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ESTERILIZACIN La esterilizacin del instrumental quirrgico se ha

convertido en un campo muy especializado dentro de la tecnologa, donde


se requiere una ptima calidad tanto en el control del proceso como en
sus resultados. Como futuros profesionales de la salud, es necesario que
sepamos las tcnicas necesarias de esterilizacin, ya que debemos
proteger tanto a los pacientes, atendindolos con los materiales en estado
ptimo, como a nosotros mismos y dems personal de salud.

1. CONCEPTO. Es la eliminacin de toda forma de vida de un medio o
material, lo que se lleva a cabo generalmente por medios fsicos, por
ejemplo, filtracin, o por muerte de los organismos por calor, productos
qumicos u otra va. Esta definicin excluye por lo tanto cualquier tcnica
que resulte solamente en un dao a los microorganismos o atenuacin de
la actividad de cualquier tipo.
La esterilizacin, es la destruccin de todas las formas de vida
microscpicas, incluidos virus y esporas.

2. TIPOS DE ESTERILIZACIN. Pueden ser de 3 tipos:
A. POR DESTRUCCIN TOTAL DE MICROORGANISMOS.
Por destruccin total se entiende un proceso muy violento, que casi
siempre implica calentamiento apreciable del material, como ocurre con la
aplicacin de una llama, que es lo que hacemos en el laboratorio cuando
flameamos un ansa de platino o las bocas de tubo de ensayo o
erlenmeyers. Otra manera de destruir contaminantes es con el uso de
poderosos agentes oxidantes. Por supuesto sta metodologa, aunque es
efectiva, est muy restringida en su empleo.
B. Por MUERTE O INACTIVACIN. significa la eliminacin de microorganismos sin
que exista necesariamente desintegracin de las clulas. Se puede efectuar por
calentamiento, seco o hmedo, por radiaciones o por agentes qumicos. El
calor hmedo, generalmente en forma de vapor bajo presin, es muy til y
de gran valor en la esterilizacin en el laboratorio, que se efecta en
autoclave, o en la industria cuando se esterilizan los medios de cultivo y
los equipos de fermentacin. En el caso de las autoclaves, se pueden
alcanzar presiones de 1 a 3 atmsferas. En escala grande el equipo de
produccin es esterilizado con vapor saturado bajo presin, y la presin
requerida debe ser alcanzada en todas las partes del equipo y el aire debe
ser purgado totalmente del sistema (como ocurre tambin en el caso de los
autoclaves) porque la transferencia de calor disminuye mucho en ese
caso. Despus de la esterilizacin se mantienen las condiciones aspticas,
haciendo pasar vapor por las vlvulas y sellos.
C. POR ELIMINACIN CON MEDIOS FSICOS. La eliminacin fsica est
restringida a la esterilizacin de gases lquidos, y es fundamentalmente
llevada a cabo por filtracin mediante filtros absolutos o filtros fibrosos.
Los filtros absolutos son de materiales cermicos, de vidrio o de metal
sinterizado con poros tan pequeos que la penetracin de los
microorganismos no es posible.
Los filtros fibrosos no son absolutos y el material filtrante puede ser lana
de vidrio, amianto y esteres de celulosa, siendo las fibras de un dimetro
variable de 0.5 a 15 micrones.
3. MTODOS DE ESTERILIZACIN.
A. MTODOS FSICOS.
1) CALOR. Todos los microorganismos son susceptibles, en distinto
grado, a la accin del calor. El calor provoca desnaturalizacin de
protenas, fusin y desorganizacin de las membranas y/o procesos
oxidativos irreversibles en los microorganismos.
La efectividad del calor como mtodo de esterilizacin depende de:
Temperatura, Tiempo de exposicin.
2) CALOR HMEDO.
El calor hmedo produce desnaturalizacin y coagulacin de protenas.
Estos efectos se deben principalmente a dos razones:
El agua es una especie qumica muy reactiva y muchas estructuras
biolgicas (DNA, RNA, protenas, etc.) son producidas por reacciones que
eliminan agua. Por lo tanto, reacciones inversas podran daar a la clula a
causa de la produccin de productos txicos. Adems, las estructuras
secundarias y terciarias de las protenas se estabilizan mediante uniones
puente de hidrgeno intramoleculares que pueden ser reemplazadas y
rotos por el agua a altas temperaturas.
El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho
ms elevado que el aire. Por lo que, los materiales hmedos conducen el
calor mucho ms rpidamente que los materiales secos debido a la
energa liberada durante la condensacin.
2.1. FORMAS.
EL AUTOCLAVE: aparato ms comnmente utilizado en los
laboratorios para esterilizar cultivos y soluciones que no formen
emulsiones con el agua y que no se desnaturalicen a temperaturas
mayores a 100 C. Una temperatura de 121 C (una atmsfera de
sobrepresin) con un tiempo de exposicin mayor a 15 minutos sirve para
destruir organismos formadores de esporas.
VENTAJAS:
Rpido calentamiento y penetracin
Destruccin de bacterias y esporas en corto tiempo
No deja residuos txicos
Hay un bajo deterioro del material expuesto
Econmico
DESVENTAJAS:
No permite esterilizar soluciones que formen emulsiones con el agua
Es corrosivo sobre ciertos instrumentos metlicos
Tambin existen otros mtodos que utilizan el calor hmedo, que aunque
no permiten la eliminacin total de los microorganismos viables, se usan
para controlar los microorganismos presentes en un material o una
preparacin.
TINDALIZACIN.
Es un mtodo de esterilizacin fraccionada, consiste en calentar el material
a la temperatura seleccionada (entre 60 y 100C) por perodos
aproximados de 30 minutos a 1 hora, por 3 das consecutivos con perodos
de incubacin intermedios, las formas vegetativas se destruyen por el
calentamiento y las esporas germinan durante el perodo de incubacin
intermedio y son eliminadas en el siguiente calentamiento. USO:
Esterilizacin de materiales lbiles a ms de 100C pero estables a
temperaturas entre 60 y 100C.
LIMITACIONES:
Proceso muy largo (3 das). Puede que no se logre la esterilizacin.
AGUA HIRVIENTE.
Consiste en poner el contacto el material con agua hirviendo por un
periodo no menor a 10 minutos. Se usa para la destruccin de
microorganismos patgenos no formadores de esporas en ropas, platos,
etc. Tambin se puede emplear en el control de microorganismos
presentes en el agua de consumo.
PASTEURIZACIN.
Utilizado en la eliminacin de microorganismos patgenos en productos
lcteos, vinos, cerveza y jugos.
3) CALOR SECO.
El calor seco produce desecacin de la clula, efectos txicos por niveles
elevados de electrolitos, procesos oxidativos y fusin de membranas.
Estos efectos se deben a la transferencia de calor desde los materiales a
los microorganismos que estn en contacto con stos. El aire es mal
conductor del calor, y el aire caliente penetra ms lentamente que el vapor
de agua en materiales porosos. La accin destructiva del calor sobre
protenas y lpidos requiere mayor temperatura cuando el material est
seco o la actividad de agua del medio es baja. Esto se debe a que las
protenas se estabilizan mediante uniones puente de hidrgeno
intramoleculares que son ms difciles de romper por el calor seco.
1.1. FORMAS.
ESTUFA DE ESTERILIZACIN. Es el artefacto utilizado en los
laboratorios para esterilizar por calor seco. Se requiere mayor temperatura
y tiempo de exposicin que el autoclave. La temperatura vara entre 120 y
180C, requirindose distintos tiempos de exposicin. Sirve para esterilizar
material de vidrio. El papel y el algodn no pueden ser esterilizados a ms
de 160C.
VENTAJAS: - No es corrosivo para metales e instrumentos. - Permite la
esterilizacin de sustancias en polvo y no acuosas, y de sustancias
viscosas no voltiles.
DESVENTAJAS:
Requiere mayor tiempo de esterilizacin, respecto al calor
hmedo, debido a la baja penetracin del calor.
Existen otras formas de eliminar microorganismos por calor seco:
INCINERACIN.
Se utiliza para destruir material descartable contaminado.
ACCIN DIRECTA DE LA LLAMA.
Elimina a los microorganismos cuando se lleva al rojo el material de metal
como ansas, lancetas, agujas de diseccin.
4) RADIACIONES.
4.1. RADIACIONES NO IONIZANTES.
RADIACIN ULTRAVIOLETA
Los cidos nucleicos y las protenas absorben la radiacin ultravioleta, esa
absorcin causa modificaciones qumicas, entre ellas, la formacin de
dmeros de timina los cuales ocasionan lecturas errneas del cdigo
gentico, produciendo mutaciones que impiden funciones vitales de los
microorganismos, por lo tanto, stos mueren. Se utiliza para la
Desinfeccin de superficies y de aire. Limitaciones: Escaso poder de
penetracin, sus efectos pueden ser revertidos, puede causar quemaduras
en la piel y en los ojos.
LUZ VISIBLE.
Aunque no se puede considerar como un agente esterilizante, la luz
visible, de suficiente intensidad, puede causar dao celular y muerte. Hay
dos mecanismos por los cuales la luz visible mata a las clulas, uno de
ellos requiere de oxgeno molecular y ambos requieren de la presencia en
la clula de fotosensibilizadores, los cuales son sustancias que absorben
luz. Cuando esas sustancias absorben luz son activadas y llevadas a un
nivel de mayor energa, en algunos casos retornan al estado normal
emitiendo luz, pero tambin puede ocurrir que le transfieran la energa a
otro componente celular, esta transferencia de energa ocasiona el dao
en las clulas.
4.2. RADIACIONES IONIZANTES.
Estas incluyen los rayos (alfa), (beta), (gamma), X y protones y
neutrones de alta energa. Al absorber estas radiaciones, el agua y otras
sustancias se ionizan, crendose radicales libres los cuales ocasionan
diferentes tipos de dao en las clulas.
USOS:
La principal aplicacin industrial es para la esterilizacin de
materiales quirrgicos y otros equipos mdicos sensibles al calor y para la
preservacin de ciertos productos alimenticios.
LIMITACIONES: Son muy costosas, requieren un riguroso control e
instalaciones especiales para su uso.
La accin de las radiaciones depende de:
Tipo de radiacin
Tiempo de exposicin
Dosis
B. MTODOS QUMICOS.
Estos mtodos provocan la perdida de viabilidad de los microorganismos.
Dentro de los compuestos qumicos podemos encontrar agentes
esterilizantes, desinfectantes y antispticos.
La efectividad de estos agentes depende de las condiciones bajo las que
actan.
Concentracin: vara con el tipo de agente y de microorganismo, pues
una misma concentracin del agente puede producir un efecto diferente en
distintos microorganismos. Tiempo: los microorganismos no son
susceptibles a un agente en la misma forma, por lo que no todos los
microorganismos mueren al mismo tiempo.
pH: afecta tanto a los microorganismos como a los agentes
qumicos. El aumento de pH por encima de 7 incrementa la carga negativa
de los microorganismos afectando la concentracin del agente sobre la
clula. El pH determina el grado de disociacin y la efectividad del agente
qumico, pues a menor disociacin mayor permeabilidad y mayor
efectividad.


ANTISPTICOS
Alcoholes
Iodo
Agentes catinicos, aninicos y
anfteros
Peroxido de Hidrogeno

DESINFECTANTES Y
ESTERILIZANTES
Cloro y Compuestos clorados
Aldehdos
Oxido de Etileno
Compuestos Fenlicos
cidos y lcalis
ANTI SPTI COS.
1. 1. ALCOHOLES.
Lesionan la membrana celular de los microorganismos y desnaturalizan
protenas celulares. Desorganizan la estructura fosfolipdica. No destruyen
esporas y tienen una accin germicida lenta. Los alcoholes de cadena
corta tienen un efecto nocivo mayor que los de cadena larga. Se utilizan en
concentraciones del 50 al 70%. Los ms utilizados son el etanol e
isoproplico.
1. 2. I ODO.
Es un agente oxidante que modifica grupos funcionales de protenas y
cidos nucleicos. Inactiva protenas y enzimas pudiendo atacar tambin
grupos amino, indoles, etc. Se utiliza como desinfectante de la piel (tintura
de iodo: yodo molecular 2% y yoduro de sodio 2% en alcohol), aunque es
irritante. Es efectivo contra esporas.
1. 3. AGENTES I NI COS Y ANFTEROS.
Son sustancias que lesionan la membrana celular debido a que
desordenan la disposicin de las protenas y de los fosfolpidos, por lo que
se liberan metabolitos desde la clula, se interfiere con el metabolismo
energtico y el transporte activo.. Sus principales ventajas se hallan en que
son inodoros, no tien, no son corrosivos de metales, estables, no txicos
y baratos.
Catinicos: Sales de amonio cuaternarias. Tienen mayor
actividad a pH alcalino y los Gram + son ms susceptibles.
Aninicos: Jabones y cidos grasos. Tienen mayor actividad a
pH cido y son eficaces contra Gram +.
Anfteros: Actan como catinicos o aninicos segn el pH.
1. 4. PERXI DO DE HI DRGENO.
Es un antisptico dbil, con capacidad oxidante y formadora de radicales
libres. Actualmente, el perxido de hidrgeno gaseoso se est utilizando
como desinfectante de superficies o descontaminante de gabinetes
biolgicos debido a que no posee las propiedades txicas y cancerigenas
del xido de etileno y formaldehdo.
1) DESI NFECTANTES Y ESTERI LI ZANTES
2. 1. CLORO.
El cloro, los hipocloritos y las cloraminas son desinfectantes que actan
sobre protenas y cidos nucleicos de los microorganismos. Oxidan y
atacan grupos aminos, indoles y al hidroxifenol de la tirosina. El producto
clorado ms utilizado en desinfeccin es el hipoclorito de sodio (agua
lavandina), que es activo sobre todas las bacterias, incluyendo esporas, y
adems es efectivo en un amplio rango de temperaturas.
La actividad bactericida del hipoclorito de sodio se debe al cido
hipocloroso (HClO) y al Cl
2
que se forman cuando el hipoclorito es diluido
en agua. La actividad germicida del ion hipocloroso es muy reducida
debido a que por su carga no puede penetrar fcilmente en la clula a
travs de la membrana citoplamtica. En cambio, el cido hipocloroso es
neutro y penetra fcilmente en la clula, mientras que el Cl
2
ingresa como
gas. El hipoclorito de sodio se comercializa en soluciones
concentradas (50-100 g/l de Cloro activo), a pH alcalino y en envases
oscuros que favorecen su estabilidad, pero es inactivo como desinfectante.
2. 2. ALDEH DOS.
Son agentes que actan sobre protenas, lo que provoca modificacin
irreversible de enzimas e inhibicin de la actividad enzimtica .Se utilizan
como desinfectantes y esterilizantes. Destruyen esporas.
2.3. EL GLUTARALDEHDO.
Es el nico esterilizante efectivo en fro. El formaldehdo como gas se
utiliza para descontaminar edificios, ambientes, etc.
Consiste en preparar una solucin alcalina al 2% y sumergir el material a
esterilizar de 20 a 30 minutos, y luego un enjuague de 10 minutos. Puede
esterilizar plstico, goma, vidrio, metal, etc.
2.4. EL FORMALDEHDO.
Se utilizan las pastillas de paraformaldehdo, las cuales pueden disponerse
en el fondo de una caja envueltas en gasa o algodn, que despus pueden
ser expuestos al calor para una rpida esterilizacin (accin del gas
formaldehdo). Tambin pueden ser usadas en Estufas de Formol, que son
cajas de doble fondo, en donde se colocan las pastillas y se calienta hasta
los 60 C y pueden esterilizar materiales de ltex, goma, plsticos, etc.
Las pastillas de formalina a temperatura ambiente esterilizan en 36 hs.
Tiene la desventaja de ser muy irritante y perder actividad en ambientes
refrigerados.
2. 5. COMPUESTOS FENLI COS.
Son desinfectantes que provocan lesiones en la membrana citoplasmtica
porque desordenan la disposicin de las protenas y fosfolpidos. Esto
causa filtracin de compuestos celulares, inactivacin de enzimas y lisis.
El fenol no es usado a menudo como desinfectante por su olor
desagradable, por ser muy irritante y por el residuo que queda luego de
tratar las superficies. Los derivados del fenol ms utilizados son el
hexaclorofeno (compuesto difenlico) y los cresoles (alquil fenoles). Estos
son muy efectivos a bajas concentraciones contra formas vegetativas de
bacterias. No son efectivos contra esporas.
2. 6. XI DO DE ETI LENO.
Es un agente alquilante que se une a compuestos con hidrgenos lbiles
como los que tienen grupos carboxilos, amino, sulfhidrilos, hidroxilos, etc.
Es utilizado en la esterilizacin gaseosa, generalmente en la industria
farmacutica. Sirve para esterilizar material termosensibles como el
descartable y plstico, equipos electrnicos, bombas cardiorrespiratorias,
etc. Es muy peligroso por ser altamente inflamable y explosivo, y adems
cancergeno.
C. FILTRACIN.
Se usan membranas filtrantes con poros de un tamao determinado. El
tamao del poro depender del uso al que se va a someter la muestra.
Hay que tener en cuenta que los filtros que se utilizan generalmente en los
laboratorios no retienen virus ni micoplasmas, estos ltimos estn en el
lmite de separacin segn el dimetro de poro que se utilice.
Existen tres tipos bsicos de filtros:
1) FILTROS PROFUNDOS O FILTROS DE PROFUNDIDAD.
Consisten de un material fibroso o granular prensado, plegado, activado, o
pegado dentro de los canales de flujo. En este tipo de filtros la retencin de
las partculas se produce por una combinacin de absorcin y de retencin
mecnica en la matriz.
2) MEMBRANAS FILTRANTES.
Tienen una estructura continua, y la retencin se debe principalmente al
tamao de la partcula. Partculas ms pequeas al tamao del poro
quedan retenidas en la matriz del filtro debido a efectos electrostticos.
Filtros de huella de nucleacin (Nucleoporo): Son pelculas
muy delgadas de policarbonato que son perforadas por un tratamiento
conjunto con radiacin y sustancias qumicas. Son filtros con orificios muy
regulares que atraviesan la membrana verticalmente. Funcionan como
tamices, evitando el paso de toda partcula con un tamao mayor al del
poro. Se usa para esterilizar aceites, algunos tipos de pomadas,
soluciones oftlmicas, soluciones intravenosas, drogas diagnsticas,
radiofrmacos, medios para cultivos celulares, y soluciones de antibiticos
y vitaminas.
4. CONTROLES.
Controles de
Esterilizacin
Controles fisico-qumicos Monitorean el proceso
de esterilizacin Controles biolgicos
Controles de
Esterilidad
Transferencia a medios de cultivo Monitorean el material
esterilizado
Test de promocin del crecimiento
Test de bacteriostsis
Filtracin por membranas
A. CONTROLES DE ESTERI LI ZACI N.
Son controles que se realizan sobre el mtodo de esterilizacin.
Monitorean o controlan si el proceso de esterilizacin funciona
correctamente.
1) CONTROLES BIOLGICOS
Utiliza indicadores biolgicos como controles del proceso de esterilizacin.
Estos indicadores son preparaciones estandarizadas de microorganismos
relativamente resistentes al mtodo de esterilizacin que se emplea. Los
indicadores se procesan en forma conjunta con el material a esterilizar y el
nmero de microorganismos presentes en el indicador es mayor que el
que se encuentra en el material.
Una vez concluido el proceso de esterilizacin los indicadores son
inoculados en medios de cultivo adecuados e incubados durante un
determinado perodo de tiempo. Si el proceso de esterilizacin fue
correctamente empleado y funciona bien no debe observarse desarrollo
del indicador incubado.
2) CONTROLES FISICOQUMICOS
2.1. TERMOCUPLAS. Son mtodos directos que registran la temperatura
a la que se desarrolla la esterilizacin.
2.2. SUSTANCIAS DE PUNTO DE FUSIN CONOCIDO.
Se utilizan en autoclaves generalmente, son sustancias con un punto de
fusin similar al de la temperatura de esterilizacin del proceso. Estas
sustancias estn mezcladas con un colorante y al fundir indican si se
alcanz la temperatura ptima de esterilizacin y el tiempo que se
mantuvo.
B. CONTROLES DE ESTERI LI DAD.
Permite controlar en forma probabilstica si el material qued
completamente esterilizado pues se testea un porcentaje representativo de
todo el material.
1) TRANSFERENCIA DIRECTA DE MEDIOS DE CULTIVO Se
transfiere una parte de la muestra a medios de cultivos apropiados que
permitan el crecimiento de cualquier contaminante.
1.1. Tioglicolato para anaerobios y aerobios (37C).
1.2. Tripticasa-Soja para aerobios (25C).
Las muestras representativas se incuban en estos medios durante un
perodo de 14 das, al cabo del cual no se debe observar ningn tipo de
crecimiento. Puede ocurrir que la muestra no se encuentre estril pero que
no se produzca crecimiento durante la incubacin por algn motivo
inherente al medio o a la muestra, por ejemplo presencia de algn
inhibidor, etc.
2) TEST DE PROMOCIN DEL CRECIEMIENTO
Es un testigo del control de esterilidad. Son testigos que se utilizan para
los medios de crecimiento del control ya que estos medios tienen
capacidad de promover el crecimiento. Para estos testigos se utilizan
microorganismos con exigencias nutricionales. Los medios deben ser
inoculados con un bajo nmero de microorganismos, se incuban durante 7
das, al cabo de los que se debe observar un abundante crecimiento.
3) TEST DE BACTERIOSTSIS. Es un control que se realiza para
determinar si la muestra supuestamente estril no posee propiedades
bacteriostticas. De esta forma se previenen falsos negativos pues no se
produce crecimiento habiendo en la muestra microorganismos viables.
Para este test se toman los medios de cultivo con microorganismos de
ensayo y se siembran en las muestras a testear.
Se incuban durante 7 das. Si se produce crecimiento esto indica que el
material no contena inhibidores.
4) FILTRACIN POR MEMBRANAS.
Se utiliza para determinar la esterilidad de medios de cultivo, soluciones de
antibiticos, etc. Se filtran los medios y se procesa el filtro como en un
control de esterilidad para determinar si hay microorganismos presentes.
CONCLUSIONES
La capacitacin de TODOS los miembros del equipo de salud es factor es
determinante en la contribucin de la seguridad de los pacientes.
La limpieza es la prctica esencial para todo procesamiento de
desinfeccin o esterilizacin de un equipo que va a ser empleado en
nuestro paciente. Los mtodos de desinfeccin o esterilizacin son
elegidos de acuerdo a los criterios de Spaulding. traslado de los
materiales esterilizados se realizan segn normativa de resguardo hasta el
usuario final. El almacenaje de los materiales se realizan en zona limpia y
protegida que preserve el material. La aplicacin de las medidas
prevenibles para evitar las infecciones estn en nuestras manos.