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Mtodos basados en la interaccin

de la radiacin con la materia


Aqu se agrupan las tcnicas cuyo fundamento
sobrelleva la interrelacin entre la energa
electromagntica y la materia.
En general se asigna tambin a estos mtodos el
nombre global de espectroscopia o mtodos
pticos
Debemos repasar
Que es la radiacin electromagntica?
Qu es el espectro electromagntico?
Dualidad de la radiacin
electromagntica
velocidad, amplitud, frecuencia o longitud
de onda.
fotones
Que es la radiacin
electromagntica?
La radiacin electromagntica es una forma
de propagacin de energa a travs del
espacio sin soporte material y emitida por
una sustancia en estado excitado.
Espectro electromagntico
Se denomina espectro electromagntico a
la distribucin de energa del conjunto de
las ondas electromagnticas
Dualidad de la radiacin electromagntica
Tiene naturaleza ondulatoria en su
movimiento, definida por parmetros como
velocidad, amplitud, frecuencia o longitud
de onda.
Es un flujo de partculas de energa
llamadas fotones. La energa de un fotn es
proporcional a la frecuencia de radiacin.
Parmetros ondulatorios
la longitud de onda ()
se define como la longitud de un ciclo, o
bien como la distancia entre dos mximos o
mnimos sucesivos.
Parmetros ondulatorios
la frecuencia (v)
es el nmero de ciclos por segundo
la frecuencia es la nica caracterstica
constante en una radiacin, ya que la
longitud de onda y la velocidad dependen
de la naturaleza del medio de propagacin.
La radiacin como partcula
Por otra parte la radiacin
electromagntica como transportadora
de energa fue definida por Planck
(1900) considerando que la energa de
las partculas est cuantificada, slo
estn permitidos ciertos niveles de
energa
La radiacin como partcula
Cuando una partcula pasa de un nivel de
menor energa a uno de mayor energa
slo absorbe un cuanto de energa, que
est relacionado con la frecuencia de la
radiacin absorbida
E= h=hc/
Los efectos que provoca la radiacin
sobre la materia son de varios tipos:
puede provocar la absorcin de la
radiacin
Los efectos que provoca la radiacin
sobre la materia son de varios tipos:
Puede desviar el desviar la radiacin
electromagntica
Los efectos que provoca la radiacin
sobre la materia son de varios tipos:
Dispersar la radiacin
Los mtodos pticos se
pueden clasificar en:
No espectroscpicos
Espectroscpicos
No espectroscpicos
Se basan en la medicin del cambio en la
direccin o en las propiedades fsicas de la
radiacin electromagntica.
Ejemplos:
refraccin, dispersin, interferencia.
Los mtodos son:
refractometra, turbidimetra,
nefelometra, interferometra, etc.
Mtodos espectroscpicos
Se basan en la medida de:
Intensidad de la energa radiante
longitud de onda de la energa radiante
Tienen en comn:
Medida de un espectro
Pueden ser de absorcin o emisin
Mtodos espectroscpicos
Es frecuente dividir las tcnicas pticas de acuerdo
con la regin espectral que interacciona con la
materia. As, es frecuente denominar a la
espectroscopia como:
de rayos X,
ultravioleta lejano, ultravioleta cercano y visible
infrarrojo cercano y medio, infrarrojo lejano
microondas y radiofrecuencia
Regin ultravioleta y visible
La ms empleada por su sencillez y el
bajo costo de los equipos ms sencillos
capaces de llevarla a cabo: los
colormetros
Esta tcnica es especialmente
cuantitativa
Regin ultravioleta y visible
Se fundamenta en la disminucin de
intensidad que sufre un rayo de luz
monocromtica al atravesar una
disolucin que contenga un constituyente
que absorba parte de la radiacin.
aplicaciones tanto sustancias orgnicas
como inorgnicas
Tambin se utiliza como indicadora del
punto final de una titulacin.
Regin ultravioleta y visible
Aplicaciones
Deteccin de sustancias orgnicas
Deteccin de sustancias inorgnicas
Indicadora del punto final de una
valoracin.
Orbitales atmicos
Orbitales moleculares
Orbitales moleculares del
hidrgeno
Qu es el espectro?
Se define como una representacin grfica
o fotogrfica de la distribucin de
intensidades de la radiacin
electromagntica emitida o absorbida por
la materia, en funcin de la longitud de
onda de dicha radiacin.
Los espectros son debidos a transiciones
entre estados de energa caractersticos
de la materia.
Espectros de absorcin
Regin del infrarrojo
emplea con fines cualitativos en qumica
orgnica, pues permite el anlisis sencillo
de los grupos funcionales de una molcula.
Ello es debido a que la radiacin infrarroja
interacciona con los estados de energa
vibracional de los enlaces y stos son
caractersticos de los tomos que los
forman.
Espectro infrarrojo de la lactosa
Espectroscopia de
absorcin molecular
Ley de Lambert Beer
Medida cuantitativa de la
radiacin
Ley de Lambert Beer
La potencia radiante de una lnea o banda
depende del nmero de tomos o molculas
excitadas, entonces es directamente
proporcional a la concentracin
P = kC
donde k es una constante de proporcionalidad
A consecuencia de las interacciones entre
los fotones y las partculas absorbentes,
la potencia del haz se atena de P0 a P1.
Por lo tanto podemos definir:
la transmitancia T de la solucin
Como la fraccin de radiacin incidente transmitida
(o no absorbida) por la solucin segn:
T =P1/P0
%T = 100P1/P0
Absorbancia
Una magnitud fsica ms til que la
transmitancia, es la absorbancia, que se
define como:
T
P
P
A log log
0
10
=

=
Relacin entre la absorbancia y
el espesor
La ley de Lambert relaciona el espesor de la muestra de anlisis con la
relacin entre la potencia incidente sobre la muestra y la potencia
transmitida por la muestra. Si todos los factores que intervienen en la
medicin se dejan constantes y se vara el espesor de la muestra
tenemos que:
al aumentar el espesor, la potencia de la luz
transmitida disminuir, aumentando la absorbancia.
Entonces:
A = es directamente proporcional al espesor o
camino ptico
A = k b
Relacin entre la absorbancia
y la concentracin
La Ley de Beer relaciona la concentracin de la
especie absorbente con la relacin de la potencia del
haz transmitido por el medio absorbente y la potencia
del haz incidente.
Todo aumento en la concentracin de la especie
absorbente habr de aumentar el nmero de fotones
absorbidos
Entonces:
A = es directamente proporcional a la
concentracin
A = k C
La ley de Lambert-Beer
A= bC ( es la absortividad molar)
A=abC (a es la absortividad especfica)
La absorbancia, A, es adimensional.
La concentracin de la muestra, C, se suele
expresar en moles/litro (M) o en g/litro
La longitud del camino ptico, b, se expresa en cm.
La cantidad se llama absortividad molar y sus
unidades son litro/mol cm.
Cuando la concentracin es expresada en g/l, debe
hablarse de la absortividad a , y sus unidades son
litro/gcm.
Medida experimental de la
absorbancia
la solucin en estudio debe estar dentro de un
recipiente.
La interaccin de la radiacin con las paredes del
mismo es inevitable,
por lo tanto se producirn prdidas de potencia
en cada interfase como resultado de las
reflexiones y las absorciones.
Las prdidas por reflexin pueden llegar a ser del
orden de 8%.
Deben sumarse las prdidas por dispersin dentro
de la solucin debido a la presencia de molculas
grandes o a inhomogeneidades del disolvente.
Medida experimental de la
absorbancia
Medida experimental
C b
P
P
P
P
A
solucin
solvente
= = = ) ( log log ) (
0

Expresin experimental
Representacin de la ley de
Lambert -Beer
Limitaciones de la ley de
Lambert Beer
La relacin lineal entre la absorbancia y la longitud de camino
ptico para una concentracin fija de sustancia absorbente es
una generalizacin de la que no se conocen excepciones.
La ley de Lambert Beer establece que la absorbancia es
proporcional a la concentracin de las especies absorbentes.
Esto se verifica estrictamente para luz monocromtica y muy
bien en el caso de soluciones diluidas ( 0,01M) de la mayora
de las sustancias.
Limitaciones Reales
A concentraciones altas (> 0.01M)
Las distancias medias entre las partculas
disminuyen hasta tal punto que cada partcula
afecta la distribucin de carga de los vecinos.
Estas interacciones alteran la capacidad
absorbente de las partculas respecto a una
radiacin de determinada longitud de onda.
Causa desviaciones de a relacin lineal
Limitaciones reales
A concentraciones muy diluidas (con muy
baja concentracn del absorbente)
La presencia de electrolitos (o el
solvente)se aproximan mucho a las especies
absorbentes alterando la absortividad
molar debido a interacciones
electrostticas
Causa desviaciones de a relacin lineal
Desviaciones qumicas
Se presentan desviaciones de la ley de
Lambert-Beer cuando
el analito experimenta asociacin
disocicin
reaccin con el solvente
para dar productos con propiedades
diferentes a las del propio analito
Desviaciones qumicas
Presencia de otras sustancias
(interferencias) que absorben luz a a
misma longitud de onda (o muy cercana) que
el analito
Desviaciones instrumentales
La ley de Lambert-Beer es una ley lmite en
el sentido de que se aplica slo cuando la
absorbancia se mide con una radiacin
monocromtica.
Los instrumentos de rutina no emplean
fuentes monocromticas sino fuentes
continuas
Desviaciones instrumentales
Las desviaciones de la ley de
Lambert-Beer que resultan
del uso de un haz
policromtico no son
apreciables, siempre que la
radiacin usada abarque un
tramo espectral dentro del
cual el absorbente no
presenta grandes cambios en
funcin de la longitud de onda
Seleccin de la
longitud de onda
de trabajo
COMPONENTES BASICOS DE UN ESPECTROMETRO Vis-UV
3 4 1 2
1
FUENTE DE RADIACIN o LMPARA
SISTEMA PTICO
a) Sistema para dirigir la radiacin
b) Sistema de aislamiento de la longitud de onda
2
3
RECIPIENTE PARA LA MUESTRA (GENERALMENTE
LQUIDA)
4
SISTEMA DE DETECCIN (TRANSDUCTOR DE LA RADIACIN)
a) b)
Fuentes de radiacin
Requisitos:
Intensidad de radiacin elevada.
Emitir en un amplio rango de (emisin continua).
Intensidad constante con el tiempo.
Fuentes de radiacin -visible
Lmpara de Wolframio
(lmpara de inscandescencia).
Se basa en la incasdencencia,
emite luz en el visible e IR
cercano desde 350-2500 nm
regida por las leyes de emisin
del cuerpo negro. La radiacin
emitida depende de la
temperatura.
Filamento de W
o W+I2
Fuentes de radiacin -UV
Lmpara de Arco de Xenn
(lmpara de descarga)
Se basa en la descarga entre dos
electrodos en un bulbo de cuarzo
con Xe a alta presin, la excitacin
de Xe produce la emisin de luz
contnua entre 250 y 600 nm.
Selector de longitudes de onda
Monocromador con red
Selector de longitudes de onda
Monocromador con prisma
Selector de longitudes de onda
Los filtros trabajan absorbiendo todas las radiaciones
excepto una banda estrecha de radiacin procedente
de la fuente continua. A un filtro se lo caracteriza por
o general por una longitud de onda nominal, un
porcentaje mximo de transmitancia y un ancho de
banda efectivo.
Recipientes para la muestra
Los recipientes que contienen la
muestra normalmente se llaman
celdas o cubetas y deben estar
fabricados de un material
transparente en la regin
espectral de inters.
Detectores
LOS DETECTORES DE FOTONES SON
DISPOSITIVOS QUE TRANSFORMAN
LA ENERGIA RADIANTE EN UNA SEAL
ELCTRICA
Detectores: Requisitos
responder rpidamente a bajos niveles de energa radiante en un
amplio rango de longitudes de onda
debe producir una seal elctrica que se amplifique fcilmente
tener un nivel de ruido relativamente bajo
la seal elctrica producida debe ser directamente proporcional
a la potencia del haz.
G = kP + k
Siendo:
G = es la respuesta (en unidades de corriente, resistencia o
potencial)
k = cte que mide la sensibilidad del detector
k= respuesta constante, conocida como corriente oscura, an
cuando no llegue radiacin al detector.
Detectores
Fototubo: La radiacin
causa una emisin de
electrones de una
superficie slida
fotosensible.
Basado en el
efecto fotoelectrico.
Son muy sensibles a la
radiacin VIS y UV.
Tienen tiempos de
respuesta muy rpidos.
Solo pueden medir
radiacin de baja
potencia.
Su sensibilidad viene
limitada por la corriente
oscura debida a la
amplificacin.
Fototubo UV
Otros equipos de
espectroscopia UV-visible
Otros equipos de
espectroscopia UV-visible
Spectronic 20
Espectroscopia
de emisin y absorcin
atmica
Mientras que la mayora de las tcnicas
espectroscpicas se utilizan para el estudio y
caracterizacin de molculas o iones en su entorno
cristalino, la espectroscopa de emisin y absorcin
atmica se usa casi exclusivamente para el anlisis de
tomos.
La tcnica resulta casi insuperable como mtodo de
anlisis elemental de metales.
La espectroscopa de emisin puede utilizarse para la
identificacin y para la determinacin cuantitativa de
todos los elementos de la tabla peridica.
Pueden identificarse tres clases diferentes de procesos
de emisin que difieren en cmo la sustancia alcanza el
estado excitado previo a la emisin.
a) Emisin a partir de una excitacin electromagntica.
b) Emisin a partir de excitacin trmica.
c) Emisin a partir de excitacin elctrica.
Los tipos ms importantes de espectros de
emisin se basan en la utilizacin de energa no
electromagntica para llevar a un tomo o a una
molcula al estado excitado, a partir del cual se
miden las emisiones de radiacin. El proceso
puede describirse segn:
X + energa trmica o elctrica X* (excitado)
X* X + h (emisin)
El estudio espectroscpico de
tomos (iones o molculas) se
hace en fase gaseosa.
Primer paso es la atomizacin de la
muestra y con ello se determina la
sensibilidad, precisin y exactitud
del mtodo.
Clasificacin de los mtodos espectrales atmicos
mtodo de
atomizacin
temperatura
tpica de
atomizacin (C)
Base del mtodo nombre comn y abreviatura del mtodo
Absorcin Espectroscopa de absorcin AAS
Emisin Espectroscopa de emisin atmica AES
Llama 1750-3150
Fluorescencia
Espectroscopa de fluorescencia atmica
AFS
Absorcin
Espectroscopa de absorcin atmica
electrotrmica
Electrotrmico 1200-3000
Fluorescencia
Espectroscopa de fluorescencia atmica
electrotrmica
Plasma de Ar
acolado por
induccin
6000-8000 Emisin
Espectroscopa de plasma acoplado por
induccin ICP
Plasma de Ar de
corriente continua
6000-10000 Emisin
Espectroscopa de plasma de corriente
continua DC
Chispa elctrica o
arco
40000 Emisin Espectroscopa de emisin de chispa
Equipos
emisin
absorcin
Aplicaciones
Seal = k C
anlisis de rutina de los metales alcalinos, alcalino-
trreos, (son los ms fcilmente excitables y cuya
determinacin por otros mtodos es por lo general
complicada, ejemplo sodio en aguas)
Dificultad: controlarlas distintas variables:
temperatura de la llama
presin de los gases
Altura de la llama
La correlacin entre la intensidad de la seal y la
concentracin del elemento emisor en una solucin
permita la utilizacin de este fenmeno con fines
cuantitativos.
Seal = k C
Fuentes de error
Factores instrumentales
dependen del
instrumento:
tipo y forma de
mechero
tamao de la llama
presin del comburente
-combustible, etc.
Interferencias:
dependen de la
composicin de la
solucin y de la
presencia de otras
especies diferentes
del analito.
causan aumento o
depresin de la seal
Interferencias
Disminucin de la seal por disminucin del
grado de disociacin de la sal del analito
Aumento de la seal debido a la presencia de
otro metal fcilmente ionizable
Aumento de la seal debido a la presencia de
elementos que emiten a longitudes de onda
muy cercanas a la del analito y el equipo
empleado no puede separarlas
Fluorescencia y Fosforescencia
Fluorescencia
Es una tcnica de emisin de radiacin
se produce despus de la absorcin de un fotn por
parte del constituyente, seguida por la prdida de la
energa adquirida por un mecanismo de intercambio de
calor (choques moleculares) y por emisin de un nuevo
fotn.
Las sustancias orgnicas de molculas grandes y rgidas
son las que presentan esta importante cualidad analtica
cuantitativa. La fluorimetra utiliza en general la
radiacin ultravioleta como agente de excitacin y la
radiacin emitida cae frecuentemente en la zona visible.
Fosforescencia
Se diferencia de la fluorescencia en que la
molcula excitada queda despus de los choques en
un estado metaestable y no emite el fotn
inmediatamente, sino lo que retiene un cierto
tiempo. Se aplica a sustancias orgnicas con dobles
enlaces conjugados y en general se debe hacer a
bajas temperaturas.
Diagrama de niveles de
energa
Salto electrnico
Diagrama de niveles
electrnicos
Espectro de absorcin y
fluorescencia
Instrumental
Medida
Requiere curva de calibracin
Preparacin de soluciones patrn
La seal es directamente
proporcional a la concentracin
S = kC
Curva de calibracin
Aplicaciones
Sin duda alguna las aplicaciones ms
importantes en la fluoromtria son:
en anlisis de alimentos
de productos naturales
Aplicaciones
Compuestos Orgnicos:
adenina, cido antranlico, cistena, hidrocarburos
aromticos policclicos, indol, naftol, protenas,
cido saliclico, escatol, triptfano, cido rico,
adrenalina, alquilmorfina, LSD, penicilina,
fenobarbital, procana, reserpina, clorofila,
alcaloides, flavonoides, esteroides, cido ascrbico,
cido flico, nicotinamida, piridoxal,
corticoesteroides, estrgenos, progesterona,
andrgenos, cidos biliares, colesterol, triglicridos,
creatinina, deshidrogenasas, transaminasas,
fosfatasas, perioxidasas, ATP, luciferina, luciferasa,
vitaminas: A, B1, B2, B6, C y la E, etc.
Aplicaciones
Compuestos Inorgnicos:
cianuro, fluoruro, sulfatos, fosfatos, aluminio,
arsnico, berilio, boro, calcio, magnesio,
tierras raras, selenio, uranio, etc.
Ventajas frente a otras
tcnicas espectroscpicas
Alta sensibilidad
Lmites de deteccin del orden de las
partes por billn
gran intervalo de linealidad
Alta selectividad
Tcnicas no
espectroscpicas
Turbidimetra y Nefelometra
Turbidimetra y Nefelometra
Se aplica a soluciones turbias o sea cuando
debemos analizar una suspensin de
partculas slidas en un lquido
Se basan en la dispersin de la luz
Qu fenmeno ocurre?
Cuando una solucin turbia se interpone en la
trayectoria de la luz:
la potencia radiante que llega al detector es menor
que la que llegara si se tratara de un lquido
transparente (no absorbente).
Esta reduccin es el resultado de la dispersin
causada por reflexin y refraccin en las partculas
suspendidas.
La luz se dispersa en todas direcciones y por
consiguiente el poder de radiacin del haz que llega
al detector disminuye de modo considerable.
De que depende
La concentracin: Mayor sea el nmero de
partculas, mayor es la dispersin.
Tamao de la partcula: Factores como el pH, la
velocidad y orden de la mezcla, concentracin de
los reactivos, duracin del estado de reposo y la
fuerza inica.
Longitud de onda: Generalmente las muestras se
iluminan con luz blanca, pero si estn coloreadas,
se debe escoger una porcin del espectro
electromagntico en la que la absorcin del medio
se reduzca al mnimo.
Qu medimos?
La luz que lega al detector
Igual que en espectrofotometra de
absorcin
Podemos usar el mismo
equipamiento que en absorcin
Turbidmetro de campo
Turbidmetro de laboratorio
Turbidmetros
Aplicaciones
concentracin bacteriana
sulfato en aguas
Nefelometra
Se basa en la dispersin de la radiacin que
atraviesan las partculas de materia.
Cuando la luz atraviesa un medio transparente en
el que existe una suspensin de partculas slidas,
se dispersa en todas direcciones y como
consecuencia se observa turbia.
La intensidad depende de: el nmero de partculas
suspendidas, su tamao, su forma, los ndices
refractivos de la partcula y del medio
dispersante, y la longitud de onda de la radiacin
dispersada
Instrumento
Un nefelmetro.
Los componentes principales son muy similares
a los del instrumental empleado en las
mediciones especpectrofluorimtricas.
El detector generalmente forma un ngulo de
90 con el haz incidente.
Instrumento
Ventajas
Diferencia con la turbidimetra
La eleccin entre uno de ambos mtodos
reside en la dispersin de luz, si es extensa,
es apropiado aplicar la turbidimetra, en
cambio si es mnima es apropiada la
nefelometra. De la nefelometra se obtienen
mejores resultados, porque determina
concentraciones de pocas partes por milln
(ppm), con una precisin de 1 al 5%.