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Determinacin de vitamina C por Espectrofotometra

I. OBJETIVOS

Determinar el efecto de la temperatura en la degradacin de vitamina C mediante
el anlisis cuantitativo por espectrofotometra.

II. MARCO TEORICO
Las propiedades del cido ascrbico o vitamina C, que junto a las vitaminas B
pertenecen al grupo de hidrosolubles, son variadas y complejas, pues los investigadores
informan, desde su descubrimiento en 1936, casi peridicamente sobre nuevas
aplicaciones del cido ascrbico, un alimento funcional, porque ms all de nutrir tiene
efectos benficos para la salud, tales como, su utilidad en la prevencin de la formacin
de cataratas y en el riesgo de desarrollar degeneracin macular en personas mayores o
ancianas, al servir de coadyuvante en la fecundidad masculina, al apuntalar al sistema
inmune contra los efectos del resfriado, asma, tabaco y contaminantes areos, tambin
suprime la aparicin de clulas leucmicas y el crecimiento del tumor rectal y cncer de
crvix; en los diabticos potencia la accin de la insulina en el metabolismo de los
carbohidratos y acelera la curacin de los heridas, ayuda en la formacin de colgenos,
puede reducir edemas, por su efecto de estimulacin de la diuresis, es un potente
neutralizador de venenos (mercurio, arsnico y toxinas bacterianas) y retarda el
envejecimiento de la piel.

La Association of Official Analytical Chemist (AOAC) ha recomendado la
determinacin de vitaminas mediante mtodos microbiolgicos, espectrofotomtricos y
fluoromtricos . La cromatografa lquida de alta eficacia (HPLC) ha sido la principal
va de anlisis de las vitaminas . Los detectores flluoromtricos y espectrofotomtricos
acoplados a HPLC se han usado para el anlisis de las vitaminas tanto en preparaciones
farmacuticas como en fuentes naturales; la cromatografa de fase reversa tambin la
han aplicado mucho en el estudio de estos compuestos. Los mtodos rutinarios de
volumetra igualmente pueden ser empleados y permiten su aplicacin en un laboratorio
de control de calidad de productos de la colmena, constituyndose en un mtodo
alternativo vlido en situaciones en que no se dispone de equipamiento de ltima
generacin . Todas estas tcnicas mo dernas nos permiten determinar el contenido de
vitamina C en mieles. El mtodo volumtrico recomendado por la AOAC es la
titulacin con el indicador redox 2,6-diclorofenolindofenol.






III. MATERIALES Y EQUIPO

Tubos de ensayo.
Pipeta graduada.
Vaso de precipitados.


IV. PROCEDIMIENTOS

Preparacin de la curva estndar:

Leer a 520 nm
Preparacin de la muestra
- Extraer juego de naranja (pelar, exprimir y filtrar).
- Luego poner el jugo de naranja en:
10 ml (control).
10 ml de jugo a 50C por 10 min.
10 ml de jugo a 70C por 10 min.
10 ml de jugo a 90C por 10 min.
- Hacer el siguiente sistema y homogenizar:
3 ml control + 21 A. Oxlico.
3 ml del jugo a 50C +21 ml de A. Oxlico.
3 ml del jugo a 70C +21 ml de A. Oxlico.
3 ml del jugo a 90C +21 ml de A. Oxlico.
- Repetir el paso 2 para la curva estndar y leer a 520 nm.
V. RESULTADOS:
Tubos I II III IV V
Ac. Ascrbico (ml) 1 2 3 4 5
Ac. Oxlico Aforar a 100 ml.
Tubo I 10ml de H2O destilada.
Tubo II 1ml de A. Oxlico.
Tubo III I II III IV V
1 ml de ET n1 +
9ml de agua
1 ml de ET n2 +
9ml de agua
1 ml de ET n3 +
9ml de agua
1 ml de ET n4 +
9ml de agua
1 ml de ET n5 +
9ml de agua
Tubo IV
1 ml de ET n1 1 ml de ET n2 1 ml de ET n3 1 ml de ET n4 1 ml de ET n5
Tubo I 10ml de H2O destilada. (Ajustar)
Tubo II
1ml de A. Oxlico.


Lectura de la solucin madre



Lectura de jugo de naranja



L1 0.100
Tubo III I II III IV V
1 ml de ET n1 +
9ml de agua
1 ml de ET n2 +
9ml de agua
1 ml de ET n3 +
9ml de agua
1 ml de ET n4 +
9ml de agua
1 ml de ET n5 +
9ml de agua
ABS. 0.086 0.153 0.167 0.078 0.083
Tubo IV
1 ml de ET n1 1 ml de ET n2 1 ml de ET n3 1 ml de ET n4 1 ml de ET n5
ABS. 0.147 0.274 0.312 0.274 0.147
L2 0.061 0.121 0.145 0.215 0.265
L1 0.100
Tubo III I II III IV
1 ml de ET n1 +
9ml de agua
1 ml de ET n2 +
9ml de agua
1 ml de ET n3 +
9ml de agua
1 ml de ET n4 +
9ml de agua
ABS. 0.147 0.120 0.123 0.113
Tubo IV
1 ml de ET n1 1 ml de ET n2 1 ml de ET n3 1 ml de ET n4
ABS. 0.154 0.125 0.125 0.113
L2 0.007 0.005 0.002 0











0
0.061
0.121
0.145
0.215
0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0 50 100 150 200 250 300 350 400 450
0, 90
0.009, 70
0.012, 50
0.015, 21
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
0 0.002 0.004 0.006 0.008 0.01 0.012 0.014 0.016
Curva de calibracin para Ac. Ascrbico
Concentracin de Ac. Con respecto al tiempo


VI. CONCLUSIONES:
Se determin que la temperatura es un factor clave para la
degradacin del cido Ascrbico, y que a mayor sea la temperatura
menor ser la concentracin de cido ascrbico.
Determinamos que la absorbancia est en relacin con la
concentracin, con esto pudimos determinar la concentracin de
cido ascrbico a partir de concentraciones establecidas y sus
respectivas absorbancias.

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
http://es.wikipedia.org/wiki/%C3%81cido_asc%C3%B3rbico
http://es.wikipedia.org/wiki/%C3%81cido_asc%C3%B3rbico
http://books.google.com.pe/books?id=r7y3XuFAB8UC&pg=PA37&
dq=acido+ascorbico&hl=es-
419&sa=X&ei=1meHU5mOH4XJsQSj1YD4Cw&ved=0CDoQ6AE
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