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COMISIN DE CONTROL ANALTICO Y AMPLIACIN DE COBERTURA

CRITERIOS PARA LA VALIDACIN DE MTODOS FISICOQUMICOS


Rev. No.: 0 FECHA: 2011-02-16 CLAVE: CCAYAC-P-058


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3.3 BLANCO DE MUESTRA: Son matrices que no contienen el analito de inters (placebo).
Son difciles de obtener pero son necesarios para estimar las interferencias que pudieran
encontrarse durante el anlisis de las muestras de prueba.

3.4 CRITERIOS DE ACEPTACIN: Parmetros bajo los cuales el resultado de una prueba
ser considerado aceptable.

3.5 CURVA DE CALIBRACIN: Es la representacin grfica de la seal medida como una
funcin de cantidad del analito.

3.6 INCERTIDUMBRE: Estimacin que caracteriza el intervalo de valores, dentro de los
cuales se encuentra el valor convencionalmente verdadero de la magnitud medida.

3.7 INTERVALO DE TRABAJO: Intervalo comprendido entre las concentraciones superior e
inferior (incluyendo dichas concentraciones) y para las que se ha demostrado que el
analito es cuantificado con un nivel satisfactorio de repetibilidad, recuperacin y
linealidad.

3.8 INTERVALO LINEAL: Es la capacidad de un mtodo analtico para dar resultados que
son directamente proporcionales a la concentracin del analito dentro de un intervalo
dado.

3.9 LMITE DE CUANTIFICACIN: Es la concentracin ms baja a la cual el analito puede
cuantificarse con una precisin y veracidad aceptables bajo las condiciones
experimentales establecidas.

3.10 LMITE DE DETECCIN: Es la concentracin ms baja a la cual puede detectarse el
analito pero no necesariamente cuantificarse bajo las condiciones experimentales
establecidas.

3.11 MATRIZ O PLACEBO: Muestra que contiene todos los componentes de un producto a
excepcin del analito.

3.12 MTODO NORMALIZADO: Proceso de medicin robusto donde pequeas variaciones
en el procedimiento no deben producir de forma imprevista grandes variaciones en los
resultados.

3.13 MTODO NO NORMALIZADO: Mtodo alternativo que demuestra o estima el mismo
analito tal cual se mide utilizando el mtodo normalizado.

3.14 MUESTRA ADICIONADA O FORTIFICADA: Porcin representativa del material a
evaluar, a la que se le adicionan cantidades conocidas del analito de inters.


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3.15 PARMETRO DE DESEMPEO: Parmetro especfico a evaluar en una validacin.

3.16 RECUPERACIN O RECOBRO: Cantidad del analito recuperada en la porcin de
muestra o muestra adicionada cuando esta es conducida a travs del mtodo analtico
completo, y que permite evaluar la eficiencia de la extraccin, proceso de preparacin e
interferencias que puedan existir al aplicarlo. Se expresa en trminos de porcentaje.

3.17 REPETIBILIDAD: Grado de concordancia entre resultados analticos individuales,
cuando el procedimiento se aplica repetidamente a diferentes porciones de una muestra
homognea por un solo analista, usando los mismos instrumentos y mtodo en intervalos
cortos de tiempo.

3.18 REPRODUCIBILIDAD (PRECISIN INTERMEDIA): Grado de concordancia entre
resultados analticos individuales, cuando el procedimiento se aplica repetidamente a
diferentes porciones de una muestra homognea por dos analistas o instrumentos
diferentes, usando el mismo mtodo en diferentes das.

3.19 RESPUESTA ANALTICA: Lectura obtenida al aplicar un mtodo analtico, como
pueden ser el rea o altura del pico en un cromatograma, lectura de absorbancia,
cuentas de iones en un Espectro de Masas, lectura en mV, mL gastados en volumetra,
diferencia de peso en un gravimtrico, entre otros.

3.20 RESULTADO DE ENSAYO: Valor de un mensurando obtenido tras la realizacin de un
mtodo de ensayo especfico.

3.21 ROBUSTEZ: Es la medida de la capacidad del mtodo analtico de permanecer
inalterado por pequeas, pero deliberadas variaciones (efecto de cambio en las
condiciones) en los parmetros del mismo, proporcionando un ndice de su confiabilidad
durante su uso normal.

3.22 SELECTIVIDAD: Es la capacidad de un mtodo analtico para medir solamente lo qu se
pretende que se mida.

3.23 SENSIBILIDAD: Es el cambio en la respuesta del instrumento que corresponde a un
cambio en la concentracin del analito. Es la pendiente del intervalo de trabajo y cuanto
mayor es esta, mayor es la sensibilidad del mtodo.

3.24 SESGO: Es la diferencia entre el valor promedio obtenido de los resultados de prueba
con respecto a un valor de referencia aceptado o conocido.

3.25 VALIDACIN: Es el proceso que establece, mediante estudios de laboratorio, que las
caractersticas de desempeo del mtodo, satisfacen los requisitos para su aplicacin
analtica.

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3.26 VALIDACIN PARCIAL (confirmacin del mtodo): Evidencia objetiva para demostrar
que al aplicar un mtodo normalizado, se cumple con las especificaciones del mismo y
se cuenta con la competencia tcnica para realizarlo adecuadamente tomando en
consideracin sus propias instalaciones, equipo y personal.


4. DOCUMENTOS APLICABLES

1. AOAC. Guidelines for Single Laboratory Validation of Chemical Methods for Dietary
Supplements and Botanicals. December 2002.

2. CENAM. Gua para estimar la incertidumbre de la medicin. Abril 2004.

3. CENAM-EMA. Gua tcnica sobre trazabilidad e incertidumbre en las mediciones analticas que
emplean la tcnica de medicin de conductividad electroltica. Abril 2008.

4. CENAM-EMA. Gua tcnica sobre trazabilidad e incertidumbre en las mediciones analticas que
emplean las tcnicas de Espectrofotometra de Absorcin Atmica y de Emisin y Atmica con
Plasma Acoplado Inductivamente. Abril 2008.

5. CENAM-EMA. Gua tcnica sobre trazabilidad e incertidumbre en las mediciones analticas que
emplean las tcnicas de Cromatografa de Gases (GC) y Cromatografa de Lquidos de Alta
Resolucin (HPLC). Abril 2008.

6. CENAM-EMA. Gua tcnica sobre trazabilidad e incertidumbre en las mediciones analticas que
emplean la tcnica de Gravimetra de Masa. Abril 2008.

7. CENAM-EMA. Gua tcnica sobre trazabilidad e incertidumbre en las mediciones analticas que
emplean la tcnica de medicin de pH. Abril 2008.

8. CENAM-EMA. Gua tcnica sobre trazabilidad e incertidumbre en las mediciones analticas que
emplean la tcnica de Titulacin volumtrica. Abril 2008.

9. CENAM-EMA. Gua tcnica sobre trazabilidad e incertidumbre en las mediciones analticas que
emplean la tcnica de Espectrofotometra de Ultravioleta-Visible. Abril 2008.

10. Colegio Nacional de Qumicos Farmacuticos Bilogos. Gua de Validacin de Mtodos
Analticos. Edicin 2002.

11. Directiva 96/23/CE en cuanto al funcionamiento de los mtodos analticos y la interpretacin de
los resultados. Agosto 2002.


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12. EMA. Documento MP-CA005-01. Manual de Procedimientos. Incertidumbre de mediciones.
Poltica.

13. Eurachem. The Fitness for Purpose of Analytical Methods. A Laboratory Guide to Method
Validation and Related Topics. First Edition 1998.

14. Eurachem-CITAC. Guide CG4 Quantifying Uncertainty and Analytical Measurements. Second
Edition. QUAM :2000.1

15. IUPAC. Harmonized Guidelines for Single Laboratory Validation of Methods of Analysis. Pure
Appl. Chem., Vol. 74, No. 5, pp. 835855, 2002.

16. NMX-CH-140-IMNC-2002. Gua para la expresin de incertidumbre en las mediciones.

17. RILAA/INPAZ. Curso a distancia sobre Validacin de Mtodos Qumicos. Buenos Aires,
Argentina. 2005.

18. Eurolab. Measurement Uncertainty in Testing. A short introduction on how to characterize
accuracy and reliability of results including a list of useful references. Techical Report No.
1/2002. June 2002.

5. DESCRIPCIN DE LA ACTIVIDAD

5.1 CRITERIO No. 1

Clasificar el mtodo como Normalizado o no Normalizado conforme a lo siguiente:

5.1.1 Mtodo Normalizado es aquel mtodo publicado como primera instancia en:

1. Normas Oficiales Mexicanas (NOM)
2. Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos (FEUM)
3. Normas Mexicanas (NMX).

Como segunda instancia:

4. Mtodos Oficiales del AOAC
5. Standard Methods
6. Environmental Protection Agency (EPA)
7. Pesticide Analytical Manual (PAM)
8. Collaborative International Pesticides Analytical Council (CIPAC)
9. United States Pharmacopoeia (USP)
10. British Pharmacopoeia (BP)
11. American Society for Testing Materials (ASTM)
12. International Standard Organization (ISO)

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13. Codex Alimentarius
14. Food and Drug Administration (FDA)
15. Food and Agriculture Organization (FAO)
16. European Commission (CE)
17. United States Department of Agriculture (USDA)

5.1.2 Mtodo no Normalizado es aquel:

1. Desarrollado por el laboratorio (mtodo propio).
2. Mtodo obtenido de publicaciones cientficas (Journals, tesis, etc).
3. Mtodo normalizado modificado, ampliado o usado fuera de su alcance.


5.2 CRITERIO No. 2

Considerar los siguientes parmetros de desempeo de acuerdo al tipo de mtodo.

Mtodos normalizados
Mtodos no
normalizados
Fsicos
Parmetro
Fisicoqumicos
Cuantitativos Cualitativos
Fisicoqumicos
Intervalo lineal y de
trabajo

Lmite de deteccin
Lmite de cuantificacin
Recuperacin
Sesgo
Repetibilidad
Reproducibilidad
Incertidumbre



Sensibilidad
Selectividad
Robustez


Nota: Los parmetros de desempeo a considerar para los mtodos fisicoqumicos depender del tipo de prueba
de que se trate.

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5.3 CRITERIO No. 3

Clasificar el mtodo por tipo de prueba


Tipo de prueba

Metodologa
Espectrofotomtrica
Espectrofotometra UV-Visible
Turbiedad
Absorcin Atmica (AA),
Plasma Inductivamente Acoplado (ICP)

Cromatogrfica
Cromatografa de Lquidos (HPLC),
Cromatografa de Gases (GC),
Cromatografa de Lquidos-Masas (HPLC-MS),
Cromatografa de Gases- Masas (GC-MS)

Potenciomtrica
pH
Aniones y cationes por tcnica de Ion selectivo
Conductimetra

Volumtrica Valoraciones por titulacin (manual y automtica)
Gravimtrica
Prdida por secado
Residuo de ignicin
Fsica
(cuantitativa)
Materia extraa
Densidad relativa
Disolucin
Desintegracin
ndice de refraccin
Rotacin ptica
Punto de fusin
Polarimetra
Espectrometra de Infrarrojo
Variacin de volumen
Uniformidad de dosis
Osmolaridad
Temperatura de fusin
Dispositivos mdicos
Color
Viscosidad
Temperatura de fusin, etc.




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Tipo de prueba

Metodologa
Fsica
(cualitativa)
Pruebas lmites de cloruros, fosfatos, hierro, fluoruros,
sulfatos, etc
Metales pesados (cualitativa)
Inhibidores (formaldehdo, sales cuaternarias, oxidantes,
derivados clorados, etc.

CRITERIO No. 4

Establecer los parmetros finales de desempeo con base al tipo de prueba:

Tipo de prueba
Parmetro de
desempeo
E
s
p
e
c
t
r
o
f
o
t
o
m

t
r
i
c
a

C
r
o
m
a
t
o
g
r

f
i
c
a

P
o
t
e
n
c
i
o
m

t
r
i
c
a

V
o
l
u
m

t
r
i
c
a

G
r
a
v
i
m

t
r
i
c
a

F

s
i
c
a

Intervalo lineal y de trabajo SI SI SI SI SI NO
Lmite de deteccin SI
a
SI
a
NO NO NO SI
b

Lmite de cuantificacin SI
a
SI
a
SI
a
SI
a
SI
a
NO
Recuperacin SI SI NO SI SI NO
Sesgo SI SI SI SI SI NO
Repetibilidad SI SI SI SI SI SI
c

Reproducibilidad SI SI SI SI SI SI
c

Incertidumbre SI SI SI SI SI SI
c

Sensibilidad SI
d
SI
d
SI
d,e
SI
e
SI
d
NO
Selectividad SI
d
SI
d
SI
d,e
SI SI SI
b

Robustez SI
d
SI
d
SI
d
SI
d
SI
d
SI
d

a
Solo para anlisis a nivel de trazas (ppm, ppb, ppt)

b
Solo mtodos cualitativos.
c
Solo mtodos cuantitativos.
d
Solo aplica para mtodos no normalizados.
e
Solo para el anlisis de aniones y cationes por in selectivo

Nota: Solo para mtodos gravimtricos y volumtricos la selectividad se sustenta con los resultados de linealidad,
recuperacin, repetibilidad y reproducibilidad, si estos cumplen con los criterios de aceptacin establecidos


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5.5 CRITERIO No. 5

Seleccionar el tipo de matriz a evaluar conforme a:

1. La ms solicitada.
2. La ms compleja.
3. Para mtodos generales que apliquen a diferentes matrices; FEUM, Residuos orgnicos,
metales contaminantes, etc. Se debe seleccionar una matriz representativa por grupo
(alimentos, principio activo, tipo de presentacin, entre otros)
a. Alimentos: lcteos, crnicos, productos de la pesca agua, cereales, frutas,
vegetales, productos de panificacin, miel, productos de confitera, especias,
entre otros.
b. Medicamentos: cpsula, gragea, tableta, suspensin, jarabe, ungento, colirio,
espuma, gel, supositorio, parche, jalea, ovulo, entre otros.

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5.6 CRITERIO No. 6

Evaluar los parmetros de desempeo correspondientes como se detalla en las siguientes tablas:

Parmetro Muestras Repeticiones Calcular/determinar

Observaciones

Intervalo lineal
Blancos de muestra (placebos)
o muestras adicionadas

Mnimo 5 niveles diferentes de
concentracin


Cada nivel por
triplicado
a) Graficar respuesta analtica (y) vs.
nivel de concentracin adicionado (x)

b) Confirmar visualmente la existencia
de linealidad del intervalo.

c) Elaborar grfico de residuales.

d) Confirmar aleatoriedad de los
residuales alrededor de la recta
Ver nota 2
a) Utilizar niveles establecidos en la
curva de calibracin utilizar la tabla
gua contenida en el anexo A.

b) Los niveles de concentracin deben
estar igualmente espaciados en el
intervalo de inters.

c) Considerar en el intervalo el valor de
la especificacin y/o los valores de
aceptacin y rechazo y estar en la
medida de lo posible al centro de este.

d) Reportar el intervalo de
concentraciones obtenido en las
unidades establecidas por el mtodo.

Intervalo de
trabajo
Blancos de muestra (placebos)
o muestras adicionadas

Mnimo 5 niveles diferentes de
concentracin.
Cada nivel por
triplicado
a) Considerar los niveles que cumplen
con los criterios de recuperacin y
repetibilidad establecidos.

b) Graficar la concentracin obtenida
(y) vs. la concentracin adicionada (x)

c) Calcular la pendiente (m) y el
coeficiente de correlacin (r ).

a) Utilizar los datos obtenidos en la
estimacin del intervalo lineal.

b) Reportar el intervalo de
concentraciones obtenido en las
unidades establecidas por el mtodo



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Parmetro Muestras Repeticiones Calcular/determinar

Observaciones

Lmite de
deteccin
(pruebas
cualitativas)
Blancos de muestra (placebos)
o muestras adicionadas.

Mnimo 5 niveles diferentes de
concentracin.

10 replicas de cada nivel
Elaborar tabla de respuesta de
resultados positivos y negativos con
respecto a la concentracin
Concentracin mnima en la cual se
obtienen 10 resultados positivos
Lmites de
deteccin y
cuantificacin
Blancos de muestra (placebos)
o muestras adicionadas

Mnimo 5 niveles diferentes de
concentracin.
Cada nivel por
triplicado
a) Calcular la pendiente (m) y
la desviacin estndar de la
ordenada al origen (sbo) de
la respuesta analtica (y) vs
nivel de concentracin
adicionado (x)

b) Estimar los lmites con las
siguientes ecuaciones:

m
sb
LD
o
* 3 . 3
=

m
sb
LC
o
* 10
=

a) Utilizar los datos obtenidos en la
estimacin del intervalo de trabajo,

b) Reportar los lmites estimados
estadsticamente en las unidades
establecidas por el mtodo.

c) Considerar como lmite prctico de
cuantificacin el nivel inferior estimado
en el intervalo de trabajo.

Recuperacin y
sesgo
Blancos de muestra (placebos)
o muestras adicionadas.

Mnimo 5 niveles diferentes de
concentracin

Cada nivel por
triplicado
a) Calcular la concentracin
recuperada para cada nivel de
concentracin adicionado.

b) Para el sesgo, efectuar la resta
aritmtica de la concentracin aadida
menos la concentracin recuperada.
a) Utilizar los datos obtenidos en la
estimacin del intervalo de trabajo

b) Reportar la recuperacin como
intervalo en % y el sesgo como intervalo
en las unidades establecidas por el
mtodo.


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Parmetro Muestras Repeticiones Calcular/determinar

Observaciones

Repetibilidad
Blancos de muestra (placebos)
o muestras adicionadas.

Tres niveles diferentes de
concentracin (niveles inferior,
medio y superior estimados en
el intervalo de trabajo)
Cada nivel por
sextuplicado.


a) Analizar las muestras por un mismo
analista (analista 1) en 2 das
diferentes (3 niveles/triplicado /da).

b) Calcular el % de recuperacin de
los 6 resultados para cada nivel

c) Calcular la media (x), desviacin
estndar (sr) y el coeficiente de
variacin (CVr) de los % de
recuperacin obtenidos para cada
nivel adicionado.


a) Utilizar la informacin obtenida en la
estimacin del intervalo de trabajo como
los datos para el da 1 (cada nivel por
triplicado por da).

b) Reportar la desviacin estndar (sr)
o coeficiente de variacin (CVr) mximos
obtenidos.

c) Si no se cuenta con dos analistas o
dos equipos para estimar la
reproducibilidad, estimar solo la
repetibilidad con el mismo analista pero
utilizando un tercer da.
Reproducibilidad
(Precisin
intermedia)
Blancos de muestra (placebos)
o muestras adicionadas.

Tres niveles diferentes de
concentracin (niveles inferior,
medio y superior estimados en
el intervalo de trabajo).
Cada nivel por
sextuplicado.


a) Analizar las muestras en 2 das
diferentes (3 niveles/triplicado/da) y
por un analista diferente (analista 2)

b) Calcular el % de recuperacin de
los 6 resultados para cada nivel

c) Combinar estos resultados con los
datos obtenidos en la estimacin de la
repetibilidad y calcular la media (x),
desviacin estndar (sR) y el
coeficiente de variacin (CVR) de los
% de recobro para cada nivel.

Reportar la desviacin estndar (sR) o
coeficiente de variacin (CVR) mximos
obtenidos






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Parmetro Muestras Repeticiones Calcular/determinar
Observaciones

Sensibilidad
Blancos de muestra (placebos)
o muestras adicionadas.

Mnimo 5 niveles diferentes de
concentracin.

Cada nivel por
triplicado
a) Graficar la respuesta analtica (y) vs
la concentracin adicionada (x)

b) Calcular la pendiente de la recta (m)

a) Utilizar los datos obtenidos en la
estimacin del intervalo de trabajo

b) Reportar la relacin entre el cambio de
respuesta analtica por unidad de
concentracin.
Selectividad
Blancos de muestra o
muestras adicionadas con
cantidades conocidas de
interferencias, productos de
degradacin o impurezas
Por duplicado
Evaluar si la presencia de las
interferencias, impurezas o productos
de degradacin inhiben o incrementan
la deteccin del analito.

Pueden emplearse tcnicas
confirmatorias para asegurar la identidad
del analito como son la utilizacin de
detectores de espectrometra de masas,
arreglo de diodos o infrarrojo.

Cuando no se tienen estndares de
interferencias o impurezas se pueden
aplicar las siguientes condiciones de
degradacin:

a) Temperatura: 70-120 C o 20 C por
debajo de su punto de fusin, durante 2
a 4 semanas.

b) Luz UV, luz fluorescente y/o humedad
relativa por un tiempo apropiado.

c) pH 1 a 2 y/o 10 a 12 y someterlas a
60-80 C por un tiempo apropiado.

d) Para lquidos y semislidos adicionar
perxido de hidrgeno.




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Parmetro Muestras Repeticiones Calcular/determinar
Observaciones

Robustez
Blancos de muestra (placebos)
o muestras adicionadas

Concentracin equivalente al
nivel medio estimado en el
intervalo de trabajo
8 muestras por duplicado
a) Identificar de 4 a 7 factores que
puedan tener un efecto significativo en
el desempeo del mtodo y variar
ligeramente cada uno ellos.

b) Efectuar una serie de 8
combinaciones de valores nominales
con variaciones deliberadas

c) Analizar una muestra por duplicado
con cada serie de combinaciones

d) Calcular las diferencias de las
mediciones de los subgrupos.

e) Graficar en una lnea los valores de
las diferencias de menor a mayor.

f) Calcular la desviacin estndar de
las diferencias (sDi).

a) Reportar los factores que ms influyen
en el resultado final.

b) Establecer si el mtodo es robusto
frente a las variaciones establecidas.














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Parmetro Muestras Repeticiones Calcular/determinar
Observaciones

Incertidumbre No aplica
Utilizar la informacin
obtenida en el proceso
de validacin.
a) Especificar el mensurando.

b) Identificar las fuentes de
incertidumbre

c) Cuantificar los componentes de la
incertidumbre (u)

d) Calcular la incertidumbre estndar
combinada (uc)

e) Calcular la incertidumbre
expandida(Uexp)

Puede utilizarse como gua los criterios
establecidos en las referencias 2, 12, 14,
16 y 18.


Nota 1. Cuando no sea posible adicionar de manera directa el analito en la muestra, la adicin debe ser llevada a cabo en las primeras etapas.
Nota 2. Para la determinacin de: intervalo lineal y de trabajo, lmites de deteccin y cuantificacin, recuperacin, sesgo, repetibilidad y sensibilidad se debe aplicar el mtodo
de ensayo especfico por un mismo analista (el de ms experiencia en el anlisis) bajo las mismas condiciones.
Nota 3. Para mtodos fsicos cuantitativos la repetibilidad y reproducibilidad se calculan en base a la lectura directa.



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5.7 CRITERIO No. 7

Criterios de aceptacin

Parmetro Criterio de aceptacin
Intervalo lineal
a) Comportamiento lineal en la grfica de concentracin vs respuesta analtica.

b) Datos aleatorios en el grfico de residuales
Intervalo de trabajo
a) Pendiente: valor cercano a 1

b ) Coeficiente de correlacin:
r 0.98 para cuantificacin de residuos e impurezas
r 0.99 para cuantificacin de contenido e ingrediente activo

Lmite de cuantificacin
prctico
Nivel inferior estimado en el intervalo de trabajo
Lmite de cuantificacin
estimado
Menor o igual al nivel inferior estimado en el intervalo de trabajo
Lmite de deteccin
Recuperacin
Repetibilidad
Reproducibilidad
Los establecidos en la referencia original del mtodo. Si no se dispone de estos
datos utilizar como gua las tablas contenidas en el anexo B.
Robustez
Si s
Di
< s
R
el conjunto de los factores no influye en el resultado y por tanto el
mtodo es robusto.



5.8 CRITERIO No. 8

Elaborar un protocolo de validacin que incluya lo siguiente:

Ttulo
Protocolo de validacin parcial o total (segn aplique). Sealar asimismo el
nombre y clave del mtodo que se pretende validar.

1.Objetivo
Considerar los parmetros de desempeo a evaluar y el analito a determinar

2. Campo de aplicacin
Indicar el tipo de producto (s) para los cuales aplica la validacin

3. Mtodo de ensayo
Elaborar un diagrama de flujo simplificado, que seale la metodologa empleada
para cuantificar el analito (mtodo interno)
4. Equipo Descripcin general del equipo a utilizar en la validacin.
5. Materiales
Indicar los materiales a utilizar separando como material de uso general y material
volumtrico


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6. Reactivos
a) Indicar el nombre de los reactivos a utilizar y su grado.
b) Sealar los patrones a utilizar con su grado de pureza o concentracin.
c) Detallar la preparacin de las soluciones de trabajo (soluciones que no
requieren de un valor de ttulo exacto).
d) Detallar la preparacin de la soluciones de referencia (soluciones que requieren
de un ttulo exacto, soluciones stock, curva de calibracin, etc.).

7. Muestras
Indicar las caractersticas, forma de almacenamiento y cantidades de muestra
estimadas para llevar a cabo la validacin.
Detallar la preparacin de los blancos de muestra o muestras adicionadas.
8. Desarrollo experimental
Detallar las instrucciones para cada uno de los parmetros de desempeo a
ensayar.
9. Resultados Propuesta de formato de registro
10. Anlisis estadstico
Establecer para cada parmetro de desempeo la herramienta estadstica a
utilizar para su evaluacin.
11. Criterios de aceptacin
Establecer los criterios de aceptacin que deben cumplirse con su respectiva
referencia bibliogrfica.


Nota: El protocolo debe incluir firmas de quien elabor, revis y aprob.


5.9 CRITERIO No. 9

Elaborar un informe de resultados de validacin que incluya lo siguiente:

Ttulo
Informe de resultados de validacin parcial o total (segn aplique). Sealar
asimismo el nombre y clave del mtodo que se valid.
1.Objetivo Considerar los parmetros de desempeo evaluados y el analito determinado.
2. Campo de aplicacin Indicar el tipo de producto (s) para los cuales aplic la validacin
3. Antecedentes
Hacer una breve explicacin de las caractersticas del analito, su importancia
sanitaria o nutricional, as como las especificaciones nacionales e internacionales
establecidos para este.
4. Equipo
Descripcin del nombre, marca, modelo, nmero de serie, nmero de
identificacin e intervalo de trabajo del equipo utilizado en la validacin
5. Materiales
Descripcin de:
a) Nombre, marca y lote del material de uso general utilizado.
b) Nombre, marca, clave, volumen nominal y volumen real del material volumtrico
empleado
6. Reactivos
a) Indicar el nombre, marca, grado, pureza, presentacin y lote de los reactivos
utilizados
b) Indicar el nombre, marca, pureza o concentracin, presentacin y lote de los
patrones de referencia utilizados
c) Detallar la preparacin de las soluciones de trabajo (soluciones que no
requieren de un valor de ttulo exacto) que se emplearon


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d) Detallar la preparacin de la soluciones de referencia (soluciones que requieren
de un ttulo exacto, soluciones stock, curva de calibracin, etc.) que se utilizaron.

7. Muestras
Indicar las caractersticas, forma de almacenamiento, marca, presentacin,
caducidad y cantidades de muestra utilizadas para llevar a cabo la validacin.
Detallar la preparacin de los blancos de muestra o muestras adicionadas
utilizados.
8. Mtodo de ensayo
Elaborar un diagrama de flujo simplificado, que seale la metodologa empleada
para cuantificar el analito (mtodo interno)
9. Desarrollo experimental
Detallar como se llevaron a cabo los ensayos de cada uno de los parmetros de
desempeo.
10. Resultados
Presentacin de resultados en forma de tablas, sealando fechas de inicio y
trmino, analistas, laboratorio, analito, matriz, unidades y clave de bitcora o
registro primario
11. Anlisis de resultados
Presentar en forma de tabla los criterios de aceptacin considerados y los
resultados obtenidos y hacer las observaciones correspondientes.
12. Conclusin
Efectuar una conclusin final en donde se seale que el mtodo se ajusta al uso
propuesto (Numeral 5.4.3 17025)

13. Bibliografa
Referencias utilizadas.

14. Anexos
Los que aplique:

Bases de datos utilizadas
Cromatogramas, espectros, resultados impresos, etc.
Certificados de anlisis o pureza.
Certificados de trazabilidad
Certificados de calibracin de material.
Formatos de verificacin de material
Grficos de control, etc.



Nota: El informe de resultados debe incluir firmas de quien elabor, revis y aprob.


6.0 NOTIFICACIN DE VIGENCIA

Se otorga un periodo de transicin de 180 das contados a partir de la fecha de publicacin para que
los laboratorios que se encuentren autorizados o en proceso del mismo se apeguen a estos criterios.

Para los laboratorios que soliciten autorizacin posterior a la fecha de publicacin, debern cumplir
estos criterios de inicio.

Estos criterios se aplicarn en todos los procesos de evaluacin que se realicen a los 180 das
naturales, a partir de la fecha de publicacin del documento en la pgina web de la COFEPRIS.

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ANEXOS

Anexo A. Gua para considerar los niveles del intervalo lineal

Determinacin Intervalo recomendado
Contenido o principio activo
80 a 120 % del contenido del marbete o
especificacin
Cuantificacin de una impureza 50 a 120 % el valor de la especificacin
Uniformidad de contenido 70 a 130 % la concentracin declarada en el marbete
Prueba de disolucin Mnimo 20% el intervalo establecido
Residuos y contaminantes 0 a 150 % el valor de la especificacin.


Anexo B.- Criterios de aceptacin


Recuperacin para contenido en alimentos y agua

Concentracin del analito
Criterio de aceptacin

0.1 a 1 % 90-108%
1 a 10 % 92-105%
10 a 99 % 95-102%
100 % 98-101%


Recuperacin para residuos y contaminantes en alimentos y agua.

Concentracin del analito Criterio de aceptacin
< 1 g/kg g/L 50-120%
1 a 10 g/kg g/L 60-120%
10 a 100 g/kg g/L 70-120%
0.1 a 100 mg/kg mg/L 70-110%
100 a 1000 mg/kg mg/L 85-110%


Recuperacin en productos farmacuticos


Prueba Criterio de aceptacin
Cromatogrfica 98-102%
Volumtrica 98-102 %
Espectrofotomtrica 97-103 %

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Repetibilidad y reproducibilidad para contenido en alimentos y agua.


Concentracin del analito
Repetibilidad ( r)

Reproducibilidad (R )

0.1 a 1 % CVr 3% CVR 6%
1 a 10 % CVr 2% CVR 4%
10 a 99 % CVr 1.5 % CVR 3 %
100 % CVr 1% CVR 2%


Repetibilidad y reproducibilidad para residuos y contaminantes en alimentos y agua.

Concentracin del analito
Repetibilidad ( r)

Reproducibilidad (R )

< 1 g/kg g/L CVr 35% CVR 53%
1 a 10 g/kg g/L CVr 30% CVR 45%
10 a 100 g/kg g/L CVr 20% CVR 32%
0.1 a 100 mg/kg mg/L CVr 15% CVR 23%
100 a 1000 mg/kg mg/L CVr 10 % CVR 16%

Repetibilidad y reproducibilidad en productos farmacuticos


Prueba Repetibilidad Reproducibilidad
Cromatogrfica CVr 2 % CVR 2 %
Volumtrica CVr 2 % CVR 2 %
Espectrofotomtrica CVr 3 % CVR 3 %