Clase 2

Estructura Celular
2008
La superficie de la
célula bacteriana
• pared celular:
– estructura más rígida
– protege la membrana en la mayoría de
microorganismos
 Depositar el cultivo en
un portaobjeto

Bañar con colorante, lavar

y secar
Secar al aire

Portaobjeto Aceite
Poner gota de aceite sobre
el portaobjeto, examinar con
el objetivo 100X
Pasar el portaobjeto suavemente por la llama
Agregar a la muestra fijada
con calor el colorante cristal
violeta y dejar 1 minuto

Todas las bacterias se ven

de color púrpura

Agregar solución de yodo

(lugol) y dejar por 3 min

Todas las bacterias permane-

cen de color púrpura
En las bacterias pueden distinguirse dos tipos celulares según la
estructura de la superficie celular: Gram (-) y Gram(+)
El péptidoglicano
Diaminopimélico Lisina
Estructura global del peptidoglicán
 Síntesis del peptidoglicán

• 4 etapas:
1. síntesis de precursores hidrosolubles en
el citoplasma bacteriano
2. unión a un lípido de membrana
3. formación de polímeros lineales en la
superficie externa de la membrana
4. formación de enlaces cruzados entre
estos polímeros
Primera etapa:
N-acetilglucosamina-1-fosfato se une al UDP para dar UDP-NAM
Se forma el éter láctico
Se unen al mismo tiempo los cinco aminoácidos para formar el N-
acetilmurámico.
Segunda etapa:
Cambio del UDP por undecaprenil-fosfato (bactoprenol)
Se agrega un pentapéptido de glicina a nivel de la L-lisina
La molécula que era hidrófila cambia a lipófila
Se une la molécula de NAG
Tercera etapa:
En la pared celular se produce la transglucosidación y formación del enlace
beta alargando de esta manera la molécula.
Participan autolisinas, enzimas que cortan el enlace β (1,4) de las cadenas
pre-existentes
Cuarta etapa:
Los enlaces transversales entre moléculas del polímero se producen por
transpeptidación
El enlace entre las dos D-Ala sirve de activador de la reacción
 Síntesis de peptidoglicán, otras características

• La síntesis del péptido es no-traduccional

• Participan al menos 15 enzimas
• Cada aa es adicionado por una enzima
diferente
• La penicilina impide la unión transversal o
puente interpeptídico, pero no la
elongación del polímero.
• De la misma manera actúan las
cefalosporinas, vancomicina, bacitracina y
cicloserina.
 Peptidoglicán, otras características

• solo en procariotes
• en casi todas las bacterias
• en arqueas es distinto, se llama pseudopeptidoglicán
• presencia de aminoácidos de configuración D
• la porción glicán es uniforme en el reino de las bacterias
• se conocen ~100 estructuras diferentes
• mayor variación en el péptido de entrecruzamiento
• Nunca están presentes aa aromáticos, ramificados, con S, his, arg, pro
• En Gram positivo el peptidoglicán compone el 90% de la pared.
Pseudopeptidoglicán,
en arqueas

NAM es reemplazado por el

N-acetiltalosaminurónico
(NAT)
 Pared de bacterias Gram positivo
• La red de mureína (PG) está muy
desarrollada y llega a tener hasta 40 capas
• Los aminoácidos implicados varían de una
especie a otra.
• La constitución del esqueleto es
característica de la especie y constituye un
buen parámetro taxonómico
• Es frecuente la presencia de los
aminoácidos L-diaminopimélico o de lisina
• Su contenido proteico es bajo.
• En ella se encuentran ácidos teicoicos
 ACIDOS TEICOICOS
• son polisacáridos
acídicos
• contiene residuos de
glicerolfosfato o ribitol
fosfato
• son polioles conectados
por ésteres de fosfato
• tienen azúcares y D-Ala
unidos
• tienen carga negativa
(superficie bacteriana)
• están asociados a
lípidos, ácidos
lipoteicoicos
• principal antígeno de
Estructura del ácido ribitol teicoico de B. subtilis. superficie
 Capa S
• estructura de proteínas o glicoproteínas en la
superficie de algunas bacterias
• Presente en 9 de 10 grupos filogenéticos de
Bacteria y en todos los grupos de Archaea
• en algunos casos corresponde a la pared
• tiene apariencia cristalina con simetrías
• Poco se sabe de su función biológica
– Cubierta protectora
– Filtro de moléculas
– Atrapador de iones
– Función en adhesión o reconocimiento de
superficies
 MEMBRANA EXTERNA
GRAM NEGATIVO
• segunda bicapa lipídica
• comparte propiedades de la
membrana citoplasmática
• contiene fosfolípidos y
proteínas, pero también un
lípido especial y UNICO, ………
el LIPOPOLISACÁRIDO
LPS tóxico=endotoxina
 Lípido A
• no es un lípido glicerol
• los ácidos grasos van unidos a un disacárido
compuesto por N-acetil-glucosamina
• los ácidos grasos más comunes son:
– caproico
– láurico
– mirístico
– palmítico
– esteárico
 El lipopolisacárido (LPS)

• reemplaza casi completamente los

fosfolípidos de la capa externa
• mantiene las características de dipolo
• tiene un PM sobre 10.000
• la composición química varía
• compuesto por 3 regiones
– lípido A
– core R
– cadena lateral O
• contiene dideoxiazúcares como
abecuosa, colitosa, tivelosa, paratosa
 Pared de bacterias Gram negativo

• La red de mureina (PG) presenta 1-3 capas

• Contiene siempre únicamente mesodiaminopimélico
• Nunca contiene lisina
• No se encuentran puentes interpeptídicos
• Se encuentran grandes cantidades de lipoproteínas y
lipopolisacáridos que representan hasta el 80% del
peso seco de la pared celular
• Para mantener la estabilidad de las capas de
lipopolisacáridos es necesario el ión Ca++
• La capa de mureína puede ser atacada por la lisozima
cuando se las trata con EDTA, un agente que al quelar
el Ca++ libera una parte del LPS y permite la acción de
la enzima.
• Hasta ahora no se ha podido demostrar la presencia
de ácidos teicoicos.
Permeabilidad de la membrana externa

• es relativamente permeable a pequeñas moléculas

• no es permeable a enzimas o a moléculas grandes
• posee porinas:
– canales de membrana, entran y salen compuestos de bajo PM
– la mayoría son inespecíficos
– la más grande permite el paso de compuestos de un PM de
hasta 5.000
– trímeros de subunidades idénticas
– proteínas de transmembrana
– poros de 1 nm de diámetro
 Porinas
• OmpF (1,2 nm) reprimida su expresión por
altas temperaturas y presión osmótica
• PhoE se expresa cuando la concentración de
fosfato es baja en el exterior
• LamB permite el paso de maltosa y
maltodextrinas, se induce por maltosa, es
receptor del fago λ
• Tsx para nucleósidos y receptor del fago T6
• TonA para ferricromo, receptor de fagos T1 y
T6
 Espacio periplasmático
• solo en bacterias Gram negativo
• contiene proteínas como:
– enzimas hidrolíticas
– de unión
– Quimiorreceptores
– Metabolismo energético
 Características de la pared

GRAM NEGATIVO GRAM POSITIVO

• multicapa • un tipo de
• fina molécula
• textura rugosa • gruesa
• textura lisa
Mycoplasma y Thermoplasma, dos ejemplos de bacterias SIN pared
Mycobacterium tuberculosis: agente etiológico de la tuberculosis
 PARED DE MYCOBACTERIUM

LAM: lipoarabinomanano
 Mycobacterium tuberculosis. Acid-fast stain. CDC.
Tinción de Ziehl-Nielsen: se hierve en una solución alcohol ácido y el colorante
rojo fucsina. Es la única bacteria que capta este colorante en esas condiciones.
 FUNCIONES DE LA PARED CELULAR

** Protección       ** Forma           ** División
 Resistencia de la pared
• responsable es el peptidoglicán

• la presión de turgor en E. coli es

de 5,27 kg/cm2, ………equivalente a
la rueda de una bicicleta
OTRAS ESTRUCTURAS CELULARES EN BACTERIAS

Intracelulares
- Mesosomas
- Gránulos de almacenamiento (cuerpos de inclusión)
- Vesículas de gas
- Endoesporas

Extracelulares
­ Flagelo
­ Fimbrias
­ Pili
­ Cápsula (glicocalix)
 MESOSOMAS

• son invaginaciones de la cara interna de la

membrana citoplasmática

• aparecen cuando va a dividirse la célula

• se concentra la síntesis de ATP (fosforilación

oxidativa)
 Cuerpos de inclusión
• depósitos de energía o moléculas
estructurales

• separados en el citoplasma por una

unidad de membrana que no es una bi-
capa, sino una mono-capa lipídica.
El polihidroxibutirato
(PHB) constituye una
reserva de carbono y
energía
 Otros cuerpos de inclusión
• GLICÓGENO: polímeros de glucosa, son gránulos
más pequeños, solo se ven con el microscopio
electrónico. Se pueden teñir con yodo.

• POLIFOSFATO: reservas de fosfato inorgánico. Se

tiñen con colorantes básicos.

• GRÁNULOS DE AZUFRE: bacterias que metabolizan

el azufre lo oxidan a So en forma de gránulos

• Los gránulos que se pueden ver mediante tinción se

llaman metacromáticos
 MAGNETOSOMAS
• presente en bacterias magnéticas
• función en magnetotaxis
• espirilos en agua dulce
• cadenas de Fe3O4, 5 a 40 partículas magnéticas
• orientación en un campo magnético
• no se conoce el significado ecológico, podría ser
el mantener la bacteria en zonas donde el
ambiente cambia anóxico/óxico
• rodeados por una unidad de lípidos, proteínas y
glicoproteínas, las que precipitarían el Fe+3
• el hierro es ingresado a través de quelantes
Magnetotactic bacteria. Transmission electron micrograph of
Magnetospirillum magneticum AMB-1 reveals a long chain of
nanometer-sized magnetic particles.
 a) b)

a) MET de campo oscuro de un espirilo que contiene

cristales magnéticos.
b) Imagen magnificada de los cristales magnéticos.
 Esquema de las posibles reacciones que conducen a la
biomineralización de magnetita en distintas especies de
bacterias magnetotácticas cultivadas.
Modelo para la formación de magnetosomas

Komeili, 2007. Annu. Rev. Biochem. 76:351–66

Three-dimensional organization of magnetosomes.

Komeili, 2007. Annu. Rev. Biochem. 76:351–66

Flotación de cianobacterias provocadas por la presencia de vesículas de gas.
 Vesículas de gas
• para regular el nivel de flotación en el agua
• mecanismo de movilidad, en cianobacterias
• tienen forma de huso, huecas, rígidas
• 300 a 700 nm de largo, 60 a 110 nm de ancho
• están en un nº de pocas a cientos por bacteria
• la membrana está compuesta por proteínas
• es impermeable al agua y solutos, pero es
permeable a los gases
GvpA: pequeña, altamente hidrofóbica, constituye un 97% de la proteína
na total de la vesícula
GvpC: más grande, en pequeñas cantidades. Le da rigidez.
ESPORAS, ESPORULACIÓN
Bacillus anthracis y sus esporas
 ESPORULACIÓN
• Género Bacillus: aeróbicos, esporulados
• Género Clostridium: anaeróbicos obligados o
microaerofílicos, bacilos, esporulados

• Las esporas son refractarias al microscopio

óptico, son de forma ovalada, se las puede
encontrar intracelular (endospora) o
extracelularmente
 Esporas

• Pueden ser central, subterminal o terminal

• Solo se forma una espora por célula vegetativa
• es impermeable a colorantes
• resistente al calor
• resistente a la sequedad
• resistente a bactericidas
• los procesos de esterilización van dirigidos a
matar esporas
 (proteínas)

Dipicolinato
de calcio y
SASP**)

(proteínas)
 Endoespora
• contiene dipicolinato de calcio
• contiene 10-30% de agua
• consistencia de gel
• las enzimas permanecen inactivas por la
deshidratación
• pH es una unidad menor
• contiene proteínas ácido solubles pequeñas
(SASPs)
– se unen al DNA y lo protegen de daño por UV,
desecación y del calor seco
– son fuente de energía y carbono durante la
germinación
“En el proceso han participado un total aproximado de 200 genes”
Streptomyces: estruct.
esporulantes.
 Modelos de ensamblaje del anillo Z

• El anillo se ensambla dinámicamente gracias al

intercambio de unidades de FtsZ (FtsZ
monomérica)
• FtsZ se encuentra en el citoplasma en forma de
protofilamentos, en donde el ensamblaje
involucra un intercambio de fragmentos entre el
citoplasma y el anillo Z