UNIVERSIDAD CATÓLICA DE SANTA MARÍA

PROGRAMA PROFESIONAL DE MEDICINA VETERINARIA Y
ZOOTECNIA
TEMA:
Hemaglutinación
CURSO:
Inmunología Veterinaria
ALUMNA:
Julio Enrique Zúñiga Flores
DOCENTE:
Dra. Eloísa Zúñiga Valencia.
SEMESTRE:
VIII – Par
PRÁCTICA N° 04
I.TEMA: Hemaglutinación (H.!
II. OBJETIVO:
"onocer el titulo #emaglutinante $el antígeno que se %a a
utili&ar 'ara $i(erentes %irus sea el caso) *DV+ I,V+ I,D+ -,P+
.g+ .s+ etc.
NDV: En(erme$a$ $e *e/castle
IBD: En(erme$a$ $e la ,ursa $e Fa0ricio o $e 1um0oro
III. FUNDAMENTO:
2a 'rue0a se $esarrolla en $os (ases+ una 'rimera que es una
reacción antígeno anticuer'o en un me$io líqui$o 3 una
segun$a consistente en la a$ición $e com'lemento+ una
#emolisina $e'en$iente $e com'lemento 3 eritrocitos.
-i se #a 'ro$uci$o reacción antígeno 4 anticuer'o+ es $ecir+ si
el suero anali&a$o contenía anticuer'os (rente al antígeno+ el
com'lemento que$a 56a$o 3 no 'ue$e acti%ar la #emólisis $e
los gló0ulos ro6os.
7n e6em'lo cl8sico $e utili&ación $e esta 'rue0a es la
'erineumonía 0o%ina o la 'leuroneumonía 'orcina.
IV. MARCO TEÓRICO:
1. I!"#$%&&'(
• 2a #emaglutinación es la aglutinación $e los #ematíes o
gló0ulos ro6os.
• 2a #emaglutinación se $e0e a la 'resencia $e antígenos
en los eritrocitos+ antígenos ca'aces $e reaccionar con
anticuer'os o 0ien con 'roteínas es'ecí5cas $e algunos
microorganismos (entre las que $estacan las
#emaglutininas!.
• El aumento $el título $e anticuer'os in$ica una in(ección
reciente.
• %eces+ sim'lemente con $eterminar un título ele%a$o
'o$emos su'oner que se #a 'ro$uci$o una in(ección
reciente.
• 2os títulos $e Ig1 'or sí solos suelen in$icar una in(ección
'asa$a.
). P"%*+,- +,-,$,- * ., $*!*&&'( $* ,!'&%*"/#-:
• Prue0as $e aglutinación
• Prue0as $e 'reci'itación
• Fi6ación $el com'lemento
• Prue0as $e #emaglutinación e in#i0ición $e la
#emaglutinación
• E2I-
• Prue0as $e inmuno9uorescencia
• Prue0as $e neutrali&ación
0. F'1,&'( $*. &#2/.*2*!#:
: 2a 56ación $el com'lemento se 0asa en la ca'aci$a$ $el
com'lemento 'ara unirse a los com'le6os antígeno 4
anticuer'o.
: 2a #emoaglutinación es un m;to$o $on$e no se mi$e la
ca'aci$a$ in(ecciosa $e las 'artículas %irales.
: Es una t;cnica in$irecta 'ara me$ir 'artículas %irales+
'ues en reali$a$ me$iante esta t;cnica se mi$e la
canti$a$ $e 'artículas #emoaglutinantes ('roteínas
%irales! in$e'en$ientemente si estas est8n inclui$as en
la 'artícula %iral o li0res como antígeno.
V. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA:
1. M,!*"',.*-:
1.1 R*,&!'3#- *&*-,"'#-:
• ntígeno) *DV+ I,V+ I,D+ -,P+ .g+ .s+ etc.
• ,u<er Fos(ato -alino ('H) =.>!
• nticoagulante lse%er) ?ml
• 1ló0ulos ro6os la%a$os 3 're'ara$os al @A.
• gua 0i$estila$a $esioni&a$a est;ril ("onstitución $el
antígeno!.
1.) E4%'/# *&*-,"'#:
• Be(rigera$ora.
• "entri(uga
• Placas en V
• ,otellas
• Pi'etas multicanal $e >C – >CCul
• Pi'eta autom8tica sim'le $e >C – >CC ul
• Di's
• "u0etas $e 'l8stico
• Pi'etas $e @ – @C ml
• Jeringas $e E ml
• gu6as
• Pi'etas $e Pasteur
). M%*-!",:
• -angre $e gallina) >ml
0. P"#&*$'2'*!#:
• 2a%ar los gló0ulos ro6os 3 're'8ralos al @A+ a%es que
se'an li0res $e en(erme$a$.
• 7san$o una 'i'eta multicanal agregar EC ul $e ,7FFEB
-2I*F a to$as las cel$as $e una 5la com'leta en la
'laca $e tra0a6o.
• 7san$o una 'i'eta autom8tica sim'le agregar EC ul $el
antígeno 'uro (*DV! en la 'rimera cel$a $e la 5la.
.e&clar 'or @C %eces 3 luego 'asar 'or EC ul a la cel$a
$e la segun$a columna. Beali&ar la misma o'eración
#asta la cel$a @>$escartan$o EC ml $e la última $ilución.
• gregar EC ul $e los gló0ulos ro6os la%a$os a to$os 3
ca$a una $e las cel$as $e la 5la.
• Homogeni&ar 0ien e incu0ar 'or @ #ora a tem'eratura
am0iente.
4. L*&!%",:
• El titulo $el antígeno ser8 la última $ilución $on$e se
o0ser%a #emaglutinación.
• Para contar las uni$a$es #emaglutinantes+ em'e&ar $e la
ultima #emaglutinación #acia atr8s (i&quier$a!.
P2") @> G H cua$ra$itos
15) 154 156 151
7
150
)
157
4
151
)6
15)8
7
158
1)
1510
)4
15)0
46
15409
7
@ utg I ?J ul ,P- K ?L ul ,-P
8. I2:;**-:
F';%", N< 01: gregan$o el 0u<er salino 3 el antígeno a
to$as las cel$as $e una 5la $e la 'laca
F';%", N< 0): 2le%an$o la 'laca a la incu0a$ora
F';%", N< 00: Besulta$os $e la 'r8ctica que se reali&ó.