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UNIVERSIDAD TÉCNICA PARTICULAR DE LOJA

FITOQUIMICA Y FARMACOGNOSIA

Aguilar Milagros, Montaño Jorge, Obaco Fernando, Pozo Gabriel, Tacuri Cristian

EXTRACCION DE ACEITE ESENCIAL DE CLAVO DE OLOR (SYZYGIUM
AROMATICUM) MEDIANTE DESTILACIÓN POR ARRASTRE DE VAPOR
RESUMEN
En la presente practica se procedió a la extracción de aceite esencial de clavo de olor (Syzygium
aromaticum) mediante destilación por arrastre de vapor. Con el aceite extraído se procedió a
realizar una TLC, donde se obtuvo un Rf=0,41. El rendimiento del aceite extraído fue de 3,48 %.
Con la GC-MS se pudo identificar los siguientes compuestos en el extracto: el eugenol (2
metoxi-4-2-propenilfenol) con un 54. 34 %, luego el isoeugenol (2-metoxi-4-propenilfenol) con
22,55%, ergolina-8-carboxamida con 11,29 % y el -carofileno con 7,54 %.
Palabras clave: Aceites esenciales, eugenol, tlc, cromatografía de gases

INTRODUCCION
El clavero (Syzygium aromaticum) es un
árbol generalmente bajo de 3 a 6 metros de
altura (León, 1968) con hojas perennes
(Bruneton, 2001). Es nativa de las islas
Molucas y crece bien solo en áreas
ecuatoriales, de humedad abundante y alta
temperatura altura (León, 1968). Para
obtener su aceite esencial se puede utilizar
los botones florales pero principalmente las
hojas. La droga es muy característica: olor
aromático particular, sabor ardiente,
morfología típica (Bruneton, 2001).
Su composición química se caracteriza por
la presencia mayoritaria de un
propenilfenol, el eugenol. Principalmente en
forma libre y en parte en forma de acetato de
eugenilo, su contenido oscila entre 70 y 85
%. El eugenol va acompañado de varias
decenas de compuestos terpénicos,
alifáticos, aromáticos y heterocíclicos. El
aceite esencial (de clavos, Ph.eur. 3
a
.ed.)
contiene de 75 a 88 % d eugenol, 5-14 % de
-cariofileno, y de 4-15 % de acetato de
eugenilo (Bruneton, 2001).
Se lo puede emplear para el tratamiento de
pequeñas heridas después de lavado
abundante; como antálgico (cefaleas, dolores
dentales); antálgico en afecciones de la
cavidad bucal y/o faríngea (colutorios,
pastillas); en enjuagues para la higiene
bucal. Por vía oral, se utilizan
tradicionalmente en el tratamiento
sintomático de trastornos digestivos: como
gases, digestiones lentas, eructos,
flatulencias. En Alemania, las preparaciones
2

a base de clavo (o aceite esencial) se utilizan
en enjuagues de boca en casos de
inflamación de la boca o garganta
(Bruneton, 2001).
El eugenol del aceite esencial de clavos es
un potente inhibidor de la agregación
plaquetaria. Durante mucho tiempo los
cirujanos dentales han empleado el eugenol
en medicación intracanalar, pero parece que
este producto puede originar lesiones
histológicas cuando se aplica en contacto
directo con los tejidos vivos lo que ha
llevado a abandonarlo. Interesante por sus
propiedades anestésicas locales (inhibe la
conducción nerviosa), también es
antiinflamatorio (inhibidor de la síntesis de
prostaglandinas y de la quimiotaxis de
leucocitos). A concentraciones bajas (10
-2
-
10
-3
mM/L) es bactericida. El eugenol forma
parte también de la formulación de
disoluciones para enjuagues de boca y
pomadas (Bruneton, 2001).

Fuente: (Bruneton, 2001)
Por vía general y a dosis elevadas (0,5
ml/Kg), el aceite esencial del clavo es
toxico, sobre todo en niños pequeños a los
que provoca depresión del SNC, necrosis
hepatocelular, convulsiones y/o trastornos
mayores de la coagulación. Se metaboliza
rápidamente y se excreta, en su mayor parte
conjugado y en muy baja proporción
epoxidado (Bruneton, 2001).
El aceite esencial de clavo de olor se obtuvo
mediante destilación por arrastre de vapor.
Al poseer este aceite esencial un punto de
ebullición alto puede aislarse en un proceso
de destilación con algún líquido de punto de
ebullición inferior, por ejemplo agua
(Ocampo, Ríos, Betancur, Ocampo, 2008).

METODOLOGÍA:
Para la obtención del aceite de clavo de olor
se realizaron los siguientes procedimientos:
se preparó el equipo de destilación en las
instalaciones del laboratorio de Aceites
Esenciales, empleamos los botones florales
de clavo de olor como materia prima, para
un mejor rendimiento, pesamos en una
balanza analítica 2,25 kg de la misma. En el
destilador vertimos una cierta cantidad de
agua y colocamos la materia prima en la
bandeja. Se tapa el destilador, se revisa el
nivel de agua, se cierra la válvula de control
para evitar que fugue el aceite esencial ya
que es una especie muy volátil y se perdería
rendimiento. Se coloca en la entrada de agua
la manguera que permitirá el enfriamiento
del condensador y en la salida de éste una
manguera por donde saldrá agua caliente del
mismo, asegurándose de medir la
temperatura inicial al comenzar la
destilación. Se calienta con llama normal
hasta que ebulla y empieza a salir vapor. En
este punto se controla el calentamiento para
que el destilado no sea demasiado rápido y
lo podamos controlar con un máximo de 5
gotas por segundo. A la salida del
condensador obtenemos un extracto líquido,
3

teniendo en cuenta que el aceite obtenido a
partir del Clavo de Olor es más denso, lo
que hará que se precipite en el fondo y las
partículas de agua se suspenderán en la parte
superior, formando así dos fases, una liquida
(superior) y una oleosa (inferior). Se mide la
temperatura final. Se debe recolectar el
aceite esencial mediante intervalos cada
cierto tiempo hasta que la cantidad de
extracción de aceite muestre un cambio
insignificante en su destilación. El tiempo
estimado de duración de este procedimiento
fue de 3 horas. Luego se colecta el destilado
y se lo deja reposar por unas 12 horas, para
que se pueda separar las fases, y obtener
finalmente el aceite. Luego se decanta las
fases oleosas de la acuosa y se obtiene
nuestro Aceite, con el cual se procederá a
realizar las distintas pruebas para su
determinación química. Se realizó la TLC
mediante fase directa, para identificar el
Eugenol que es la sustancia más activa de
este aceite, para lo cual sembramos una
muestra con la ayuda de un capilar en una
placa de silica gel (fase directa), la
desarrollamos con una fase móvil que está
compuesta por diclorometano 2:3 hexano.
Luego observamos con espectro de luz de
365 nm y con un espectro de 254 nm.
Posteriormente añadimos ácido Sulfúrico
para fijar en la silica gel y vainillina para
revelar sus componentes mediante
calentamiento. Para el rendimiento pesamos
la materia prima que fue las semillas secas,
luego pesamos la probeta vacía, y después la
probeta con el aceite obtenido, hay que
recalcar que el aceite mostro algunas gotas
de agua por lo cual bajo el rendimiento
teórico del aceite. Finalmente realizamos los
cálculos pertinentes obteniendo un
rendimiento de 3, 48 %. En el caso de la
densidad colocamos el aceite en el
picnómetro y lo pesamos, luego colocamos
agua en el mismo y procedimos a tomar su
peso, teniendo en cuenta que la densidad del
agua es 1, la densidad de nuestro aceite fue
0.96 g/ml. Así mismo para identificar los
compuestos del extracto se realizó una GC-
MS, con el cual se pudo identificar los
compuestos presentes en este extracto
RESULTADOS Y DISCUSION:
- Se obtuvo un Rf= 0,45 del extracto al
cual se le realizo la TLC empleando una
fase directa (hexano-diclorometano) en
una proporción 3:2, que presenta un
color amarillo-pardo. Según Wagner y
Bladt el aceite esencial del clavo de olor
muestra un Rf aproximado a 0,5.
Wagner., Bauer., Melchart, Xiao.,
Staudinger, A., obtuvieron en la especie
Cinnamomum cassia que también
contiene eugenol un Rf = 0,41. Todos
los Rf vistos anteriormente se
aproximan al Rf obtenido en nuestra
práctica. También observamos las
placas en luz UV a una longitud de onda
de 254 nm y a 365 nm





365 nm
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Rf= 0,42

- Para obtener el rendimiento del aceite
esencial empleamos la siguiente
formula:
R (%) = (a / b ) * 100
()



R (%)= 3.48
Según Bruneton el rendimiento del
aceite es de 150 a 180 ml/kg, en nuestro
caso obtuvimos un volumen de 70,61 ml,
que posiblemente se debe al tiempo de
extracción aproximado de 3 horas que duro.
- Aproximadamente 1 ml de aceite
esencial de clavo de olor se procedió a
realizar una identificación de los
compuestos obtenidos mediante GC-MS
y obtuvimos el siguiente cromatograma:

Los compuestos más representativos que se
identificaron en esta prueba fueron: el
eugenol (2 metoxi-4-2-propenilfenol) con un
54. 34 %, luego el isoeugenol (2-metoxi-4-
propenilfenol) con 22,55%, ergolina-8-
carboxamida con 11,29 % y el -carofileno
con 7,54 %.

DATOS DEL PROCESO
EXTRACTIVO:
Cantidad de Material (g) 2250g
Densidad Aparente del
material (g/ cm
3
)
1.03
Tipo de Destilación Arrastre de
Vapor
Temperatura (ºC) 20 ºC
Presión (mmHg) 4.5
atm.
Tiempo de destilación 3
horas
Presión Atmosférica (mm
Hg)
1 atm.
Temperatura Entrada y
salida del Refrigerante.
entrada: 16 °
C
salida: 18 °C
Longitud de
Refrigeración (cm)
44cm
Volumen de aceite 70, 61 ml
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extraído
Rendimiento (%) 3.48%
Color del aceite Amarillo
claro







BIBLIOGRAFIA:
- Bruneton, J., (2001).aceites
esenciales. Farmacognosia,
fitoquímica, plantas medicinales.
España. Editorial Acribia.
- León, J., (1968). Fundamentos
botánicos de cultivos tropicales.
Perú. Editorial IICA
- Ocampo, R., Ríos, L., Betancur, L.,
Ocampo, D. (2008). Curso práctico
de química enfocado a la biología ya
los alimentos. Colombia. Editorial
Universidad de Caldas
- Wagner, H., Bladt, S., (2009). Plant
Drugs Analysis. Alemania. Editorial
Springer
- Wagner, H., Bauer, R., Melchart, D.,
Xiao, P., Staudinger, A., 2011.
Chromatographic fingerprinter
analysis of herbal medicines.
Alemania. Editorial Springer












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Cuestionario

- ¿Qué métodos según la bibliografía se emplean comúnmente para separar el aceite
del agua y poder recuperarlo?
- En la destilación por arrastre por vapor de agua intervienen dos líquido: el agua y la
sustancia que se destila, estos líquidos no suelen ser miscibles, y para separar estas fases se
secan agregando sulfato de sodio anhidro y luego se filtra con papel filtro, así vamos a tener
el extracto orgánico (Guarnizo, 2009).
- ¿Cuál es la composición química del aceite obtenido por su grupo en la experiencia
realizada?
- Las semillas de clavo de olor producen aproximadamente un 15% a 20% de aceite volátil, el
cual es responsable del característico olor y sabor. El tallo produce cerca del 5% de aceite y
las hojas 2%, además las semillas contienen un complejo de taninos, gomas, resinas y varios
glucósidos de esteroles.
- Este aceite esencial comprende un total de 23 componentes identificados, entre ellos
eugenol (76,8%), seguido de β-cariofileno (17,4%), α-humuleno (2,1%) y acetato de
eugenilo (1,2%) como componentes principales. El aceite esencial de clavo de olor
demostró actividad de barrido contra la hydracyl 2,2-difenil-1-picrilo (DPPH) radical a
concentraciones más bajas que las concentraciones de eugenol, hidroxitolueno butilado
(BHT), y hidroxianisol butilado (BHA), vanilina y metil N amil cetona 10%, taninos 10%,
triterpenos (ácido oleanólico) 1% (Jirovetz, et al. 2006).
- ¿Cómo se evalúa la calidad organoléptica de un aceite esencial?
- La propiedad organoléptica está vinculada a la volatilidad de la sustancia y esto se evalúa
mediante el tamaño y la forma, estado electrónico, isometría y la posición cis/trans del
producto (Trucco, 2003).
- ¿Qué métodos permiten determinar la composición química de un aceite esencial?
- Estos métodos se realizan con la finalidad de identificar sustancias y conocer la composición
de la droga o planta, entre ellos existen métodos cualitativos y cuantitativos.
- Cualitativos: reacciones de coloración o precipitación, reacciones de fluorescencia, análisis
cromatográfico, cromatografía en capa fina, cromatografía de gases, cromatografía líquida
de alta precisión. Métodos espectrofotométricos, espectro infrarrojo, espectro UV, espectro
RMN, espectrometría de masas.

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- ¿Qué métodos se utilizan para caracterizar o conocer las propiedades físicas de un
aceite esencial?
Estos métodos tienen como objetivo garantizar que cumplan con las normas de calidad y
detección de adulteraciones como la discriminación de calidad, y determinación de que el
producto es natral, los parámetros utilizados son: densidad, poder rotatorio índice de
refracción, miscibilidad en etanol, punto de inflamación y rango de destilación. Métodos
fundamentales de análisis de propiedades aceites esenciales.
Propiedades físicas
Apariencia (viscosa, etc). Color (desde amarillo claro hasta azul oscuro) Olor (dulce, acido,
amaderado, fresco, etc).Densidad relativa a 20Cº (generalmente menor a 1, ejemplo 0.845)
Índice de refracción a 20Cº (147428 nD, etc). Rotación óptica a 20Cº((+)135.34, (-)245.63
°Z) Solubilidad en mezclas alcohol-agua (alcoholes rebajados). (Valarezo, 2008)
Propiedades Químicas
Miscibilidad en etanol. Índice de acidez. Índices de saponificación y éster. Determinación de
aldehídos y cetonas. Formación de fenilhidrazonas. Índice de acetilo. Técnicas
cromatográficas: TLC, TLC/AgNO3, HRGC, HPLC. Métodos espectroscópicos: UV, IR, GC-MS,
1H-, 13C-NMR. (Valarezo, 2008)
- Indique el tratamiento pos-destilación que le daría a un aceite esencial para
mantener su calidad durante el tiempo de almacenamiento antes de su uso.
- Deben ser colocados en frasco oscuro o ámbar perfectamente bien cerrado para evitar el
ingreso de aire,, nunca guardar en botellas de plástico. Conservar a temperatura ambiente,
no calentarlos a baño maría (Lavabre, 1995).

Bibliografía.


Albarracin, G. (2009). Comparacion de dos métodos de extracción de aceite escencial usando pipper
aduncum procedente de la zona cafetera. Trabajo de grado, 28-29.
Guarnizo, A. (2009). Experimentos de química orgánica. 88-90. Armenia: Ediciones Elizcom.
Jirovetz, L., Buchbauer, G., Stoilova, I., Stoyanova, A., Krastanov, A., & Schmidt, E. (28 de Julio de 2006).
Chemical Composition and Antioxidant Properties of Clove Leaf Essential Oil. Agriculural and Food
Chemestry, 6303-6307.
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Lavabre, M. (1995). Aromaterapia libro práctico. México: Lasser Press Mexicana.

Trucco, F. (2003). Cátedra de Faramacognosia y productos naturales. Cátedra de Faramacognosia y
productos naturales. Montevideo, Uruguay: Publicaciones de la catedra de farmacognosia.

Valarezo, E. (1 de julio de 2008). memorias. Recuperado el 2014, de memorias:
http://memorias.utpl.edu.ec/sites/default/files/documentacion/ingenieria-quimica/utpl-ingenieria-
quimica-2008-aceites-esenciales.pdf
PAGINA AISLAMIENTO DE EUGENOL
http://books.google.com.ec/books?id=qmFQ3LwymmMC&pg=PA41&dq=destilaci%C3%B3n+por+arra
stre+de+vapor&hl=es&sa=X&ei=6Be7U-
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