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Metodologia de resistncia de linhagens de soja e Meloidogyne javanica e

Pratylenchus brachyurus

As linhagens de soja previamente selecionadas sero testadas para determinar os
padres de resistncia e suscetibilidade aos nematoides Meloidogyne javanica e
Pratylenchus brachyurus em casa de vegetao. Os materiais primeiramente sero
semeados em vasos plsticos (de 5 L) com substrato e areia estreis, na proporo de
1:2. O delineamento utilizado ser inteiramente casualizado, com dez repeties por
gentipo, onde cada vaso, contendo uma planta, representar uma repetio.
Para obteno do inoculo, sero utilizadas plantas de tomateiro (Solanum
lycopersicum) infestada com M. javanica e para P. brachyurus sero utilizadas plantas
de soja (Glicine max) infestadas com o nematoide, todos os inculos sero mantidos em
casa de vegetao no campo experimental das Faculdades ITES. A extrao dos ovos e
juvenis de segundo estdio dos nematoides sero realizadas de acordo com a
metodologia proposta por HUSSEY & BARKER (1973), modificada por BONETTI &
FERRAZ (1981). A contagem dos ovos ser feita em Lmina de Peters e a suspenso
calibrada para 1000 ovos e J2/mL.
Dez dias aps a germinao das sementes, cada plntula ser inoculada com 5
mL da suspenso de ovos, com o auxilio de uma pipeta. Os vasos plsticos contendo as
plntulas sero mantidos em casa de vegetao, durante 90 dias, onde sero monitoradas
as temperaturas do ar mximas e mnimas. A plantas recebero todos os tratos culturais
necessrios para o desenvolvimento completo da cultura.
Decorridos 90 dias da inoculao, as plantas sero levadas ao laboratrio de
solos e nematologia da Faculdade ITES, onde cada uma ser cuidadosamente retirada
do vaso plstico e ter suas razes lavadas. Para contagem e estimativa do ndice de
galhas (IG) ser utilizada a escala sugerida por TAYLOR & SASSER (1978) (Tabela 1)
e contagem das massas de ovos, pelo mtodo de colorao de massas de ovos de
Meloidogyne spp. com fucsina cida (SILVA et al., 1988).





Tabela 1: Escala para avaliao de ndice de Galhas e ndice de Massa de Ovos
(TAYLOR & SASSER, 1978).
NDICE N DE GALHAS E/OU MASSA DE OVOS
0 0
1 1-2
2 3-10
3 11-30
4 31-100
5 100
Fonte: TIHOHOD, 1993.

A seguir, proceder a extrao de ovos + J2 do nematoide das galhas e das
leses radiculares atravs da metodologia proposta por HUSSEY & BARKER (1973),
modificada por BONETTI & FERRAZ (1981). A contagem dos espcimes sero feitas,
em Lmina de Peters com o auxlio de microscpio fotnico. O nmero de espcimes
dos nematoides sero utilizados para clculo do fator de reproduo (FR), obtido atravs
da diviso da populao final pela populao inicial (inoculada) dos nematoides em
cada planta, conforme metodologia proposta por OOSTENBRINK (1966).
A resistncia dos gentipos de soja ao nematoide de galhas ser avaliada de
acordo com a classificao proposta por CANTO-SENZ (1985) (Tabela 2) e do
nematoide das leses radiculares ser avaliada apenas pelo fator de reproduo.
Tabela 2: Esquema proposto por CANTO-SENZ (1985) para classificao de
gentipos de soja quanto reao a Meloidogyne javanica, baseado no ndice de galhas
(IG) e fator de reproduo (FR).
REAO IG E FR
Hipersuscetveis IG 2 e FR 1
Suscetveis IG 2 e FR 1
Tolerantes IG 2 e FR 1
Resistentes IG 2 e FR 1
Imunes IG = 2 e FR = 1
Fonte: SASSER et al., 1985.


Para anlise dos dados, sero realizadas anlises de varincia (ANOVA). A
discriminao entre as mdias dos tratamentos (gentipos) para as variveis: intensidade
de galhas, nmero de galhas, ndice de galhas, nmero de massa de ovos, nmero de
ovos e fator de reproduo, sero realizadas pelo teste de Scott-Knott com 5% de
probabilidade, utilizando-se o programa computacional ASSISTAT 7.5 (SILVA &
AZEVEDO, 2009).

BONETTI, J. I. & S. FERRAZ. Modificaes no mtodo Hussey & Barker para
extrao de ovos de Meloidogyne exigua, em razes de cafeeiro. Fitopatologia
Brasileira, v. 6, p. 533, 1981.
CANTO-SENZ, M. The nature of resistence to Meloidogyne incognita. In: SASSER,
J. N.; CARTER, C. C. An advanced treatise on Meloidogyne. Vol 1: biology and
control. Raleigh, NC, USA: North Carolina State University Graphics, 1985. p. 225-
231.
HUSSEY, R. & BARKER, K. R. A Comparations of methods of collecting inocula of
Meloidogyne spp. Including a new technique. Plant Disease Reporter, v. 57, p. 1025-
1028, 1973.
OOSTENBRINK, M. Major characteristic of the relation between nematodes and
plants. Mededelingen Landbouwhogeschool, Wageningen Nederlands, 1966. 46 p.
SASSER, J. N. & CARTER, C. C. Overview of the international Meloidogyne project
1975-1984. In: SASSER, J. N.; CARTER,C. C. (Ed). An advanced treatise on
Meloidogyne. Vol 1: biology and control. Raleigh, NC, USA: North Carolina State
University Graphics, 1985.
SILVA, F. de A.S. & AZEVEDO, C.A.V. Principal components analysis in the
software Assistat-Statistical Attendance. In: World Congress on Computers In
Agriculture, 7, Reno-NV-USA: American Society of Agricultural and biological
Engineers, 2009.

SILVA, J. F. V. Resistncia gentica da soja a nematides do gnero Meloidogyne. In:
SILVA, J. F. V.; MAZAFFERA, P.; CARNEIRO, R. G.; ASMUS, G. L.; FERRAZ, L.
C. C. B. Relaes parasito-hospedeiro nas meloidoginoses da soja. Londrina:
Embrapa Soja, Sociedade de Nematologia, 2001. 127p.
TAYLOR, A. L.; SASSER, J. N. Biology, identification and control of root-knot
nematodes. Raleigh: NCSU Graphics. 1978. 111p.