Alcoholes: El mecanismo de acción consite en la desnaturalización de proteínas por inhibición de la

producción de metabolitos escenciales, esta acción se cumple en presencia de agua, ellos explica
por q el alcohol de 70 es mas efectivo q el de 95
Cloro:

Fenol:

Inactivan sistemas enzimáticos
Si mal no recuerdo, la desnaturalizacion es cuando la forma de la proteina cambia por factores
externos. Temperatura, variacion del pH etc. Con lo cual pierde su funcion como tal. Por eso son
tan peligrosos los cuadros febriles altos. Ya que las proteinas del cuerpo y en especial las del
cerebro pueden desnaturalizarse y la persona quedar con secuelas. En bioquímica, la
desnaturalización es un cambio estructural de las proteínas o ácidos nucleicos, donde pierden su
estructura nativa, y de esta forma su óptimo funcionamiento y a veces también cambian sus
propiedades físico-químicas.
 En la desnaturalización de la estructura cuaternaria, las subunidades de proteínas se
separan o su posición espacial se corrompen.
 La desnaturalización de la estructura terciaria implica la interrupción de:
 Enlaces covalentes entre las cadenas laterales de los aminoácidos (como los puentes
disulfuros entre las Cisteínas).
 Enlaces no covalentes dipolo-dipolo entre cadenas laterales polares de aminoácidos.
 Enlaces dipolo inducidos por fuerzas de Van Der Waals entre cadenas laterales no polares
de aminoácidos.
 En la desnaturalización de la estructura secundaria las proteínas pierden todos los
patrones de repetición regulares como las hélices alfa y adoptan formas aleatorias.
 La estructura primaria, la secuencia de aminoácidos ligados por enlaces peptídicos, no es
interrumpida por la desnaturalización
La coagulacion de las proteinas es un proceso irreversible ocasionado por la desnaturalizacion
causada por someterlas a temp superiores a los 70 ºC. O ser tratadas con soluciones salinas,
acidas, alcoholes etc, La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su
desnaturalización por los agentes indicados, que al actuar sobre la proteína la desordenan por la
destrucción de su estructura terciaria y cuaternaria .
En el embarazo
Durante el embarazo, es importante tener cuidado con los medicamentos y los antibióticos.
Examinamos las diferentes clases de antibióticos y medicamentos, para ver cuáles se pueden
utilizar con seguridad, incluso en el embarazo y, por el contrario, a cuáles es necesario renunciar.
Penicilina, cefalosporina y derivados sintéticos
Utilizados desde hace años durante el embarazo, son eficaces contra un amplio número de
bacterias y de infecciones, y no se conocen efectos secundarios sobre el feto. Por este motivo, son
de primera elección durante los nueve meses.
Macrólidos (eritorimicina, claritromicina, etc.)
Se administran, sobre todo, en presencia de alergia a la penicilina o a la cefalosporina y sus
derivados. La clindamicina es útil para tratar las infecciones provocadas por gérmenes anaerobios,
tanto locales (dermatitis) como sistémicos (trastornos en las vías urinarias).
Quinolonicos (ciprofloxacina)
Se pueden utilizar en el embarazo con toda tranquilidad, para tratar problemas específicos y
contra gérmenes que son sensibles a esta sustancia con seguridad, como los que originan las
infecciones de las vías urinarias.
Aminoglicosidos (estreptomicina, gentamicina)
Constituyen una clase de antibióticos muy activos, pero, por desgracia, no están exentos de
posibles efectos tóxicos sobre el nervio acústico y los riñones del feto. Por lo tanto, para las
futuras mamás, está previsto un empleo exclusivo en el ámbito hospitalario, para infecciones
específicas diagnosticadas (por ejemplo, algunos tipos de infecciones urinarias o respiratorias).
Tetraciclina
A esta molécula se le han atribuido efectos secundarios sobre la formación del cartílago y la
dentición del bebé. En consecuencia, se desaconseja su empleo durante la gestación.
Asociación de trimetropina y sulfametoxazol
Presenta una importante limitación de uso en el último trimestre de la gestación, a causa de
posibles efectos perjudiciales sobre el recién nacido.

Sensibilidad bacteriana a los antibióticos
La determinación de la Concentración Inhibidora Mínima (CIM) es la base de la medida de la
sensibìlidad de una bacteria a un determinado antibiótico. La CIM se define como la menor
concentración de una gama de diluciones de antibiótico que provoca una inhibición de cualquier
crecimiento bacteriano visible. Es el valor fundamental de referencia que permite establecer una
escala de actividad del antibiótico frente a diferentes especies bacterianas.
Hay diferentes técnicas de laboratorio que permiten medir o calcular de rutina, y de manera
semicuantitativa, las CIM (métodos manuales y métodos automatizados o semiautomatizados).
Estos diferentes métodos de rutina permiten categorizar una cierta cepa bacteriana en función de
su sensibilidad frente al antibiótico probado. Esta cepa se denomina Sensible (S), Intermedia (I) o
Resistente (R) al antibiótìco.
Para un determinado antibiótico, una cepa bacteriana es, según la NCCLS:
 Sensible, si existe una buena probabilidad de éxito terapéutico en el caso de un
tratamiento a la dosìs habitual.
 Resistente, si la probabilidad de éxito terapéutico es nula o muy reducida. No es de
esperar ningún efecto terapéutico sea cual fuere el tipo de tratamiento.
 Intermedia, cuando el éxito terapéutico es imprevisible. Se puede conseguir efecto
terapéutico en ciertas condiciones (fuertes concentraciones locales o aumento de la
posología).

Agar Sangre: Medio de cultivo enriquecido que permite el desarrollo de todo tipo de bacterias
tanto gram positivas como gram negativas, diferencial (por el tipo de hemolísis) , no selectivo.
La Placa Agar Sangre esta preparada con medio de cultivo en polvo de nombre Agar Base Sangre,
tiene como ingredientes agar-agar. infusión músculo de corazón, peptona, cloruro de sodio;
El color del medio es ámbar claro una vez se halla agregado sangre un 5% o 10 % del volumen
total , su color cambia a rojo cereza.
La sangre utilizada para preparar el medio es sangre de cordero, sangre humana ;según los
resultados esperados se utiliza tambien sangre de caballo y de conejo, importante considerar que
algunas bacterias varían el tipo de hemolisis de acuerdo a procedencia de la sangre.
El uso de este medio de cultivo se fundamenta en que la infusión de músculo de corazón y la
peptona, otorgan al medio un alto valor nutritivo, que permite el crecimiento de una gran
variedad de microorganismos, aún de aquellos nutricionalmente exigentes. El cloruro de sodio
mantiene el balance osmótico.
El agregado de sangre al medio base aporta nutrientes para el crecimiento bacteriano y permite
detectar hemólisis.
El medio se prepara suspendiendo 40 grs de polvo en 1000 cc de agua destilada a punto de
ebullición , disolver hasta obtener una solución homogénea, aplicar calor lentamente en
constante agitación , no permitir la ebullición , de esta forma aseguramos que los nutrientes no
se desnaturalicen. La reconstitución del medio se alcanza cuando el medio se visualiza
transparente a trasluz. Llevar a autoclave a esterilizar a 121ºC a 1 atmósfera de presión por 15
minutos ( Mantener variable de temperatura constante).
Enfriar hasta 50º temperatura que se registra en la práctica cuando el dorso de la mano resiste
el contacto con el matraz. Es importante que el medio no registre mayor temperatura para lograr
conseguir agar sangre ( temperaturas elevadas generan agar chocolate). Agregar la sangre y
homogeneizar.
Medir ph del medio en vaso de precipitado y asi evitar contaminación; el ph del medio a 25ºC
debe registrar 7.3 +/- 0.2
Su disposición en placa de petri estéril, alrededor de 4 mm de espesor unos 18 a 20 ml. Tener
presente que debe plaquearse de inmediato después de agregar la sangre ya que la temperatura
baja y el agar se solidifica bajo los 40ª C.
La totalidad del plaqueado en lo posible va a control de esterilización a 37º C por 24 hr .
Una muestra, en placa de agar sangre, se siembra directamente sobre la superficie sólida del
medio de cultivo. Siembra en superficie por inoculo diluido en estrias zig-zag, o por hisopado para
depositar inoculo y posterior dilución en siembra en abanico. Se incuba por 24 hrs. a 37ºC.
El objetivo de la siembra es el cultivo de muestras diversas para obtener crecimiento bacteriano
en colonias aisladas ( cultivo y aislamiento), además del estudio de reacciones hemolíticas en una
amplia variedad de microorganismos.
4.1.- AGAR SANGRE.

El AS al 5% con base de Tripticasa-Soja es un medio de uso
general que permite el crecimiento tanto de microorganismos
exigentes como no exigentes, que incluyen bacterias aerobias y
anaerobias, aunque no es medio de elección para anaerobios. Permite
visualizar reacciones hemolíticas que producen muchas especies
bacterianas. Tiene por base una fuente proteica (digeridos trípticos,
digeridos proteicos de soja) con una pequeña cantidad de hidratos de
carbono naturales, cloruro sódico y 5% de sangre.

La aportación de caseína y peptonas de soja al agar de
Tripticasa-soja hace el medio en muy nutritivo por el suministro de
nitrógeno orgánico, particularmente aminoácidos y pépticos de
cadena más larga. La presencia de estas peptonas en el medio
permite el cultivo de una gran variedad de gérmenes aerobios y
anaerobios que crecen rápidamente, así como los del género
Cándida. También permite el crecimiento de algunos gérmenes
exigentes como estreptococos, pneumococos, Brucella,
corinebacterias, Erysipelothrix y Pasteurella.

Permite así mismo determinar la capacidad de algunas
bacterias de producir enzimas extracelulares que actúan sobre los
glóbulos rojos, ya sea por lisis completa (hemólisis beta, produce un
halo transparente alrededor de la colonia hemolítica), parcial
(hemólisis alfa, coloración verdosa alrededor de la colonia) o por
ausencia de alteración (hemólisis gamma).

La producción de hemolisinas por las bacterias depende de
muchos factores ambientales como pH o atmósfera de incubación.
Las muestras que puedan contener Brucella o Neisseria deben
incubarse en atmósfera enriquecida en CO2. Las muestras que
puedan contener Brucella o Neisseria deben incubarse en
atmósfera enriquecida en CO2.

4.2.- AGAR CHOCOLATE
Este medio utiliza la misma base que el Agar Sangre.
Antiguamente se añadían los hematíes a la base fundida y se elevaba
la temperatura para lisarlos parcialmente y que soltasen al medio sus
componentes. Esto daba al medio su habitual color pardo chocolate.
El Agar chocolate es un medio destinado principalmente al
aislamiento de gonococos y meningococos, pero en el que pueden
crecer muchos otros microorganismos exigentes. Con un medio
análogo a éste es con el que Thayer y Martin han hecho sus primeros
asilamientos selectivos de gonococos, después de añadir antibióticos.

El Agar chocolate lleva Hemoglobina que aporta al medio otros
factores, en particular el factor V (nicotín-adenina nucleótido)
termosensible, que no se encuentran en el Agar chocolate pueden
aportarse en una mezcla químicamente definida: el PolyViteX. El Agar
chocolate con PolyViteX permite el cultivo de la mayor parte de los
gérmenes encontrados en patología humana o veterinaria.

La siembra de líquidos cefalorraquídeos, pus, resiembra de
hemocultivos, etc., es favorable en este medio, pero está
particularmente indicado para aislamiento de las Neisserias
patógenas y de los Haemophilus.

AGAR MCCONKEY
El agar MacConkey II es una medio selectivo y diferencial para
la detección de organismos coliformes y patógenos entéricos.
Actualmente existen una gran cantidad de medios diseñados para el
aislamiento, cultivo e identificación de bacterias entéricas. El artículo
base sobre el agar MacConkey, uno de los primeros que se
desarrollaron, fue publicado en 1905 y contenía una descripción
detallada de su composición y de los diferentes patrones de
crecimiento obtenidos. Su composición se ha modificado en
numerosas ocasiones
Actualmente existen una gran cantidad de medios diseñados
para el aislamiento, cultivo e identificación de bacterias entéricas. El
artículo base sobre el agar MacConkey, uno de los primeros que se
desarrollaron, fue publicado en 1905 y contenía una descripción
detallada de su composición y de los diferentes patrones de
crecimiento
obtenidos. Su composición se ha modificado en numerosas ocasiones.
La fórmula del agar MacConkey II es de 1983 y se diseñó
especialmente para mejorar su capacidad de inhibir el “swarming” de
Proteus spp y para alcanzar una definitiva diferenciación entre
fermentadores y no fermentadores de la Lactosa.
Este medio es ligeramente selectivo ya que la concentración de
sales Biliares, que inhiben el crecimiento de los microorganismos
Gram positivos, es baja en relación con otros medios similares. Se
incluye también cristal violeta para inhibir el crecimiento de las
bacterias Gram positivas, especialmente estafilococos y enterococos.
La diferenciación de organismos entéricos se lleva a cabo con la
combinación de Lactosa con el indicador Rojo neutro. Se producen
colonias rosas a rojas si el aislado es capaz de fermentar la Lactosa y
colonias sin color en caso contrario.
colonias lactosa (-): incoloras (= no hay fermentación de la
Lactosa). Salmonella, Shigella, Pseudomonas
colonias lactosa (+): rosa/rojo ladrillo rodeadas de un halo de
sales biliares precipitadas. E. coli (rosa/roja), E. aerogenes
(rosa y mucosa)
Caldo peptona
Es una agua peptonada que permite, mediante la adición de un reactivo específico, comprobar la
reacción del indol.
La degradación del aminoácido triptofano contenido en la peptona,mediante una enzima produce
un compuesto heterocíclico el indol, el cual en presencia del para-dimetil-amino-benzaldehido, en
medio ácido produce un compuesto complejo coloreado,soluble en solvente orgánico,
especialmente en el alcohol amílico, entonces se produce un anillo de color cereza y el
microrganismo es Indol positivo. El complejo del triptófano con el p-DAR no es absorvible por el
alcohol amílico.
En algunas circunstancias se suelen preparar el caldo úrea y el caldo INDOL en un mismo tubo. En
este caso,se disuelven la peptona (del caldo peptonado) y los ingredientes del caldo úrea (excepto
la úrea) en el B.M. y cuando el medio está a 50°C se agrega la úrea. Otras veces se agrega los
ingredientes del caldo úrea sobre el agua peptonada estéril, cuando ésta 50°C y se esterlliza por
filtración. Es un medio preparado asi, la lectura de úrea precede a la adición del reactivo KOVACS
para el indol.
Es necesario recordar que para la úrea positiva el PH del medio es alcalino , y el rojo fenol vira al
color cereza; mientras que para el indol el pH del medio es fuertemente ácido, por el HCL
contenido en el reactivo KOVACS.
Por lo tanto una reacción es independiente de la otra, es decir, en el tubo puede leerse úrea
positiva o indol positivo, o úrea negativa o indol positivo o viceversa, indistintamente.
Son úrea positivos: los Proteus.
Son úrea negativos: Shiguella, Escherichia, Salmonella, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella ,
Serratia, Providencia.