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Ao de la Promocin de la Industria Responsable y del Compromiso Climtico

I NMUNO!MA"O#O$I A
(LABORATORIO CLNICO - 6
TO
CICLO)
%actor R& y 'ariante (u
Pro)esora: Milagros Mena Crdova
Inte*rantes+
Apolaya Ore!o" Lorena
Barrial Ro#as" $li%a&e'(
Ca#alen )*are%" +air
C,rdenas Cas'illo" -(onny
$spino%a Ben'*ra" .a'(erine
Ora/(ea Maani" 0erni/a
INTRODUCCIN
El descubrimiento del sistema Rh se le atribuye a Landsteiner y Wiener, en
1940, a partir de sus experimentos con animales al inmunizar conejos con
eritrocitos del mono Macacus rhesus. Los anticuerpos obtenidos alutinaban los
eritrocitos del !" # de los indi$iduos y se plante% &ue estos eran portadores
del 'actor Rh (Rh positi$os). *l 1" # restante se le clasi+c% como Rh neati$os.
El 'actor Rh, es una clase de prote,na &ue se encuentra en la super+cie de los
l%bulos rojos, el cual esta constituido por un complejo de seis ant,enos a los
cuales -isher y Race desinaron con letras ., /, E, c, d, e. .uando un indi$iduo
presenta dichas prote,nas se le considera 0Rh positi$o12 cuando no las tiene es
0Rh neati$o1.
El 'actor Rh es hereditario y se transmite en dos enes. El 'actor Rh positi$o es
dominante, es decir si una persona tiene un en positi$o y otro neati$o, su
'actor ser3 positi$o.
El *nt,eno / tiene dominancia anti4nica. Los indi$iduos &ue presentan este
ant,eno en sus eritrocitos se denominan Rh (5), y a&uellos &ue no tienen el
ant,eno / se denominan Rh (6). 7ara la determinaci%n del 'actor Rh, en la
e$aluaci%n de rutina en el laboratorio se utiliza antisueros comerciales *nti6/, y
puede realizarse por m4todos en tubo o en portaobjetos.
Los anticuerpos *nti6/ tienen importancia considerable ya &ue pueden oriinar
la en'ermedad 8emol,tica del Reci4n 9acido (8/9) y reacciones hemol,ticas
trans'usionales. La :ariante /u, es una $ariante d4bil del *nt,eno /. Este tipo
de reacciones d4biles o neati$as con el anti6/ son detectadas de 'orma
%ptima por la aplicaci%n de una prueba de *ntilobulina indirecta.
OBJETIVOS
/eterminaci%n del -actor Rh en di$ersas muestras de sanre.
/eterminaci%n de la $ariante /u en las muestras &ue presentaron
alutinaci%n d4bil o no presentaron alutinaci%n.
E$idenciar e interpretar la reacci%n de alutinaci%n.
MARCO TERICO
Factor Rh
El 'actor es una prote,na interal de la membrana alutin%ena de los l%bulos
rojos. ;on Rh positi$as a&uellas personas &ue presentan dicha prote,na en sus
eritrocitos y Rh neati$a &uienes no presenten la prote,na. <n !"# de la
poblaci%n tiene en esa prote,na una estructura dominante, &ue corresponde a
una determinada secuencia de amino3cidos &ue en lenuaje com=n son
denominados habitualmente Rh5. *lrededor de la sexta semana de estaci%n,
el ant,eno Rh comienza a ser expresado en los l%bulos rojos humanos.
>ener Rh6 sini+ca &ue se tiene la misma prote,na pero con modi+caciones en
ciertos amino3cidos &ue determinan di'erencias sini+cati$as en la super+cie
de los l%bulos rojos, y hacen a los humanos Rh6 disponer de anticuerpos en el
plasma &ue reaccionan contra los l%bulos rojos Rh5 .
El principal ant,eno Rh es el / y el anticuerpo presente en &uienes carecen de
ant,eno / es el anti6/. ;i el ant,eno / est3 presente el 'enotipo es Rh
positi$o y si / est3 ausente es Rh neati$o. ;e han identi+cado m3s de 4"
ant,enos del sistema Rh, pero de todos ellos apenas cinco son 'recuentes,
estos son? /, ., E, c, e. Los anticuerpos a los distintos ant,enos Rh aparecen
despu4s de exponerse un indi$iduo Rh neati$o a eritrocitos de sanre Rh
positi$o. La herencia de los ant,enos Rh es determinada por un complejo de
dos enes, de los cuales uno codi+ca la prote,na transportadora de ant,eno /
y otro codi+ca la prote,na transportadora de ant,eno @.@ o @c@, o de @E@ y @e@.
El 4"# de los indi$iduos Rh positi$os es homocioto al 'actor /, y el ""#
restante es heterocioto por haber heredado un 'actor / positi$o y otro
neati$o de sus proenitores.
La trans'usi%n de sanre de un Rh5 a un RhA &ue no tiene dicho alutin%eno
induce la 'ormaci%n de anticuerpos, &ue en sucesi$as donaciones puede
alutinar la sanre. /e ah, &ue en las donaciones de sanre y %ranos se tena
en cuenta dicho 'actor. El 'actor Rh (Rhesus) 'ue descubierto por Barl
Landsteiner y Wiener en1940.
Variante Du
Existen $arios 'actores del sistema Rh, los cuales se expresan en 'orma d4bil o
incompleta. Los m3s
importantes son?
El 'actor /u es el m3s importante en Cnmunohematolo,a, como es d4bil no es
'3cil encontrarlo pero conser$a su capacidad anti4nica, por lo &ue puede
inmunizara una persona Rh (6).
Cualmente si una persona &ue es Rh (6) inmunizada recibe sanre /u (5)
creyendo &ue es Rh (6) puede tener una reacci%n hemol,tica. En obstetricia
tambi4n es importante por&ue las parturientas /u (5) clasi+cadas como Rh (6)
no re&uieren protecci%n de la lobulina anti6Rh. >ambi4n hay &ue recordar &ue
la parturienta Rh (6) &ue tiene un hijo /u (5) clasi+cado como Rh (6) si debe
ser inyectada con la lobulina anti6Rh.
9o est3 claramente de+nida la conducta a seuir para la trans'usi%n sanu,nea
a un paciente cataloado como Rh (/) neati$o, pero con 'actor /u (5). ;e han
reportado casos &ue por recibir sanre Rh (5) han desarrollado *c anti6Rh de
especi+cidad anti6/ (no hay anti6/).
/ebe sospecharse de &ue la sanre sea /u (5) cuando la sanre sea di',cil de
clasi+car anti6Rh o anti6/. .omo no hay suero anti6/ debe demostrar su
presencia con la prueba de *ntilobulina 8umana.
Prueba de Coob! indirecta
* di'erencia de la prueba de .oombs directa, la prueba indirecta se basa en la
@incubaci%n@ del suero del paciente con una muestra de sanre tipo D, y
posteriormente se procede a administrar el @anti6suero@.
*
di'erencia de la prueba directa, en la prueba indirecta se busca la presencia de
@anticuerpos@ en el suero del paciente y no @anticuerpos@ peados a la
super+cie de los l%bulos rojos. La prueba indirecta se usa para realizar
@tipi+caci%n@ de rupos sanu,neos, pruebas sanu,neas cruzadas y como
m4todo de rastreo para e$itar reacciones trans'usionales.
Suero anti "#obu#ina huana
El suero anti lobulina humana se obtiene inyectando animales mam,'eros,
eneralmente conejos, con lobulinas humanas puri+cadas siuiendo un
protocolo est3ndar de inmunizaci%n. /e acuerdo con este protocolo se prueba
el suero de los conejos y se escoen los &ue han respondido mejor a la
inmunizaci%n. ;e obtiene sanre total de los mismos (no es imprescindible
sacri+carlos) y se hace una mezcla de plasmas &ue se procesa para obtener un
reacti$o especi+co &ue ser3 capaz de detectar lobulinas humanas,
especialmente amma lobulinas y componentes del complemento. La mezcla
indicada se diluye con una soluci%n tamp%n (p8 aprox. de E) &ue contiene una
pe&ueFa cantidad de alb=mina bo$ina2 se le aFade un 0,1 # de azida s%dica
(9G9a) como conser$ante. 7ara e$itar errores en la utilizaci%n del reacti$o
obtenido, &ue es incoloro, puede adicionarse un colorante $erde.
La prueba de la antilobulina humana permite detectar e identi+car
inmunolobulinas yHo componentes del complemento unidos a hemat,es, ya
&ue, aFadido a hemat,es sensibilizados producir3 su alutinaci%n a condici%n
de &ue dichos hemat,es hayan sido la$ados a 'ondo con suero salino +siol%ico
para eliminar las prote,nas plasm3ticas &ue no est4n unidas espec,+camente a
los mismos.
PROCEDIMIENTO
E$%eriencia N& '( Determinacin de Rh.
6 ;uspensi%n de Il%bulos Rojos al G#.
6 Rotular J tubos, primer tubo con 0/1 y al seundo tubo con 0.1.
6 .olocar una ota del suero comercial *nti A / al primer tubo, y una ota
con *lbumina al seundo tubo.
6 .olocar inmediatamente una ota a cada tubo de l%bulos rojos al G#.
6 Kezclar sua$emente y centri'uar a 1000 R7K x 1 min.
6 ;uspender el bot%n de l%bulos rojos y buscar alutinaci%n.
D
C
E$%eriencia N& )( Variante D
u
.
6 ;i existe una reacci%n d4bil, incubar a GE
o
. x 1" A G0 min. ambos tubos.
6 La$ar 4 $eces con soluci%n salina decantando por completo la soluci%n
salina en declinado.
6 *rear J otas del Reacti$o de .oombs.
6 .entri'uar a 1000 R7K x 1 min. y leer.

D
C
RESU*TADOS
E$%eriencia N& '( Determinacin de Rh.
Rh POSITIVO? (presencia de alutinaci%n o bot%n)
Rh NE+ATIVO? (ausencia de alutinaci%n)
Tubo D(
En el tubo se e$idenci% una alutinaci%n d4bil, por ende se har3
la $ariante /
u
.
Tubo C( En el tubo de control no se e$idenci% aluna reacci%n.
E$%eriencia N& )( Variante D
u
.
Du POSITIVO? (presencia de alutinaci%n o bot%n) L Rh 7D;C>C:D
Du NE+ATIVO? (ausencia de alutinaci%n) L Rh 9EI*>C:D
Tubo D(
;e e$idenci% una mejor alutinaci%n, 'ormando un bot%n
compacto y +rme,
Tubo C( 9o se obser$o ninuna reacci%n.
DISCUSIN
.*<;*; /E ERRDR E9 L* /E>ERKC9*.CD9 /E LD; *9>CIE9D; /EL ;C;>EK*
Rh
Resultados -alsos positi$os?
El reacti$o 'ue colocado e&ui$ocadamente en el tubo incorrecto.
El reacti$o esta contaminado con otro anticuerpo. Este problema rara $ez
sucede y cuando se presenta, se debe a la presencia de al=n anticuerpo
contra ant,enos de muy baja 'recuencia.
7olialutinaci%n. 9o es 'recuente obser$ar polialutinacion con los sueros
anti Rh, debido a &ue durante el procesamiento del reacti$o, los anticuerpos
&ue inducen este 'en%meno son eliminados.
7or autosensibilizaci%n de los l%bulos rojos, cuando se emplean reacti$os
de alta prote,na. La presencia de prote,nas anormales en el suero del
indi$iduo inducen la autoareaci%n de los hemat,es, especialmente cuando
se emplean reacti$os de alta prote,na. Este 'en%meno se pre$iene
empleando de rutina hemat,es la$ados y suspendidos al "# en soluci%n
salina.
.ontaminaci%n bacteriana del reacti$o, contaminaci%n con otros sustancias
o con reacti$os de otros 'rasco.
Exceso de centri'uaci%n.
Resultados -alsos 9eati$os?
La colocaci%n err%nea de un determinado reacti$o en el tubo &ue se le
corresponde.
Mue el reacti$o no se colo&ue en el tubo. /ebe comprobarse pre$iamente la
presencia del reacti$o antes de arear las c4lulas.
Reacciones muy d4biles o neati$as del antisuero con una determinada
$ariante del ant,eno. 7or ejemplo, la reacci%n del anti6E puede ser neati$a
o muy d4bil con la $ariante E.
*ntisueros contra ant,enos compuestos, pueden dar reacciones imprecisas
con l%bulos rojos &ue poseen dichos ant,enos separados. ;e obser$a a
menudo con los sueros anti6. &ue reaccionan mejor con los l%bulos rojos
de 'enotipo .e &ue con los .E.
La aitaci%n 'uerte del tubo para desprender el bot%n de las c4lulas despu4s
de la centri'uaci%n, conduce a la dispersi%n de las alutinaciones d4biles.
/eterioro de las inmunolobulinas o anticuerpos, por contaminaci%n o
conser$aci%n inadecuada.
Nlo&ueo de los ant,enos presentes en la membrana del eritrocito por
exceso de anticuerpos. Este 'en%meno se obser$a especialmente con el
ant,eno / en muestra de sanre del cord%n umbilical, pro$enientes del
niFo con se$era sensibilizaci%n Rh.
-alta de centri'uaci%n adecuada puede conducir a resultados 'alsos
neati$os.
CONC*USIONES
El conocimiento del rupo Rh de una persona es 'undamental para
arantizar una trans'usi%n de sanre exitosa.
La $ariante /u es una prueba para comprobar si una persona es
$erdadero positi$o o neati$o con respecto al 'actor Rh (/). La $ariante
/u se determina cuando el 'actor Rh es neati$o.
El *nt,eno /u se determina por la uni%n del suero *nti6/ a los
ant,enos de super+cie de los l%bulos rojos y su posterior alutinaci%n
con el suero de *ntilobulina 8umana.
-EB+RAF.A
http?HHOOO.drrondonpediatra.comHreacti$oPantilobulinaPhumana.htm
http?HHOOO.nlm.nih.o$HmedlineplusHspanishHencyHarticleH001Q00.htm
http?HHOOO.mediraphic.comHpd'sHmedlabHmyl6J00!Hmyl0!E6!b.pd'
http?HHOOO.bionano.t$HrupoPsanuineo.html
http?HHes.scribd.comHdocH1GJ040J!QH"EGE!EE16/eterminacion6/el6
;istema6*bo6y6Rh