Pruebas bsicas de

Pruebas bsicas de
Coagulacin
Coagulacin
Departamento de Hemostasia y
Departamento de Hemostasia y
Trombosis. IIHEMA
Trombosis. IIHEMA
Academia Nacional de Medicina
Academia Nacional de Medicina
Va Intrnseca de la
Va Intrnseca de la
coagulacin
coagulacin
Bioq Bioq. Luis Bastos . Luis Bastos
Dpto. Hemostasia y Trombosis Dpto. Hemostasia y Trombosis
IIHEMA IIHEMA
Academia Nacional de Medicina Academia Nacional de Medicina
Fibringeno
M. Fibrina
Fibrina
I I a
FT
VI I a
Ca
2+
XIIIa
VI A I NTR NSECA
VI A I NTR NSECA
DE LA
DE LA
COAGULACI ON
COAGULACI ON
XII XI I a
XI XI a
IX I Xa
VI I I a
FL
Ca
2+
Ca
2+
PK
X
Xa
Va
FL
Ca
2+
QAPM
IIHEMA IIHEMA
II
QU PRUEBAS
QU PRUEBAS
EVALAN LA VIA
EVALAN LA VIA
INTRNSECA DE LA
INTRNSECA DE LA
COAGULACION?
COAGULACION?
IIHEMA IIHEMA
XII
XII
XI I a
XI I a
XI
XI
XI a
XI a
IX
IX
I Xa
I Xa
VIIIa
VIIIa
FL
FL
Ca
Ca
2+ 2+
Ca
Ca
2+ 2+
FC
FC
X
X
Xa
Xa
Va
Va
FL
FL
Ca
Ca
2+ 2+
II
II
I I a
I I a
Fibringeno
Fibringeno
Fibrina
Fibrina
Activador
Activador
+ FL
+ FL
VI A I NTRI NSECA
VI A I NTRI NSECA
APTT o KPTT
APTT o KPTT

Prueba de eleccin para la evaluacin

Prueba de eleccin para la evaluacin
de la va intrnseca
de la va intrnseca
IIHEMA IIHEMA
APTT
APTT
CUALES SON LOS
CUALES SON LOS
COMPONENTES Y/O
COMPONENTES Y/O
REACTIVOS NECESARIOS
REACTIVOS NECESARIOS
PARA REALIZAR LA
PARA REALIZAR LA
DETERMINACIN?
DETERMINACIN?
IIHEMA IIHEMA
Tiempo de
Tiempo de
Tromboplastina
Tromboplastina
Parcial Activada
Parcial Activada

Fosfolpidos de distinto
Fosfolpidos de distinto
origen y concentracin
origen y concentracin

Activador (Kaoln,
Activador (Kaoln,
Ac
Ac
.
.
Elgico
Elgico
,
,
Slice)
Slice)

Cloruro de calcio 0,025 M

Cloruro de calcio 0,025 M
IIHEMA IIHEMA
APTT
APTT
Qu sensibilidad
Qu sensibilidad
debera poseer el
debera poseer el
reactivo de eleccin ?
reactivo de eleccin ?
IIHEMA IIHEMA
APTT
APTT

Dficit de factores de la va
Dficit de factores de la va

Presencia de heparina
Presencia de heparina

Inhibidores de la va
Inhibidores de la va
IIHEMA IIHEMA
DE QU VARIABLES
DE QU VARIABLES
VA A DEPENDER LA
VA A DEPENDER LA
SENSIBILIDAD DE LA
SENSIBILIDAD DE LA
PRUEBA?
PRUEBA?
IIHEMA IIHEMA
APTT
Sensibilidad
Activador
Naturaleza y
concentracin
de FL
IIHEMA IIHEMA
CMO REALIZAMOS
CMO REALIZAMOS
LA PRUEBA ?
LA PRUEBA ?
IIHEMA IIHEMA
APTT o KPTT
APTT o KPTT

100
100

l plasma paciente
l plasma paciente

100
100

l
l
cefalina
cefalina
+ activador
+ activador
2 minutos 37
2 minutos 37

C
C

100
100

l
l
cloruro de calcio 0,025M
cloruro de calcio 0,025M

V.N
V.N
.: 37
.: 37
-
-
48 segundos
48 segundos
IIHEMA IIHEMA
ES IMPORTANTE
ES IMPORTANTE
RESPETAR EL TIEMPO
RESPETAR EL TIEMPO
DE INCUBACIN?
DE INCUBACIN?
IIHEMA IIHEMA
VIA EXTRINSECA
VIA INTRINSECA
XIIIa XIIIa
VIIa
FT
PL Ca
2+
fibringeno fibrina fibrina
Fibrina insoluble Fibrina insoluble
IX
IXa
VIIIa
PL Ca
2+
X
Xa
X
Va
PL Ca
2+
II IIa
XIIa QAPM PK
XI
XIa
IIHEMA IIHEMA
FASE DE
CONTACTO
EN QU
EN QU
SITUACIONES
SITUACIONES
PENSARIAMOS AL
PENSARIAMOS AL
OBTENER UN APTT
OBTENER UN APTT
PROLONGADO ?
PROLONGADO ?
IIHEMA IIHEMA
APTT prolongado
APTT prolongado

Pacientes bajo tratamiento

Pacientes bajo tratamiento
anticoagulante oral

D
D

ficit de factores : VIII, IX, XI,

ficit de factores : VIII, IX, XI,
XII, QAPM, PK
XII, QAPM, PK
anticoagulante oral

Fibringeno < 100

Fibringeno < 100
mg
mg
/
/
dl
dl
IIHEMA IIHEMA
APTT prolongado
APTT prolongado

Heparina no fraccionada
Heparina no fraccionada

Inhibidores
Inhibidores

P.
P.
Politransfundido
Politransfundido

VIII, V
VIII, V
IIHEMA IIHEMA
APTT prolongado
APTT prolongado

D
D

ficit
ficit
de
de
vitamina
vitamina
K
K

Hepatopat
Hepatopat

as
as

CID
CID
IIHEMA IIHEMA
ANTE UN APTT
ANTE UN APTT
PROLONGADO,
PROLONGADO,
QU PRUEBA
QU PRUEBA
DEBEMOS REALIZAR ?
DEBEMOS REALIZAR ?
IIHEMA IIHEMA
Correccin con
plasma normal
( relacin 1:1)
IIHEMA IIHEMA
APTT prolongado
APTT prolongado
APTT mezcla plasma del
paciente con plasma
normal (1:1)
No corrige
o prolonga
Corrige
Dficit de factores Inhibidor
IIHEMA IIHEMA
APTT
APTT
Corregir con plasma normal (1:1)
Indice de Rosner
APTT (P+N) APTT N
APTT P
> Valor de corte (0,1)No Corrige
Valor de corte Corrige
IIHEMA IIHEMA
APTT
APTT
APTT (P+N) APTT N
APTT P
= 0,10
Valor de corte
P = 80
P = 80
seg
seg
N = 40
N = 40
seg
seg
P+N
P+N
46
46
seg
seg
55
55
seg
seg
Corrige
Corrige
No Corrige
No Corrige
QU HACER SI
QU HACER SI
TENEMOS UN APTT
TENEMOS UN APTT
PROLONGADO, QUE
PROLONGADO, QUE
CORRIGE Y FACTORES
CORRIGE Y FACTORES
VIII, IX, XI, XII
VIII, IX, XI, XII
NORMALES ?
NORMALES ?
IIHEMA IIHEMA
APTT c/incubacin
prolongada (10 min. a 37C)
Corrige
Posible dficit
Precalicrenas
IIHEMA IIHEMA
CMO REALIZAMOS
CMO REALIZAMOS
LA DETERMINACIN
LA DETERMINACIN
DE LOS FACTORES DE
DE LOS FACTORES DE
LA VA ?
LA VA ?
IIHEMA IIHEMA
Determinacin de factores
Determinacin de factores

Modificacin del APTT

Modificacin del APTT

Reactivos:
Reactivos:
-
-
fosfolpidos de distinto origen
fosfolpidos de distinto origen
y concentracin
y concentracin
-
-
activador
activador
-
-
cloruro de calcio 0,025 M
cloruro de calcio 0,025 M
-
-
plasma deficiente en factor
plasma deficiente en factor
a estudiar, (diluido ?)
a estudiar, (diluido ?)
IIHEMA IIHEMA
Determinacin de factores
Determinacin de factores

Muestra: plasma diluido 1/5, 1/10, 1/20

Muestra: plasma diluido 1/5, 1/10, 1/20

Curva del factor :

Curva del factor :
-
-
diluciones del estndar:
diluciones del estndar:
1/5, 1/10, 1/20, 1/40
1/5, 1/10, 1/20, 1/40

Diluyente Fluido II
Diluyente Fluido II
(buffer
(buffer
Owren
Owren
modificado, pH 7,35)
modificado, pH 7,35)
IIHEMA IIHEMA
Determinacin de factores
Determinacin de factores

50
50

l diluci
l diluci

n paciente
n paciente

50
50

l diluci
l diluci

n plasma deficiente
n plasma deficiente

50
50

l
l
cefalina
cefalina
+ activador
+ activador
2 minutos 37
2 minutos 37

C
C

50
50

l
l
cloruro de calcio 0,025M
cloruro de calcio 0,025M
IIHEMA IIHEMA
Determinacin de factores
Determinacin de factores

V.N
V.N
.: 50%
.: 50%
-
-
150%
150%

Valores :
Valores :

dficit del factor

dficit del factor

inhibidor
inhibidor
IIHEMA IIHEMA
Determinacin de factores
Determinacin de factores
IIHEMA IIHEMA
Factor (U/dl)
T
i
e
m
p
o

(
s
e
g
)
normal
inhibidor especfico
o dficit
DEFICIENCIA DE FACTORES
DEFICIENCIA DE FACTORES
DEFI CI ENCI A
DEFI CI ENCI A
I NCI DENCI A
I NCI DENCI A
HERENCI A
HERENCI A
Fibringeno
Fibringeno
1:1 milln
1:1 milln
AR
AR
Factor II
Factor II
1:2 millones
1:2 millones
AR
AR
Factor V
Factor V
1:1 milln
1:1 milln
AR
AR
Factor VII
Factor VII
1:500.000
1:500.000
AR
AR
Factor VIII
Factor VIII
1:10.000
1:10.000
XLR
XLR
Factor IX
Factor IX
1:60.000
1:60.000
XLR
XLR
Factor XI
Factor XI
1:100.000
1:100.000
AR
AR
Factor XIII
Factor XIII
1:2 millones
1:2 millones
AR
AR
IIHEMA IIHEMA
Va final
Va final
o comn
o comn
Bioq Bioq. Luis Bastos . Luis Bastos
Dpto. Hemostasia y Trombosis Dpto. Hemostasia y Trombosis
IIHEMA IIHEMA
Academia Nacional de Medicina Academia Nacional de Medicina
VIA EXTRINSECA
VIA INTRINSECA
XIIa HMK PK
II IIa
fibringeno
fibrina
fibrina
Fibrina insoluble Fibrina insoluble
XIIIa XIIIa
XI
XIa
IX IXa
VIIIa
PL Ca
2+
X
Xa
VIIa
FT
PL Ca
2+
X
Va
PL Ca
2+
IIHEMA IIHEMA
QU PRUEBAS
QU PRUEBAS
PODEMOS UTILIZAR
PODEMOS UTILIZAR
PARA EVALUAR
PARA EVALUAR
ESTA VA ?
ESTA VA ?
IIHEMA IIHEMA

Tiempo de
Tiempo de
Trombina (TT)
Trombina (TT)

Fibringeno (I)
Fibringeno (I)
IIHEMA IIHEMA
Tiempo de
Tiempo de
Trombina (TT)
Trombina (TT)
Tiempo de Trombina
Tiempo de Trombina

Mide el tiempo de coagulacin del

Mide el tiempo de coagulacin del
plasma en presencia de trombina
plasma en presencia de trombina
.
.

Evala la transformacin de
Evala la transformacin de
fibringeno a fibrina, pero excluye la
fibringeno a fibrina, pero excluye la
participacin del factor XIII.
participacin del factor XIII.
IIHEMA IIHEMA
Tiempo de Trombina
Tiempo de Trombina

Reactivo:
Reactivo:
-
-
solucin de trombina de
solucin de trombina de
10 unidades/ml
10 unidades/ml

Muestra:
Muestra:
-
-
plasma citratado
plasma citratado
IIHEMA IIHEMA
CMO REALIZAMOS
CMO REALIZAMOS
LA PRUEBA ?
LA PRUEBA ?
IIHEMA IIHEMA
Tiempo de Trombina
Tiempo de Trombina

100
100

l de plasma
l de plasma
30 segundos 37
30 segundos 37

C
C
100
100

l de
l de
trombina
trombina

Se debe informar su valor en

Se debe informar su valor en
relaci
relaci

n
n
con el normal del d
con el normal del d

a.
a.
-
-
valores normales entre 16
valores normales entre 16
-
-
22 segundos.
22 segundos.
IIHEMA IIHEMA
EN QU
EN QU
SITUACIONES
SITUACIONES
TENDRAMOS UN TT
TENDRAMOS UN TT
PROLONGADO ?
PROLONGADO ?
IIHEMA IIHEMA
T T prolongado
T T prolongado
Fibringeno disminuido (<100mg%)
Fibringeno anmalo
Heparina
PDF-DD
Paraprotenas
Heparinoides
IIHEMA IIHEMA
T. TROMBI NA
T. TROMBI NA
Corregir con plasma normal (1:1)
P= 25seg N= 16seg
N/2= 20seg P+N= ?
P+N
< N/2 N/2
Corrige No Corrige
Fibringeno (I)
Fibringeno (I)
IIHEMA IIHEMA
Determinacin de Fibringeno
Determinacin de Fibringeno

Modificacin Tiempo de Trombina

Modificacin Tiempo de Trombina
(mtodo de
(mtodo de
Clauss
Clauss
)
)

Reactivos: solucin de trombina

Reactivos: solucin de trombina
(concentracin de 100 75 U/ml)
(concentracin de 100 75 U/ml)
IIHEMA IIHEMA
Determinacin de Fibringeno
Determinacin de Fibringeno

Muestras :
Muestras :
-
-
diluidas 1/10 en buffer veronal
diluidas 1/10 en buffer veronal
Owren
Owren
pH=7,35
pH=7,35

Curva de calibracin:
Curva de calibracin:
-
-
diluciones 1/5, 1/10, 1/20 y
diluciones 1/5, 1/10, 1/20 y
1/40 del
1/40 del
estndard
estndard
.
.
IIHEMA IIHEMA
CMO REALIZAMOS
CMO REALIZAMOS
LA PRUEBA ?
LA PRUEBA ?
IIHEMA IIHEMA

100
100

l Trombina +
l Trombina +

100
100

l de diluci
l de diluci
n
n
de plasma
de plasma
Tiempo de
Tiempo de
coagulaci
coagulaci

n
n

Tiempo de coagulacin es
Tiempo de coagulacin es
inversamente proporcional a la
inversamente proporcional a la
concentracin de Fibringeno
concentracin de Fibringeno
IIHEMA IIHEMA
Determinacin de Fibringeno
Determinacin de Fibringeno

Los resultados se expresan en

Los resultados se expresan en
mg
mg
/dl.
/dl.

V.N
V.N
.: 200
.: 200
-
-
400
400
mg
mg
/
/
dl
dl
IIHEMA IIHEMA
Resultados : TT alterado,TP normal,APTT normal
Resultados : TT alterado,TP normal,APTT normal
mezcla del plasma
del paciente
c/normal (1:1)
Dosaje de
Fibringeno
Hipo o
afibrinogenemia
Corrige No corrige
Disminuido
T de Reptilasa
Alterado Normal
Disfibrinogenemia
congnita o
adquirida
Inhibicin
tipo
heparina
IIHEMA IIHEMA
Qu hacer ante un paciente
Qu hacer ante un paciente
con antecedentes de
con antecedentes de
sangrado tardo, que presenta
sangrado tardo, que presenta
APTT, PT y TT normales
APTT, PT y TT normales
?
?
IIHEMA IIHEMA
Determinar
Factor XIII
IIHEMA IIHEMA
Factor XIII
Alterado Normal
Determinacin de -2
antiplasmina
Disminudo: dficit
congnito o adquirido
Dficit congnito o
adquirido del FXIII o
inhibidor del FXIII
IIHEMA IIHEMA
ESTRUCTURA DEL FACTOR XIII
ESTRUCTURA DEL FACTOR XIII
Subunidad A (XIIIA):
Cromosoma 6
globular
Sitio activo
Monocitos, megacariocitos,
placenta, hgado
A
A
B
B
Tetrmero (A
2
B
2
)
Subunidad B (XIIIB)
Cromosoma 1
Filamentosa
Transportador XIIIA
Hgado
IIHEMA IIHEMA
CUALES SON LAS
CUALES SON LAS
FUNCIONES DEL
FUNCIONES DEL
FXIII?
FXIII?
IIHEMA IIHEMA

Estabilizar el cogulo
Estabilizar el cogulo
(
(
transamidasa
transamidasa
)
)

Produce la unin entre la fibrina y

Produce la unin entre la fibrina y
la
la
2 antiplasmina.
2 antiplasmina.
IIHEMA IIHEMA
Funciones del F XIII
Funciones del F XIII

Entrecruzamiento (uniones covalentes)

Entrecruzamiento (uniones covalentes)
entre:
entre:
IIHEMA IIHEMA

mon
mon

meros de fibrina
meros de fibrina

malla de fibrina
malla de fibrina

fibronectina
fibronectina

col
col

geno (matriz para proliferaci

geno (matriz para proliferaci

n
n
de fibroblastos)
de fibroblastos)

2
2
-
-
antiplasmina
antiplasmina
fibringeno
fibrina
fibrina
Fibrina insoluble
Fibrina insoluble
XIIIa
XIIIa
VIA INTRINSECA
XIIa
HMK
PK
XI
XIa
VIA EXTRINSECA
IX IXa
VIIIa
PL Ca
2+
X
Xa
VIIa
FT
PL Ca
2+
X
Va
PL Ca
2+
II IIa
IIHEMA IIHEMA
E
D
E E
E
D D D D D D
E
D D
E
D D D D
trombina
2FpA + 2FpB
D
A A
B B
E
D D
FIBRINOGENO
E
D D
E
D
D
MONOMERO
DE FIBRINA
DIMERO DE
FIBRINA
F XIIIa
POLIMERO DE FIBRINA
IIHEMA IIHEMA
Manifestaciones clnicas
Manifestaciones clnicas

Ditesis hemorrgicas tardas:

Ditesis hemorrgicas tardas:
-
-
cada del cordn umbilical
cada del cordn umbilical
-
-
traumas o cirugas
traumas o cirugas
-
-
hemorragias intracraneales
hemorragias intracraneales
(SNC, pacientes deficitarios)
(SNC, pacientes deficitarios)

Cicatrizacin tarda y anmala de heridas

Cicatrizacin tarda y anmala de heridas

Abortos espontneos y recurrentes

Abortos espontneos y recurrentes
IIHEMA IIHEMA
Prueba
Prueba
de
de
solubilidad
solubilidad

C
C

mo
mo
evaluar
evaluar
la
la
deficiencia
deficiencia
de FXIII
de FXIII
?
?
Urea o
Urea o
Ac.Ac
Ac.Ac

tico
tico
Ca
Ca
2+ 2+
o
o
IIa
IIa
plasma
plasma

Sensibilidad
Sensibilidad
?
?
IIHEMA IIHEMA
SOLUBILIDAD
Plasmas deficientes (artificiales)
Plasmas deficientes (artificiales)
0
50
100
150
200
250
300
1% NP 5% NP 10% NP
IIa/Aa
Ca/Aa
Ca/Urea
3000
2000
1000
50
0
Tiempo (min)
Concentracin de plasma (%)
IIHEMA IIHEMA
PRUEBA DE
PRUEBA DE
SOLUBILIDAD DEL
SOLUBILIDAD DEL
COAGULO
COAGULO
Trombina/Ac.Ac
Trombina/Ac.Ac

tico
tico

mayor
mayor
sensibilidad
sensibilidad

tiempos
tiempos
m
m

s
s
cortos
cortos
EQAS, 2003 EQAS, 2003
IIHEMA IIHEMA
Prueba de solubilidad en urea 5M
Prueba de solubilidad en urea 5M
200 l de PPP
100 l buffer Owren
200 l Cl2Ca
30 minutos a 37 C
3 ml de urea 5 M
Valor normal: insoluble > 24 horas
IIHEMA IIHEMA
Solubilidad en Trombina
Solubilidad en Trombina
-
-
Actico
Actico

200
200

l fisiolgica
l fisiolgica

200
200

l plasma
l plasma

100
100

l trombina (30UI/ml)
l trombina (30UI/ml)
30min 37
30min 37
3ml
3ml
Ac
Ac
. Actico al 2%
. Actico al 2%
IIHEMA IIHEMA
Laboratorio (Cuantificacin)
Laboratorio (Cuantificacin)

Inmunoelectroforesis especfica
Inmunoelectroforesis especfica
(
(
Laurell
Laurell
) para subunidades A y B.
) para subunidades A y B.

Elisa para subunidades A y B.

Elisa para subunidades A y B.
IIHEMA IIHEMA
Sistema
Sistema
Fibrinoltico
Fibrinoltico
Bioq Bioq. Luis Bastos . Luis Bastos
Dpto. Hemostasia y Trombosis Dpto. Hemostasia y Trombosis
IIHEMA IIHEMA
Academia Nacional de Medicina Academia Nacional de Medicina
Sistema Fibrinoltico
Sistema Fibrinoltico
Plasmingeno
PAI
PAI
Plasmina
2 - Antiplasmina
u-PA/u-PAR
t-PA
Fibrina
Fibrina PDF
IIHEMA IIHEMA
Sistema Fibrinoltico
Sistema Fibrinoltico
Test
Globales
PAI

2
-PI
Lisis de
Euglobulinas
Lisis en Sangre
Entera
Inhibidores
PDF/f.
D-Dmero
Marcadores de
Fibrinolisis
Plasmingeno
t-PA
Sustrato y
activador
IIHEMA IIHEMA
Evaluacin Fibrinoltica
Mtodo funcional
Dosaje de plasmingeno cromognico
Electroinmunoensayo
Mtodo funcional
Dosaje de 2-antiplasmina cromognico
Electroinmunoensayo
Lisis de Euglobulinas
Mtodo funcional
Dosaje de plasmingeno cromognico
Electroinmunoensayo
Mtodo funcional
Dosaje de 2-antiplasmina cromognico
Electroinmunoensayo
Lisis de Euglobulinas
IIHEMA IIHEMA
Pre y post
Lisis de Euglobulinas isquemia por
oclusin venosa
TPA Mtodo funcional
PAI cromognico
Dmero D Aglutinacin
PDF en ltex
IIHEMA IIHEMA
Evaluacin Fibrinoltica
Puntos a tener en cuenta:
Puntos a tener en cuenta:

Reposo previo
Reposo previo
:
:
-
-
20 minutos (el estrs y ejercicio
20 minutos (el estrs y ejercicio
la liberacin endotelial de
la liberacin endotelial de
tPA
tPA
)
)

Ayuno previo:
Ayuno previo:
-
-
Cafena: la actividad
Cafena: la actividad
fibrinoltica.
fibrinoltica.
-
-
Carbohidratos ricos en caloras:
Carbohidratos ricos en caloras:
la actividad del PAI
la actividad del PAI
-
-
1
1
IIHEMA IIHEMA
Puntos a tener en cuenta:
Puntos a tener en cuenta:

Evitar
Evitar
:
:
-
-
Alcohol
Alcohol
:
:
la actividad fibrinoltica
la actividad fibrinoltica
por la liberacin del
por la liberacin del
PAI
PAI
-
-
1
1
-
-
Tabaco: el antgeno del
Tabaco: el antgeno del
tPA
tPA
IIHEMA IIHEMA
0
5
10
15
9 12 15 18 21 24 3 6 9
Hora
P
A
I

B
i
o
l

g
i
c
o

(
U
I
/
m
l
)
RITMO
RITMO
CIRCADIANO
CIRCADIANO
Normales
Normales
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
9 12 15 18 21 24 3 6 9
Hora
t
P
A

B
i
o
l

g
i
c
o

(
U
I
/
m
l
)
0
2
4
6
8
9 12 15 18 21 24 3 6 9
Hora
t
P
A

i
n
m
u
n
o
l

g
i
c
o

(
n
g
/
m
l
)
AE AE Wallnfer Wallnfer et et al, 1993 al, 1993
IIHEMA IIHEMA
Lisis del cogulo
Lisis del cogulo

Evala globalmente la actividad

Evala globalmente la actividad
fibrinoltica
fibrinoltica

Afectada por los niveles de

Afectada por los niveles de
Plg
Plg
/
/
Plm
Plm
,
,
fibringeno, activadores e inhibidores de
fibringeno, activadores e inhibidores de
la fibrinolisis (
la fibrinolisis (

2
2
-
-
PI)
PI)
IIHEMA IIHEMA
Lisis del cogulo
Lisis del cogulo

Sangre recin extrada en tubo de vidrio

Sangre recin extrada en tubo de vidrio
limpio y seco.
limpio y seco.

Bao a 37
Bao a 37
C
C
, tomar la hora cuando
, tomar la hora cuando
coagula.
coagula.

Tomar el tiempo de lisis completa del

Tomar el tiempo de lisis completa del
cogulo
cogulo
IIHEMA IIHEMA
Lisis de
Lisis de
Euglobulinas
Euglobulinas

Precipitacin de fraccin proteica

Precipitacin de fraccin proteica
(Euglobulinas) en medio cido
(Euglobulinas) en medio cido

Activadores del
Activadores del
Plasmingeno
Plasmingeno

PAI

Fibringeno
Fibringeno

Plg
Plg

Plasmina
PAI Plasmina
Sobrenadante
Sobrenadante
:
:
-
-
Inhibidores de la Plasmina (
Inhibidores de la Plasmina (

2
2
-
-
PI)
PI)
IIHEMA IIHEMA
Lisis de
Lisis de
euglobulinas
euglobulinas
250 l PPP*
4 ml agua destilada
70l cido actico (1%)
30 min. en heladera 4-8C
Centrifugar a 1000 rpm, 5 min
(*) PPP obtenido de sangre anticoagulada (9:1) con citrato cido de sodio.
IIHEMA IIHEMA
Lisis de
Lisis de
euglobulinas
euglobulinas
Descartar el sobrenadante
250l de borato de sodio
250l de CaCl2 0,025M
IIHEMA IIHEMA
FIBRINOLI
FIBRINOLI
SIS
SIS
Respuesta a la isquemia
Respuesta a la isquemia
Muestra basal (pre)
Muestra luego de 10 min. de compresin
(post)
Esfingomanmetro: presin media entre la
mnima y la mxima (del paciente)
IIHEMA IIHEMA
Respuesta a la isquemia
Tanto la muestra basal como la post oclusin
se deben recoger en tubos con citrato cido y
mantener refrigeradas
ndice post/pre:
< 0,70 buena respuesta
0,70-0,75 pobre respuesta
> 0,75 mala respuesta
IIHEMA IIHEMA