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Curs

o:
GENTICA GENERAL

Docente: GARCIA LOPEZ JHON

Alumna:
GARCIA FLORES DOGMINIQ

Codigo:
125508k




INTRODUCCIN

La mitosis es el tipo de divisin del ncleo celular por el cual se conservan
los orgnulos y la informacin gentica contenida en sus cromosomas, que pasa de
esta manera a las clulas hijas resultantes de la mitosis. La mitosis es igualmente un
verdadero proceso de multiplicacin celular que participa en el desarrollo, el
crecimiento y la regeneracin del organismo. Este proceso tiene lugar por medio de
una serie de operaciones sucesivas que se desarrollan de una manera continua, y que
para facilitar su estudio han sido separadas en varias etapas.
El resultado esencial de la mitosis es la continuidad de la informacin hereditaria de
la clula madre en cada una de las dos clulas hijas. El genoma se compone de una
determinada cantidad de genes organizados en cromosomas, hebras de ADN muy
enrolladas que contienen la informacin gentica vital para la clula y el organismo.
Dado que cada clula debe contener completa la informacin gentica propia de
su especie, la clula madre debe hacer una copia de cada cromosoma antes de la
mitosis, de forma que las dos clulas hijas reciban completa la informacin. Esto
ocurre durante la fase S de la interfase, el perodo que alterna con la mitosis en el ciclo
celular y en el que la clula entre otras cosas se prepara para dividirse.












OBJETIVOS
- Observar e interpretar figuras de distintas fases de la mitosis en clulas
vegetales.
- Esquematizar las fases sucesivas de la mitosis.
- Aprender el procedimiento correcto a realizar en la identificacin de la
mitosis.
MARCO TEORICO
El Ciclo Celular
Cuando una clula se divide en dos, uno ambos productos de la divisin pueden volver
a dividirse, establecindose de esta forma un ciclo de divisin celular, el perodo
entre dos mitosis consecutivas, se denomina interfase. El estado normal de una clula
es con los cromosomas en estado de un cromatidio, es decir en estado de una doble
hlice de ADN. Indudablemente para que una estructura pueda dividirse en dos
exactamente iguales, esta estructura ha de estar duplicada, es decir todos sus
componente repetidos y separados en estructuras diferenciadas. El cromosoma antes
de dividirse debe pasar a un estado en el que posea dos cromatidios, genticamente
idnticos. La duplicacin del materia gentico ha de ser previo a la divisin celular.
En la interfase del ciclo de divisin celular podemos distinguir tres perodos:
G1.- Es un estado que se caracteriza por ser genticamente activo, el ADN se
transcribe y se traduce, dando lugar a protenas necesarias para la vida celular y
sintetizando las enzimas y la maquinaria necesaria para la sntesis del ADN.
Fase S.- Es la fase en la cual se duplica por entero el material hereditarios, el
cromosoma pasa de tener un cromatidio a tener dos, cada uno de ellos compuesto por
una doble hlice de ADN producto de la duplicacin de la original, como la replicacin
del ADN es semiconservativa, las dos dobles hlices hijas sern exactamente iguales, y
por tanto los cromatidios hermanos, genticamente idnticos.
G2.- Durante este perodo se ultima la preparacin de todos los componentes de la
divisin celular, al final de esta fase, se produce una seal que dispara todo el proceso
de la divisin celular.


La divisin celular se compone de dos partes, la divisin del ncleo (cariocinesis, o
mitosis) y la del citoplasma (citocinesis). La divisin del ncleo es exacta, se reparte
equitativamente el material hereditario, mientras que la citocinesis puede no serlo, es
decir el reparto de orgnulos citoplsmicos y el tamao de las dos clulas puede no
ser equitativo ni igual.
Durante la mitosis el ADN va a estar totalmente empaquetado y supernrollado,
inaccesible a polimerasas y transcriptasas, es por ello que toda la actividad funcional
del ADN ha de realizarse en la interfase previa a la cariocinesis.
Al final de la mitosis, la clula entra en interfase, si esa clula ya no se va a dividir ms,
entra en lo que se denomina perodo G0, si por el contrario esa clula va a volver a
dividirse entra de nuevo en el perodo G1 previo a la sntesis del ADN, e inicindose
un nuevo ciclo de divisin celular.
FASES DE LA MITOSIS
El proceso de mitosis es rpido y altamente complejo, y est integrado por una serie
de eventos sucesivos que se desarrollan de manera continua. Para facilitar el estudio
de estos eventos se los ha separado en varias etapas conocidas como: profase,
metafase, anafase y telofase. La mitosis es generalmente, pero no necesariamente,
seguida inmediatamente por la citocinesis, la cual divide el citoplasma, las organelas y
la membrana celular en dos clulas, cada una con un ncleo, con cantidades similares
de estos componentes.
PROFASE
Durante la primera etapa de la mitosis, la profase, los cromosomas duplicados se
preparan para la separacin y la maquinaria mittica se ensambla.
Formacin del cromosoma mittico El ncleo de una clula en interfase contiene
longitudes enormes de bras de cromatina. El estado extendido de la cromatina en
interfase es ideal para la separacin en dos clulas hijas. Antes de separar sus
cromosomas, una clula los convierte en estructuras mucho ms cortas y gruesas por
un proceso notable de compactacin de cromosomas (o condensacin cromosmica),
que ocurre en etapas iniciales de la profase.
Los cromosomas mitticos estn compuestos por tipos similares de bras, como se ve
al examinar con el microscopio electrnico los cromosomas completos aislados de las
clulas mitticas. Parece que la compactacin cromosmica no altera la naturaleza de
la bra de cromatina, sino la manera en que la bra de cromatina se empaca. El
tratamiento de los cromosomas mitticos con soluciones que disuelven las histonas y
la mayora de las protenas no histonas revela una estructura que conserva la forma
bsica del cromosoma intacto.
Las asas de DNA se unen por su base con las protenas no histonas que conforman el
andamiaje cromosmico. Durante la interfase, las protenas del andamiaje
cromosmico se dispersan dentro del ncleo y tal vez forman parte de la matriz
nuclear. En aos recientes la investigacin de la compactacin cromosmica se enfoc
en un complejo abundante de mltiples protenas llamado condensina. Las protenas
de la condensina se descubrieron mediante la incubacin de ncleos en extractos de
huevos de rana y la identicacin de las protenas que se relacionan con los
cromosomas durante la compactacin.







Cada cromosoma mittico comprende un par de cromtides hermanas conectadas
entre s por el complejo proteico cohesina.
La disolucin de la envoltura nuclear y la particin de los organelos citoplsmicos En
la mayora de las clulas eucariotas el huso mittico se ensambla en el citoplasma y
los cromosomas se compactan en el nucleoplasma. La rotura de la envoltura nuclear
al nal de la profase posibilita la interaccin entre el huso y los cromosomas. La
fosforilacin de las molcu- las de la lmina por la cinasa mittica Cdk promueve el
desen- samble de la lmina nuclear, que constituye la capa interna de la envoltura
nuclear. El destino de la porcin membranosa de la envoltura nuclear es tema de gran
Modelos de las funciones de condensina y
cohesina en la formacin de los cromosomas
mitticos. Inmediatamente despus de la
duplicacin, las hlices de DNA de un par de
cromtides hermanas se man- tendran juntas
por efecto de molculas de cohesina que rodean
las hlices de DNA hermanas, como se muestra
en la parte superior del dibujo.
controversia. Segn la visin clsica, la envoltura nuclear se fragmenta en una
poblacin de pequeas vesculas que se dispersan por la clula mittica.
PROMETAFASE
La membrana nuclear se ha disuelto, y los microtbulos (verde) invaden el espacio
nuclear. Los microtbulos pueden anclar cromosomas (azul) a travs de los
cinetocoros (rojo) o interactuar con microtbulos emanados por el polo opuesto. La
membrana nuclear se separa y los microtbulos invaden el espacio nuclear. Esto se
denomina mitosis abierta. Cuando el huso crece hasta una longitud suficiente, los
microtbulos asociados a cinetocoros empiezan a buscar cinetocoros a los que
anclarse. Otros microtbulos no se asocian a cinetocoros, sino a otros microtbulos
originados en el centrosoma opuesto para formar el huso mittico.







Conforme los cromosomas se congregan hacia el centro del huso mittico, los
microtbulos ms largos unidos con un cinetocoro se acortan, en tanto que los
microtbulos ms cortos unidos con el cinetocoro hermano se alargan. Se piensa que
estos cambios de longitud de los microtbulos son regidos por diferencias en la fuerza de
traccin (tensin) en los dos cinetocoros hermanos. El acortamiento y la elongacin de los
microtbulos se deben sobre todo a prdida o ganancia de subunidades en el extremo ms
del microtbulo.
Micrografa con uorescencia de una clula pulmonar de
salamandra, cultivada en la prometafase temprana de la mitosis,
justo despus de que la envoltura nuclear se rompiera. Ahora los
microtbu- los del huso mittico pueden interactuar con los
cromosomas. El huso mit- tico se ve verde despus de la marca con
un anticuerpo monoclonal contra tubulina, mientras que los
cromosomas aparecen azules despus de marcar- los con un
pigmento uorescente.











Comportamiento de los microtbulos durante la formacin de la placa de la metafase. Al
principio el cromosoma se conecta con los microtbulos de los polos opuestos, que pueden
tener una longitud muy distinta. Conforme la prometafase contina, este desequilibrio se
corrige como resultado del acortamiento de los microtbulos de un polo debido a la prdida
rpida de subunidades de tubulina en el cinetocoro y la elongacin de los microtbulos del
polo opuesto mediante la rpida adicin de subunidades de tubulina en el cinetocoro.
El compromiso de un cromosoma durante la prometafase y su movimiento a la placa de la metafase.
Esta serie de fotografas tomadas de un video muestra los movimientos de los cromosomas de una
clula pulmonar de salamandra en un periodo de 100 s durante la prometafase. Aunque la mayora
de los cromosomas de la clula estaba casi alineada en la placa de la metafase al principio de la
secuencia, uno de los cromosomas. no se haba unido con las bras del huso (echa). En B el
cromosoma des- encaminado se uni al huso y luego se mueve hacia el polo con velocidad variable
hasta que llega a su posicin estable en F. La posicin de un polo se indica con la punta de echa en
A.
METAFASE
A medida que los microtbulos encuentran y se anclan a los cinetocoros durante la
prometafase, los centrmeros de los cromosomas se congregan en la "placa metafsica" o
"plano ecuatorial", una lnea imaginaria que es equidistante de los dos centrosomas que se
encuentran en los 2 polos del huso. Este alineamiento equilibrado en la lnea media del
huso se debe a las fuerzas iguales y opuestas que se generan por los cinetocoros
hermanos. El nombre "metafase" proviene del griego que significa "despus."


1. Microtbulos astrales que irradian hacia afuera desde el centrosoma, para la regin
exterior del cuerpo del huso. Ayudan a colocar el aparato del huso en la clula y es
probable que contribuyan a establecer el plano de citocinesis.
2. Microtbulos cromosmicos (del cinetocoro) que van desde el centrosoma hasta los
cinetocoros de los cromosomas. En las clulas de los mamferos cada cinetocoro est
unido con un haz de 20 a 30 microtbulos, lo que forma una bra del huso. Durante la
metafase los microtbulos cromosmicos ejercen una fuerza de traccin sobre los
cinetocoros. Como resultado los cromosomas se mantienen en el plano ecuatorial por
una competencia de tirar la cuerda entre las fuerzas de traccin equilibradas que
ejercen las bras del huso cromosmico de los polos opuestos. Los microtbulos
cromosmicos son necesarios para el movimiento de los cromosomas hacia los polos
durante la anafase.
3. Microtbulos polares (o interpolares) que se extienden desde el centrosoma y ms all
de los cromosomas. Los microtbulos polares de un centrosoma se superponen con sus
contrapartes del centrosoma opuesto. Los microtbulos polares forman una canasta
estructural que mantiene la integridad mecnica del huso. Cuando se ven imgenes o
videos de la mitosis, parece que la metafase es una etapa durante la cual la clula hace una
breve pausa, como si todas las actividades mitticas se detuvieran. No obstante, el anlisis
experimental revela que la metafase es un periodo en el que ocurren sucesos importantes.



ANAFASE
Todos los cromosomas de la placa de la metafase se dividen en sincrona al principio
de la anafase y las cromtides (ahora denominadas cromosomas porque ya no estn
unidas a sus hermanas) comienzan su migracin hacia el polo. Cuando el cromosoma
se mueve durante la anafase, su centrmero luce como su borde delantero con los
brazos del cromosoma atrs. El movimiento de los cromosomas hacia el polo
contrario es muy lento en relacin con otros tipos de movimientos celulares: avanzan
cerca de 1 m por minuto, un valor calculado por un investigador de la mitosis como
el equivalente a un viaje de Carolina del Norte a Italia que tomara cerca de 14
millones de aos. La escasa velocidad del movimiento cromosmico asegura que los
cromosomas se separen con exactitud y sin enredos. En la seccin siguiente se
describen las fuerzas que al parecer impulsan el movimiento de los cromosomas
durante la anafase. El movimiento de los cromosomas hacia el polo se acompaa de
un acortamiento evidente en los microtbulos cromosmicos. Desde hace mucho
tiempo se apreci que las subunidades de tubulina se pierden del extremo ms (con
base en el cinetocoro) de los microtbulos cromosmicos durante la anafase.





TELOFASE
Conforme los cromosomas se aproximan a sus polos respectivos, tienden a reunirse
en una masa, lo que marca el principio de la etapa nal de la mitosis, o telofase En la
telofase las clulas hijas regresan a la condicin de interfase: la envoltura nuclear se
reforma y los cromosomas se dispersan cada vez ms hasta que desaparecen de la
vista en el microscopio. La divisin real del citoplasma en dos clulas hijas tiene lugar
por un proceso que se describe un poco ms adelante. Sin embargo, primero hay que
regresar y considerar las fuerzas necesarias para que todos los movimientos
principales de los cromosomas ocurran durante la mitosis.



CITOCINESIS
Durante la mitosis se realiza la separacin de los cromosomas duplicados en los ncleos
de las clulas hijas, pero la clula se divide en dos clulas hijas por un proceso separado
llamado citocinesis. El primer indicio de citocinesis en la mayora de las clulas animales
aparece durante la anafase como una indentacin en la supercie celular en una banda
angosta alrededor de la clula. Conforme pasa el tiempo, la indentacin se profundiza
para formar una hendidura que rodea por completo la clula. El plano del surco est en el
mismo que antes ocupaban los cromosomas de la placa de metafase, por lo que los dos
conjuntos de cromosomas al nal se parten entre dos clulas diferentes. A medida que
una clula se divide en dos, se libera membrana plasmtica adicional a la supercie celular
mediante vesculas citoplsmicas que se fusionan con el surco divisorio que aumenta.
Telofase. Micrografa electrnica de un corte
a travs de una clula de la granulosa ovrica
en telofase.
El surco contina profundizndose al pasar por los remanentes densamente
empacados de la porcin central del huso mittico, lo que forma un puente
citoplsmico entre las clulas hijas llamado cuerpo central. Las supercies opuestas
nalmente se fusionan entre s en el centro de la clula, con lo que sta se divide en
dos.
Se cree que el mecanismo generador de la fuerza que opera durante la citocinesis es
similar a la contraccin basada en la actina-miosina de las clulas musculares. En
tanto el desliza- miento de los lamentos de actina de una clula muscular causa el
acortamiento de la bra muscular, el deslizamiento de los lamentos del anillo
contrctil tira de la corteza y la membrana plasmtica unida hacia el centro de la
clula. Como resultado el anillo contrctil constrie la regin ecuatorial de la clula,
de modo muy similar a lo que sucede cuando se tira del cordn para cerrar la abertura
de una bolsa.




FIJADOR : CARNOY










Es el mejor fijador conocido para el glucgeno y en general, para los hidratos de
carbono simples y para protenas fibrilares y sobre todo miofibrillas, su accin
fijadora es extremadamente rpida deshidratando el tejido al mismo tiempo, sin
embargo produce una excesiva retraccin mstica y una hemlisis masiva de
eritrocitos as como una pobre conservacin estructural del ADN. Est compuesta
por:
ETANOL ABOSLUTO..60.0 ml.
CLOROFORMO.30.0 ml.
C. ACTICO GLACIAL..10.0 ml.
Colorante: Orcena
Composicin:
ORCENA--------------------1-2 G
ACIDO ACTICO--------------45 ML
Se disuelve la orcena en caliente a 60C en cido actico, tomando las mismas
precauciones que en el proceso de preparacin del carmn, para evitar la
evaporacin del actico. Una vez enfriada la disolucin, aadir
AGUA DESTILADA------------100 ml




MATERIALES Y METODOS
Estilete.
Papel absorbente.
Portaobjetos.
Cubreobjetos.
Luna de reloj.
Pinzas.
Mechero.
Alcohol.
Fijador Carnoy.
Orcena Actica.
Microscopio.
Races jvenes del bulbo de cebolla.
Vaso de vidrios.
Bistur.
Vial.
Gotero.
Tijera.
PROCEDIMIENTO
1. Una semana antes de realizar el experimento escoja algunos bulbos de
cebolla fresca e inserte tres palillos de dientes en sus partes laterales y
colquelos en agua.

Races jvenes de cebolla

2. Seleccionar y Cortar con el bistur
unas siete raicillas de cebolla. Luego
colocar las races seleccionadas en un
vial, seguidamente agregar el fijador
carnoy, dejar que actu el colorante
durante 20 minutos.



3.-Despus del paso anterior. Las races se retiran del vial y se colocan
en una luna de reloj y se le agregar 2 o tres gotas de orcena,
ayudndonos de una pinza de madera calentar suavemente a la llama
del mechero, esperar hasta que se emitan 10 vapores tenues.


4.-Con las pinzas finas tomar con cuidado una raz y colocarla sobre un
porta, cortar los ltimos 2 3 milmetros y desechar el resto. Colocar el
cubre objetos y encima una almohadilla hecha con papel de filtro sobre la
que se ejerce presin con el dedo pulgar, primero suave, despus ms
intensa, para aplastar la muestra, tcnica conocida como squash.


5. Aspirar con el papel de filtro el exceso de colorante. Y lleve el preparado al
microscopio primero a pequeo aumento y luego con aumentos mayores,
recorriendo diversos campos para descubrir en las clulas observadas, las
distintas fases de la mitosis.
RESULTADOS
Profase temprana

Los
cromo
somas se empiezan a condensar.
Se empieza a formar el Huso
acromtico o mittico.
Se duplican los centriolos
Profase tarda









Los cromosomas ya formados se mueven y se unen a una fibra del huso por su
centrmero (un slo cromosoma por fibra), de manera que las cromtidas
miran hacia los polos de la clula. Cuando se han unido se van moviendo hasta
situarse en el centro de la clula.


Prometafase



Metafase

los cromosomas se encuentran situados en el ecuador (parte media) de la
clula, formando una figura muy caracterstica llamada PLACA ECUATORIAL.





Anafase temprana

Las cromtidas se separan y se desplazan hacia los centriolos, al tiempo que
van desapareciendo las fibras del huso. En este momento ya se ha repartido el
material hereditario (las cadenas de ADN) de forma idntica en dos partes.

Anafase tarda

A nivel de la membrana plasmtica se inicia la formacin de un pliegue de
segmentacin, es decir, indica el inicio de la citocinesis.


Telofase temprana

El huso acromtico empieza a desaparecer.
Se visualizan dos dotaciones completas de cromosomas, una en cada polo.

Telofase tarda

Los cromosomas se descondensan se forma la envoltura nuclear y cada
clula presenta dos ncleos.


CONCLUSIONES
En el tejido meristematico, cuyas clulas estn en constantes divisin se
pueden apreciar las fases mitticas.
Al observar la anafase temprana y anafase tarda . La anafase temprana viene
definida por la separacin de cromtidas hermanas, mientras que la tarda por
la elongacin de los microtbulos que produce la separacin de los
centrosomas. Al final de la anafase, la clula ha conseguido separar dos juegos
idnticos de material gentico en dos grupos definidos, cada uno alrededor de
un centrosoma.
La identificaron los principales cambios morfolgicos que se presentan
durante el proceso de division de las celulas en las races de cebolla, se
observaron la posicion de los cromosomas, la condensacion de la cromatina, la
segmentacion.

RECOMENDACIONES
Para mantener el desarrollo de las races de los bulbos de cebolla, llevarlos al
agua, solo la zona radicular.
Tener precaucin de no agregar demasiado fijador Carnoy ya que puede daar
los tejidos.
Al calentar la muestra es necesario controlar que solo emane 10 vapores.
Mientras se lleva al fuego en la luna de reloj, evitar de las muestras se quemen.
Al momento de hacer el squash tener cuidado de no romper el cubreobjetos
y procurar limpiar el excedente con papel .
BIBLIOGRAFA
- Gilbert, S. F. (2010). Developmental Biology (Ninth Edition). Ed. Sinauer.
- Gilbert, S.F. (2005). Biologa del Desarrollo (7 Edicin). Ed. Panamericana.
- Carlson, M. B. (2009). Embriologa Humana y Biologa del Desarrollo (Cuarta
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- Wolpert, Jessell, Lawrence, Meyerowitz, Robertson, Smith
(2009). Principios del Desarrollo (3 Edicin). Ed. Panamericana.
LINKOGRAFIA
- file:///C:/Users/FAM%20FLORES/Downloads/biologiacelularymolecular5ta
ed-130131071349-phpapp01.pdf
- http://www.monografias.com/trabajos94/mitosis-y-meiosis/mitosis-y-
meiosis.shtml