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ANÁLISIS DEL CRECIMIENTO EN LOS PROCESOS BIOTECNOLÓGICOS

 Etapas de diseño del medio:

1. Selección = ingredientes del medio de cultivo – Aspectos a tener en cuenta:
-Función de los ingredientes
-Interés de obtener crecimiento vs formación del producto
-Información sobre el microorganismo, los sustratos y el proceso
-Los macro y micro elementos para el crecimiento y la formación de producto
-Macro elementos: C, N, O, H, S, P, K, Mg
-Micro elementos Ca, Mn, Fe, Cu, Co, Zn, B, Cr, Mo, vitaminas (ácido fólico, biotina,
vitamina K), aminoácidos (triptófano, metionina, valina), otros (ácidos grasos, ácidos
nucleicos)

2. Formulación

3. Optimización = implica hallar la mejor concentración para mejorar el proceso,
garantizando así mayor producto – Aspectos a tener en cuenta:
-Cambiar un componente y mantener el resto igual (observando consecuencias)
-Cultivo continuo
-Técnicas estadísticas

 Esquema:


 Etapas para el desarrollo del Bioproceso

1. Cultivo Mixto (variedad de microorganismos)
2. Medio Selectivo (asegura el crecimiento específico de un microorganismo ej. Acetobacter)
3. Crecimiento libre de Contaminación (Caja de Petri; se manejan y controlan los nutrientes,
agar-agar y pH)
4. Cultivo a pequeña escala (varía el pH de crecimiento para obtener el pH de formación del
producto – medio líquido)
5. Fermentador
6. Medio Líquido
7. Extracción con solventes (separación)
8. Producto Obtenido (se le hace una caracterización)






 Tipos de Medios de Cultivo

A) Medio Definido = para estudio fisiológico y producción
Ventajas Desventajas
 Composición definida
 Mayor reproducibilidad en el proceso
 Mayor estabilidad en
almacenamiento
 Mayor facilidad para purificar
 Estricto procedimiento d preparación
 Alto costo
 Tiempo
 Factores de crecimiento

B) Medio Complejo = se basa en componentes naturales y su composición es desconocida
Características
 Medio barato
 Puede proveer factores de crecimiento necesarios como vitaminas, hormonas,
elementos trazas, etc. por lo que da como resultado un rendimiento celular bastante
alto
 Este medio contiene extracto de levadura, peptona, licores de maíz, etc.

 Estequiometría del Crecimiento

1. Reacción Biológica


2. Balance por Elementos:
C: w = c + d
4 ecuaciones con 5 incógnitas – se utiliza el término RQ
H: x + b g =  c + 2 e
O: y + 2 a + b h =  c + 2 d + e
N: z + b i =  c

3. Coeficiente de Respiración (RQ): varía según el tipo de microorganismo; los
microorganismos anaerobios no tienen coeficiente de respiración

4. Balance de Electrones:
Tener en cuenta los números de valencia de los elementos:
C H O N S P
4 1 – 2 – 3 6 5

Se definen los núcleos de electrones libres; para ello se toman los subíndices (átomo-gramo) y se
multiplican por su respectivo número de valencia.
Ej. glucosa – C
6
H
12
O
6

# electrones disponibles (glucosa) = (6 x 4) + (12 x 1) + (6 x -2) = 24

5. Grado de Reducción (γ)




Ej. glucosa – C
6
H
12
O
6

*Nota: es mejor emplear sustratos con un grado de reducción menor puesto que son de más fácil
de oxidación.
Compuesto Fórmula γ
Metano
CH
4

N-Alcano
C
15
H
32

Metanol
CH
4
O

Glicerol
C
3
H
8
O
3

Mannitol
C
6
H
14
O
6

Ácido Acético
C
2
H
4
O
2

Ácido Láctico
C
3
H
6
O
3

Glucosa
C
6
H
12
O
6

Formaldehído
CH
2
O

Ácido Glucónico
C
6
H
12
O
7

Ácido Málico
C
4
H
6
O
5

6. Balance de electrones disponibles
De acuerdo a la reacción biológica descrita inicialmente: el carbono se distribuye entre la biomasa
y el producto, por ello se tiene el siguiente balance:

Donde:

grado de reducción del sustrato;

grado de reducción de la biomasa
En este balance no se tiene en cuenta la fuente de nitrógeno ni los subproductos porque su
Ej.
E. Coli
CH
1.77
O
0.49
N
0.24

Aerobacter Aerogenes
CH
1.83
O
0.55
N
0.25

S. Cereviciae
CH
1.83
O
0.56
N
0.17

C. Utilis
CH
1.83
O
0.46
N
0.19


7. Rendimiento de Biomasa (

)

Donde:
c – moles de biomasa que se producen (coef. estequiométrico)
PM biomasa – PM real biomasa = peso fórmula + % de cenizas
Si se está trabajando con datos experimentales:

8. Estequiometría del Producto:

Donde:

grado de reducción del sustrato;

grado de reducción de la biomasa;

grado
de reducción del producto
9. Rendimiento del Producto:

Donde:
f – moles de producto (coef. estequiométrico)
Si se está trabajando con datos experimentales:

10. Demanda Teórica de Oxígeno:
Para hallar las moles de oxígeno (coeficiente “a”)

Puede ocurrir que el producto sea cero y por lo tanto:

Se agrega que:
La producción máxima de biomasa está dada por:

La producción máxima del producto está dada por: