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Elaborado: Rosario Calixto Cotos

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS


E.A. P. INGENIERIA AGROINDUSTRIAL
ASIGNATURA: BIOQUIMICA
SEMESTRE 2014-I
Mg. MARIA ROSARIO CALIXTO COTOS

PRACTICA 6

ESTUDIO DEL FRACCIONAMIENTO DE LIPIDOS EN ALIMENTOS

I. OBJETIVO
Fraccionar e identificar los lpidos cerebrales

ii. INTRODUCCIN TEORICA
El cerebro presenta en su composicin, casi todos los lipidos conocidos
El colesterol presente en nuestro organismo proviene de dos fuentes, el exgeno de
la dieta y el endgeno que es sintetizado a partir de AcetilCoA, siendo el rgano ms
importante de procesos de sntesis el hgado, aunque otros tejido pueden sintetizarlo
(ID, glndulas suprarrenales, piel, aorta, etc). La velocidad de sntesis est
influenciada por la tasa de colesterol corporal.

Fundamento de la reaccin de Salkowski
El mtodo se basa en la deshidratacin de la molcula de colesterol por la accin del
cido sulfrico concentrado con la formacin de colesterileno de color rojo.



Fosfatidilcolina. Es un fosfolpido que, junto con las sales biliares, ayuda a la
emulsificacion de las grasas.. Es el componente ms abundante de la fraccin
fosfatidica que puede extraerse tanto de yema de huevo), como de gramos de soja
mediante extraccin mecnica, o qumica usando hexano. Es uno de los principales
constituyentes de las bicapas lipidicas de las membranas celulares. El cerebro y el
sistema nerviso presenta una serie de fosfolpidos.
Estos fosfolpidos se caracterizan por su solubilidad en solventes orgnicos como el
ter, alcohol, etc y por su insolubilidad en la acetona.
FOSFATIDILCOLINA
Elaborado: Rosario Calixto Cotos

III. PARTE EXPERIMENTAL

.1. MATERIALES Y REACTIVOS

HNO3 conc, H2SO4 50%, H2SO4 conc., NaOH 40 %, Molibdato de amonio10 % , Acetona 40%,
lugol, cocina elctrica, embudos, centrifuga, tubos de centrifuga, probetas, tubos de ensayo,
gradilla, vasos de 50 mL, pipetas, bombillas, papel parafina
Balanza analtica, bao mara.

2. PROCEDIMIENTO
Fundamento de la extraccin de colesterol y lecitina del cerebro:
La extraccin est basada en la diferencia de solubilidades de dichos lpidos en
solventes orgnicos tales como acetona, ter, cloroformo y alcohol, y otros. El
colesterol es soluble en acetona y los fosfolpidos son insolubles en este disolvente

1. Pesar 5 g de tejido cerebral y luego triturar en un mortero despus aadir 5 ml de
acetona (inflamable)
2. Todo el contenido colocar en un tubo (I) y centrifugar, durante 10 minutos.
Separarar el sobrenadante y colocar en otro tubo de prueba (II), dejar evaporar
con ayuda de la estufa a baja temperatura.
3. Prueba cualitativa para determinar la presencia de colesterol:
Reaccin de Salkowsky:
A. En el tubo (II) con la muestra desecada y fra adicionar 1 ml de cloroformo
B. Luego 5 gotas de H2SO4 conc sobre las paredes del tubo. Observar la
presencia colesterol al formarse un anillo de color rojo intenso

4. Prueba para reconocer el fosfolpido: Fosfatidilcolina: Lecitina
A. El residuo que quedo en el tubo i aadir 2 ml de cloroformo mezclar, transferir
en un vaso y aadir 5 ml de NaOH 5 %, hervir por 2 minutos en B.M.
B. Enfriar y luego neutralizar con aprox 5 gotas H2SO4 50% medir el pH, con la
tiras de pH.
C. Filtrar, separar en dos partes iguale
D. Para FOSFORO: En un tubo del filtrado aadir 1 ml de HNO3 y 2 gotas de
NH4OH
E. Luego en calor aadir 6 gotas de Molibdato de amonio 5%
F. Caliente en B.M observe el precipitado amarillo de fosfomolibdato de amonio
G. Para COLINA. El filtrado en el tubo agregar 1 ml de NaOH 40% mas 3 gotas
de lugol, calentar en B:M hirviente ligeramente por 30 seg, y perciba los
vapores de amina, olor caracterstico a pescado y un precipitado amarillo, que
nos demuestra la presencia de colina.(Iodoformo)

IV. RESULTADOS
Colesterol
Solvente de extraccin: .
Ecuacin qumica de reconocimiento de colesterol


Fosfolipidos
Solvente de extraccin.-
Realice la ecuacin qumica de reconocimiento de colina



Elaborado: Rosario Calixto Cotos

Realice la ecuacin qumica de reconocimiento de fsforo



Cul es la estructura de la fosfatidilcolina y la fosfatidiletanolamina














V. CUESTIONARIO

1. Durante la extraccin de los lpidos, Qu ocurri con las protenas del
tejido? Explique.
2. Haga una lista de disolventes orgnicos en orden decreciente de polaridad.
3. De los siguientes lpidos: colesterol, fosfolpidos y glucolpidos Cul es la
de mayor polaridad y cual la de menor polaridad?
4. Realice un diagrama de la extraccin y fraccionamiento de lpidos en el
cerebro.

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1. Robinson David. Bioqumica y valor nutritivo de los alimentos. 2da edicin.
Editorial Acribia 1991. Zaragoza.
2. Cheftel Claude y Cheftel Henri. Editorial. Acribia, Espaa. Introduccin a la
bioqumica y tecnologa de los alimentos, Vol 1, p, 215, 2000
3. Campbell Bioqumica 6ta edicin, Editorial Cengare Learning, 2009, Mxico.











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