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BIOTECNOLOGIA ALIMENTARIA

MOMENTO 2 ACTIVIDAD 3
CUESTIONARIO


PRESENTADO POR
FERNANDO ARROYAVE ALVAREZ 1115.069.802


GRUPO
211619-11


TUTOR
GLAEHTER YHON FLOREZ







UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA
20 DE OCTUBRE DE 2014
CUESTIONARIO
Desarrollar el siguiente cuestionario basado en la lectura del articulo
Purificationand_characterisation_of_Saccharomyces_cerevisiae_external_invertase_isoforms

1. Qu tipos de tecnologas son mostrados en el artculo?
2. Segn su criterio las polticas o tecnologas descritas en los artculos. Cmo pueden ser aplicadas
o implementadas, en el contexto nacional colombiano?
3. Especifique la relacin directa existente entre los temas tratados y la biotecnologa Alimentaria.
4. Como se realiza la determinacin de actividad enzimtica de la enzima del artculo elegido.
5. Explique la metodologa para la determinacin de la actividad enzimtica de las siguientes
protenas:
a. Glucosa Isomerasa. b. Peptinasa. c. Proteasa. d. Amilasa.
6. Una de los mtodos ms utilizados para el rompimiento celular es la sonicacin, describa y
explique el fundamento fsico de esta tcnica.
7. Determine la sensibilidad de dos mtodos de determinacin de protenas, junto con las tinciones de
comassie y nitrato de plata.
8. Si se tiene 65 ml de extracto enzimtico para realizar una purificacin de protenas, Cunto sulfato
de amonio hay que adicionarle a dicha solucin para llevarla a una saturacin del 30%, y cuanto
hay que adicionarle de ms para llevarla al 50%?
9. Defina y explique y el fundamento de las siguientes cromatografas:
a. Cromatografa preparativa. b. Cromatografa exclusin por tamao c. Cromatografa de
intercambio inico d. Cromatografa de intercambio catinico e. Cromatografa de fase reversa
10. Como se calcula el factor de purificacin de una enzima y el rendimiento de esta, cul es su
significado prctico.
11. Cules son los mtodos de concentracin de protenas escala laboratorio ms utilizados y cul es su
fundamento fsico.
12. Describa una metodologa para determinar el nmero de subunidades de un enzima alostrica
purificada.
13. Explique el dogma central de la biologa molecular y como este se relaciona con la enzima del
artculo.
14. Explique por qu al realizar una mutacin en el gen del enzima, esto puede conllevar a un aumento
en la actividad.
SOLUCION

1. Qu tipos de tecnologas son mostrados en el artculo?
R/: EL artculo nos habla acerca de la tecnologa de produccin de Invertasa Externa o azcar invertido
de la sacarosa utilizando la invertasa externa para su transformacin incrementando esto el rendimiento
y evitando la utilizacin de cidos para su separacin en glucosas y fructosa.

2. Segn su criterio las polticas o tecnologas descritas en los artculos. Cmo pueden ser
aplicadas o implementadas, en el contexto nacional colombiano?
R/: La aplicacin de este mtodo en el mbito colombiano se puede lograr debido a la gran industria
dulcera que poseemos en especial el valle del cauca donde es posible su aplicacin por industrias
azucareras ya que permite un mayor rendimiento y disminuye los costos de produccin.

3. Especifique la relacin directa existente entre los temas tratados y la biotecnologa
Alimentaria.
R/: El tema escogido est fuertemente correlacionado con la biotecnologa ya que se reemplaza un
catalizador qumico por una enzima biolgica extrada de la levadura Saccharomyces cerevisiae de
amplio uso a nivel industrial y comercial.

4. Como se realiza la determinacin de actividad enzimtica de la enzima del artculo elegido.
R/: El Ensayo de actividad de la invertasa externa se realiz con el siguiente procedimiento:
Se tomaron 25 L de invertasa y se aadi a una solucin de sacarosa 0,3 M en 50 mM de tampn de
acetato (475 L) a pH 4,5.
Despus de 5 min a 25C la reaccin fue terminada por adicin del reactivo cido 2,4-dinitrosaliclico
(500 L) y la mezcla se hirvi en bao de agua salada durante 5 min. Antes de la medicin de la
absorbancia a 540 nm, se aadido 4 ml de agua desionizada. La curva estndar se obtuvo con diferentes
concentraciones (entre 0,5 y 10 mM) de una cantidad equimolar de mezcla de D-glucosa y D-fructosa
en 50 mM de tampn acetato a pH 4,5. Una unidad de la actividad de la invertasa (U) corresponde a la
cantidad de enzima que cataliza la hidrlisis de 1 mol de sacarosa por 1 min bajo condiciones
descritas del ensayo. Invertasa concentracin se obtuvo midiendo la absorbancia a 280 nm
(A280nm=2.25 para 1 mg / ml solucin invertasa).
5. Explique la metodologa para la determinacin de la actividad enzimtica de las siguientes
protenas:
a. Glucosa Isomerasa. b. Peptinasa. c. Proteasa. d. Amilasa.
R/:

6. Una de los mtodos ms utilizados para el rompimiento celular es la sonicacin, describa y
explique el fundamento fsico de esta tcnica.
R/:

7. Determine la sensibilidad de dos mtodos de determinacin de protenas, junto con las
tinciones de comassie y nitrato de plata.
R/:

8. Si se tiene 65 ml de extracto enzimtico para realizar una purificacin de protenas, Cunto
sulfato de amonio hay que adicionarle a dicha solucin para llevarla a una saturacin del
30%, y cuanto hay que adicionarle de ms para llevarla al 50%?
R/:

9. Defina y explique y el fundamento de las siguientes cromatografas:
a. Cromatografa preparativa. b. Cromatografa exclusin por tamao c. Cromatografa de
intercambio inico d. Cromatografa de intercambio catinico e. Cromatografa de fase
reversa
R/:

10. Como se calcula el factor de purificacin de una enzima y el rendimiento de esta, cul es su
significado prctico.
R/:

11. Cules son los mtodos de concentracin de protenas escala laboratorio ms utilizados y cul
es su fundamento fsico.
R/:

12. Describa una metodologa para determinar el nmero de subunidades de un enzima
alostrica purificada.
R/:

13. Explique el dogma central de la biologa molecular y como este se relaciona con la enzima del
artculo.
R/:

14. Explique por qu al realizar una mutacin en el gen del enzima, esto puede conllevar a un
aumento en la actividad.
R/: