UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Universidad del Perú, DECANA DE AMÉRICA
Cátedra de Química Analítica Instrumental

Obtención del espectro de azosulfamida, longitud
de onda óptima y curva de Ringbown
PRÁCTICA N°2
INTEGRANTES:
o
o
o
o

13040094 Auris Candela Lidia
13040076 Cubas Luca Sheila
13040101 Damián Santa Cruz Rossmery
13040018 Norabuena Urbiza Daisy

PROFESOR : Fredy Quispe Huamán
GRUPO : Viernes de 2-6 p.m.

E.A.P : Farmacia y Bioquímica

En ésta práctica conoceremos el comportamiento de las sustancias en este caso azosulfamida frente a las radiaciones electromagnéticas . hallaremos la zona de trabajo donde se cumple la ley de Lambert-Beer y la concentración óptima.PRÁCTICA N°2 : OBTENCIÓN DEL ESPECTRO DE AZOSULFAMIDA. . El fundamento de la espectrofotometría se basa en la absorción de las radiaciones electromagnéticas por parte de los grupos cromóforos. Al aumentar la concentración del compuesto absorbente en solución. Concentración). la absorbancia de una solución es directamente proporcional a la concentración y a la longitud del trayecto del paso de luz. La ley de Beer establece la relación entre el grado de absorbancia de una solución y otras dos variables : la concentración del absorbente y la longitud del trayecto que el haz de luz recorre a través de la solución. Según esta ley . donde a partir de los datos obtenidos en la práctica anterior hallamos la longitud de onda óptima . donde generalmente sólo son importantes los cromóforos cuya absorción máxima posee una longitud de onda superior a 200 nm. LONGITUD DE ONDA ÓPTIMA Y CURVA DE RINGBOWN INTRODUCCIÓN : Se denomina espectrofotometría a la medición de la cantidad de energía radiante que absorbe un sistema químico en función de la longitud de onda de la radiación. Todos estos datos se obtendrán al trazar la curva de Ringbown ( gráfica de absortancia vs. y a las mediciones a una determinada longitud de onda. que son grupos que experimentan transiciones electrónicas al absorber radiaciones . más luz es absorbida y menos transmitancia.

30 µg/mL. Para la curva de Ringbown: Las transmitancias son convertidas a absortancias mediante la fórmula: ABSORTANCIA= 100. siguiendo los pasos: - - Enchufar el instrumento. . 12 µg/mL. Luego. fiolas pequeñas Agua destilada Propipeta Método Operatorio Se realizan las diluciones a partir de la muestra estándar (Azosulfamida 500 µg/mL). 2 µg/mL. 0.MATERIALES Y MÉTODOS Materiales y reactivos        Espectrofotómetros UV-visible: Modelo UV-2100 ESPECTROFOTOMETRO Marca: UNILO Modelo GENESYS 105 UV-visible Marca: THERMO SCIENTIFIC Cubetas de cuarzo Papel tissue Estándar de azosulfamida 500µg/mL ( 0. transmitancia. 50 µg/mL. seleccionar la opción que se requiera. y se llevan a observar al espectrofotómetro a ser leídas a 520nm y 530nm ya que estas longitudes de onda fueron las obtenidas en el laboratorio anterior. 0. y realizar las respectivas lecturas.4 µg/mL.0.2 µg/mL. 60µg/mL . 0.7 µg/mL. absorbancia u otro. 80 µg/mL. 40 µg/mL. 10 µg/mL. luego se traza la curva sigmoidea y los trazos auxiliares para obtener la zona de trabajo y la concentración óptima.1 µg/mL. Mientras tanto.%T Obtenidas las absortancias de cada una de la lecturas. prender el estabilizador. tubos de ensayo. 0. encender el espectrofotómetro y dejarlo cargar por unos minutos.5 µg/mL. se debe enjuagar la cubeta. 5µg/mL. colocando las absortancias en el eje lineal y las concentraciones en el eje logarítmico. 70 µg/mL. 1 µg/mL.3 µg/mL. se debió haber encendido el espectrofotómetro para que se caliente o estabilice y obtener mejores resultados. 7 µg/mL. Para cambiar muestra. 20 µg/mL. se grafica en papel semilogaritmico. 90 µg/mL y 100 µg/mL ) Matraces. pipetas. para esta experiencia se eligió Transmitancia finalmente se realiza la lectura primero del blanco (que debe salir 100%T) y luego de la muestra. 3 µg/mL.

Modelo UV-2100 ESPECTROFOTOMETRO Modelo GENESYS 105 UV-visible RESULTADOS: Marca: UNILO Marca: THERMO SCIENTIFIC .

6 96. Log C y % Transmitancia. Azosulfamida µg/mL mg/mL log C %T Absortancia 0.9031 0.3 12 12000 4.3 2.Azosulfamida: Sustancia analizada a 520nm Tabla 1: Datos de Absortancia.6990 66.8 8.0 100 80 80000 4.0792 43.4771 10.2 200 2.3 300 2.6 33.6990 95 5 0.5 20 20000 4.0 100 100 100000 5 0.2 2 2000 3.7 44.1 15.5 99.5 56.0 100 70 70000 4.8451 93 7 1 1000 3 91.6990 0.0 100 90 90000 4.8451 55.6 30 30000 4.9542 0.1 0.6021 3.1 7 7000 3.1 100 2 97.9 4.0 100 .7 700 2.8451 0.4 50 50000 4.7782 0.4771 79 21 5 5000 3.4 400 2.5 500 2.30103 93.7 0.6021 95.9 0.4 76.3010 23.9 40 40000 4.1 6.9 3 3000 3.5 60 60000 4.1 89.4771 97 3 0.3010 84.

3010 81.5 2 2000 3.5 8.8451 91.8 35.7782 1.2 99. Log C y % Transmitancia.4771 94.6990 93.4771 12.6021 94.1 87.1 55.9 40 40000 4.4 3 3000 3.0792 43.6990 3.5 500 2.1 100 2 96 4 0.Azosulfamida: Sustancia analizada a 530nm Tabla 2: Datos de Absortancia.2 10 10000 4 44.4 400 2.30103 91.8 100 100000 5 0.4 70 70000 4.8 60 60000 4.3 300 2.8 6.2 200 2.1 99.1 22.9 0.9 12 12000 4.7 700 2.1 0.5 1 1000 3 89.6 90 90000 4.4 99.6 18.6021 6 94 50 50000 4.8451 1.6 0.4771 77.3 30 30000 4.9 5.9 .6 98.7 75.6990 64.2 56.9 5 5000 3.9031 0. Azosulfamida µg/mL mg/mL log C %T Absortancia 0.4 8.5 10.2 96.2 0.2 98.1 5.8 20 20000 4.3010 24.9542 0.8 80 80000 4.

Cuanto menor es la longitud de onda. entre otros.%T) que nos servirá luego para trazar la gráfica de la curva sigmoidal (curva de Ringbown) en relación absortancia vs. que tienen diferentes absorciones y deben ser usados correctamente al igual que deben estar completamente limpios. 2000). podemos notar que hay diferencias en los valores obtenidos. -El uso de diferentes cubetas (cuarzo y plástico). hallando para eso su absortancia.   Por otro lado. que está dada por la siguiente formula: CONCLUSIONES:  Se concluye que mediante esta técnica a partir de los valores de transmitancia. ya que no podemos asegurar que sean exactos para ello debimos ver propiedades de la sustancia tales como punto de fusión. que pueden deberse a distintos factores tales como: -El uso de dos modelos diferentes de espectrofotómetros.  Pudimos determinar la zona de trabajo y la concentración óptima de la azosulfamida mediante la curva de ringbown. mayor la energía de radiación electromagnética necesaria para la excitación electrónica. Así la radiación necesaria para la excitación de electrones σ es de mayor energía que la requerida para la excitación de electrones de pares aislados o de electrones π. -Malas diluciones realizadas a partir del patrón. pues uno puede estar en mejor funcionamiento que el otro o tener mayor precisión para los resultados. . es decir. Concentración. es decir.  Según los resultados obtenidos. Nos es útil para poder cuantificar una sustancia es decir un análisis cuantitativo. También debemos considerar el error fotométrico (error instrumental en función de la transmitancia). en la gráfica podemos notar que no todos los puntos forman la curva sigmoidea por lo que tuvo que adecuarse los puntos para la gráfica considerando la mayor cantidad de puntos posibles. tanto mayor es la diferencia de energía entre los orbitales. a transiciones entre niveles de energía discretos. nos servirá para hallar los valores de absortancia ( ABSORTANCIA = 100 .DISCUSION DE RESULTADOS :  En los intervalos visibles y ultravioleta del espectro las absorciones de las moléculas orgánicas conducen a transiciones electrónicas desde orbitales con electrones enlazantes y no enlazantes a orbitales vacíos no enlazantes o antienlazantes.( Seyhan Ege.

Generalmente sólo son importantes los cromóforos cuya absorción máxima posee una longitud de onda superior a 200 nm. Su estructura química que presenta es la siguiente : Donde se observa varios grupos cromóforos como lo son los dobles enlaces . que tienen un átomo de nitrógeno unido directamente al anillo aromático. El desplazamiento del máximo de absorción se pone claramente de manifiesto. estando en razón directamente proporcional absorbancia con concentración. Las transiciones desde π-> π* son características de cromóforos con dobles enlaces. lo que significa que cada vez se requieren radiaciones de onda más larga para excitar un electrón π. En las aminas aromáticas. la ley de Beer .De acuerdo a la estructura química del compuesto estudiado ubique el o los grupos cromóforos señale las transiciones electrónicas respectivas. Los anillos aromáticos son por si mismos cromóforos . tanto menor es la diferencia energética entre el orbital π enlazante más alto y el antienlazante más bajo. Transiciones electrónicas características de algunos cromóforos. por lo que se encuentra fuera de este límite.el benceno posee seis electrones π deslocalizados y poseen un espectro UV con máximos de absorción. es posible la interacción entre los electrones no enlazantes del átomo de nitrógeno y los electrones π del anillo ( n -> π) . La transición π -> π* de un doble enlace C=C aislado posee un máximo de absorción de unos 190 nm. Logramos comprobar mediante los datos obtenidos con el espectrofotómetro . . donde nos dice que a mayor concentración menor transmitancia y que a menor concentración hay mayor transmitancia. Cuanto mayor es el número de dobles enlaces de un polieno. CUESTIONARIO: 1.Beer en el análisis cuantitativo.. dependiendo del número de dobles enlaces conjugados. los grupos amino y el anillo aromático . La espectroscopia visible-UV se utiliza con elevada sensibilidad en el intervalo de validez de la ley de Lambert.

Investigue sobre los principales errores en la lectura de absorbancia relacionados con la concentración (Error relativo ⁄ ) y error absoluto δ T y la curva de Crawford.logT = . La magnitud del error relativo en la concentración.2. explique y fundamente a qué se debe la formación de mesetas. Tomando la expresión de la ley de Beer: A = log I0/ I =  bC = . De acuerdo a la curva de Ringbown. Cualquier incertidumbre en la medida de la transmitancia produce una incertidumbre en la medida de la absorbancia y por lo tanto también en la medida de la concentración de la muestra. C / C. de la misma manera con soluciones diluidas se genera mesetas inferiores. Calcule la energía y el número de ondas de longitud de onda óptima obtenida. Para 520nm: Para 530nm: 3.4343 ln T (1) Derivando parcialmente con respecto a C y T manteniendo constantes b y : .0. inferior y superior. por la incertidumbre en la medida de la transmitancia puede deducirse de la ley de Beer y se conoce como error relativo analítico por unidad de error instrumental o error relativo analítico por unidad de error fotométrico y se designa por: (C / C) / T. Se fundamenta según la ley de Beer: a mayor concentración mayor absorbancia y menor transmitancia. en las soluciones concentradas el %T será menor y la absortancia hallada será mayor según la fórmula: A= 100-%T esto originará en la curva de Ringbown mesetas superiores. 4. Como se trabajó con soluciones diluidas y concentradas de azosulfamida.

4343 / T x 0. esto es.368 o 36.(T T/ T) / (T.4343  T/T =  b  C b.4343dT / -T. T. el error en la concentración crece exponencialmente.0. si Xi es el valor medido. (2) (3) Tomando incrementos finitos: .4343  T /T =  b  C (4) Dividiendo el miembro izquierdo de la ecuación (4) entre .4343 lnT) = 0 (6)  (1/(T. tomando transmitancia entre cero y uno. El valor mínimo se obtiene mediante la segunda derivada de la ley de Beer con respecto a C y T.0. cuando esta es igual a cero.73% para un T de 1%. lnT)2 = 0 = - T (LnT+1) = 0 lnT = -1 T = 0. Esta gráfica indica que el error depende en forma compleja de la medida de la transmitancia y para valores muy bajos o muy altos de transmitancia.4343 con un C/C mínimo de 2. Asi pues.4343lnT) b. derivando nuevamente la ecuación (5) e igualando a cero:  (( C/C) / T)/  C =  (0. El error absoluto: Se define como la diferencia que existe entre el valor real de la magnitud a medir y el obtenido en una medida.8 %T. lnT))/  T = (- T lnT). presentándose un mínimo error en la concentración para la transmitancia correspondiente a 0.368 que corresponde a una A = 0. =  ( bC) -0. se satisface la relación: | | . mientras que para valores intermedios el error permanece aproximadamente constante.4343 T / T logT (5) Entonces el error relativo en la concentración para una medida espectrofotométrica está dado por: A partir de esta última relación se construye la curva del error o curva de Crawford graficando el valor absoluto de ( C/C) / T vs. Xv el valor real y ΔX el error instrumental o sensibilidad del aparato de medida.logT   C/C = 0. (-0.log T y el derecho entre  bC se obtiene que el error relativo analítico es:  C/C = . Puesto que es una diferencia de valores de una misma magnitud. el error absoluto se expresa en las mismas unidades que la magnitud.

Disponible en: https://www. Manual de química orgánica. Química Orgánica Estructura y reactividad. Aramendía.pdf . Pág. Pág. Lacreu. Aramendia. 2004. 19° ed. Seyhan Ege. 325. Errores asociados a los métodos espectrofotométricos [internet] Colombia: Universidad Nacional de Colombia. Espectrofotometría UV–Visible [internet]. 2012. Dirección Nacional de innovación Académica. Sturm C. 4. 1986.cl/usuario/2775c7595e300ed228a801eb8341e457/mi_blog /r/Espectrofotometria__Uv___Visible2012.cl/usuario/2775c7595e300ed228a801eb8341e457/mi_blog/r/Espectrofot ometria__Uv___Visible2012.co/cursos/ciencias/2001184/lecciones/Cap09/05_03 _01. Tomo 2.virtual. [Consulta: 27/08/14] Disponible en: https://www. España : EDITORIAL REVERTÉ . 2012.unal.REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS: 1.ucursos. Wolfgang Walter. Perú. 1042 3. Química 2 química en acción. Aldabe. 2014. España : EDITORIAL REVERTÉ.pdf 5. Buenos Aires : EDICIONES COLIHUE. Hans Beyer.edu. 327. [Consulta: 27/08/14] Disponible en: http://www.htm 6. Juan Carlos Sturm. 41-42 2. Pág. 2000. Aplicaciones en el Análisis químico.ucursos.