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APOSTILA DE BIOLOGIA GERAL

Prof. Msc. Nayane Peixoto

2014

Faculdade Metropolitana de Anpolis


Engenharia Ambiental e Agronomia
Apostila de Biologia Geral Prof. Nayane Peixoto

Normas para aulas prticas de Biologia

1. Respeite os horrios de incio e trmino das aulas;


2. S poder assistir aulas em sua prpria turma;
3. imprescindvel o uso do atlas no laboratrio;
4. obrigatrio o uso de jalecos brancos, calas e sapato fechado;
5. de responsabilidade do aluno ter seu material pessoal, como lpis, roteiro de aula
prtica, etc.;
6. Verifique os materiais a serem utilizados nos primeiros 5 minutos aps recebimento;
7. Se quebrar alguma lmina ou lamnula, notifique o responsvel pelo laboratrio e o
professor;
8. Aps a utilizao deixar o microscpio limpo, desligado e completo;
9. Entregar o material de laboratrio ao responsvel pelo laboratrio, certificando de que
este est completo;
10. Cuidar da limpeza da bancada quando for de sua responsabilidade;
11. Quaisquer danos aos materiais do laboratrio de responsabilidade do aluno;
12. Em datas de prova, seguir orientaes passadas pelo professor na ocasio.

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BIOSSEGURANA
o conjunto de aes voltadas para preveno, minimizao ou eliminao de riscos
inerentes s atividades de pesquisa, produo, ensino, desenvolvimento tecnolgico e
prestao de servios, as quais possam comprometer a sade do homem, dos animais, do meio
ambiente ou a qualidade dos trabalhos desenvolvidos. Os agentes biolgicos so considerados
de acordo com a patogenicidade para o homem; a virulncia, o modo de transmisso; a
endemicidade; a existncia ou no de profilaxia e de teraputica eficaz.
Existem 4 grupos distintos:
GRUPO 1

no constituem risco para o meio ambiente;


Escherichia coli.
GRUPO 2

alto risco para os profissionais de laboratrio;


Schistossoma mansoni, Wuchereria bancrofti e Sporothrix schenckii.
GRUPO 3
enfermidades graves aos profissionais de laboratrio;
Mycobacterium tuberculosis, HIV e Trypanossoma cruzi.
GRUPO 4
srio risco para os profissionais de laboratrio e para a coletividade;
facilmente, podendo
causar a morte rapidamente;

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Instrues de Laboratrio, Reconhecimento e Manuseio do Microscpio
Ordem:
1- Arrume em ordem o material necessrio para cada experincia - isso evita confuso;
2- Use sempre o jaleco e/ou mscaras e/ou luvas quando necessrio;
3- Etiquete cuidadosamente todo o material;
4- Depois de usar lavar e/ou limpar, reponha o material no devido lugar.
Limpeza:
1- Depois de usar, lave a vidraria e enxgue vrias vezes em gua limpa;
2- No jogue o material usado na pia;
3- Deixe o seu lugar to limpo como gostaria de encontrar.
Precaues:
1- Sempre que ocorrer um acidente no trabalho, avise imediatamente ao professor;
2- Quando aquecer uma substncia em um tubo de ensaio, no aponte a extremidade aberta
para voc ou para outra pessoa;
3- Nunca prove uma droga ou uma soluo, a no ser com permisso do professor;
4- Se qualquer substncia cair na sua pele, lave-a imediatamente com gua corrente;
5- Leia os rtulos dos frascos antes de usar as substncias nele contidas;
6- Quando qualquer substncia cair no cho ou na mesa, lave o local imediatamente;
7- Ao lidar com vidraria, proceda com cuidado para evitar quebras e cortes perigosos;
8- Substncias inflamveis devem ser aquecidas em banho-maria ou em chapa eltrica;
9- Em caso de dvida sobre o uso de uma substncia, consulte o professor.
Atitude:
1- Use o tempo de laboratrio para realizar apenas o exerccio indicado para aula prtica;
2- Leia antes da aula as instrues para o exerccio do dia;
3- Siga todas as instrues cuidadosamente;
4- Registre os resultados em um caderno reservado para esse fim;
Relatrio
1- Faa os relatrios seguindo as instrues do seu professor;
2- A linguagem deve ser clara e sucinta;
3- Os desenhos e grficos devem ser traados com linhas firmes e a lpis;
4- Se forem usar cores para os desenhos, elas devem ser fiis ao visto em laboratrio (No
copiar desenhos de atlas ou colegas);
5- Para cada experincia poder ser feito um relatrio sucinto que dever constar de: Ttulo, Objetivo,
Introduo, Material utilizado, Procedimentos, Resultados, Discusso, Concluses.

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AULA 1
INTRODUO A MICROSCOPIA

Conceitos tericos:

- Microscpio ptico;
- Noes bsicas sobre Microtcnica Vegetal;
- Obteno de cortes a mo livre;
- Tipos de cortes utilizados em estudos anatmicos;
- Preparao microscpica;
- Montagem e fechamento de lmina;
- Desenho do material em estudo.

Objetivo: Identificar as partes componentes do microscpio ptico e treinar sua utilizao


correta, com isso realizar focagem e observao de objetos contidos em lminas de tecidos
vegetais.
1. Observar detalhadamente o microscpio ptico, identificando cada uma de suas partes
constituintes:

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2. Responda:
Quais estruturas so responsveis pelo aumento do objeto?
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
Em quantas vezes este aumento pode ocorrer?
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
Qual a funo do revlver?
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
Qual a funo do charriot?
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
3. Utilize a lmina disponvel. Leve ao microscpio e desenhe o observado. Faa
desenho de detalhes.

Aumento: __________

4. Descreva o que foi possvel observar ao microscpio ptico no procedimento anterior:


_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________

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AULA 2
MORFOLOGIA CELULAR CLULA ANIMAL, VEGETAL E BACTERIANA

Nesta aula sero apresentadas as diferenas entre clulas eucariontes e procariontes; e


clulas animal e vegetal.

Visualizao de clula bacteriana:


1. Com o auxlio de um swab, faa frices no dente;
2. Deposite o material colhido na lmina;
3. Pingue uma gota de azul de metileno, retire o excesso com o papel toalha;
4. Pingue uma gota de gua e cubra com uma lamnula;
5. Leve ao microscpio, pingue leo de imerso, observe no aumento de 100x10 e desenhe.

Visualizao de clula vegetal:


1. Com o auxlio de uma pina ou lmina retire uma poro da epiderme da cebola;
2. Coloque na lmina;
3. Pingue uma gota de azul de metileno, retire o excesso com o papel toalha;
4. Pingue uma gota de gua e cubra com uma lamnula;
5. Leve ao microscpio, observe e desenhe.

Visualizao de clula animal:


1. Com o auxlio de um swab, faa frices na mucosa oral;
2. Deposite o material colhido na lmina;
3. Pingue uma gota de azul de metileno, retire o excesso com o papel toalha;
4. Pingue uma gota de gua e cubra com uma lamnula;
5. Leve ao microscpio, observe e desenhe.

Resultados Esperados
Espera-se observar as diferentes morfologias celulares e observas as principais caractersticas
observveis ao microscpio ptico.

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AULA 3
EFEITO DE SUBSTNCIA LIPOSSOLVEL E TEMPERATURA SOBRE A
ESTRUTURA E PERMEABILIDADE DA MEMBRANA

A partir desse experimento possvel verificar o efeito de uma substncia lipossolvel e


da temperatura sobre a estrutura e a permeabilidade da membrana.

Materiais
Beterraba;
Papel toalha;
Recipientes mdios para colocar a beterraba cortada;
gua filtrada;
ter etlico;
Pipeta e pr-pipeta.

Procedimentos
1. Cortar 6 pedaos de beterraba com 4 cm de comprimento, sem cascas nas extremidades;
2. Lavar e secar os cortes em papel toalha para que possa extravasar todo o restante de
betacianina das clulas que foram danificadas;
3. Colocar dois pedaos em cada recipiente;
4. No primeiro adicionar 5 ml de gua em temperatura ambiente, no segundo 5 ml de ter
etlico, no terceiro 5 mL de gua quente e dois pedaos de beterraba para cada recipiente;
5. Aguardar por cinco minutos;
6. Retirar os cortes e transferir para outros tubos contendo 5 ml de gua pura.

Resultados esperados
A membrana plasmtica das clulas composta, principalmente, de lipdeos. Com a
adio de uma substncia lipossolvel e aumento da temperatura, a clula tem sua a
membrana solubilizada. No recipiente em que a substancia foi adicionada pode-se notar a
liberao da betacianina, responsvel pela colorao caracterstica da beterraba. E no outro,
em que no foi adicionada a soluo, a gua permanece igual.
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Altas temperaturas interferem tambm no funcionamento das membranas, alterando


sua permeabilidade, assim, a betacianina composto que da a colorao caracterstica da
beterraba liberada na gua deixando-o corado. Desse modo, o tubo submetido a
temperatura mais elevada tende a sofrer alterao, a colorao fica mais escura ao passo que
aumenta a temperatura de incubao.

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AULA 4
TRANSPORTE ATRAVS DA MEMBRANA OSMOSE

A osmose o nome dado ao movimento da gua entre meios com concentraes


diferentes de solutos, separados por uma membrana semipermevel. um processo fsico
importante na sobrevivncia das clulas. A gema de ovo uma clula macroscpica, portanto,
de fcil visualizao dos processos osmticos.
A aula de transporte atravs da membrana, objetiva compreender e observar
macroscopicamente o transporte passivo: osmose.

Materiais

3 gemas de ovos;

3 recipientes para colocar as solues;

Soro fisiolgico;

Sal;

gua

Procedimentos
1. Preparar as solues:
a) Hipotnica: A partir do soro fisiolgico, adicionar mais gua a soluo.
b) Isotnica: Soro fisiolgico puro.
c) Hipertnica: Adicionar mais sal ao soro fisiolgico.
2. Colocar as solues salinas (hipotnica, isotnica e hipertnica) em 3 recipientes,
previamente identificados;
3. Separar as gemas da clara (com cuidado para no romper a membrana das gemas);
4. Colocar cada uma das gemas em um recipiente contendo as diferentes concentraes
salinas.
5. Observar os resultados na gema do ovo.

Resultados esperados
A gua movimenta-se de um meio hipotnico (menos concentrado em soluto) para um
meio hipertnico (mais concentrado em soluto) com o objetivo de se atingir a mesma
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concentrao em ambos os meios (isotnicos) atravs de uma membrana semipermevel, ou
seja, uma membrana cujos poros permitem a passagem de molculas de gua, mas impedem a
passagem de outras molculas.
No primeiro recipiente, em que foi colocada a gema na soluo hipotnica, a clula
tende a ficar edemaciada (trgida). A gua que est no meio menos concentrado tende a
passar para o mais concentrado (clula), o que aumenta o volume da clula.
No segundo recipiente a clula se encontra em um meio isotnico, portanto no h
alterao no volume celular. J no terceiro recipiente, quando a clula colocada num meio
hipertnico em relao ao seu citoplasma, esta perde volume atravs de osmose (estado de
plasmlise).

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AULA 5
EXTRAO DE DNA

A extrao de DNA de material vegetal, como a cebola ou morango, um mtodo


bem simples compreender a estrutura de uma clula vegetal, entender a funo dos reagentes
utilizados para a extrao do material gentico e a sua relao com as estruturas da clula
(parede celular, membrana), alm de possibilitar aos alunos a visualizao do DNA da clula
vegetal macroscopicamente.

Materiais
Cebola ou morango;
Faca;
Macerador;
Bquer;
gua filtrada quente;
Sal de cozinha;
Detergente neutro;
Papel filtro;
lcool etlico gelado;

Procedimentos
1. Macerar o material vegetal at formar uma massa homognea;
2. Adicionar parte do material vegetal em um bquer;
3. Adicionar a SOLUO DE EXTRAO (20ml de detergente incolor, 1 colher de sopa
rasa de sal de cozinha, 80 ml de gua quente);
4. Misturar bem e aguarde 10 minutos;
5. Filtrar a soluo utilizando o coador de papel e outro bquer;
6. Deixar esfriar por 30 minutos;
7. Em um tubo de ensaio adicionar lcool etlico gelado;
8. Visualizar os resultados.

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Resultados esperados
A macerao responsvel pela quebra da parede celular das clulas vegetais.
A soluo de extrao composta por detergente neutro, sal de cozinha e gua quente
o principal agente da extrao do material gentico. O detergente atua na emulsificao dos
lipdeos presentes na membrana das clulas, atua na ruptura desta e expes todo o protoplasto
da clula na soluo, incluindo o DNA. O sal de cozinha (Cloreto de sdio) ao se dissociar na
presena de gua gera ons que se ligam na parte polar do DNA (grupamentos fosfato) e torna
a molcula menos polar, possibilitando a separao do material gentico da gua em que est
imerso. A gua quente auxilia na desnaturao de protenas presentes na clula alm de
aumentar a eficincia do detergente e acelerar o processo de extrao.
A filtrao separa o material vegetal restante e a soluo em que o DNA est imerso.
O lcool adicionado no final desidrata as molculas de DNA e proporciona a formao de
uma mistura heterognea que em soluo salina faz com que as molculas de DNA se
aglutinem e possibilita a visualizao do DNA macroscopicamente.

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AULA 6
DESNATURAO DE PROTENAS POR SOLVENTE ORGNICO

O experimento consiste em colocar um ovo em uma soluo de solvente orgnico para


verificar a desnaturao da protena albumina presente no ovo.

Materiais

1 ovo;

Placa de Petri;

lcool etlico;

Procedimentos
1. Coloque o lcool at a metade da placa;
2. Quebre o ovo dentro da placa;
3. Observe os resultados no ovo.

Resultados esperados
Uma protena possui quatro estruturas especificas: Primria, secundria, terciria e
quaternria.
o A estrutura primria da protena inclui todas as ligaes covalentes entre
aminocidos que compem uma protena e definida pela sequncia dos
aminocidos unidos por ligaes peptdicas e pelas ligaes dissulfetos.
o A estrutura secundria refere-se aos arranjos regulares e recorrentes no espao
de resduos de aminocidos adjacentes em uma cadeia polipeptdica. As mais
comuns so a alfa hlice e beta conformao.
o A estrutura terciria refere-se ao relacionamento espacial entre todos os
aminocidos em um polipeptdio. Nem sempre clara a fronteira entre a
estrutura secundria e terciria.
o A estrutura quaternria especifica a relao espacial dos polipeptdios, ou
subunidades, no interior de uma dada protena.
A desnaturao da protena ocorre quando se rompe sua estrutura terciria. Por isso,
possvel notar que a clara do ovo adquire um aspecto esbranquiado.
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AULA 7
SEPARAO DE PIGMENTOS VEGETAIS POR CROMATOGRAFIA EM PAPEL

Esta prtica tem como objetivo demonstrar os pigmentos encontrados em folhas de


Tradescantia sp, entendendo assim que a predominncia de um pigmento sobre o outro
determina a colorao.

Materiais
Folhas de Tradescantia sp;
Macerador;
Bquer;
Acetona;
Algodo;
Esptula;
Papel filtro.

Procedimentos
1. Macerar as folhas de Tradescantia sp no macerador, acrescentando acetona;
2. Filtrar o lquido obtido com algodo passando para o bquer;
3. Corte o papel filtro em tiras de tamanhos iguais;
4. Coloque no bquer as tiras de papel filtro, com apenas a ponta do papel mergulhado;
5. Espere alguns minutos at os pigmentos serem separados ao longo da tira de papel.

Resultados Esperados
Espera-se obter uma diferena de cores ao longo da tira de papel. Estes so os
pigmentos separados por diferena de peso molecular e diferena de polaridade.

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Referncias

NERES, A.C. Histologia. Apostila de aulas prticas, Universidade Estadual de Gois. 2012/2.

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