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TECNICO EN BROMATOLOGA
TRABAJO PRCTICO
DE
MICROBIOLOGA
GENERAL
TEMA:
ENTEROBACTERIAS
ALUMNA: AGUILAR YANINA
AO: 2.013
ENTEROBACTERIAS
Las enterobactericeas (Enterobacteriaceae) son una familia de bacterias
Gram negativas que contiene ms de 30 gneros y ms de 100 especies que
pueden tener morfologa de bacilos o cocos. Los miembros de esta familia
forman parte de la microbiota del intestino (llamados coliformes) y de
otros rganos del ser humano y de otras especies animales.
Clasificacin cientfica:
Dominio: Bacteria
Filo: Proteobacteria
Clase: Gammaproteobacteria
Orden:
Enterobacteriales
Familia: Enterobacteriaceae
CARACTERISTICAS GENERALES
Las enterobacterias habitan en:
MORFOLOGICOS Y TINCIONES
-Distribuidas en suelo
-Bacilos o cocobacilos cortos gram negativos
-Agua
-No esporulados
-Alimentos
-Mtiles (flagelos peritricos) o no.
-Flora normal del intestino de humanos y
-Capsulados o no
animales
-Pilis
BIOQUIMICAS
-Anaerobios facultativos
-Catalasa positiva (execepto Shigella dysenteriae tipo 1)
-Fermentan la glucosa
-Reducen nitratos a nitritos.
No son exigentes, son de fcil cultivo.
oxidadores de una amplia
Son fermentadores de carbohidratos en condiciones anaerbicas
gama de substratos en
con o sin la produccin de gas (en especial glucosa y lactosa), y
condiciones aerbicas.
Caracteristicas de Enterobacterias
Bacterias Fermentativas
Son capaces de llevar el proceso de hidrolisis, mediante la accin de enzimas capaces de hidrolizar la
materia polimrica (Protenas, Grasas Y Carbohidratos) en unidades menores (Monomeros). La
fermentacin de las bacterias lleva un proceso catablico de oxidacin incompleta, totalmente
anaerbico, siendo el producto final un compuesto orgnico.
Ecologa
La mayora de las especies pueden aislarse del intestino del hombre y de otros animales, de all su
nombre enterobacteria (del griego entron, intestino. Pueden ser flora o ser transitorias en la cavidad
bucal, en las regiones hmedas de la piel, en especial el perineo, las fosas nasales y las vas genitales
femeninas. Son abundantes en la naturaleza, en particular en medios hmedos y, por ser expulsadas
por las heces, funcionan como medidores epidemiolgicos de salubridad e higiene poblacional.
Patogenia
La presencia de Enterobacteriaceae dentro del organismo es anormal y determina la aparicin de
infecciones, cuya gravedad depende del punto de entrada. Introducidas por los alimentos, provocan
problemas intestinales al adherirse y atravesar la barrera de la mucosa gastrointestinal, manifestada
por diarreas y deshidratacin. Ciertas especies provocan patologas especficas:
La especie Salmonella typhi es responsable de la fiebre tifoidea.
La especie Shigella dysenteriae es el agente responsable de la disentera bacilar.
La especie Escherichia coli enterotxica es responsable de la gastroenteritis infantil.
La especie Yersinia pestis es responsable de la peste.
La especie Serratia marcescens usualmente causa infecciones nosocomiales como resultado de
tratamiento en un hospital.
Las Enterobacteriaceae incluyen a organismos que resultan patgenos para el ser humano como la
Escherichia coli o la Salmonella, especialmente importantes en la mortalidad infantil en pases en
desarrollo y patgenos para las plantas como Erwinia, en la mayor parte de los casos causando
infecciones oportunistas.
Todos los bacilos de Enterobacteriaceae son resistentes a antimicrobianos comunes, tales como la
penicilina, la meticilina y la clindamicina, entre otros.
Aislamiento e identificacin de Enterobacteriaceae
Frecuentemente son aislados a partir de materia fecal en agar conteniendo lactosa y un indicador de
pH. Las colonias que fermentan la lactosa producirn suficiente cido para causar el vire del
indicador.
Medio de cultivo
Un medio de cultivo consiste en un gel o una solucin que cuenta con los nutrientes necesarios para
permitir (bajo condiciones favorables de pH y temperatura) el crecimiento de virus, microorganismos,
clulas o incluso pequeas plantas. Segn qu se quiera hacer crecer, el medio requerir unas u otras
condiciones. Generalmente se presentan desecados en forma de polvo fino o granular antes de ser
preparados, al prepararse podemos encontrarlos en estado slido, semislido y lquido. El objetivo
ltimo del cultivo es variado: antibiograma, identificacin, multiplicacin...
Medios de cultivo: Agar TSI (triple azcar hierro), agar LIA (lisina, hierro, agar) agar UREA, agar
CITRATO DE SIMMONS, caldo MR (rojo metilo), caldo VP (voges proskauer), caldo FENIL
ALANINA-malonato, medio SIM (sulfuro, indol, movilidad), medio OF GLUCOSA (oxidacin,
fermetacin).
PRUEBAS BIOQUIMICAS
Las pruebas bioqumicas se basan en la determinacin de la presencia o ausencia de diferentes
enzimas codificadas por el material gentico del cromosoma bacteriano. Estas enzimas (catalasas,
coagulasas, decarboxilasas, deaminasas, ureasas, peroxidasas, etc, tambin evalan: la capacidad de
reducir ciertos iones (ferroso a frrico), la presencia o ausencia de flagelos (prueba de movilidad), la
produccin o no de hemolisinas, el requerimiento o no de algunos factores especiales (protenas
sricas), la produccin o no de algunas toxinas con capacidad virulenta (toxina diftrica, toxina
botulnica, etc).
ESCHERICHIA COLI
CARACTERISTICAS
Gram negativas
Temperatura ptima: 37 C
Tiempo de desarrollo: 24 hs
Es un habitante comn de los intestinos de todos los animales, incluyendo humanos.
Suprime el crecimiento de especies de bacterias dainas asi como tambien sintetizando cantidades
apreciables de vitaminas.
CULTIVO
Colonias tipicas: En agar eosina - azul de metileno y agar Endo presentan reflejos
metalicos.En agar sangre producen una hemolisis tipo B
En caldo: Da lugar a una turbidez uniforme
Cepas: Lisas: forman colonias incoloras, convexas y brillantes, pero al ser subcultivadas
repetidamente en medio artificial se convierten en rugosas que forman colonias opacas
Variantes encapsuladas: Producen colonias mucoides, si son incubadas a bajas
temperaturas, y si crecen en medios con una baja concentracion de nitrogeno y fosforo y una
elevada concentracion de hidratos de carbono.
MODO DE TRANMISION
La enfermedad se transmite por via feco - oral y el vehiculo mas frecuente de infeccion humana es la
carne de bovino.
PATOGENECIDAD
Afecta el tracto urinario; pueden dezplazarse del conducto intestinal al tracto urinario y a los riones
por via hematogena o lifatica, tambien puede ir por via ascendente desde la uretra y atraves de la
vejiga hasta alcansar los ureteres y el rion
La severidad depender de la cepa invasora, teniendo en cuenta los factores de virulencia, las
podemos clasificar en:
1.- E. Coli patgena (EPEC).
Diarrea en lactantes en meses de verano. Es muy poco frecuente en pases desarrollados, los factores
de virulencia, adhesina y posible enterotoxina parecida a la Shigella.
2.- E. Coli enteroinvasiva (EIEC).
Produce diarrea por colonizacin intestino delgado, pero invade las clulas de la mucosa intestinal.
Produce gastroenteritis similar al de la Shigella.
Factor de virulencia es el mismo en los 2 casos.
Se cree que es causada por un plsmido dentro de la bacteria por lo tanto la misma capacidad de
invasin. Tambin produce enterotoxina en baja proporcin.
Sntomas fiebre, diarrea sanguinolienta con gran cantidad de leucos (pus) igual que en la shigelosis.
3.- E. Coli enterotoxignica.
La sntesis de una enterotoxina principal factor de virulencia. Diarrea por colonizacin del intestino
delgado, desde all produce las enterotoxinas que pueden ser 1 o varias diferentes. Se ha visto que
puede sintetizar una termolbil igual que la del clera (toxina termoresistente).
Mecanismo de accin inhiben la reabsorcin del Na+ y del Cl- y activan la secreccin del Cl- y de
bicarbonato se deshidrata y elimina agua con electrolitos, produce diarrea acuosa.
4.- E. Coli enterohemorrgica.
Diarrea sanguinolienta sin leucos coloniza la mucosa intestinal y produce una poderosa enterotoxina.
Tiene el mismo mecanismo de accin que la Shigella, inhibe la sntesis proteica mueren las clulas, no
reabsorbe electrolitos afecta a los vasos sanguneos, colitis hemorrgica, no tiene respuesta inmune,
esta bacteria provoca otras enfermedades no intestinales como: sndrome hemoltico urmico y
prpura trombopnica.
El serotipo O157 H7 asociada al consumo de hamburguesas poco hechas en EE.UU.
Dependiendo de los factores de virulencia ser de un tipo u otro.
2.- Infecciones Extraintestinales.
Son oportunistas en pacientes inmunodeprimidos.
Puede producir meningitis neonatal, infecciones urinarias (esto es debido a los pilli), cistitis,
pielonefritis. Infecciones de heridas peritoneales, biliares, procesos generalizados (bacteriemia y
sepsis).
Diagnstico de laboratorio.
A partir de las heces, Tincin de Gram, bacilos Gram (-), aumento de leucos (cepa enteroinvasiva)
Cultivo en:
Mac Conkey seleccionamos las colonias lactosa (+), sembramos en el Kliger (Slant), medio de
color amarillo en la base y pico. Fermentan la lactosa.
EMB
DIAGNOSTICO
Medios selectivos:
Agar EMB: Se obtienen colonias planas de color purpura oscuro con brillo metalico.
Agar SS: Se obtienen colonias inhibidas; pueden desarrollarse como grandes colonias opacas
de color rosa o rojo
Agar XLD Se obtienen colonias inhibidas; planas,secas, de color amarillo de limon.Tiene una
zona amarilla opaca en el agar circundente.
Agar enterico Hektoen Produce colonias inhibidas; pueden resultar de color naranja brillante
a salmon rosado
Pruebas Bioquimicas
Propiedades bioquimiocas fermenta la lactosa y glucosa en 48 hrs con produccion de gas y acidos
organicos (fermentacion acido mixta).
SALMONELLA
La Salmonelosis tambin es ocasionada por toxinas que pueden estar presentes en algunas plantas,
hongos, peces o mariscos, o en alimentos enlatados de forma inadecuada.
Existen Gran cantidad de microorganismos, hay hasta 2.200 serotipos diferentes. Puede producir 2
tipos de infecciones:
S. paratyphi
S. typhi.
Generalmente afecta a los intestinos y ocasionalmente pasan al torrente sanguneo y constituye una
de las causas ms comunes de gastroenteritis, presentndose con mayor incidencia en los meses de
calor.
Esta enfermedad puede afectar a cualquier persona, aunque es ms comn en bebs y nios
pequeos.
Se adquiere por medio de alimentos o agua contaminada con materia fecal, as como por el contacto
con personas o animales enfermos. Entre los alimentos que se contaminan con Salmonella, estn: las
carnes crudas o mal cocidas, la leche no pasteurizada y los productos lcteos derivados de ella, los
huevos crudos o poco cocidos, la carne de pollo, la alfalfa y las fresas regadas con aguas negras.
Otras fuentes de contagio pueden ser las mascotas infectadas, como las tortugas, pollos, perros y
gatos.
CARACTERISTICAS
Gram negativos
Anaerobios facultativos
Con flagelos peritricos
No capsula
No esporulados
Son mviles
Producen sulfuro de hidrogeno
EPIDEMIOLOGIA
PATOGENECIDAD
Se empiezan a multiplicar en el intestino delgado entre las 24 y 72 horas del contagio y luego
al torrente sanguneo, de donde puede viajar a los ganglios linfticos, la vescula, el hgado, el
bazo y otras partes del cuerpo
Las mayora de las bacterias son destruidas por el sistema inmunolgico, las que siguen vivas
se siguen reproduciendo ocasionando daos.
SINTOMAS
Sangrado nasal
Fatiga severa
Lentitud, inactividad, sensacin de letargo
Debilidad
DIAGNOSTICO
Otros exmenes:
Coprocultivo
Examen de orina ELISA
Conteo de plaquetas
Estudio anticuerpo fluorescente
CULTIVO
Colonias de color negro azabache, brillo de color negro o con puntos colonias de color negro o
gris verdoso en bismuto sulfito agar (BSA), un medio selectivo solo para Salmonella Typhi
TRATAMIENTO
PROFILAXIS
SHIGELLAS
Las shigellas son los agentes etiolgicos de las disenteras bacilar o shigelosis.
CARACTERISTICAS
Forma de barra
Anaerobico facultativo
No moviles
No formadoras de esporas
Fermentador
Oxidasa negativo
GENERALIDADES
EPIDEMIOLOGIA
Prevalencia es la edad escolar. Los nios se infectan por agua o alimentos contaminados
Las infecciones con Shigella pueden contraerse por comer alimentos contaminados. Los
alimentos contaminados pueden tener un aspecto y olor normales. Los alimentos pueden
contaminarse por contacto con personas infectadas que los manipulan y se olvidan de lavarse
las manos con jabn despus de utilizar el bao. Las legumbres pueden contaminarse si se
cosechan de un campo en el que hay aguas servidas. Las moscas pueden procrear en heces
infectadas y luego contaminar los alimentos. Las infecciones con Shigella tambin pueden
Una endotoxina
La invasibidad
Una exotoxina
PATOGENIA
En ocasiones hay deseo de evacuacin intestinal sin bolo fecal solo con sensacin
dolorosa de obrar
DIAGNOSTICO
Solo la identificacin del agente etiolgico en las materias fecales de un paciente con
un cuadro clnico de sndrome disentrico febril, hace el diagnostico etiolgico.
Serologa
Con frecuencia las personas normales presentan aglutinacin contra varias especies de
Shigella. Sin embargo, la determinacin seriada de los ttulos de anticuerpos a veces revela el
aumento de anticuerpos especficos. Para el diagnstico de infecciones por Shigella no se
emplea la serologa.
BACTERIA ERWINIA
Clasificacin cientfica
Reino: Bacteria
Filo: Proteobacteria
Clase: Gammaproteobacteria
Orden: Enterobacteriales
Familia: Enterobacteriaceae
Gnero: Erwinia
CARACTERSTICAS DE LA ENFERMEDAD
HOSPEDEROS:
Patata, zanahoria, aguacate has, tomate, pera, manzana, esprragos y papaya. Puede vivir en
condiciones de escasez de aire (oxigeno).
SNTOMAS Y DAO:
Erwinia es un patgeno que puede ser problema tanto a nivel de campo como en post
cosecha. Bajo condiciones de campo, ocasiona pudriciones blandas y hmedas en races
reservantes, en algunos casos se puede sentir un olor ftido. Este sntoma no es producido
directamente por Erwinia, sino por bacterias secundarias.
En post cosecha, afecta a turiones de esprrago verde. En los turiones se observan los
sntomas a nivel de la punta, mostrando flacidez y pudricin hmeda. El sntoma de
pudricin hmeda, tambin puede ubicarse a nivel de el corte en la base del turin, este
sntoma se suelo dar cuando no se tiene cuidado con la limpieza de los turiones durante la
cosecha.
Ciclo de la enfermedad:
Erwinia es una bacteria muy comn en el suelo. Se caracteriza por tener un amplio rango de
hospedantes. Ocasiona sntomas a varios tipos de hortalizas, especialmente aquellas que
tengan tejidos suculentos. Como la gran mayora de bacterias, Erwinia es considerado un
patgeno dbil porque requiere heridas para poder penetrar. En condiciones de campo, se
encuentra comnmente asociada a pudriciones causadas por Fusarium y Phytophthora, en
estos casos es considerado un organismo secundario.
Una vez dentro del tejido vegetal secreta una serie de enzimas que degradan las diferentes
partes del tejido vegetal. Comienzan macerando las lminas medias (sustancia segmentantes
entre clula y clula) y luego la pared celular. Una vez degradada la lmina media y pared
celular, el contenido protoplasmtico de la clula es utilizado por la bacteria. Debido a esta
forma de ataque, los sntomas producidos son pudriciones blandas y hmedas.
AGENTE CAUSAL:
Es una bacteria Gram negativo en forma de bastn y con flagelos pertricos. El gnero
contiene algunas especies saprofitas y varias fitopatgenas. Es la nica fitobacteria
facultativa, lo que significa que se pueden multiplicar tanto en la presencia como en ausencia
de oxgeno. Es oxidasa negativa, catalasa positiva y fermentadora. La coloracin de la
mayora de las colonias es crema y algunas especies producen colonias amarillas.
El gnero Erwinia pertenece a la familia Enterobacteriaceae y causa las enfermedades
denominadas pudricin blanda, canela negra, tallo hueco de papa, tallo hueco del tomate,
tizn de fuego de la pera y de la manzana. E. carotovora subsp. atroseptica ocasiona la
pudricin blanda, necrosis vascular y marchitez en la papa.
TRANSMISIN:
o
Generalmente penetra por heridas (heladas, laboreo, insectos). A veces en suelos muy
hmedos a travs de las lenticelas de races sanas.
DESARROLLO:
o
Requiere altas humedades (superiores al 90%), para progresar y continuar con xito la
enfermedad, en sus etapas iniciales. Las altas temperaturas aceleran su multiplicacin
en los espacios intercelulares.
La bacteria es incapaz de penetrar las clulas vivas, pero produce sustancias que
terminan matndolas y desintegrndolas (licuefaccin de los tejidos); en estas
condiciones les sirven de alimento y en su presencia las bacterias se reproducen y
repiten este proceso.
Erwinia es una bacteria que se multiplica muy activamente a temperaturas altas
(mayores a 25C), Adicionalmente requiere condiciones de alta humedad en el suelo. En
algunos casos puede desarrollarse en condiciones anaerbicas.
RESULTADOS:
Los compuestos qumicos utilizados para controlar esta bacteria en las plantas se pueden
clasificar en tres grupos generales, de acuerdo con su actividad:
Evitar hacer daos mecnicos muy severos en las races reservantes durante las labores
culturales.
Controlar otros patgenos como Fusarium, Phytophthora, nemtodos o insectos.
Durante la Cosecha:
Serratia
S. marcescens
S. odorifera
S. plymuthica
S. proteamaculans
S. quinivorans
S. rubidaea
HABITAT
. Las especies de Serratia se encuentran en el suelo, en las plantas y en el agua. En la poblacin sana, a
diferencia de Enterobacter y Klebsiellas, slo se observan ocasionalmente en el tracto gastrointestinal
o en las vas areas superiores. Tambin pueden encontrarse colonizando la flora intestinal, tracto
respiratorio, tracto urinario, aparato cardiovascular, en ambientes y reservorios pobres en nutrientes
como el agua potable, caeras e insumos hospitalarios como jabones, antispticos, etc
Patognesis
Las bacteriemias por Serratia marcescen se presentan con mayor frecuencia en pacientes con
enfermedad de base como: diabetes, neoplasias, insuficiencia renal crnica.
DIAGNSTICO
El diagnstico es mediante el cultivo del agente patgeno de la sangre y cultivos de orina, secreciones
bronquiales o lavado broncoalveolar..
La identificacin de microorganismos en el laboratorio no es complicada. La diferenciacin con otras
especies de enterobacterias se efecta mediante la BunteReihe (mtodo de identificacin de la
actividad enzimtica mediante una serie de probetas marcadas con diferentes colores / reactivos,
como agar Kligler, agar citrato Simmonds, etc.).
Las Serratia presentan resistencia primaria a numerosas penicilinas y cefalosporinas.
CULTIVOS
Serratia, Al igual que otros Enterobacteriaceae, Crecen bien en medios ordinarios en condiciones
aerbicas y anaerbicas. Crecen bien en medios sintticos utilizando varios compuestos como nica
fuente de carbono. ptima de crecimiento de todas las cepas de Serratia Se ha observado a pH 9 y en
las temperaturas 20-37 C. Crecimiento de todas las cepas de Serratia es inhibida a pH <4,5 o> 45 C.
Algunas cepas pueden crecer bien a pH 5, mientras que otros en este mismo pH requieren de largos
perodos de incubacin para exhibir el crecimiento. Crecimiento variable se ha observado a los 5 C y
40 C.
Las colonias de Serratia han sido conocidas por su pigmento rojo. Sin embargo, la pigmentacin slo
est presente en slo un pequeo porcentaje de las culturas aisladas. la produccin de pigmentos es
muy variable entre las especies y depende de muchos factores como la especie tipo y tiempo de
incubacin. Colonias no pigmentadas se asemejan a otros miembros de Enterobacteriaceae.
La mayora de especies de Serratia son de origen humano (materia fecal). Cualquier cepa de Serratia
en el medio ambiente se producir en los humanos. Las especies de mayor preocupacin es S.
marcescens, Un patgeno humano responsable de un gran porcentaje de las infecciones
nosocomiales afectan a las vas urinarias y respiratorias, en la fibrosis qustica, y en quemaduras.
Culturas de S. marcescens Se han aislado del suelo. Desde un punto de vista de la seguridad sanitaria,
S. marcescens es de gran preocupacin debido a su creciente nmero de casos, la virulencia y su
creciente resistencia a los antibiticos.
KLEBSIELLA
CARACTERISTICAS
Inmviles
Gram-negativas,
anaerobias facultativas
Es un frecuente patgeno humano, los organismos bacteriales del gnero Klebsiella pueden liderar un
amplio rango de estados infecciosos, notablemente neumona. Entre ellos, cabe destacar los
siguientes:
MORFOLOGIA
Klebsiella pneumoniae constituye el patogeno mas importante para la especie humana de todos los
que se encuentran en el grupo klebsiella. K.pneumoniae es un microorganismo capsulado al de la
disenteria bacilar.Excretan una enterotoxina, labil al calor, de gran potencia.
CULTIVO
Los generos de klebsiella enterobacter y serratia se incluyen en un unico grupo.Puden ser
identificados mediante pruebas bioquimicas
PATOGENECIDAD
Se halla con frecuencia en los pulmones de pacientes afectos de procesos pulmonares cronicos
DIAGNOSTICO DE LABORATORIO
Tanto klebiella como enterobacter llvan a cabo una fermentacion tipo butilenglicol.
PROTEUS
CARACTERISTICAS
Bacilos moviles
Gram negativos
Se encuentran con frecuencia en el suelo, el las cloacas y en el estircol. Los proteus producen con
frecuencia infeccin del tracto urinario tanto como a nivel comunitario como hospitalario
interviniendo frecuentemente en otras infecciones graves.
HABITAD
Proteus es un gnero de bacterias ubicuos, residentes del tracto intestinal del hombre y
algunos animales.
CULTIVO
MORFOLOGIA
PATOGENIA
Hay tres especies que causan infecciones oportunistas en el hombre: P. vulgaris, P.mirabilis,
y P. pen.neri
Yersinia.
Yersinia
Clasificacin cientfica
Reino:
Bacteria
Filo:
Proteobacteria
Clase:
Gammaproteobacteria
Orden:
Enterobacteriales
Familia: Enterobacteriaceae
Gnero: Yersinia
VAN LOGHEM, 1945
Bacilo Gram (-), son cocobacilos, se caracterizan por una tincin bipolar, retienen ms los extremos
que el centro, anaerobios facultativos, son mtiles a 22C, pero no a 37C, por flagelos anfitricos, o
peritricos, forman pilis, y fimbrias. No forman cpsulas de gran espesor ni esporas, las especies
importantes:
Y. enterocoltica.
Y. pestis (peste).
Y. pseudotuberculosis.
La Yersinia enterocoltica y pestis, se parecen en que los 2 tienen como reservorio a los animales. Se
diferencian en que la enterocoltica (fecal - oral) y en la pestis es una pulga.
El germen yersinia se contagia a travs del consumo de alimentos o agua contaminados y por el
contacto con personas o animales infectados. La Y. enterocoltica se transmite por animales como el
cerdo (carne picada). Los animales son la principal fuente de yersinia. Los desechos fecales de
animales (sobre todo de los cerdos) pueden contaminar el agua, la leche y los alimentos, que se
convierten en una fuente de infeccin para las personas y otros animales. El germen ha sido
encontrado en intestinos de cerdo, leche cruda, lagos, arroyos, helados, leche de chocolate
pasteurizada en forma incorrecta, tofu, mariscos, animales silvestres y domsticos.
La yersiniosis es una enfermedad bacteriana que generalmente afecta el tracto intestinal. Es una
enfermedad relativamente rara y generalmente se presenta como un hecho individual aislado. Ha
habido informes de brotes epidmicos ocasionales debidos a la exposicin comn.