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CRUCES MONOHIBRIDOS Y DIHIBRIDOS

LABORATORIO No. 9

Por:
ATENCIA GNDARA PEDRO L.
VERONA TABOADA CARLOS A.

M.Cs.:
DAZ STO JUAN M.

Universidad de sucre
Facultad de educacin y ciencias
Programa de biologa
Sincelejo-sucre

INTRODUCCIN
El anlisis gentico de la transmisin de caracteres ligados al sexo conllev al
descubrimiento experimental del enlace de los genes con los cromosomas.
De esta manera, el propio concepto de sexo de los organismos y los procesos de
su transmisin obtuvieron una explicacin inesperada a la luz del estudio sobre el
papel de los cromosomas en los fenmenos hereditarios.
La investigacin sobre la citologa de las diferencias sexuales demostr que un
sexo contiene dos cromosomas XX idnticos y el otro, una pareja heteromorfia de
cromosomas XY.
En el anlisis del curso de la herencia de una multitud de caracteres de los
organismos, result que algunos de ellos son transmisibles.
Drosophila melanogaster tiene tres pares de autosomas (cromosomas 2, 3 y 4) y
un par de cromosomas sexuales (cromosomas X e Y). La determinacin del sexo
en este organismo es XX para las hembras y XY para los machos. Los
cromosomas 2 y 3 son metacntricos y el 4 es puntiforme.
El cromosoma X es telocntrico y el Y acrocntrico.
La heredabilidad de caractersticas se rige por leyes de segregacin formuladas
por MENDEL, las cuales consisten en la relacin dihibrida de caractersticas que
se heredan independientemente y se expresan segn sea el curso generacional.
En estas Estas leyes se afirma que:
Cuando se aparean lneas puras diferentes para una caracterstica la
descendencia presenta en forma uniforme el fenotipo del progenitor que
posee el fenotipo dominante, independientemente de si ste es macho o
hembra; es decir, de la direccin del apareamiento.

durante la formacin de los gametos la segregacin de los alelos de un par


es independiente de la segregacin de los alelos de otro par.

OBJETIVOS
General:
Aprender a realizar cruces dihibridos.
Especficos:
Observar el resultado de la uniformidad de las generaciones filiales en cada
uno de los cruces de esta sp. segn los conceptos de heredabilidad
establecidos.
Aplicacin de los conceptos estadsticos en la demostracin de una
hiptesis de trabajo y en el mecanismo de transmisin de caracteres
genticos.
Observar el resultado de una segregacin independiente frente a una
segregacin de genes ligados.

MATERIALES
1. Cepas mutantes y silvestres de Drosophila melanogaster.
2. Estereoscopio
3. Lupa
4. Vidrio de reloj
5. ter
6. Aguja de diseccin
7. Pinceles
8. Medios de cultivos frescos.
METODOLOGIA
1. escoger las cepas de la caracterstica que se desea estudiar, anestesiando
y durmiendo a las moscas, para seleccionar 3 machos y 3 hembras
vrgenes que se colocan en un medio de cultivo fresco (previamente
preparado) con las caractersticas del cruce.
2. observe diariamente y anote sus observaciones.
3. cuando aparezcan las larvas saque a los adultos a otro frasco, para evitar
que se confundan con los descendientes.
4. Una vez obtenida la F1 se analizan y se clasifican segn el sexo y
caractersticas estudiadas.
5. Se realiza un nuevo cruzamiento F2 con hembras vrgenes siguiendo, los
procedimiento estipulado en los puntos antes mencionados.
6. Despus de dos das de haber nacido la progenie F2, cuente los individuos
y clasifquelos segn el sexo y su fenotipo.

RESULTADOS
El fenotipo normal de la Drosophila melanogaster corresponde a cuerpo de color
marrn claro, ojos grandes y rojos, y alas que sobrepasan la longitud del abdomen
y son transparentes y ligeramente puntiagudas. Las nerviaciones de las alas estn
compuestas por 5 venas longitudinales y dos transversales. En los machos, la
parte distal dorsal del abdomen es oscura y en la parte ventral se encuentra el
pene rodeado por las placas genitales (que le sirven para sujetarse a la hembra),
son ms pequeos que las hembras y en el tarso del primer par de patas, poseen
una estructura compuesta de unos pelos gruesos y cortos, llamada peine sexual
que permite distinguir sexos.
FENOTIPOS MUTANTES INCLUIDOS EN LAS PRCTICAS
EBONY (e)

Ebony es un locus situado en la posicin


70,7 del cromosoma 3.

Los mutantes ebony poseen un cuerpo de


color negro brillante.

White es un locus situado en la posicin 1,5


del cromosoma X, en el segmento
diferencial.

El rasgo caracterstico de los mutantes


White, al que deben su nombre es el color
blanco puro de los ojos y los ocelos.

WHITE (W)

Cruce dihibrido de dos lneas mutantes de Drosophila melanogaster.

Machos: ebony
Hembras: White

Fenotipo de los patntales


Hembras White y machos ebony
Numero de individuos de la F1 y su fenotipo
N= 125 individuos
Hembras ebony (ojos rojos cuerpo negro): 49
Machos White (ojos blancos cuerpo amarillo): 76
Numero de individuos normales de la F2
Se obtuvo en la F2 un total de 83 individuos distribuidos en las siguientes clases
fenotpicas: 37 moscas de ojos rojos y cuerpo negro, 13 moscas de ojos rojos y
cuerpo amarillo, 22 moscas de ojos blancos y cuerpo negro y 11 moscas de ojos
blancos y cuerpo amarillo.

PRUEBA DE BONDAD DE AJUSTE O DE HOMOGENEIDAD: X2


Hiptesis nula
Ho: los resultados obtenidos tienen una proporcin de 9:3:3:1 y segregan segn
esta proporcin.
Hiptesis alternativa
Hi: los resultados obtenidos no tienen una proporcin de 9:3:3:1 y segregan al
azar.
Clculo de proporciones esperadas de la F2.
Para calcular las proporciones fenotpicas esperadas en la F2; nos basamos en
los valores y fenotipos obtenidos experimentalmente; por ello, se concluye que las
caractersticas dominantes son ojo rojo (AA) y cuerpo negro (BB) y los caracteres
ojo blanco (aa) y cuerpo amarillo (bb) son recesivos; por lo tanto el cruce es el
siguiente:
F2:

AaBb

AaBb

9/16 van a ser individuos A_B_ es decir de ojos rojos y cuerpo negro
3/16 van a ser individuos A_bb es decir de ojos rojos y cuerpo amarillo
3/16 van a ser individuos aaB_ es decir de ojos blancos y cuerpo negro
1/16 van a ser individuos aabb es decir de ojos blancos y cuerpo amarillo
De esta manera determinamos el nmero de individuos que se esperara para
cada clase fenotpica as:
Moscas de ojos rojos y cuerpo negro
Moscas de ojos rojos y cuerpo amarillo
Moscas de ojos blancos y cuerpo negro
Moscas de ojos blancos y cuerpo amarillo

Tablas 1: tabla de chi cuadrado.


(O-E)

(O-E)2

(O-E)2/E

37

-9,8

96,04

2,05

13

-2,72

7,4

0,57

22

6,28

39,43

2,51

11

6,53

42,64

9,54

------

------

14.67

fenotipos

Fenotipos

Valores
observados
(O)

Ojos rojos
cuerpo negro
Ojos rojos
cuerpo
amarillo
Ojos blancos
cuerpo negro
Ojos blancos
cuerpo blanco

3
1
Totales

Valores
esperados
(E)

83

83

El valor de chi cuadrado corresponde a 14,67


Se rechaza Ho si:
X2 X2 ( gl )Calculada valor de la tabla
Se acepta Ho si:
X2 < X2 ( gl )Calculada valor de la tabla.
Los grados de libertad para este caso corresponde a 3; ubicando el valor de chi
cuadrado obtenido en nuestro ejercicio para cinco de libertad en una tabla de
distribucin de chi cuadrado; tenemos que este valor no se encuentra entre el 20 y
30 por ciento de probabilidad de ocurrencia; en otras palabras podemos decir que
se rechaza la hiptesis nula.

ANLISIS DE RESULTADOS
Gregory Mendel report en 1865 los mtodos bsicos de la trasmisin de los
caracteres hereditarios, en sus investigaciones utiliz chicharos permitiendo as
determinar las proporciones tpicas para los cruces. En el presente proyecto se
utiliz moscas Drosophila melanogaster de las lneas Ebony, y White para los
cruces Dihbridos que permiten la comprensin de la gentica mendeliana, la cual
postula dos leyes principales: La ley de la segregacin independiente de los
caracteres y la ley de la trasmisin independiente de los caracteres.
En Drosophila la mutacin Ebony produce el color de cuerpo negro brillante.
Esta mutacin es recesiva (ee) frente a su alelo dominante (EE) que produce
individuos de fenotipo silvestre.
Se han analizado cruzamientos de hembra White por machos Ebony y otros
recprocos. Se aislaron hembras vrgenes, siguiendo el procedimiento descrito en
la prctica anterior.
La F1 produjo individuos con las caractersticas estudiadas en el ensayo no
habiendo mas variacin fenotpica que la concerniente al sexo, puesto que el
resultado de este primer cruce fue el de hembras Ebony, ojos rojos cuerpo negro
y machos ojos blancos cuerpo amarillo.
La F2 arrojo una alta tasa de variabilidad fenotpica con expresin de caracteres
como: moscas de ojos rojos y cuerpo negro, moscas de ojos rojos y cuerpo
amarillo, moscas de ojos blancos y cuerpo negro y moscas de ojos blancos y
cuerpo amarillo, estas caractersticas fenotpicas constan de una proceso de
segregacin el cuales segn la prueba chi cuadrado no se ajustan a la
probabilidad planteada (9:3:3:1) pero no obstante sabemos que esta probabilidad
es la que rige la herencia de carcter en cruces dihibridos y monohibridos.
La prueba de 2 (chi o gi cuadrado) se utiliza para establecer en qu medida los
resultados obtenidos en una experiencia se ajustan a los valores esperados segn
una hiptesis establecida previamente. Con esta prueba se puede determinar si
las discrepancias existentes entre proporciones fenotpicas observadas y
esperadas, para un determinado patrn de herencia, son estadsticamente
significativas o son tan pequeas que se pueden atribuir al azar. Adems, toma en
consideracin el tamao de la muestra y el nmero de variables. El valor de chi
cuadrado que se obtuvo con los datos experimentales fue de 14.67 el cual se
comparo con un valor terico, tabular de tres grados de libertad y por existir
diferencias significativas entre los valores esperados y observados, se rechaza la
hiptesis nula, lo que quiere decir que los valores producto de la F2 no se ajusta
ala proporcin mendeliana.

CONCLUSIONES
A travs de este proyecto se pudo comprobar las leyes postuladas por
Mendel y por la bibliografa saber que en condiciones reales heredabilidad
de cada uno de los caracteres estudiados se expresan segn esta
proporcin.
El cruce dihbrido revel que dos genes independientes proporcionan una
progenie (F1)heterocigota para las dos caractersticas tomadas en cuenta.
La F2 del cruce dihbrido revel diferentes combinaciones genotpicas
arrojando proporciones fenotpicas que se ajustan a la proporcin (9:3:3:1).

CUESTIONARIO
1. Que es un retrocruzamiento?
Recibe el nombre de retrocruzamiento el cruzamiento entre un individuo y
uno de sus parentales. Cuando el parental utilizado es el homocigtico
recesivo, se denomina cruzamiento prueba, ya que con este mtodo se
puede averiguar si un individuo es homocigtico dominante o
heterocigtico.
Si todos los descendientes del cruzamiento prueba son del fenotipo
dominante; el individuo problema debe ser, necesariamente, homocigtico.
Por el contrario, si la mitad de la descendencia presenta el fenotipo
dominante y la otra mitad es recesiva, el individuo problema es
heterocigtico.
2. Explique como realizara un retocruzamiento en el cruzamiento que realiz
Cruzando moscas de la primera generacin filial con parentales
homocigotos recesivos, cruzar el individuo del que no sabemos si es
homocigtico o heterocigtico para el carcter dominante, con un individuo
homocigtico para el carcter recesivo. Si todos los descendientes de ese
cruzamiento presentan el fenotipo dominante, es que el padre era
homocigtico para el carcter dominante; si la mitad presentan el carcter
recesivo, es que el padre era hbrido.
El retrocruzamiento es muy importante, pues nos permite descubrir los
individuos puros, dominantes para una caracterstica.
3. Describa y localice dos mutaciones autosmicas diferentes en Drosophila
melanogaster
Lista de mutaciones para D. melanogaster, en cada uno de sus
cromosomas.

BIBLIOGRAFAS CITADA

Garner, E. J., Simmons, M. J., &Snustad, D. P. (2003). Principios


degentica. Mexico: Limusa Wiley.
Klug, S.W. CONCEPTOS DEGENETICA. Pearson. Prentice Hall.Octava
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OBrien, M. 2009. Drosophila Genetics Lab Version 6.27 . En
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Plomin, E.G. GENETICA DE LACONDUCTA. Editorial Ariel. Primeraedicin.
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Puerta, M.J. GENETICAFUNDAMENTOS YPERSPECTIVAS. McGrawHillInteramericana. Segunda edicin.Madrid. 1999. pp. 74, 75, 702-717,746749, 756, 757.