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ESCUELA POLITÉCNICA NACIONAL

INGENIERIA QUÍMICA
LABORATORIO DE ANÁLISIS INSTRUMENTAL I

PRÁCTICA No. 5
“ANÁLISIS DE SUSTANCIAS COLOREADAS POR ESPECTROFOTOMETRÍA”
Rojo 40

Realizado por:
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Evelyn Alquinga

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Kerly Carrión

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Michelle Molina

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Eduardo Rueda

Grupo: 3

Fecha de realización: Martes, 11 de noviembre del 2014
Fecha de entrega: Martes, 18 de noviembre del 2014

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También se determinó que en 0.3 6.435mg de Rojo 40 lo que equivale a un porcentaje de 0. C. Datos experimentales obtenidos de la solución madre en la práctica.093 y con ayuda de la ecuación obtenida de la curva de calibración se calculó la concentración de la solución cuyo valor fue de 1. además con la ecuación del Gráfico2 se obtuvo el coeficiente de absortividad molar el cual fue de 40238 [M -1cm-1]. debido a que se realizó una dilución.96%.5 0. gracias a la interacción que tienen las mismas para absorber o transmitir radiaciones electromagnéticas.029·10-6 0. 1. y su valor fue de 28.007·10-6 0.7 mg/L. se calculó la concentración de la solución de Mora Ya.0 5.311·10-6 mol/L.401 2 10. Sustancia Peso molecular (g/mol) Rojo 40 496. Tablas de datos y diagramas Tabla1. es así que se puede medir la cantidad de: radiación visible – ultravioleta absorbida por la solución a una longitud dada.007·10-5 0. 2009..ANÁLISIS DE SUSTANCIAS COLOREADAS POR ESPECTROFOTOMETRÍA RESUMEN EJECUTIVO La presente práctica tuvo como objetivo el análisis de sustancias coloreadas por medio del método de espectrofotometría.420 (Barros. la misma que contenía Rojo 40 también.148mg/L y la molaridad fue igual a 2.5 0. Datos experimentales obtenidos de cada disolución en la práctica. la cual fue de 0.5 1.15g de jugo soluble Mora Ya existe 1. Solución Concentración (mg/L) Rojo 40 10 (nm) 505 Tabla2.0 2.0 1. Gracias a la curva de calibración se concluyó que la relación entre la absorbancia y concentración de una solución descrita según la ley de Lambert y Beer es directamente proporcional. Se realizaron cinco diluciones de una solución madre de Rojo 40 y se midió la absorbancia de cada una para poder formar una curva de calibración. Posteriormente. Dilución Alícuotas (mL) para la dilución Concentración (mg/L) Molaridad (mol/L) Absorbancia 1 25. se midió la absorbancia de una solución de Mora Ya.043·10-7 0.014·10-6 0.0 4. Finalmente.0 2. que se presentan en forma de ondas.168 3 5. El principio de esta técnica es el análisis espectral cualitativo y semicuantitativo de sustancias coloreadas. Datos bibliográficos del Rojo 40.0 1.045 5 1. “Los aditivos en la alimentación de los españoles y la legislación que regula su autorización y uso”) Tabla3.086 4 2.031 2 .

Absorbancia de la solución diluida de Mora Ya. Longitud de onda máxima de la solución madre de Rojo 40. Resultado de la concentración de la solución diluida de Mora Ya.960 40238 Solución madre Diluciones Celdas Espectrofotómetro UV .15g Solvente Agua 50.311·10-6 Tabla7.093 Tabla6. Esquema de la práctica de espectrofotometría Figura2. obtenida en la práctica 3 .435 0.Tabla4.700 1. Resultados obtenidos de Rojo 40 Solución Concentración (mg/L) Masa de Rojo 40 (mg) %wRojo 40 ε (M-1cm-1) Mora Ya 28.148 2. Cantidades de solvente y soluto usadas para la preparación de la solución de Mora Ya. Soluto Mora Ya 0. Disolución Absorbancia Mora Ya 0.Visible Figura1.00mL Tabla5. Disolución Concentración (mg/L) Molaridad (mol/L) Mora Ya 1.

168 0. Concentración 0.05 0.031 0 0 0. Molaridad 4 0.086 0.5 4 4.00001 0.4 0.9987 0.5 5 5.081x R² = 0.35 y = 40238x R² = 0.5 3 3.9987 0.045 0. Molaridad 0.000006 0.000004 0.25 0.45 0. M 0. [C (mg/L)] 0.2 0. Absorbancia vs.3 0.15 Tendencia de la curva 0.3 0.168 Tendencia de la curva 0.5 1 1.5 2 2.401 0.15 0.2 A vs.000002 0.000008 Molaridad (mol/L) Gráfico2.086 0. Concentración Absorbancia vs.000012 .05 0.031 0 0 0.045 0.401 Absorbancia 0.Absorbancia vs.35 y = 0.4 0.45 Absorbancia 0.1 0. Absorbancia vs.25 A vs.5 Concentración (mg/L) Gráfico1.1 0.

093) = ¿? Se obtuvo la ecuación de la recta: Donde: y = absorbancia x = concentración (mg/L) Cálculo de la molaridad de Rojo 40 en la solución diluida de Mora Ya: Se conoce el espectro de absorción de la solución de Rojo 40 (Gráfico2) - Absorción = 0.2.093 - Molaridad (M0.093 - Concentración (C0. Cálculos Preparaciones de las diluciones a partir de solución madre: Ejemplo de cálculo: - Primera dilución: Volumen requerido para obtener un C1 = 5 mg/L Cálculo de la concentración de Rojo 40 en la solución diluida de Mora Ya: Se conoce el espectro de absorción de la solución de Rojo 40 (Gráfico1) - Absorción = 0.093) =¿? Se obtuvo la ecuación de la recta: Donde: y = absorbancia x = concentración (mol/L) 5 .

Cálculo de la cantidad de Rojo 40 en 0.15g de Mora Ya en una matraz de 50mL Cálculo del valor de la absortividad molar: Se sabe que: Dónde: A= absorbancia ε = absortividad molar L = longitud que atraviesa la luz a través de la muestra (L = 1cm) C = concentración (mol/L=M) Se obtuvo en el Gráfico2 la ecuación de la recta: Se compara con la ecuación general de la recta: Donde: m = pendiente de la recta y = absorbancia x = concentración (mol/L = [M]) b = corte en el eje de las ordenadas 6 | .Cálculo de la concentración de la solución a analizar de Mora ya: - Se diluyeron 2mL de la solución a analizar en un matraz de 50 mL.15g de Mora Ya: | Cálculo del porcentaje (% w) de rojo 40 en la solución de Mora ya: Sabiendo que se diluyeron 0.

pero que no 7 .Entonces: Se igualan las Ecuaciones 1 y 2 Si b=0 Sea: Pero: Si se igualan las Ecuaciones 4 y 5: Se reemplaza la Ecuación 3 en la Ecuación 6 y se tiene que: Si se divide para L a cada lado de la Ecuación 7: Se sabe que L=1cm 3. λ máxima = 505 nm (Tabla1). de la solución madre de Rojo 40. lo que permite observar el cumplimiento de la ley de Lambert y Beer. valor en el que la sensibilidad es máxima. la absorbancia también aumenta. el cual es propio de cada sustancia. de acuerdo a los datos obtenidos en la Tabla3. Se puede concluir que la absorbancia es directamente proporcional a la concentración. que a medida que aumenta la concentración. El análisis se lo realizó a esa longitud de onda definida. valor que muestra un alto grado de confianza. En estos gráficos el R2 de cada uno fue de 0. a una longitud de onda definida de acuerdo a los resultados en la Tabla3. lo que permitió encontrar la longitud máxima de absorción del mismo. debido a que la absorción de una sustancia también depende de la intensidad de la longitud de onda que incida sobre la muestra. Resultados y discusión Se obtuvo el espectro de absorción.9987. En el que: Con los datos de absorbancia obtenidos se graficaron las curvas de calibración (Gráfico1 y Gráfico2). Se determinó la absorbancia de las diluciones preparadas y se pudo observar.

Se recomienda calibrar el espectrofotómetro. se debe manejar con cuidado. 2009. y trabajar con 4 a 5 diluciones. ajustar con el blanco a 0% de absorbancia. google. Se obtuvo que en 0. C. solución concentrada. & Roani. Bibliografía - Barros.equivale a 1.15g de Mora Ya existen 1. C.. Se recomienda preparar las soluciones lo más exactas posibles. de tal manera que no se toque la parte por donde va a incidir el haz de luz.7mg/L.311·10-6 (mol/L) (Tabla6). Recomendaciones Se recomienda. la solución de Mora Ya tiene una gran cantidad de Rojo 40. errores pequeños. no utilizar detergente. este coeficiente es una propiedad característica de la solución y representa la cantidad de luz absorbida por la dilución.com.ec/books?id=JuLQjrDgQAoC&pg=PA208&dq=rojo+ allura&hl=es-419&sa=X&ei=vjloVIijFIWbgwSQk4OgDg&ved=0CB0Q6AEwAA#v=onepage&q=r ojo%20allura&f=false (Noviembre. debido errores cometidos en la preparación de las diluciones.. se la seque y limpie correctamente. En el caso de que las celdas sean desechables enjuagar con abundante agua destilada. “Diccionario de restauración y diagnóstico”. pero a pesar de ello se obtuvo un modelo confiable y casi exacto.148mg/L y molaridad de 2.96% de contenido del mismo. http://books.093 de la solución diluida de Mora Ya. Se recomienda trabajar con soluciones diluidas y que la absorbancia no sea mayor que 2. antes de cada lectura. para obtener un buena curva de calibración. 4. Y finalmente con la obtención de la pendiente del Gráfico2 se logró determinar el valor del coeficiente de absortividad molar el cual fue de 40238 [M-1cm-1]. o burbujas). Tomar en cuenta que el blanco que contiene todos los componentes del sistema excepto el que se desea medir. valor con el que se encontró la concentración de esta dilución 1. que vayan a influir en los resultados. 2003. que antes de introducir la celda al espectrofotómetro. lo mismo que representa un porcentaje de 0.ec/books?id=N6ro8FkEqtIC&pg=PA85&dq=tecnica+de+espectrofotometria&hl=es-419 8 .google. 5. en este caso en la de Rojo 40. que comparado con las diluciones preparadas a partir de la mezcla patrón. ya sea en el momento de tomar el valor exacto de la mezcla patrón para la dilución o por no aforar correctamente. “Los aditivos en la alimentación de los españoles y la legislación que regula su autorización y uso”.com. Se obtuvo una absorbancia de 0. lo que permitió encontrar la concentración inicial de la solución de Mora Ya (solución analizada) cuyo valor fue de 28. lo que va a permitir eliminar el registro de absorbancia que pueden presentar los demás componentes que forman parte de la muestra a analizar o el solvente utilizado. - Giannini.435mg de Rojo 40. 2014). Hay que cerciorase que la muestra colocada en la celda no contenga interferencias (como pelusas. http://books. R.

2014). “Química analítica moderna”.com. 2014).ec/books?id= ZF9jSBZCghAC&pg=PA143&dq=coeficiente+de+absortividad+molar&hl=es-419&sa=X&ei=Hb9q VPqGN8iUNoOZgZgO&ved=0CBsQ6AEwAA#v=onepage&q=coeficiente%20de%20absortividad %20molar&f=false (Noviembre. F.com. 1980.ec/books?id=8SAtkthrFEkC&pg=PR27&dq=curva+de+calibracion+espectrofotometria &hl=es-419&sa=X&ei=L61qVModwpY2npGEyAM&ved=0CBsQ6AEwAA#v=onepage&q=curva %20de%20calibracion%20espectrofotometria&f=false (Noviembre. http://books. - Quesada.. S. “Manual de experimentos de laboratorio para Bioquímica”. 2014). google. 9 . http://books.google. 2007. W. - Pickering..&sa=X&ei=jVFqVPmCO8f9yQSn-4IY&ved=0CC4Q6AEwBA#v=onepage&q=tecnica%20de%20e spectrofotometria&f=false (Noviembre.