LABORATORIO DE BIOPROCESOS

ING. AUGUSTO CASTILLO

EXAMEN DE LABORATORIO BIOPROCESOS DE SEGUNDA UNIDAD

1. Cmo poner en marcha el quimiostato?
Primero se inocula los m.o. en un cultivo por lote, luego se le deja
que se desarrolle hasta los 2/3 de la fase logartmica, que es el
final del cultivo por lote. Luego se le inicia la alimentacin y la
extraccin de producto, mediante el efluyente, que es el inicio del
cultivo continuo. Luego se tiene uin tiempo derterminado para
alcanzar un E.E.
X

2.

2/3

E.E

t
Dibuje

detalladamente

un

quimiostato.

3. Cul es el objetivo de perturbar el E.E. por alta concentracin de

sacarosa y aireacin?
Es demostrar que el estado estacionario es estable.
Sacar al sistema de su e.e. por un periodo transitorio, hasta que
vuelva a su estado original siguiendo una trayectoria oscilante,
alrededor de la posicin estacionaria.
El cultivo demandar mas sustrato y la concentracin de este tendr
a disminuir, hasta alcanzar nueva un e.e.
Un estado estacionario es inestable si no resiste la perturbacin y si
no llega a su estado e.e inicial.
Poner alta concentracin de sacarosa a un bajo X, esto llega a e.e con
un X mas alto.

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A mas aireacin mas clulas dependiendo de la afinidad de m.o. al

oxgeno.

4. Explique el mtodo detalladamente el mtodo de determinacin de

protenas.
Agregar a un tubo de ensayo 0.5 ml de muestra de los viales.
Aadir 5 ml de reactivo de Bradford dejar reacionar por 5 minutos.
Leer la absorbancia a 595nm, en base a un blanco de 0.5ml de agua y
5ml de reactivo de Bradford.
Hallar la concentracin a travs de una curva de calibrado, con las
muestras conocidas y con la misma preparacin de los anteriores.
5. Qu criterios para determinar los flujos?
Para cultivo continuo se considera que :
0.1Dcri< D<0.8 Dcrit
Dcri = max del cultivo por lote(0.452 h-1)
0.0452 h-1 < D<0.3616 h-1..para V= 680 ml
- se calcula el tiempo de residencia :

= 1/D,

=D

- tiempo en que se logra el estado estacionario t= 3x

Estimar el gasto e.e (G= Fx3x

NOTA: tomas el cuadro que el profe te da para

diferentes D
6. Cmo determinar los vvm en tu experimento?
Yo2 = 1 g cel/gO2
E= 0.1 (eficiencia de absorcin )

= 0.452 h-1
X= 3 g/l
Demanda de O2= Na = x/ Yo2

Na= 1.356g/l h

Velocidad de aireacin especfica es:

2

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Vvm= 2.035x10-4 (NaT/ E) , para T= 30C

7. Explique el mtodo de lavado.

X= 0 , = D=DCrit.
Cortar el flujo de alimentacin despus de haber transcurrido el
tiempo de fermentacin, en donde se alcanza una reduccin de x y
u= umx =0.452 h-1
-

utilizando la ecuacin del balance general de clulas: dx/dt= Dx + ux

ln(x/x0) = (u-D)t
8. Cmo y para sirve 3 , Dcri y max ?
3 =T, es el tiempo donde se alcanza el estado estacionario; hay un

95% de seguridad que se alcanse el estado estacionario en el tiempo

T.
Dcri = la velocidad de dilucin crtica; la concentracin celular se hace cero
D es mayor que el Dcri ( lavado del cultivo)
Dcri= max (So/(ks+So)
max = mxima velocidad de crecimiento del microorganismo.