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ESTUDIO DE BACTERIAS EN Eucalyptus globulus Labill.

Baltazar Castaeda, Hernan1


Herrera Donayre, Mara Cristina2
Facultad de Ciencias Forestales y del Ambiente
RESUMEN
La investigacin tuvo como finalidad de describir las caractersticas macroscpica y microscpica, a si como el desarrollo
de la colonia en laboratorio del Agrobacterium tumefaciens, como patgeno causante de las agallas en plantones y
arboles de Eucalyptus globulus en el Valle del Mantaro. Se muestrearon plantones y arboles situado en los bosques de
Uas, Hualhuas, Santa Rosa de Ocopa y Vivero Forestal E.E. El Mantaro, Jauja respectivamente. Los resultados
muestras caractersticas que es gram negativa a la tincin Gram, de forma de cocos y bacilos cortos. El desarrollo en
medio de cultivo PDA, forman colonias de color blanco cremoso a anaranjado cristalino, de forma lobulada. El tejido
leoso tumorado del Eucalyptus globulus Labill por el A. tumefaciens, muestra clulas radiales tpicamente uniseriada
se modifican a multiseriada por efecto de la hiperplasia provocada por la tumoracin.
Palabras claves: Agrobacterium tumefaciens, Eucalyptus globulus, agalla de coronas

ABSTRACT
The research was aimed to describe the macroscopic and microscopic characteristics, whether the development of
laboratory colony of Agrobacterium tumefaciens, a pathogen causing galls in plants and trees of Eucalyptus globulus in
the Mantaro Valley. Seedlings and trees were sampled forests located in Uas, Hualhuas, Santa Rosa de Ocopa EE
Nursery The Mantaro, Jauja respectively. The results show features which is gram negative Gram stain, so short of cocci
and rods. The development in PDA medium, colonies are creamy white to orange crystalline, lobed. The woody tissue
tumors by Eucalyptus globulus Labill; A. tumefaciens, showing radial cells typically uniseriate to multiseriate modified
due to the hyperplasia caused by the tumor.

Key words: Agrobacterium tumefaciens, Eucalyptus globulus, crow gall

1 Ingeniero
2

Forestal. M. Sc. E-mail: hbaltaza@hotmail.com


Ingeniero Forestal y Ambiental. E-mail: mcdonayre@hotmail.com

INTRODUCCIN
En el Valle del Mantaro el Eucalyptus globulus es la
principal especie forestal establecida en una superficie
de 2061 ha (INRENA, 2007). Dicho recurso, su uso es
muy apreciado por los pobladores destinando a postes
preservados, madera aserrada, madera rolliza para
construccin y como fuente energtica valiosa para las
comunidades campesinas, en algunos casos su
aprovechamiento ha generado ingresos econmicos.
Actualmente, existe muchas plantaciones situada en
todo el mbito del valle, y ellas no tienen un manejo y
aprovechamiento forestal sostenible, en algunos casos
se ha llegado a la sobreexplotacin, situando en riesgo
la permanencia de la especie.
Sin embargo, un aspecto muy importante que se ha
descuidado es el manejo fitosanitario del E. globulus, y
como consecuencia puede observarse la presencia de
muchos parsitos y entre ellos el Agrobacterium
tumefaciens, que es una bacteria que ataca al fuste,
ramas y races, y principalmente en la fase de
produccin en vivero; disminuyendo en gran medida
su valor econmico y afectando directamente las
propiedades fsico mecnicas de esta.
Actualmente, no existen reporte sobre dicho problema
en el Valle del Mantaro, por lo que se hace necesario
estudiar aspectos biolgicos de dicho patgenos, a fin
de lograr la identificacin, para sentar base en la
prevencin y control de problemas fitosanitarios del
E. globulus, en el valle.
MATERIAL Y MTODOS
Lugar de ejecucin:
La investigacin se realiz en fase de campo
colectando muestras de tallo y fuste de E. globulus
atacado por A. tumefaciens de plantones y arboles
procedente de Uas, Hualhuas, Santa Rosa de
Ocopa y E.E. Experiemental Agropecuaria; y en el
Laboratorio de Manejo Forestal de la Universidad
Nacional del Centro del Per.
Materiales y equipos
Se utilizaron reactivos y equipos de investigacin
fitopatologica necesarios para el estudio de bacterias.
Se empleo el medio de cultivo papa dextrosa agar.
Diseo Metodolgico
La investigacin realizada, fue no experimental debido
a que no se manipul variable alguna, fue descriptiva
cualitativo y cuantitativo, porque se describieron las
caractersticas morfolgicas de la unidad formadora de
colonias (UFC), tincin diferencial Gram, y el

desarrollo de la colonia bacteriana in vitro. Se


muestrearon tallo y fuste enfermo con tumoraciones
hiperplasicas. Hernndez, et al. (2006).
Tcnicas y procedimientos de recoleccin de
datos
Se colectaron plantas que presentaban tumoraciones
en el cuello y tronco del rbol de las especies
sealadas y afectadas por el ataque de bacterias,
siguiendo la metodologa de ARGUEDAS (1993), y T.
GOSZCZYNSKA, J.J. SERFONTEIN & S.
SERFONTEIN (2000).
Anlisis, las muestras fueron observadas en el
laboratorio con tincin diferencial para observar su
Gram positividad o negatividad, luego fueron
cultivadas en placas Petri con el medio PDA (peptona,
dextrosa y agar agar.)
Se tomaron microfotografas con una cmara digital
SONY de 10,1 megapixeles, modelo DSC-950.
Se evaluaron:
Forma , color y tamao de las agallas
bacterianas
Reaccion a la Tinsion Gram.
Forma de bacterias
Forma , color, superficie de colonias
RESULTADOS Y DISCUCION
Identificacin de la especie estudiada
Se ha identificado la especie forestal del Eucalyptus
globulus Labill, afectada por tumores hiperplasicos del
Agrobacterium tumefaciens.
Macroscopia de las agallas formadas
Desarrollo anormal hiperplasico del tallo de una planta
en regeneracin natural de Eucalyptus globulus
procedente del bosque de Uas. Obsrvese la
tumoracin a nivel del cuello de la planta.

Figura 2 y 3: Mltiples tumoraciones, y tumoracin


nica y pronunciada en plantas de
Eucalyptus globulus de la EE El
Mantaro.
Formacin de agallas en rboles adultos de
Eucalyptus globulus

Figura 1: Tumor de Eucalyptus globulus de


regeneracin natural Uas
(a)
Formacin de agallas bacteriana en plntulas de
eucalipto procedente del vivero forestal E.E. El
Mantaro Jauja.

(b)
Figura 4 y 5. Agallas aejas (a) y jvenes (b)
observado en rboles adultos rebrotes
de Eucalyptus globulus de la E.E. El
Mantaro(a) y Santa Rosa de Ocopa (b)
(Concepcion), respectivamente.
Tinsion gram en bacterias del eucalipto
Se ha observado un tipo de bacteria dentro de las
clulas de las tumoraciones de Eucalyptus globulus
Labill; esta bacteria es un coco gram negativo.

Figura 6 y 7. El A. tumefaciens en forma de cocos y


bacilos cortos y gram negativas.
Microscopia de las agallas formadas
Se observaron que los tumores presentan un
desarrollo anormal, no distinguindose en las tres
caras tpicas de la madera (radial, tangencial,
transversal), sino una mezcla de estas como un
enrollamiento.

Figura 10 y 11. Corte tangencial que muestra clulas


en hiperplasia

Figura 12. Obsrvese el desarrollo anormal de clulas


en corte radial.
Las clulas radiales tpicamente uniseriadas se
modifican a multiseriadas por efecto de la hiperplasia
provocada por la tumoracin en Eucalyptus globulus
Labill

Figura 8 y 9. Obsrvese el desarrollo anormal


de las clulas en un corte de la madera del
tumor de Eucalyptus globulus Labill
Se observa el desarrollo de clulas hiperplasicas a
nivel del radio.

Figura 13 y 14. Obsrvese el desarrollo de clulas


radiales multiseriadas.

Cultivo de bacterias de Eucalyptus globulus


El Agrobacterium tumefaciens, se cultivaron en medio
PDA, luego, inoculando las unidades formadoras de
colonias, proveniente de las diferentes tumoraciones
colectadas.

Figura 16 y 17. Observese el desarrollo lobulada de la


colonia bacteriana.
Tipo
Color
Forma frontal
Borde frontal
Elevacin

Caracterstica
Blanco cremoso
a anaranjado
cristalino
Lobulada

Hospedante

Eucalyptus
globulus

Ondulado
Acuminada

Los resultados del estudio realizado, podemos afirmar


que las caractersticas estudiadas son similares en
cuanto a forma y color; adems el desarrollo de la
colonia bacteriana a la referida por ARGUEDAS,
(1993); Y T. GOSZCZYNSKA, J.J. SERFONTEIN & S.
SERFONTEIN (2000), respectivamente.
Figura 15. Observese la coloracin blanco cremoso a
anaranjada de las UFC del A. tumefaciens.
CONCLUSIONES
Se ha identificado a Agrobacterium tumefaciens, como
el patgeno causante de las agallas en el Eucalyptus
globulus en el Valle del Mantaro.
El
Agrobacterium
tumefaciens,
presenta
caractersticas que es gram negativas, en forma de
cocos y bacilos cortos.
El Agrobacterium tumefaciens, el desarrollo en medio
de cultivo PDA, forman colonias de color blanco
cremosos a anaranjado cristalino, de forma lobulada.
El tejido leoso tumorado del Eucalyptus globulus
Labill por el A. tumefaciens, muestra clulas radiales
tpicamente uniseriadas se modifican a multiseriadas
por efecto de la hiperplasia provocada por la
tumoracin.

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