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ARTÍCULO DE REVISIÓN 

 

 ANIMALES MODIFICADOS GENÉTICAMENTE EN INVESTIGACIÓN FARMACOLÓGICA 
(Genetically Modified Animals in Pharmacological Research) 
 
 
Mauricio D. Dorfman, Ph.D. 
 
Division of Neuroscience, Oregon National Primate Research Center/Oregon Health and Science University, Beaverton, Oregon, USA. 
 
 
 
 

RESUMEN 
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Los animales modificados genéticamente (AMG) son una herramienta ampliamente utilizada en la investigación biomédica, ya 
que permiten modelar enfermedades, estudiar las bases moleculares de las condiciones patológicas, identificar y validar nuevos 
blancos  farmacológicos,  y  estudiar  la  farmacocinética  y  toxicidad  de  los  fármacos.  Los  AMG  pueden  sobreexpresar  un  gen 
foráneo (animal transgénico), tener interrumpida la expresión de un gen (knock‐out), o tener reemplazado un gen en particular 
(knock‐in). El ratón es el animal de laboratorio de elección para la generación de AMG, principalmente por la facilidad con que 
es posible modificarlo genéticamente y su bajo costo económico de mantención. Entre los avances más destacados del último 
tiempo en las técnicas de ingeniería genética, esta la introducción de mutaciones célula o tejido‐específico, los cambios en el 
genoma del ratón que pueden inducirse o reprimirse en un momento puntual de la vida del animal, y la sustitución de genes del 
ratón por su ortólogo humano. Las limitaciones tecnológicas para producir modelos de ratones manipulados genéticamente son 
cada vez menores, mientras que las aplicaciones y ejemplos de usos de estos animales en farmacología, que podemos encontrar 
en  la  literatura,  son  cada  vez  mayores.  Por  lo  tanto,  entender  lo  que  se  requiere  experimentalmente  para  responder  una 
pregunta científica es tan importante, como conocer las herramientas biotecnológicas disponibles en el mercado. Esta revisión 
no  tiene  otro  fin  que  informar  de  manera  general  los  tipos  de  AMG  que  existen  y  ejemplificar  los  usos  de  estos  en  la 
investigación farmacológica. 
 
Palabras claves: Animales Modificados Genéticamente, Transgénicos, Knock‐Out, Knock‐In, Ratones Humanizados. 
 
Publicado por la Sociedad de Farmacología de Chile 
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INTRODUCCIÓN 
 
La  investigación  biomédica  tiene  por  objetivo,  no  sólo 
entender  los  mecanismos  moleculares  involucrados  en  el 
inicio  y  progresión  de  las  enfermedades,  sino  también 
desarrollar  nuevas  estrategias  para  el  tratamiento  y 
prevención  de  dichas  anomalías.  Para  este  propósito,  la 
validación experimental y los ensayos preclínicos utilizando 
modelos  animales  son  indispensables.  Los  modelos 
animales de enfermedades pueden ser:  
 
 

 
1)   Naturales,  es  decir,  que  suceden  espontáneamente, 
como por ejemplo la ateroesclerosis en el mono ardilla.  
2)   Inducidos de forma física, como en el caso de las ratas 
ovariectomizadas para el estudio de la osteoporosis.  
3)   Generados con el uso de agentes químicos, como es el 
modelo  de  diabetes  mellitus  tipo  1  inducido  con 
estreptozotocina.  
4)   Originado con un agente biológico, como en el caso del 
modelo animal de septicemia inducido con LPS.  
5)  Producido 
mediante 
manipulación 
genética.

 
 
 
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Correspondencia  a:  Dr.  Mauricio  D.  Dorfman,  Division  of  Neuroscience,  Oregon  National  Primate  Research  Center/Oregon  Health  and  Science  University,  505 
Northwest 185th Avenue, Beaverton, Oregon 97006, USA. Correo electrónico: mauriciodorfman@yahoo.com  
 

 
Rev. Farmacol. Chile (2012) 5(1): 9 
 

 

 Farmacol.  en  el  que  se  correlacionó  positivamente  el  efecto  conocido  de  las  100  drogas  más  vendidas.    El  mamífero  de  elección  para  la  generación  de  modelos  AMG  es  el  ratón.  Por este  motivo.  no  existen  modelos  animales  que  desarrollen  espontáneamente  las  características  de  esta  enfermedad  (depósitos  de  ovillos  neurofibrilares y placas amiloides en el cerebro).  que  muchas  veces  causaba  mutaciones  dañinas  en  el  genoma  del  animal.  como  por  ejemplo  la  baja eficiencia del método y la integración azarosa del DNA  exógeno.  Pero  no  sólo  la  industria  farmacéutica se ha beneficiado con el uso de la tecnología  genética en modelos animales.  que  se  definen  como  aquellos  en  los  cuales  se  ha  introducido  un  gen  foráneo  en  su  genoma  y  por  lo  tanto  han  ganado  una  función  que  anteriormente  no  tenían.  la  utilización  de  promotores  específicos  permite  que  el  transgén  (DNA  exógeno)  se  exprese  de  forma  tejido‐específico  en  el  animal  transgénico.  Dentro  de  los  animales  modificados  genéticamente  (AMG)  están:  1)  los  animales  transgénicos.  con  el  fenotipo  observado  en  los  ratones  KO  para  los  blancos  moleculares  de  cada  droga  (1). mediante técnicas de ingeniería genética.  uno  de  los  modelos  de  EA  más ampliamente utilizados en el mundo.  Un  dato  que  apoya  el  uso  masivo  de  AMG  proviene  de  un  estudio  retrospectivo.  El  costo  económico  de  mantención de estos animales es otra ventaja a considerar.  ya  que  por  su  tamaño.  en  los  cuales  se  reemplaza  una  secuencia  específica  del genoma del animal.    El  descubrimiento  de  modelos  animales  que  remeden  las  enfermedades  humanas  es  fundamental  para  la  identificación  de  nuevas  terapias.  Los  resultados  obtenidos  demostraron  que  la  expresión  del  transgén  GLUT4  mejoró  la  resistencia  a  la  insulina  y  recuperó  el  control  de  la  glicemia  en  los  animales  diabéticos (5).  varias  de  las  limitaciones  iniciales.  no  ha  variado  sustancialmente. Chile (2012) 5(1): 10      .    Un  ejemplo  de  la  utilidad  de  los  transgénicos  en  la  validación  de  una  vía  de  transducción  de  señal  terapéuticamente  relevante. se les ha  introducido. lo cual mantiene el costo en un  rango asequible.  removido  o  reemplazado  una  región  específica  de  su  genoma.    ANIMALES TRANSGÉNICOS    El  primer  animal  transgénico  se  generó  hace  más  de  dos  décadas.  KO  y  KI  se  han  convertido  en  una  herramienta de uso masivo.  el  espacio  requerido  para  albergar  un  gran  número  de  ellos  es  pequeño  y  la  cantidad  de  alimento necesario es bajo.  Estos  últimos  se  definen  como  aquellos  animales  a  los  cuales.  Además. sino que básicamente todas  las  ramas  de  la  farmacología  han  logrado  resultados  positivos con el uso de modelos de AMG.  Sin  embargo.  han  sido  resueltas  a  lo  largo  de  los últimos años.  permiten  mejorar  enormemente  la  eficiencia.  Las  ventajas  del  ratón  por  sobre  otros  mamíferos  como  la  rata  o  el  conejo.  Otro  avance  obtenido  en  la  tecnología  de  los  animales  transgénicos  es  la  inducción  temporal  o  condicional  de  la  expresión  del  transgén  (4).  Estas  ventajas  se  deben  en  parte  a  la  facilidad  para  cruzarlos  y  el  poco  tiempo  que  demora  obtener  nuevas  camadas.    Rev. En esta revisión  bibliográfica  se  abordará  de  manera  general  la  forma  de  generar  los  distintos  tipos  de  ratones  manipulados  genéticamente. que puede ir desde un simple par  de  bases  hasta  el  reemplazo  de  un  gen  completo.  fue  la  expresión  del  gen  humano  que  codifica  para  el  transportador  de  glucosa  4  (GLUT4)  en  una  cepa  de  ratón  diabético  (db/db).  mediante  la  microinyección  de  una  secuencia  lineal  y  purificada  de  ácido  desoxirribonucleico  (DNA)  en  ovocitos  fertilizados  (2)  (Figura  1A).  En  el  caso  de  la  enfermedad  de  Alzheimer  (EA).  la  tecnología  para  generar  animales  transgénicos  convencionales. gracias a los avances en la tecnología que  involucra  a  la  ingeniería  genética.  disminuyendo los costos asociados con la generación de los  ratones  transgénicos  (3). Los sistemas de transferencia de DNA que  hoy  están  disponibles.     El número de ratones modificados genéticamente que son  utilizados  en  instituciones  de  investigación  científica  ha  crecido  rápidamente  en  las  últimas  décadas.  la  facilidad  con  que  es  posible  modificar  genéticamente  su  línea  germinal  y  la  gran  disponibilidad  de  células  embrionarias  indiferenciadas.  se  han  desarrollado  métodos  para  lograr  la  inserción  del  DNA  exógeno  en  sitios  específicos  del  genoma.  En  este  último  grupo  se  incluyen  también  a  los  animales  knock‐in  (KI).  los  modelos  animales  transgénicos.  que  se  definen  como animales a los cuales se les ha eliminado de manera  específica la expresión de un gen y como consecuencia han  perdido  una  función  que  inicialmente  poseían.  Por  otra  parte.  La  expresión  inducida  con  tetraciclina  es  un  sistema  ampliamente  utilizado  en  aquellos estudios donde la expresión del transgen durante  el  desarrollo  causa  la  muerte  del  animal.  evitando  la  producción  de  mutaciones  indeseadas  y  toxicas  para  el  animal.  se  discutirán  las  diversas  aplicaciones  que  tiene  el  uso  de  dichos  modelos  en  los  estudios  farmacológicos  y  finalmente  se  analizará  desde  un  punto  de vista prospectivo los enfoques que tendrá el uso de los  AMG en la investigación farmacológica en el futuro.  radican  en  la  posibilidad  de  disponer  de  cientos  de  organismos  genéticamente  homogéneos  en  el  corto  plazo.  transferencia  de  DNA  por  medio  de  espermatozoides  y  clonamiento  de  células  somáticas.  se  han  invertido  muchos  recursos  para  generar  modelos  transgénicos  de  la  EA.  Recientemente.  como  por  ejemplo  el  uso  de  vectores  virales.  Desde  entonces.  por  medio  de  la  microinyección  de  embriones.  y  2)  los  animales  knock‐out  (KO).  De  esta  manera  se  puede  “encender”  o  “apagar”  al  transgén  mediante  la  inyección de análogos de la tetraciclina (Figura 1B).  Un  ejemplo  de  ellos  es  el  ratón  transgénico  Tg2576  (6).

 debido a las diferencias en la composición y/o  expresión  génica  de  las  diferentes  especies. el  represor rtTA mantiene apagada la expresión del cDNA de interés.     El  proceso  para  generar  un  ratón  KO  tiene  dos  etapas:  la  construcción  del  vector  (Figura  2A)  y  la  inyección  de  las  células  mES.        A)  Producción  de  un  ratón  transgénico  mediante  la  microinyección  de  un  pronúcleo.  mediante  la  interrupción de un gen específico a través de la tecnología  de  recombinación  homóloga  en  células  mES. fibrosis y  falla  cardiaca  (7).  sin  embargo. por lo que  todas las células del organismo llevan la mutación inducida  (animal KO convencional).  en  la  etapa  de  blastocisto  del  embrión (Figura 2B).  transportador o receptor no será igual en el animal que en  el humano.  La  razón  por  la  cual  se  utilizan  las  células  mES  en  la  producción  de  ratones KO.  B)  Sistema  de  regulación  de  la  expresión  del  transgen  mediante  el  sistema  de  la  tetraciclina.  Esto  debido  a  que  muchas veces la interacción de una droga con una enzima. permitiendo así la sobreexpresión  de  este  transgén  específicamente  en  células  de  la  musculatura  cardiaca.  el  aislamiento  de  células  madre  de  embriones  de  ratón  (mES)  y  la  posterior  demostración  de  la  posibilidad  de interrumpir un gen particular con un gen de neomicina  en  células    mES.  Gracias  a  este  transgénico  se  descubrió  que  la  activación  inapropiada  del  receptor  de  mineralocorticoide  provoca  daños a nivel cardiaco y que el bloqueo de la aldosterona  tiene beneficios terapéuticos en la falla cardiaca. cuya secuencia génica se  ha  colocado  bajo  el  control  del  promotor  de  la  cadena  pesada de la α‐miosina. Uno de los principales inconvenientes  de  esta  tecnología  es  que  la  mutación  (interrupción  del  gen) es transmitida a través de la línea germinal.  Esta  estrategia  involucra  dos  transgenes. el desarrollo de la    Rev.   La  toxicología  es  otra  rama  de  la  farmacología  que  ha  obtenido  beneficios  de  la  investigación  con  animales  transgénicos.  mejoró  significativamente  la  condición  patológica  del  animal.    El  transgén  2  lleva  en  su  construcción  el  cDNA  de  interés.  es  el  ratón  transgénico  de  la  11β‐ hidroxiesteroide deshidrogenasa.  Figura 1. es decir. cuyo estudio mejoró el  conocimiento  del  metabolismo  de  primer  paso  del  midazolam (8).  cuya  expresión  está  controlada  por  el  elemento  de  respuesta a tetraciclina.  corresponde  al  ratón  transgénico  de la citocromo P450 3A4 (CYP3A4). El transgén 1utiliza un promotor tejido‐específico para conducir  la  expresión  de  un  represor  o  activador  reverso  de  la  transcripción  del  operón  de  tetraciclina  (representado  en  este  esquema  por  el  sitio  de  respuesta  a  tetraciclina:  ERT).  un  bloqueador  selectivo  de  la  aldosterona.    Otro ejemplo de un modelo transgénico que desarrolla una  condición  patológica.  permitiendo  mejorar  el  conocimiento  de  la  función  in‐vivo  de  enzimas. En presencia del antibiótico tetraciclina se bloquea  el  efecto  del  represor  (rtTA)  y  se  induce  la  transcripción  del  cDNA  (encendido del transgén 2). Farmacol.    Estos  eventos  permitieron  posteriormente  la  producción  de  ratones  KO.  darán  origen  a  los  distintos  tipos  celulares  del  animal  adulto. Un ejemplo de  animal  transgénico  utilizado  para  el  estudio  del  metabolismo  de  drogas.  estas  células  pueden  mantenerse  en  cultivo  de  manera  indiferenciadas  y  escoger.  que  han  incorporado  correctamente  el  constructo  en  su  genoma.  un  avance  importante  ha  sido  la  posibilidad  de  generar animales “humanizados”.  hay  que  tener  especial  cuidado  con  las  diferencias  entre  especies  a  la  hora  de  interpretar  los  resultados.  mediante  la selección con antibióticos.  Este  animal  transgénico  tejido‐ específico presenta una condición de hipertrofia.  El  material  genético  es  inyectado  directamente  en  un  ovocito  fertilizado  y  posteriormente  este  último  es  implantado  en  una  hembra  pseudopreñada.  En  esta  área.       ANIMALES KNOCK‐OUT    La  generación  de  animales  KO  fue  precedida  principalmente  por  dos  descubrimientos  en  la  década  de  1980.  proteínas  transportadoras y receptores de xenobióticos involucrados  en el metabolismo y transporte de drogas. Sin embargo.  La  administración  de  eplerenona.  En  este  sentido.  Además. Chile (2012) 5(1): 11      . aquellos clones que tienen el  constructo  en  la  región  correcta  del  genoma  antes  de  inyectarlas en el embrión (Figura 2A). mejorando de esta forma la predicción del riesgo  del  xenobiótico  en  humanos  (revisar  en  la  sección  de  animales KI). Por el contrario.     Los  AMG  además  se  han  utilizados  ampliamente  en  estudios  farmacocinéticos. animales en los  cuales  se  reemplaza  un  gen  del  ratón    por  su  ortólogo  humano. en ausencia de tetraciclina. es que estas células son pluripotentes y por lo  tanto.

 A) El vector contiene el gen  de interés (Gen A).  o  mediante  inyección  intravenosa.  la  cual  es  responsable  de  la  defensa  celular  del  organismo  contra  toxinas  endobióticas  y  xenobióticas.  La  figura  3  ilustra  la  producción de un ratón KO para un gen X. Chile (2012) 5(1): 12      .  Los  ratones  de  la  primera  camada  son  quimeras.  GLUT4.    tecnología  Cre‐LoxP  ha  permitido  eliminar  la  expresión  de  un  gen  de  forma  célula‐específica  (animal  KO  condicional)  (9).  inducible)  (10). por  ejemplo. que permiten la inserción del constructo en el  lugar  donde  está  ubicado  el  gen  original  en  el  genoma  del  ratón.     Si  la  expresión  del  gen  Cre  está  bajo  el  control  de  un  promotor  de  un  gen  que  se  expresa  en  un  tipo  celular  determinado.     Como  ejemplos  del  uso  de  animales  KO  en  estudios  farmacológicos  podemos  mencionar  al  ratón  KO  para  glutatión S transferasa pi (GstP‐KO).          Proceso  para  generar  un  ratón  KO  mediante  recombinación  homóloga  en  células mES.    2)   Un animal que tenga el gen de interés.  y  los  ratones  KO  para  el  receptor  de  insulina.  la  cual  producirá  la  recombinación homologa al reconocer los sitios LoxP.  Esta  glicoproteína. Este gen codifica para  una  de  las  enzimas  glutatión  S‐transferasas  más  importantes.  Los  estudios  con  el  modelo  de  ratón  GstP‐KO  permitió  determinar  el  efecto  carcinogénico  del  7.  ya que tienen una mezcla de las células propias del blastocisto y las células  mES  inyectadas.  fisiología  y  farmacología.  que tiene un alto nivel de expresión en la membrana apical    Rev.  Una  vez  que  el  vector  es  introducido  en  las  células  mES.     Figura 2.  cultivando  las  células  en  presencia  de  neomicina.  con lo cual se pierde especificidad en la infección. interrumpido  por el gen de resistencia a la neomicina (neor) y todo esto flanqueado por  dos regiones de homología. Ejemplo de ello son:  el  ratón  KO  para  Apoliproproteina  E.  se  seleccionan  aquellos  clones  que  tienen  el  inserto.  son  inyectadas  en  el  blastocisto  de  un  ratón  de  aproximadamente  4  días  de  gestación y posteriormente el blastocisto se transplanta en el útero de una  hembra  pseudopreñada.  el  uso  de  un  sistema  inductor  como  el  de  la  tetraciclina  (animal  KO  condicional. Además.  Los  animales KO son utilizados ampliamente como modelos de  ciertas condiciones clínicas relevantes.  Estos  virus  pueden ser administrados en el animal adulto localmente.    Otro  ejemplo  son  los  ratones  KO  para  las  diferentes  isoformas  de  la  Glicoproteína‐P  MDR1.  B)  Las  células  mES  con  el  inserto  en  la  ubicación  deseada.  cuya  finalidad  es  estudiar  los  mecanismos  moleculares  asociados  con  la  fisiopatología  de  la  resistencia a la insulina y diabetes mellitus tipo 2 (12). específicamente  en hepatocitos.  lo  cual  ha  permitido  a  los  científicos usar esta herramienta experimental en todas las  aéreas  de  la  biología.12‐ dimetilbenceno  antraceno  (DMBA)  (13).  Los  animales  KO  homocigotos  se  obtienen  haciendo  una  selección  mediante  nuevos  cruzamientos  y  la  genotipificación  del  constructo.  Una  alternativa  al  uso  de  vectores  de  expresión  transgénicos  inducibles. es  posible  inducir  la  expresión  de  la  recombinasa  en  un  momento determinado de la vida del animal mediante. Farmacol.  con lo cual se logra la infección en las células que rodean el  sitio  de  de  inyección.  el  receptor  del  factor  de  crecimiento  tipo  insulina  1. mediante el sistema Cre‐LoxP.  es  la  infección  de  ratones  con  vectores  de  expresión  viral  que  expresen  la  proteína  CRE. flanqueado por  dos sitios LoxP.  el  efecto  hepatotóxico  del  paracetamol  (14)  y  la  disfunción  endotelial producida por el tabaco (15).     Durante  los  últimos  20  años  se  han  generado  miles  de  ratones  KO  en  todo  el  mundo.  utilizado  como  modelo  de  ateroesclerosis  (11).  el  sustrato  del  receptor  de  insulina  1  y  2. que corresponden a secuencias génicas  que serán reconocidas por la enzima recombinasa CRE.  se  obtendrá  como  resultado  un  animal  KO  condicional  o  tejido‐específico.  Para  la  utilización  de  esta  tecnología  se  requiere  dos  tipos de animales:     1)   Uno  que  exprese  el  gen  Cre  (nombre  proveniente  del  inglés:  Causes  Recombination)  que  codifica  para  la  enzima  recombinasa.

 algunas aplicaciones específicas de  estos  animales  en  investigaciones  farmacológicas.  En  este  KI  humanizado  se  reemplazó  solamente  los  exones  8.  Es  el  caso  por  ejemplo.  perfiles  farmacocinéticos  y  toxicológicos  de  innumerables  drogas.  vinblastina.  Por  ejemplo. la recombinación homologa en células mES.  9  y  10. Por otro lado. es relevante entender  cuáles  son  las  necesidades  del  proyecto  científico  del  que  se participa.  Los  agonistas. Farmacol.jax.  con  especificidad por el TPOr humano.    La  tecnología  KI  también  se  utiliza  para  introducir  mutaciones  puntuales  y  modelar  enfermedades  humanas  en el ratón.  del  ratón  KI  con  repeticiones  CAG  en  el  gen  de  Huntingtina. aquellos científicos interesados  en  adquirir  modelos  AMG  pueden  dirigirse  a  diferentes  empresas  biotecnológicas  u  organizaciones  sin  fines  de  lucro  que  ofrecen  sus  servicios  y  productos  a  través  de  páginas web.  El  primero (izquierda) es un ratón transgénico que expresa el gen de la enzima  recombinasa  CRE  bajo  el  control  del  promotor  de  la  Albumina  (Alb).  Un  ejemplo  de esto  último. Por otra parte.  El  gran  avance  del  último  tiempo  en  las  tecnologías  para  manipular  el  genoma  de  ratón.  utilizando.    Un  estudio  que  demuestra  esto  último  es  el  ratón  KI  α2δ1  R217A.  creado  el  año  2007.  sin  embargo  no  siempre  es  necesario  el  reemplazo  completo  del  gen  para  lograr  la  “humanización”. La  humanización  de  ratones  mediante  la  tecnología  KI  (reemplazo de un gen del ratón por su ortólogo humano).  en  teoría  cualquier  enfermedad  humana  causada  por una mutación es posible estudiarla en un ratón KI en el  que  se  ha  mutado  su  ortólogo  humano.  digoxina. ejemplificando de entre miles  de ejemplos existentes.    El  resto  de  las  células  del  ratón.  En  esta  revisión  bibliográfica  se  ha  descrito  de  forma  general  los  diferentes  tipos  de  modelos  de  animales  modificados genéticamente. inactivar regiones esenciales de una proteína. los hepatocitos sufren la eliminación del  gen X mediante recombinación de los sitios LoxP (ilustrado en el esquema  con  una  tijera).  permiten  al  científico  innovar  en  las    modificaciones  genómicas  casi  sin  limitaciones. el cual remeda la enfermedad de Huntington  (19).  Esta  estrategia  experimental  requiere  de  dos  tipos  de  ratones.    ANIMALES KNOCK‐IN    Esta tecnología se basa en la inserción o reemplazo de una  secuencia  de  DNA  en  un  sitio  definido  del  genoma  del  animal.  como  el  dominio  catalítico  de  una  quinasa.  tienen el gen de interés flanqueado por los sitios LoxP. el Consorcio Internacional  de  Ratón  Knock‐Out  (IKMC).  para  determinar  el  tipo  de  modelo AMG que sería útil generar.  y  que  asocia  tres  de  los  consorcios  más  importantes  del  mundo  en  el  ámbito  de  los  ratones  KO.  Con  este  KI  se  demostró  que  el  mecanismo de acción del efecto analgésico de gabapentina  y  pregabalina  es  mediado  por  una  interacción  específica  con  el  aminoácido  arginina  217  de  la  subunidad  α2δ1  del  canal  de  calcio  (18).  se ha convertido en una herramienta muy importante para  evaluar  in  vivo  la  eficacia.  tiene  como  principal  aspiración  mutar  todos  los  genes  codificantes  en  el  ratón  (alrededor de 30.  Por  lo  tanto.    Figura 3.  es  el  estudio  realizado  en  un  ratón  KI  para  el  receptor  de  trombopoyetina  (TPOr). distribución y excreción de  drogas.  ciclosporina  A.  El  cruce  de  estos  dos  animales  da  origen  a  ratones  KO  para  el   gen  de  interés  específicamente  en  las  células  que  expresan  la  enzima  recombinasa CRE. El ratón  de la derecha tiene el gen que se desea eliminar (gen X) flanqueado por dos  stios  LoxP.  Con  respecto  a  la  utilización  de  la  tecnología KI para modelar una enfermedad humana en el  ratón.  loperamida  y  rodamina (16).000) mediante ingeniería genética de una  línea celular estandarizada de mES proveniente de ratones    Rev.  al  igual  que  en  la  tecnología  para  generar KO. lo cual no afecta la  transcripción del gen o traducción ribosomal de su mRNA.org)  es  una  organización  independiente  y  sin  fines  de  lucro. fueron inyectados en los  ratones  KI  humanizados  para  TPOr  y  demostraron  un  efecto dosis‐respuesta respecto al número de plaquetas. en la superficie biliar de los hepatocitos  y  en  el  lado  luminal  de  las  células  del  tubo  proximal  del  riñón. En este modelo animal. Chile (2012) 5(1): 13      .  el  ratón  KI  humanizado  para  el  receptor  de  quimioquina  1  (CCR1)  se  usó  para  estudiar  el  efecto  de  antagonistas  de  CCR1  específicos  de  humano  sobre  la  modulación  de  la  respuesta inflamatoria (17).  la  cual  está  enfocada  principalmente  en  la  investigación  genética de mamíferos con la finalidad de ayudar a mejorar  la salud humana.  en  el  cual  se  modificó  una  arginina  por  una  alanina  en  la  ubicación  217  de  la  subunidad  α2δ1  del  canal  de  calcio  dependiente  de  voltaje.      Obtención  de  ratones  KO  hepatocito‐específico  utilizando  el  sistema  Cre‐ LoxP.  que  no  expresan  CRE.  ya  que  esta  región  era  la  responsable  de  la  especificidad  de  los  agonistas  que  se  quería  investigar. The Jackson Laboratory (http://www.  o  el  sitio  de  unión  a  drogas  de  la  proteína  blanco.  Estudios  realizados  con  estos  animales  KO  demostraron la importancia de las diferentes isoformas de  esta  glicoproteína  en  la  farmacocinética  y  toxicidad  de  varios  fármacos  como  la  invermectina. el gen  Ccr1 del ratón fue reemplazado completamente por el gen  CCR1  humano.    de los enterocitos. En este ejemplo.  dexametasona.  cuya  expresión se produce exclusivamente en los hepatocitos del ratón. participa en la absorción.

  Gusella  JF.   Qin W.  White  JK. Haigh J.  Reddick  RL. McMahon AP 2002 Efficient recombination in diverse tissues  by  a  tamoxifen‐inducible  form  of  Cre:  a tool  for  temporally  regulated  gene activation/inactivation in the mouse.  McCoid  SC. Bond BR. Mayer U.715  inhibits  cell  infiltration  and  inflammatory  responses in human CCR1 transgenic mice.  and  spinal  cord:  an  ex  vivo  autoradiographic  study  in  alpha2‐delta  type  1  genetically modified mice.   Granvil CP. Chapman P.   Conklin DJ.  Spits  H. Akiyama TE. Chile (2012) 5(1): 14      .  Brown  K. Whitsett J.  Cole G 1996 Correlative memory deficits.  Wolf  CR  1998  Increased  skin  tumorigenesis  in  mice  lacking  pi  class  glutathione  S‐ transferases.  Vonsattel  JP. no sólo buscar  y  comprar  un  determinado  ratón  KO.  Piedrahita  JA.knockoutmouse.  Joyner  AL.  fenotípica  y  médicamente  hablando  son  completamente  diferentes.  amygdala.   Henderson  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genética  en  animales  pretenden  hacer  viable  económica  y  técnicamente  eficiente  la  generación  de  modelos fenotípicamente más parecidos al humano. Prough RA. Wunderlich FT.   Schinkel AH.  podría  conducir  a  cambios  no  deseados  en  la  expresión  de  otros  genes  en  el  AMG  y  de  esta  forma  enmascarar o exagerar el fenotipo del animal. Proc Natl Acad Sci U S A 97:12741‐12745  15.   Wheeler  VC. Bhatnagar A 2009 Glutathione‐S‐ transferase  P  protects  against  endothelial  dysfunction  induced  by  exposure to tobacco smoke.  Kuroiwa  Y  2007  Transgenic  animal  production and animal biotechnology.   Belteki G. van DL. Kitteringham N. Haigh K. limitations.  Kasinathan  P.  Maeda  N  1992  Spontaneous  hypercholesterolemia  and  arterial  lesions  in  mice  lacking  apolipoprotein E. Abeta elevation.  Ure  J. J Clin Invest 95:1512‐1518    6.  Nelson  RT. Eckman C.  McMahon  EG  2003  Transgenic  model  of  aldosterone‐driven  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ratón KO para un gen particular.  Tylaska  LA.  Stock  JL.  Bacon  EJ. and amyloid  plaques in transgenic mice.   Gordon  JW.   Henderson CJ. Nucleic Acids Res 33:e51  5. Park BK 2000  Increased  resistance  to  acetaminophen  hepatotoxicity  in  mice  lacking  glutathione S‐transferase Pi.org)  permite.     En  el  futuro  se  espera  que  la  tecnología  avance  hacia  la  mejora  en  la  humanización  de  los  AMG.  Sands  AT  2003  Knockouts  model  the  100  best‐selling  drugs‐‐will they model the next 100? Nat Rev Drug Discov 2:38‐51  2.  Henderson  N  1989  Cre‐stimulated  recombination  at  loxP‐ containing  DNA  sequences  placed  into  the  mammalian  genome. Funder  JW.  Wang  Z. Hum Mol Genet 9:503‐513    Rev.  Shepard  RM.  de  tal  forma  que  los modelos experimentales sean cada vez más similares a  los  humanos.  Zijlmans  JM.   Zhang  SH. and perspectives.  si  bien  son  herramientas  únicas  y  valiosas  para  las  investigaciones farmacológicas básicas y preclínicas.  Por  lo  tanto. Kabacs N.   Hsiao K. Brain Res 1075:68‐80  19. Farmacol. Walker LC 2006  Calcium  channel  alpha2‐delta  type  1  subunit  is  the  major  binding  protein  for  pregabalin  in  neocortex.  Nucleic Acids Res 17:147‐161  10.   Bian F. tienen  limitaciones que no debieran subestimarse una vez que se  obtienen  los  resultados  de  la  investigación.  Smith  AG. J Immunol 176:3141‐3148  18.  Vrbanac  V.  un  proceso  fisiológico  o  el  comportamiento de un fármaco en el humano. Science 274:99‐102  7. Science 258:468‐471  12. Theriogenology 67:127‐133  4.  Yi  H.  McNeish  JD.  McNeish  JD  1995  Glycemic  improvement  in  diabetic  db/db  mice  by  overexpression  of  the  human  insulin‐regulatable  glucose transporter (GLUT4). Elizondo G.  Stukenbrok  HA.  MacDonald  ME  2000  Long  glutamine  tracts  cause  nuclear  localization  of  a  novel  form  of  huntingtin  in  medium  spiny  striatal  neurons  in  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