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en las
fecundacin externa, expulsando al exterior primero el esperma para despus seguir con los
vulos y se inicie la fertilizacin .(Bermdez, et al.2004). Las conchas de abanico al ao tienen
con frecuencia 2 desoves masivos intensos principalmente en verano y primavera. La madurez
de las gnadas se acelera durante los eventos El Nio, debido a las altas temperaturas,
incrementando la frecuencia del desove (FAO, 2006) El Ciclo Biolgico comprende de cuatro
fases; huevo, larva, juvenil y adulto. La fase larval es planctnica y presenta tres estadios:
trocofora, velegir y el estado pedi veliger que se caracteriza por la segregacin de la disconcha
y del pie que le sirve para adherirse al sustrato adecuado. (Carbajal, et al.2005).
OBJETIVOS
Llevar a cabo el desove de los reproductores, obteniendo gametos separados
(esperma y vulos).
Llevar a cabo la fertilizacin de los ovocitos, logrando una fertilizacin mnima del
50%.
Identificar los estadios iniciales de huevo, embrin (6-8horas), blstula rotatoria
(8-12horas), trocfora (20-36horas).
Mantener un buen acondicionamiento de los huevos fertilizados.
MATERIALES Y METODOS
A).- PROCEDENCIA DE CONCHA DE ABANICO:
Los reproductores de concha de abanico fueron extradas de la playa el dorado de la empresa
INTERCOL S.AC Y luego trasladadas las especies en seco
al laboratorio de maricultura
AGUA DE MAR
FILTRACION DE AGUA:
USANDO TAMIZ DE 120u 40
um
AIREACIN
AGREGAR CLORURO DE
SODIO 1ML /L
AGREGAR TIOSULFATO DE
SODIO 1ML /L
DURANTE 1
HORA
ESCALA DE
MADURES
SEXUAL (IGS)
REPRODUCTORES
LIMPIEZA, ESCOBILLA Y
EJEMPLARES
ACONDICIONAMIENTO
ALIMENTACION:
TETRASELMIS
SUECICA
RESULTADOS
Los resultados que se muestran a continuacin fueron obtenidos el viernes 2 de mayo del
2014 a partir de las 3.00 pm
HORA: 03:00 PM
a
FIGURA N 03: parmetros
PH: 8.12
T:21.8
S : 35.7
FIGURA N 06:
espermatozoides de
Argopecten purpuratus
HORA: 10:28 PM
HORA: 10:29 PM
HORA: 10:45PM
HORA: 11:10PM
HORA: 11:24PM
HORA: 11:57PM
HORA: 12:50 AM
HORA: 02:15 AM
HORA: 03:04 AM
HORA: 04:10 AM
HORA: 10:50 AM
HORA: 04:02 PM
RECUENTO DE GAMETOS
Una vez que las especies depositan por completo sus gametos se procede con el recuento de
vulos y espermatozoides.
Recuento de vulos:
Nmero de vulos/m
67.8 vulos /ml
x1000
especies
ml=67800 vulos
1
2
3
4
5
TOTAL
l
75
85
61
68
50
67.8
Recuento de espermatozoides:
Nmero de espermatozoides/
especies
20ml
1
210
713 espermatozoides /ml x20
2
218
ml=14260 espermatozoides
3
285
TOTAL
713
Figura 28: Imgenes de la toma de peso (a) longitud y altura (b y c) de los organismos de
concha de abanico.
Figura 30: observacin de los rganos sexuales maduros y extraccin de las partes blandas
Figura 31: peso de las partes blandas, presentando una coloracin intensa en los rganos
sexuales tanto para el macho (espermas) como para la hembra (vulos), textura suave, para
aquellos organismos que ya tena un desove y textura dura, para aquellos madurantes.
N|
01
LVD
LAP
PT (g)
EMS
PPB(g)
PG(g)
IGS
(cm)
(cm)
7.2
66.8
IIA
27
PG/PPBX100
22.22
7.7
77.33
IIB
30.97
7.61
24.57
8.2
92.17
IIB
32.93
5.88
17.86
8.04
81.48
IIB
33.13
7.79
23.51
6.7
55.79
IIA
23.83
7.31
30.68
6.5
02
7
03
7.6
04
7.23
05
6.51
06
6.95
61.82
IIA
24.9
5.88
23.61
6.9
62.91
IIA
27.96
7.47
26.72
6.2
07
08
6.1
7.7
8.2
71.8
IIB
31.51
6.84
21.71
6.95
59.9
IIA
26.21
11.73
44.75
10
6.59
6.95
7.8
77.74
IIB
25.77
8.68
33.68
11
6.45
6.8
61.27
IIA
29.35
6.32
21.53
12
8.22
91.18
IIB
34.64
9.27
26.76
09
RANGO
6-7.23
6.8-
55.79 -
50% IIA
23.83 -
5.88 -
41.6% (5 de 12
8.22
92.17
50% IIB
34.64
11.73
organismos)
son > de 25%
PROMEDIO
6.7358
7.4717
71.6825
29.017
7.565
en IGS
26.47
DESVIACION
0.56
7.47
71.68
29.017
1.6285
26.4667
ESTANDAR
Dnde:
LAP=Longitud antero-posterior
R= Rango
DE= Desviacin estndar
ANLISIS BIOESTADSTICA
Para una variable:
P= Promedio
I DISCUSION:
Argopecten purpuratus es una especie hermafrodita funcional. Tanto la gnada femenina como
la masculina maduran de forma simultnea. Sus gametos los expulsa de forma secuencial,
normalmente el esperma primero seguido de los vulos, para luego cambiar a esperma otra vez
dentro del mismo ciclo de desove (FAO, 2006)
Los ejemplares de A. purpuratus adquieren la primera madurez gonadal cuando alcanzan la talla
de 65 mm, a los 10 o 12 meses de edad, desovando de 1 a 10 millones de vulos. (BERMUDEZ
ET AL, 2004). Los reproductores empleados en la prctica se encontraban en estado III, fase de
maduracin.
Los reproductores pueden ser inducidos al desove mediante la aplicacin de dos tcnicas:
sobrealimentacin y shock trmico. Tcnica por sobrealimentacin: consiste en retirar
totalmente el agua de mar sin filtrar de los tanques, exponiendo a los reproductores ejemplares
en un medio sin agua por 15 minutos. Luego, transcurrido este tiempo se aade 40 L de
alimento consistente en la microalga I. galbana en una concentracin de 2 a 5 x106 cel/mL, sin
suministro de oxigeno. Tcnica por shock trmico: sta consiste en calentar el agua de mar
sin filtrar contenida en un recipiente de 30 L en una cocina gas, hasta alcanzar una temperatura
de +/- 27 C .Pasado este tiempo se suministr 40 L de la microalgas I. galbana en una
concentracin de 2 a 5 x106 cel/mL, sin adicin de oxigeno (IMARPE, 2008) .Para el caso de
los reproductores utilizados en prctica, no se llegaron a utilizar ninguna tcnica esto fue
debido a que los ejemplares extrados de la empresa INTERCOL S.A.C ubicada en el dorado.
Los ejemplares se encontraban listas para desovar rpida mente debido al traslado que se hizo
unos cuantos minutos para iniciar el desove de argopecten purpuratus lograron desovar los
gametos (vulos o espermios), mostrando los espermios una tonalidad lechosa (forman
abundante burbujas en la superficie del tanque cuando reciben aireacin) y los vulos una
coloracin anaranjada
El ciclo biolgico de Argopecten purpuratus comprende cuatro fases: huevo, larva, juvenil y
adulto. La fase larval es planctnica y presenta tres estadios: 1 trocfora (larva ciliada) 2 veliger
(con velo u rgano ciliado nadador) y el estadio 3 pediveliger, que se caracteriza por la
segregacin de la concha y del pie, que le sirve para adherirse al sustrato adecuado (IMARPE,
2008). En prctica solo se pudo observar hasta el estadio de larva trocofera .
Los datos de IGS encontrados reportan un 50% de organismos con capacidad desovar ya
que estos presentan de 25- 50% de IGS. Sumado los organismos presentan la coloracin
adecuada y la forma turgente necesaria para el desove. El 50 % de organismos presentaban
estadios II B en la escala demadurez gonadal, seguido por el estadio III.
CONCLUSIONES:
II REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
Fao, 2006. Helm, M.; Bourne, N.; Lovatelli, A. (comp./ed.). Cultivo de bivalvos en
criadero. Un manual prctico. Fao documento tcnico de pesca. no. 471. Roma. 184 pp.
Carbajal. W., de la Cruz. J., Ramirez. P., Bances. B.,Galn.j., y Castaeda. J. (2005)
Evaluacin poblacional del recurso concha de abanico (argopecten purpuratus) en la
isla lobos de tierra.
CUESTIONARIO:
a) Desde el punto de vista microbiolgico, qu cuidados se debe tener con los
organismos reproductores, equipos, materiales, etc.?
Los reproductores deben ser limpiados externamente para liberarlos de organismos incrustantes,
deben tener una adecuada alimentacin ya que esto influye en el porcentaje de gametos que
liberara al momento del desove
Los equipos y materiales deben ser desinfectados o esterilizados, ya que pueden transmitir
organismos patgenos, los cuales causaran enfermedades y por consiguiente la muerte de las
larvas. Adems se debe tener agua microfiltrada a 1 um y esterilizada con UV.
b) Qu factores ambientales favorecen la maduracin de los organismos reproductores y
en qu tiempo puede recuperarse y volver a desovar la concha de abanico?
Existen varios factores ambientales que pueden inducir el desove, de los cuales cabe mencionar
la temperatura, los estmulos qumicos y fsicos, las corrientes de agua o una combinacin de
estos y otros factores. La presencia de esperma en el agua a menudo estimula el desove de
animales de la misma especie.
En ambientes tropicales, algunas especies de bivalvos mantienen sus gametos maduros durante
todo el ao y desovan cantidades limitadas durante los doce meses. En las zonas templadas, la
puesta suele estar limitada a un perodo concreto del ao. Muchos bivalvos desovan en masa, y
el perodo de puesta es muy corto, durante el que expulsan casi todo el contenido de la gnada.
La concha de abanico responde mejor a temperaturas de agua de entre 22 y 24 C. y se
acondiciona en un rango ms amplio de salinidades (25 a 35%), con un valor ptimo de
alrededor de 30%
c) Aparte de la temperatura, qu otros estmulos pueden inducir el desove en los moluscos
bivalvos?
Factores qumicos como es el caso del perxido de hidrogeno, el cual fue utilizado en el centro
acucola de la Arena (Casma). Durante la induccin al desove, los reproductores a los que se
adicion dicha sustancia comenzaron a expulsar sus gametos al cabo de 3 a 5 minutos y el grupo
que recibi slo el estmulo trmico, demor alrededor de 20 a 30 minutos. Se comprob que el
perxido de hidrgeno acelera substancialmente la respuesta de las conchas de abanico para el
desove. El perxido de hidrgeno activa las hormonas relacionadas con la va de las
prostaglandinas, induciendo as el desove en invertebrados que liberan gametos. Adems se
puede estimular con los gametos de otros bivalvos.
d) A qu nivel de la ovognesis son liberados los ovocitos en la concha de abanico?.
Cuntos cuerpos polares son liberados despus de la fertilizacin.
Al final de la etapa de la vitelognesis, en donde los ovocitos son hidrtadis antes de su
evacuacin. Desovados se encuentran en el oviducto proximal, glandula ovidutual y oviducto
distal; mide 4.6x1.5 mm. Las clulas foliculares que dan en el ovario formando los folculos
postovulatorios, para el siguiente desove.
Cuando ocurre la fertilizacin, antes de que los proncleos se hayan fusionado, formando el
cigoto, ocurre la liberacin del primer y segundo cuerpo polar.
e) Investigar la cantidad de ovocitos que libera cada concha de abanico y desde que
tamao.
Los desoves en su mayora son parciales. La fecundidad puede variar entre 500.000 a 4.000.000
de vulos por animal y los vulos fecundados pueden llegar a tamaos entre 45 a 50 m.
f)Qu es poliespermia y qu mecanismos impiden que este fenmeno sea comn en los
moluscos?
Es un fenmeno que ocurre en el momento de la fertilizacin, producto del ingreso de varios
espermatozoides en el ovocito, puede ocurrir cuando hay autofecundacin, dado que estos
organismos son hermafroditas funcionales y liberan ovocitos al igual que espermatozoides. Para
evitar esto la concha de abanico libera primero uno de los gametos, para luego de un tiempo
liberar el otro. Adems ocurre en la membrana del ovocito una despolarizacin, la cual no
permite el ingreso del segundo espermatozoide.
g) En el cultivo comercial de concha de abanico, el desove natural es un problema durante
la cosecha porque los animales bajan de peso. Mediante que tratamiento gentico se
podra evitar tal problema?
El inters en desarrollar la tecnologa para producir conchas de abanico triploides en la costa
Pacfica de Norteamrica surgi por dos motivos. En primer lugar la industria quera disponer
de conchas de abanico de buena calidad para el consumo durante todo el ao para mantener y
prolongar la campaa de comercializacin. Las gnadas del ostin pueden ocupar hasta el 50%
del peso de las partes blandas del cuerpo. Cuando en la primavera el glucgeno se convierte en
gametos, el ostin desarrolla un sabor desagradable y despus del desove las partes blandas
pierden volumen y se vuelven acuosas, convirtindose entonces en un producto no apto para la
comercializacin. En segundo lugar, al evitar el desove se pueden evitar las muertes por la
llamada enfermedad del verano, en parte debida al estrs fisiolgico sufrido durante la poca
de reproduccin.