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UNIVERSIDAD DEL NORESTE

REA CIENCIAS QUMICO BIOLGICAS


BIOLOGA CELULAR
BILOGA MARISELA MORENO GALDEANO
PRCTICA 5 CLULAS SANGUNEAS
CASTILLO GARCA ANA ESTHER
GRADO: 3

GRUPO: A

15 DE NOVIEMBRE DEL 2014

La sangre es el principal lquido que circula por nuestro organismo y est compuesta en un
45 % por clulas sanguneas (glbulos blancos, glbulos rojos, plaquetas). Posee una matriz
extracelular lquida, viscosa y coagulable, que se denomina plasma.

En el plasma encontramos las clulas sanguneas o fragmentos celulares llamados


plaquetas.
La mayora de las clulas sanguneas se producen en la medula sea, que es un tejido en el
interior de los huesos como el crneo, las costillas el esternn, las vrtebras los huesos de la
cadera y los extremos de los huesos largos.
Una vez formadas las clulas sanguneas permanecen en la medula sea y siguen un
proceso de maduracin antes de pasar a la circulacin.
La hematopoyesis es el proceso de formacin, desarrollo y maduracin de los elementos
formes de la sangre (eritrocitos, leucocitos y plaquetas) a partir de un precursor celular
comn e indiferenciado conocido como clula madre hematopoytica pluripotencial, Unidad
Formadora de Clones, Hemocitoblasto .
Las clulas sanguneas son degradadas por el bazo y los macrfagos del hgado. Este ltimo,
tambin elimina las protenas y otras sustancias de la sangre

Hematopoyesis
Proceso de Maduracin de las clulas sanguneas

FUNCION
ES DE LA SANGRE:
Es un medio de transporte, llevando oxgeno desde los pulmones al resto de tejidos,
transportando el CO2 desde los tejidos a los pulmones,
Transportando sustancias nutritivas a tejidos y sustancias de desecho a los riones.
Transporta hormonas.
Interviene en la regulacin de la temperatura.
En el equilibrio cidobase.
En el equilibrio osmtico.
PLASMA: es una solucin acuosa 90% de agua y un 10% de compuestos inorgnicos como
sales minerales (cloruro sdico y cloruro potsico).
La funcin de las sales es la de conferir una cierta presin osmtica al plasma.
Tambin hay compuestos orgnicos, como glcidos, aminocidos, hormonas, vitaminas y
protenas plasmticas.

Entre las protenas est la albmina, que es la ms abundante y con mayor peso molecular.
La albmina se sintetiza en el hgado continuamente
Las globulinas son otro conjunto de protenas de peso molecular variable. Dentro de ellas se
distinguen:
Gamma globulinas: forman la inmunoglobulina o anticuerpos,
Beta globulinas: protenas encargadas del transporte de hormonas e iones metlicos.
Existen unos factores plasmticos de la coagulacin, que son el fibringeno y la protrombina.

Eritrocitos o Glbulos Rojos


Son las clulas ms abundantes en sangre, en los mamferos han perdido el ncleo, complejo
de Golgi, mitocondrias, y centriolos.
Presentan forma de disco bicncavo, debido a la ausencia del ncleo.
Interviene en el transporte de oxgeno y bixido de carbono
La oxigenacin es en pulmones y luego recogen el CO2 del resto de los tejidos
Anemia
4,5 millones por mm3 en la mujer y de 5,5 millones por mm3 en el hombre, debajo del nivel
se produce la enfermedad: la anemia. Cuando hay una baja en la concentracin de
hemoglobina .Que puede ser por carencia de eritrocitos o hemoglobina
Vida 100 120 das
Leucocitos o Glbulos Blancos

Son clulas provistas de ncleo, con movimientos ameboides y de abandonar el torrente


sanguneo. Los leucocitos emigran continuamente desde la sangre hacia otros tejidos donde
realmente realizan su funcin
Se clasifican en cinco tipos segn tincin, morfologa nuclear y funcin. Numerosos de 5000
a 9000 por ml3 de sangre. Granulares y no granulares
Granulocito neutrfilo: El glbulo blanco es el ms abundante y represente del 50 a 70 %
leucocitos sangre perifrica. Tienen funciones bactericidas, fagocitan a las bacterias y luego
las degradan con sustancias enzimticas lipoliticas y proteolticas
Inflamacin aguda--- bacterias, virus protozoarios o patgenos multicelulares
Dao fsico por calor o frio, sustancias qumicas
Cuando existe dao por quemadura astillas sucias Daa tejido conjuntivo, los capilares se
inflaman y dejan escapar plasma hacia la zona afectada.
Neutrfilos pseudpodos paso aberturas temporales y escapan del vaso (diapdesis) hacia
las zonas donde estn proliferando las bacterias y las fagocitan.As los restos de las
bacterias y neutrfilos muertos constituyen la pus
Granulocitos eosinfilos. Proceden de precursores de la mdula sea. Al madurar son
liberados a la sangre, tardan tres a cuatro das en alcanzar los tejidos conjuntivos y all
permanecen hasta que mueren al cabo de doce das.
Los eosinfilos representan del 1 al 3% de la poblacin de leucocitos en sangre. Pero de cada
uno en sangre, hay 300 en el tejido conjuntivo. Son clulas de defensa contra procesos de
alergia
Granulocito Basfilo. Clula que se encuentra en muy baja proporcin en el organismo.
Nunca se ha observado en algunas especies. Por tanto no se sabe si no tienen o es que no se
han visto. En el hombre constituyen el 0,5% de los leucocitos. No se conoce su funcin
exacta se cree que intervienen en procesos alrgicos
Linfocitos: Representan del 20 al 45%. Son los leucocitos ms pequeos y poseen un
ncleo casi esfrico con escaso citoplasma. Vamos a encontrar en la sangre tres tipos de
linfocitos:
Los linfocitos pequeos, que son los ms abundantes.
Linfocitos medianos, los menos abundantes.

Y linfocitos grandes, escasos en la sangre pero abundantes en los rganos linfoides.


linfocitos T
linfocitos pequeos,
linfocitos B
Se diferencian en su origen y funcin, pero morfolgicamente son iguales.
Los T se producen en el timo durante el desarrollo embrionario y son capaces de reconocer
clulas extraas y reaccionan contra ellas.
Los B se originan en diversos rganos dependiendo del grupo de animales. Las aves, se
encuentran en las bolsas de Fabrizio (rgano linfoide). En los peces telesteos, en el rin.
En los anfibios y reptiles, en el hgado fetal y la mdula sea roja. En los mamferos se
encuentra en la mdula sea roja. Los linfocitos B reaccionan frente a un estmulo que libera
los anticuerpos. Por ello tambin se les llama clulas de inmunidad hormonal.
Monocito: Representan del 2 al 10% de los leucocitos. Son los que poseen mayor tamao.
El ncleo del monocito es ovoide en sus formas juveniles y arrionadas en sus formas
maduras. Existen unos monocitos que son mviles, emigran al tejido conjuntivo y se
convierten all en macrfagos, poniendo as en funcionamiento su funcin fagoctica.
OBJETIVOS

Realizar la tcnica de extensin o frotis sanguneo.

Reconocer las caractersticas de las clulas sanguneas y sus funciones.

Practicar la tcnica de tincin mediante el set de tincin rpida para frotis sanguneo
Diff-Quik.

INTRODUCCIN

Como todo tejido la sangre se compone de clulas y componentes extracelulares (su matriz
celular). Estas dos fracciones tisulares vienen representadas por:

Los elementos formes tambin llamados elementos figurados : son elementos


semislidos (es decir, mitad lquidos y mitad slidos) y particulados (corpsculos)
representados por clulas y componentes derivados de clulas.

El plasma sanguneo: un fluido traslcido y amarillento que representa la matriz


extracelular lquida en la que estn suspendidos los elementos formes.

Los elementos formes constituyen alrededor del 45% de la sangre. Tal magnitud porcentual
se conoce con el nombre de hematocrito (fraccin "celular"), adscribible casi en totalidad a
la masa eritrocitaria. El otro 55% est representado por el plasma sanguneo (fraccin
acelular).
Los elementos formes de la sangre son variados en tamao, estructura y funcin, y se
agrupan en:

las clulas sanguneas, que son los glbulos blancos o leucocitos, clulas que "estn
de paso" por la sangre para cumplir su funcin en otros tejidos;

los derivados celulares, que no son clulas estrictamente sino fragmentos celulares;
estn representados por los eritrocitos y las plaquetas; son los nicos componentes
sanguneos que cumplen sus funciones estrictamente dentro del espacio vascular.

Las tinciones hematolgicas son un conjunto de procesos que conducen a la coloracin de


las estructuras que componen las clulas sanguneas. Esto tiene por objeto el aumentar el
contraste entre esas estructuras y el medio que las rodea, y permite por tanto que las
clulas sean visual izadas microscpicamente con mayor facilidad.
La prctica del frotis sanguneo, tambin llamado extendido, es de gran importancia en
hematologa ya que el diagnstico de muchas enfermedades hematolgicas puede realizarse
con slo observar las caractersticas morfolgicas de las clulas sanguneas.
ANTECEDENTES
Paul Ehrlich, es el autor de la tincin que posibilit el mtodo diagnstico de la baciloscopa
el cual fundamento en el carcter alcohol-cido resistente a la decoloracin propio del bacilo,
para evidenciar utiliz cido ntrico y tio con violeta de genciana o fucsina, en presencia de
anilina disuelta en agua. Este genio alemn, naci el 14 de marzo de 1854 en Strehlen.
Silesia, fue siempre un gran aficionado a los colorantes y a las tinciones. De hecho su tesis

para recibir su ttulo de mdico, vers sobre la teora y la prctica de las tinciones de los
tejidos animales. l fue el primero que clasific los colorantes en cidos, bases y neutros, y
el mismo que revolucion las tinciones hematolgicas. En 1882 fue la fecha en que comienza
la inslita historia de la tincin.
Hoy en la actualidad la realizacin de extensiones y tinciones es prctica habitual en el
laboratorio. Pese a no realizarse a todas las muestras, al no ser considerado procedimiento
de rutina, es necesario en aquellos casos en los que se detecte mediante anlisis previos
alguna

alteracin.

La correcta realizacin, as como una buena interpretacin de lo observado, permite en


muchos casos el diagnstico de hematopatas.
OBTENCION Y TINCION DE UN FROTIS DE SANGRE
IDENTIFICACIN DE LAS CLULAS SANGUNEAS
TIPO CELULAR

ASPECTO

ERITROCITOS

Forma

TAMA

ABUNDANCI FUNCIONES

A RELATIVA

de

disco

7 m

bicncavo,
anucleado

700
de

por Transporte

cada

oxgeno

de
98%

s,

dan referenci leucocito

secundariamente

color

rojo a

CO2 25%

y,

la

sangre
LEUCOCITOS

1 por cada
700

GRANULOCITOS

eritrocitos
NEUTRFIL Ncleo con
OS

3-5 lbulos

Fagocitosis. Pueden

unidos por
un

~1 de cada 2 abandonar
12 m

Leucocitos

el

torrente circulatorio

filamento.

y penetrar en los

Granulaci

tejidos para realizar

all la fagocitosis.

muy

fina,
difcilment
e
perceptibl
e.
Ncleo con
dos
lbulos

Fagocitan

unidos por

complejos antgeno-

un

~3 de cada anticuerpo.
9 m

delgado
EOSINFIL
OS

los

filamento.

Su

100

nmero aumenta

Leucocitos

en

las

reacciones

Las

alrgicas

granulacio

y en las infecciones

nes

parasitarias.

acidfilas
dan

una

coloracin
rojiza

al

citoplasma
.
BASFILOS

Ncleo
voluminos

Contienen heparina

(anticoagulante)

bilobulado.

Los

(vasodilatador).

grnulos

12 m

histamina

~1 de cada Responsables de los

basfilos

200

cambios

son

Leucocitos

producidos

gruesos,
tien

en

vasos
el

sanguneos durante

citoplasma

los procesos

de

inflamatorios.

color

oscuro y

los

frecuente
mente
dificultan
la
observaci
n

del

ncleo.

Ncleo
esfrico

Producen

que ocupa

anticuerpos.

LINFOCITO

la

mayor

parte de la
clula.

~1 de cada 3 responsables
Leucocitos
6-8 m

del rechazo de los


injertos

Citoplasm
a

Son

los

trasplantes

muy

escaso.
Ncleo
ovoide, en

Fagocitosis.

forma de

vuelven muy

rin o de

activos despus de

herradura.
MONOCITO
S

Se

~1 de cada atravesar la
9-12 15

El ncleo
es

ms m

claro

que

Leucocitos

pared

de

los

capilares y penetrar
en

el

tejido

el de

conjuntivo.

los

Fagocitan

linfocitos

sobre

(cromatina

hongos y protozoos.

todo

virus,

menos
densa)
Anucleado

Forman

s.

cuando los

Esfricos,

vasos

ovales

3 m

Difcil

un

tapn

sanguneos

de son lesionados.

TROMBOCIT o
OS

estimar

Liberan

alargados.

por aparecer

tromboplastina, que

Aparecen

aglutinados

interviene

en

en grupos

formacin del

(aglutinad

cogulo,

os) en

serotonina

las

vasoconstrictor.

y
,

extensione
s.

Material
- Algodn
- Alcohol
- Lancetas estriles
- Portaobjetos
- Frascos de tincin
- Microscopio
Reactivos
- Set de coloracin rpida para frotis sanguneos Diff-Quik:

Solucin fijadora

Evita el deterioro de la estructura

(Fast Green en metanol)

celular

Solucin colorante I

Tie de rosa plido el citoplasma y

(Eosina G en tampn fosfato)

las granulaciones acidfilas

Solucin colorante II

(eosinfilas)
Tie de color azul-violeta oscuro

(Tiazina en tampn fosfato)

los ncleos de las clulas y


las granulaciones basfilas.

la

un

Procedimiento
Con un algodn empapado en alcohol limpia el dedo que te vayas a pinchar.
Coge una lanceta estril por el extremo en el que no est el pincho, para que se
mantenga estril y pnchate en la yema del dedo. El pinchazo debe ser profundo, de tal
manera que la sangre salga por simple flexin de la falange, sin necesidad de apretar. Una
vez recogida la sangre necesaria vuelve a limpiar el dedo con el algodn mojado en alcohol.
Deposita una gota de sangre en un extremo del porta.
Para realizar el frotis (extensin) se procede como indica el dibujo.

A. Deposita una pequea gota de sangre en un extremo del portaobjetos. Si la cantidad de


sangre es excesiva las clulas quedarn apelotonadas en la extensin y ser difcil
observarlas.
Coloca el segundo portaobjetos formando un ngulo de unos 45 con el primero y
asegurndote de que apoya todo el borde.
Desliza lentamente el portaobjetos hacia la gota de sangre hasta que entren en contacto.
Vers como la sangre se extiende por el borde.

B. Desliza ahora el porta en el sentido contrario en un movimiento rpido y procurando que


no pierda el contacto con el otro.
C. Todo el procedimiento se debe realizar apoyado en la mesa y sujetando el porta como
indica el dibujo.
D. Deja secar el frotis al aire antes de comenzar el proceso de tincin.
Sumerge el portaobjetos con la extensin de sangre durante un segundo en la solucin
fijadora, djalo escurrir y vuelve a sumergirlo durante otro segundo y repite el procedimiento
hasta haber completado diez inmersiones de un segundo.
Repite el procedimiento con las soluciones colorantes I y II. Es importante que no se altere
el orden de los colorantes, ya que, de otra manera, no se obtendra el resultado esperado.
Debes evitar tambin la contaminacin de unos lquidos con otros.
Por ltimo debe lavarse el exceso de colorante con abundante agua. El chorro de agua no
debe ser fuerte, para evitar que arrastre las clulas sanguneas. La mejor manera es colocar
el porta inclinado y dejar caer un pequeo chorro de agua sobre el extremo superior.

Observacin

Las clulas ms abundantes son, con gran diferencia, los eritrocitos. Son clulas anucleadas
y quedan teidos de color anaranjado plido. Se puede observar distinta intensidad de
coloracin entre el centro y la periferia, debido a su forma caracterstica de disco bicncavo.
Si recorremos la extensin lentamente, de vez en cuando nos llamarn la atencin los
leucocitos, generalmente ms grandes que los eritrocitos y con sus ncleos intensamente
teidos de color azul violeta.
Utiliza el cuadro de los elementos formas de la sangre para intentar identificar los distintos
tipos de leucocitos; los rasgos que te van a ser ms tiles en la identificacin son: el tamao
de las clulas, que podrs determinar por comparacin con los glbulos rojos, la forma del
ncleo y la coloracin del citoplasma.
Las plaquetas son difciles de identificar porque se confunden con partculas de polvo u otras
impurezas que aparecen dispersas por la extensin, pero son bastante abundantes.
Dibujos
Dibuja los tipos celulares que observes, calcula su tamao aproximado utilizando como
referencia el de los glbulos rojos e indica el nmero de clulas de cada tipo que has podido
ver. Seala qu rasgos te han permitido identificar cada tipo de clula. No olvides poner
junto a cada dibujo los aumentos con los que has realizado la observacin.
DIBUJO

ERITROCITOS

Tamao Aproximado:
7 m
Objetivo de 100x

OBSERVACIONES:
Se observaron globulos rojos en forma de
ficha

tambin

llamados

crenados.

Los

glbulos rojos tenan una coloracin color


salmn,todos tenan el mismo tamao, se
apreciaba su concavidad central y su forma
circular bien definida,existen en mayor
cantidad, en la parte donde se concentr
mayor cantidad de sangre los eritrocitos se
apelmazaron dando la apariencia de pila de
monedas.
Algunas plaquetas de tamao muy pequeo
en comparacin con el eritrocito y se

observan sin ningn ncleo con un color


uniforme azul intenso.

DIBUJO

NEUTRFILOS

Tamao
Aproximado:21 m
Objetivo de 100x

OBSERVACIONES:
Se

aprecia

aunque

semejante

en

granulaciones

su

al

eosinofilo

citoplasma

son

menos

las
en

comparacin con el eosinofilo, es un


color menos intenso, un tono ligero como
naranja

pardo.

Con

un

ncleo

azul

dividido en una parte muy delgada o


segmento , cuando es segmentado y
cuando es banda su ncleo es ms
grueso y no presenta esa divisin, la
imagen

muestra

un

neutrfilo

segmentado

DIBUJO

LINFOCITOS

Tamao

Aproximado:

12 m
Objetivo de 100x

OBSERVACIONES:
Linfocito presenta un citoplasma con un color
azul claro y un ncleo que cubre toda la clula
color azul intenso. De un tamao mayor que el
eritrocito.

DIBUJO

MONOCITOS

Tamao

Aproximado:

21 m
Objetivo de 100 x
OBSERVACIONES:
El monocito se ve de gran tamao, presenta un
citoplasma de un tono ms claro que el
linfocito, color azul celeste, con un ncleo muy
grande en forma de rin de un tono color lila
o morado claro, sin grnulos en su citoplasma.

DIBUJO

EOSINFILOS

Tamao

Aproximado:

17 m
Objetivo de 100 x
OBSERVACIONES:
El eosinofilo presenta un color ligeramente
anaranjado o salmonado en el citoplasma con
abundantes grnulos y un ncleo azulado

DIBUJO

BASFILOS

Tamao

Aproximado:

17 m
Objetivo de 100 x

OBSERVACIONES:
El basfilo presenta abundantes grnulos en su
citoplasma, y ncleo grande color morado ms
oscuro que el citoplasma.

Cuestiones
Adems de los formes que aparecen en la tabla anterior, qu otros componentes
constituyen la sangre? Plaquetas, factores de coagulacin, glcidos, aminocidos, hormonas,
vitaminas y protenas plasmticas.
Dnde se forman las clulas sanguneas? En la medula sea (tejido en el interior de los
huesos como el crneo, las costillas el esternn, las vrtebras los huesos de la cadera y los
extremos de los huesos largos)
Conclusiones
Las clulas sanguneas realizan distintas funciones y presentan gran variedad en su
morfologa lo que facilita su reconocimiento. Son muy importantes para el organismo, son
producidas en la medula sea que se encuentra en el interior de los huesos. Presentan varias
etapas de maduracin que dependiendo en la etapa en la que se encuentren ser su
morfologa.
Bibliografa
http://udlasistemabiologico.blogspot.mx/2010/09/celulas-sanguineas-y-su-funcion.html
http://www.aeal.es/index.php/la-medula-osea/tipos-de-celulas-sanguineas-que-se-generanen-la-medula-osea

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