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MEDIO DE CULTIVO

COMPOSICION G/LITRO

CALDO TETRATIONATO
( ENRIQUECIDO
SELECTIVO)

.Peptona de casena
2,5
.Peptona de carne
.Mezcla de sales biliares
.Carbonato clcico
10,0
.Triosulfato Sodico
Aditivos:
.Yoduro Potasico
.Yodo
6,0
.Eventualmente Verde
Brillante
0,01

AGA BILIS ESCULINA

MEDIO LOWESTEIN
JENSEN
Selectivo enriquecido
Crecimiento mycobacteria

2,5
1,0

USO

INTERPRETACION

Para el enriquecimiento de
salmonellas, a partir de diversos
materiales de investigacin

Sembrar masivamente en el medio de cultivo con el


material de muestra.
Incubacion: 18-24 Horas a 37Grados C o a 43 C.
Los cultivos desarrollados deben ser investigados
posteriormente..

30
5,0

. Extracto de Carne
.Peptona de carne
. Bilis de Buey
40,0
. Esculina
1,0
. Eltiato Ferrico
. Agar
15,0

Dihidrogenofosfato potsico
2,5
Sulfato de magnesio
heptahidratado
0,24
TRi-citrato de Magnesio-14
hidratado
0,6
LAsparagina

3,0
5,0

Medio utilizado para el


aislamiento e identificacin
presuntiva de estreptococos del
grupo D

Sembrar el material de estudio, en tubo o placa segn la


preferencia
Incubacion: hasta 3 dias a 35-37 grados C en aerobiosis.
Medio preparado: ambar u oscuro ligeramente opalescente.
El medio con esculina tiene un tinte azulado.

0,5

Para la demostracin y ensayo de


resistencia de bacterias de la
tuberculosis segn LOWESTEIN
1931, modificado por JENSE 1932

Sembrar masivamente el medio de cultivo por estria en


superficie, cerrar hermticamente los tubos
Para el cultivo micobacterias glicerofobas se utiliza el medio
de cultivo sin glicerina.
Incubacio: hasta 12 semanas a 37 Grados centgrados
Al cabo de 10-14 dias y despus semanalmente se
inspecciona el medio de cultivo en cuanto a crecimiento de
colonias
Ventilar cuidadosamente los cultivos.

3,6
Fecula de papa
30,0
Verde Malaquita inhibidor
0,4
Aditivos:
Glicerina
12 ml
Homogeneizado de huevo
Entero
1 lt

Microorganismos: mycobacterium tuberculosis typus


humanus variante R
Colonias: sobre el medio conteniendo glicerina, crecimiento
umbiliforme eugonico es decir frondisi, prominente, con
aspecto de pastel, seco, casi siempre amarillento, de
desarrollo limitado si se cultiva sobre un medio similar
excento de glicerina

MEDIO LOWESTEIN JENSEN

MEDIO THAYER MARTIN


( selectivo)

Proteosa peptona
D (+)- glucosa
Almidon soluble
Hidrogenofosfato
Dipotasico
Dihidrogenofosfaot
Potsico
Cloruro sdico
Agar- agar

15,0
1,0
1,0
4,0
1,0
5,0
12,0

Para el aislamiento selectivo de


Neisseria gonorrhoeae y
Neisseria meningitis a partir de
material clnico de investigacin
segn Thayer y Martin1964, 1966
Este medio de cultivo tambin es
adecuado para el transporte de
material sembrado, es adecuado
sobre todo para material
contaminado por flora
acompaante ( por ejemplo frotis

Microorganismos: tipo bovinus ( variante s)


Colonias: sobre el medio conteniendo glicerina, nicamente
crecimiento limitao sobre el medio excento de glicerina,
crecimiento disgonico es decir colonias aplanadas
( frecuentemente en forma de Pezon) lustrosas, confluentes
y sin formacin de pigmento.
Microorganismos:
. Typus Galinaceus
.Typus poikilothermarum.
Colonias: crecimiento rpido en forma de csped hmedo
bastante frondoso.
Temperatura Optima 41 a 42 Graods C typus gallinaceus
Temperatur optima a 25 grados centgrados typus
poikilothermorum.
Calentar previamnte el medio de cultivo durante unos 80
min en estufa a 37 Grado C. luego se siembre con el
material objeto de ensayo y se incuba hasta 48 horas en
cmara humedad en atmosfera que contenga 5-10% de
C02, obtenible con angercult.
Las colonias crecidas se somenten individualmente a
investigacin para su identificacin exacta.
Algunos driterios diagnosticos importante:
1. Morfologa tpica de las colonias que se presentes
aisladas.
2. Ensayo de oxidasa con bactident, oxidasa ( neisseria

vaginales o farngeos)

AGAR BAIRD PARKER


Telurito y cloruro
inhibidores
El telurito se reduce a
teluro y toma de color
marron a negro
Yema por accin de la
leutiniara se convieryte en
lecitina

AGAR CETRIMIDE

Peptona de casena
10,0
Extracto de carne
5,0
Extracto de levadura
1,0
Piruvato sdico
10,0
Glicina
12,0
Cloruro de litio
5,0
Agar- agar
15,0
ADITIVOS
Emulsion de yema lecitina de
huevo telurito
50 ml
Eventualmente
sulfametacina
0,05g

Para el asilamiento y la
diferenciacin de estafilococos en
alimentos y materiales
farmacuticos segn BAIRD
Parker 1962

Peptona de gelatina
Cloruro de magnesio
Sulfato potsico
10,0
N-Cetil,N,Ntrimetilamoniobromuro
(cetilmide)
0,3
Agar-agar
13,0

Para el asilamiento y la
diferenciacin de pseudomonas
aeruginosa a partir de diversos
materiales, segn Brown y
Lowbury 195 modificado

20,0
1,4

es oxidasa-positiva)
3. Tincin de frotis segn GRAM con el equipo de
colorantes GRAM-color ( las neisserias son diplococos
gram Negativas)
4. Ensayos de fermentacin.
Diluir convenientemente el materiala investigar y extenderlo
finalmente sobre la superficies del medio de cultivo.
Incubacion desde 24 a 48 horas a 37 grados centgrados.
Microorganismo: staphylococcus aureus.
Colonia: negras, lustrosas, convexas 1 a 5 mm de dimetro
con borde estrecho blanquecino rodeado por un halo claro
de 2 a 5mm de anchura dentro de halo claro presencia de
anillos opacos no visibles antes de las 48 horas de
incubacin.
Microorganismo: staphylococcus epidermis.
Colonia: negras, lustrosas pero de forma irregular al cabo de
24 horas, presencia de zonas opacas alrededor de las
colonias
Microorganismo: Micrococcus
Colonia: crecimiento ocacional, muy pequeas, pardas hasta
negras, ausencia de halos clarificacin.
Microorganismo: bacilos
Colonia: pardo-obscuras, mates, presencia a veces de halos
de clarificacin al cabo de 48 horas
Microorganismo: levaduras, colonias blancas sin halos de
clarificacin.
Sembrar las placas en superficies.
Incublacion: hasta las 48 horas a 42 grados C, pues a esa
temperatura crecen escamosamente muchos de los
grmenes que forman la flora de acompaamiento.
Las colonias pseudominas aeruginosa forman un pigmento
verde-azulado ( piocianina) y son fluorescentes a las luz UV.
Para la identificacin definitiva, deben incluirse en la preuba
otras investigaciones.

Aditivo:
Glicerina
10ml

AGAR DNASA

Triptosa
20,0
Cloruro sdico
5,0
Acido desoxirribonucleico 2,0
Agar-agar
15,0

Para la demostracin de la DNAsa


( desoxirribonucleasa) formada
microbianamente segn el
mtodo de Jeffries y col 1957
para la identificacin de
microrganismos sobre todo
estafilococos DNasa positivos

Sembrar en superficies por estria, el agar de ensayo con un


cultivo puro del material sometido a investigacin sobre la
misma placa puede sembrarse varias cepas enforma de
bandas paralelas o por sectores
Incubacin: bajas condiciones optimas en caso de
estafilococos de 18 a 24 horas a 37 grados C.
Microorganismos: manitol positivas
Coloni: amarillas con zona amarillas a su alrededor
Microrganismos: manitol negativos
Colonia: incoloras o del color del medio de cultivo
Microorganismos: Dnasa positivos
Colonias: HCL 1N: halos de aclaramiento perfectamente
delimitados, contrastando con el medio de cultivo turbio
Microorganismos: Dnasa negativos.
Colonia: sin formacin de halo

AGAR LIA

Peptona de carne
5,0
Extracto de levadura
3,0
D(+) glucosa
1,0
L-lisina monoclorhidrato 10,0
Tiosulfato sdico
0,04
Citrato de amonio y hierro 0,5
Purpura de bromocresol 0,02
Agar agar
12,5

Agar de ensayo para la


demostracin simultanea de
lisina de carboxilasa (LD) y de la
formacin de acido sulfihidrico
(H2S) para la identificacin de
enterobacteriaceas, sobre todo
de salmonellas y Arizona segn
EDWARS y FIFE 1961

En este medio nutritivo se siembra con el cultivo puro


sometido a ensayo tanto por estria sobre la superficies
inclinada como por picadura central en la columna vertical
subyacente
Uncubacion: 16-18 horas a 37 grados C

CALDO RM-VP

Peptona de carne 7,0

Medio de cultivo de ensayo para

Sembrar 2 tubos de caldo de RM-VP con el cultivo puro

D(+) glucosa
Tapon de fosfatos

AGAR CZAPEK DOX

AGAR SABOURAUD
GLUCOSA 2%

5,0
5,0

Sacarosa 30,0
Nitrato sdico 3,0
Sulfato de magnesio 0,5
Cloruro potsico
0,5
Sulfato de hierro (II) 0,01
Hidrogenofosfato dipotasico
1,0
Agar-agar
13,0
Peptonas
10,0
D(+)-glucosa 20,0
Agar-agar
17,0

la realizacin de la prueba rojo de


metilo ( CLARK y LUBS 1915) y
del ensayo de ( VOGES
PROSKAUER) 1898) para la
diferenciacioin bioqumica,
especialmente del grupo Coliaerogenes

objeto de investigacin
Incubacin: hasta 4 dias a 37 grados C
Luego se realizan los ensayos:
Prueba de rojo de metilo aadir al primer tubo unas 5 gotas
de la solucin indicadora de rojo metilo.
Reaccin cromtica: de anaranjado a rojo
Microrganismos: eschericia coli, citrobacter y otros
Reaccion cromtica: de anaranjado a amarilla
Microrganismos: enterobacter aerogenes y enterobacter
cloacae y otros
Reaccin cromtica: rojo ( positivo)
Microrganismos: enterobacter aerogenes, enterobacter
cloacae y otros.
Reaccin cromtica: eschericia coli, citobacter y otros
Microrganismos: sin reaccin ( negativo)

Agar selectivo para el cultivo de


hongos y bacterias del suelo
segn CZAPEK 1902-1903) y DOX
1910

Sembrar en superficies en estension delgada el medio de


cultivo
Incubacin: generalmente de 1 a 2 semanas a 25 grados C.
La temperatura optima de incubacin para penicillum es de
20 a 25 grados C para aspergillus de 30 grados C y para
candia de 28 grados C

El medio de cultivo ha sido


recomendado por JANKE 1961
para el cultivo de desmatofitos,
adems es adecuado para el
ensayo de sensibilidad de hongos
( FRUH 1985), GEORG y co 1954
han recomendado aadir
cicloheximida, penicilina y
estreptomicina para inibir los
grmenes acompaantes no
patgenos.

Las placas se siembran de acuerdo a las prescripciones con


el material de muestra.
Las colonias de hongos crecidas se evalan macro y
microscopicamnete.