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DIRECTORIO:
DR. JUAN RAMN DE LA FUENTE
RECTOR
LIC. ENRIQUE DEL VAL BLANCO
SECRETARIO GENERAL
DR. LUIS ALBERTO ZARCO QUINTERO
DIRECTOR DE LA FACULTAD DE MEDICINA
VETERINARIA Y ZOOTECNIA
DR. JORGE CRDENAS LARA
SECRETARIO GENERAL DE LA FACULTAD DE MEDICINA
VETERINARIA Y ZOOTECNIA
DR. GERMAN VALERO ELIZONDO
JEFE DE LA DIVISIN DE EDUCACIN CONTINUA
DR. FERNANDO CONSTANTINO CASAS
JEFE DEL DEPARTAMENTO DE PATOLOGA
Autor(es)
En la elaboracin de este manual participaron:
Dr. Jan Bouda
MC PC Rosa Mara Garca Escamilla
MVZ. Luis Enrique Garca Ortuo
MVZ MES S. Genaro Jardn Herrera
MVZ. Esp. Araceli Lima Melo
MVZ Esp. MC. Rosa Luz Mondragn Vargas
MVZ Esp. MC. Gerardo Quiroz Rocha
MVZ. Esp. Guadalupe Ramrez D.
MVZ MSc. Hedberto Ruiz Skewes
Editor
MVZ MES S. Genaro Jardn Herrera
Primera edicin electrnica (2003)
Divisin de Educacin Continua
Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia
Universidad Nacional Autnoma de Mxico
Ciudad Universitaria
Mxico D. F.
ISBN:
Diseo de portada
MVZ Gerardo N. Valdivieso Navarro
Edicin electrnica
MVZ Gerardo N. Valdivieso Navarro
MVZ MPhil. MC Germn Valero Elizondo
Revisin Tcnica
Dr. Fernando Constantino Casas
PRLOGO
MANUAL DE PRCTICAS
PATOLOGA CLNICA
MVZ MES S. Genaro Jardn Herrera
Introduccin
El estudio de las enfermedades ha evolucionado notablemente, respecto
de la Patologa Clnica, las pruebas que tardaban varias horas en realizarse, hoy
se realizan rpido en micromtodos en equipos automatizados, lo que significa
que se ha avanzado en el ahorro de tiempo y reactivos. Lo mismo sucede con la
confiabilidad de los resultados obtenidos.
Respecto de la educacin y en general del proceso enseanzaaprendizaje, han aparecido nuevas tecnologas como Internet, correo
electrnico,
realidad virtual, sistema multimedia; herramientas y medios
disponibles, que los profesores pueden utilizar para la imparticin de clases,
tanto tericas como prcticas en un ambiente ms actual y acorde con la
realidad en que viven y se desarrollan los educandos.
El proceso del aprendizaje se constituye de los siguientes pasos:
presentacin de contenidos por el profesor, donde presenta los contenidos
utilizando el lenguaje oral, escrito y en ocasiones imgenes, adems de los
medios que considere necesarios para cada tema del programa. Los estudiantes
perciben los mensajes emitidos por el profesor utilizando sus sentidos, a
continuacin los mensajes son captados y almacenados. El siguiente paso
consiste en encontrar la informacin en nuestro sistema mental, para luego
continuar con su aplicacin y solucin de algn problema que se le presente a la
persona que esta aprendiendo. El proceso anterior supone que para llevar a
cabo el aprendizaje necesariamente requiere de la aplicacin del conocimiento
adquirido, captado y almacenado, en este sentido, el aspecto prctico del
aprendizaje es insustituible por formar parte de l.
Con la finalidad de lograr mejores resultados en el proceso enseanzaaprendizaje, es que el conocimiento adquirido durante las sesiones tericas
debe ser llevado a la prctica, donde los alumnos tienen la oportunidad de poner
en prctica los conocimientos adquiridos; siguiendo esta metodologa el proceso
puede lograr mejores resultados, ya que el aprendizaje se vuelve ms
significativo.
El objetivo del presente manual es proporcionar a los estudiantes las
prcticas que se desarrollaran durante el curso de Patologa Clnica en la
Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Nacional
Autnoma de Mxico, as dispondrn de informacin acerca de los diferentes
pasos de cada una de ellos.
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CONTENIDO
Autor(es) ................................................................................................................................. 3
PRLOGO.............................................................................................................................. 4
CONTENIDO .......................................................................................................................... 5
Prctica 1.-REAS DEL LABORATORIO Y ANALITOS DETERMINADOS (Jardn Herrera S. G.) .... 6
Prctica 2.-OBTENCIN Y MANEJO DE MUESTRAS SANGUNEAS EN DIFERENTES
ESPECIES ANIMALES (Quiroz Rocha G. y Bouda J.) ............................................................................................................ 11
Prctica 3.- CENTRIFUGACIN Y MANEJO DE MUESTRAS (Lima Melo A.) ............................ 22
Prctica 4.- MICROHEMATCRITO (Jardn Herrera S. G.) ............................................................ 26
Prctica 5.- DETERMINACIN DE PROTENAS Y FIBRINGENO POR
REFRACTOMETRA (Jardn Herrea S. G.) ..................................................................................... 28
Prctica 6.- CUENTA DE ERITROCITOS Y LEUCOCITOS (Mondragon Vargas R.L.) ..................... 30
Prctica 7.- PREPARACIN Y TINCIN DE FROTIS SANGUNEOS (Jardn Herrera S. G.) ........ 33
Prctica 8.- DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS, ESTIMACIN DE PLAQUETAS,
CORRECCIN DE CUENTA DE LEUCOCITOS, MORFOLOGA DE ERITROCITOS ... (Jardn
Herrera S. G.)............................................................................................................................................................................................
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LQUIDO
Fig. 7. Tincin.
Urianlisis
Para la realizacin del estudio de la orina se requiere de microscopio
ptico, centrifuga (3000 rpm), tiras reactivas para la evaluacin del examen
qumico (pH, protena, glucosa, cetonas, bilirrubina, urobilingeno, sangre,
nitritos), refractmetro de Goldberg para determinar densidad urinaria; tambin
se hace uso de la tcnica de cido sulfosaliclico para la determinacin de
protenas.
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Color
27(insulina)
25
Naranja
Azul
Animales de laboratorio
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21
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18
16
14
Negro
Verde
Amarillo
Rosa
Blanco
Azul
Puncin cardiaca
Equino
Cerdo Ovino
X
Caprino Peces
Reptiles
Animales de
laboratorio
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
Peces
Aves
Reptiles
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Procedimiento:
Toma de muestras sanguneas
Sistema de tubos con vaco (VACUTAINER).- Es
conveniente seguir las instrucciones que marcan los
fabricantes. Se requiere de cierta prctica para hacer un
manejo eficiente. En este sistema es
importante que si se utiliza algn tipo
de anticoagulante, el tubo debe ser
llenado al volumen indicado; es decir
hasta que el vaco se termine, ya que
de no hacerlo las proporciones
Fig. 26. Sistema VACUTAINER.
sangre/anticoagulante
se
vern
alteradas y con ello los resultados.
Esto puede suceder cuando se sangran animales muy
deshidratados o que se mueven mucho, por lo cual no es Fig. 27. Sistema de
posible llenar el tubo apropiadamente, en estos casos se tubos con vaco.
recomienda utilizar otro sistema de extraccin de la muestra.
Adems, es conveniente que se evite que la sangre golpee contra el fondo del
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tubo, ya que esto causa hemlisis. Se debe dirigir el chorro de sangre hacia las
paredes.
Jeringa.- Debe cuidarse que no se haga un vaco muy violento, tambin es
conveniente utilizar calibre de aguja adecuado dependiendo de la especie y talla
del animal, as como el vaso a puncionar (Cuadro 1).
En caso de que se utilicen jeringas con anticoagulante, se recomienda
que este se encuentre en forma lquida, con el objetivo de que mezcle
adecuadamente. Si se va a transferir la sangre a otro recipiente, debe quitarse la
aguja de la jeringa para evitar hemlisis en la muestra.
Fig. 28. Muestreo sanguneo con aguja y jeringa.
De v. caudal en pez
De v. yugular en tortuga
De v. coccgea en tortuga
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BIOQUMICA CLNICA
En forma rutinaria los laboratorios clnicos pueden utilizar suero o plasma
para las determinaciones bioqumicas. El uso del suero es el ms difundido para
este tipo de determinaciones, aqul se obtiene a partir de una muestra de
sangre extrada sin anticoagulante (tubo con tapn rojo), esperando el tiempo
necesario para la formacin y retraccin del cogulo. El promedio de tiempo de
formacin del cogulo es de 30 a 60 min para la mayora de las especies; para
el caso de los rumiantes, el tiempo que se requiere, es de entre 1 a 3 horas, por
esta razn es ms prctico y exacto enviar al laboratorio muestras de plasma
empleando la heparina de sodio o litio como anticoagulante para solicitar ese
tipo de determinaciones.
Si se va a obtener suero, es necesario dejar la sangre en reposo a
temperatura ambiente, es decir 15 - 25 C, para la adecuada formacin del
cogulo. Una vez formado aqul, debe ser separado de las paredes del tubo o
jeringa donde se obtuvo la muestra. Esto se puede hacer utilizando un palillo
largo de madera o una pipeta Pasteur; posteriormente centrifugar durante 10 min
y transferir dicho suero inmediatamente a otro tubo limpio. No se debe tratar de
centrifugar, ni colocar la muestra en refrigeracin antes de que est el cogulo
bien formado, ya que estos manejos provocarn que se prolongue el tiempo de
coagulacin y exista predisposicin a hemlisis en la muestra y con lo cual ser
inadecuada para su evaluacin.
Para llevar a cabo anlisis bioqumicos (glucosa, Na, K, Cl, P,
bicarbonato, actividad de enzimas), es necesario separar el suero del cogulo o
el plasma de las clulas dentro de un perodo de 1 hora (mximo de 2 h)
despus de tomada la muestra, debido a que si el tiempo es mayor, las
concentraciones de los analitos a medir variarn como consecuencia de un
intercambio entre las fases celular y lquida de la sangre. Esto no es importante
en el caso de muestras sricas para exmenes inmunolgicos.
Una vez separado el suero o plasma es conveniente analizar de
inmediato (especialmente en el caso de la glucosa), de no ser as, es
conveniente conservarlo a temperatura de refrigeracin (0-4 C). Cuando no sea
urgente la obtencin de los resultados, como en el caso de que se quiera hacer
una investigacin o conocer el estado fisiolgico de un animal o poblacin en
particular, es posible enviar las muestras congeladas, -8 a -20 C, ya que en
trminos generales la gran mayora de los analitos son estables al menos una
semana a estas temperaturas. Es recomendable que cuando se quiera recurrir a
este procedimiento se consulte a un bioqumico clnico antes de hacerlo ya que
aunque pocas, s existen algunas determinaciones inestables como la sorbitoldeshidrogenasa (SDH).
La forma de obtener el plasma, especialmente en casos de urgencia, es
tomando las muestras de sangre empleando heparina de litio o heparina de
sodio (tubo con tapn verde) como anticoagulante. La proporcin requerida es 3
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B) Pruebas de coagulacin
Para la preservacin de estas muestras se emplean los citratos como
anticoagulantes, principalmente la sal de sodio, aunque tambin se puede usar
la de potasio. La proporcin que se debe emplear es de 9 partes de sangre por 1
parte de citrato de sodio al 3.8% (tubo con tapn azul). La muestra se debe
mezclar con suavidad al menos 10 veces. Si la muestra se trabajara despus de
1 hora, es recomendable centrifugarla a 3000 rpm durante 10 min, se obtiene el
plasma en tubos de plstico y se mantienen en congelacin. Las muestras
debern ser procesadas en un tiempo mximo 3 horas.
Se puede enviar la muestra de sangre entera al laboratorio o enviar slo
el plasma, previa centrifugacin durante 10 min. La muestra debe ser
centrifugada dentro de las primeras 2 horas de tomada la muestra y no debe
exceder a 3 horas el tiempo de procesamiento.
Determinacin del estado cido-base
La gasometra es una tcnica de gran utilidad diagnstica y teraputica.
La aplicacin prctica de esta prueba est en funcin al equilibrio cido-base,
por lo cual se emplea como estudio prequirrgico, sobre todo cuando se usa
anestesia inhalada, en las patologas que afectan la ventilacin pulmonar o la
funcin renal, situaciones de deshidratacin, en la deteccin de problemas
subclnicos de tipo metablico.
Para evaluar el equilibrio cido-base se pueden emplear los sitios de
coleccin descritos anteriormente. Normalmente para el diagnstico correcto del
equilibrio cido-base es suficiente enviar sangre venosa, pero si se quiere
evaluar el intercambio gaseoso a nivel pulmonar se debe enviar sangre arterial;
por ejemplo, cuando se emplea anestesia inhalada.
La determinacin debe hacerse en sangre con anticoagulante (heparina
de litio o de sodio) entre las primeras 3 horas posteriores a la toma de la
muestra.
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Las
muestras
anticoagulante.
deben
ser
obtenidas
sin
2.
3.
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4.
5.
6.
7.
8.
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Plasma
Material:
Una muestra sangunea con anticoagulante, mnimo 3 mL
Un tubo de ensaye al vaco de vidrio de 5 a 10 mL
Una centrfuga convencional de 1000 a 3000 rpm
Una centrifuga Eppendorf de 10,000 a 15,000 rpm
Una pipeta Pasteur, serolgica o automtica
Un tubo Eppendorf
Procedimiento:
1. Las muestras para obtener plasma deben ser obtenidas utilizando
anticoagulante (ej.: heparina).
2. Se deben centrifugar a 3000 rpm por 10 minutos, en centrfuga Eppendorf
2 min.
3. Se separa el plasma utilizando una pipeta Pasteur o pipetas automticas
en alcuotas de 4 mL en tubos Eppendorf.
4. Congelar.
Tiempos de coagulacin
Material:
Una muestra sangunea tratada con citrato de sodio al 3.8 % , relacin 1:9
Un tubo al vaco con recubrimiento de silicn
Una centrfuga convencional de 1000 a 3000 rpm
Una pipeta Pasteur, serolgica o automtica
Procedimiento:
1. Para determinar tiempos de coagulacin: Tiempo de Protrombina (TP) y
Tiempo parcial de tromboplastina activada (TPTa) es necesario obtener
las muestras con citrato de sodio al 3.8%, en una relacin de nueve
partes de sangre y una de anticoagulante
2. Los tubos deben tener recubrimiento de silicn para evitar la activacin de
los tiempos de coagulacin con el vidrio
3. Centrifugar inmediatamente a 3000 rpm por 10 min.
4. Separar el plasma con ayuda de una pipeta Pasteur o de pipetas
automticas, en alcuotas, en tubos plsticos de 1 mL
5. Congelar inmediatamente
Nota: es importante no hemolizar las muestras debido a que ello interfiere con la
lectura de los tiempos de coagulacin. Todas las determinaciones deben
efectuarse por duplicado y realizar simultneamente con una muestra de un
testigo clnicamente sano. Se debe recordar que son 3 horas como mximo,
despus de tomar la muestra para la evaluacin de los tiempos de coagulacin.
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Manejo de muestras:
Las muestras se deben identificar con el nombre del paciente, raza, edad,
gnero, hora y fecha de muestreo. Se anota la anamnsis, los hechos relevantes
como diarrea, vmito, anorexia, hiporexia, das de duracin, adems de indicar
los tratamientos, por ejemplo: terapia de lquidos, corticoterapia, transfusin
sangunea, etctera.
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La solucin que diluye los leucocitos es cida para lizar los eritrocitos
cido actico glacial denominado Solucin de Turk. El diluente para eritrocitos
debe ser isotnico, la solucin ms utilizada es la de Hayem.
Objetivo:
Qu los alumnos aprendan a realizar cuentas manuales de eritrocitos y
leucocitos.
Material:
Una muestra de sangre con anticoagulante (EDTA), mnimo 3 mL
Una pipeta de Thoma para cuenta de leucocitos (dilucin 1:20)
Una pipeta de Thoma para cuenta de eritrocitos, (dilucin 1:200)
Una cmara de Newbauer cuenta glbulos o hemocitmetro
Un cubreobjetos especial (cubre hematmetro)
Algodn o papel higinico para limpieza de pipetas
Solucin para diluir la sangre (isotnica de cloruro de sodio, Hayem, Turk)
Una pieza de caucho para conectar la pipeta
Un contador de clulas de una tecla
Un microscopio ptico
Procedimiento:
Los pasos que se han de seguir para la cuenta de clulas hemticas, se
refieren de manera general a continuacin, considerando que para cada tipo
celular (eritrocitos y leucocitos) se requiere slo un tipo de pipeta con diferente
capacidad como ya se mencion, adems de una solucin distinta para cada
caso.
1.- Mezclar la muestra de sangre gentilmente (por lo menos 20 veces) o
utilizando un homogenizador.
2.- Coloque un tubo de caucho en la pipeta de Thoma correspondiente (la de la
marca 101 para cuenta de eritrocitos, y la de la marca 11 para cuenta de
leucocitos).
3.- Introducir la punta de la pipeta en la muestra de sangre y mediante succin
suave llenar la pipeta hasta la marca 0.5.
4.- Se limpian las puntas de las pipetas en su parte externa con algodn,
cuidando de no extraer la muestra.
5.- A continuacin, se termina de llenar la pipeta hasta la marca superior al bulbo
(101, o 11 dependiendo del caso).
6.- Colocar la pipeta en posicin horizontal y se tapa la punta con un dedo antes
de retirar la pieza de caucho.
7.- La pipeta debe agitarse de 2 a 3 min., de preferencia en un agitador
mecnico. Si no se cuenta con este recurso, manteniendo la pipeta en posicin
horizontal basta con tapar ambos extremos de la pipeta con los dedos medio y
pulgar, formando una curva (ocho) con movimientos de la mueca.
8.- En el caso de cuenta de eritrocitos, se elimina por lo menos una tercera parte
del contenido de la pipeta, con lo que se elimina el lquido de la porcin capilar
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Objetivo:
Que los alumnos aprendan a identificar los diferentes tipos de leucocitos.
Material:
Procedimiento:
Los alumnos utilizarn el microscopio para observar los extendidos
celulares teidos, identificando a los leucocitos como neutrfilo, eosinfilo,
basfilo, linfocito, monocito y clula plasmtica con base en las caractersticas
morfolgicas de estas.
Los leucocitos se clasifican sobre la base de sus caractersticas
morfolgicas y funcionales, as tenemos a los granulocitos o polimorfonucleares:
neutrfilos, eosinfilos y basfilos, y a los mononucleares: monocitos y linfocitos.
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Neutrfilos:
Las clulas maduras de los neutrfilos segmentados, se distinguen por su
ncleo segmentado, cromatina condensada y lbulos nucleares unidos por
filamentos delgados de cromatina; presentan grnulos especficos en el
citoplasma. Una estructura parecida a un palillo de tambor o apndice nuclear
(cuerpo de Barr) contiene un cromosoma X inactivo, que puede ser visto en los
neutrfilos de las hembras de los mamferos.
Eosinfilos:
Las caractersticas distintivas de los eosinfilos son la presencia de
grnulos citoplasmticos brillantes, rosados, rojizos y un ncleo menos
segmentado que el de los neutrfilos maduros (es raro encontrar ms de dos
lbulos). Los grnulos presentes en el citoplasma varan en tamao y forma con
las diferentes especies y algunas veces incluso dentro de una misma.
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Basfilos:
Los basfilos presentan grnulos de color rojo violeta en el citoplasma; el
nmero, tamao y tincin de los grnulos vara entre las diferentes especies, los
basfilos de los perros presentan pocos grnulos, pero son grandes, en
comparacin con las clulas de los bovinos, caballos y gatos, cuyos grnulos
son pequeos y numerosos. La caracterstica metacromacia de los basfilos es
atribuida al contenido de sus grnulos de glicosaminoglicano sulfatado
(mucopolisacrido), heparina, cido condroitn sulfato y dermatn sulfato.
Monocitos:
Por lo general son grandes, de 16 a 20 m de dimetro, poseen ncleo
grande amorfo, su cromatina est distribuida en forma de listones y bandas, por
lo general presentan uno o dos pequeos nuclolos, su citoplasma es
abundante, de color azul grisceo y contiene numerosas vacuolas,
especialmente en un extremo de la clula, es frecuente detectar seudpodos en
la membrana celular, lo cual refleja la actividad motriz de estas clulas.
Linfocitos:
El ncleo en los linfocitos contiene cromatina compacta, su forma es
redonda, aunque puede ser oval o indentada, el nuclolo no es visto por lo
general, la cantidad de citoplasma es escasa en linfocitos pequeos pero puede
ser ms abundante en linfocitos grandes, una pequea cantidad de grnulos
azuroflicos pueden ser vistos en su citoplasma. Las clulas con grandes
grnulos azuroflicos son conocidas como linfocitos de grnulos grandes y
usualmente incluyen a las clulas asesinas NK y a un componente del
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Clulas plasmticas:
Las clulas plasmticas presentan ncleo pequeo generalmente
excntrico con cromatina agrupada a menudo en forma de una rueda de carreta,
citoplasma abundante intensamente basoflico y una pequea rea ms clara
cercana al ncleo. Nuclolo que puede ser visto en los plasmoblastos. La
basofilia presente en el citoplasma se atribuye al complejo retculo endoplsmico
rugoso (RER) que ocupa la mayor parte del citoplasma y una zona ms clara
que est ocupada por el aparato de Golgi.
CUENTA DE PLAQUETAS
Las plaquetas son fragmentos del citoplasma de los megacariocitos
participan en la hemostasis de diversas formas. La importancia de su estimacin
radica en que la mayora de los defectos adquiridos de la coagulacin tienen que
ver con ellas.
Objetivo:
Que los alumnos aprendan a cuantificar plaquetas, as como a evaluar su
morfologa.
Material:
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Procedimiento:
Estimacin de plaquetas en frotis
El nmero en promedio de plaquetas por campo a inmersin en perros es
de 8 a 29 plaquetas, en gatos de 10 a 29 (multiplicado por 20= 109/L). Se debe
buscar en el frotis para asegurarse que la distribucin de las plaquetas sea
adecuada y que no se presenten cmulos, pues de presentarse la estimacin no
ser confiable.
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Material:
Procedimiento:
La correccin se realiza si existen ms de 5 GRN mientras se cuentan
100 leucocitos, en una cuenta leucocitaria diferencial. Se determina la
proporcin de GRN/100 leucocitos. El ajuste del recuento de clulas nucleadas
se realiza con la siguiente formula:
Cuenta leucocitaria corregida = 100/ GRN + 100 X cuenta de clulas nucleadas
(Willard, 1993).
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MORFOLOGA DE ERITROCITOS
Los eritrocitos de los mamferos son anucleados, y la mayora presentan
forma de discos bicncavos, esta forma resulta en la formacin de un rea de
palidez central, esto es ms caracterstico en sangre de perros. Otras especies
no presentan esta rea de palidez central. El aparente beneficio de la forma
bicncava es que permite a los eritrocitos deformarse al circular. En el caso de
las aves, peces y reptiles son nucleados, en los cerdos los eritrocitos presentan
espculas. Muchas veces la morfologa de los eritrocitos es diagnstica, por
ejemplo, los esferocitos se presentan en anemias inmunomediadas, los cuerpos
de Heinz en anemias hemolticas, entre muchas otras. Los eritrocitos de las
cabras por lo general presentan una superficie plana con una depresin de
superficie pequea; una gran variedad de irregularidades en la forma
(poiquilocitosis) puede presentarse en las cabras normales. Los eritrocitos de los
animales de la familia Camelidae (camellos, llamas, vicuas y alpacas) son
delgados, elpticos llamados eliptocitos u ovalocitos, y no son bicncavos.
Objetivo:
Qu los alumnos aprendan a identificar los eritrocitos de las diferentes
especies domsticas y las alteraciones morfolgicas que se presentan ms
frecuentemente.
Material:
Procedimiento:
Observacin
correctamente.
cuidadosa
al
microscopio
ptico,
de
frotis
teidos
Anormalidades eritrocitarias
Rouleaux:
Los eritrocitos de las preparaciones de sangre de caballos, gatos y cerdos
sanos con frecuencia presentan rouleaux (adhesin de los eritrocitos en
conjunto, dando la imagen de pilas de monedas). El incremento en la
concentracin de fibringeno y de globulinas potencia su formacin como
sucede en procesos inflamatorios. Tambin se puede asociar con enfermedades
linfoproliferativas en las que una o ms inmunoglobulinas son producidas en
gran cantidad.
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Aglutinacin:
La agregacin de eritrocitos en grupos celulares (no en cadenas como en
el rouleaux) es conocido como aglutinacin. La aglutinacin es producida por la
presencia de inmunoglobulinas unidas a la superficie de los eritrocitos.
Policromasia:
La presencia de eritrocitos de color rojo azulosos es conocido como
policromasia. Los eritrocitos policromticos generalmente son reticulocitos que
se tien de color rojo azuloso debido a la presencia de hemoglobina (rojo) y
ribosomas y polirribosomas (azul). Un pequeo nmero de eritrocitos
policromticos son generalmente vistos en la sangre de perros y cerdos sanos.
Cuando se presenta, el animal presenta anemia regenerativa, pese a no ser la
normalidad morfolgica que denote regeneracin ms importante.
Anisocitosis:
La variacin en el tamao de los eritrocitos en frotis de sangre teidos se
conoce como anisocitosis. Es frecuente en bovinos, pudindose presentar
cuando un nmero significativo de clulas pequeas son producidas, como en la
deficiencia de hierro, o cuando un gran nmero de clulas ms grandes son
producidas (reticulocitos). Consecuentemente, la anisocitosis esta presente en
anemia regenerativa.
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Hipocromia:
La presencia de eritrocitos con disminucin en la concentracin de
hemoglobina se conoce como hipocromia, generalmente se observa en anemia
por deficiencia de hierro.
Fig. 73.
Fig. 74.
Fig. 75.
Equinocitos:
Los equinocitos son eritrocitos con espculas espaciadas y de tamao
similar. Las espculas pueden ser picudas o redondeadas. Por lo general son
artefactos que resultan de la sobredosificacin de EDTA, deficiente tcnica en la
preparacin de frotis o prolongado almacenamiento de la muestra de sangre
antes de realizar la preparacin. La transformacin a equinocito ocurre in vitro en
presencia de cidos grasos; se forman cuando los eritrocitos se deshidratan,
cuando el pH se incrementa. Tambin pueden aparecer en animales urmicos,
inmediatamente posterior a transfusin de sangre almacenada, o en algunas
deficiencias de piruvato cinasa en perros con glomerulonefritis y neoplasias
(linfoma, hemangiosarcoma, tumor de clulas cebadas y en carcinomas).
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Acantocitos:
Son eritrocitos con irregularidades espaciadas y de tamao variable. Entre
las causas que producen su presencia estn: alteraciones en los lpidos de la
membrana, incremento en el colesterol sanguneo o debido a la presencia
anormal de la composicin de las lipoprotenas del plasma; enfermedad
heptica, posiblemente debido a alteraciones en la composicin de los lpidos
del plasma; hemangiosarcomas; coagulacin intravascular diseminada y
glomerulonefritis.
Keratocitos:
Son eritrocitos que contienen o que parecen contener una vescula, estas
reas no teidas son reas circulares localizadas en un extremo de las clulas.
La remocin o ruptura de stas reas resulta en la formacin de una o dos
proyecciones. Los keratocitos han sido reconocidos en varias alteraciones en las
que se incluyen a las siguientes: anemia por deficiencia de hierro, enfermedades
hepticas, toxicidad por doxorubicina en gatos, sndromes mielodisplsicos y en
varias alteraciones en perros que presentan conjuntamente equinocitos y
acantocitos.
Estomatocitos:
Son eritrocitos en forma de copa que presentan elongacin del rea de
palidez central, con frecuencia aparecen como artefacto. La forma la adquieren
cuando el contenido de agua de los eritrocitos se incrementa.
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Esferocitos:
Los esferocitos resultan del dao a la membrana celular. Presentan falta
de palidez central y dimetro menor. Se presentan frecuentemente en anemia
hemoltica inmuno mediada en perros, otras causas potenciales incluyen:
picadura de vboras y de abeja, intoxicacin por zinc, parsitos eritrocitarios,
transfusin de sangre almacenada, diseritropoyesis familiar, anaplasmosis,
entre otras.
Fig. 79.
Fig. 80.
Esquistocitos:
La destruccin de los eritrocitos puede aparecer cuando los eritrocitos son
forzados a travs de vasos sanguneos alterados, o cuando son expuestos a
fluido turbulento. Pueden ser vistos en perros con anemia hemoltica asociada
con coagulacin intravascular diseminada, en anemia severa por deficiencia de
hierro, mielofibrosis, enfermedad heptica, falla cardiaca, glomerulonefritis,
desrdenes hemofagocticos histiocticos en perros, entre otras causas.
Codocitos:
Son clulas delgadas, a menudo hipocrmicas con incremento en el
tamao de la membrana, presentan forma parecida a una campana con
densidad central u ojo de toro. Un pequeo nmero de codocitos son
frecuentemente vistos en la sangre de perros normales y pueden estar
incrementados en anemias regenerativas en los perros, en diseritropoyesis
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Excentrocitos:
Son eritrocitos en los que la hemoglobina se localiza a un costado de la
clula, dejando un rea sin ella. Se forman por la adhesin de reas opuestas de
la cara interna de la membrana del eritrocito. Son vistos en animales que
ingieren o reciben oxidantes en los que se incluyen: cebolla, acetaminofn y
vitamina K en perros y perxido de hidrgeno intravenoso en bovinos. Los
excentrocitos tambin han sido observados en caballos con deficiencia de las
enzimas glucosa 6 fosfatasa deshidrogenasa y deficiencia de glutation reductasa
secundaria a deficiencia de flavin adenin dinucleotidasa eritrocitaria.
Eliptocitos (Ovalocitos):
Los eritrocitos de animales de la familia Camelidae presentan forma oval
o elptica. Generalmente son eritrocitos planos, ms que bicncavos. Han sido
reconocidos en gatos con anormalidades de la mdula sea (desrdenes
mieloproliferativos y leucemia linfoctica aguda), lipidosis heptica, puentes
portosistmicos, y toxicidad por doxorubricina en perros con mielofibrosis,
sndrome mielodisplsico y glomerulonefritis, en los que pueden ser espiculados.
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Dacriocitos:
Estos eritrocitos tienen forma de lgrima. Se observan en sangre de
perros y gatos con desrdenes mieloproliferativos, en glomerulonefritis,
hiperesplenismo. Son comunes en la deficiencia de hierro en rumiantes,
incluyendo a las llamas.
Drepanocitos:
Los eritrocitos fusiformes o en forma de hoz, son frecuentemente vistos
en sangre de venados o ciervos normales y en sangre de personas con anemia
de clulas delgadas. Los drepanocitos se desarrollan de forma secundaria en la
polimerizacin de la hemoglobina. La forma de drepanos en los venados
depende de los tipos de hemoglobina presente. Pueden ser producidos in vitro
cuando la tensin de oxgeno es alta y el pH se encuentra entre 7.6 y 7.8.
Cristales de hemoglobina:
La presencia de grandes cristales de hemoglobina dentro de los eritrocitos
es comnmente reconocida en frotis de sangre de gatos y llamas, y rara vez
reconocidos en frotis de perros. No son de importancia diagnstica.
Eritrocitos lizados:
La presencia de fantasmas en las preparaciones de sangre perifrica
evidencia que las clulas han sido destruidas previamente a la realizacin de la
preparacin, consecuentemente la presencia de eritrocitos lisados indica
hemlisis intravascular reciente o hemlisis in vitro en el tubo colector posterior a
la obtencin.
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Cuerpos de Howell-Jolly:
Son remanentes nucleares pequeos y esfricos, presentes en bajo
nmero en sangre de caballos y gatos normales. Con frecuencia se presentan
en asociacin con anemia regenerativa o posterior a esplenectoma en otras
especies. Tambin pueden ser ms numerosos en animales que reciben terapia
con glucocorticoides.
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Reticulocitos:
Son eritrocitos inmaduros, presentan RNA en su citoplasma, el cual se
pone de manifiesto al teir los frotis de sangre con el colorante azul de metileno.
Su presencia en gran nmero representa respuesta regenerativa de la serie roja.
Cuerpos de Heinz:
Estas inclusiones corresponden a agregados de hemoglobina precipitada
que se une a la superficie interna de la membrana de los eritrocitos. Se tien de
azul oscuro. Pueden ser reconocidos como pequeas proyecciones cuando las
uniones con la membrana rodean a la inclusin. Cuando se presenta hemlisis
intravascular, pueden ser visibles como inclusiones en los eritrocitos fantasmas.
Estas estructuras se tien de azul con tinciones para reticulocitos. En contraste
con otras especies, los gatos pueden presentar hasta 5% de cuerpos de Heinz
dentro de sus eritrocitos, normalmente.
La principal causa es la desnaturalizacin de la hemoglobina por agentes
oxidantes, tambin puede aparecer en casos de anemia en gatos que padecen
diabetes mellitus (especialmente cuando la cetoacidosis se encuentra presente),
hipertiroidismo y linfoma. Han sido reconocidos en eritrocitos de ganado que
pasta en zonas deficientes en selenio. La intoxicacin por cobre resulta en la
formacin de cuerpos de Heinz en ovejas y cabras, tambin en perros que
ingieren zinc. La anemia hemoltica con cuerpos de Heinz se presenta posterior
a la aplicacin de varios medicamentos entre los que se incluyen: acetaminofen
y azul de metileno en gatos y perros, metionina y fenazopiridina en gatos,
menadiona (vitamina K3) en perros y fenotiazina en caballos.
Puntilleo basoflico:
El puntilleo basoflico esta constituido por ribosomas y poliribosomas, que
en conjunto forman inclusiones que se tien de azul, con nuevo azul de
metileno. Con frecuencia se presenta en anemias regenerativas, siendo
prominente en animales intoxicados con plomo.
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Prueba alternativa
Frote sanguneo
Retraccin del cogulo
Tiempo
de
coagulacin
activada
Ninguna
Sulfato de Protamina
Cofactor Coaglutinina
Parmetro evaluado
Cantidad de plaquetas
Funcin plaquetaria
Factores coagulantes
Factores coagulantes
Fibrinolisis
Enfermedad de von Willebrand
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Material:
Una lanceta
Una cuerda de 50 centmetros de largo
Un cronmetro
Una caja de papel filtro o papel higinico
Procedimiento:
El aumento de la presin venosa se produce colocando una cuerda en el
hocico (perro), misma que tambin sirve para mantener el labio evertido, a
continuacin se realiza un corte estndar, teniendo cuidado de no presionar la
herida, ni manipularla. Con el papel filtro se absorbe la sangre que sale de la
herida a intervalos de 15 segundos, sin tocar la incisin. Generalmente no se
requiere anestesiar al animal.
Interpretacin:
El tiempo de sangrado en la mucosa oral no debe superar los 5 6 minutos.
PRUEBA DE RETRACCIN DEL COGULO
Es una prueba sencilla, simple y fcil de realizar para evaluar la funcin
plaquetaria. La prueba se basa en que las plaquetas son contrctiles y con el
tiempo traccionan las bandas de fibrina y las juntan para formar un cogulo
firme.
Objetivo:
Qu los alumnos aprendan a realizar instrumentalmente la prueba de retraccin
del cogulo.
Material:
Un tubo de ensaye sin anticoagulante
Una muestra de sangre sin anticoagulante
Un bao Mara
Un cronmetro
Procedimiento:
El procedimiento consiste en colocar la sangre en un tubo sin
anticoagulante, despus de que coagul, se incuba a 37 C.
Interpretacin:
La observacin despus de una hora debe mostrar cierto nivel de suero
exprimido fuera del cogulo, por lo tanto visible en forma externa. A las 24 horas
el cogulo sufre su mxima retraccin. Si el cogulo se lisa rpidamente durante
las 24 horas en que es incubado a 37 C, sugiere hiperactividad fibrinoltica,
como sucede en coagulacin intravascular diseminada.
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TIEMPO DE PROTROMBINA
Evala las vas extrnseca y comn de la coagulacin, los factores de la
coagulacin que causan problemas clnicos de la va comn son: FX y FV,
trombina y el fibringeno. En este documento se proporciona el procedimiento
citado por Pathromtin BEHRING, ya que es importante recordar al lector que
existen muchos procedimientos y tcnicas propuestas por los diferentes
productores.
Objetivo:
Que los alumnos aprendan a realizar instrumentalmente el tiempo de
protrombina, as como la interpretacin de los resultados proporcionados por la
misma.
Material:
Una muestra de sangre tratada con citrato de sodio al 3.8%, una parte de
anticoagulante y nueve de sangre
Una centrfuga (3000 rpm)
Una pipeta Pasteur
Un bao Mara
Un thrombotimer (evaluador de tiempos de coagulacin)
Procedimiento:
En un tubo precalentado a 37 C, pipetear:
Plasma citratado
100 L
Reactivo Pathromtin*
100 L
Incubar 2 minutos a 37 C
Solucin de cloruro de calcio (37 C)
100 L
*Pathromtin BEHRING.
Valores normales:
Perros: 9 a 14 segundos
Ganado bovino: 18 a 28 segundos
Caballos: 9 a 12 segundos
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Interpretacin:
Esta prueba valora a los factores dependientes de la vitamina K, y a los
de sntesis heptica. De estos, los factores II, VII, IX, y X, el VII tiene la vida
media ms corta, cuando la sntesis de stos factores es retenida o deteriorada
significativamente, el FVII sufrir deficiencia ms precoz. El factor VII se
encuentra en la va extrnseca y por tanto TP es el nico estudio que evala a la
va comn, ste se eleva con ms rapidez y tiene el mximo incremento relativo
como aumento del porcentaje por encima de la media normal. El TP se eleva en
hepatopata severa, en enfermedad colesttica, en esteatorrea aclica y en
intoxicacin por warfarina.
TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ACTIVADA (TTPa)
Es la prueba que evala a los factores de la va intrnseca de la
coagulacin, es decir nos permite identificar a la actividad de los factores XII, XI,
IX y VIII, tambin valora la va comn. El TTPa evala a todos los factores
coagulantes excepto aI FVIII. El procedimiento citado es utilizado por
laboratorios Baxter.
Objetivo:
Qu los alumnos aprendan a realizar instrumentalmente el TPTa, e interpretar
los resultados obtenidos.
Material:
Un plasma normal fresco o tratado con citrato de sodio
Un equipo Ci-Trol Coagulation Control, Niveles I, II y III
Una pipeta Pasteur
Equipo manual o automatizado para evaluar TPTa
Procedimiento:
Precalentar la tromboplastina IS a 37 C
Pipetear en los tubos de coagulacin precalentados en la siguiente forma:
Plasma
Plasma control
Tromboplastina IS
Plasma
0.1 mL
Plasma control
0.1 mL
Plasma precalentado y plasma de control, 1 a 2
minutos a 37C. (max. 5 min.)
Aada
la
tromboplastina
precalentada
enrgicamente
0.2 mL
0.2 mL
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Valores normales:
Perros: 17 a 30 segundos
Interpretacin:
La alteracin ms frecuente es la deficiencia hereditaria del factor VIII:C
de la coagulacin conocida como hemofilia A y la deficiencia de FBI:ag
denominada enfermedad de von Willebrand, deficiencia del factor IX de la
coagulacin conocida como hemofilia B.
TIEMPO DE COAGULACIN ACTIVADA (TCA)
Esta prueba se usa en gran parte de la misma manera que el TTPa,
evala defectos de la va intrnseca y de la comn. Para que su valor se
prolongue un factor debe estar reducido hasta menos del 5% del normal,
mientras que el TTPa se prolongar ante deficiencias menores de 30% de lo
normal. Un portador de hemofilia A o B con 40 a 60% de FBI o IX no ser
detectado por el TTPa cotidiano. Sin embargo, el TCA es menos especfico que
el TTPa porqu la trombocitopenia severa puede prolongarlo hasta 10 segundos.
El TTPa no se modifica por la trombocitopenia ya que el reactivo utilizado para
su reaccin tiene un fosfolpido que cumple la misma funcin que el FP3.
Objetivo:
Qu los alumnos aprendan a realizar instrumentalmente el tiempo de
coagulacin activado, adems de interpretar los resultados obtenidos de la
prueba.
Material:
Dos tubos de ensaye al vaco que contengan tierra primitiva
Una muestra de sangre sin anticoagulante, mnimo 3 mL
Un cronmetro
Procedimiento:
Obtener sangre y dividirla en dos alcuotas
La primera se coloca en uno de los tubos
En el segundo tubo se coloca la otra alcuota
Precalentar los tubos a 37 C y mantener la temperatura constante hasta
que forme el cogulo
Incubar la sangre a 37 C durante 60 segundos a partir de que se coloc
la muestra en el tubo
Invertir el tubo cada 5 segundos hasta que se forme el primer cogulo
visible, este es el punto final
Interpretacin:
En perros el cogulo se debe formar entre 60 y 100 segundos y en gatos menos
de 60 segundos.
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Aspecto, para valorarla se debe colocar el tubo con la orina sobre una
superficie con letras impresas e intentar leerlas, si se pueden apreciar las
letras, entonces la orina es transparente y si resulta difcil apreciarlas, la
orina se considera turbia, el nmero de cruces en que se informa
depende de la visibilidad de la muestra, es decir si la turbidez es leve
(1+), si es moderada (2+) y si es marcada (3+). En la mayora de las
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Examen qumico:
Para el examen qumico se utilizan tiras reactivas, siendo importante
verificar la fecha de caducidad, se almacenan en lugares secos y no deben
exponerse por mucho tiempo a temperatura ambiente.
Forma de uso de la tira reactiva:
a) Se sumerge completamente las reas de prueba de la tira reactiva
en la orina fresca, bien mezclada, sin centrifugar, se retira la tira de
forma inmediata y se coloca de manera horizontal, teniendo
cuidado de no tocar las reas reactivas.
b) Aproximadamente despus de un minuto se comparan las reas
reactivas con la correspondiente escala cromtica del envase.
c) Se emiten los resultados.
Los analitos que lee cada tira reactiva varan con la marca del
laboratorio, pero los de inters que deben evaluar son:
Protena (g/L), Cetonas, Glucosa mmol/L, Bilirrubina, Urobilingeno, Sangre
(eri/L)
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pH:
Fundamento: El rea reactiva contiene los indicadores de rojo de metilo y
azul de bromotimol, que permite medir pH entre 5 y 9. De manera general
el pH de los carnvoros es cido, flucta entre 5.5. 7.5; mientras que el
de los herbvoros es alcalino, de 7.5 8.5.
Bilirrubinas:
Fundamento: Se basa en la formacin de un complejo entre una sal
diazdica y la bilirrubina en un medio cido, que da un cambio
caracterstico de color. La reaccin de diazotizacin se produce ms
fcilmente con la bilirrubina conjugada.
Urobilingeno:
Fundamento: El urobilingeno junto con la sal diazdica produce un
colorante azoico rojo.
Glucosa:
Fundamento: Se basa en el mtodo de glucosa oxidasa, que genera
perxido de hidrgeno a partir de la glucosa. La peroxidasa cataliza
entonces la degradacin del peroxido utilizando electrones y protones
donados por un cromgeno que cambian de color durante el proceso.
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Cuerpos cetnicos:
Fundamento: Se base en la reaccin del acetoacetato (principalmente) o
la acetona (en menor medida) con el nitroprusiato de sodio y la glicina en
condiciones alcalinas, que produce un color violeta.
Examen microscpico:
Para el examen microscpico se centrifugan 10 mL de orina por 2 a 3
min., a 2 500 rpm, posteriormente se decanta y se deja el sedimento, ste
se homogeniza y se coloca una gota en un portaobjetos, el cul se cubre
con un cubreobjetos y se observa con los objetivos 10X y 40X. En
aumento de 100X se observan estructuras como cristales y en ocasiones
algunos cilindros; en el aumento de 400X se realiza la lectura celular
observando al menos 10 campos y se obtiene un rango.
Fig. 99. Centrifugacin a 2500 rpm.
Fig.100. Leucocitos.
Fig.105. Espermatozoides.
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Procedimiento:
Rasurar la zona de puncin, previa asepsia y analgesia local se procede a
incidir la piel con bistur o aguja ms gruesa. Acto seguido se introduce la aguja
con el mandril hasta detectar la cpsula heptica, se perfora y luego se quita el
mandril, introducindose en la gua la aguja para obtener la biopsia de 2 a 5 cm.
La biopsia obtenida con la aguja es depositada en una caja de petri para su
posterior anlisis.
Fig.107. Analgsia.
Fig.108. Incisin.
Fig.109. Puncin.
Solucin de
CuSO4 al 1.025
-
+
+
Solucin de
Grasa %
CuSO4 al 1.055
<13
+
13-25
+
+
25-34
>34
Estado de
lipidosis
Normal
Ligera
Signos
clnicos
-
Moderada
Grave
+
Insuficiencia
heptica (++)
- Sedimentacin
+ Flotacin
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Figs. 112. y 113. Tincin con colorante Sudan III para detectar presencia de esteatorrea.
Figs. 114. y 115. Tincin con azul de metileno para detectar amilorrea.
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Interpretacin:
Positivo: Tira de la pelcula digerida (aclaramiento), presencia de tripsina
fecal.
Negativo: Tira de pelcula no digerida (color negro), ausencia de tripsina
fecal.
Nota: se debe realizar al mismo tiempo otra prueba con heces de un animal
sano como control.
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Se sujeta una vaca con ayuda del nariguero, para luego colocarle el
abrebocas (Fig. 121), sujetando las correas a los cuernos o nuca del animal. Se
lubrica con agua la sonda oro-ruminal (longitud de 3.3 m) y se introduce a travs
del abrebocas hacia el rumen (Fig. 122). Una vez que la sonda es introducida
deber quedar aproximadamente un metro fuera y libre, dependiendo del
tamao del animal. El extremo libre de la sonda se conecta al extremo distante
de la bomba (Fig 123). Acto seguido, se conecta en la salida superior un trozo
de manguera y se eliminan los primeros 200mL de lquido para evitar
contaminacin con saliva (Fig 124). El lquido obtenido se depositar en una
botella de plstico para su anlisis posterior.
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De esta forma se hace el vaco dentro del tanque y ste a su vez har la
succin del lquido del rumen haca ste. El tanque tiene lateralmente ventanillas
para verificar el nivel de llenado (Fig. 128), y evitar que el lquido pase a la
mquina ordeadora. En pocos minutos se obtendrn varios litros de lquido
ruminal.
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ruminal);
verde
negruzco
(alcalosis,
2. Olor. El olor normal del lquido ruminal puede definirse como aromtico.
Sin embargo, los olores perceptibles son cido picante (acidosis ruminal)
o el amoniacal (alcalosis ruminal).
3. Consistencia (viscosidad). La consistencia del lquido normal es
ligeramente viscosa en tanto que la consistencia acuosa es sugerente de
acidosis ruminal aguda.
4. Sedimentacin y flotacin. La prueba consiste en poner en reposo una
muestra de lquido ruminal y medir el tiempo que tardan en aparecer los
fenmenos de sedimentacin-flotacin. El tiempo normal esperado para
ello ser de 4 a 8 min, mientras que la ausencia de algunos fenmenos o
la modificacin de dicho valor podr ser considerada como una
anormalidad (ausencia de flotacin en la acidosis o en indigestin simple).
Examen bioqumico:
1. Determinacin de pH. Debido a la importancia de esta determinacin
para el diagnstico, es necesario utilizar un potencimetro, el cual debe
calibrarse previamente. El potencimetro se coloca en un amortiguador con
pH 4.0 durante 30 segundos. Si el potencimetro no marca el pH de 4.0
deber ser ajustado girando la perilla o tornillo correspondiente.
Posteriormente, el electrodo se lava con agua de llave y se introduce en un
segundo recipiente que contiene un amortiguador con pH 7.0, e igualmente,
de no marcar 7.0, el potencimetro deber ser calibrado girando el respectivo
tornillo, y se lava el electrodo con agua de llave. As queda listo para medir el
pH en el lquido ruminal. Cada vez que se introdujo el electrodo en los
amortiguadores o en otros lquidos, es necesario sacudir el potencimetro
para eliminar el excedente de lquido de la medicin anterior y as evitar
interferencias con los resultados.
Para obtener una lectura correcta se pone en contacto al potencimetro
con el lquido ruminal durante 30 segundos (Fig. 130). Despus de la lectura,
el electrodo se lava y se coloca agua de llave dentro de la tapa del electrodo
para mantenerlo hmedo (esto es fundamental para garantizar su
conservacin y buen funcionamiento). Cuando se evalan varias muestras es
necesario volver a calibrar el potencimetro con amortiguador con pH 7.0
cada 15 min.
El valor del pH en el lquido ruminal de una vaca sana es entre 6.0 y 7.0
(6.4 a 7.0 en dietas ricas en fibra y 6.0 a 6.6 en dietas ricas en alto contenido
en carbohidratos solubles). Los valores obtenidos fuera del rango normal
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Interpretacin:
CUADRO 6. DIAGNSTICO DIFERENCIAL DE LOS TRASTORNOS RUMINALES
Acidosis ruminal
Parmetro
Color
Olor
Viscosidad
Indigestin
Acidosis ruminal
subclnica o
simple
aguda
subaguda
Verde-pardo obscuro
Lechoso, grisceo
Gris verdoso
cido picante
Acuoso
Mohoso
Acuoso
Alcalosis ruminal
Putrefaccin
Lquido ruminal
ruminal
normal
Verde pardo
Negro verdoso
Verde olivo
cido ligero
Amoniacal
Amoniacal ptrido
Aromtico
Ligeramente
Variable
Pastoso
Ligeramente viscoso
Rpida
Variable
Sin separacin
Durante 4 a 8 min.
Ausente
Variable
Ausente
Durante 4 a 8 min.
viscoso
Sedimentacin
Flotacin
sedimento
sedimento
Ausente
Ausente
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(Continuacin)
Acidosis ruminal
Indigestin
Acidosis ruminal
subclnica o
simple
aguda
subaguda
pH
6.8 - 7.2
3.8 - 5.0
5.1 - 5.9
Actividad
> 8 min.
Ausente
Acelerada
Parmetro
bacteriana
Protozoarios
Alcalosis ruminal
Putrefaccin
Lquido ruminal
ruminal
normal
7.3 - 8.0
7.5 - 8.5
6.0 - 7.0
> 8 min.
> 8 min.
3 - 6 min.
2 - 4 min
40 - 100
Ausente
0 150
50 150
10 - 50 (falta)
200 - 400
7.0 - 7.5
5.5 - 7.0
6.0 - 7.5
Alcalina (NaHCO3)
Alcalina o
7.7 - 8.4
o variable
variable
(X 10 /mL)
pH de orina
82
83
Interpretacin
Negativa
Trazas
Dbilmente positiva
Claramente positiva
Fuertemente positiva
Reaccin visible
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(Continuacin)
Leche alcalina
Leche cida
adherirse al fondo de
la copa.
Este
smbolo
se
agrega
cuando
la
reaccin es claramente
alcalina, esto est
indicado por un color
prpura oscuro.
El bromocresol prpura
es de color amarillo a
pH 5.2. Este smbolo
debe agregarse al
grado de reaccin
cuando la mezcla es
amarilla.
PRUEBA DE WISCONSIN
Introduccin:
La prueba de Wisconsin es similar a la prueba de California. El detergente
del reactivo al ponerse en contacto con el DNA de las clulas somticas produce
una mezcla con viscosidad relacionada al nmero de clulas somticas
presentes en la leche. En la prueba se mezclan en un tubo el reactivo y la leche,
despus se permite drenar a los tubos graduados durante unos segundos y se
vuelve a poner en posicin vertical para leer los mL de solucin que quedaron en
el tubo. La prueba es rpida, sencilla y barata. Esta provee un medio objetivo de
graduar la viscosidad de la mezcla del reactivo de California con la leche.
Objetivo:
Que los alumnos aprendan a realizar instrumentalmente la prueba de Wisconsin
as como su interpretacin en casos de mastitis subclnica.
Material:
10 tubos de prueba: son de plstico transparente, flexibles de 12.1 X 130 mm
de dimetro interno (DI) con un orificio de ventilacin de un dimetro
aproximado de 3 mm localizado a unos 65 mm arriba del fondo del tubo
10 tapones de latn: con un orificio en el centro de 1.09 a 1.10 mm de
dimetro
Una gradilla para los tubos: para sostener firmemente 10 tubos de plstico
para la prueba
Una jeringa o pipeta automtica: con capacidad de 2 mL para verter
muestras de leche. Se debe ajustar la exactitud
Un cronmetro
Procedimiento:
1.- Enjuagar y sacudir los tubos para remover el exceso de agua antes de
usarlos.
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mL remanentes en el tubo
0.0 1.0
1.1 1.5
1.6 1.8
1.9 2.0
2.1 2.5
2.6 3.0
3.1 6.0
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Material:
Un calostrmetro
100 mL de calostro del primer ordeo post-parto
Un recipiente limpio para la obtencin del calostro
Una probeta de 100 mL
Calostrmetro:
El calostrmetro es un aremetro con dos escalas, una numerada y otra
que tiene tres colores que indican la GE del calostro.
Procedimiento:
Se llena con calostro el cilindro o recipiente con suficiente profundidad
para que flote el calostrmetro sin tocar el fondo. El calostrmetro debe tener
una temperatura cercana a 22 C. Se debe retirar la espuma o nata para evitar
errores en la lectura. Se introduce el calostrmetro con cuidado y se deja que
flote libremente. Una vez que se ha estabilizado, se hace la lectura en la escala
numerada o de los colores, situada en la parte superior del densitmetro.
Interpretacin de la lectura:
Una lectura superior a 1.060= buena calidad, 1.050= mediana calidad,
< 1.050 baja calidad.
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Introduccin:
Los lquidos corporales pueden ser evaluados desde el punto de vista
fsico, qumico y celular. La primera de estas evaluaciones puede realizarse
desde el momento mismo de la toma de la muestra, la informacin que
proporciona puede ser valiosa para el establecimiento de un diagnstico
presuntivo. Las dos evaluaciones restantes pueden o no llevarse a cabo en el
lugar del muestreo, dependiendo del material con el que se cuente.
Objetivo:
Que los alumnos aprendan a procesar e interpretar las muestras de
lquidos corporales.
Material:
Un hemocitmetro
Un refractmetro de Goldberg
Un frasco con tiras reactivas para el anlisis qumico de la orina
Un frasco con 50 mL de reactivo de Pandy
Un portaobjetos
Un cubreobjetos
Una jeringa hipodrmica desechable (1-3mL)
Una vela o parafina
Para la cuenta celular (eritrocitos y clulas nucleadas) se requiere
hemocitmetro (tcnica manual). Para evaluacin de protenas en lquido
sinovial se puede ocupar el refractmetro de Goldberg. Las tiras reactivas para
orina y reactivo de Pandy para evaluar protenas en lquido cefalorraqudeo. El
refractmetro es utilizado tambin en la determinacin de la gravedad
especfica. Tambin se requiere portaobjetos, cubreobjetos, jeringas de 3 mL
cortadas en secciones de 1 mL y una vela.
El reactivo de Pandy consiste en 10 mg de cido carblico (fenol) disuelto
en 100 mL de agua destilada.*
Procedimiento:
Es conveniente subrayar que dependiendo del tamao de la muestra se
realizar el anlisis de la misma, ya que si slo se obtuvo una muestra pequea
se dar prioridad a la evaluacin citolgica sobre las dems pruebas. En el caso
*
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93
Material:
Informacin proporcionada por el propietario, informacin obtenida del
examen fsico y resultados de las pruebas de laboratorio.
Procedimiento:
Analizar la informacin proporcionada por la historia clnica, el examen
fsico y los resultados de laboratorio, acto seguido los alumnos deben solicitar de
manera escrita de acuerdo a su anlisis, pruebas especficas para confirmar el
diagnstico de la enfermedad que se presume presenta el animal.
EJEMPLO DE SOLUCIN DE CASOS CLNICOS
El caso corresponde a un perro domstico de la raza Bulldog ingls,
hembra de 5 aos de edad. El calendario de vacunacin y de desparasitacin
esta vigente. La alimentacin se basa en alimento comercial y sobras de comida.
EXAMEN FSICO
El paciente present: cianosis, disnea, aletargamiento, debilidad,
mucosas cianticas y fatiga.
HEMOGRAMA 1
Hematocrito :
Hemoglobina:
Glbulos rojos:
VGM:
CMHG:
Plaquetas:
Protenas totales:
Leucocitos:
Neutrfilos:
Bandas:
Metamielocitos:
Mielocitos:
Linfocitos:
Monocitos:
Eosinfilos
Basfilos:
unidades
0.75 L/L
258 g/L
10.3 X 1012/L
72
fL
344 g/L
200 X 109/L
77
g/L
7.1
X109/L
5.5
X 109/L
0.1
X 109/L
0
X 109/L
0
X 109/L
0.9
X 109/L
0.1
X 109/L
0.5
X 109/L
0.0
X 109/L
valores de referencia
0.37 - 0. 55
120 - 180
5.5 - 8.5
60 - 77
320 - 360
200 - 900
60 - 75
6.0 - 17.0
3.0 - 11.5
0 - 0.3
0
0
1.0 - 4.8
0.1 - 1.4
0.1 - 0.9
Raros
94
HEMOGRAMA 2
Hematcrito:
Hemoglobina:
Glbulos rojos:
VGM:
CMHG:
Plaquetas:
Protenas totales:
Leucocitos:
Neutrfilos:
Bandas:
Metamielocitos:
Mielocitos:
Linfocitos:
Monocitos:
Eosinfilos:
Basfilos:
unidades
valores de referencia
0.56 L/L
0.37 - 0.55
188 g/L
120 - 180
9.3
X 1012/L
5.5 - 8.5
60
fL
60 - 77
335 g/L
320 - 360
280 X 109/L
200 - 900
55
g/L
60 - 75
6.0 - 17.0
16.2 X109/L
9
15.2 X 10 /L
3.0 - 11.5
0
X 109/L
0 - 0.3
0
X 109/L
0
0
X 109/L
0
9
0.04 X 10 /L
1.0 - 4.8
0.01 X 109/L
0.1 - 1. 4
0.0
X 109/L
0.1 - 0.9
9
0.0
X 10 /L
Raros
Valores obtenidos
0.64
213
10.4
61
332
290
64
8.0
5.4
0
0
0
2.3
0.1
0.2
0.0
95
URIANLISIS
Aspecto:
Color:
Densidad:
pH:
Protena:
Cetona:
Glucosa:
Bilirrubina:
Urobilingeno:
Sedimento:
Transparente
Amarillo claro
1.023
5.5
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Normal
Eritrocitos: 5 a 10 /campo
Leucocitos: 0 a 1
Clulas transitorias: 0 a 1
Lpidos: 1+
5.0
7.5
100
10.98
40.0
56
266
77.0
31
46
0.67
2.80
1.54
(0.78 a 1.46)
(2.27 a 2.91 mmol/L)
(0.75 a 1.70 mmol/L)
96
ESTUDIOS ADICIONALES
ECOCARDIOGRAFA
Disminucin del lmen de trquea torcica y cervical
Colapso traqueal
Sndrome braquioceflico
Puentes seos en columna lumbosacra
Obstruccin de vas respiratorias
En la ecocardiografa resalta la presencia del sndrome braquioceflico, lo
que confirma los hallazgos que se presentaron en los hemogramas practicados.
La obstruccin del lmen de la trquea y la obstruccin de las vas respiratorias,
contribuye al desarrollo de la eritrocitosis manifestada por el animal. La
presencia de puentes seos fue un hallazgo incidental.
MOQUILLO POR INMUNOFLUORESCENCIA
La prueba fue negativa, con lo que se descarta la posibilidad de la
presencia de sta enfermedad.
EQUILIBRIO CIDO-BASE
pH
pCO2
HCO3
EB
1
7.20
56
24.6
-1.3
2
7.37
39.9
22.0
-2.1
3
7.33
43.3
22.2
-2.9
valores de referencia
(7.32 - 7.45)
(32 - 46) mmHg
(19 - 28) mmol/L
(-5.0 - 3.6) mmol/L
97
98
ABDOMINOCENTSIS
Introduccin:
La obtencin de lquido abdominal ya sea en poca o mayor cantidad,
puede aliviar en forma temporal el malestar del paciente, no obstante, el
beneficio primordial radica en la posibilidad de establecer un diagnstico y de
esa manera elegir la terapia ms adecuada. Un aumento de fluido en la cavidad
abdominal no es una enfermedad por s misma, pero es indicativa de un proceso
patolgico en la produccin o en el sistema de drenaje del fluido. El anlisis del
fluido incluyendo examen citolgico, es un mtodo rpido, fcil, de bajo costo y
relativamente seguro. Se puede obtener informacin til para el diagnstico,
pronstico y tratamiento de los procesos que causan acumulacin de fluido en la
cavidad abdominal.
En la mayora de los casos no se requiere el drenaje completo de la
efusin. Si la etiologa del lquido puede ser corregida habr cierta reabsorcin
hacia el espacio vascular. En un caso de hemorragia, por ejemplo, hasta el 50 %
de los eritrocitos reingresan a la circulacin. La remocin de mucho lquido
puede relacionarse con disminucin protica significativa.
En algunos pacientes el incremento de la presin intraabdominal puede
evitar la acumulacin adicional de lquido o sangre; si se extrae, el lquido puede
reformarse con rapidez. Otra consideracin es la velocidad de remocin; en
algunos casos la cada repentina de la presin intraabdominal promueve desvo
de lquidos, colapso cardiovascular y choque.
Indicaciones:
Para evaluar cualquier enfermedad que produzca aumento del lquido
abdominal.
Abdomen agudo.
Cuando hay evidencia de gas libre en cavidad abdominal.
Determinar el dao a un rgano relacionado con traumatismo
abdominal.
Objetivo:
Que los alumnos aprendan el procedimiento para la obtencin de lquido
abdominal, los casos en que est indicado, el material que se utiliza, el manejo
adecuado de la muestra y los diagnsticos que se pueden obtener.
Material:
Distintos materiales pueden ser utilizados en diferentes tcnicas en
funcin de la cantidad de lquido presente y de la naturaleza del examen que el
clnico desea practicar en ese fluido.
Aguja de calibre 20 a 22 G de 1 pulgada con jeringa de 6 a 10 mL, cuando hay
cantidades considerables de lquido, es una tcnica fcil, rpida y barata, sin
embargo, se puede correr el riesgo de lesionar rganos abdominales.
99
101
CUADRO 9.
Caractersticas fisicoqumicas y citolgicas de
trasudados y exudados. Diferenciacin de trasudados, trasudados
modificados y exudados en perros.
TRASUDADO
TRASUDADO
EXUDADO
OBSERVACIONES
Con base en la
densidad del agua
destilada, 1.000
MODIFICADO
Densidad
<1.017
1.017-1.025
> 1.020
Protenas
totales(g/L)
Clulas nucleadas
9
(X 10 /L)
Tipos celulares
predominantes
<25
25-50
>30
< 1.0
0.5-10.0
>5.0
Mononuclear,
Mesotelial
Neutrfilos
Mononuclear
Eritrocitos
Bacterias
Ausentes
Linfocitos
Monocitos
Mesotelial
Eritrocitos
Ausentes
Variable
Colectar la muestra
con EDTA
INDICACIONES
Exudado
abdominal
asptico
(uroabdomen)
Exudado
abdominal
asptico
(uroabdomen)
Exudado abdominal asptico (ruptura
del rbol biliar)
Exudado
abdominal
asptico
(pancreatitis)
Lquido blanco o rosado (quilotrax o
quiloabdomen)
OBSERVACIONES
til en uroabdomen
TORACOCENTSIS
Introduccin:
La toracocentsis es esencial para el establecimiento del diagnstico
presuntivo o definitivo. As mismo, la extraccin del lquido mejora la
visualizacin radiolgica del pulmn y pleura, adems de brindar solucin a
alteraciones que cursan con disnea.
Indicaciones:
Pleurorrea.
Neumotrax o hidrotrax como tratamiento para estabilizar a un paciente con
disnea.
Masas en cavidad pleural o mediastino.
102
Objetivo:
Que los alumnos aprendan el procedimiento para la obtencin de lquido
torcico, los casos en que esta indicado, el material que se utiliza, el manejo
correcto de la muestra y los diagnsticos que se pueden obtener.
Material:
Una aguja de mariposa estril (calibres 19 a 22) para animales pequeos,
delgados y en gatos.
Un catter calibres 20 a 22 para animales grandes u obesos. Este tipo de
catter permite retirar la aguja una vez introducido en la cavidad torcica, de
esta forma se disminuye la posibilidad de daar los rganos intratorcicos.
Venoclisis.
Una llave de tres vas.
Una jeringa de 12, 20, o 60 mL dependiendo del volumen de lquido o aire que
se va a evacuar.
Procedimiento:
Colocar al animal de pie o en decbito
esternal. Frente al paciente con
neumotrax o pleurorrea, se requiere
mayor cuidado debido a que la
manipulacin o adopcin de posturas
puede exacerbar la disnea.
Rasurar y preparar aspticamente el
sitio apropiado de la pared torcica y
todo el procedimiento se realiza con
tcnicas estriles.
En la mayora de los pacientes la
toracocentesis se realiza sin anestesia
general o analgesia local (excepto con
Fig. 133. Toracocentesis.
animales agresivos), sin embargo, si se
va a drenar un gran volumen de lquido,
se recomienda el uso de analgesia local con lidocana al 2 %, debido a que la
pleura parietal a menudo es bastante sensible a la penetracin an con
agujas de poco dimetro.
Por lo general, la toracocentesis se efecta entre el 7 y el 8 espacio
intercostal a nivel del tercio ventral o ligeramente dorsal a la unin
costocondral (Fig.133). Segn la evaluacin radiogrfica a veces es
necesario puncionar en un espacio diferente.
Introducir la aguja o el catter, atravesando la piel, los msculos
intercostales y la pleura parietal, hasta la cavidad pleural. Por lo general se
siente un ligero tronar cuando se penetra la pleura. Para evitar el riesgo de
103
104
Neoplasias
Metaplasias
Quilotrax
PERICARDIOCENTSIS
Introduccin
La pericardiocentsis es una tcnica diagnstica y teraputica que debe
aplicarse en todos los pacientes con derrame pericrdico. Cuando se realiza de
forma correcta, es segura y eficaz, principalmente desde el punto de vista
teraputico. El examen del lquido pericrdico incluye recuentos completos de
clulas nucleadas, eritrocitos, determinacin de protenas totales y examen
citolgico. Si en la citologa se observan bacterias es recomendable realizar
cultivo y antibiograma.
Indicaciones:
Derrames pericrdicos de origen incierto
Estabilizar clnicamente a perros y gatos con derrame pericrdico.
Objetivo:
Que los alumnos aprendan el procedimiento utilizado para la obtencin
del lquido pericrdico, los casos en que se indica, el material necesario y los
diagnsticos que se pueden obtener con esta muestra.
Material:
Se utiliza un catter de calibre 14 a 16, de 13 a 15 cm de largo que tenga
entre uno y tres orificios laterales cerca de la punta. Los orificios laterales se
pueden cortar con una hoja de bistur procurando no dejar bordes cortantes. El
catter se conecta a una llave de tres vas, una extensin y una jeringa de 30 a
60 mL.
Procedimiento:
Colocar al paciente en decbito lateral izquierdo, debe utilizarse la zona
precordial derecha para evitar laceraciones de vasos
coronarios extramurales del lado izquierdo. Los lbulos
pulmonares derechos tienen una escotadura cardiaca
mayor, de modo que se minimiza la posibilidad de
lesin.
Rasurar y preparar aspticamente un rea rectangular
de la piel de la pared derecha del trax medio, entre los
espacios intercostales 2 y 8.
El punto de insercin se localiza entre el 4 y 6
espacio intercostal. Se puede introducir el catter en el
105
106
107
Fig.136. Artrocentsis.
ABORDAJES
Articulacin radiocarpiana:
Se flexiona el carpo y la aguja se inserta por la cara craneal entre el radio
y el hueso radiocarpiano.
Articulacin del codo:
Se flexiona ligeramente el codo y se inserta la aguja desde la cara
caudolateral de la articulacin, de forma tal que sea caudal y medial al cndilo
lateral del hmero y ligeramente dorsal a la tuberosidad del olcranon del cbito.
La aguja pasar a travs del msculo ancneo y el tendn de insercin del
msculo trceps.
Articulacin escapulohumeral:
Se flexiona ligeramente el hombro y se inserta la aguja medialmente
ventral al proceso acromin del hmero. Se avanza en forma oblcua
108
Articulacin femorotibiorotuliana:
La artrocentsis de esta articulacin puede realizarse desde ambos lados
del ligamento recto patelar, puesto que ambos espacios articulares estn
conectados. Se flexiona la articulacin para extender la cpsula articular,
mientras se aplica presin digital sobre la cpsula en un lado del ligamento
patelar. Ello causa la protrusin de la cpsula en el lado opuesto. Se hace
avanzar la guja a travs de est ltima zona en direccin oblicua.
Articulacin coxofemoral:
Se puede utilizar un abordaje lateral o ventral. En el primer caso, se
abduce y se rota el fmur cranealmente (normalmente agarrando la articulacin
femorotibiorotuliana). Esta maniobra permite abrir el espacio articular y tensa la
cpsula. Se inserta la aguja craneal al trocnter mayor del fmur y se avanza
craneoventralmente hacia la articulacin. Debe tenerse cuidado para evitar la
arteria femoral, que cruza la cpsula articular y el nervio citico, que es caudal a
la articulacin.
Para el abordaje ventral, se coloca al animal en decbito dorsal, con
ambos fmures abducidos con suavidad hasta que estn perpendiculares a la
lnea media. La cara ventral de la fosa acetabular se localiza justamente caudal
al origen del msculo pectneo, en la eminencia ileopectnea de la pelvis. Se
avanza la aguja craneal en un ngulo de 45, a travs de la cpsula articular.
Manejo de la muestra:
La muestra debe manipularse correctamente lo antes posible despus de
su obtencin. El lquido sinovial normal no se coagula, sin embargo, cuando
exista contaminacin sangunea, hemorragia intraarticular o exudacin proteica,
en diferentes enfermedades inflamatorias, las muestras pueden coagularse a no
ser que se procesen de inmediato o se les aada un anticoagulante. Si se
obtiene poca cantidad de lquido, es necesario realizar inmediatamente las
extensiones, cuando es un volumen mayor se deposita en un tubo de vidrio al
vaco con EDTA, para el estudio citolgico, mientras que para la prueba del
cogulo de mucina se prefiere heparina. Cualquier anticoagulante es adecuado
para las otras pruebas de diagnstico.
Utilidad diagnstica:
Procesos no inflamatorios
Hemoartrosis
Artropatas degenerativas
Procesos inflamatorios
Artritis sptica
109
Artritis asptica
Procesos neoplsicos
Enfermedades inmunomediadas
LQUIDO CEFALORRAQUDEO
Introduccin:
El examen de lquido cefalorraqudeo (LCR) es un complemento muy
importante en la exploracin de los animales con enfermedad neurolgica y
como mnimo debera incluir el recuento de clulas nucleadas, evaluacin
citolgica y determinacin de la concentracin de protenas.
Las muestras comnmente se obtienen de la cisterna magna, en donde la
muestra se puede obtener con relativa facilidad y sin tanto riesgo de
contaminacin sangunea,
tambin puede obtenerse lquido del espacio
subaracnoideo lumbar. Las muestras obtenidas a nivel lumbar son por lo general
de poco volumen y presentan un mayor nivel de contaminacin sangunea, sin
embargo, Thompson public en 1990 que pueden ser tiles en las
enfermedades focales de la mdula espinal y que debido a que el LCR fluye de
craneal a caudal, aumenta la probabilidad de obtener diagnsticos exitosos. Se
puede extraer aproximadamente 1 mL de LCR por cada 5 Kg de peso corporal y
se pueden realizar varias pruebas con slo 1 o 2 mL.
Indicaciones:
Disfuncin del sistema nervioso central
Trastorno neurolgico detectado en el examen fsico
Historia reciente de signos neurolgicos
Investigacin de enfermedades focales de la mdula espinal
Sospecha de infiltracin de linfoma en sistema nervioso central
Objetivo:
Que los alumnos aprendan el
procedimiento y los abordajes de los
sitios anatmicos en donde se puede
obtener LCR, las indicaciones, el
material necesario, el manejo de la
muestra, la utilidad diagnsticas y las
principales complicaciones a considerar.
Material:
Se utiliza una aguja espinal con
estilete de calibre 20 de 9 cm, en la
mayora de los pacientes. En perros
pequeos y gatos puede utilizarse una
aguja de calibre 22 de 3 a 5 pulgadas.
Guantes estriles
Tubos con y sin EDTA
110
Procedimiento:
El lugar de la obtencin del LCR, se selecciona basndonos en la
localizacin de la lesin. El LCR se obtiene del espacio atlantooccipital en
lesiones por encima del foramen mgnum o del segmento craneal de la mdula
espinal. En lesiones caudales a la mdula cervical craneal, el LCR se obtiene en
el espacio subaracnoideo lumbar.
Abordaje atlantooccipital:
Inducir al animal a anestesia general e
intubarlo.
Rasurar el rea atlantooccipital, preparar la
piel quirrgicamente.
111
Abordaje lumbar:
El animal es inducido a anestesia general
Rasurar y preparar la piel quirrgicamente en una zona que se extiende 3 a 4
cm lateralmente de la lnea media desde la porcin craneal de las alas del leon
hasta el proceso espinoso dorsal de L6.
Se coloca al animal en decbito lateral y se flexiona el rea lumbosacra
atrayendo cranealmente las extremidades posteriores. De preferencia el rea a
puncionar debe ubicarse en la orilla de la
mesa para facilitar el movimiento de la
mano del operador.
Con guantes estriles se palpan las
apfisis espinosas dorsales de las
vrtebras lumbares. Los puntos ptimos
para la obtencin de LCR son los
espacios L 4 - L 5 y L 5 - L6
112
114
115
116
Complicaciones:
Ruptura de procesos inflamatorios encapsulados.
Diseminacin de un agente infeccioso.
Siembra de clulas neoplsicas en el recorrido de la aguja.
Hemorragia.
IMPRONTA
Las improntas son las huellas que quedan en una laminilla cuando se
pone en contacto con un tejido. Son fciles de obtener y requieren de una
sujecin mnima del paciente. En general producen muestras menos celulares
que los raspados y ms contaminacin que un aspirado, sin embargo, la
morfologa de las clulas puede ser excelente. En consecuencia, las improntas
de lesiones superficiales a menudo slo reflejan una infeccin bacteriana
secundaria y/o displasia tisular inducida por inflamacin. Ello dificulta su uso en
el diagnstico de neoplasias, sin embargo, son muy tiles para la evaluacin
rpida de una muestra de biopsia.
117
Indicaciones:
Lesiones superficiales.
Muestras de biopsias quirrgicas.
Lesiones: pstula, ppula o quiste.
Linfoadenomegalia (linfoma).
Procedimiento:
En lesiones ulceradas:
Si es una lesin ulcerada, realizar la primera impronta antes de limpiar el
exudado, de esta forma es ms fcil identificar algunos microorganismos
bacterianos que se perderan si se limpia la lesin.
La limpieza posterior para la segunda impronta, se lleva a cabo con una gasa
humedecida con solucin salina fisiolgica, retirando contaminantes como
exudado y sangre, de esta forma se obtiene una preparacin de mejor calidad.
Presionar un portaobjetos limpio contra la lesin previamente preparada. La
presin se ejerce con suavidad y aplicando un ligero movimiento ondulante, de
otra forma se pueden obtener clulas deformadas. De preferencia deben
obtenerse varias improntas de un mismo lugar.
Fijar la impronta al aire, puede ser de utilidad agitar la laminilla, esto ayuda a
preservar las clulas y la calidad de la muestra.
En muestras de biopsias:
Empleando una hoja de bistur se secciona el tejido o masa a examinar,
creando una nueva superficie.
La sangre y el lquido tisular deben retirarse de la superficie mediante contacto
con un material absorbente limpio (Fig. 149). El exceso de sangre o fluidos
puede inhibir la adherencia de las clulas tisulares a la superficie de cristal.
Apoyar con suavidad la superficie secada con lo cual se obtiene una
preparacin celular del tejido sobre un portaobjetos limpio y se retira con
rapidez. En un mismo portaobjetos pueden realizarse 3 o 4 improntas
Fijar las muestras al aire.
118
119
LITERATURA CONSULTADA
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Scientific Publication. Oxford,1996.
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