UNIVERSIDAD JUAREZ DEL ESTADO DE DURANGO

ESCUELA DE CIENCIAS QUIMICAS

IDENTIFICACION Y APLICACIN DE COMPUESTOS

FLUORECSENTES DE ALACRANES DE LA REGION DE
DURANGO

Por:
ROBERTO EMISAEL GONZALEZ REYES
TESIS

Presentada como Requisito Parcial para

Obtener el Ttulo de:
Qumico Frmaco Bilogo

Durango, Dgo., Mxico.

Noviembre de 2014.

REVISIN DE LITERATURA
Antes que nada hay que describir como es el comportamiento, las longitudes de onda
y comportamiento del espectro de la luz UV.
El trmino radiacin UV est presente en muchos mbitos de la vida actual.
Al hablar de rayos ultravioleta pensamos de inmediato en los peligros a la piel
generados por largas exposiciones al sol y tambin el aumento de radiaciones de esta
longitud de onda por efecto de la disminucin de la capa de ozono. Se ha descrito que
los materiales de origen orgnico son especialmente sensibles a las radiaciones del
espectro UV, ya que el contenido energtico de los fotones es suficiente para provocar
la alteracin de la mayor parte de los materiales orgnicos debido a su alto contenido
energtico. La radiacin UV est presente en numerosas fuentes lumnicas, entre ellas
la luz natural, las lmparas fluorescentes y en menor proporcin en lmparas
incandescentes de wolframio-halgeno. (Fernanda Espinosa Ipinza, Viviana Rivas
Poblete, 2011)
La porcin visible del espectro irradia entre los 400 y 700 nm, y es la nica radiacin
del espectro que puede ser vista por el ojo humano. La radiacin UV, en tanto, va
desde 10 a 400 nm, desde UV de vaco hasta casi el prpura del espectro. La fraccin
UV del espectro puede ser dividida en cuatro regiones:
UVA, conocida como UV de onda larga, entre 320 y 400 nm. Este tipo de lmpara
es la ms usada en conservacin.
UVB, conocida como UV de onda media, entre 280 y 320 nm.
UVC, conocida como UV de onda corta, entre 180 y 280 nm. UV de alta frecuencia.

 UV de vaco, entre 10 y 180 nm. Esta radiacin slo puede estar presente en el vaco
pues es rpidamente absorbida por el aire.

Figura 1.
Espectro de luz uv

Una vez dicho esto podemos explicar que en los artrpodos, especialmente los
escorpiones y alacranes, contienen en su exoesqueleto una sustancia que al ser
sometida a luz ultravioleta emite una luminiscencia caracterstica, debido a la
composicin se est. En parte esto se debe a que

la necesidad de estos para

protegerse de la radiacin uv solar, una investigacin sugiri, esto puede deberse a la

necesidad de estos por diferenciar la especie y diferenciar entre macho y hembra, lo
cual al final de la investigacin se descart, notndose que hay diferencias
significativas entre especies pero no entre gnero, aunque las diferencias pueden ser
significativas, no por eso la luminiscencia de estos va a dotar de superioridad. (Carl T.
Kloock, 2008)

Otra investigacin sugiere que en los artrpodos se basan en la reticulacin oxidativa

en el endurecimiento de la cutcula un proceso conocido como esclerotizacin. Entre
los artrpodos, los escorpiones son notable en que el proceso de esclerotizacin est

acompaada por la acumulacin de fuerte fluorescencia visible. Lo que nos hace notar
que la fluorescencia depende de un proceso oxidativo que es similar a el
envejecimiento oxidativo de protenas humanas, lo que llevo a estos investigadores a
la obtencin e identificacin del elemento fluorescente, el nombre de este compuesto
es -carbolina un derivado del triptfano. ( Shawn J Stachel et al., 1999)

Figura 2
Estructura molecular de betacarbolina

La identificacin del compuesto en estos artrpodos, hace que la bsqueda de posibles

aplicaciones para este mismo sea ms fcil, ya que as podemos obtener ms
informacin de la aplicacin anterior de esta en humanos, ratas o algn otro ser vivo.
Investigaciones realizadas con la -carbolina nos muestran su efecto sobre las mono
amino oxidasas, haciendo de la -carbolina

un inhibidor reversible de esta enzima,

convirtindolo as en un antidepresivo. Los IMAO se usan a menudo en pacientes

depresivos que son refractarios al tratamiento con los antidepresivos cclicos.

Las -carbolinas se unen con alta afinidad a los receptores de benzodiacepinas (BDZs)
localizados sobre la interface entre la subunidad alfa y la subunidad gamma del
complejo receptorial GABAA/ BZ, induciendo un cambio conformacional del receptor
que permite modular negativamente (reduce la frecuencia de apertura del canal de Cl) la capacidad del GABA para aumentar la conductibilidad del anin Cl- a travs de la
membrana celular (Beltrn y Navarro, 2000; Martn-Lpez y Navarro, 1997a; Sarter et
al., 1995)

ANTECEDENTES

Las investigaciones previas de la obtencin del principio beta carbolina fue empleada
en la investigacin de Shawn J Stachel, quien logro extraer el compuesto fluorescente
gracias al alcohol en el que fueron recolectados estos escorpiones. El alcohol extrae
lentamente un componente fluorescente de todos los escorpiones. Una muestra del
extracto etanlico (100 ml) se concentr a vaco para proporcionar 0,72 g de un aceite
amarillo espeso. Despus, el residuo se adsorbi sobre gel de slice (6,5 g) y se eluy
con 5% de metanol / cloroformo. Quien tambin demostr que adems de la extraccin
por disolventes podemos obtener una mezcla hecha del exoesqueleto molido el cual
al ser purificado tambin puede darnos un lquido fluorescente ( Shawn J Stachel et
al., 1999

Las investigaciones de Carl T. Kloock demuestra las diferencias significativas entre

especies que puede hacer que haya variaciones en cuanto el uso de diferentes
especies de artrpodos como escorpiones. Pero hace que entre especies no hay
diferencias significativas entre genero entre mismas especies, (Carl T. Kloock 2008)

Esto nos deja establecer un rango especfico en el cual podemos establecernos para
el estudio y la aplicacin del extracto.

El uso ms mencionado de la beta carbolina es como una droga que al ser aplicada
como frmaco puede resultar como un antidepresivo, pero que al ser utilizado con

otros fines puede resultar como una droga alucingena por su efecto sobre las mono
amino oxidasas. Esta actividad les permite ser un potenciador de ndoles en rituales
chamanicos en Amrica del sur en el que se emplean como potenciador de la droga
procedente de la ayahuasca. Los inhibidores de la mono amino oxidasa se utilizan
mucho menos que los antidepresivos tricclicos y relacionados o que los ISRS y
relacionados, debido a los peligros de interaccin alimentaria y farmacolgica y a que
resulta ms fcil prescribir los IMAO cuando no han surtido efecto los antidepresivos
tricclicos que viceversa. La tranilcipromina es el IMAO ms peligroso por su accin
estimuladora. Los frmacos de eleccin son la fenelzina o la isocarboxazida, que
poseen menos efecto estimulante y resultan, en consecuencia, ms inocuos

Las beta carbolinas son agonista inverso completo. Estas tienen afinidad por el
receptor y le producen con su actividad intrnseca negativa una modulacin negativa.
As disminuye la unin del neurotransmisor GABA al receptor por lo cual se atena la
frecuencia de apertura del ionforo y se restringe la entrada de cloro a la neurona a
niveles menores a los que producira el GABA solo. Las beta carbolinas producen por
s mismas ansiedad y convulsiones, efectos contrarios a las benzodiacepinas

JUSTIFICACIN
El nmero de aplicaciones de la fluorescencia ha ido creciendo en el campo de la
biomedicina, la biologa y en otras ciencias relacionadas. Los mtodos de anlisis en
estos campos tambin han ido aumentando. Muchas de estas tcnicas se basan en
los microscopios de fluorescencia. Los microscopios utilizan fuentes de luz de alta
intensidad, usualmente lmparas de mercurio o xenn, LEDs, o lseres, para generar
fluorescencia en las muestras bajo observacin.
Por lo que si se logra obtener este compuesto podramos encontrar aplicaciones
similares

as

aportar

nuevos

conocimientos

en

el

mbito

cientfico

HIPTESIS
La afinidad de la beta carbolina a ciertas enzimas y la fluorescencia pueden hacer de
este compuesto un indicador para enzimas, que indican una concentracin elevada o
poca concentracin.
La hiptesis plantea que al ser sometido un tejido o un preparado, al compuesto
extrado, produzca una indicacin mediante fluorescencia cuantificable bajo
microscopio.

OBJETIVO GENERAL
Obtener el compuesto responsable de la fluorescencia en los alacranes para aplicarla
posteriormente a algunos tejidos con el fin de observar la interaccin de estos

OBJETIVO ESPECIFICO
Aplicar en tejidos fijados en laminillas para su observacin, estos tejidos principalmente
podra mencionar aquellos que contienen grandes cantidades de MAO (mono amino
oxidasa) con lo cual podremos determinar si hay interaccin o no y si puede ser
utilizado como marcador para esas enzimas.

MATERIAL Y MTODO

Micrtomo

Laminillas

Extracto de betacarbolina

Microscopio de Fluorescencia

Prepararemos cubos de parafina de ciertos rganos como lo son cerebro medula e

hgado, con el micrtomo procederemos a hacer cortes de no ms de 8 micras,
montamos el rgano montado y lo desparafinado, procedemos a colocar en el extracto
de betacarbolina la montamos con resina y observamos a microscopio para observar
si hay alguna afinidad a este tipo de tejido

Referencias

1. Fengjuan Chen et al, (2014). A coumarin-derived fluorescent chemosensor for

selectively detecting Cu2: Synthesis, DFT calculations and cell imaging
applications. Talanta. , pp.7
2. Shawn J Stachel, Scott A Stockwel and David L Van Vrankenl, (1999). The
fluorescence of scorpions and cataractogenesis. Chemistry & Biology., pp.9
3. Scott M. Reed, My-Trinh Do , Susan E. Masta , (2008). Parallel factor analysis
of spider fluorophores. Photochemistry and Photobiology B: Biology. 93 (), pp.6
4. Carl T. Kloock , (2008). A comparison of fluorescence in two sympatric scorpion
species. Photochemistry and Photobiology B: Biology. 91 (), pp.5
5. David Beltrn y Jos Francisco Navarro, (2002). Efectos de la administracin
de N-metil beta-carbolina-3-carboxamida sobre la conducta agonstica en
ratones machos. Psicothema. 14 (2), pp.4
6. Hernn Martnez Glattli, (). BENZODIAZEPINAS. Hojas Clnicas de Salud
Mental. 2 (), pp.17
7. Fernanda Espinosa Ipinza Viviana Rivas Poblete, (2011). Fluorescencia visible
inducida por radiacin UV. Sus usos en conservacin y diagnstico de
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8. Pharma Editores, S.L. (2008). 4.3.2 Inhibidores de la monoaminooxidasa.
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9. Urbina Valeria (2012). Aplicaciones de la Fluorescencia. [ONLINE] Available at:

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//www.uam.es/departamentos/medicina/farmacologia/especifica/F_General/FG
_T26.pdf. [Last Accessed November 2014].
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