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UNIVERSIDAD AUTNOMA GABRIEL RENE MORENO

FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y TECNOLOGIA


CARRERA: INGENIERIA QUIMICA

TRADUCCIN
LIBRO

Biodiesel Ciencia y Tecnologa

TEMA

Produccin Biocatalitica de Biodiesel

MATERIA

FECHA

:23/02/2015

Operaciones Unitrias 1

Integrantes
Reinaldo Sejas Gacha
Wendy Alejandra Gil Patton
Jose Milton Ramos Prada

213018586
213084661
213015961

Santa Cruz-Bolvia

10
Produccin Biocatalitica de Biodiesel
Resumen:La produccin biocatalitica de biodiesel es una alternativa a la sntesis qumica de los steres de alquilo graso. La
esterificacin enzimtica (trans) de materias primas baratas (glicridos con contenidos altos de cido graso y agua libre,
tales como aceites de desecho Anda rpida), en condiciones de reaccin suaves conduce a productos ms limpios y
reduccin significativa de los flujos de residuos slidos y lquidos. Sin embargo, los biocatalizadores imparten un alto coste

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de produccin, la desactivacin de la enzima, inhibidor de la tolerancia y la necesidad de


costosos requisitos de equipo estriles son otras caractersticas. Desde que los biocatalizadores
son ms caros que los catalizadores qumicos tradicionales, su recuperacin es obligatoria desde
un punto de vista econmico, la inmovilizacin de la enzima sobre un soporte slido permite
procesos continuos. Esta opinin captulo (trans) esterificacin de lipasas y biocatalizadores de
(inmovilizados) lipasas para la sntesis de biodiesel.
Palabras claves:transesterificacin enzimtica, produccin de biodiesel biocataltica, deteccin
de las lipasas, lipasas inmovilizadas, las condiciones de reaccin

10.1 Introduccin
El enfoque qumico para la sntesis de steres de alquilo de triglicridos (ruta catalizador
alcalino), aunque eficiente en trminos de rendimiento y tiempo de reaccin, sufre de varias
deficiencias:

Necesidad de refinado alimentado de tocks (limitado AGL y contenidos de agua)


Conversin ineficiente de materiales de alimentacin a steres de alcoholes de cadena ms
alta
Las dificultades en la recuperacin de glicerol
Necesidad de eliminacin del catalizador y la sal de residuos; y
Naturaleza-Energa intensiva del proceso

Estas desventajas son superadas en gran medida por un enfoque bioqumico, que, sin embargo,
presenta otros inconvenientes. La biocatlisis se refiere a la catlisis por enzimas, protenas
altamente complejos. Puesto que las enzimas estn compuestas de amonio cidos que pueden
actuar ya sea como catalizadores de cido o de base a travs de su-COOH-NH2 y -CONH2
grupos. Las enzimas se pueden introducir en la reaccin en una forma aislada, purificada o
como microorganismos de clula entera. La utilidad comercial de enzimas se encuentra limitado
por varios factores. Las enzimas individuales son caras para aislar y purificar y son difciles de
recuperar, mientras que los microorganismos de clulas enteras son relativamente baratos, pero
menos selectiva. Las enzimas no son estables fuera de un intervalo relativamente estrecho de
condiciones de operacin (disolvente, pH, temperatura). Muchas enzimas slo son eficaces en
soluciones muy diluidas y tambin se envenenan fcilmente.

10.2 Enzimtica (Trans) esterificacin


Las lipasas (protenas solubles en agua presentes en los organismos vivos) pertenecen a la clase
enzimtica de hidrolasas y la divisin catalizada de los enlaces ster de triglicridos en cidos
grasos libres y di-y monoglicridos (dada una actividad suficientemente elevada de agua) y
permiten la sntesis de steres (esterificacin, transesterificacin, interesterificacin) en los
medios de comunicacin bajo el agua. Las enzimas operan en solucin acuosa y no en aceite.
Las lipasas son activas a temperatura ambiente y a pH neutro bajo presin normal en recipientes
de reaccin simples. Las enzimas son biocatalizadores generalmente eficaces para tener

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sustrato, grupo funcional y especificidad estreo. Las lipasas especficas de la regin, que
cataliza la transesterificacin de la posicin 1 y 3 de los triglicridos, pueden aplicarse a la
produccin de productos valiosos, tales como sustitutos de la manteca de cacao
El uso de bio catlisis en la produccin de biodiesel se propuso hace unos 20 aos, pero se ha
perseguido ms ampliamente hace muy poco, sobre todo en Japn, tabla 10.1 muestra las
principales caractersticas de transesterificacin enzimtica y tambin describe los retos
cientficos y tecnolgicos. En comparacin con el cido convencional y catalizadores bsicos,
las lipasas ofrecen las ventajas de un producto ms limpio, ms fcilmente aislado, acoplados
Tabla 10.1 Caractersticas principales de transesterificacin enzimtica
Ventajas:

Las enzimas fcilmente disponibles y estables


Alta quimioterapia, la selectividad regin y estreo
Productos de alta pureza
Procesamiento adecuado o continuo y por lotes
Subsidio para materia prima barata
Condiciones de reaccin suaves
Bajo el alcohol: relacin molar aceite
Facilidad de alcoholisis con alcoholes superiores y ramificados
El medio ambiente
Recuperacin de producto simple, incluyendo glicerol
Ninguna produccin de residuos qumicos; la ausencia de tratamiento de aguas residuales
Esquemas de produccin simples

Desventajas:

Enzimas caros
La relativamente baja actividad de la lipasa
Reaccin largo tiempo de desactivacin de la enzima
Tolerancia limitada para disolventes orgnicos
Afectados por contaminantes

Contamos con una reduccin significativa en los flujos de residuos slidos y lquidos. Los
biocatalizadores normalmente imparten un elevado coste de produccin, debido a sus bajas tasas
de reaccin (en comparacin con los catalizadores homogneos bsicos), tramos cortos de la
vida celular, inhibidores de la tolerancia, dificultades en la separacin del producto y costosos
requerimientos de equipos estriles. Estos atributos afectan negativamente sobre todo a la
produccin de productos qumicos de gran volumen como el biodiesel.
Los estudios sobre la produccin de biodiesel cataltica han considerado el uso de triglicridos
de origen diferente, as como la variacin en el alcohol. El uso de biocatalizadores permite la
sntesis de steres de alquilo ramificados y especificas mas elevadas, la transesterificacin de

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los stocks de alimentacin baratos (glicridos de cido con alta grasos libres (AGL) y el
contenido de agua, tales como aceites usados y grasas), facilitan de recuperacin de glicerol, sin
operaciones complejas para la eliminacin de catalizador y la sal, y requiere menos disolvente
orgnico y menor consumo de energa en comparacin con los procesos qumicos
convencionales. La catlisis de lipasa permite la transesterificacin simultnea de triglicridos y
esterificacin de cidos grasos libres en una etapa del proceso, y, a diferencia de la mayora de
los catalizadores de quimioterapia, muchas lipasas funcionan bien en la presencia de agua [2,3].
Los principales problemas que hay que superar son la desactivacin de la enzima (por ejemplo,
la mayora de las lipasas son envenenados por metanol y otros alcoholes de cadena corta) y la
recuperacin, la contaminacin del producto y el costo total. Catalizadores enzimticos costosos
requieren el uso repetido por la inmovilizacin fsica sobre un soporte poroso (vase la seccin
10.2.1). La desactivacin tiene esencialmente un origen fsico y es debido a la inmiscibilidad de
alcoholes de bajo puntos y triglicridos.
Los tiempos de reaccin indicados de transesterificaciones catalizada por lipasa varan
tpicamente de 6 h hasta 36 h para inmovilizada de Candidaantarctica [4], que es
considerablemente ms largo que las 1 h requeridos para la catlisis bsica convencional. Sin
embargo, el progreso reciente ha reducido el tiempo de reaccin a cerca de que el tiempo de
residencia de este ltimo [5]. Los catalizadores enzimticos especficos pueden requerir
diferentes tiempos de residencia y de las temperaturas de reaccin. Las temperaturas de reaccin
en enzimtica son bajos (298 a 318 K, pero pueden ser ms altos para los microorganismos
resistentes al calor). Las ventajas aadidas son la recogida sencilla del producto, ninguna
contaminacin del catalizador al glicerol, los residuos de desecho mnimos, y la produccin
sencilla tanto para la reaccin continua y por lotes (en etapas) (vase la Fig. 10.1). En
comparacin con la reaccin qumica catalizada, la transesterificacin catalizada por lipasa
presenta reduce significativamente los costes de procesamiento hacia abajo y los problemas
ecolgicos.
En el caso de las grasas animales con altos puntos de fusin, que son por lo general cerca de la
temperatura de desnaturalizacin de la lipasa, normalmente se necesita un medio disolvente
orgnico. En los mtodos que implican disolucin de un aceite o grasa en un disolvente (por
ejemplo, hexano) con el fin de reaccionar con el alcohol en presencia de una lipasa, es necesario
separar los steres de alquilo de cidos grasos (FAAEs) a partir del disolvente, lo que aumenta
proceso de complejidad y el coste. La metanolisis requiere la presencia de un co-disolvente con
la necesidad de recuperacin. Para la aplicacin prctica de la fabricacin de combustible diesel,
no es deseable usar un disolvente.

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10,1 esquemtica de una planta de biodiesel catalizada por lipasa (despus de la Ref. [5]).
El alcohol ms utilizado, metanol, y se mezcla deficientemente con el aceite o la grasa e incluso
puede ser de desnaturalizacin de la enzima. Las lipasas son con frecuenciainactivadas mediante
la adicin de ms de 1 equivalente molar de metanol, y se deja entonces metanolisis. Por
ejemplo, (inmovilizado) de C. antarctica lipasa se inactiva en una mezcla que contiene> 1,5
equivalente molar de metanol en el aceite (Fig. 10.2). Sin embargo, se requieren al menos 3
equivalentes molares de metanol para la conversin completa de un aceite vegetal el ster
correspondiente. A fin de superar los inconvenientes mencionados anteriormente, una adicin de
varios pasos de este alcohol al medio de reaccin se ha propuesto [4, 6. 7] con el fin de lograr la
conversin completa del aceite (vase la Fig. 10.3). La inactivacin se ha eliminado tanto en
una reaccin de metanolisis de dos pasos [4] y en una reaccin de tres pasos de flujo continuo
[6]. Dado que la inhibicin de la lipasa a veces se puede evitar en presencia de un ster de cido
graso, una solucin pre-mezclada de un ster de cido graso y el alcohol se puede aadir paso a
paso (en operacin discontinua o continua).
La sntesis de FAAEs, en tanto, puede realizarse de forma continua mediante la adicin de un
alcohol a una mezcla de reaccin en un reactor de enzima de lecho fijo, la recogida de producto
de reaccin mientras se mantiene el alcohol a la concentracin apropiada, y separar el FAAE
resultante a partir de glicerol crudo y glicrido sin reaccionar ponindose de pie, centrifugacin,
separacin por membrana, destilacin molecular o sper fraccionamiento. En el lote operacin
sabia se utiliza un mtodo multi-paso. Se permite un alcohol para reaccionar a una
concentracin menor que la concentracin de inhibicin de lipasa (que se refiere a una
concentracin en la que la activacin de

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10.2 Efecto del contenido de metanol en metanlisis de aceite vegetal (SBO / mezcla RSO).
Condiciones de reaccin: 10 g de aceite / metanol, 0,4 g inmovilizados C. Antrtida lipasa a
303 K durante 24 horas (despus de [6])
la lipasa en los microorganismos se inhibe, o la lipasa est inactiva irreversiblemente), y el
alcohol se aade de manera que las concentraciones es menor que la concentracin de
inhibicin de lipasa y otros ingresos de transesterificacin. Ha habido varios informes de
bacterias que exhiben resistencia a los disolventes txicos. Algunas cepas de Pseudomonas han
desarrollado tolerancia sustancial metanol; con lipasa de P. Fluorescentes, se observaron altas
conversiones a 4,54 meq de metanol [7].
De cribado amplio de las lipasas y otras enzimas inmovilizadas en la transesterificacin es
deseable tomar en cuenta el tipo, la forma y cantidad de lipasa, el tipo de alcohol y su
suministro (por etapas para evitar la inactivacin de la lipasa) y la relacin estequiomtrica de
los reactivos, la presencia de disolventes orgnicos , la presencia de disolventes orgnicos, el
contenido de agua en el aceite, la presencia de glicerol y diversas condiciones de
funcionamiento tales como la temperatura de reaccin, tiempo (tpicamente 4-16h) y la
agitacin / agitacin [8-11]. Los factores a tener en cuenta son la especificidad, sustratos y el
producto final deseado. Una lipasa o enzima que tiene la capacidad de degradar un glicrido en
glicerol o glicrido parcial y un cido graso puede ser 1,3-especfico (por ejemplo
Rhizopusoryzae) o no especfico (por ejemplo, de C. antarctica). En general, se selecciona la
especificidad de la enzima en funcin del producto final deseado. En vista de la produccin de
steres de cidos grasos, una lipasa no especfica es preferible. No especfica

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10.3 Evolucin temporal de metanlisis de aceite vegetal (SBO / mezcla RSO). Condiciones de
reaccin: 28,95 g de aceite, 1,05 g de metanol (relacin molar de metanol (MeOH) / VO = 1:
1), y 1,2 g inmovilizados lipasa de C. antarctica a 303 K. despus de 24 y 48h reacciones, se
aadieron 1,05 g de metanol (despus de ref [. 6])
enzimas tales como Pseudomonascepacia y de C. antarctica son particularmente tiles en la
produccin de steres de alquilo para su uso como biocombustibles y lubricantes. Los Aceites y
grasas tambin pueden ser producidos por microorganismos, tales como Mortierella o
Schizochytrium. Esencialmente, cualquier microorganismo se puede utilizar siempre y cuando
producen la lipasa, tal como hongos filamentosos (por ejemplo Aspergillus, Mucor,
Phycomyces, Rhizomucor, Penicillium, Rhizopus, Cunnighamella) bacterias (por ejemplo,
Pseudomonas, Alkaligenes), o levaduras (por ejemplo, Candida, Cryptococcus). Los
microorganismos no deben permitir preferiblemente una lipasa a ser secretada a partir del
microorganismo y ser resistente al calor. Un microorganismo intacto es uno que no ha sido
sometido a ningn tratamiento (por ejemplo con disolventes) para mejorar la permeabilidad de
la membrana celular. La mayora de las lipasas utilizadas como catalizadores en la sntesis
orgnica son origen microbiano y fngico. Typicall lipasas en forma de polvo pueden obtenerse
a partir roquefortiPenicillium, Aspergillus niger, Mucorjavanicus y otros. Optimizacin de la
transesterificacin catalizada por lipasa tambin debe tener en cuenta la tolerancia de las
enzimas a disolventes orgnicos (incluyendo el alcohol) y de inmovilizacin de enzimas
Las lipasas de Candida rugosa, P. cepacia y visualizacin P. fluorescentes particularmente con
alta capacidad cataltica en metanlisis del aceite de soja (SBO) [12]

Las velocidades de reaccin de metanolisis catalizada por C. rugosa y lipasas P. Fluorescentes


disminuyeron significativamente para bajos contenidos de agua, lo que indica que el agua
previene la inactivacin de estas lipasas por metanol. Por otro lado, la velocidad de reaccin de

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metanolisis catalizada por P. cepacia lipasa sigue siendo alta, incluso a bajo contenido de agua.
Por otra parte, P. cepacia da contenido de ster de metilo de alta en la mezcla de reaccin hasta
2 o 3 equivalentes molares de metanol a aceite. Las lipasas fuertemente resistentes a la alta
metanol, tales como P. cepacia, son deseables para su uso en procesos de reaccin de
metanolisis.
Como el metanol desactiva la lipasa, Du et al. [13] propuesto de alto rendimiento (92%)
interesterificacin de SBO en funcionamiento continuo con acetato de metilo, que no tiene
ningn efecto negativo sobre la actividad enzimtica incluso despus de la reaccin 100 del
ciclo y los rendimientos de triacilglicerol (TAG) con valor ms alto que el glicerol (ecuacin
10.1). Por otra parte, mientras que los bloques de glicerol del sitio activo de la lipasa, esto no es
el caso para el TAG. Por interaccin de TAG con acetato de metanol de metilo (reciclado al
proceso) y glicerol se forman [14]

El papel del medio de reaccin en la esterificacin y transesterificacin catalizada por lipasa ha


sido discutido [15]. Varios estudios informan de la produccin catalizada por lipasa de FAAEs
en medio acuoso [3, 12, 16], disolventes orgnicos [17-20] y en sistemas libres de disolvente
[21, 22]. La naturaleza del medio de reaccin (diferentes disolventes orgnicos y fluidos sper
crticos) influye notablemente la actividad de la lipasa microbiana en (Trans) reacciones de
esterificacin en trminos de velocidades de reaccin y lipasa enantioselectividad [15]. La
polaridad del disolvente y la hidrofobicidad son capaces de modular la actividad de la lipasa en
gran medida. La alcoholisisque se realiza en un medio libre de agua se ve favorecida porque la
posible recuperacin de glicerol a partir de soluciones acuosas es difcil y la actividad de la
enzima puede disminuir rpidamente en medio acuoso.
Se necesita la presencia de agua para la expresin de la actividad enzimtica, pero puede
resultar en la inactivacin de la lipasa. Mientras que las lipasas son solubles en solucin acuosa
puede dar lugar a la inactivacin de la lipasa. Mientras que las lipasas son solubles en
soluciones acuosas, los lpidos no lo son. El uso de un disolvente orgnico adecuado o un
emulsionante ayuda a superar el problema de un contacto ntimo entre la enzima y el sustrato.
En un medio acuoso con un sustrato TG emulsionado, la hidrlisis es la reaccin de la lipasa
dominante. Lipasa de R. oryzae cataliza eficazmente la metanolisis libre de disolvente de SBO
en presencia de 4-30% de agua en los materiales de partida, pero es casi inactivo en ausencia de
agua [3]. La cintica de la reaccin sugiere una sucesin de eventos, a saber, la hidrlisis del
aceite a los cidos grasos libres y glicridos parciales, seguido por esterificacin de los cidos
grasos con metanol. Por otro lado, en medios no acuosos las reacciones de esterificacin y
transesterificacin se vuelven predominantes. Las enzimologas no acuosas ofrecen varias
ventajas sobre la catlisis bio acuosa tales como solubilidad mejorada de sustrato, estabilidad de
la enzima y la capacidad de catalizar reacciones inusuales [23]. La transesterificacin usando

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lipasa en sistemas no acuosos evita la hidrlisis de FAAEs producidos. La alcohlisis


enzimtica de aceite de grosella negra en el 96% (v / v) de etanol a 303K mediada por P.
fluorescentes lipasa dio lugar a un rendimiento qumico mximo de 52% FAEEs despus de 8h
y la conversin mxima de 95,4% TG a MG, DG FAEE Y FFA despus de 16 horas [22]
La cantidad de agua presente en el medio de reaccin es un parmetro crtico en la produccin
de biodiesel influye en la biotransformacin en medios no acuosos [24]. En el caso de los
aceites usados que contienen una gran cantidad de agua, el progreso de la reaccin se inhibe y
las instalaciones para la eliminacin del agua son necesarias.
Menos de una monocapa de agua se requiere para una enzima para mostrar la actividad
biolgica expresada. A medida que aumenta el nivel del agua, aumenta la flexibilidad de la
enzima y se convierten en disminuciones significativas y la transesterificacin de rendimiento.
La adicin de 1% ( WV ^ (- 1)) de agua en el caso de la enzima libre y 0,5% ( WV ^
(- 1)) de agua en el caso de inmovilizado Chromobacteriumviscosum (lipasa de una fuente
microbiana) dio los rendimientos mximos de transesterificacin de Jatropha de 73% y 92%,
respectivamente [26]. Iso et al. [27 tambin han informado de que el contenido de agua es un
parmetro importante para la reaccin de transesterificacin catalizada por lipasa.
C. antarctica lipasa no requiere pre-tratamiento con agua por el alcohol que se produzca [6,17]
Los fluidos supercrticos (SCG) con su calidad "-lquido como el" son una clase nica de
medios no acuosos para las reacciones catalizadas por enzimas ya que las altas velocidades de
reaccin pueden ser alcanzados. Su viscosidad ms baja en comparacin con disolventes
orgnicos hacen atractivos como medios de reaccin para el transporte de reactivos y productos
hacia y enzima lado a otro. Las enzimas se aplica ms comnmente utilizados en condiciones de
SCF son lipasas. Hay muchas razones para el uso frecuente de las lipasas en los SCF: aumento
de la solubilidad de los sustratos lpidos hidrofbicos en los SCF no polares, la inversin de las
reacciones de hidrlisis en favor de sntesis (como (trans) esterificacin), propiedades
disolventes sintonizables (Ajustando T, p), de alta difusividad sustrato, facilidad si el
procesamiento aguas abajo de los productos, y una fcil extraccin de SCF por T simple, la
reduccin de p. Supercrtica CO _2 (sc _2 CO) es un disolvente proceso
especialmente atractivo para la catlisis enzimtica, ya que no es peligroso. En caro y el medio
ambiente. El uso de lipasas libre o inmovilizada como catalizadores en _2 se CO es
posible ya que estas enzimas son a la vez estable y activa en este medio [28-31] y mantienen su
actividad a presiones tan altas como 400MPa [32]. Erickson et al. [33] investig el efecto de los
cambios de presin-introducido en las propiedades fsicas de scCO2 sobre la tasa de
transesterificaciones catalizada por lipasa. Lipasas inmovilizadas de Rhizomurcormiehei
(Lipozyme) [34] y C. antarctica (Novozym 435) [35] muestran un rendimiento catlisis ideal,
con respecto a la actividad y la estabilidad cuando se ensaya en scCO2 como disolvente de
reaccin. Catlisis enzimtica [36], la esterificacin [30, 37-41] y la transesterificacin es
scCO2 [42-48] se ha informado.
En los sistemas sin disolventes FAAEs se obtienen de manera eficiente slo de cara
(ramificados) alcoholes superiores, no a partir de MeOH o EtOH. Recientemente, el
rendimiento cintica y termodinmica de los medios no polares y procesos libres de disolventes
se han comparado [49]
Las lipasas catalizan efectivamente la esterificacin de cidos grasos libres [1].

435

Obviamente, durante una reaccin de esterificacin entre una fuente de aceite que contiene un
cido carboxlico y un alcohol, agua (pero no glicerol) se produce como un subproducto, que
puede causar la inhibicin. Miristato de etilo fue producida por reaccin enzimtica continua en
scCO2 [50]. Lipasas modificadas (termoestables y resistentes al alcohol) se utilizaron en la
preparacin de oleato de etilo de trolein y etanol [51]. Lipasa de A. Niger, C. rugosa y R.oryzae
fueron casi inactiva durante metanlisis de triolena en n-hexano como disolvente orgnico,
mientras que lipasas de Penicilliumcamembertii, P. cepacia y P. fluorescentes mostraron
actividad cataltica [7]. Este ltimo mostr la ms alta conversin (48%) despus de 24 horas de
este medio de reaccin. Varios lipasas comerciales tambin se ensayaron por su capacidad para
catalizar la esterificacin de glicerol con cido linoleico conjugado y grasos de cadena larga a
partir de aceite de pescado (EPA y DHA) [52]
Interesterificacin conduce a cambios en la composicin triacilglicrido.
Interesterificacin enzimtica (IE) se puede utilizar para actualizar grasas saturadas baratas y
para obtener un mejor comportamiento de fusin. Reaccin Interestificacin generalmente
ocurre junto con la hidrlisis, dando lugar a diacil- y monoacyglycerol.
Otro producto de las lipasas catalizada por interesterificacin es la FFA. Inmovilizada
Thermomyces lanuginosa lipasa que se emplea para catalizar la reaccin de interesterificacin
entre PON CPRM (CRO) y triestearina (SSS) a 318 K en un sistema libre de disolvente. [53].
Del mismo modo, la lipasa inmovilizada SP435 de C. antarctica se ha utilizado en la
interesterificacin de grasa saturada (manteca de cerdo) y un aceite vegetal insaturado (trisen
extra, HOSNO) [54] estearina de palma (PS, dt slido) y olena de almendra de palma (PKOo,
fase) las mezclas lquidas fueron modificados por interesterificacin enzimtica utilizando R.
miehei (Lipozyme IM60) a 333 K para lograr las propiedades fsicas de las grasas de margarina.
[55]. Tambin se inform de la interesterificacin enzimtica de mezclas de CO.PS [56,57],
TLW-RSO [58] y TLW-SNO [59]. La catlisis de lipasa tambin se utiliza para la produccin de
cidos grasos por hidrlisis de aceite vegetal (por ejemplo, Poo / C, rugoso [60]).
Tabla 10.2 reporta una gran variedad de fuentes de bio-aceite que han sido sometidas a la
biocatlisis para la produccin de biodiesel. Ejemplos ilustrativos son alcohol catalizado por
lipasa (con alcoholes otra metanol) de SBO y

435

Tabla 10.2 Biocatalisis en (trans) esterificacin


fuente de bio aceite

Biocatalisis

Referencias

Aos

Lipasa
C. antrctica, M.
miehei, P.
Fluorecente
AcidoMiristico
Lipasa
RSO
Lipasa
RSO
C, parapsilosis
VOs, TLW
G. candidum, P.
cepacia, R. delemar
PMF
R. rhizopodiformis
Aceite de hgado de H. lanuginosa, C.
bacalao
antrctica
RSO, SBO, OO, C. antrctica, M.
TLW
miehei, P. cepacia, R.
delemar,
G.
candidum
SBO
R. oryzae
Fracciones de suero
C. curvatus
Perder rpido/aceite
Lipasa
Aceites usados/grasas Lipasa
CON, PKO
P. cepacia
CPO, PKO
H. lanuginosa
Aceite
Crambe, C. papaya
Aceite Camelina
SBO
C. rugosa, P. cepacia,
P. fluorecente
Aceite de Grosella P. fluorescente
negra
VOs, (OO)
C. curvatus
MOSNO, trioleina
Varios Lipasas

[1]
[51]

1985
1990

[50]
[62]
[63]
[17]

1993
1994
1994
1996

[64]
[44, 65]

1997
1997/8

[66]

1998

[3]
[67]
[68]
[2]
[21]
[69]
[70]

1999
1999
2000
2000
2000
2000
2000

[12]

2001

[22]

2001

[9]
[71]

2001
2002

Aceite jatropha
C. viscosum
Residuos ABE contg. C. cylindracea
PMO
CON, PKO
C. rugosa y R. miehei
Residuos ABE contg. Lipasa
VOs
Trioleina
Lipasa Modificada
VOs, grasa
T. lanuginosa, R.
miehei, C. antrctica
y clulas microbianas
RSO
Cultivo Bacterial
SBO
Lipasa para RMRC
BD5

[7]
[26]

2002
2003

[19][72]
[73]

2004 2005
2005

[51]
[74]

2006
2003

[75]
[76]

2005
2005

SBO, BTW
SON

435

BTW [1], de SNO en ter de petrleo bajo condiciones anhidras [61] y de RSO (con 2-etilhexanol 1-1) [62], as como laalcoholisis de aceite de fraccin media de palma (PMF) por la
lipasa de Rhizopusrhizopodiformis [64]. En este ltimo caso, las diferencias se observaron entre
metanol y propanol en hexano. La transesterificacin de RSO en medio acuoso catalizado por
lipasa de Candidaparapsilosis fue permitida por la inhibicin de metanol de la hidrlisis de
steres [63]. Comercialmente las lipasas disponibles tienen diversas especificidades en la
reaccin de transesterificacin. Foglia et al. [66] proyectarn 1,3-especfico (M. miehei y R.
delemar), especfica de acilo (G. candidum) y no especfica (C. antarctica y P. cepacia) lipasas
por su capacidad de transesterificacin de RSO, SBO, OO y TLW con alcoholes primarios de
cadena corta (metanol (MeOH), etanol (EtOH), propanol(PrOH), butanol(BuOH)) utilizando
diversos disolventes (Figs 10.4 y 10.5). Dado que los aceites blancos contienen inevitablemente
una cierta cantidad de agua, industrialmente es necesario ser capaz de aplicar una lipasa que
catalize eficazmente metanol incluso en la presencia de agua. Se inform de la produccin BDF
a partir de aceite vegetal catalizada por la lipasa R. oryzae en el sistema que contiene agua sin
un disolvente orgnico [3].
El biodiesel tambin ha sido producido en un proceso microbiano / qumico combinado en el
que Cryptococcuscurvatus (C. curvata o A. curvatem) en el suero deprodeproteinas, un producto
de desecho de la industria lechera, produce un triglicrido de cido graso rico en intercelular, o
el aceite de una sola clula [67]. Despus de la interrupcin de las clulas sometidas a
tratamiento qumico conocido para producir FAME. La transesterificacin de aceites / grasas de
desecho se ha llevado a cabo en condiciones libres de solventes con una esterasa en presencia de
1 a 120% en peso de agua [2] La glicerolisis sin disolventes de CPO y PKO catalizada por lipasa 1. 3-especfica de Humicola
lanuginosa se utiliz para la produccin de glicerol monoacilo [69], CNO y PKO se utilizaron
para producir glicridos de cadena media (mezcla

435

10,4 catalizada por lipasa de transesterificacin de grasas y aceites que utilizan M. miehei
(alcoholes primarios) y C. antarctica (alcoholes secundarios) (despus de ref. [66])

435

10.5 transesterificacin enzimtica y la esterificacin de cidos grasos libres (FFA) que


contienen materias primas de triglicridos utilizando M. miehei (alcoholes primarios) y C.
antarctica (alcoholes secundarios) lipasas (despus de ref. [66])
de MG, DG y TG) mediante una combinacin de la hidrlisis catalizada por lipasa (con C.
rugosa) y la esterificacin (con R. meihei) [72]. Tambin se informo la alcoholisis de lipasas
catalizadas de aceites crambe y camelina [70]. Lipasa (C. curvatus) - metanlisis de aceite de
oliva catalizado no se vio afectado por la presencia de disolvente orgnico y agua [71]. Wl
activado de tierra de blanqueo (ABE), que contiene hasta 40% de aceite de pal residuos, se
utiliz para la produccin de FAAEs utilizando la lipasaC. cylindracea en un sistema de
disolvente orgnico [19] Del mismo modo, Kojima y Park [73] describen a la FAME catalizada
por lipasa la produccin de aceites residuales vegetales (% en peso) alrededor de 35-40
incrustados en la tierra de blanqueo filtrada residuos activado (ABE), un cido mineral. La
arcilla montmorillonita tratada se utiliza como adsorbente en la descolonizacin de la grasa y la
refinacin de petrleo (80kt / ao dados de alta en Japn).
Cao et al [75] han informado de la produccin de combustible biodiesel por fermentacin de
colza (RSO 245kg de 1.000 kg de semillas). Tambin la transesterificacin biocataltica de
aceites y grasas (grasas de restaurante de residuos, (transgnico) SBO, SO, petrleo microalga
ingeniera, aceite de ricino, aceite de desecho industrial, etc.).

435

Con metanol en serie 3-4 reactores de lecho fijo enzimas se report T, lanuginosa, R, miehei, C,
antarctica y clulas microbianas [74], SBME 56% de rendimiento se produce en 24 h desde el
2,5% en peso RMRC BD5 lipasa-produccin clulas libres en 303 K en presencia de 10% en
peso de agua [76] zymatic.
Transesterificacin enzimtica de RME y trimetilolpropano a trimetilolpropanotri steres que
pueden ser utilizados como materias primas fluidos hidrulicos biodegradables [77].

10.2.1 Biocatlisis por las lipasas inmovilizadas


Desde que las biocatlisis son ms caras que la catlisis qumica tradicional, su reciclado es
esencial a la ejecucin de una operacin econmica. Esto es posible mediante la inmovilizacin
de enzimas sobre soportes slidos, que tambin permite procesos continuos. Las lipasas se
pueden inmovilizar por atrapamiento, como en una matriz sol-gel de silicato estratificado o
polmero. Las enzimas de inmovilizacin fsica permiten el uso repetido y facilita la
recuperacin de la enzima del medio de reaccin, mejora la estabilidad, ofrece un mejor control
de las reacciones, y proporciona productos de pureza y rendimientos ms altos. Las desventajas
incluyen el tiempo necesario para el aislamiento e inmovilizacin. Por otra parte, la
inmovilizacin de enzimas tambin podra disminuir su actividad intrnseca. Las lipasas
inmovilizadas muestran mayor afinidad a metanol que a los triglicridos, en consecuencia,
cuando el alcohol se absorbe en los poros de una lipasa inmovilizada, el acceso de TGS est
bloqueado, adems, el glicerol liberado tambin puede inhibir la reaccin mediante la
limitacin de sustrato y la difusin del producto debido a su insolubilidad en aceite o disolvente
orgnico. La regeneracin de una lipasa inmovilizada desactivada slo puede ser parcial.
La biocatlisis por las lipasas inmovilizadas se considera como una tecnologa alternativa para
producir biodiesel [78]. Inmovilizado C, Antrtica es estable durante al menos dos aos [4].
Esto sugiere que el costo de produccin de combustible biodiesel por una reaccin de flujo de
tres pasos puede llegar a ser menor que por transformacin qumica.
Ha habido varios informes sobre esterificacin de FFA con metanol o etanol [79-82]. Bloomer
et al. [79,80] conseguirse un sistema disolvente orgnico eficaz para producir esteres etlicos de
cidos grasos de cadena larga con inmovilizada R, lipasa miehei. La aplicacin de este sistema a
la conversin de FFA de residuos a sus steres de metilo requiere la eliminacin del disolvente
despus de la reaccin. AGL de residuos de atn (obtenidos en el proceso de produccin
enzimtica de un aceite rico en cido docosahexaenoico a partir de aceite de atn) pueden ser
esterificados a 303 K con 2 mEq de MeOH usando 1,0% en peso de lipasa de C. antarctica
inmovilizada en un sistema libre de disolvente orgnico [92 ].
Como se muestra en la Tabla 10.3, varios estudios tambin han aparecido en la sntesis de
steres de cido oleico catalizadas por lipasa inmovilizada [40,45]. Inmovilizado R, miehei no
pierde su actividad cuando son expuestos a CO2 a 30 MPa durante 24 h.
L a esterificacin de cido oleico por etanol catalizado por inmovilizada M, miehei en

435

Tabla 10.3 Biocatalizadores inmovilizado en (trans ) esterificacin


Fuente de bio-aceite
Biocatalizador(es)

Ao(s)

cido oleico
Acido esterico
cido oleico
Aceite de maz
Vos, TLW

1992
1992
1996
1996
1996

Soapstock
SNO
Aceite de hgado de bacalao
Aceite de atn
Grasa de restaurante
Mezcla SBO/RSO
Aceite crambe
Aceite camelina
Trioleina, SFO
Aceite usado
Manteca de cerdo, grasa de
restaurante
SBO, grasa animal,
aceites/grasas usados
CSO
Desgomado SBO
Residuos de atn FFA
SNO
MOSNO, trioleina
Varioa
RSO
SBO
SNO
cido oleico

RSO, SBO, PNO, maz,


aceites de tocino
Aceite de cido (TG/FFA)
SNO
Trioleina
SNO
Aceite de salicornia
VOs, grasas (residuos) de
origen animal, grasas
(Residuos) grasas/aceites,

Referencia(
s)
M. miehei inmovilizada
[40]
R. miehei inmovilizada
[79, 80]
R. miehei inmovilizada
[45]
Lipasa inmovilizada
[47]
M. miehei, C. antrctica [17]
inmovilizada
Lipasas inmovilizadas
[83]
Lipasa inmovilizada
[84]
H. lanuginosa, C. antrctica [43, 44]
inmovilizada
C. antrctica inmovilizada
[85]
PS-30 P. cepacia lipasa
[86]
C. antrctica inmovilizada
[4, 6]

1996
1998
1998

C. antrctica inmovilizada
R. miehei
P. fluorescens inmovilizada
C. antrctica inmovilizada
Lipasa inmovilizada

[70]

1999
1999
1999,
2000
2000

[27]
[87]
[88]

2001
2001
2002

P. fluorescens, C. antrctica
inmovilizada
C. antrctica inmovilizada
C. antrctica inmovilizada
C. antrctica inmovilizada
C. antrctica inmovilizada
P. fluorescens, R. miehei
inmovilizada
Lipasa inmovilizada
C. antrctica inmovilizada
C. antrctica inmovilizada
Lipasa
pancretica
porcina
inmovilizada
C. rugosa, lipasa pancretica
porcina
inmovilizada
Lipasa inmovilizada

[89]

2002

[90]
[91]
[92]
[93]
[7]

2002
2002
2002
2002
2003

[94]
[95]
[13, 96]
[97]

2003
2004
2004
2004

[98]

2004

[99]

2005

C. antrctica inmovilizada
Diversas lipasas inmovilizadas
C. antrctica, P. cepacia, R. miehei
inmovilizada
R.
miehei,
H.
insolens
inmovilizada
Lipasa
pancretica
porcina
inmovilizada
Lipasa inmovilizadab

[100, 101]
[11]
[102]

2005/7
2005
2005

[103]

2006

[104]

2006

[5]

2006

Microorganismo

intacto

que [105]

2006

435

aceites
de
pescado, contiene lipasa recombinante
microbianos
inmovilizada
SNO
Lipozyme IM20
[78]
2007
SNO
Lipozyme TL-IM
[106]
2007
a
SBO, CSO, RSO, OO, SON, aceite de maz, aceite de salvado de arroz, aceite de pescado,
aceite microbiano.
b
Al menos uno de C. antrctica, T. lanuginosa, P. fluouescens, P. cepacia y C. viscosum.
dixido de carbono supercitrico (scCO2) y hexano se compararon [40]. La estabilidad de la
enzima se vio afectada por el contenido de agua. Enzima (M. miehei inmovilizada en resina de
intercambio de aniones macroporosa: Lipozyme IM) cataliza la hidrlisis de aceite de canola en
scCO2 a DG, MG, glicerol y cidos grasos libres se inform [107].Esterificacin catalizada por
lipasa f glicerol y cido oleico en hexano con iso-octano se describe [98], C, lipasas rugosas y
lipasas de pncreas porcino manifestado en contraste especificidades posicionales en la sntesis
de glicrido, el contenido de agua en la mezcla de reaccin es de importancia primordial. C, en
la antrtica lipasa B inmovilizada sobre un poliacrlico(Novozym 435) es un biocatalizador
heterogneo de excelente estabilidad y actividad. Refinado PEP se transesterifica con alcoholes
primarios y secundarios con inmovilizada C, en la Antrtida en un sistema libre de solventes
con el 91,5% (FAME) rendimiento a 323 K despus de 7 h [90]. Del mismo modo, se inform
de la produccin enzimtica de biodiesel a partir de SNO por Novozym 435 en un sistema libre
de disolvente [93]. Inmovilizado metanolisis lipasa de aceite de maz en una corriente de scCO2
fue descrito [47], as como continua metanlisis de tres pasos de un SBO / mezcla de RSO
usando 4% inmovilizada C, la Antrtida lipasa con rendimiento de 98,4% despus de 48 horas a
303 K (vase tambin Fig. 10.3) [4,6]. Ms del 95% de la conversin de ster se mantuvo
durante al menos 50 ciclos de la reaccin (100 das). Adems, en la esterificacin de cido
linoleico (C18: 2) con metanol, el tiempo medio de la biocatalizador inmovilizado C, la
Antrtida super 100 das [95].
P inmovilizada, fluorescens lipasa es muy popular como un biocatalizador en comparacin con
biocatalizadores movilizados como su actividad es ms eficaz y que puede ser utilizado
repetidas veces sin disminucin de la actividad [27]. Los estudios para modificar genticamente
este producto se estn llevando a cabo [108]. P inmovilizada, fluorescens (en EP100
polipropileno) fue el mejor entre varias lipasas microbianas probados para la actividad
metanolisis en un sistema de n-hexano con 90% de conversin de MOSNO despus de 48 h
[7]. Tambin, con lipasa inmovilizada de R, miehei (Lipozyme RMIM) en un sistema libre de
disolvente, de alta conversin (> 80%) fue posible en un protocolo de metanolisis de tres pasos
(relacin molar SNO / MeOH = 1: 4,5).
La transesterificacin de triolena (OOO) y SFO se llev a cabo utilizando diversas lipasas
inmovilizadas (P, fluorescens, P. cepacia, M. javanicus, C. rugosa, R. niveus) en condiciones no
acuosas [27]. P. fluorescens en caolinita poroso (Toyonite 200-M) mostr la mayor actividad
(una conversin del 100% a los 323 a 333 K en 10-20 h) con C3 y C4 alcoholes, con resultados
bastante similares para OOO y OFS (Fig. 10.6) . metanolisis para etanlisis y el disolvente
orgnico se necesitaba 1,4- dioxina para la homogeneizacin de la mezcla de reaccin. La
actividad de las enzimas inmovilizadas en el sistema no acuoso se vio afectada por el contenido
de agua; la mayor conversin se inform de 0,3% en peso de agua. Del mismo modo, el
contenido de agua del soporte para la lipasa de M, miehei inmovilizada sobre una resina de
aniones macroporosos, es un factor determinante en la actividad cataltica de la enzima para la
esterificacin [30,31].Inmovilizacin

435

10.6 Comparacin de trioleina y aceite de crtamo en la transesterificacin usando


inmovilizador P. fluorescens (despus de ref . [27 ] ) .

deChromobacteriumviscosum sobre Celite-545 mejora el rendimiento de reaccin del aceite de


Jatropha con metanol a 313 K de 62% (para la lipasa libre) a 71% con un tiempo de proceso de
8 h [26]. Adems adicin de agua elev el rendimiento al 92%, que est cerca a la alcanzada por
transesterificacin qumica (93%). Es interesante notar que las semillas de Jatropha s mismos
contienen actividad de la lipasa que tambin podra catalizar reacciones de transesterificacin
[109].
Solinas et al. [102] han comparado la actividad de R. miehei inmovilizada (LipozymeRMIM),
de C. antarctica (Novozym 435) y P. cepacia (PS-C y PS-D) en la reaccin por lotes de tres
etapas libre de disolvente de triolena con C1 -C5 alcoholes a 313 K. Los preparativos PS-D
difieren en el soporte de inmovilizacin (partculas de cermica y de tierra de diatomeas,
respectivey). P. cepacia (PS-D era el ms activo con una conversin del 100% en butanlisis a
butil steres de cido oleico despus de 6 horas a 313 K para BuOOH / trioleina = 3. Los bajos
conversiones en metanlisis fueron causadas por la mala miscibilidad de metanol y trioleina y
desnaturalizacin de la enzima. lipasa inmovilizada de P.cepacia en caolinita se utiliz
previamente para triolena reaccin con butanol, pero con resultados muy diferentes [27]. Este
tentativamente se ha atribuido a diferencias en la fuerza de la interaccin entre la enzima y el
apoyo [102] .Wu et al. [86] utiliz P. cepacia lipasa para la produccin de biodiesel a partir de

435

grasa de restaurante reciclado y etnol. Esta lipasa no se inactiva por metanol cuando se usa
como una preparacin en polvo [12].

Inmovilizado etanlisis catalizada por lipasa de SNO se llev a cabo a medio libre de solventes
[78,84]. Tambin se inform que el proceso de etanlisis de cuatro pasos sin disolvente de SNO
catalizada por una lipasa pancretica porcina 1,3-especfica inmovilizada [97]. En una
evaluacin crtica de seis acojan comercialmente lipasas inmovilizadas y siete alcoholes
monovalentes simples (incluyendo primaria y de cadena ramificada y alcoholes secundarios), se
observ que el rendimiento muy considerables diferencias de alcoholisis en la produccin
enzimtica libre de disolvente de steres alqulicos de SNO. Para la mayora de los alcoholes,
Novozyme 435 produjo el rendimiento ms alto FAAE (> 90%) para el metanol, etanol absoluto
y 1-propanol [11]. En general, 96% de etanol fue el alcohol preferido para todas las lipasas,
excepto Novozym 435 y las reacciones etanlisis alcanz la eficiencia de conversin
mxima. El aumento de la conent agua en el sistema result en un aumento del grado de
conversin para todas las lipasas, excepto Novozym 435. enzimticatransesterificacin de SNO
en un sistema bifsico acuoso-aceite con metanol fue catalizada por la lipasa libre e
inmovilizada de R, miehei (Palatase 20.000 L) y Humicolainsolens (Lopozyme TL 100 L)
[103]. Continuo alcoholisis catalizada por lipasa de SNO utilizando inmovilizado Lipozyme TLIM Tambin se inform de [106].
El rendimiento de ster metlico de Novozym 435 (C. Antrtida en resina acrlica) catalizada de
transesterificacin de SBO crudo (con alto contenido de fosfolpidos) en tres etapa de adicin de
metanol es significativamente menor que la de refinado SBO [91,96]. Al parecer, los substnces
que retir en el paso desgomado (principalmente fosfolpidos, pero tambin cidos libres y
agua) inhiben metanlisis de triglicridos de soja. La actividad del agua tambin juega un papel,
pero AGL no tienen ningn efecto negativo en la transesterificacin enzimtica. Biodiesel grado
(nmero de acidez <1 mg KOH / g) se obtuvo mediante catlisis de lipasa (y otras materias
primas) a 318 K a partir de soluciones de una sola fase de SBO y alcohol en disolventes
orgnicos inertes utilizando un procedimiento de dos reactores con tiempos de residencia para el
petrleo crudo (primera etapa) y biodisel bruto reciclado (segunda etapa) de aproximadamente
60 y 17 min, respectivamente [5].
La alcoholisis de aceite de Salicornia brachiate, mediada por la lipasa pancretica porcina libre e
inmovilizada (en quitosano), se llev a cabo a 298 K usando metanol en hexano y acetona en los
rendimientos de 45-55% despus de 12 h [104].
Como lipasas inmovilizadas pueden ser envenenados por alcoholes inferiores, la regeneracin
completa no siempre se logra fcilmente. Germ. Offenl. DE 10217607 a Wu y Chen [89]
describe la aplicacin de un disolvente de lavado para lipasas inmovilizadas
desactivado. Requisitos para el disolvente son la no toxicidad de la lipasa y buena solubilidad
para los aceites y las grasas, el alcohol y metanlisiswater.SBO con Novozym 435 (C.
Antrtida) tras el pretratamiento con diversos disolventes (por ejemplo, isopropanol, SBO,
biodiesel) fue descrita .
Yang et al. [94] han informado de un mtodo para producir dister de glicerol a partir de una
variedad de glicridos (vegetales, el pescado y los aceites microbianos) usando un alcohol
inferior (en la relacin molar 1: 0,3 a 1: 1,5) en presencia de lipasa inmovilizada

435

de 1-10 h (en el reactor) o para 5 min (en el reactor de columna). Las lipasas de inmovilizado
H. lanuginosa y C. Antrtida se utilizaron para etanlisis de aceite de hgado de bacalao en
condiciones scCO2 [43,44]. Etanlisis paso a paso (a fin de evitar la inactivacin de la lipasa)
de aceite de atn usando inmovilizada de C. antarctica Se ha informado [85].
En la produccin de ster (acetona) manteca de cerdo y la grasa fraccionada restaurante, la
lipasa inmovilizada (Chirazyme L-2) la actividad se ve obstaculizada por las cantidades en
exceso (superior a 1 mol) de metanol [88]. ster de sebo-metilo se obtuvo con una conversin
del 74% en una reaccin de tres pasos. Tambin se inform que la de tres pasos enzimtica
metanlisis del aceite comestible de residuos de combustible biodiesel con lipasa inmovilizada
C. Antrtida en un reactor de lecho fijo [87]. Un modelo de sustrato de aceite de cido (mezcla
de TG y FFA) se utiliz para la conversin a la fama por lipasa de C. antarctica inmovilizada
[100101]. AGL en la mezcla de TG / FFA fueron esterificados con metanol de manera eficiente,
pero el agua generada por la esterificacin inhibieron significativamente la metanlisis de los
triglicridos. Un proceso de dos pasos (Fig. 10.7) con deshidratacin intermedia logra> 98,5%
en peso FAME despus de una reaccin 24 h. La lipasa inmovilizada era muy estable en las
reacciones de primer y segundo -Paso y podra ser utilizado por ms de 100 das sin prdida
significativa de actividad.

10.7 sistema de reaccin de dos pasos para convertir aceite de cido a los steres metlicos de
cidos grasos utilizando lipasa inmovilizada C.antarctica. Las concentraciones de lipasa

435

fueron 0,5% en peso y 6% en peso para la primera y segunda etapa, respectivamente (despus
de ref. [101]).

La borra se evalu como materia prima para la produccin catalizada por lipasa es biodiesel
[83]. El enfoque adoptado fue llevar a cabo primero una transesterificacin alcalino-catlisis de
los cidos grasos de glicerol ligada seguido de esterificacin catalizada por lipasa de los cidos
grasos libres en la preparacin que wen no esterificado por la transesterificacin alcalina. Se
emple secado por congelacin para eliminar el agua de la SS antes de la reaccin. Varios
comercialidad disponibles lipasas inmovilizadas examinados no muestra ninguna actividad
transesterificacin a valores de pH alcalinos (pH = 13). Despus de ajustar el pH a la
neutralidad (pH = 6-7) en condiciones ptimas a 315 K, slo Novo Lipozyme SP435 es una
dosis de 1,1% (w / w) mostr esterificacin enzimtica incompleta (63% de cidos grasos libres
en la mezcla de post-alcoholisis) , lo que resulta en un producto con un contenido superior a
FFA en gran medida las especificaciones de biodiesel. La concentracin ptima de agua fue
0,70% (vol / vol). esta lnea de investigacin fue perseguido ms all.
Aceite de Crambe y aceite de camelina se transesterifican libre de disolvente con alcoholes de
cadena larga tales como alcohol olelico, los alcoholes derivados de crambe y los aceites de
camelina, n-octanol, as como isopropanol usando Novozym 435 (lipasa inmovilizada de B de
C. antarctica), Lipozyme IM (lipasa inmovilizada de R. miehei) y la papaya (Carica papaya)
lipasa ltex como biocatlisis principalmente con el objetivo de preparar steres de cera y
"steres bio" para aplicaciones de cosmticos [70]. Es de inters notar que alcoholisis de aceites
crambe y camelina con isopropanol no podra lograrse por medio de lcali (KOH) la catlisis
[110].
En detalle, un proceso tpico para la produccin de biodiesel de aceite de lipasa utilizando
comprende las siguientes etapas:

Filtrado de la grasa biolgica (RSO, SBO, PNO, maz, o aceite de manteca de cerdo)
para eliminar las impurezas, la agitacin para emulsionar;

Permitir que la grasa y metanol en una relacin molar de 1: 1 a 2: 1, enzima


inmovilizada y el disolvente orgnico (ter de petrleo, isooctano, n-hexano, n-heptano,
ciclohexano o triclorometano) en proporciones de enzima / VO 1:10 a 01:25, disolvente
orgnico / VO 1: 0,5 a 1: 1,5 para reaccionar a 303 K 15 K para 4-18 h bajo agitacin; y

La separacin de la enzima del producto de reaccin, la centrifugacin para estratificar,


de pie para separar la capa de glicerol gruesa inferior, la destilacin del lquido superior para
recuperar el disolvente orgnico y obtener el aceite de biodiesel final [99].
El proceso es simple y alta en el rendimiento, y no muestra contaminacin.
La mayora de los problemas antes mencionados de la catlisis de lipasa han sido superados por
Kansai Ingeniera Qumica Co. [105], que ha desarrollado un proceso de bajo costo para la
produccin eficiente de FAAEs por reaccin de un microorganismo intacto inmovilizado
producir una lipasa recombinante con una (residuos) de grasa o aceite y un alcohol de bajo costo
lineal inferior (con una mejor permeabilidad de la membrana celular)

435

en un sistema (casi) completamente libre de disolventes en la presencia de grandes cantidades


de agua (3-30% en peso). En el proceso de la concentracin de alcohol se mantiene por debajo
de la concentracin de inhibidor de la lipasa, o un ster de cido graso se aade al sistema de
reaccin para evitar la desactivacin de la lipasa. En el uso de microorganismos a s mismos, la
permeabilidad de la membrana celular por lo general requiere un tratamiento con disolvente
costoso y consume mucho tiempo [111]. Sin embargo, debido a que el microorganismo intacto
utilizado por Kansai no est expuesto a disolvente tratamiento la preparacin del ster de cido
graso es simple. El proceso permite el reciclaje de aceites usados y proporciona el combustible
biodiesel con poca contaminacin ambiental. Como no es necesario para aislar una enzima, el
proceso requerido para la purificacin de la enzima puede ser eliminada. Como se eliminan los
disolventes utilizados convencionalmente para la reaccin y el tratamiento de microorganismos,
en consecuencia, tambin lo son las instalaciones necesarias para la recogida de los
disolventes. El uso de biocatalizadores de clulas completas inmovilizados dentro de una
partcula de soporte de biomasa como lipasas es una ventaja para la industria de
biodiesel. Cepas derivadas localmente de clulas enteras, se utilizaron moldes inmovilizados
para biocatlisis de aceite de alga marina en biodiesel [112]. Fukuda [10113] ha revisado
recientemente el uso de clulas enteras biocatlisis enzima lipasa en la transesterificacin de los
triglicridos, y en particular la produccin BDF por metanolisis catalizada por la lipasa sobre las
superficies de las clulas de R. oryzae IFO4697. El uso directo de la lipasa intracelular de R.
oryzae clulas como biocatalizador de clula completa [114115] representa una atractiva
alternativa a la utilizacin de la lipasa extracelular [3, 4, 6, 17, 61].
La calidad del producto que se puede obtener en las condiciones operativas de la catlisis de
lipasa (vase la Ref. [5]), a temperaturas de reaccin ms bajas y con tiempos de residencia
comparables a la catlisis alcalina, justificar cierto optimismo. Transesterificacin catalizada por
lipasa de aceite vegetal para la produccin de steres de alquilo debe mejorarse an ms con el
fin de hacer que sea econmicamente aplicable. Problemas a resolver son la maximizacin de la
tasa de conversin de alcoholes sin disolventes, ampliacin de proporcionar cantidades
suficientes, el desarrollo de nuevos sistemas reacor con biocatalizadores inmovilizados y
adicin de alcohol en varias porciones, el uso de lipasas extracelulares tolerante a los
disolventes orgnicos , lipasas intracelulares (es decir, clulas microbianas enteras) y
microorganismos modificados genticamente (levaduras "inteligentes") [8]. Una mejora
significativa en la vida operativa biocatalizador contribuira sustancialmente a la reduccin del
coste de produccin de biodiesel [13].
La inmovilizacin de lipasas es una de las estrategias presentadas hasta ahora para resolver este
problema. Igualmente importante es la constatacin de que la regeneracin de las lipasas
inmovilizadas desactivados se puede lograr mediante lavado con alcoholes superiores (C3-C4)
[89]. De hecho, la actividad de (comerciales) lipasas inmovilizadas se puede aumentar de forma
significativa (por un factor de 8-10) por un pretratamiento tal disolvente. El otro enfoque se
ilustra por la sobreexpresin citoplsmica de R. oryzae lipasa en Saccharomycescerevisiae
recombinante (levadura de panadera) con la posterior congelacin-descongelacin y secado de
aire resultante en un biocatalizador de clula completa que cataliza metanolisis en un sistema de
reaccin libre de disolvente [116, 117].

435

Conversiones catalizadas por enzimas de materia prima para la produccin de biodiesel de


lpidos han sido revisados [108, 118]. Procesos enzimticos para producir FAME partir de aceite
vegetal son lentos para ser comercialmente aviable. es factible ampliar la fermentacin
Chlorella hetertrofos para las enzimas de produccin de biodiesel a nivel industrial (ver
seccin 9.5), el proceso no es an competitivo con el combustible diesel convencional. Sin
embargo, las enzimas de la produccin de biodiesel est ganando terreno, con una planta en
China usando enzimas NOVOZYM sobre una base consistente.

10.3 Bioplstico-to-biodiesel
A "biopolyester-combustible latente", obtenida a partir de aceites vegetales (por ejemplo SBO)
mediante la conversin en cidos grasos -hidroxi utilizando una levadura gen alterado seguido
por polimerizacin con lipasa de C. Antrtida como un catalizador, ha sido diseado para una
doble funcin, primero como un material de envasado y luego como biodiesel [119]. Una
enzima natural (gen alterado cutinasa de E. coli) puede usarse para descomponer una suspensin
de residuos biopolyester desmenuzado en agua tibia a biodiesel en 3-5 das.