You are on page 1of 15

I. INTRODUCCIÓN A.- CARBOHIDRATOS

Los glúcidos, azúcares, carbohidratos o sacáridos son aldehídos o cetonas polihidroxilados (osas), o productos derivados de ellos por polimerización (ósidos), reducción (alcoholes polihídricos y ciclitoles), oxidación (ácidos aldónicos, urónicos y sacáricos), sustitución (aminoazúcares) y esterificación (sulfatos y fosfatos); cuya fórmula empírica es: (CH 2 O) n , n≥3 1 . Se clasifican por:

Por su estructura

Por el número de

Por su naturaleza

Por su actividad

molecular

átomos de

de la

función

carbono

 

carbonílica

  • Monosacáridos : glucosa,

  • Disacáridos:

Monosacáridos : glucosa, Disacáridos: Triosas: C3 Tetrosas: C4 Aldosas: Aldehído Reductores. Azúcares
Monosacáridos : glucosa, Disacáridos: Triosas: C3 Tetrosas: C4 Aldosas: Aldehído Reductores. Azúcares

Triosas:

C3

Tetrosas: C4

Aldosas:

Aldehído

  • Reductores. Azúcares

Reductores. Azúcares

fructosa,

fructosa, Pentosas: C5 Cetosas: Cetona oxidados por

Pentosas: C5

Cetosas:

Cetona

  • oxidados por

oxidados por

galactosa

galactosa Hexosa: el reactivo

Hexosa:

el reactivo

C6

de Tollens o

sacarosa,

sacarosa, Heptosas: C7 los reactivos

Heptosas: C7

los reactivos

maltosa,

 

de Benedict

lactosa

o Fehling.

  • Polisacáridos:

almidón,

   

No reductores

glucógeno,

 

quitina

Entre los polisacáridos más importantes tenemos:

I. INTRODUCCIÓN A.- CARBOHIDRATOS Los glúcidos, azúcares, carbohidratos o sacáridos son aldehídos o cetonas polihidroxilados (osas),

Glucógeno:

Es el polisacárido de reserva común en los animales. El glucógeno se almacena en el hígado y músculos.

Almidón:

Es la forma habitual de hidrato de carbono empleado para almacenamiento de energía en las plantas, es un polímero compuesto por subunidades de α-glucosa. El almidón tiene dos formas: la amilosa, la forma más sencilla, no está ramificada, mientras que la amilopectina, que es la forma frecuente, normalmente está compuesta por aproximadamente 1000 unidades en una cadena ramificada. 2

Celulosa:

Polisacárido que se localiza en los vegetales como principal constituyente de las paredes celulares. Desde el punto de vista industrial y comercial la celulosa es

1 E. Herrera. Elementos de La Bioquímica. 309pp 2 Elder Solomon. Biología 53pp

importante por la obtención de ciertos productos, por ejemplo: el algodón, algodón pólvora (se emplea como explosivo sin humo), rayón y celofán. 3

Quitina:

Es un homopolisacárido lineal compuesto por residuos de N-acetilglucosamina unidos por enlaces (β 1->4).La única diferencia química con respecto a la celulosa es el cambio del grupo hidroxilo en C-2 por un grupo amino acetilado. Es el componente principal de la mayoría de los artrópodos. 4

B.- LíPIDOS

importante por la obtención de ciertos productos, por ejemplo: el algodón, algodón pólvora (se emplea como

Constituyen un grupo químicamente diverso de compuestos cuyas característica común y definitoria es su insolubilidad en agua. Las funciones biológicas de los lípidos son tan diversas como su química. En muchos organismos, las grasas y los aceites son las formas principales de almacenamiento energético; mientras que los fosfolípidos y esteroles constituyen los principales elementos estructurales de las membranas biológicas. Otros lípidos, aun estando presentes en cantidades relativamente pequeñas, juegan papeles cruciales como cofactores enzimáticos, como transportadores electrónicos, pigmentos que absorben la luz, anclas hidróficas para proteínas chaperonas que ayudan en el plegamiento de las proteínas de membrana, agentes emulsionantes en el tracto digestivo, hormonas y mensajeros intracelulares. 5

Son moléculas constantes en todos los seres vivos donde participan como fuente de energía. así un gramo de lípido otorga aproximadamente 9.3 kilocalorías. En los animales se almacena en el, donde constituyen en reserva energética, mientras en las plantas se almacena en semillas en forma de aceites para ser utilizados durante la germinación.

Al almacenarse en el tejido celular subcutáneo forma una barrera que impide que pierda el calor producido en el tejido muscular. Las ballenas y los osos polares Y otros animales polares soportan las bajas temperaturas porque tienen gran cantidad de lípido bajo la dermis.

Los lípidos se clasifican en saponificables e insaponificables. La saponificación es una reacción química entre un ácido graso y una base o alcalino, en la que se obtiene como principal producto la sal de dicho ácido y de dicha base. Estos compuestos tienen la particularidad de ser antipáticos, es decir tienen una parte polar y otra apolar (o no polar), con lo cual pueden interactuar con sustancias de propiedades dispares. Por

3 Tito Chávez. Biología. 23pp 4 Lehninger. Principios de Bioquímica. 247pp 5 Lehninger. Principios de la Bioquímica. 343pp

ejemplo, los jabones son sales de ácidos grasos y metales alcalinos que se obtienen mediante este proceso.

 

Lípidos Saponificables

 

Lípidos

 

Insaponificables

 

Simples

Complejas

Derivadas

Acigliceridos

Fosfolipidos

Terpenos

Ceridos

Glucolipidos

Esteroides

 

Prostaglandinas

II.-OBJETIVOS

Reconocer la presencia de almidón y azúcares reductores en muestras problema.

Reconocer algunas propiedades fisioquímicas de los lípidos.

Identificar la presencia de lípidos en muestras problema.

III. MATERIALES Y MÉTODOS.

Materiales del alumno por mesa

Lámina porta y cubre objetos.

 Lámina porta y cubre objetos.  2 ml (40 gotas) de orina (la primera del

2 ml (40 gotas) de orina (la primera del día y en ayunas).

 Lámina porta y cubre objetos.  2 ml (40 gotas) de orina (la primera del

5 ml (100 gotas) de aceite de cocina.

2 ml (40 gotas) de leche evaporada.

2 ml (40 gotas) de leche descremada.

2 ml (40 gotas) de jugo de mandarina.

    2 ml (40 gotas) de leche evaporada. 2 ml (40 gotas) de

Un trozo pequeño de papa, cebolla, zanahoria, pan y manzana.

 3 goteros
3
goteros
    2 ml (40 gotas) de leche evaporada. 2 ml (40 gotas) de

Materiales del Laboratorio.

  • Tubos de ensayo

    2 ml (40 gotas) de leche evaporada. 2 ml (40 gotas) de
  • Pinza de madera

    2 ml (40 gotas) de leche evaporada. 2 ml (40 gotas) de
  • Estufa

  • Cocina

  • Vaso de precipitación de 500 ml para baño maría

  • Reactivo de Sudan III en solución alcohólica

Estufa Cocina Vaso de precipitación de 500 ml para baño maría Reactivo de Sudan III
  • Lugol

  • Solución glucosa al 1%

Estufa Cocina Vaso de precipitación de 500 ml para baño maría Reactivo de Sudan III
  • Bencina

Estufa Cocina Vaso de precipitación de 500 ml para baño maría Reactivo de Sudan III
  • NaOH al 20%

  • Detergente

Detergente Reactivo de Benedict Agua Destilada
Detergente Reactivo de Benedict Agua Destilada
  • Reactivo de Benedict

Detergente Reactivo de Benedict Agua Destilada
  • Agua Destilada

Placa Petri  Otros IV. RESULTADOS Y DISCUSIONES Experimento 1: Reconocimiento de Almidón: - Colocar en
Placa Petri  Otros
Placa Petri
Otros

IV. RESULTADOS Y DISCUSIONES

Experimento 1: Reconocimiento de Almidón:

  • - Colocar en placas petri un trozo de papa, cebolla, zanahoria, pan, y manzana.

  • - Agregar dos gotas de lugol a cada una de las muestras y anotar los resultados.

Con lugol
Con
lugol
Con lugol Muestr Observaciones Presencia de Porcenta a almidón (si/no) je de almidón Papa La coloración

Muestr

Observaciones

Presencia de

Porcenta

a

almidón (si/no)

je de

almidón

Papa

La coloración es intensa

16.6%

Cebolla

No se tiñe. No hay cambios

No

Trazas

Zanaho

Reacción lenta, se tiñe

No

0.3%

ria

ligeramente

Pan

Reacción violenta. La coloración

52.1%

es intensa

Manzan

No se observan cambios

No

Trazas

a

La papa, al ser un tallo de reserva contiene también almidón se tiño de azul pero no tan violentamente como el pan.

La cebolla y la zanahoria tuvieron una reacción parecida, no se tiñeron casi nada y también el proceso fue lento, porque no son estructuras de gran capacidad de reserva.

El pan fue el más reactivo, ya que esta hecho casi todo de almidón, se tiño rápidamente de un azul-violeta oscuro.

Finalmente la manzana no se tiño, el lugol no actuó sobre ya que al ser un fruto, solo contiene glucosa y fructosa, las cuales son muy pequeñas como para reaccionar con el lugol.

Reacción del Lugol: Este método se usa para identificar polisacáridos. El almidón en contacto con unas gotas de Reactivo de Lugol (disolución de yodo y yoduro potásico) toma un color azul-violeta característico 6 .

Si la disolución de la placa petri se torna de color azul-violeta, la reacción es positiva.

Fundamento: La coloración producida por el Lugol se debe a que el yodo se introduce entre las espiras de la molécula de almidón. No es por tanto, una verdadera reacción química, sino que se forma un compuesto de inclusión que modifica las propiedades físicas de esta molécula, apareciendo la coloración azul violeta.

6 Brandwein. Biología. 162pp

Experimento 2: Reconocimiento de azúcar reductor o Reacción de Benedict:

Muestra

Observación (después del baño maría)

Contenido de azúcar reductor (muy abundante,

abundante, trazas)

Tubo 1: Agua destilada

Turquesa

Ausencia

Tubo 2: Glucosa

Rojo ladrillo

Muy abundante

Tubo 3: Jugo de fruta

Ámbar

Abundante

Tubo 4: Orina

Verde

Traza

Experimento 2: Reconocimiento de azúcar reductor o Reacción de Benedict: Muestra Observación (después del baño maría)
Experimento 2: Reconocimiento de azúcar reductor o Reacción de Benedict: Muestra Observación (después del baño maría)

Tubo 1: En agua destilada se puso el reactivo de Benedict solo, luego de exponer a baño maría se observó un color azul, color del reactivo.

Tubo 2: En presencia de glucosa (C 6 H 12 O 6 ) se añade el reactivo y luego del baño maría cambia a color rojo ladrillo esto debido a la reacción producida entre el grupo aldehído (CHO) y el sulfato de cobre.

Tubo 3: El jugo de fruta (mandarina) que contiene fructosa, también se usó el reactivo de Benedict y también luego del baño maría, se observó un color ámbar. Dio positivo (con el reactivo ya estable) debido a que esta cetohexosa se tautomeriza a glucosa (que es capaz de reducir al ion cúprico).

Tubo 4: La orina, reacciono positivo, cambiando a un color verde, esto debido a la presencia anormal de azucares.

En química, la reacción o prueba de Benedict identifica azúcares reductores (aquellos que tienen su OH anomérico libre), como la lactosa, la glucosa, la maltosa, y celobiosa. En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu 2+ que tiene color azul a Cu + , que precipita de la solución alcalina como Cu 2 O de color rojo-naranja.

El reactivo de Benedict consta de:

Sulfato cúprico;

Citrato de sodio;

Carbonato anhidro de sodio.

Además se emplea NaOH para alcalinizar el medio.

Este método colorimétrico se usa para identificar monosacáridos. El color del reactivo de Benedict es azul . Una reacción positiva (que detecte monoscáridos) resulta en la observación de un cambio de color en verde, amarillo , naranja y rojo.

La reacción:

El fundamento de esta reacción radica en que en un medio alcalino, el ion cúprico (otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo Aldehído del azúcar (CHO) a su forma de Cu + . Este nuevo ion se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso (Cu 2 O).

El medio alcalino facilita que el azúcar esté de forma lineal, puesto que el azúcar en solución forma un anillo de piranósico o furanósico. Una vez que el azúcar está lineal, su grupo aldehído puede reaccionar con el ion cúprico en solución.

En estos ensayos es posible observar que la fructosa (una cetopentosa) es capaz de dar positivo. Esto ocurre por las condiciones en que se realiza la prueba: en un medio alcalino caliente esta cetohexosa se tautomeriza (pasando por un intermediario enólico) a glucosa (que es capaz de reducir al ion cúprico).

Los disacáridos como la sacarosa (enlace α(1 → 2)O) y la trehalosa (enlace α(1→1)O), no dan positivo puesto que sus OH anoméricos están siendo utilizados en el enlace glucosídico.

En resumen, se habla de azúcares reductores cuando tienen su OH anomérico libre, y éstos son los que dan positivo en la prueba de Benedict. 7

7 José M. Macarullla. Biomoléculas. 38pp

Experimento 3: Propiedades de los Lípidos

Enumerar 3 tubos de ensayo son los siguientes insumos:

- Tubo 1.- Colocar 2 ml de agua destilada + 1 ml de aceite, agitar la muestra para observar una emulsión transitoria. Dejar reposar para observar luego la formación de dos capas (mezcla heterogénea).

-Tubo 2.- Colocar 2 ml de agua destilada + 1 ml de aceite, añadir una pizca de detergente, agitar y observar una emulsión permanente.

-Tubo 3.- Colocar 2 ml de bencina + 1 ml de aceite, observar lo q ue o curre.

MUESTRA

OBSERVACION

REACCION

Tubo 1 : aceite + agua

Se forma una mezcla heterogénea con dos

NO

capas

Tubo 2 : aceite + agua

El detergente

SI

+detergente

emulsifica al aceite

Tubo 3 : aceite + bencina

Se solubiliza totalmente gracias a la

SI

acción de la bencina

- La mezcla de aceite y agua se observó la propiedad de la densidad, la mezcla fue heterogénea y en dos faces claras, agua abajo y aceite arriba.

- En la mezcla de aceite, agua, detergente, en cambio el detergente emulsifico las grasas lo cual permitió una mejor mezcla, esta vez fue heterogénea pero en un menor grado ya no tan notorio como en el primer caso.

Experimento 3: Propiedades de los Lípidos Enumerar 3 tubos de ensayo son los siguientes insumos: -

- El aceite en bencina, la mezcla fue homogénea, ya que lo semejante disuelve lo semejante.

El agua sola no es capaz de disolver la grasa que compone y contiene la suciedad. Un detergente en cambio sí, debido a la capacidad que tiene para formar emulsiones con los materiales solubles en grasas; las moléculas de detergente rodean a la suciedad hasta incluirla en una envoltura denominada micela, la parte apolar de la molécula de detergente se disuelve en la gotita de grasa mientras que los grupos carboxilato, polares, se orientan hacia la capa de agua que los rodea. La repulsión entre cargas iguales evita que las gotas de grasa se unan de nuevo. Se forma así una emulsión que se puede separar de la superficie las grasas del agua. 8

Experimento 4: Reconocimiento de Lípidos:

- El aceite en bencina, la mezcla fue homogénea, ya que lo semejante disuelve lo semejante.

Primero enumeramos 4 tubos de ensayo. Luego en cada tubo colocamos lo siguiente:

Tubo 1: Colocamos 1 ml. de agua destilada y agregamos 3 gotas de reactivo Sudan lll en solución alcohólica. Debemos tener cuidado de no agitar la solución.

Tubo 2: Colocamos 1 ml. de aceite, agregamos 3 gotas de reactivo Sudan lll en solución alcohólica. No agitamos la solución.

Tubo 3: Colocamos 1 ml de leche evaporada normal y agregamos 3 gotas de reactivo de Sudan lll en solución alcohólica. No agitamos la solución.

Tubo 4: Colocamos 1 ml de leche descremada y agregamos 3 gotas de reactivo de Sudan lll. No agitamos y anotamos los resultados.

 

Muest

Observación

Contenido de Lípido

ra

ra (Sí/No)

(Sí/No)

Tubo 1: Agua destilada

Se forma una mezcla homogénea.

No

Se diluye totalmente

Tubo 2: Aceite

 

Se forma una mezcla heterogénea,

 

formando 2 fases.

Tubo 3: Leche

 

Se forma una mezcla heterogénea,

12% de

evaporada

formándose 2 capas.

grasas

Tubo 4: Leche

 

Se forma una mezcla heterogénea,

1.5% de

descremada

formando 2 fases.

grasas

8 Emilio Herrera. Elementos de la Bioquímica. 495pp

- - Al agua destilada se agrego Sudan III el cual es de color rojo. -
- - Al agua destilada se agrego Sudan III el cual es de color rojo. -
  • - -

Al agua destilada se agrego Sudan III el cual es de color rojo.

  • - Al agregar Sudan III al aceite se tiñe de un rojo intenso, separado del aceite, en forma de un anillo en la parte superior.

  • - Algo similar a la leche evaporada, también se formo un anillo en la parte superior, aunque la mezcla era algo más viscosa.

  • - Y la leche descremada tuvo el mismo resultado, pero en menor cantidad, era un anillo rojo pero más delgado que el de la leche evaporada. 9

9 Dr. Claudio Montero. Manual de técnicas de Histoquímica Básica.