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20 CONGRESSO BRASILEIRO DE ENGENHARIA SANITRIA E AMBIENTAL

BIODEGRADAO ANAERBIA DE CELULOSE A PARTIR DE


CULTURA BACTERIANA MISTA PRESENTE NO CHORUME DE
DEPSITO DE LIXO URBANO A CU ABERTO
Luciana Paulo Gomes(1)
Engenheira Civil. Profa Dra da Universidade do Vale do Rio dos Sinos
- UNISINOS.
Jurandyr Povinelli
Engenheiro Civil. Prof. Dr. da Escola de Engenharia de So Carlos USP - Departamento de Hidrulica e Saneamento.
Rosana Filomena Vazoller
Biloga. Profa Dra da Escola de Engenharia de So Carlos - USP Departamento de Hidrulica e Saneamento.

FOTOGRAFIA
NO
DISPONVEL

Endereo(1): Av. Unisinos, 950 - So Leopoldo - RS - CEP:. 93022-000 - Brasil - Tel:


(051) 590-3333 - ramal 1766 - e-mail: lugomes@euler.unisinos.tche.br

RESUMO
O presente trabalho apresenta resultados obtidos acerca da atividade de cultura bacteriana
mista capaz de degradar a celulose sob a condio de anaerobiose estrita. A cultura
bacteriana foi obtida a partir do enriquecimento de amostra de chorume, originada da
degradao de resduos slidos urbanos, de depsito de lixo cu aberto do municpio de
So Carlos, Estado de So Paulo.
A cultura bacteriana anaerbia celuloltica foi enriquecida e subcultivada em meios de cultivo
lquido e slido contendo celulose em p CC 41 Whatmann, e mantida temperatura de 372
C. A habilidade da cultura bacteriana em degradar a celulose foi avaliada atravs de ensaios
de acompanhamento do crescimento celular e produo de metablitos. As contagens iniciais
de bactrias anaerbias celulolticas e metanognicas no chorume estudado revelaram a ordem
de grandeza de 104 bactrias/mL para ambos os grupos.
Variando-se a concentrao da celulose em cultivo lquido, as velocidades de crescimento
da cultura anaerbia celuloltica foram encontradas na faixa de 0,06 a 0,20 mg S.A.B. / L
h (Soro Albumina Bovina / Litro Hora), atravs de medidas de protenas totais. Foi
verificada a produo de acares redutores totais e cidos orgnicos volteis, aps
perodos de incubao de aproximadamente 100 horas.
Os experimentos realizados forneceram dados originais sobre a microbiologia e atividade
celuloltica do chorume, revelando aspectos do metabolismo pouco conhecidos, que
podem auxiliar na avaliao do potencial real do lquido gerado pela degradao de
resduos slidos, na inoculao de biodigestores anaerbios, ou na acelerao de aterros
sanitrios.

PALAVRAS-CHAVE: Resduos Slidos Urbanos, Chorume, Aterro Sanitrio, Digesto


Anaerbia, Microbiologia.

20 Congresso Brasileiro de Engenharia Sanitria e Ambiental

2015

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INTRODUO
Aterro sanitrio um mtodos existentes atualmente empregados na disposio dos
resduos slidos urbanos. No Brasil considerado uma soluo atraente para os resduos
slidos, pois trata-se do mtodo mais vivel economicamente, alm de ser uma alternativa
energtica (VAZOLLER et al., 1992).
Para STEGMANN apud TEIXEIRA (1993), os aterros sanitrios devem ser operados de
modo a otimizar os processos de degradao bioqumica no interior dos mesmos. Para que
os processos de interveno nos aterros tornem-se eficientes, imprescindvel o
conhecimento mnimo das caractersticas fsico-qumicas e biolgicas dos lquidos
gerados durante a degradao dos resduos slidos, ou seja, do chorume. Vrios estudos
neste sentido j foram realizados, podendo-se exemplificar com os trabalhos de
MANTELL (1975); POHLAND apud PAVONI (1975), ROBINSON & MARIS (1985);
BALDOCHI (1990), SENIOR et al. apud SCHALCH (1992) e SCHALCH (1992).
Observa-se grandes variaes nos resultados das anlises dos chorumes provenientes de
diferentes aterros sanitrios ou lixes. As razes esto relacionadas s caractersticas da
populao geradora dos resduos (nvel e caractersticas de vida scio-econmicoculturais), topografia e geologia do local do tratamento e/ou destino final do lixo, formas
de coleta dos resduos, e ainda, s caractersticas hidrolgicas e climticas da regio.
importante, ainda, o conhecimento das caractersticas microbiolgicas do chorume, uma
vez que os processos de degradao dos resduos que ocorrem nos aterros sanitrios so
em grande parte devido s atividades de bactrias existentes neste lquido. As interaes
microbianas que ocorrem em ecossistemas anaerbios tm sido elucidadas com os estudos
sobre a microbiologia da digesto anaerbia, inicialmente realizados no trato intestinal de
animais herbvoros (rmen), em biodigestores e nos lodos provenientes de regies
bentnicas lacustres e marinhas (KIRSCH, TOERIEN & SIEBERT, TOERIEN,
HUNGATE, ZEIKUS & WINFREY apud VILLAS BAS, 1990).
Em uma das poucas revises realizadas sobre a dinmica microbiana em aterros
sanitrios, BARLAZ et al. (1990) mostraram a importncia de uma clara definio dos
principais nveis trficos existentes nestes sistemas e, particularmente, do papel das
bactrias acetognicas consumidoras de hidrognio, em funo da possvel existncia de
competio com as metanobactrias hidrogenotrficas pelo mesmo substrato gasoso.
Outro importante aspecto levantado pelos autores foi a ausncia de conhecimento em
relao ao principal precursor do gs metano em aterros sanitrios. A digesto anaerbia
de lodos de esgotos resulta na produo de 70% de metano a partir do acetato. No entanto,
no se pode afirmar valores semelhantes para os sistemas de aterramento de resduos
slidos.
O presente trabalho mais uma colaborao ao conhecimento dos aspectos fundamentais
da degradao anaerbia de resduos slidos. Foram realizados experimentos para a
avaliao da cintica de degradao da celulose por culturas bacterianas anaerbias
oriundas do chorume, uma vez que o chorume um dos principais produtos da
degradao de resduos slidos, e possui um elevado potencial hidroltico devido a
presena de bactrias e metablitos, e a celulose constitui a maior frao de carbono
orgnico nos resduos slidos.
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METODOLOGIA
A manipulao de microrganismos anaerbios requer tcnicas apropriadas para a
manuteno da atmosfera livre de agentes oxidantes, em especial o oxignio. As tcnicas
portanto, utilizam gases como nitrognio, dixido de carbono ou hidrognio. Os
procedimentos para o cultivo dos microrganismos anaerbios celulolticos, estudados
neste trabalho, foram baseados naqueles descritos por HUNGATE (1969), BRYANT
(1972) e MILLER & WOLIN (1974). Trabalhos realizados por VAZOLLER (1989),
VILLAS BAS (1990) e GIAJ-LEVRA (1991) foram tambm considerados.
Os meios de cultura e solues empregados (meio de cultura BCYT; meio de cultura
mineral suplementado Zinder; soluo trao de metais; soluo trao mineral; soluo
macro mineral; soluo de vitaminas; soluo redutora e soluo de diluio anerbia),
bem como a metodologia para o rompimento celular, determinaes de protenas,
aucares e cidos volteis esto descritos em GOMES (1995). A celulose em p utilizada
nos experimentos foi do tipo CC 41 WHATMAN, catlogo nmero 4061-050.
O chorume estudado foi coletado no antigo Lixo da cidade de So Carlos - SP,
localizado no Stio Santa Madalena. O local era utilizado para a disposio de resduos
urbanos e parte dos resduos industriais gerados na cidade, e foi caracterizado como
Lixo, tendo em vista a falta das condies sanitrias mnimas exigidas pela NBR 8419
(ABNT, 1984).
Foram realizadas as seguintes determinaes fsico-qumicas com a amostra de chorume:
medida do pH (potencial hidrogeninico); anlises de DQO (demanda qumica de
oxignio), DBO (demanda bioqumica de oxignio), nitrognio total, amoniacal e
orgnico, fsforo total, alcalinidade total, slidos totais, suspensos e dissolvidos. As
tcnicas analticas empregadas bem como as anlises de metais (ferro, mangans, cromo,
nquel, cdmio, chumbo, zinco, cobalto e cobre) , por absoro atmica, basearam-se nos
procedimentos descritos pela APHA/AWWA/WPCF (1992).
As caractersticas microbiolgicas iniciais do chorume foram obtidas pela determinao
do nmero de microrganismos anaerbios celulolticos totais, por anlises microscpicas
e anlises dos gases formados por cromatografia gasosa.
O mtodo empregado na contagem dos microrganismos anaerbios celulolticos foi o
Nmero Mais Provvel (NMP), segundo metodologia descrita por BARLAZ et al. (1989)
e GIAJ-LEVRA (1991).
Para o acompanhamento do crescimento celular, foram realizadas observaes
microscpicas sob luz comum, fluorescncia e contraste de fase. Utilizou-se durante as
observaes microscpicas, na maioria das vezes, os aumentos de 100 x para a objetiva, e
10 x para as oculares.
Realizou-se tambm ensaios para determinao das velocidades especficas e tempos de
gerao mdios do crescimento microbiano, o consumo mdio de substrato e a obteno
mdia de produtos da degradao anaerbia da celulose e glicose. Estudou-se as culturas
em meio suplementado, segundo ZINDER & KOCH (1984), contendo celulose em p nas
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concentraes de 1 g/L, 5 g/L e 10 g/L, bem como em meio contendo glicose nas
concentraes de 1 g/L e 3g/L.
O inculo empregado sempre foi uma amostra das culturas enriquecidas e mantidas em
meio de cultura basal suplementado com celulose em p na concentrao de 5 g/L,
incubado em mdia por 15 dias, em estufa temperatura de 37 2 C. Este procedimento
foi sempre o mesmo, incluindo os ensaios com as culturas microbianas frente a glicose.
No acompanhamento do crescimento microbiano empregou-se um mtodo de
determinao indireta, medida da quantidade de protenas totais, expressa em mg de Soro
Albumina Bovina / Litro (mg S.A.B./L). Os procedimentos para a medida de protenas
foram os descritos por LOWRY et al. (1951) e PETERSON (1977).
O rompimento das clulas bacterianas, previamente medida de protenas totais, foi
efetuado segundo o Mtodo da Acetona, segundo BHADURI & DEMCHICK (1983).
O consumo do substrato glicose e a obteno de produtos, pela degradao da celulose foi
acompanhado a partir da determinao de carboidratos, segundo o mtodo de Somogyi
(SOMOGYI apud PEREGO JR., 1979).
A avaliao dos produtos da degradao dos compostos orgnicos foi tambm realizada
pelo Mtodo da Titulao para cidos Volteis Totais, segundo Di LALLO e
ALBERTSON (1961).
Os valores obtidos permitiram calcular as velocidades mdias do crescimento das culturas
bacterianas (Vmdio). Considerando-se que os ensaios foram realizados com culturas
mistas, optou-se pela realizao de clculos do crescimento celular linear.
Foram tambm calculadas as velocidades mdias de produo de cidos volteis (VP), e
avaliadas a produo e o consumo dos acares redutores totais.

RESULTADOS
A caracterizao fsico-qumica do chorume resultou nos dados apresentados na Tabela 1.
O valor obtido para o nmero de bactrias anaerbias celulolticas foi de 2,3 x 104
bactrias/mL de chorume ou log NMP = 4,36 bactrias/mL. Analisando-se os valores de
metano (%), foi possvel indicar a ordem de grandeza das clulas metanognicas, em
funo da leitura das diluies: 105 bactrias/mL.
As anlises microscpicas tiveram duas finalidades: 1) observar a morfologia das espcies
e 2) auxiliar na leitura dos resultados do ensaio de NMP. Desde o incio do trabalho
observou-se o predomnio de bacilos pequenos esporulados ou no. Filamentos longos e
cocos tambm estavam presentes em grande nmero nas amostras observadas. Algumas
espcies em formato de sarcinas fluorescentes e filamentos longos com extremidades
retas, no fluorescentes foram verificados.

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Finalmente as Figuras 1 a 4 apresentam os resultados dos ensaios realizados com as


culturas celulolticas enriquecidas do chorume.

Tabela 1 - Valores das anlises e exames fsico-qumicos da


amostra de chorume.
PARMETROS
pH
Alcalinidade Total (mg/L de CaCO3)
DQO (mg/L)
DBO (mg/L)
Nitrognio Total (mg/L)
Nitrognio Amoniacal (mg/L)
Nitrognio Orgnico (mg/L)
Fsforo Total (mg/L)
Slidos Totais (mg/L)
Slidos Totais Fixos (mg/L)
Slidos Totais Volteis (mg/L)
Slidos em Suspenso (mg/L)
Slidos em Suspenso Volteis (mg/L)
Slidos em Suspenso Fixos (mg/L)
Slidos Dissolvidos (mg/L)
Slidos Dissolvidos Volteis (mg/L)
Slidos Dissolvidos Fixos (mg/L)
Metais (mg/L) - Ferro
Mangans
Cromo
Nquel
Cdmio
Chumbo
Zinco
Cobalto
Cobre

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RESULTADOS
7,2
1094
1640
1050
350
203
147
3,8
3878
1290
2588
166
103
63
3712
2485
1227
62
1,2
0,27
0,001
0,001
0,001
0,84
0,001
0,17

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Regresso Linear :

Celulose 1 g/L

Protenas (mg S.A.B./L)

Celulose 5 g/L
90

Celulose 10 g/L

80

Glicose 1 g/L

Celul. 1 g/L
PROT = 0,007 t + 20,14
r = 0,986

Glicose 3 g/L

70

Celul. 5 g/L
PROT = 0,11 t + 19,92
r = 0,988

60
50

Celul. 10 g/L
PROT = 0,14 t + 19,66
r = 0,951

40
30
20

Glic. 1 g/L
PROT = 0,75 t - 13,61
r = 0,994

10
0
0

72

144

216

288

360

432
Glic. 3 g/L
PROT = 0,37 t + 8,04
r = 0,995

Tempo (h)

Figura 1 : Crescimento Celular - Regresso Linear

Celulose 1 g/L
90

Celulose 5 g/L
Celulose 10 g/L

Protenas (mg S.A.B./L)

80

Glicose 1 g/L
Glicose 3 g/L

70

Velocidades mdias :
Celul. 1 g/L
0,07 mg S.A.B./ L h
Celul. 5 g/L
0,11 mg S.A.B./ L h

60
50

Celul. 10 g/L
0,14 mg S.A.B./ L h

40
30

Glic. 1 g/L
0,75 mg S.A.B./ L h

20
10
0
0

72

144

216

288

360

Glic. 3 g/L
432 0,37 mg S.A.B./ L h

Tempo (h)

Figura 2 : Crescimento Celular - Velocidades Mdias

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cidos Volteis Totais (mg/L)

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1400

Velocidades mdias :

1200

Celul. 1 g/L
1,38 mg / L h

1000
800

Celul.1 g/L

600

Celul.5 g/L

400

Celul.10
g/L
Glic.1 g/L

200

Celul. 5 g/L
0,61 mg / L h
Celul. 10 g/L
1,03 mg / L h
Glic. 1 g/L
4,27 mg / L h

Glic.3 g/L
0
0

72

144

216

288

Glic. 3 g/L
432 5,58 mg / L h

360

Tempo (h)

3000

50

2500

40

2000
30
1500
20
1000
10

500
0
0

72

144

216

288

Tempo (h)

Figura 4 : Obteno de Produtos e


Consumo de Substrato

0
360

Aucares Redutores Totais


(mg Glicose / L)
(para dados de
Substrato = Celulose)

Aucares Redutores Totais


(mg Glicose / L)
(para dados de
Substrato = Glicose)

Figura 3 : Obteno de Produtos - Velocidades Mdias

Glicose 1 g/L
Glicose 3 g/L
Celulose 1 g/L
Celulose 5 g/L
Celulose 10 g/L

DISCUSSO E CONCLUSES
Parmetros de crescimento de microrganismos so obtidos a partir da modelagem
matemtica do crescimento celular, que pode ser definida como a tentativa de representar
este crescimento por funes matemticas.
Quando tem-se um microrganismo crescendo em meio de cultura, em processo
descontnuo clssico, tambm conhecido por batelada, como o caso do processo
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utilizado neste trabalho, bastante comum observar-se seu desenvolvimento conforme


uma curva sigmide, com fases distintas, como de adaptao, de acelerao, exponencial,
de desacelerao, estacionria e de decrscimo.
A chamada fase exponencial de crescimento tem importncia fundamental, na medida em
que o perodo em que a velocidade especfica de crescimento mxima e constante. a
fase de melhor desenvolvimento microbiano, e decorrncia direta da excelncia das
condies ambientais.
A ocorrncia de fase exponencial de crescimento no obrigatria, especialmente quando
se trata do crescimento de culturas mistas em substrato representado por material
particulado (MOSER, 1985).
Levando-se em conta que, no presente trabalho, utilizou-se uma cultura mista, hidrolticafermentativa, sem nenhuma garantia de composio constante ou sincronicidade, alm da
falta de possibilidade de mensurar ou observar a ocorrncia ou no de morte celular,
considerou-se ser razovel a no ocorrncia de fase exponencial no crescimento das
culturas.
Por outro lado o modelo linear de crescimento celular e produo de metablitos ajustouse bastante bem aos valores obtidos nos ensaios realizados, o que ficou evidenciado pelos
valores dos coeficientes de correlaes obtidos.
Como esperado, a cultura celuloltica enriquecida se desenvolveu mais facilmente em
glicose do que em celulose, o que comprovado pelos maiores valores de Vmdia e Vp,
nesse substrato.
Na maioria dos trabalhos em literatura, como constatado na reviso de SAHA (1991)
sobre degradao de polissacardeos por culturas mistas, as atividades das culturas
celulolticas foram em geral avaliadas pelas taxas enzimticas, ou pela percentagem da
celulose degradada, diferentemente das medidas de protenas realizadas nesse trabalho.
Assim, pode-se fazer uma comparao da atividade sacaroltica resultante das culturas do
chorume com os valores de CAILLIEZ et al. (1993), em que o autor estudou as
velocidades de crescimento de seis clostrdios isolados de um biodigestor de resduos
slidos domsticos, pela determinao da matria seca, e verificou maiores velocidades
especficas de crescimento tambm em acares, como a celobiose, da ordem de 0,23 h-1,e
menores em celulose (mistura de AVICEL em p e papel de filtro), da ordem de 0,05 a
0,027 h-1.
A falta de agitao constante dos frascos-reatores foi uma opo na tentativa de simular a
falta de mistura existente nos processos de digesto anaerbia de resduos slidos, como
os caracterticos do lixo urbano.
A compreenso do papel dos microrganismos atuantes nos sistemas anaerbios aplicados
ao tratamento de resduos slidos, sem dvida colabora com indicaes do potencial de
biodegradao de diversos componentes orgnicos, bem como evidencia rotas
metablicas dessa degradao. Nesse trabalho, a celulose foi degradada a acares e
cidos orgnicos volteis, como descrito em outros trabalhos com culturas celulolticas de
o

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origem diversa ao chorume (BRANDON, 1979; SAHA, 1991). A constatao de rotas


biolgicas semelhantes contribui para a avaliao em geral dos microrganimos
celulolticos anaerbios, e permite verificar similaridades entre culturas e condies de
cultivo.
Embora o entendimento da degradao enzimtica de polissacardeos por culturas mistas
tenha avanado nos ltimos anos (SAHA, 1991), muito ainda permanece a ser esclarecido
para, inclusive, tornar atraente o uso de microrganismos na transformao de lixo em
produtos mais nobres, como lcoois e cidos orgnicos. O mrito em se estudar as
culturas mistas do chorume est, at o presente, no estabelecimento das condies
suscetveis ao melhor crescimento microbiano, na identificao de culturas, enfim, na
indicao das melhores condies de pH, temperatura, nutrientes, estabilidade, etc., que
no futuro, em conjunto podero exercer alguma influncia no desenho de sistemas da
engenharia.
A recirculao do chorume em aterros sanitrios, afim de otimizar a hidrlise de
polissacardeos, protenas e lipdeos, ou mesmo estimular a metanognese, tem sido
prtica comum (POHLAND & HARPER, 1985; MENNERICH, 1986; LEMA et al.,
1987; GANDOLA, 1995), portanto, a consistncia de resultados como os alcanados
nesta pesquisa, parece no deixar dvidas do potencial dos microrganimos anaerbios
celulolticos na degradao da frao celulsica dos resduos slidos.
Estudos como este, que resultaram na determinao de parmetros de crescimento e
produo de metablitos certamente contribuiro para um melhor conhecimento da
cintica da degradao de material particulado, com a adoo do modelo linear aplicado
ao crescimento de culturas mistas.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
1.

AMERICAN PUBLIC HEALTH ASSOCIATION; AMERICAN WATER WORKS


ASSOCIATION & WATER POLLUTIONS CONTROL FEDERATION. Standard methods for the
examination of water and wasterwater. 18a edio. Washington, APHA, 1992.
ASSOCIAO BRASILEIRA DE NORMAS TCNICAS - ABNT. NBR 8419 : Apresentao de
projetos de atrerros sanitrios de resduos slidos urbanos. 1984.
BALDOCHI, V.M.Z. Comportamento dos cidos volteis no processo de estabilizao anaerbia dos
resduos slidos urbanos em aterro sanitrio. So Paulo, 1990, 172p. Dissertao de Mestrado, Escola
de Engenharia de So Carlos - USP.
BARLAZ, M.A.; SCHAEFER, D.M. & HAM, R.K. Effects of prechiling and sequential washing or
enumeration of microrganisms from refuse. Appl. Environ. Microbiol., 55:50-54, 1989.
BARLAZ, M.A.; HAM, R.K. & SCHAEFER, D.M. Methane production from municipal refuse : a
review of enhancement techniques and microbial dynamics. Critical Rev. in Environm. Control, 19:557584, 1990.
BHADURI & DEMCHICK. Simple and rapid method for disruption of bacteria for protein studies.
Applied and Environm. Microbiol., 46(4) : 941 - 943, 1983.
BRANDON, D.G. Isolation of an anaerobic cellulolytic mixed culture. European J. Appl. Microbiol.
Biotechnol., 7, 281 - 288, 1979.
BRYANT, M.P. Commentary on the Hungate Technique for culture of anaerobic bacteria. The Am.
J. Clinical Nutrition, 25: p.1324-1328, 1972.
CAILLIEZ, C.; BENOIT, L.; GELHAYE, E.; PETITDEMANGE, H. & RAVAL, G. Solubilization
of cellulose by mesophilic cellulolytic clostridia isolated from a municipal solid wate digester.
Biosource Technology, 43:77-83, 1993.

2.
3.

4.
5.

6.
7.
8.
9.

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24.
25.
26.
27.

28.

29.

30.

31.

32.

Di LALLO, R. & ALBERTSON, O.E. Volatile acids by direct titration. JWPCF, 33 (4) : 356-365,
1961.
FILIP, R. & SMELD-HILDMANN, R. Microbial activity in sanitary landfills - A possible source of
the humic substances in groudwater ?, Wat. Sci. Tech., 20(3) : 55-59, 1988.
GANDOLLA, M. Techniques, exploitation et gestion des dcharges contrlees - textes. Cycle
detudes postgrades en ingnierie de Lausanne - Institut de gnie de lenvironnement, 1995.
GIAJ-LEVRA, L.A. Estudo de metodologia de contagem para bactrias anaerbias celulolticas. So
Carlos, 1991, 140 p. Dissertao de Mestrado - Departamento de Hidrulica e Saneamento - Escola de
Engenharia de So Carlos - USP.
GOMES, L.P. Avaliao da atividade bacteriana anaerbia celuloltica do chorume originado em
sistema de disposio de resduos slidos urbanos a cu aberto. So Carlos, 1995, 210p. Tese de
Doutorado - Departamento de Hidrulica e Saneamento - Escola de Engenharia de So Carlos - USP.
HUNGATE, R.E. A roll tube method for cultivation of strict anaerobes. In: Methods in
microbiology. Eds. J.R. NORRIS & D.W. RIBBONS, Nova York : Academic Press Inc., 1969, vol. 3B,
p. 117-132.
LEMA, J.M.; IBANEZ, E. & CANALS, J. Anaerobic treatment of landfill leachates : kinetics and
stoichiometry. Environm. Tech. Lett., 8, p. 555 - 564, 1987.
LOWRY, O.H.; ROSEBROUGH, N.J.; LEWIS FARR, A. & RANDALL, R.J. Protein measurement
with the folin phenol reagent. J.Biol.Chem., 193: p. 265-275, 1951.
MANTELL, C.L. Solid wastes : origin, collection, processing and disposal. Ed. Wiley - Interscience
Publication, 1975.
MENNERICH, A. & ALBERS, H. Anaerobic pr-treatment of high concentrated landfill leachates.
p. 360-371, 1986.
MILLER, T.L. & WOLLIN, M.J. A serum bottle modification of the Hungate Technique for
cultivating obligate anaerobes. Appl.Microbiol., 27: p. 985-987, 1974.
PAVONI, J.L. et al.. Handbook of solid waste disposal - materials and energy recovery. Ed. Van
Nostrand Reinhold Comp., 1975.
PEREGO Jr., L. Fermentao alcolica contnua de mosto de melao : influncia da concentrao do
mosto e da vazo especfica de alimentao na estabilidade do sistema a 32 C. So Paulo, 1979, 162 p.
Dissertao de Mestrado. Departamento de Tecnoligia Bioqumica-Farmacutica da Fac. Cincias
Farmacuticas da USP.
PETERSON, G.L. A simplification of the protein assay method of Lowry et al. - which is more
generally applicable. Anal.Biochem., 83, 346 - 356, 1977.
POHLAND, F.G. & HARPER, S.R. Critical review and summary of leachate and gas production
from landfills. Atlanta, Georgia Instituite of Technology, School of Civil Engineering, 1985, 165p.
ROBINSON, H.D. & MARIS, P.J. The treatment of leachates from domestic waste in landfill sities.
J. Water Pol. Contr. Fed., 57:p. 30-38, 1985.
SAHA, B.C. Mixed cultures in enzymatic degradation of polysaccharides. In : Mixed Cultures in
Biotechnology. Eds. G. Zeikus & E.A. Johnson. Mc Graw Hill, 1991, p. 233-259.
SCHALCH, V. Anlise comparativa de dois aterros sanitrios semelhantes e correlaes dos
parmetros do processo de digesto anaerbia. So Paulo, 1992, 219p., Tese de Doutorado,
Departamento de Hidrulica e Saneamento - Escola de Engenharia de So Carlos - USP.
TEIXEIRA, E.N. Efeito inibidor da recirculao direta de chorume na decomposio anaerbia de
resduos slidos. So Carlos, 1993, 388p.Tese de Doutorado - Departamento de Hidrulica e
Saneamento - Escola de Engenharia de So Carlos - USP.
VAZOLLER, R.F. Estudos sobre isolamento, caracterizao e crescimento de culturas puras de
bactrias metanognicas provenientes de biodigestores de lodo de esgoto. So Paulo, 1989, 146 p.,
Dissertao de Mestrado, Instituto de Cincias Biomdicas - USP.
VAZOLLER, R.F.; GOMES, L.P.; BALDOCHI, V.M.Z.;VILLAS BAS, D.M.F.; BADRA, R.J. &
POVINELLI, J. Fundamental studies on biodegradability potential microbiology and biochemistry of
two experimental landfills. 6th International Congress and Exhibition on Solid Waste, Madrid, jun/1992.
VILLAS BAS, D.M.F. Estudo da microbiota anaerbia hidroltica-fermentativa em aterro sanitrio.
So Carlos, 1990, 157 p., Dissertao de Mestrado, Departamento de Hidrulica e Saneamento, Escola
de Engenharia de So Carlos - USP.
ZINDER , S.H. & KOCH, M. No-acetoclastic methanogenesis from acetate : acetate oxidation by a
thermophilic syntrophic coculture. Arch. Microbiol. 138: 263 - 272, 1984.

20 Congresso Brasileiro de Engenharia Sanitria e Ambiental

2024