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Foto de los miembros del grupo de Enzimas Microbianas para Aplicaciones Industriales de izquierda
a derecha: el Dr. Javier Pastor, la Dra. Pilar Daz, Mai Nielsen, Beln Infazn, Amanda Fillat, Susana
Valenzuela, Monica Estupin, Friket Uyar y Silvia Cesarini.
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eslabones. En este caso los eslabones seran los azcares sencillos y la cadena sera el
carbohidrato. Estas son las biomolculas ms comunes en la biosfera y la capacidad que tienen
las enzimas para degradarlas es lo que provoca tanto xito comercial.
Existen muchas variedades de carbohidratos, segn los azcares sencillos que los compongan.
Los ms comunes son la celulosa, compuesta por molculas de glucosa unidas en cadena y el
xilano, este compuesto por residuos de xilosa. Las enzimas encargadas de romper la celulosa
son las celulasas y las que acaban con las cadenas de xilano son las xilasas. Es a partir de aqu
donde empieza el trabajo de los grupos de investigacin, buscar estas enzimas, conocerlas y
mejorarlas.
El grupo de investigacin de la UB descubri una bacteria, aun no identificada, en los arrozales
del Delta del Ebro (Catalua). El microorganismo se incub y se dej crecer en placas de agar
enriquecidas con xilano, y se vio que era capaz de degradarlo. Despus de varias
comparaciones genticas con dems especies y subespecies se concluy que esta bacteria era
una nueva especie de Bacillus y se bautiz con el nombre de Paenibacillus barcinonensis. Hacia
este logro se dirigieron la mayora de los trabajos de este grupo de biotecnologa de la UB, que
trabaja con esta recin descubierta bacteria que contiene cuatro xilanasas y tan slo una de
ellas, adems, muestra actividad celulasa.
De esta bacteria se han querido aislar primero las xilanasas ya que al ser el xilano el
componente ms abundante en las paredes celulares de las plantas, es el perfecto candidato
para la industria del blanqueo del papel. Para obtener esta actividad enzimtica se hizo uso de
la ingeniera gentica. Se introdujo el gen que codificaba la principal xilanasa de P.
barcinonensis (llamada XynA) en otro microorganismo, la bacteria E.coli, muy utilizada en
estudios de biotecnologa. De esta manera este E.coli recombinante para este nuevo gen era
capaz de expresar la xilanasa de P.barcinonensis. A partir del aislamiento de la enzima, se le
sometieron a condiciones similares a las de los procesos industriales, medios alcalinos y
temperaturas altas. La enzima respondi a las exigencias de estas duras pruebas con xito.
Aunque por otro lado, la produccin de esta enzima en E.coli fue insuficiente, siendo
inadecuada para las altas demandas comerciales.
Las exigencias de las industrias son muy estrictas.
Si el uso de la biotecnologa es menos rentable
que el uso de los clsicos qumicos usados hasta
el momento, seguramente la eleccin del
empresario ser seguir con sus tratamientos
habituales. Por eso, la faena de la comunidad
cientfica consiste en crear unas enzimas, en este
caso xilanasas, eficaces. El grupo de investigacin
de la UB, en este sentido seleccion una nueva
xilanasa de P. barcinonensis, y a travs de la
ingeniera gentica, modificaron el gen que
Como piezas de Lego, el ADN se puede
codificaba la xilanasa en cuestin, a travs de lo
desmontar para conseguir una nueva
que se llama, la evolucin dirigida. Esta tcnica
forma.
quiere reproducir a escala de laboratorio el
proceso de evolucin que seguira una protena
para llegar al cum laude de su potencial. En este caso se utilizaron dos tcnicas: la del DNA
shuffling, que consiste en cortar el ADN en trozos y despus unirlos al azar, como si fuesen
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piezas de Lego. Y la de error prone PCR, que consiste aadir una protena que tiene la
capacidad de producir errores al azar en la secuencia del ADN. A travs de estos dos mtodos,
se introdujeron cambios en la secuencia de ADN inicial que en algunos casos dieron lugar a
mejoras. Sobretodo, en aquellos que afectaban a residuos de la superficie de la protena
dndole estabilidad frente a temperaturas altas o pH alcalinos.
Pero, para realmente conocer el efecto de las xilanasas en el proceso del blanqueado de papel,
se evalu el efecto de varias familias de xilanasas sobre la pulpa de eucalipto, un rbol de
madera dura con alto contenido en xilanos. En este proceso, las xilanasas, que son uno de los
principales implicados en la rotura del xilano, rompen los xilanos de la superficie que
contienen las fibras de celulosa; esto provoca que los elementos qumicos con accin
blanqueante (como el dixido de cloro y el perxido de hidrgeno) hagan mejor su funcin y
en menor cantidad, hecho que favorece que se liberen menos contaminantes durante este
proceso. Adems, con estos experimentos, se vio que la adicin de dos familias de xilanasas a
la vez tena un efecto sinrgico para el blanqueamiento. Y tambin se vio una disminucin en
el contenido de los llamados cidos hexeneurnicos, principales responsables del
envejecimiento y amarilleamiento del papel por el transcurso de los aos. Es por todos estos
resultados, que las xilanasas son unas excelentes candidatas para prosperar en esta industria.
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H. pylori
Otra de las lipasas que se estudi fue la llamada esterasa de Heliobater pylori. Esta bacteria
coloniza el estmago y es una de las responsables de la aparicin de las lceras gstricas, y la
lipasa parece ser que tiene una parte de protagonismo en el desarrollo de la enfermedad ya
que parece que debilita la capa protectora del estmago hacindola ms sensible a los cidos
gstricos que se encuentran en el interior.
Para su estudio, tambin se aisl el gen de la esterasa en otra bacteria y se la present a sus
potenciales inhibidores, los mismos que se utilizaron para el tratamiento contra el acn. En
este caso, los resultados fueron poco precisos; en algunos casos se vio una clara inhibicin de
la enzima, aunque en otros casos, al contrario, se observ una activacin.
Parece que la observacin de estos metabolitos inhibidores frente a las lipasas ha sido
reveladora tanto de nuevas como de falsas teoras. Aun son uno de los candidatos como
posibles terapias para estas enfermedades; pero en la ciencia, las aplicaciones generales no
suelen funcionar y es por eso que la investigacin de numerosos grupos de investigacin
trabajan para dilucidar todos los detalles.
Nuevas familias
Hay infinidad de bacterias y cada una tiene sus propias enzimas. Con motivo del aumento en la
demanda de estas para la biotecnologa, hay numerosos investigadores dedicados a buscar
nuevas enzimas en la poblacin microbiana que cumplan los requisitos para su aplicacin en la
industria. Es por esta creciente corriente que el grupo de investigacin de la UB aisl una lipasa
de una cepa de Rhodococcus del subtrpico, se compar genticamente con otras lipasas y se
concluy que no perteneca a ninguna familia anterior y por lo tanto se clasific en una nueva
familia de lipasas, llamada familia X.
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Conclusiones
Despus de haber ledo y conocer un poco como funciona el mundo de la biotecnologa, la
ingeniera gentica y el uso y manipulacin de las bacterias y enzimas a antojo de la
comunidad cientfica (aun con limitaciones), es imposible trazar los lmites de esta cantera aun
sin agotar. Podramos decir que se trabaja a tientas para encontrar nuevas propiedades de
estos pequeos obreros, para que se conviertan en autmatas capaces de revolucionar el
funcionamiento de las industrias y alejarnos de las fbricas de los tiempos modernos. Pero
detrs de esta comunidad cientfica, existe un historial de trabajos que difumina esta idea del
azar. El continuo descubrimiento de nuevas bacterias, nuevas enzimas y familias y la mejora de
estas a travs de las manipulaciones genticas, requiere del constante trabajo y dedicacin de
muchos grupos de investigacin que intentan conseguir la mejora e innovacin de los ya
envejecidos mtodos industriales para as tambin evitar, en la medida de los posible, masivas
contaminaciones ambientales.
Y seguramente, en estos microorganismos, por los cuales muchos de nosotros sentimos temor
o hasta ciertos episodios de pnico, ante la sola idea de su presencia, sean claves para un
desarrollo indeterminado de la ciencia.
Trabajos externos
El uso de las enzimas como elementos integrados en los procesos industriales, es uno de los
campos cientficos ms en auge debido a su vertiente comercial. Es por eso que existen
muchos grupos de investigacin dedicados a este campo. El grupo de enzimas microbianos de
la UB se dedica a ello, aunque externos a ella, hay varios grupos nacionales dedicados a esta
rama de la biotecnologa.
En este caso nos hemos fijado en el trabajo desarrollado por el grupo Microbiologa y
Parasitologa de la Universidad de Alcal de Henares (Madrid) que, dirigido por la Dra. Mara
Enriqueta Arias, estudia los enzimas microbianos y sus aplicaciones industriales. En los ltimos
aos nos aseguran que han tratado ms el tema de la industria del papel con una enzima
llamada lacase y tambin han utilizado mtodos mecnicos para el pasteado del papel, como
la pirolisis o el uso de diferentes gradientes de temperatura. Aunque en estudios anteriores se
han dedicado a estudiar otros enzimas como las hemicelulasas, xilanasas y manasas, todas
ellas dianas de componentes vegetales.
Uno de sus estudios se enfoc tambin en la industria papelera. En este caso, el grupo de
investigacin de la Universidad de Alcal de Henares quiso probar la eficiencia de la pulpa de la
paja de trigo para fabricar el papel en lugar de la clsica madera. La hiptesis era que el trigo
es un producto que se genera en exceso y que se acaba desaprovechando y, por lo tanto,
convirtindolo en un potencial fabricador de papel se evitaran gran parte de las prdidas.
La enzima protagonista en este proceso era la lacasa que se encargaba de digerir la lignina de
la paja de trigo y as obtener puramente las fibras vegetales (pulpa) aptas para la fabricacin
del papel. La encargada de fabricar esta enzima era un microorganismo, Streptomyces cyanes.
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Como en todo experimento cientfico se hizo un control, la paja sin la enzima y la paja con la
enzima. Como resultados positivos se vio que ante la presencia de la lacasa, haba un aumento
en la fuerza del papel aunque tambin se observaron defectos en las propiedades mecnicas
de este.
Adems de los estudios para la aplicacin de las
lacasas en la industria papelera, se vio como
estas enzimas con muy baja especificidad
podan atacar y oxidar a un amplio rango de
componentes fenlicos, txicos producidos en la
elaboracin de tintes industriales. Es por eso
que este grupo de investigacin en Madrid
comprob su capacidad para eliminar la
toxicidad de los tintes utilizados en la industria
textil. Para as evitar posibles contaminaciones
ambientales y hasta problemas de salud. Se aisl
el gen codificante para esta enzima de la
bacteria Streptomyces ipomonea y se clon en
otro microorganismo para producirlo en grandes
cantidades.
Seal de contaminacin
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S.V: Yo soy chilena y ya marche. All ya estuve en un laboratorio porque por la carrera
tenemos que hacer un trabajo de investigacin. Entonces tambin trabaj en un laboratorio un
par de aos. Y ahora que estoy aqu s que me gustara seguir. Pero ahora mismo las
posibilidades son bastante complicadas ac as que quizs tenemos que marchar.
C.A: Cmo se trabaja en el grupo del Dr. Javier Pastor y la Dra. Pilar Daz?
S.V: Estoy muy a gusto en el grupo. La verdad es que nos llevamos muy bien. Ha sido
fundamental tener una buena relacin tanto con los jefes como con las compaeros ya que
son 4 o 5 aos que ests metido todo el da en el laboratorio. Y es una cosa que se agradece.
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