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INFORME DE BIOLOGA

CATALASA

Integrantes:
-

Valentina Guerrero
Gnesis Gonzlez
Katherine Reyes
Constanza Vega
Daniela Zapata

INTRODUCCIN

Observaremos y analizaremos la accin de la enzima catalasa en diferentes temperaturas y


pH, demostrando su accin sobre el perxido de hidrgeno.
Para lograr este objetivo, realizaremos tres experimentos.
En el primero, compararemos la accin de la catalasa presente en hgado y papa, frente al agua
oxigenada (H2O2).
Posteriormente, comprobaremos su accin en hgados sometidos a distintas temperaturas (congelado,
cocido y a temperatura ambiente).
En el ltimo experimento, verificaremos la influencia del pH en la velocidad de las reacciones
enzimticas. Analizaremos su accin frente a tres porciones de hgado, cada una con un compuesto
de diferente pH (H2O2, NaOH y HCl).
Los experimentos a realizar nos ayudarn a complementar y entender mejor el funcionamiento de
las enzimas, y los factores externos que modifican su comportamiento.

MATERIALES
-

Tres vasos precipitados


Pipetas
Agua oxigenada
Encendedor
Pajuela
Papa
Hgado de pollo
Cronmetro
Bolsa para los deshechos
Bandejas
Paos
Cloro
Papel milimetrado
Cuchara
Hidrxido de sodio
Acido clorhdrico

EXPERIMENTO 1
ACCIN DE LA CATALASA

Materiales:
- 3 vasos precipitados
- Pipeta
- Agua oxigenada
- Cronmetro
- Pajuela
- Encendedor
- Papa rallada
- Papilla de hgado (temperatura ambiente)
Procedimiento
1. Coloque en cada tubo de ensayo 5 cc de agua oxigenada.
2. Proceda de la siguiente manera:
Vaso 1: 5 cc de agua oxigenada
Vaso 2: 5 cc de agua oxigenada
Vaso 3: 5 cc de agua oxigenada

(control)
+ raspado de papa
+ papilla de hgado

3. Observe el desprendimiento de las burbujas en cada tubo y anote los resultados en la


siguiente tabla:
N vaso
1
5cc de H2O2
2
5cc de H2O2 +
raspado papa

3
5cc de H2O2 +
papilla de hgado

Velocidad
de reaccin
No hay
reaccin.
6.5
segundos.

Caractersticas iniciales
(en cada vaso)
Slo presencia de H2O2.

Cantidad de
gas
Ninguno

Cambios
observados
No hay alteraciones

El raspado de papa,
color amarillo claro de
apariencia pastosa.

Moderado

5 segundos-

Papilla de hgado color


rojizo oscuro.

Abundante

La papa desprende
una cantidad
moderada de burbujas
que dan una
consistencia compacta
a la solucin.
La papilla de hgado
desprende gran
cantidad de burbujas
de consistencia ms
diluida y agua.

1.- A qu se debe que la velocidad de la reaccin enzimtica sea mayor en un tejido que en
otro?
Esto se debe a que el hgado, comparado con la papa, tiene una mayor cantidad de peroxisomas (por
ende, una elevada cantidad de catalasa) que son esenciales en la detoxificacin que realiza este
rgano.
2.- Introduzca la pajuela al interior del vaso de precipitado, registre sus observaciones. Qu
gas libera este compuesto por accin de la catalasa?
Al acercar la pajuela encendida al vaso, esta se aviva rpidamente. Esto se debe a que la reaccin
producida por la catalasa libera O2, producindose una mayor combustin.
3.- Qu sustancias cambian durante la reaccin en los vasos de precipitado 1 y 2?
En el vaso 1, el H2O2 se mantiene intacto ya que no hay presencia de catalasa. En el vaso 2, el H2O2 es
transformado en agua (H20) y oxgeno (O2) bajo la accin de la catalasa.
4.- A qu se debe el aumento de temperatura percibida en los vasos de precipitados? Explique.
Se debe a la accin de la enzima catalasa, sta acelera los movimientos de choque entre reactantes
liberando energa, producindose una reaccin exergnica.
5.- Qu se entiende por especificidad enzimtica? En qu forma podra demostrarlo
experimentalmente? (Hgalo a travs de otro ejemplo).
Que las enzimas actan sobre un sustrato determinado, produciendo una determinada reaccin. La
lipasa est especificada en disgregar grasas que sern posteriormente absorbidas por el organismo.
6.- Cul es el sustrato donde acta la catalasa?
Acta sobre el H2O2.

EXPERIMENTO 2
EFECTO DE LA TEMPERATURA

II.- Qu factores pueden modificar la actividad cataltica de las enzimas?


Uno de los factores que afectar la accin de una enzima es la temperatura. La actividad
cataltica es mxima cuando acta en una temperatura ptima. Si la temperatura es muy
elevada, puede producirse la desnaturalizacin de la enzima. En el caso contrario, si se
somete a bajas temperaturas, se inactiva el funcionamiento de sta.
Otro factor es el pH. Al igual que la temperatura, posee un rango ptimo en el cual la
actividad enzimtica ser mayor. Cuando se excede o se conserva bajo el rango
establecido, la enzima cambia su carga (positiva, neutra o negativa), modificando la
estructura del sitio activo.

Materiales:
-

Tres vasos de precipitados


Pipeta
Agua oxigenada (H2O2)
Hgado de pollo cocido, congelado y a temperatura ambiente.

Procedimiento:
1.- Etiquete tres vasos de precipitado (1-2-3)
2.- La papilla de hgado debe ser molida y dividida en tres porciones: la 1era de estas
porciones ser cocida en agua hirviendo a 100C, la 2da porcin debe congelarse a
temperaturas -10 C por espacio de una semana, el hgado congelado debe ser
transportado en un pocillo que contenga hielo para mantener su baja temperatura. La 3era
porcin se descongelar la noche anterior al experimento, ya que se usar descongelado a
temperatura medio ambiente.
3.Vaso 1: agregue papilla de hgado
+
2cc de H2O2
Vaso 2: papilla de hgado cocida por 15
+
2cc de H2O23.
Vaso 3: papilla de hgado en hielo por 15 +
2cc de H2O2

N vaso

1
Papilla de hgado + 2cc de
H2O2
2
Papilla de hgado cocida +
2cc de H2O2

Condicin de la
enzima

Color
inicial

Temperatura

Cambios
observados

25C aprox.

Hay reaccin, se
genera una
espuma diluida.
No hubo
cambios
observados.

Marrn
Activa

S
Cocida a 100C ,
pero trabaja a
25C

Caf
No

Desnaturalizada
3
Papilla de hgado congelada
+ 2cc de H2O2

Presencia
de
reaccin

Inactiva

Rojiza

S, en
poca
cantidad

Congelada a
-10C, pero
trabajada a 5C
aprox.

Escasa presencia
de espuma en el
contenido.

1.- Basndose en los resultados obtenidos, realice grficos en papel milimetrado; que
representen el efecto de la temperatura sobre la actividad de la catalasa.
ANEXO 1
2.- A partir de su grfica establezca la relacin entre la temperatura y la actividad enzimtica
en 2 lneas.
En una temperatura ptima la enzima realiza su actividad sin dificultad, pero en presencia de T mx. o
min. la accin de la catalasa se ve interrumpida, sin poder realizar su trabajo.
3.- A bajas temperaturas regularmente las enzimas se inactivan, fenmeno llamado
inactivacin; al respecto conteste:
a.- Qu diferencia esencial existe entre la desnaturacin y la inactivacin?
En la desnaturalizacin la enzima pierde su estructura nativa al subir la T, dejando de funcionar
(Irreversible). En la inactivacin, deja de actuar en bajas T, pero al volver a su rango ptimo, la enzima
vuelve a funcionar (reversible).
b.- En qu forma lo demostrara?
Si se aplica H2O2 en papa congelada, no se produce ninguna reaccin. Pero al repetir esta accin en la
papa en temperatura ambiente, se podr observar la accin de la catalasa sobre el agua oxigenada.

EXPERIMENTO 2
EFECTO DEL PH

Materiales:
-

Hgado de pollo
Tres vasos de precipitado
Pipetas
Cucharas
Hidrxido de sodio
Acido clorhdrico
Agua oxigenada
Agua destilada

Procedimiento:
1.- Etiquete tres vasos de precipitado (1-2-3)
2.- En cada vaso de precipitado coloque una cucharada de papilla de hgado, luego proceda como
muestra la tabla. A continuacin observe lo que sucede en los vasos 2 y 3 al agregar agua oxigenada,
no olviden registrar todas sus observaciones.

3.- Proceda de la siguiente manera:


Vaso 1: papilla de hgado + 5cc de agua destilada
Vaso 2: papilla de hgado + 5 cc de NaOH
Vaso 3: papilla de hgado + 5 cc de HCl
4.- Cuando haya depositado en cada vaso la papilla de hgado, solicite a su profesora que agregue los
reactivos correspondientes (NaOH y HCl). A continuacin agregue a los tres tubos, 5 cc de H2O2;
tpelos con tubos de seguridad y observe. A continuacin introduzca el papel pH y registre los
cambios.
N vaso
Valor del pH
Caractersticas
Presencia de
Cambios
iniciales del
reaccin
observados
hgado
1
7
Papilla rojiza,
S
Reacciona
Papilla de hgado
temperatura
normalmente.
+ 5 cc de agua
ambiente.
Abundantes
destilada + 2 cc
burbujas
de H2O2
2
12,7
Papilla rojiza,
S
Se reduce un
Papilla de hgado
temperatura
poco la accin de
+ 5 cc de NaOH
ambiente.
la enzima.
+ 2 cc de H2O2
3
1
Papilla rojiza,
No
No hubo
Papilla de hgado
temperatura
reaccin. La
congelada + 5 cc
ambiente.
papilla se cuece,
de HCl + 2 cc de
compactndose.
H2O2

1.- El pH matemticamente se define como el logaritmo negativo de la concentracin de


protones en los cidos, en el caso de una sustancia alcalina se debe restar el pH al pOH
(valor=14). Basndose en esta informacin calcule el pH del HCl y NaOH. Incorporar
dichos valores en la tabla de datos.
NaOH

pOH = -log[OH-]
pH= 14 - pOH

>>

HCl

pH = -log [H+]

pOH = -log[0.05]
pH NaOH = 12.7
pH = -log [0,1]

pOH= 1.30

pH HCl = 1

2.- Basndose en los resultados obtenidos, realice un grfico en papel milimetrado; que
represente el efecto del pH sobre la actividad de la catalasa.
ANEXO 2
3.- A partir de su grfica establezca la relacin entre el pH y la actividad enzimtica.
La actividad enzimtica es mayor en un rango ptimo (catalasa = 7), si acta sobre un rango
mayor o menor, modifica su estructura, perdiendo o reduciendo su actividad enzimtica.

CONCLUSIONES
En el experimento realizado, pudimos comprender de forma clara, la funcin de las enzimas,
su especificidad y los factores que pueden alterar su accin.

Las clulas que forman el hgado y la papa poseen una gran concentracin de peroxisomas en
su citoplasma.
Notamos explcitamente la especificidad de las enzimas, que actan sobre sustratos y
condiciones especficas.
La temperatura y el pH son factores concluyentes en la accin enzimtica.
El pH ptimo de la catalasa es neutro, si se altera este rango, la funcionalidad enzimtica se
ve afectada.
El agua oxigenada es un compuesto que daa los tejidos, por esto, la catalasa acta
rpidamente sobre ella, transformndola en O2 y H2O. Es fundamental en el proceso de
detoxificacin celular

BIBLIOGRAFA
Enzimas
http://www.juntadeandalucia.es/averroes/recursos_informaticos/concurso1998/accesit6/enzimas.html
http://academia.cch.unam.mx/wiki/biologia3y4/index.php/Enzimas
http://es.wikipedia.org/wiki/Enzima
Especificidad enzimas
http://temasdebioquimica.wordpress.com/2008/07/12/especificidad-enzimatica/
pH y temperatura
http://www.ehu.es/biomoleculas/enzimas/enz1.htm#ph
http://www.ehu.es/biomoleculas/enzimas/enz1.htm#t
Calculo del pH y pOH
http://www.forest.ula.ve/~rubenhg/acidez/