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Os exames laboratoriais so realizados a partir da solicitao mdica a fim de diagnosticar,

monitorar ou acompanhar o tratamento de um paciente.


Coleta de sangue venoso

Objetivo
Uma boa coleta de sangue permite segurana no resultado do exame, todos os
procedimentos devem ser realizados de forma a garantir a segurana do profissional, do paciente
e da amostra.

Desenvolvimento
O paciente deve ser orientado a manter um jejum de 10 a 14 horas, antes da coleta. Ele
fica livre somente para beber gua, a coleta deve ser preferencialmente realizada na parte da
manha e antes da pratica de exerccios fsicos.
A obteno do sangue pode ser por puno venosa, arterial, ou puno de pele (capilar), a
amostra tambm podem ser coletadas no dorso da mo, na veia femoral, veias jugulares, cordo
umbilical e seio sagital superior.
Normalmente usa-se a dobra do cotovelo ou a mo para a coleta.
Procedimento
Verificar quais exames ser realizado.
Identificar os tubos com o nome do paciente.
Retirar a agulha da embalagem estril e acoplar a seringa estril.
Colocar o garrote ao redor do brao acima do cotovelo.
Paciente abrir e fechar a mo vrias vezes.
Determinar a veia a ser puncionada.
Desinfetar a pele com lcool 70%.
Introduzir a agulha na pele e penetrar no interior da veia.
Aps a coleta, pedir para o paciente abrir a mo.
Soltar o garrote.
Retirar a agulha voltada para cima.
Distribuir nos tubos Inverter os que tiverem anticoagulantes.
OBS: quando se quer obter o soro do paciente, usa-se tubo sem anticoagulante, e se
deseja obter plasma, usa-se tubo com anticoagulante.

Concluso
Com os dias de estgio na rea de coleta, foi possvel obter prtica, aumentar confiana alm de
aprender as tcnicas utilizadas, para que na hora da coleta eu possa transmitir ao paciente
segurana e confiabilidade.

HEMATOLOGIA

Do ponto de vista da sua constituio, o sangue considerado como um sistema complexo


e relativamente constante, constitudo de elementos slidos (clulas sanguneas), substncia
lquida (soro ou plasma) e elementos gasosos (oxignio e gs carbnico). Embora no seja
necessrio conhecer todos os detalhes sobre os procedimentos analticos dos testes, essencial
conhecer o tipo de amostra necessria para cada tipo de anlise.
Tipo de Anlise - Tipo de Amostra

Bioqumica e Sorolgica - Soro ou plasma


Hematolgica - Sangue total com EDTA
Glicmica - Plasma com fluoreto de sdio
Coagulao - Plasma com citrato de sdio

Tubos para coleta


Cada tipo de amostra deve ser coletada em um tubo especfico para cada tipo de anlise,
sendo de extrema importncia conhec-los para a realizao de uma coleta de material biolgico. O
material colhido em recipiente inadequado ser rejeitado e descartado pelo laboratrio pois no ter
validade para a realizao da anlise. Todos os tubos devero ser homogeneizados imediatamente
aps a coleta. Deve-se invert-los de 5 a 8 vezes, suavemente. Tubos homogeneizados
inadequadamente podero conter pequenos cogulos sanguneos que diminuiro a utilidade do tubo.
Quando o paciente possui mais de um exame solicitado e estes exames necessitam de materiais
diferentes que devem ser coletados em recipientes diferentes, deve-se obedecer uma sequncia para
coleta dos materiais para que no haja contaminao dos aditivos de um tubo para outro, o que
ocasiona grandes alteraes em alguns parmetros analticos. A sequncia de coleta para tubos
plsticos de coleta de sangue tubo com citrato de sdio (tampa azul), tubo sem anticoagulante
(tampa vermelha ou tampa amarela), tubo com heparina (tampa verde), tubo com EDTA (tampa
roxa) e tubo com fluoreto de sdio (tampa cinza). Quando o paciente tiver apenas exames de

coagulao, dever ser coletado primeiro um tubo de descarte. Isso devido ao fato de o primeiro
fluxo de sangue coletado conter os fatores de coagulao, principalmente a protrombina, o que altera
os

resultados.

Anlises de Coagulao

Quando se pretende fazer anlise de coagulao, dever ser colhida uma amostra de plasma
(CITRATO DE SDIO). Esta ser obtida atravs da coleta em tubo de citrato de tampa azul. Este tubo
contm Citrato de Sdio, o sangue colhido com anticoagulante deve ser cuidadosamente
homogeneizado por inverso de 5 a 8 vezes para evitar hemlise e a coagulao do sangue.

Anlises Bioqumicas e Sorolgicas

Quando se pretende fazer anlise bioqumica ou sorolgica, dever ser colhida uma amostra
de soro. Esta ser obtida atravs da coleta em tubo sem anticoagulante para que ocorra o processo de
coagulao. Portanto, a coleta deve ser feita no tubo de tampa vermelha sem gel ou no tubo de tampa
amarela com gel. Estes tubos contm ativador de cogulo e deve-se, imediatamente aps a coleta,
homogeneiz-los por inverso de 5 a 8 vezes para evitar hemlise, manter em repouso na posio
vertical por 30 minutos para retrair o cogulo e seguir a centrifugao a 3.000 rpm durante 10 minutos.

Anlises Bioqumicas

Quando se pretende fazer anlise bioqumica, gasometria ou outros exames, dever ser
colhida uma amostra de plasma (HEPARINA). Est ser obtida atravs da coleta em tubo de heparina
de tampa verde. Este tubo contm Heparina, o sangue colhido com anticoagulante deve ser
cuidadosamente homogeneizado por inverso de 8 a 10 vezes para evitar hemlise e a coagulao do
sangue.

Anlises Hematolgicas

Quando se pretende fazer anlise hematolgica, dever ser colhida uma amostra de sangue
total (EDTA). Esta ser obtida atravs da coleta em tubo de EDTA de tampa roxa. Este tubo contm
anticoagulante especfico para evitar a coagulao. O sangue colhido com anticoagulante deve ser

cuidadosamente homogeneizado por inverso de 5 a 8 vezes para evitar hemlise e a coagulao do


sangue.

Anlises Glicmicas

Quando se pretende fazer anlise de glicemia, dever ser colhida uma amostra de plasma
(FLUORETO DE SDIO). Esta ser obtida atravs da coleta em tubo de tampa cinza. Este tubo
contm fluoreto de sdio com EDTA, o sangue colhido com anticoagulante deve ser cuidadosamente
homogeneizado por inverso de 5 a 8 vezes para evitar hemlise e a coagulao do sangue.

Sistema ABO e fator Rh

O tipo sanguneo em humanos condicionado por alelos mltiplos. So quatro os tipos de


sangue: A, B, AB e O. Cada um destes tipos caracterizado pela presena ou ausncia
de aglutinognio,

nas

hemcias,

e aglutinina,

no

plasma

sanguneo.

Os aglutinognios so substncias encontradas na membrana plasmtica das hemcias e que


funcionam como antgenos quando introduzidos em indivduos que no os possuam. Existem dois
tipos de aglutinognios: A e B.
As aglutininas so substncias presentes no plasma sanguneo e que funcionam como
anticorpos que reagem com antgenos estranhos. Existem dois tipos de aglutininas: anti-A e antiB. O contato entre um aglutinognio e sua aglutinina correspondente provoca a aglutinao do
sangue. Assim, indivduos com sangue Tipo A no podem doar sangue para indivduos do Tipo B,
e vice-versa. Indivduos do Tipo AB podem receber sangue de qualquer grupo. J os do Tipo O
podem doar para qualquer grupo.

Tipo Sanguneo

Aglutinognio (hemcias)

Aglutinina (plasma)

Anti-B

Anti-A

AB

AB

-----

-----

Anti-A e Anti-B

Indivduos com sangue Rh+ possuem o fator Rh em suas hemcias e apresentam


aglutinao do sangue quando entram em contato com anticorpos anti-Rh. Aqueles que no
possuem o fator Rh em suas hemcias so chamados Rh- e no apresentam reao de
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aglutinao quando em contato com anticorpos anti-Rh. Quando um indivduo Rh- recebe
sangue Rh+, ele passa a produzir anticorpos anti-Rh.
A eritroblastose fetal uma doena que pode ocorrer quando mes Rh- geram filhos Rh+.
Nestes casos, pequenos vasos da placenta se rompem e h passagem de sangue do filho para a
me. Em resposta, o sangue da me passa a produzir anticorpos anti-Rh. Numa prxima
gravidez, se o filho for Rh+, os anticorpos maternos iro atacar as hemcias do feto, provocando a
doena.
O cromossomo D o responsvel pela produo da maior parte do aglutinognio
conhecido como Rh, por isso o termo Rh pode ser substitudo pelo fator D

Determinao grupo ABO e Rh em lmina

Materiais

Laminas
Reagentes (anti-A, anti-B, anti-AB e anti-D)
sangue

Mtodo

1. Pegar quatro lminas e marca-las de acordo com o reagente a ser colocado. Colocar uma
gota de sangue em cada lmina e uma gota de cada soro de acordo com a marcao
realizada. Exemplo: uma gota do reagente anti-A na lmina marcada como anti-A.
Homogeneizar. Observar a presena de aglutinao macroscpica se houver aglutinao
significa que a hemcia possui antgeno correspondente. Exemplo: Houve aglutinao com
o reagente anti-A, significa que o sangue pode ser A. Se no houver aglutinao com
nenhum dos reagentes, o tipo sanguneo o O. Se houver aglutinao com o reagente
anti-D significa que o sangue Rh positivo.
Determinao grupo ABO em tubo

Materiais
Tubos
Pipetas
Reagentes (anti-a, anti-b, anti-ab e anti-d)
Sangue
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Centrfuga

Mtodos

1. Marcar trs tubos como anti-A, anti-B e anti-AB. Colocar duas gotas de sangue nos trs
tubos e duas gotas do reagente correspondente.
2. Centrifugar por 15 segundos em 3500 rpm. Ressuspender delicadamente o boto de
hemcias e examinar a presena ou no, de aglutinao.

Coombs Direto

O teste de Coombs direto um mtodo que permite a identificao da presena de anticorpos


fixados sobre as hemcias. Tecnicamente, baseia-se no fato de que os anticorpos que recobrem
as hemcias podem ser identificados pela adio de anticorpos antigamaglobulina humana.

Materiais

Tubos
Soro de coombs
Sangue
Soluo fisiolgica
Pipetas
Centrfuga

Mtodo

1. Colocar 2 gotas do sangue em um tubo, adicionar soluo fisiolgica e centrifugar a 3.000


rpm por um minuto,desprezar (com cuidado) o sobrenadante deixando o boto de
hemcias no fundo do tubo, repetir o procedimento mais duas vezes.
2. Colocar 2 gotas do soro de Coombs e centrifugar novamente por 15 segundos, agitar
levemente o tubo e observar se h aglutinao dos eritrcitos. Se houver aglutinao o
teste de coombs positivo, se no houver ele negativo.
Coombs indireto

A prova de Coombs indireto atualmente chamada de pesquisa de anticorpos irregulares


(PAI). Esta prova avalia a presena de anticorpos irregulares circulantes no soro de doadores de
sangue, receptores, gestantes, pacientes com suspeita de anemia hemoltica por presena de
anticorpos, entre outros.
O teste antiglobulina humano baseia-se na aglutinao de hemcias sensibilizadas
previamente com anticorpos humanos ou fraes do complemento atravs do anti-soro AGH
(SORO DE COOMBS).

Materiais

Tubos
Centrfuga
Banho-maria
Soro de coombs
Hemcias com tipagem conhecida
Soluo fisiolgica

Mtodo

1. Preparar uma suspenso salina a 5% com hemcias conhecidas quanto ao antgeno e


cujo anticorpo correspondente se deseja detectar (o mais comum a deteco de
anticorpos anti- Rh positivo, anti-D). As hemcias devem ser compatveis com o soro
quanto ao sistema ABO (comumente empregam-se hemcias do grupo O Rh positivo).
2. Colocar duas gotas da suspenso em um tubo de 12 x 75 mm e lavar trs vezes com
soluo salina.
3. Adicionar duas gotas do soro a ser testado.
4. Misturar e incubar em banho a 37C, durante 30 a 45 minutos.
5. A seguir, lavar as hemcias trs vezes com soluo salina e adicionar o soro de Coombs
(duas gotas).
6. Agitar e centrifugar a 1.000 r.p.m. por 15 segundos.
7. Proceder leitura: presena de aglutinao significa teste de Coombs Indireto Positivo,
ausncia de aglutinao significa Teste de Coombs Indireto Negativo.
Esfregao

A realizao do esfregao sanguneo etapa significativa em um hemograma, pois possibilita


a leucometria diferencial, a estimativa do nmero de leuccitos e plaquetas por microlitro de
sangue, a avaliao morfolgica das clulas sanguneas e tambm a pesquisa de parasitas
sanguneos.

Materiais
Sangue
Lminas
Lpis

Mtodo

1. Preparar duas lminas novas e desengorduradas. Colocar uma gota de sangue pequena
em uma das extremidades da lmina. Tomar a outra lmina e coloca-la frente da gota
num ngulo de 45, fazer um ligeiro movimento para trs at o sangue se espalhar
totalmente na borda da lmina. Com um movimento uniforme, para frente, fazer esta
lmina deslizar sobre a outra, ela arrastar atrs de si o sangue que se espalhar em fina
camada. Imediatamente aps, agita a lmina ao ar at o esfregao secar-se
completamente e identificar com lpis.

Colorao de Lmina

Os corantes para esfregaos sanguneos so uma mistura de corantes de caractersticas


neutras, dependentes do pH da soluo corante, que em condies apropriadas coram os
componentes nucleares e citoplasmticos dos leuccitos, com predominncia de tons vermelhos
(quando cidos) e azulados diversos (quando bsicos).

Materiais

Corante (Leishman, Rosefeldou Wright)


Lamina com esfregao
gua destilada
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Mtodos

2. Preencher a lmina com o corante, deixar por 3-5 minutos.


3. Adicionar gua destilada sobre o corante e a lmina, deixar por 15 minutos.
4. Escorrer o corante e lavar em gua corrente, secar e examinar ao microscpio, as
hemcias ficam com colorao rsea e os leuccitos azuis.
Contagem de Plaquetas

As plaquetas, tambm chamadas de trombcitos, so clulas sanguneas produzidas na


medula ssea e que atuam na formao de cogulos de sangue, a fim de impedir uma hemorragia
sempre que houver necessidade.

Materiais

Lmina corada
Microscpio

Mtodo

1. Em um esfregao corado, contar as plaquetas em 10 campos que contenham 100


hemcias. Somar e multiplicar por 1000.

Valores de referncia: 150.000 a 400.000/mm

Contagem total de eritrcitos

Materiais

Cmara de Neubauer
Pipetas
Tubos
Lquido de Gower
Sangue
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Lamnula
Microscpio

Mtodo

1. Pipetar 4ml do lquido de Gower e 20l do sangue


em um tubo, homogeneizar.
2. Colocar a lamnula sobre a cmara de Neubauer

preencher um dos lados da cmara com a


diluio.
3. Levar ao microscpio e contar as hemcias de
cinco quadrados mdios centrais, como na figura
abaixo.

Clculo
n de eritrcitos/mm3 = n de eritrcitos contados 10.000

Valores de referncia: Homens adultos: 4,6 a 6,2 milhes/ml de sangue venoso


Mulheres adultas: 4,2 a 5,4 milhes/ml de sangue venoso
Crianas: 3,8 a 5,5 milhes/ml de sangue venoso

Contagem total de leuccitos

Materiais
Cmara de Neubauer
Pipetas
Tubos
Lquido de Turk
Sangue
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Lamnula
Microscpio

Mtodo

1. Pipetar 400l do lquido de Turk e 20l de sangue em


um tubo de ensaio, homogeneizar.
2. Colocar a lamnula sobre a cmara de Neubauer e
preencher um dos lados da cmara com a diluio.
3. Levar ao microscpio e contar os leuccitos de quatro
quadrados laterais maiores, como na figura abaixo.

Clculo

n de leuccitos/mm3 = n de leuccitos contados 50

Valores de referncia: 3.800 a 9.800/mm3

Hematcrito

O hematcrito um exame de diagnstico que serve para avaliar a percentagem dos glbulos
vermelhos ou hemcias no volume total de sangue, ajudando a identificar a anemia.

Materiais

Capilar
Sangue
Papel ou gaze
Bico de bunsen
Centrfuga

Mtodo

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1. Encher dois teros de um capilar com sangue com anticoagulante, limpar a extremidade
com papel ou gaze.
2. Fechar a extremidade do tubo na chama, protegendo o sangue com o dedo e rotacionando
lentamente o capilar para que ele feche por igual, sem formar deformaes na ponta.
3. Centrifugar por 5 minutos a 11.500 rpm.
4. Fazer a leitura no carto especial alinhando o incio da coluna de hemcias em zero e o
final do plasma em 100% e obtenha o resultado em porcentagem.

Valores de referncia: Homens: 40% a 50%


Mulheres: 35% a 45%
Crianas at 1 ano: 34% a 40%
Recm-nascidos: 50% a 60%

Hemoglobina

hemoglobina

uma

protena

presente

nos

eritrcitos

(hemcias),

constituindo

aproximadamente 35% de seu peso. um pigmento presente no sangue responsvel por


transportar o oxignio, levando-o dos pulmes aos tecidos de todo o corpo.

Materiais

Regente de cor
Padro
gua destilada
Sangue
Tubos
Pipetas
Espectrofotmetro

Mtodo

1. Identificar 3 tubos como branco, teste e padro. Adicionar no tubo padro 5ml do reagente
de cor e 20l do padro. No tubo teste colocar 5ml do reagente de cor e 20l do sangue
total.
2. Misturar e esperar 5 minutos.
3. Determinar as absorbncias em 540nm, acertando o zero com gua destilada. A cor
estvel por vrias horas.
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Clculos

Hemoglobina (g/dl) =

absorbncia do teste
10
absorbncia do padro

Fator de calibrao =

10
absorbncia do padro

Hemoglobina (g/dl) = fator de calibraoabsorbncia do teste


Valores de referncia: Homens: 12,5 17,5 g/dl
Mulheres: 11,5 15,5 g/dl

VCM

O volume globular mdio (VGM) ou volume corpuscular mdio (VCM) mede o tamanho das
hemcias. Um VCM elevado indica hemcias macrocticas, ou seja, hemcias grandes. VCM
reduzidos indicam hemcias microcticas, isto , de tamanho diminudo.

VCM =

Clculo
hematcrito
10
eritrcitos
Valores de referncia: Macrocitose = 98fl
Normocitose = 80 98fl
Microcitose = 80fl

HCM

O HCM (hemoglobina corpuscular mdia) ou HGM (hemoglobina globular mdia) o peso


da hemoglobina dentro das hemcias.Quando as hemcias tm poucas hemoglobinas, elas so
ditas hipocrmicas. Quando tm muitas so hipercrmicas.

Clculo

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HCM =

hemoglobina
10
eritrcito

Valores de referncia: Hipercromia = 32pg


Normocromia = 27-32pg
Hipocromia = 27pg
CHCM

O CHCM (concentrao de hemoglobina corpuscular mdia) ou CHGM (concentrao de


hemoglobina globular mdia) avalia a concentrao de hemoglobina dentro da hemcia.

Clculo

CHCM =

hemoglobina
100
hematcrito

Valores de referncia: Normocromia = 31 35%


Hipocromia = 31%

Contagem de reticulcitos

O reticulcito uma clula jovem que representa uma fase intermediria entre os eritroblastos
da medula ssea e os eritrcitos maduros, anucleados e j totalmente hemoglobinizados.

Materiais

Sangue
Corante azul cresil brilhante
Lminas

Mtodos

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Fazer um esfregao com uma gota de azul cresil brilhante e uma gota de sangue total. Incubar por
15 minutos a 37C.

Clculo

Reticulcitos =


n de hemcias contadas

Valores de referncia: 0,5 a 1,5%


Concluso

Podemos concluir que alm da importncia da coleta do material biolgico a ser analisado,
de suma importncia observar bem o exame a qual o paciente foi solicitado, para que este seja
armazenado e analisado de forma correta. Devemos sempre colocar a identificao nos tubos em
primeiro lugar, alm de conferir o laudo do exame com o cadastro do paciente, pra assegurar que
no haja erros na emisso de resultados.

Uroanlise
A urina composta por 96% de gua e 4% por substncias provenientes da dieta e do
metabolismo. Constituda por uria e outras substncias qumicas orgnicas e inorgnicas
dissolvidas em gua que podem sofrer alterao devido a alimentao, atividade fsica,
metabolismo orgnico e funo endcrina.
Para a realizao do exame, a urina considerada padro ou mais adequada para anlise
a primeira amostra da manh. Esta amostra deve ser colhida imediatamente aps acordar, pela
manh, em jejum e antes de realizar qualquer atividade. recomendado, ainda que esta amostra
seja colhida aps oito horas de repouso e, pelo menos quatro horas aps a ltima mico. A
primeira amostra da manh considerada como amostra padro para a realizao do exame de
urina porque ela mais concentrada que as outras amostras e porque nesta amostra se verifica
maior crescimento das bactrias eventualmente presentes na bexiga, assim o resultado da analise
realizada reflete melhor as condies do paciente.
Uma outra amostra a segunda amostra da manh, sendo obtida com mais facilidade no
laboratrio que a primeira amostra da manh. Deve ser colhida de duas a quatro horas aps a
primeira mico do dia, podendo sofrer alteraes devido a ingesto de alimentos e lquidos no
desjejum. Com o objetivo de aumentar a concentrao de eventuais bactrias presentes na bexiga
pode-se recomendar a restrio de ingesto de lquido aps as 2 horas.

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A amostra randmica colhida a qualquer momento do dia sendo recomendvel que o


intervalo de tempo entre a ltima mico e a coleta da amostra seja de pelo menos duas horas. A
composio pode , certamente, influenciada pelos alimentos e lquidos ingeridos durante o dia. A
utilizao da amostra randmica inevitvel em situao de emergncia e urgncia, frequentes
em ambiente hospitalar. Entretanto, a utilizao da amostra randmica narealizao do exame de
urina deve considerar a elevada possibilidade de resultados falsos negativos assim como
resultados falsos positivos dentre os constituintes avaliados na realizao do exame.
Em crianas, a obteno da amostra de urina realizada atravs de coletor auto aderente,
sendo substitudos aps 30 minutos mesmo que a criana no tenha urinado para evitar
contaminao.
O armazenamento das amostras servem para manter a integridade dos elementos e para a
estabilidade qumica, sendo que o tempo de coleta e transporte no deve ultrapassar 1 hora,
sendo conservada em refrigerador caso no seja possvel o transporte no tempo estipulado.
Dessa forma, pode ser traada a importncia do exame de urina para diagnsticos
posteriores, bem como tratamentos de possveis infeces ou outro tipo de patologia.

Objetivo

O objetivo deste relatrio demonstrar, por meio de materiais e mtodos a importncia do


exame de urina, de forma que sejam exposto seus componentes e possveis resultados. O
paciente deve ser orientado na hora da coleta a realizar a assepsia do local, caso no seja
necessrio este dever ser relatado no exame, para que o mdico saiba o mtodo utilizado para a
coleta.

Material
Amostra biolgica
Fita reagente
Estante
Centrfuga
Lminas
Lamnulas
Refratmetro
Tubos
Microscpio
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Mtodo

1. Colocar a urina em um tubo para a medio de volume, e em outro tudo separar a


quantidade que ser centrifugada.
2. Colocar a fita reagente e esperar 2 minutos para a leitura, comparar os resultados
na embalagem das fitas. Colocar uma gota da urina no refratmetro para que seja
medida a densidade da urina. Levar o tubo para a centrifuga por 5 minutos,
desprezar o sobrenadante e utilizar o sedimento do final do tudo.
3. Colocar em uma lmina o sedimento, cobrir com a lamnula e analisar no
microscpio na objetiva de 40x.

A anlise divida em trs partes, sendo:

1. - Exame Fsico
Aspecto
A urina pode ser considerada lmpida, ligeiramente turva e turva. A urina pode apresentar
turvao quando h presena de grandes quantidades de hemcias, clulas epiteliais,
cristais e bactrias, alm da presena de matria gordurosa.
Odor
Em situaes normais, a urina apresenta odor caracterstico, ligeiramente aromtico,
alterando aps algum tempo de repouso. Quanto a urina entra em estado de
decomposio, seu odor ptrido ou amoniacal, devido fermentao bacteriana.
Cor
A urina, em situaes normais, apresenta cor amarela, variando do tom claro e escuro. A
urina pode apresentar colorao vermelha ou castanha em casos de hematria, alm de
apresentar variaes de colorao devido a certos alimentos ingeridos, como por exemplo
a beterraba. Em casos de ingesto de medicamentos, a urina pode apresentar colorao
bastante variada como vermelha, verde, laranja, etc.
Densidade
medida a densidade da urina com a finalidade de verificar a capacidade de concentrao
e diluio do rim, bem como o estado de hidratao do paciente, diabetes inspido e
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inadequao da amostra por baixa concentrao. A densidade da urina normal varia de


1016 a 1020, no volume de 24 horas.

2. - Exame Qumico
pH
Embora um individuo sadio produza a primeira urina da manh com pH ligeiramente cido,
entre 5,0 e 6,0, o pH normal das outras amostras do dia pode varias de 4,5 a 8,0. A urina
noturna tem pH mais baixo por causa da acidose respiratria fisiolgica do sono.
O pH urinrio importante na determinao de acidose respiratria ou metablica;
alcalose respiratria ou metablica, anormalidades na secreo e reabsoro de cidos e
bases pelos tbulos renais; precipitao de cristais e formao de clculos;
acompanhamento de tratamento das infeces do trato urinrio e determinao de
amostras insatisfatrias.
Protenas
A determinao de protenas a mais indicativa de doena renal, pois a presena de
proteinria pode ser indicativo de doenas renais incipientes. A urina em estado normal
possui pequenas quantidades de protena, em mdia menos de 10 mg/dL ou 150 mg por
24 horas, e a principal protena encontrada a albumina, sendo observada atravs de fitas
reativas. O resultado qualitativo normalmente representado por negativo, trao e positivo.
O resultado positivo acompanhado pelo nmero de cruzes, dado pelo grau de
intensidade da reao.
Glicose
Anlise bioqumica mais utilizada na deteco e controle da diabetes mellitus Alm disso, a
anlise utilizada para determinar deficincia da reabsoro tubular, leses no sistema
nervoso central, distrbios da tireide, latncia de diabetes durante a gravidez. Em adultos,
a excreo de glicose na urina de em mdia 130 mg durante 24 horas, sendo observada
atravs de tira reativa contendo glicose oxidase.
Bilirrubina
A bilirrubina um composto amarelo muito pigmentado, sendo produto da degradao da
hemoglobina. Sua presena na urina pode ser a primeira indicao de hepatopatias,
sendo, muitas vezes,detectada bem antes do desenvolvimento da ictercia porque o limiar
renal de eliminao de bilirrubina menor que 2 mg/dL, enquanto que os indivduos com
ictercia apresentam concentrao de bilirrubina direta no sangue maior que 2,5 mg/dL.
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Urobilinognio
Tal como a bilirrubina, o urobilinognio um pigmento biliar resultante da degradao da
hemoglobina e derivado da bilirrubina pela ao da flora bacteriana intestina.
Normalmente, o adulto excreta menos de 4 mg por dia, visto que uma parte do
urobilinognio reabsorvido, retornando ao fgado. Valores aumentados podem indicar
cirrose heptica, ictercias parenquimatosas e constipao crnica.
Sangue
O sangue pode ser encontrado na urina em forma de hemcias ntegras (hematria), ou
presente como hemoglobina. Em condies normais, a hemoglobina destruda e
metabolizada no retculo endotelial e quando no ocorre uma metabolizao normal ocorre
a ultrapassagem do limiar renal para hemoglobina (100 a 300 mg/dL), no sendo
reabsorvida e sofrendo eliminao renal.
A hematria pode ocorrer em casos de clculos renais, glomerulonefrite, pielonefrite,
tumores, trauma e exposio a produtos ou drogas txicas.
Cetonas
Geralmente, quantidades mensurveis de cetonas no so vistas na urina, pois toda a
gordura metabolizada completamente degradada em dixido de carbono e gua. Quando
o uso de carboidratos fica comprometido e o estoque de gordura precisa ser metabolizado
para o suprimento de energia, pode-se detectar cetonas na urina.
Nitrito
A determinao de nitrito na urina til para diagnostico das infeces da bexiga, pois
muitas vezes os casos so assintomticos ou os sintomas so inespecficos. Quando h
presena de nitritos, ocasionalmente constatado a presena de bactrias, pois essas so
responsveis pela transformao do nitrato em nitrito.

3. - Exame Microscpico
Leuccitos
Os leuccitos so os glbulos brancos que permanecem com suas caractersticas
morfolgicas intactas. Quando h presena de leuccitos na urina isso pode ser o principal
indicativo de inflamao nas vias urinrias.

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Hemcias
A presena de hemcias na urina pode ser um indicador de infeces e traumas.
Clulas epiteliais
So encontradas em urinas normais, em nmero varivel, principalmente em urina de
mulher e mais intensamente durante a gestao.
Cilindros
Os cilindros so clulas agrupadas e possuem suas caractersticas especificas
dependendo da sua formao. Os tipos de cilindros so:
- Cilindros hialinos no indicam doena, mas pode ser um sinal de desidratao.
- Cilindros bacterianos
- Cilindros hemticos sangue.
- Cilindros leucocitrios indicam inflamao dos rins.
- Cilindros de clulas epiteliais indicam leso dos tbulos.
- Cilindros granulares
- Cilindros creos inflamao sria dos rins
- Cilindros adiposos indicam proteinria.
- Cilindros largos

Cristais
A presena de cristais na urina pode depender do pH, e em urinas cisas, so encontrados
os uratos amorfos, oxalatos de clcio e cido rico. Em urinas alcalinas, encontramos
fosfatos amorfos, fosfato triplo ou amonaco-magnesiano, carbonato de clcio e fosfato de
clcio. Os cristais de maior importncia so:
- Cristais epiteliais so as prprias clulas do trato urinrio que descamam.
- Cristais de cido rico
- Cristais de cestinha
- Cristais de bilirrubina
- Cristais de colesterol
- Cristais de magnsio amnio-fosfato.

Resultado

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Os resultados esperados sero avaliados de acordo com o valor de referncia, bem como
a anlise da urina por meio fsico, qumico e microscpico para que seja estipulado o estado em
relao aos componentes da urina, levando em considerao as substncias consideradas
normais, e com alterao.
Concluso

O exame de urina , sem duvida, um meio preciso para avaliao da funo renal,
disfunes metablicas, bioqumicas e microbiologias, alm de possibilitar a avaliao de outras
patologias. Para isso, de extrema importncia o uso de tcnicas sensveis e especificas para o
bom desenvolvimento da anlise. Com este estgio aprendemos a importncia de orientar o
paciente a realizar a coleta de forma correta, alm de tomar as medidas preventivas para
assegurar a integridade da amostra, fornecendo segurana e confiabilidade de resultados.

Parasitologia
O exame parasitolgico das fezes utilizado para diagnosticar os parasitos intestinais, por
meio da pesquisa das diferentes formas parasitrias que so eliminadas nas excrees fecais,
alm do estudo das funes digestivas, dosagem da gordura fecal, pesquisa de sangue oculto,
entre outras. A coleta deve ser realizada em quantidade aproximada de 30g em recipiente limpo e
seco, de preferncia de boca larga, ou ainda, na proporo de uma parte de fezes para trs do
conservador, quando este j est acondicionado no recipiente para a conservao do material,
evitando a contaminao por urina. Em crianas, no utilizar as fezes da fralda quando estiverem
diarricas ou lquidas, solicitar coletores infantis disponveis. No caso de fezes consistentes,
encaminhar condicionalmente para o responsvel do setor verificar se para a analise, a
quantidade suficiente. Encaminhar ao laboratrio em at 3 horas se em temperatura ambiente
ou em at 6 horas se refrigerada.
O exame coproparasitolgico consiste na anlise das fezes para que seja observada a
presena de protozorios ou helmintos. Os protozorios so os cistos unicelulares, enquanto os
helmintos so os ovos e as larvas. Os mais importantes no mbito laboratorial so:
- Protozorios
Giardia lamblia
A Giardia lamblia um parasita monoxnico, de ciclo biolgico direto. A facilidade de
manter esse ciclo in vitrocontribui para o desenvolvimento de vrias pesquisas. As formas
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infectantes para homens e animais so os cistos, sendo estes, portanto, os responsveis


pela disseminao da doena. A transmisso ocorre por via fecal-oral: de forma indireta,
por meio da ingesto de gua e alimentos contaminados, ou de forma direta, de pessoa a
pessoa por meio de mos contaminadas ou entre homossexuais masculinos. A
transmisso direta tambm pode ocorrer a partir do contato direto com animais infectados.
A ingesto de 10 a 25 cistos suficiente para iniciar a infeco num hospedeiro humano.
Ao ser ingerido, o cisto alcana o estmago, onde o meio cido inicia o processo de
desencistamento. Esse processo completa-se no intestino delgado, principalmente
duodeno e jejuno, onde ocorre o rompimento dos cistos e a liberao dos trofozotos. Cada
cisto maduro com quatro ncleos libera dois trofozotos binucleados. Por reproduo
assexuada, num processo de diviso binria longitudinal, os trofozotos multiplicam-se e
colonizam o intestino. Eles se mantm aderidos mucosa intestinal por meio do disco
suctorial. O ciclo se completa pelo encistamento, processo no qual o trofozoto se retrai,
condensa e secreta uma membrana resistente, composta inclusive de quitina. J no
interior dos cistos formados ocorre nucleotomia, o que origina cistos maduros
tetranucleados que sero eliminados para o meio exterior. O processo de encistamento
ocorre na poro final do leo e principalmente no ceco do hospedeiro, mas ainda no est
totalmente esclarecido. Supe-se a influncia de fatores dentro ou fora do parasita, dentre
os quais se destacam o PH intestinal, e estmulo de sais biliares e o destacamento do
trofozoto da mucosa, sendo este ltimo o fator de maior destaque, supostamente
provocado pela resposta imune local. Os cistos so excretados junto com as fezes do
hospedeiro, mas no so eliminados de forma contnua. Eles so definidos como a forma
infectante, mas no se sabe ainda se necessitam de um perodo de maturao, ou se j
so infectantes logo aps serem excretados. Se mantidos em condies favorveis de
temperatura e umidade, os cistos podem se manter viveis por at dois meses no meio
ambiente. O elevado nmero de cistos eliminados pelas pessoas parasitadas, a alta
resistncia do cisto aos fatores ambientais e tambm a transmisso direta por contato com
animais contaminados torna ainda mais preocupante a disseminao desta doena.
A forma sintomtica aguda da infeco por girdia dura poucos dias e apresenta diarria
(89%) aquosa e explosiva de odor ftido, indisposio (84%), gases (74%), distenso,
dores abdominais (70%), nusea (68%), anorexia (64%) e perda de peso (64%). A
presena de muco e sangue nas fezes raramente ocorre. J a forma sintomtica crnica
da giardase pode persistir por vrios anos com a presena de episdios diarricos
contnuos, intermitentes ou espordicos. Alm disso, pode apresentar esteatorria
(aumento de gordura nas fezes), perda de peso mais significativa e m absoro intestinal.

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As principais complicaes da giardase crnica esto relacionadas m absoro de


gorduras e nutrientes como, por exemplo, algumas vitaminas e o ferro.
Entamoeba histolytica
A amebase uma infeco sintomtica ou assintomtica causada pela Entamoeba
histolytica. A E. histolyticase locomove e obtm alimentos com o auxilio de pseudpodes
do tipo lobpodes, vive na luz do intestino grosso do hospedeiro, mas pode originar a
forma invasiva da doena, ao penetrar a submucosa e alcanar rgos como fgado,
pulmes, crebro, e possui duas formas evolutivas: trofozoito e cisto. O trofozoto
corresponde forma vegetativa que habita a luz do intestino grosso e pode,
ocasionalmente, provocar leses na mucosa intestinal, no fgado, no pulmo, na pele e at
no crebro. O trofozoto uninucleado e mede entre 15 e 60 micrmetros e se locomove
pela emisso de pseudpodes. Seu citoplasma pode ser diferenciado em ectoplasma - o
qual hialino- e endoplasma-onde se encontram os ncleos e os vacolos digestivos. No
apresentam mitocndrias, reticulo endoplasmtico e aparelho de Golgi. O cisto a forma
de resistncia, geralmente esfrico ou oval, variando de 8 a 20 micrmetros de dimetro.
Consiste em um citoplasma que apresenta de um a quatro ncleos, pequenos vacolos e
incluses citoplasmticas envolvidas por uma parede csticas.
O ciclo de vida de Entamoeba histolytica monoxnico e relativamente simples. No ciclo
encontram-se quatro estgios: cisto, metacisto, trofozoto e pr-cisto. O inicio do ciclo
ocorre a partir da ingesto dos cistos maduros junto de gua e alimentos contaminados. O
cisto passa, ento, pelo estmago e pelo intestino delgado, resistindo ao do suco
gstrico e das secrees intestinais. De fato, estas substncias contribuem para a
formao de uma fenda na parede do cisto, a qual permite o incio do processo de
desencistamento que ocorre principalmente na poro distal do leo e ceco. A partir deste
processo liberada uma forma tetranucleada (metacisto) que por diviso binria da origem
a oito trofozotos uninucleados. Esses trofozotos multiplicam-se por diviso binria e
colonizam o intestino grosso, principalmente na regio do ceco. Em geral, os trofozotos
vivem como um comensal, aderidos na mucosa intestinal alimentando-se de bactrias e
detritos. Dando continuidade ao ciclo, muitos desses trofozotos diminuem de tamanho e
se arredondam formando o pr-cisto, etapa que marca o incio do processo de
encistamento. O pr-cisto secreta ao seu redor uma membrana glicoprotica, denominada
parede cstica, formando assim um cisto uninucleado. Esses cistos tornam-se
tetranucleados e podem ser excretados juntamente com as fezes do hospedeiro,
possibilitando a infeco de outro ser humano.

23

Moscas, baratas e outros artrpodes atuam como vetores mecnicos e contribuem para a
distribuio dos cistos de E. histolytica, principalmente em reas onde predominam
populaes de nvel scio-econmico mais baixo, bem como precrias condies de
saneamento bsico.
A amebase intestinal apresenta duas formas clnicas principais: colite no-disentrica e
colite disentrica (disenteria amebiana). A colite no-disentrica a forma clnica mais
comum entre os indivduos sintomticos infectados por Entamoeba histolytica. Essa forma
clnica caracterizada por evacuaes diarricas ou no, com duas a quatro dejees
dirias. O indivduo pode eliminar fezes pastosas ou moles e, eventualmente, com sangue
ou muco. Ao longo da infeco pode ocorrer alternao entre funcionamento intestinal
normal e quadros de diarria. Esto presentes na maioria dos casos, ainda, sintomas
intestinais como flatulncia, desconforto abdominal e clicas. Pode ocorrer, mais
raramente, febre. A colite disentrica uma forma clnica menos comum, tendo sido
observada em cerca de 10% dos indivduos com amebase intestinal. Essa forma clnica
apresenta evoluo aguda e caracterizada pela presena de dores abdominais, clicas
intestinais intensas, diarria lquida com evacuaes mucossanguinolentas e febre
moderada.
Cryptosporidium sp
O protozorio do gnero Cryptosporidium apresenta alta capacidade de veiculao hdrica
e, por isso, causa grande preocupao s empresas de saneamento e indstria da gua.
Apesar de tambm ocorrer em pacientes imunocompetentes, a criptosporidiose humana
considerada uma infeco oportunista devido sua alta prevalncia em indivduos
imunodeprimidos, como os portadores de HIV/AIDS. Nesses pacientes, a diarreia
provocada pela doena grave e recorrente.
Os esporozotos e merozotos pertencentes ao gnero Cryptosporidium possuem um
complexo apical (visvel apenas em microscpio eletrnico) constitudo por estruturas
como roptrias, micronemas, grnulos eltron-densos, microtbulos sub-peculiarese anis
apicais. Por isso, so classificados no filo Apicomplexa. Os oocistos possuem um formato
que varia de esfrico a ovoide, medindo de 3 a 8,5 m de dimetro de acordo com a
espcie. Em sua maioria, apresentam uma parede cstica dupla e espessa, mas 20% deles
tm parede fina que se rompe ainda dentro do hospedeiro. Internamente a eles, h quatro
esporozotos que so libertados ou nas fezes, ou no tubo digestivo do hospedeiro aps
a dissoluo da sutura presente em sua parede. O esquizonte aparece no intestino j sem
complexo apical. esfrico, apresenta ncleo volumoso, nuclolo evidente e mede de 4 a
6 m de dimetro.
24

A transmisso ocorre principalmente pela ingesto de oocistos, que so as formas


evolutivas infectantes, esporulados (via fecal-oral). As principais fontes so animais ou
humanos que estejam eliminando oocistos. Os oocistos podem ser veiculados pelos
alimentos, pela gua, pelo ar, por insetos, no vesturio e tambm pelo contato ntimo entre
pessoas. Criao de gados e ovelhas tem sido relacionada infeco humana. Foi
observado que durante um surto de febre aftosa em 2001 no Reino Unido, em que um
grande nmero de bovinos foram sacrificados, o nmero de casos de criptosporidiose
reduziu de forma significativa. A autoinfeco pode ocorrer se os oocistos libertarem seus
quatro esporozotos no intestino delgado do hospedeiro.
O ciclo composto de (1) merogonia ou esquizogonia (reproduo assexuada), (2)
gametognese (reproduo sexuada com produo de gametas), (3) formao do zigoto
(fertilizao) e (4) esporogonia (formao do oocisto e liberao de esporozotos).
A infeco humana faz-se por via fecal-oral, quando os oocistos so ingeridos. No
estmago h a dissoluo de sua membrana e a liberao de quatro esporozotos. O
protozorio capaz de encistar tambm fora do trato gastrointestinal, como no trato
respiratrio, na conjuntiva do olho e no sistema reprodutor.
Os esporozotos possuem um complexo apical (roptrias, micronemas, anel polar, etc.) que
importante para sua aderncia s clulas epiteliais do intestino.
O Cryptosporidium se aloja nas clulas epiteliais atravs de um vacolo parasitforo
extracitoplasmtico. Este vacolo formado por uma expanso da membrana celular e
dos microvilos, que acabam por envolver completamente o parasito, assim o parasito fica
coberto por um complexo de vrias membranas de ambos os organismos.
Aps o estabelecimento dos esporozotos nas clulas epiteliais, ocorre a diferenciao em
trofozotos unicelulares. Ocorre ento a merogonia ou esquizogonia, que um processo de
muitas divises nucleares que produziro merozotos. Este processo forma 8 (oito)
merozotos alongados (tipo I) que so liberados no intestino e infectam outras clulas. Esta
segunda gerao capaz de formar quatro merozotos cada (tipo II). Os merozotos tipo II
so capazes de repetir o ciclo assexuado ou produzir gametcitos (gametogonia). A
gametogonia produz um macrogametcito e cerca de 16 microgametcitos. A unio destes
formar o zigoto que progredir para oocisto.
Normalmente estes oocistos possuem parede espessa e contm quatro esporozotos.
Estes oocistos so liberados no meio ambiente atravs das fezes, onde podem sobreviver
por meses. Porm alguns oocistos possuem parede delgada, que se rompe facilmente e
acabam por liberar os esporozotos dentro do hospedeiro, este processo chamado de
autoinfeco.

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Os principais sinais e sintomas da criptosporidiose so: diarria aquosa, fezes mucosas,


desidratao, perda de peso, anorexia, dor abdominal, febre, nuseas e vmitos. No
incomum acontecer tambm dores nas articulaes, mialgias, vertigens e at a sndrome
de Reiter (conhecida como artrite reativa) em crianas.
- Helmintos
Ascaris lumbricoides
Ascaridase, ascaridiose ou ascarase, popularmente conhecida como lombriga, uma
doena infecto-parasitria causada pelo Ascaris lumbricoides, nematide que parasita
principalmente o trato gastrointestinal humano, causando diversos sintomas de acordo
com o percurso desenvolvido pelas larvas durante sua migrao no organismo do
hospedeiro, at alcanar sua maturidade reprodutiva e chegar ao seu habitat natural. Sua
frequncia na populao varia em funo das condies climticas, ambientais, e do grau
de

desenvolvimento

socioeconmico,

tendo

alta

prevalncia

em

pases

em

desenvolvimento e, consequentemente, grande impacto na sade pblica e no meio social


e sanitrio desses pases. Trata-se de uma das principais helmintases, causadora na
maioria dos casos de uma infeco leve e benigna, mas que pode ocasionar, entretanto,
graves complicaes para o hospedeiro, como interferncia no seu estado nutricional,
desenvolvimento fsico e mental, sobretudo na populao infantil.
Os ovos eliminados pelas fmeas de Ascaris lumbricoides podem ser frteis ou infrteis.
Caso a fmea tenha sido fecundada pelo macho, os espermatozides acumulam-se nos
teros ou ovidutos e fertilizam os ovos. Os ovos frteis medem 60x45 micrmetros e tm
forma esfrica ou oval, contendo a clula germinativa no segmentada, alm de
apresentar alta resistncia quando liberados no meio ambiente. So sensveis a
temperaturas elevadas, ambiente seco e anaerobiose: sobrevivem por at dois anos em
temperaturas de 5 a 10C, mas podem morrer em poucos minutos em temperaturas acima
de 50C. Podem tambm sobreviver por at trs meses na ausncia de oxignio e por at
seis anos em solos midos e sombreados. Se no fecundadas as fmeas eliminam ovos
infrteis, os quais no podem evoluir posteriormente. Esses so mais alongados, com 80 a
90 micrmetros de comprimento, citoplasma granuloso e casca mais delgada. Ovos
infrteis aparecem nas fezes de indivduos com infeces unissexuais, ou seja, infectados
somente por fmeas, ou quando apresentam um grande nmero de fmeas jovens e no
fecundadas.
Os ovos de Ascaris lumbricoides so eliminados juntamente com as fezes do indivduo
infectado. Ao atingir um ambiente com temperatura entre 15 a 35C e umidade mnima de
26

70%, em duas a oito semanas os ovos frteis originam larvas que sofrem mudas dentro da
casca. Esse perodo de embrionamento dos ovos ocorre no meio exterior e requer a
presena de oxignio. Forma-se inicialmente uma primeira larva, L1, dentro do ovo. Essa
apresenta um esfago com duas dilataes, sendo do tipo rabditide. Uma semana aps,
a larva L1 sofre muda, transformando-se em L2 e em seguida outra muda, transformandose em L3, a qual apresenta um esfago retilneo ou filariide. Essa larva L3, ou de terceiro
estgio, a forma infectante e pode permanecer vivel por vrios meses. Os ovos
contendo a forma infectante, ao serem ingeridos, tm sua casca amolecida no estmago e
sofrem ao dos sulcos digestivos no duodeno, onde liberam suas larvas. Essa ecloso
deve-se a fatores como temperatura, pH, presena de agentes redutores e concentrao
de CO2 no intestino do prprio hospedeiro. Ao serem liberadas, as larvas atravessam a
parede intestina, ao nvel do ceco, e por meio dos vasos linfticos ou veias do sistema
porta, alcanam o fgado em cerca de quatro a cinco dias. A partir da, atingem o corao
direito e os pulmes, nos quais realizam o ciclo pulmonar, cerca de quatro a cinco dias
aps a ingesto dos ovos. Nos pulmes, aps cerca de oito ou nove dias, as larvas L3
continuam sua evoluo e sofrem uma terceira muda, originando larvas L4, as quais
atravessam as paredes dos capilares alveolares e atingem os alvolos. J nos alvolos,
ocorre uma quarta muda, originado L5. Aps duas semanas, as larvas sobem pelos
bronquolos, brnquios, traquia e laringe, quando so expelidas ou deglutidas com as
secrees brnquicas at atingir o estmago e o intestino. A ltima muda ocorre no
intestino, jejuno geralmente, e origina larvas nas formas juvenis, as quais crescem e se
desenvolvem sexualmente em aproximadamente dois meses.
O Ascaris lumbricoides, na sua forma adulta, alimenta-se de produtos semi-digeridos no
intestino do hospedeiro, j que apresentam as enzimas necessrias para digesto de
protenas, carboidratos e lipdeos. Os scaris adultos so aerbios facultativos, porm,
normalmente no meio em que se encontram, seu metabolismo quase inteiramente
anaerbio. Eles realizam movimentos constantes para se manterem aderidos luz do
intestino, e tm uma longevidade mdia de dois anos. O ciclo biolgico do Ascaris
lumbricoides do tipo monoxnico, ou seja, possui um nico hospedeiro. A nica forma
infectante desse parasita o ovo embrionado contendo larvas de terceiro estgio, e a via
de penetrao no ciclo a oral.
A fase de invaso larvria geralmente assintomtica, mas quando h elevadas cargas
larvrias pode causar hepatomegalia e mais raramente ictercia. Durante a passagem das
larvas pelos pulmes ocorre a eosinofilia pulmonar aguda (Sndrome de Loeffler),
caracterizada por um quadro respiratrio de intensidade varivel no qual h presena de
tosse, dispnia, sibilos e dor retroesternal. Vermes adultos de Ascaris lumbricoides em
27

grande nmero podem ocluir o intestino a partir da compactao e formao de um "bolo


de scaris". Podem, ainda, causar volvos (retoro do intestino) e intussuscepo
intestinal (invaginao de uma poro do intestino para dentro de outra).
Taenia solium e Taenia saginata
Tenases so infeces causadas pelos vermes adultos de platelmintos cestoides do
gnero Taenia.

Os parasitas desse gnero so heteroxnicos, por possurem um

hospedeiro intermedirio e um definitivo. A Taenia saginata e a Taenia solium podem


habitar o intestino delgado do homem, tornando este o seu nico hospedeiro definitivo. A
Taenia solium, na sua forma larvar ou cisticerco, encontrada em rgos ou tecidos de
sunos, seus hospedeiros intermedirios. J a Taenia saginata tem como hospedeiros
intermedirios os bovinos. Os quadros mais observados no caso de infeces sintomticas
incluem manifestaes generalizadas do aparelho digestrio, podendo originar deficincias
nutricionais. Quando o homem ingere larvas de T. solium ocorre o desenvolvimento de
outra doena, denominada cisticercose humana.
A transmisso da tenase ocorre por meio da ingesto de carne crua ou malcozida, de
origem suna ou bovina, contaminada com os cisticercos de cada espcie de tnia.
Aps serem liberadas por um indivduo infectado para o meio exterior, as proglotes
grvidas cheias de ovos, se rompem por contrao da sua musculatura, ou decomposio
de sua estrutura pela dessecao, e liberam milhares de ovos no solo. Se mantidos em
condies adequadas de umidade e protegidos da luz solar, esses ovos podem se manter
infectantes por vrios meses.
O hospedeiro intermedirio, no caso da T. solium o porco, e no caso da T. saginata o
boi, ingere os ovos, os quais atingem o estmago, sofrem a ao da pepsina e passam a
ter sua casca amolecida pela ao conjunta da bile, do colesterol e da tripsina ao
chegarem ao intestino. O embrio hexacanto ento liberado, penetra na mucosa
intestinal com auxlio dos acleos, permanecendo a por aproximadamente quatro dias.
Aps esse perodo, penetram nas vnulas, atingindo as veias e os vasos linfticos do
mesentrio. Atingem a circulao e so transportados a muitos rgos e tecidos, at o
local de implantao, podendo se alojar em vrios locais, principalmente no crebro e nos
msculos de maior movimentao, como masseter, lngua e corao. O embrio pode
crescer at cerca de um cm e manter alguma quantidade de lquido em seu interior,
originando uma estrutura denominada cisticerco, no prazo de 10 ou 12 semanas. No caso
da T. solium, o cisticerco denominado Cysticercus cellulosae e no caso da T. saginata,
Cysticercus bovis, que pode sobreviver por at dois anos.

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Ao ingerir carne crua ou malcozida de porco ou boi contaminada, o homem adquire a


infeco. O cisticerco ingerido sofre ao do suco gstrico e atinge o duodeno. Na mucosa
do intestino delgado, aps evaginao, o cisticerco fixa-se por meio do esclex e a partir
da transforma-se numa tnia adulta, que pode atingir vrios metros de comprimento.
Aps trs meses do incio da infeco, as proglotes grvidas comeam a ser eliminadas.
As proglotes grvidas de T. solium so desprovidas de movimentos prprios, em virtude da
musculatura menos desenvolvida, sendo eliminadas passivamente com as fezes do
hospedeiro. A T. saginata apresenta uma capacidade locomotora maior, sendo possvel a
eliminao ativa de suas proglotes pelo nus e raramente pela boca do hospedeiro. Vrias
proglotes grvidas se desprendem do estrbilo diariamente. T. solium libera em uma nica
vez de trs a seis proglotes, enquanto a T. saginata libera de oito a nove.
Ao ingerir os ovos ou anis de T. solium, o homem assume o papel de hospedeiro
intermedirio e desenvolve a cisticercose.

Nesse caso, o embrio penetra a mucosa

duodenal, atinge a circulao passa a localizar-se em rgos como crebro, olhos e tecido
celular subcutneo.
A tenase geralmente assintomtica. Como no h invaso das mucosas, a maioria das
manifestaes clnicas ocorrem devido a presena do verme no intestino associada
competio por nutrientes entre o parasito e o hospedeiro. Alm disso, a absoro dos
excretos do verme podem causar alguns sintomas como cefalia e irritabilidade. Sendo
assim, o sintoma mais comum a dor abdominal inespecfica, mas pode ocorrer tambm
nuseas, adinamia, perda de peso, alteraes no apetite, obstipao intestinal ou diarria
e prurido anal. Na tenase por T. saginata pode ocorrer sintomas abdominais agudos
devido a migrao das proglotes seguida por obstruo do apndice ou vias biliares e
pancreticas.
Schistosoma mansoni
O S. mansoni apresenta vrias fases no seu ciclo evolutivo, alm de dimorfismo sexual, e
cada uma possui suas prprias caractersticas:
Macho mede aproximadamente 1cm de comprimento; tem cor esbranquiada, com
tegumento recoberto de minsculas projees, as tubrculos; em sua poro anterior
apresenta as ventosas oral e ventral (acetbulo); na poro posterior encontrado o canal
ginecforo; apresenta ainda: esfago bifurcado ao nvel do acetbulo, ceco terminando na
extremidade posterior e sete a nove massas testiculares que se abrem no canal
ginecforo.
Fmea mede cerca de 1,5 cm de comprimento; apresenta cor mais escura, devido ao
ceco com sangue semidigerido, e tegumento liso; a poro anterior semelhante do
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macho; a posterior preenchida pelas glndulas vitelognicas e ceco; apresenta ainda:


vulva, tero (com um ou dois ovos) e ovrio.
Ovo mede por volta de 150m de comprimento por 60 de largura, possui formato oval e
um espculo voltado para trs; o ovo maduro usualmente encontrado nas fezes possui um
miracdio formado, visvel por causa da transparncia da casca.
Miracdio
Os mecanismos de transmisso so: autoinfeco externa ou direta (principal responsvel
pela cronicidade da doena), heteroinfeco ou primoinfeco, infeco indireta,
retroinfeco e autoinfeco indireta (o meio mais raro).
O hbitat do verme na fase adulta o intestino grosso e suas mediaes, vivem aderidos
mucosa ou livres na luz intestinal e alimentam-se do contedo intestinal. Eventualmente
so encontrados no apndice cecal.
As fmeas fecundadas produzem cerca de 11.000 (onze mil) ovos, de modo que seu tero
ocupa toda a regio entre o esfago e o incio da cauda. Parece muito bem fundada a ideia
de que os machos morrem aps a primeira cpula e so eliminados nas fezes. As fmeas
fecundadas se libertam do ceco e migram para a regio retal e anal. Elas atravessam o
nus do hospedeiro e depositam seus ovos na pele da regio perianal, onde causam
intenso prurido. Os ovos so liberados com a forma embrionria do helminto. Aps a
oviposio o ciclo de vida do verme chega ao fim e ele em alguns momentos este estar
morto. A durao mdia da vida desses vermes de 40 dias. A forma embrionria
conhecida como sendo o primeiro estgio desse verme. No interior do ovo (em condies
de anaerobiose) ele pode se desenvolver at o segundo estgio, conhecido como
giriniforme. Os terceiros e quarto estgio so encontrados dentro dos ovos na regio
perianal (em condies de aerobiose). O quinto estgio conhecido como larva rabditoide
e a forma infectante para o homem. Na regio perianal a maturao do ovo (at o quinto
estgio) acontece em mdia em quatro horas. Eles so muito sensveis a desseco,
resistindo em mdia 16 horas em regies secas. A protena presente na casca dos ovos
extremamente pegajosa e causa intenso prurido na pele, o que leva ao hospedeiro coar a
regio. Isto vai provocar a disseminao dos ovos para o prprio hospedeiro (autoinfeco)
ou para outras pessoas (heteroinfeco), atravs das mos contaminadas. Os ovos
aderidos na pele e nas roupas tambm se disseminam pelo ambiente, provocando
infeco de outras pessoas, mesmo distncia. Os ovos podem, ainda, ficar aderidos
roupa de cama e serem disseminados pelo ar quando este material for manejado. Ao
serem ingeridas, as larvas sofrem ao do suco gstrico e duodenal e eclodem no intestino
delgado do hospedeiro, onde liberam pequenas larvas, que vo evoluir para vermes

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adultos e migrar lentamente para o intestino grosso. No ceco os vermes reiniciam seu ciclo
biolgico.
O sintoma mais frequentemente encontrado o prurido anal intenso, predominantemente
durante a noite, quando h uma reduo da temperatura corporal (nus e regio perianal).
O prurido causado pela presena do ovo do verme na pele da regio perianal. A coceira
constante acaba por lesionar as estruturas perianais, podendo ser encontrado um nus
avermelhado, congesto e at mesmo recoberto por muco, que chega a ser sanguinolento.
Alguns pontos hemorrgicos podem ser encontrados na regio que sofreu o trauma. As
escoriaes produzidas na pele podem servir como porta de entrada para novas infeces.

Objetivo

O exame parasitolgico das fezes tem como objetivo a anlise das fezes para que seja analisado
parasitos intestinais, por meio da pesquisa das diferentes formas parasitrias.
Mtodos
Mtodo de Sheater ou Faust
Tem como finalidade exame coproparasitolgico qualitativo com princpio centrfugo-flutuao
para pesquisa de cistos e oocistos de protozorios intestinais.
Materiais
- Soluo B de acar
- Copos descartveis ou Becker
- Coador (tamis)
- Palitos de madeira
- Tubo de centrfugae centrfuga
- Lmina e lamnula
- Ala bacteriolgica
- Fezes
- Sulfato de zinco a 33%
- Lugol
Mtodo
Sheater
1. Utilizar 11 ml da soluo B com 1 g de fezes. Homogeneizar aos poucos a soluo
juntamente com as fezes em um copo plstico.
31

2. Coar com tamis para outro copo. Preencher o tubo de centrfuga, e levar para a centrfuga
por 10 minutos a 1600 rpm.
3. Flambar a ala bacteriolgica, esfriando em recipiente com gua.
4. Pegar uma gota da flutuao e pingar em uma lmina, cobrindo com a lamnula.
5. Observar no microscpio em objetiva de 100x.

Faust
1. Pegar 1 g de fezes e homogeneizar em 10 ml de gua em um copo plstico.
2. Coar com tamis para outro copo.
3. Colocar a suspenso no tubo de centrfuga e levar para a centrfuga 3x a 2500 rpm
durante 1 minuto, descartando o sobrenadante entre uma centrifugao e outra.
4. Homogeneizar tudo com 10 ml de sulfato de zinco e centrifugar novamente por 1 minuto a
2500 rpm.
5. Coletar 1 gota do sobrenadante com ala bacteriolgica e colocar na lmina, colocando
uma gota de lugol.
6. Observar no microscpio em objetiva de 100x.
Mtodo de Willis
Tem por finalidade o exame coproparasitolgico qualitativo com princpio de flutuao para
pesquisa de ovos de helmintos.
Materiais
- Soluo hipersaturada de cloreto de sdio
- Copos descartveis
- Coador (tamis)
- Gaze
- Palitos de madeira
- Borel
- Placa de Petri
- Lminas e lamnulas
- Fezes
Mtodo
1. Pegar 3,0 gramas de fezes e homogeneizar em 40 ml de soluo de NaCl em um
copo plstico.
2. Coar com tamis e gaze para outro copo.

32

3. Sobre uma placa de Petri, preencher um borel com a suspenso de fezes coadaat
formar um menisco convexo na borda do borel.
4. Colocar a lmina sobre o menisco, com cuidado para no formar bolhas, deixando
a lmina em repouso de 10 a 15 minutos.
5. Cobrir com lamnula e observar no microscpio em objetiva de 100x.
Mtodo de Hoffman
Tem por finalidade exame coproparasitolgico qualitativo com princpio de sedimentao para
pesquisa de ovos de helmintos.
Materiais
- gua
- Copos descartveis
- Coador (tamis)
- Gaze
- Palitos de madeira
- Clice de sedimentao
- Pipeta Pasteur
- Lminas e lamnulas
- Fezes

Mtodo
1. Pegar de 5 a 10g de fezes e homogeneizar em 250 a 300 ml de gua.
2. Filtrar a suspenso de fezes para um clice de sedimentao e aguardar cerca de
25 minutos.
3. Desprezar 2/3 do sobrenadante.
4. Acrescentar gua at a borda do clice e aguardar cerda de 25 minutos. Repetir o
procedimento at a soluo ficar limpa.
5. Pipetar o sedimento para a lmina, cobrindo com a lamnula.
6. Observar no microscpio em objetiva de 40x.

Concluso

Sendo o exame parasitolgico de fezes um dos mais solicitados na rotina laboratorial, de


extrema importncia o entendimento dos princpios, aplicao e indicao dos diversos mtodos

33

parasitolgicos disponveis para o diagnstico dos parasitos intestinais. Tambm devemos estar
atentos quanto ao perodo de exposio e de analise a ser realizado com a amostra.

Imunologia
Beta-HCG Ltex

Finalidade do teste
Sistema para deteco qualitativa da gonadotrofina corinica humana (hCG) por
aglutinao direta do ltex em amostras de urina, usando partculas de ltex revestidas com
anticorpo monoclonal. Somente para diagnostico in vitro.
Significado clnico
A gonadotrofina corinica humana um hormnio glicoproteico produzido pela placenta
durante a gravidez. Homens sadios e mulheres sadias no-gravidas no possuem nveis de HCG
detectveis.
Normalmente, encontra-se presente no soro e urina de mulheres gravidas aps o stimo
dia da concepo. O HCG secretado 6 a 8 dias aps a concepo, aumentado rapidamente ate
um pico de 50.000 a 200.000 um/mL na 6 a 8 semana. A partir de ento, sua concentrao
comea a cair, atingindo aps a 20 semana, um plateau de 5.000 a 20.000 um/mL para o
restante da gravidez.
Alm da gravidez, valores altos de HCG podem ser encontrados em enfermidades
trofoblsticas de origem gestacional e no gestacional. Essas situaes devem ser identificadas
antes de se fazer o diagnostico de uma gravidez.
Procedimento
1. Pipetar 25 L da urina do paciente em umas das reas da placa de reao.
Emoutras duas reas da placa de reao, colocar uma gota do Controle Positivo e
uma gota do Controle Negativo.
2. Adicionar 25 L do Ltex HCG (bem homogeneizado) as reas de reao,
contendo a urina Teste, o Controle Positivo e o Controle Negativo. Usando palitos
distintos, misturar bem a urina com o ltex. Inclinar a placa de reao, lenta e
cuidadosamente, para frente e para tras, com movimentos oscilatrios em planos
34

diferentes, por 2 minutos. Pode-se utilizar um mixer com uma rotao de 100 rpm
por 2 minutos. Aps os 2 minutos realizar a leitura dos resultados sobre uma luz
artificial para verificar presena ou no de aglutinao macroscpica.
Resultados
Positivo
Aglutinao visvel (ntida), indicando presena de hCG na amostra analisada em
concentraes superiores a 200 mUl/mL.
Negativo
Ausncia de aglutinao, indicando presena de hCG na amostra analisada em
concentraes inferiores a 200 mUl/mL (200UI/L).

Chagas - HAI

Finalidade
Eritrcitos de aves estabilizados, sensibilizados com componentes antignicos do
Trypanossoma cruzi altamente purificados, mostram aglutinao quando reagem com anticorpos
contra esses antgenos presentes no soro do paciente.

Importncia clnica
A doena de Chagas ou Tripanossomase Americana uma infeco endmica, de
evoluo essencialmente crnica, causada por um protozorio, o Trypanossoma cruzi, e
transmitida ao homem por um inseto, o triatomneo.
Imunologicamente, 3 estgios podem ser considerados: agudo, latente ou indeterminado e
crnico. Na fase aguda, verificam-se febre, miocardiopatia, linfoadenopatia, hepatoesplenomegalia
e parasitemia. A multiplicao intracelular dos parasitas nos msculos lisos e estriados e clulas
do sistema retculo endotelial acarreta a formao de pseudocistos. Na fase intermediria ou
latente no h sintomas. A doena pode evoluir para a fase crnica com sinais de miocardiopatia,
degenerao das clulas ganglionares do sistema nervoso central e perifrico, hipertrofia e
dilatao de certos rgos, tais como esfago e clon.
Pelos altos ndices de prevalncia e morbidade, ela se tornou um dos maiores problemas
de sade pblica em toda a Amrica Latina.
Como a minoria dos indivduos com sorologia positiva para T. cruzi desenvolve evidncias
clnicas da doena crnica, as informaes prestadas pelo laboratrio clnico tornam-se decisivas
no diagnstico etiolgico.
35

Vrios so os mtodos utilizados para o diagnstico da doena de Chagas: reao de


fixao de complemento, aglutinao, precipitao, imunofluorescncia, hemaglutinao e
imunoenzimtico.
Destes, os mais utilizados so reaes de hemaglutinao indireta (HAI), as reaes de
imunofluorescncia indireta (IFI) e os imunoenzimticos (ELISA).

Materiais
suspenso de hemcias sensibilizadas
soluo diluente
2-mercaptoetanol
soro controle positivo
soro controle negativo
amostra/soro
tubos
pipetas
placa de microtitulao
Mtodo
1. Colocar a placa de microtitulao sobre um pano mido para neutralizar as foras
eletrostticas.
2. Pegar 10ml da soluo diluente e acrescentar 70l de 2-mercaptoetanol.
3. Diluir em um tubo de ensaio 10l da amostra com 0,31ml da soluo diluente com
2-mercaptoetanol preparada anteriormente.
4. Pipetar 50l do soro controle positivo, negativo e da diluio da amostra nas
respectivas cavidades da placa, sugere-se A1 controle positivo, A2 controle
negativo e A3 amostra testada.
5. Adicionar 25l da suspenso de hemcias sensibilizadas em cada cavidade.
6. Agitar a placa por vibrao mecnica ou batendo, com os dedos nas bordas da
placa por 3 a 4 minutos. Deixar em repouso por 1 a 2 horas em temperatura
ambiente, em local livre de vibraes. Fazer a leitura
Resultado
Reao negativa: quando as hemcias depositam no fundo da cavidade formando um
boto.
36

Reao positiva: quando as hemcias se depositam no fundo da cavidade como um


tapete, as vezes com bordas irregulares.
Fator Reumatide - Ltex

Finalidade
Sistema para determinao qualitativa e semiquantitativa, em lminas, dos fatores
reumatoides em soro. Somente para uso diagnstico in vitro.

Significado clnico
Soro com teores de fatores reumatoides superior a 8 U.I/mL levam a aglutinao do ltex,
o que evidenciado pela formao de grumos finos ou grosseiros.
A positividade de fator reumatoide em pacientes portadores de artrite reumatoide oscila
entre 70% e 85 %.
Fator reumatoide est presente em numerosas patologias onde o sistema imunolgico
altamente estimulado. Citam-se endocardite bacteriana subaguda, malria, sfilis, tuberculose,
hepatite crnica, hansenase (lepra), leishmaniose, sarcoidose, mononucleose infecciosa, calazar,
linfomas, macroglobulinemia, poliarterite nodosa, lpus eritematosos sistmico, leucemia mieloide
crnica, infeco viral crnica e doenas autoimunes.
A presena de fator reumatoide no estabelece o diagnostico de artrite reumatoide, bem
como a sua ausncia no o afasta.
Materiais
kit reagentes ( FR -Ltex, controle positivo, controle negativo, lmina e hastes para
homogeneizao);
tubos de ensaios
pipetas semiautomticas de 25 uL e 200 uL;
ponteiras descartveis;
cronometro
amostra (soro)
Procedimento

Teste Qualitativo
1) utilizar soro no diludo;
37

2) os reagentes e amostras devem ser ambientados antes da realizao do teste. a


sensibilidade do reagente diminui em temperatura baixas;
3) adicionar ao primeiro crculo da 25 uL de soro, ao segundo do controle positivo e ao
terceiro 25 uL do controle negativo;
4) Homogeneizar o FR Ltex e adicionar 25 Ul do mesmo em cada circulo;
5) Homogeneizar as duas gotas, com uma haste plstica. Utilizar uma haste para cada
teste;
6) Imprimir movimentos circulares lmina durante 2 minutos.
7) Fazer a leitura com a seguinte interpretao.

Resultados
Teste positivo: ntida aglutinao.
Teste negativo: suspenso homognea.

Valores de Referncia: Inferior a 8 U.I /ml


Teste Semiquantitativo

1) Rotular 6 tubos de 1 a 6;
2) Colocar, a partir do tubo 1, 200 uL de soluo fisiolgica (salina);
3) Transferir 200 uL de soro para o tubo 1, homogeneizar, transferir para o tubo 2, e assim
sucessivamente, at o tubo 6.
4) Teremos ento as diluies que se seguem, com as respectivas equivalncias.

TUBO

Diluio

Soro

1:2

1:4

1:8

1:16

1:32

1:64

16

32

64

128

256

512

no
diludo
FR.

U.I/mL
Resultado
38

Proceder ao teste como descrito para teste qualitativo. Ser considerada positiva a maior
diluio da amostra que apresentar aglutinao. Expressar o resultado em U.I /mL

HIV

A sigla AIDS significa Sndrome da Imunodeficincia Adquirida, O vrus da AIDS


conhecido como HIV e encontra-se no sangue, no esperma, na secreo vaginal e no leite
materno das pessoas infectadas com o vrus.

Fundamentos do mtodo
Os poos da policubeta esto recobertas com antgenos recombinantes dos vrus HIV-1 e
HIV-2. A amostra incubada nos poos, se ela contm anticorpos contra HIV-1 ou HIV-2 ocorrer
a unio com os antgenos sensibilizados na policubeta. O material no unido deve ser removido
por lavagem. No passo seguinte adicionado o conjugado, que contm os mesmos antgenos do
que a policubeta, conjugados com peroxidase. Se a amostra contm os anticorpos, ser unido o
conjugado. O conjugado no unido removido por lavagem. A seguir adicionada uma soluo
contendo tetrametilbenzidina e perxido de hidrognio. As amostras reativas desenvolvero cor
azul claro que se torna amarela quando a reao parada com cido sulfrico.

Significado clnico
Os vrus da imunodeficincia humana (HIV-1 e HIV-2) so os agentes causadores da
Sndrome da Imunodeficincia Adquirida (SIDA). Estes retrovrus so transmitidos pela exposio
a certos fludos corporais infectados, principalmente secrees genitais e sangue ou produtos
contaminadosderivados do sangue e por passagem atravs da placenta A evidncia sorolgica da
infeco por HIV-1 e HIV-2 pode ser obtida determinando a presena de antgenos e anticorpos
no soro de indivduos nos quais suspeita infeco. Os antgenos podem, geralmente, ser
detectados na fase agudae durante a fase sintomtica da enfermidade. Os anticorpos podem ser
detectados ao longo de toda a infeco, comeando na fase aguda ou imediatamente depois dela.
O ensaio de HIV 1+2 ELISA 3 Generacin foi desenvolvidopara detectar anticorpos contra HIV-1,
HIV-1 grupo O e HIV-2.
Procedimento
Amostra (Soro ou plasma).

39

1- Levar os reagentes e amostras a temperatura ambiente antes de iniciar a prova.


2- Preparar o volume necessrio de Tampo de Lavagem diludo.
3- Colocar no suporte de tiras, a quantidade de poos requeridos para a quantidade de
determinaes a serem realizadas, incluindo 2 poos para o Controle Positivo (CP) e 3 para o
Controle Negativo (NC).
4- Colocar a Amostra (A) e os controles de acordo com o seguinte esquema:

CP

CN

Controle Positivo

---

50L

---

Controle Negativo

---

---

50L

Amostra

50L

---

---

Conjugado

100L

100L

100L

Revelador

100L

100L

100L

Stopper

100L

100L

100L

5- Para evitar a evaporao, cobrir a policubeta com fita adesiva fornecida e incubar
durante 30 2 minutos a 37C 1oC.
6- Depois da incubao, eliminar o lquido de cada poo por completo, lavar 5 vezes
segundo as instrues de lavagem (VIDE PROCEDIMENTO DE LAVAGEM)
7- Acrescentar o Conjugado;
8- Para evitar a evaporao, cobrir a policubeta com fita adesiva. Incubar durante 30 2
minutos a 37oC 1oC.
9- Lavar 5 vezes segundo as instrues de lavagem.
10- Colocar o Revelador transvasando a um recipiente limpo somente o volume
necessrio. No voltar o Revelador remanescente ao frasco original. Evitar o contato do reagente
com agentes oxidantes.
11- Incubar durante 30 2 minutos a temperatura ambiente (18-25oC), protegido da luz.
12- Acrescentar o Stopper;
13- Ler a absorbncia em espectrofotmetro em forma bicromtica a 450/600-650 nm ou a
450 nm.
Nota: recomenda-se realizar sempre a leitura em forma bicromtica. Caso a leitura for
monocromtica, realizar um branco de reagentes que dever ser subtrado das leituras das
amostras
Interpretaes dos resultados

a) Com instrumental ptico


40

A presena ou ausncia de anticorpos anti-HIV-1 ou HIV-2 determinada relacionando a


absorbncia da amostra com o valor do Cut-off.
Cut-off = CN + 0,250 CN: promdio das D.O. do Controle Negativo
Exemplo: 0,018 + 0,250 = 0,268
Amostras No Reativas: so consideradas aquelas com absorbncias menores ao valor
Cut-off.

Amostras Reativas: so consideradas aquelas com absorbncias maiores ou iguais ao


valor Cut-off.

b) Interpretao visual
Se escolhido este tipo de interpretao, deve ser considerada No Reativa toda amostra
que no apresente uma cor maior do que aquela dos Controles Negativos. Pelo contrrio, uma
amostra nitidamente amarela considerada
Reativa. Toda amostra inicialmente reativa, deve ser repetida por duplicado. Se uma ou
ambas repeties fossem positivas, a amostra deve ser considerada reativa. Uma amostra
inicialmente reativa pode ser no reativa nas duas repeties. Isto pode ser devido :
- Contaminao cruzada de um poo no reativo por uma amostra reativa.
- Contaminao da amostra durante a dispensao, impreciso no dispensado da amostra,
Conjugado e/ou Revelador no poo.
- Reutilizao de ponteiras.
- Contaminao do poo com hipoclorito ou outros agentes oxidantes.
Em certos casos, uma amostra no reativa pode apresentar uma reao falsamente
reativa, tanto na anlise inicial como em suas repeties. Algumas causas destes fenmenos
podem ser:
- Contaminao de uma amostra durante sua extrao, processamento ou conservao.
- Presena de substncias interferentes, tais como autoanticorpos, frmacos, etc.
- Dispensao e / ou aspirao ineficiente da soluo de lavagem (sistema obstruido).

Teste VDRL

Introduo

41

A sfilis uma doena infecciosa humana produzida por uma espiroqueta, o Treponema
pallidum. Ela primeiramente uma doena transmitida sexualmente. Outras possveis viam de
transmisso a transfuso de sangue infectado, hoje praticamente eliminada atravs de triagem
sorolgica de rotina, e a perinatal (sfilis congnita) transmitida in tero, pelos treponemas
procedentes da me infectada para o feto em desenvolvimento.
Clinicamente, aps um perodo de incubao que varia de 10 a 90 dias, pois
inversamente relacionado com a quantidade do inoculado, ocorre, em 85% dos pacientes, o
surgimento de um cancro, que uma leso solitria e indolor, caracterizando a sfilis primaria.
Aproximadamente 4 a 10 semanas aps o aparecimento do cancro, surgem
frequentemente sintomas como perda de peso, cefalia, anorexia, mialgia, artralgia, mal-estar,
febre baixa, linfodenopatia generalizada e exantema (presente Treponema pallidum in tero em 75
a 100% dos casos), o que caracteriza a sfilis secundria. Podem ocorrer tambm neste estgio
manifestaes de comprometimento do sistema nervoso central. Aps as manifestaes primrias
ou secundrias, ocorre o perodo conhecido como sfilis latente, caracterizado por testes
sorolgicos positivos e ausncia de achados clnicos. Pode ter durao de 1 a 2 anos. Sem
tratamento, cerca de um tero dos pacientes apresenta sfilis terciria, que pode manifestar-se
como goma (15%), sfilis cardiovascular (10%) ou neurossfilis (8 a 10%).
Os testes sorolgicos para sfilis so classificados como no-treponmicos, usados mais
comumente para a triagem, como o VDRL e o, e treponmicos, usados como testes confirmatrios
para os soros reativos nos testes de triagem, como o, (Veneral Disease Research Laboratory) e
o RPR (Rapid Plasma Reagin) e treponmicos, usados como testes confirmatrios para os soros
reativos nos testes de triagem, como o TPHA (Treponema pallidum Hemagglutination) o FTAAbs (FluorescentTreponemalAntibodyAbsorption) e ELISA (Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay).

Objetivo
O VDRL um teste de floculao, no-treponmico, para diagnstico da sfilis, atravs da
pesquisa de anticorpos no soro, plasma ou lquido cefalorraquidiano (LCR), com a grande
vantagem sobre o VDRL clssico por consistir em uma suspenso estabilizada e pronta para uso.
Princpio do Mtodo
Quando a suspenso antignica do VDRL misturada com o soro, plasma ou lquido
cefalorraquidiano (LCR) que contenham anticorpos (reaginas), as partculas de antgeno floculam
e o resultado da reao observado ao microscpio. A ausncia de floculao indica resultado
negativo.

Materiais necessrios
42

Tubos de ensaio para diluio e titulao


Pipetas sorolgicas
Estante para tubos e rack de ponteiras
Recipiente para descarte de material
Placa escavada
Salina a 0,9%
Amostra

Soro ou plasma no inativados e lquido cefalorraquidiano (LCR), livre de hemlise, lipemia


e contaminao. Em caso de necessidade, as amostras podem ser conservadas no mximo por 4
a 6 semanas a -20 C.
Procedimento

Teste qualitativo

Objetivo: para triagem e eliminao das amostras no reagentes.


1. Pipetar 50 l das amostras e soros controles nas cavidades da placa escavada.
2. Pipetar 20 l da suspenso antignica homogeneizada nas mesmas cavidades das
amostras. No necessrio misturar esses dois componentes.
3. Agitar a placa durante 4 minutos a 180rpm.
4. Imediatamente aps os 4 minutos, observar ao microscpio.

OBS: Para evitar o efeito de pr-zona sugerimos que o teste qualitativo seja realizado com
soro, plasma ou lquido cfalo- raquidiano (LCR) puro e diludo.
Resultados das leituras
Reao Negativa: AUSNCIA de agregados. Aspecto homogneo.
Reao Fracamente Positiva: PRESENA de pequenos agregados dispersos.
Reao Positiva: PRESENA de mdios e grandes agregados.
Teste semiquantitativo

1. Fazer diluio da amostra em soluo salina a 1/2, 1/4, 1/8, 1/16, 1/32 e mais se
necessrio.
43

2. Pipetar 50 l de cada diluio em cada cavidade da placa escavada.


3. Pipetar 20 l da suspenso antignica homogeneizada em cada diluio. No
necessrio misturar.
4. Agitar a placa durante 4 minutos a 180rpm.
5. Imediatamente aps os 4 minutos, observar ao microscpio.
Ttulo da amostra
Ser o da ltima diluio onde, ainda, se visualiza a presena de agregados.
Interpretao
Podem ocorrer reaes falso-positivas com o VDRL em condies como: imunizaes,
infeces, gravidez, malria, doenas auto-imune (lpus eritematoso sistmico etc.), doenas
malignas etc. Se o VDRL for positivo deve-se realizar um teste confirmatrio, especfico para
treponema.
PCR Ltex

Introduo

A Protena C Reativa (PCR) juntamente com a velocidade de hemossedimentao (VHS) e


as mucoprotenas fazem parte das chamadas reaes de fase aguda, que quando alteradas
caracterizam atividades inflamatrias inespecficas, auxiliando o diagnstico e o controle evolutivo
da inflamao.
A PCR aparece muito precocemente no soro de pacientes afetados por uma variedade de
processos inflamatrios e necrose de tecidos, tais como infeces bacterianas, doena reumtica
aguda, infarto de miocrdio, certas doenas virais, tuberculose pulmonar ativa, artrite reumatoide
e neoplasia maligna.
O aumento da PCR uma resposta inespecfica atividade inflamatria, sendo suas
caractersticas mais marcantes o aparecimento precoce, vem como o seu rpido desaparecimento
( 1 a 2 semanas).

Objetivo
Pesquisar PCR, em amostras de soro, usando-se partculas de ltex revestidas com
anticorpo monoclonal anti-PCR por aglutinao indireta.

Procedimento
44

a) Teste qualitativo

1.Pipetar 25l do soro do paciente em uma rea do carto-teste.


2. Homogeneizar a suspenso de ltex (1) e pipetar 25 l na mesma rea da amostra.
3. Misturar muito bem o soro com o ltex, espalhando-se cuidadosamente com uma vareta
plstica.
4.Atravs de movimentos suaves de rotao, sob uma boa fonte de luz, observar durante 2
minutos a formao de uma eventual aglutinao.
Observao: Para cada srie de testes devem se fazer controles positivo e negativo para
verificar a correta execuo da tcnica e o estado de conservao dos reativos.
Efeito pr-zona pode ocorrer em concentraes superiores a 400 mg/litro. Se houver
suspeita de nveis superiores a este, a amostra dever ser diluda.
Resultados das leituras
Resultado Positivo: Aglutinao ntida. Concentrao igual ou superior a 6 mg/litro.
Resultado Negativo: Total ausncia de aglutinao. Concentrao inferiora6mg/litro.
Observao: A sensibilidade do teste de 6 mg/litro. Portanto, consideram-se soros
negativos os que possuam menos que 6 mg/litro.
b) Teste Semiquantitativo:

1. Diluir o soro do paciente em salina (NaCl a 0,9%) 1:2, 1:4, 1:8, 1:16 e mais, se
necessrio.
2.Pipetar 25l de cada diluio em cada rea do carto-teste.
3.Homogeneizar a suspenso de ltex (1) e pipetar 25l em cada rea onde se encontra a
diluio daamostra.
4. Misturar muito bem o soro com o ltex, espalhando-se cuidadosamente com uma vareta
plstica (uma para cada diluio).
5.Atravs de movimentos suaves de rotao, sob uma boa fonte de luz, observar durante 2
minutos a formao de aglutinao. O ttulo da amostra corresponder a maior diluio em que
ocorrer aglutinao. A concentrao de PCR ser dada pelo seguinte clculo:
Concentrao (mg/litro)=6 x D,onde6asensibilidade do teste e D, a maior diluio que
apresenta aglutinao.
Exemplo: Se o ttulo obtido for 1:8, a concentrao aproximada de PCR existente na
amostra ser: 6x8= 48 mg/litro.

45

Toxoplasmose

Objetivo
O exame laboratorial baseado na pesquisa da presena do parasito ou presena de
anticorpos especficos. Na toxoplasmose podem ser identificadas duas formas distintas: a
congnita e a adquirida.

Procedimentos
Teste qualitativo:

1. Colocar a placa sobre um pano mido para neutralizar as foras eletrostticas.


2. Usar 1 cavidade da placa por amostra, incluindo sempre os controles positivo e
negativo, prontos para o uso.
3. Pipetar 25L do soro controle positivo, negativo e da diluio 1/32 de cada amostra
nas respectivas cavidades da placa.
4. Adicionar 25L da suspenso homognea de hemcias em cada cavidade.
5. Agitar a placa por vibrao mecnica (agitador da placa) ou batento com os dedos
nas bordas da placa por 3 a 4 minutos.
6. Deixar em repouso por 1 a 2 horas em temperatura ambiente, em local livre de
vibraes.
7. Fazer a leitura.
Interpretao
Soros que do reao negativa so informados como no reagentes, significam
ausncia de infeco atual ou pregressa para toxoplasmose. Nos casos em que ocorre reao
negativa, mas com suspeita clnica de toxoplasmose, deve-se repetir o teste aps alguns dias,
pois pode tratar-se de perodo pr-sorolgico. Todos os soros que apresentam reao positiva
devero ser testados quantitativamente para determinao da fase da doena.
Teste semiquantitativo
1. Partir de uma diluio do soro de 1/32 conforme terceiro item do teste qualitativo.
2. Pipetar 25L da soluo diluente a partir da segunda cavidade da placa at a
diluio que se pretende estudar.
3. Transferir 25L da diluio do soro 1/32 para a primeira e segunda cavidade.
Homogeneizar bem o soro com diluente na segunda cavidade (diluio 1/64) e

46

transferir 25L para a terceira cavidade (diluio 1/128) e assim sucessivamente,


desprezando 25L no final.
4. Pipetar 25L da suspenso homognea de hemcias em todas as cavidades.
5. Agitar a placa por vibrao mecnica (agitador de placas) ou batendo com os
dedos nas bordas da placa por 3 a 4 minutos.
6. Deixar em repouso por 1 a 2 horas na temperatura ambiente, em local livre de
vibraes.
7. Fazer a leitura.

Interpretao: A reao ser negativa quando as hemcias se depositarem no fundo da


cavidade formando um boto. E a reao ser positiva quando as hemcias se depositarem no
fundo da cavidade como um tapete, s vezes com bordas irregulares.
Teste de determinao de infeco recente (IgM) ou presena de anticorpos
inespecficos
1. Preparao para o 2-Mercaptoetanol:
2. Dever ser diludo com a soluo diluente, na proporo 10mL da soluo diluente
para 70L de 2-ME.
3. Essa soluo diluente com 2-Mercaptoetanol usada para diluir a amostra de soro
para a determinao de infeco recente (IgM) ou presena de anticorpos
inespecficos.
4. Esta soluo poder ser diluda em frasco mbar e acondicionada em geladeira (28C), juntamente com o kit
5. Utiliza-se conforme a necessidade e a soluo fica estvel por 30 dias.
6. Aps a preparao do 2-Mercaptoetanol:
7. Realizar o teste do soro tratado com 2-Merccaptoetanol paralelo ao Teste
Semiquantitativo.
8. Tratamento do soro: pipetar em um tubo de ensaio 10L de soro inativado ou no,
310mL da soluo de 2-Mercaptoetanol diludo (corresponde a uma diluio 1:32).
Incubar a 37C por 1 hora.
Interpretao: O teste ser negativo para o paciente no imune ou em fase pr-sorolgica.
Se houver suspeita clnica, repetir aps 1 ou 2 semanas. Ttulos do soro tratado e no tratado com
2-ME semelhantes (menos de 2 diluies): Provvel toxoplasmose pregressa.

47

Concluso
Com o tempo dedicado a imunologia pudemos observar da importncia clinica e do
diagnostico de doenas que acometem o sistema imunolgico, cada vez maior o numero de
casos de pacientes acometidos as doenas citadas neste relatrio. necessrio que se tenha
muita ateno para o diagnostico das mesmas, visto que qualquer erro nas diluies pode
acarretar resultados falsos positivos ou falsos negativos.

BIOQUMICA

A bioqumica, no mbito laboratorial clnico, possui mtodos qumicos e bioqumicos


aplicados para a identificao de doenas, por meio da utilizao de soro para a obteno dos
resultados.
Para que os resultados sejam precisos, os cuidados durante os processos bioqumicos
envolvem as condies de fracionamento e o estado clnico do paciente, bem como a coleta de
forma correta, a pureza dos reagentes, padronizao correta, clculos realizados de maneira
correta e manuteno de programa de controle de qualidade.
Objetivo

Determinar as absorbncias para anlise atravs dos valores de referncia.

Provas Bioqumicas
Glicose
Materiais
- Tubos de ensaio
- Padro n 2 glicose papliquiform
- Soro
- Glicose papliquiform n 1
- Banho maria
- Espectrofotmetro
- Cubeta
- Pipeta
- Ponteira
48

Mtodo

1. Marcar 3 tubos com amostra, padro e reagente.


2. Colocar 20uL de padro n 2 de glicose papliquiform no tubo padro.
3. Colocar 20uL do soro a ser testado no tubo marcado como amostra. Colocar 2uL
de glicose papliquiform n 1 nos 3 tubos.
4. Levar os tubos ao banho maria a 37C por 15 minutos.
5. Determinar a absorbncia da amostra e padro em 505nm, acertando o zero com o
reagente.

Clculos
Glicose (mg/dL) = Absorbncia do teste x 100
Absorbncia do padro

Valor de referncia: Plasma = 70 a 110 mg/dL

Colesterol
Materiais
- Tubos de ensaio
- Reagente colesterol liquiform n 1
- Padro colesterol liquiform n 2
- Soro
- Banho maria
- Espectrofotmetro
- Cubeta
- Pipeta
- Ponteira

Mtodo
1. Marcar 3 tubos com teste, padro e branco.
2. Colocar nos 3 tubos 2 ml do reagente colesterol liquiform n 1.
3. Colocar 20uL do padro colesterol liquiform n 2 no tubo marcado como padro.
4. Acrescentar no tubo teste 20uL do soro a ser testado.
5. Levar os tubos ao banho maria a 37C por 10 minutos.
49

6. Determinar as absorbncias do teste e padro em 50nm, acertando o zero com o


branco.
Clculos
Colesterol (mg/dL) = Absorbncia do teste

x 200

Absorbncia do padro
Fator de calibrao
FC =

200

Colesterol (mg/dL) = Abs. do teste x FC

Abs. Do padro
Valor de referncia
Adultos Colesterol Total

Crianas e adolescentes Colesterol Total

Desejvel - < 200

Desejvel - < 170

Limiar elevado 200-239

Limtrofe 170-199

Elevado - 240

Elevado - 200

Triglicrides
Materiais
- Tubos de ensaio
- Reagente de cor triglicrides PP
- Padro
- Soro
- Banho Maria
- Espectrofotmetro
- Cubeta
- Pipeta
- Ponteira
Mtodo
Marcar 3 tubos com branco, teste e padro, colocando 2ml do reagente de cor triglicrides
PP nos respectivos tubos.
1. Colocar 20ul do padro no tubo padro.
2. Colocar 20ul do soro a ser testado no tubo teste.
3. Homogeneizar e incubar em banho maria a 37C por 10 minutos.
4. Levar ao espectrofotmetro para ler a absorbncia do padro e do teste, zerando
com o branco em 505nm.
50

Clculos
FC =

200Triglicrides(mg/dL) = Abs. do teste x FC


Abs. Do padro

Valor de referncia
Adultos

Menores de 10 anos

De 10 a 19 anos

Desejvel - < 150

Desejvel - 100

Desejvel - 130

Limar elevado 150-199

Elevado - > 100

Elevado - > 130

Elevado 200-499
Muito elevado - > 500

Colesterol HDL
Material
- Tubos de ensaio
- Pipeta
- Ponteira
- Precipitante
- Colesterol liquiform1
- Padro colesterol HDL-2
- Soro
- Banho Maria
- Espectrofotmetro
- Cubeta
Mtodo
1. Colocar em 1 tubo 0,25ml do precipitante e 0,25ml do soro a ser testado, agitando
vigorosamente por 30 segundos.
2. Centrifugar a 3500rpm por pelo menos 15 minutos , pipetando o sobrenadante
lmpido imediatamente aps a centrifugao.
3. Nomear 3 tubos com branco, teste e padro, colocando 2ml de colesterol liquiform
1 nos respectivos tubos.
4. Colocar 20ul do sobrenadante no tubo teste, e 20ul do padro colesterol HDL-2 no
tubo padro. Misturar e incubar em banho maria a 37C durante 10 minutos.

51

5. Levar ao espectrofotmetro para determinar as absorbncias do teste e padro em


500nm, acertando o zero com o branco.
Clculo
ColesterolHDL (mg/dL) = Absorbncia do teste

x 40

Absorbncia do padro
Fator de calibrao
FC =

40

ColesterolHDL (mg/dL) = Abs. do teste x FC

Abs. Do padro

Clculo para obteno do VLDL (se menor que 400)


VLDL = Triglicrides
5

Clculo para obteno do LDL


LDL = Colesterol total - (HDL - VLDL)

Valores de referncia
Crianas
Colesterol LDL (2 a 9 anos)

Colesterol HDL

Desejvel - < 110

< 10 anos

Limtrofe - 110-129

Desejvel - 40

Elevado - 130

10 a 19 anos
Desejvel - 35

Adultos
Colesterol LDL

Colesterol HDL

timo - < 100

Baixo - > 40

Limiartimo - 100-129

Elevado (desejvel) - 60

Limiarelevado - 130-159
Elevado - 160-189
Muitoelevado - 190

cido rico
Material
52

- Tubos de ensaio
- Soro
- Padro
- Reagente de cor
- Pipeta
- Ponteira
- Banho Maria
- Espectrofotmetro
- Cubeta

Mtodo
1. Identificar 3 tubos com branco, teste e padro.
2. Colocar 40ul do soro no tubo teste, 40ul do padro no tubo padro e 2ml do
reagente de cor nos 3 tubos.
3. Misturar e incubar os tubos no banho maria a 37C por 5 minutos.
4. Levar ao espectrofotmetro para determinar as absorbncias do teste e do padro
em 505nm, acertando o zero com o branco.
Clculo
FC = Concentrao do padro
Absorbncia do padro

cido rico (mg/dl) = FC x absorbncia do teste

Valores de referncia
Adultos

Crianas

Homens 2,5 a 7,0

Meninos 1,5 a 6,0

Mulheres 1,5 a 6,0

Meninas 0,5 a 5,0

Bilirrubina
Materiais
- Tubos de ensaio
- Acelerador
- cido sulfanlico
53

- Padro
- Diazo reagente
- gua destilada
- Soro
- Nitrito de sdio
- Pipeta
- Ponteira
- Banho Maria
- Espectrofotmetro
- Cubeta

Mtodo
1. Preparo do Diazo Reagente
a) Adicionar 0,01ml de nitrito de sdio a 0,3ml do cido sulfanlico, misturar e
usar no dia.

2. Preparo do padro
a) Marcar um tuo como branco e um como padro.
b) Colocar no tubo branco 2ml do acelerador, 0,2ml do diazo reagente e
0,10ml do padro. Misturar e esperar por 5 minutos.
c) Levar no espectrofotmetro para determinar a absorbncia do padro em
525nm, acertando o zero com o branco.
3. Procedimento
a) Identificar 3 tubos como branco, direto e total.
b) Colocar no tubo branco 2ml de gua destilada, 0,2 de cido sulfanlico e
0,1ml da amostra.
c) Colocar no tubo direto 2ml de gua destilada, 0,2ml de diazo reagente e
0,1ml da amostra.
d) Colocar no tubo total 2ml de acelerador, 0,2ml de diazo reagente e 0,1ml da
amostra, misturar e esperar por 5 minutos.
e) Levar para o espectrofotmetro para determinar as absorbncias em
525nm, acertando o zero com o branco.

54

Clculos
Bilirrubina (mg/dL) = Absorbncia do teste

x 10

Absorbncia do padro
Fator de calibrao
FC =

10Bilirrubina (mg/dL) = Abs. do teste x FC


Abs. Do padro

Valores de referncia
Bilirrubina total

Bilirrubina direta

Recm nascidos

Recm nascidos at 0,4

1 dia at 5,1
1 a 2 dias at 7,2
3 a 5 dias at 10,3

Crianas, adolescentes e adultos


Direta at 0,4
Total 1,2

Capacidade de ligao do ferro


Materiais
-

Padro - Contm ferro na concentrao de 500 g/dL.

Tampo - Contm tampo TRIS 500 mmol/L, pH 8,3 e fenoxietanol 7,2 mmol/L.

Reagente de Cor- Contm Ferrozine 28 mmol/L.


Soro

Nitrito de sdio

Pipeta

Ponteira

Banho Maria

Espectrofotmetro

Cubeta

Mtodos
1. Identificar 3 tubos de ensaio como: Branco, Teste e Padro e proceder:
55

2.

Homogeneizar e incubar em banho-maria a 37 C por 10 minutos.

3. O nvel de gua do banho-maria deve ser superior ao nvel dos reagentes nos tubos.
4. Fazer a leitura fotomtrica do tubo Teste em 560 nm (540 - 580) ou filtro verde, acertando
o zero com o tubo Branco.
5. A primeira absorbncia do tubo Teste ser A1

4- Homogeneizar e incubar em banho-maria a 37 C por 10 minutos.


5- Fazer as leituras fotomtricas do Padro e do Teste em 560 nm (540 580) ou filtro verde, acertando o zero com o tubo Branco.
Aabsorbncia do Padro ser AP.
Asegunda absorbncia do tubo Teste ser A 2.

Calculo

Valores de Referencia: CLLF: 140 - 280 g/dL


CTLF (Adultos): 250 a 450 g/dL
CTLF (Crianas): 150 a 400 g/dL
56

IST: 20 - 50%
Transferrina: 200 a 300 mg/dL

Ferro srico
Materiais
-

Nmero 1 - Tampo Redutor: cido succnico 250mmol/L, Hidroxilamina 140 mmol/L,


surfactante e estabilizador.

Nmero 2 - Reagente de Cor: Ferrozine 12 mmol/L.

Nmero 3 - Padro: Ferro 100g/dL.

Soro

Nitrito de sdio

Pipeta

Ponteira

Banho Maria

Espectrofotmetro

Cubeta

Mtodo
1. Marcar 3 tubos de ensaio com as letras B (Branco), P (Padro), A (Amostra) e
proceder como a seguir:

2. Homogeneizar suavemente e determinar a absorbncia da Amostra em 560 nm


(540 - 580), acertando o zero com o Branco. Esta ser a absorbncia A1.
3. Em seguida adicionar:

4. Homogeneizar suavemente e incubar em banho-maria 37 o C, por 10 minutos.


Determinar as absorbncias da Amostra e do Padro em 560 nm (540-580),
acertando o zero com o Branco. A absorbncia da amostra ser A2.

57

Calculo

Valor de Referncia: Soro: 50 a 150 g/dL

Proteinas totais
Materiais
-

Reagente Biureto: hidrxido de sdio 600 mmol/L, sulfato de cobre 12 mmol/L,


estabilizador e antioxidante. Manusear com cuidado; reagente corrosivo. No pipetar com a
boca.

Padro - 4,0 g/dL: Aps o manuseio, sugere-se armazenar bem vedado para evitar
evaporao. Contm albumina bovina 4 g/dL e azida sdica 15,4 mmol/L.

Fotmetro capaz de medir com exatido a absorbncia em 545 nm (530 a 550 nm).

Pipetas para medir amostras e reagentes.

Cronmetro.

Mtodo
1. Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir:

Branco

Teste

Padro

Amostra

-----

0,02 mL

-----

Padro (n 2)

-----

-----

0,02 mL

gua destilada ou deionizada

0,02 mL

-----

-----

Biureto de Uso

1,0 mL

1,0 mL

1,0 mL

58

2. Misturar e incubar a 37 C durante 10 minutos.


3. Determinar as absorbncias do teste e do padro em 545 nm (530 a 550 nm), acertando o zero com o
branco. A cor estvel durante 1 hora.

Clculos
Ver linearidade.
Absorbncia do teste
Protenas (g/dL) =

x4
Absorbncia do padro

Devido grande reprodutibilidade que pode ser obtida com a metodologia, o mtodo do fator pode ser
empregado.
4
Fator de calibrao =
Absorbncia do padro

Protenas (g/dL) = Absorbncia do teste x Fator


Valores de referncia: Soro: 6,0 a 8,0 g/dL.

Albumina

Materiais
-

Reagente de Cor: Contm tampo 60 mmol/L, pH3,8, verde de bromocresol 300 mol/L e
Brij 35 6,0 mmol/L.

Padro - 3,8 g/dL: Contm azida sdica 15,4 mmol/L.

Fotmetro capaz de medir com exatido a absorbncia em 630 nm ou filtro vermelho (600
a 640 nm).

Pipetas para medir amostras e reagentes.

Cronmetro.

59

Mtodo
1. Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir:

Branco

Teste

Padro

1,0 mL

1,0 mL

1,0 mL

Soro

-----

0,01 mL

-----

Padro (n 2)

-----

-----

0,01 mL

Reagente de Cor (n 1)

2. Misturar e aps 2 minutos, no mximo 10 minutos, determinar as absorbncias do teste e padro em


630 nm ou filtro vermelho (600 a 640 nm), acertando o zero com o branco.

Clculos

Absorbncia do teste
Albumina (g/dL) =

x 3,8 g/dl
Absorbncia do padro

Devido grande reprodutibilidade que pode ser obtida com a metodologia, o mtodo do fator pode ser
empregado.
3,8
Fator de calibrao =
Absorbncia do padro

Albumina (g/dL) = Absorbncia do teste x Fator

Valores de referncia: 3,5 a 5,5 g/dL

Fosfatase alcalina
Materiais
-

Tampo 350 mmol/L pH 10,4, sulfato de zinco 1,0 mmol/L

acetato de magnsio 2,0 mmol/L p-nitrofenilfosfato 12 mmol/L, azida sdica 6,4 mmol/L.

60

Fotmetro com cubeta termostatizada capaz de medir com exatido a absorbncia em 405
nm.

Banho-maria mantido temperatura constante (37 C).

Pipetas para medir amostras e reagente.

Cronmetro.

Mtodo
1. Pipetar 1,0 mL do Reagente de Trabalho em um tubo 12x75 e adicionar 0,02 mL de amostra.
2. Homogeneizar.
3. Transferir imediatamente para a cubeta termostatizada a 37 C. Esperar 30 segundos.
4. Fazer a leitura da absorbncia inicial (A1), disparando simultaneamente o cronmetro.
5. Repetir a leitura aps 2 minutos (A2).

Clculo
A Teste = A2 A1

Atividade da Fosfatase Alcalina (U/L) = A Teste x 2764

O fator 2764 foi calculado segundo as condies da reao propostas acima. Recalcular o fator quando for
efetuada qualquer modificao em um dos parmetros utilizados para calcul-lo (Ver Mtodo para clculo
do fator).

Mtodo para clculo do fator


VT x 1000
Fator =
x VA x d

VT = volume total do ensaio (1,02 mL)


VA = volume da amostra (0,02 mL)
1000 = converso de U/mL para U/L

61

d = espessura da soluo (1 cm)


= absortividade milimolar do p-nitrofenol em 405 nm (18,45)

Valores de referncia
37 C
Adultos (U/L)

27 - 100

Crianas (U/L)

75 - 390

Hemoglobina glicada
Materiais
-

Tampo Hb-Rpida: tampo fosfato 36 mmol/L pH 6,7 e biocida no txico.

Hemolisante: ons borato e azida sdica 14,6 mmol/L.

Colunas para cromatografia: resina de troca inica equilibrada com tampo fosfato pH 6,7.

Fotmetro capaz de medir com exatido a absorbncia em 415 nm ou filtro azul (405 a 430).

Pipetas para medir amostras e reagentes.

Termmetro.

Mtodo
Minimizao da ao de interferentes
Este procedimento deve ser aplicado somente quando a amostra estiver turva, lipmica ou ictrica.
1. Pipetar em um tubo 1,0 mL da amostra bem homogeneizada. Marcar o nvel de 1,0 mL no tubo.
2. Centrifugar a 2000 rpm por 5 minutos. Retirar o plasma sem ressuspender as hemcias.
3. Adicionar 3,0 mL de NaCl 150 mmol/L (0,85%). Centrifugar. Acertar o volume para a marca de 1,0 mL,
retirando o excesso do sobrenadante.
4. Homogeneizar bem e utilizar para preparar o hemolisado.
Preparo do hemolisado
Em um tubo 12 x 75 adicionar 0,4 mL de hemolisante (n 2) e 0,1 mL da amostra. Agitar fortemente por 20
segundos e esperar 5 minutos. Se a hemlise for incompleta (o lquido no tubo se mostra turvo), centrifugar
e usar o sobrenadante. Antes de iniciar a cromatografia, assegurar-se de que o hemolisado, o tampo e as

62

colunas tenham a mesma temperatura ambiente. Nunca realizar a cromatografia se o hemolisado, tampo e
coluna tiverem temperaturas diferentes do ambiente no qual se realizar a cromatografia.

Preparo da coluna
A presena de bolhas de ar no filtro ou na resina interfere na drenagem do tampo, aumentando o tempo de
eluio da hemoglobina glicada.
Retirar a tampa superior da coluna, introduzir o basto fazendo movimentos giratrios descendentes a
ascendentes para ressuspender a resina. Remover imediatamente a tampa inferior, colocar a coluna em um
tubo de ensaio e esperar que todo o lquido penetre na resina. A partir da, a coluna estar pronta para uso
e a cromatografia dever ser iniciada imediatamente. Jamais iniciar a cromatografia em temperatura inferior
a 16 C ou superior a 30 C.
Medir a temperatura do lquido que drenou da coluna para correo do resultado.

Cromatografia
Adicionar 0,05 mL do hemolisado sobre a resina, de modo que no haja ressuspenso da mesma, evitando
a formao de bolhas de ar. Esperar que o hemolisado penetre na resina.
Transferir a coluna para um tubo de ensaio limpo e seco, marcado com o nmero 1 e adicionar lentamente,
com a ponta da pipeta tocando a parede da coluna, 3,5 mL de Tampo Hb-Rpida (n 1). A eluio da Hb-G
se completa quando todo o tampo penetra na resina.
Desprezar a coluna.

Colorimetria
Homogeneizar o contedo do tubo nmero 1 (Hb-G) e us-lo para a colorimetria sem qualquer tratamento
adicional.
Para um tubo limpo e seco, marcado com o nmero 2 (Hb-total) pipetar 7,0 mL de gua destilada, adicionar
0,02 mL do hemolisado e misturar.
Determinar as absorbncias dos tubos nmero 1 (Hb-G) e nmero 2 (Hb.total) em 415 nm ou filtro azul (405
a 430 nm) acertando o zero com gua destilada.
A cor estvel por 4 horas.

A1
Hemoglobina Glicada (%) =

A1
x 100

ou

x 20

63

5 x A2

A2

A1 = Absorbncia do tubo nmero 1 (Hb-G)


A2 = Absorbncia do tubo nmero 2 (Hb-Total)

Efeito da temperatura
A cromatografia deve ser realizada a 22 C. Se for realizada em temperatura diferente, corrigir o resultado
para a temperatura de 22 C, multiplicando-se o resultado encontrado pelo fator de correo
correspondente temperatura de trabalho.

Temperatura de

Fator de correo

trabalho (C)
16

1,16

17

1,13

18

1,10

19

1,08

20

1,05

21

1,03

22

1,00

23

0,98

24

0,95

25

0,93

26

0,90

27

0,88

28

0,86

29

0,84

64

30

0,82

Valores de referncia: Hemoglobina Glicada: 5,3 a 8,0%

Concluso
Conclui-se que o exame bioqumico fundamental para traar valores favorveis e
desfavorveis para a sade do paciente, bem como para analisar, identificar e determinar os
valores de acordo com o valor de referncia, podendo ser apresentando alteraes bioqumicas
ou no.

Microbiologia

Estuda os microrganismos, incluindo eucariontes unicelulares e procariontes, como as


bactrias, fungos e vrus. Tambm relacionada com a patologia, j que muitos organismos so
patognicos.

Bactrias: As bactrias so seres unicelulares aclorofilados, microscpicos, que se


produzem por diviso binria. Elas so clulas esfricas ou em forma de bastonetes curtos
com tamanhos variados, alcanando s vezes micrmetros linearmente. Na maioria das
espcies, a proteo da clula feita por uma camada extremamente resistente, a parede
celular, havendo imediatamente abaixo uma membrana citoplasmtica que delimita um
nico compartimento contendo DNA, RNA, protenas e pequenas molculas.

As bactrias classificam-se morfologicamente de acordo com a forma da clula e com o grau de


agregao:

QUANTO A FORMA

Coco: De forma esfrica ou subesfrica;

Bacilo: Em forma de bastonete (do gnero Bacillus);

Vibrio: Em forma de vrgula (do gnero Vibrio);

Espirilo: de forma espiral/ondulada (do gnero Spirillum);


65

Espiroqueta: Em forma acentuada de espiral.

QUANTO AO GRAU DE AGREGAO


Apenas os Bacilos e os cocos formam colnias.

Diplococo: De forma esfrica ou subesfrica e agrupadas aos pares.

Estreptococos: Formam cadeia semelhante a um "colar".

Estafilococos: Uma forma desorganizada de agrupamento, formando cachos.

Sarcina: De forma cbica, formado por 4 ou 8 cocos simetricamente postos.

Diplobacilos: Bacilos reunidos dois a dois.

Estreptobacilos: Bacilos alinhados em cadeia.

MEIOS DE CULTURA

O crescimento dos microrganismos nos diferentes meios de cultura utilizados fornece as primeiras
informaes para a sua identificao. importante conhecer o potencial de crescimento de cada
meio de cultura e adequar ao perfil bacteriano esperado para cada material.Alguns procedimentos
so essenciais na hora da preparao de cada meio de cultura para a obteno de melhores
resultados e evitar contaminaes, como nos diferentes casos: quando distribuir o meio antes de
autoclavar, os tubos no precisam estar esterilizados; quando distribuir o meio aps a
autoclavao,

os

tubos,

frascos,

placas,

pipetas

vidrarias

ou

materiais

auxiliares

obrigatoriamente devem ser estreis e os meios devem ser autoclavados com as tampas semiabertas, para que a esterilizao seja por igual em todo o contedo dos tubos - tampas fechadas
no permitem a entrada do vapor.
gar nutriente (AN)
Meio relativamente simples, de fcil preparo e barato, muito usado nos procedimentos do
laboratrio de microbiologia.

Utilidade: anlise de gua, alimentos e leite como meio para cultivo preliminar das amostras
submetidas exames bacteriolgicos e isolamento de organismos para culturas puras,
conservao e manuteno de culturas em temperatura ambiente, como mtodo opcional para os
laboratrios que no dispem do mtodo da criopreservao (congelamento das cepas em freezer
- 70C) e observao da esporulao de espcies de bacilos Gram positivos.
66

Interpretao:
Cor original do meio: branco opalescente
Positivo: Crescimento na superfcie do gar;
Negativo: Ausncia de crescimento.
gar sangue (AS)

O meio, usando uma base rica, oferece timas condies de crescimento a maioria dos
microrganismos. A conservao dos eritrcitos ntegros favorecem a formao de halos de
hemlise ntidos, teis para a diferenciao de Streptococcus spp. eStaphylococcus spp.
Utilidade: isolamento de microrganismos no fastidiosos, verificao de hemlise dos
Streptococcus spp. eStaphylococcus spp. e usado na prova de satelitismo (para identificao
presuntiva de Haemophilus spp.).

Interpretao:
Cor original do meio: vermelho.
Beta hemlise: presena de halo transparente ao redor das colnias semeadas (lise total dos
eritrcitos).
Alfa hemlise: presena de halo esverdeado ao redor das colnias semeadas (lise parcial dos
eritrcitos).
Gama hemlise (sem hemlise): ausncia de halo ao redor das colnias (eritrcitos permanecem
ntegros).

gar chocolate (CHOC)

Amplamente utilizado para o cultivo de microrganismos exigentes, embora cresam neste


meio quase todos os tipos de microrganismos. base do meio, adicionado sangue de cavalo,
carneiro ou coelho em temperatura alta, o que faz com que as hemcias lisem, liberando hemina e
hematina, compostos fundamentais para o crescimento dos microrganismos exigentes.

Utilidade:

crescimento de

microrganismos exigentes

Branhamellacatarrhalis e Moraxella spp.


Interpretao:
67

Haemophilus

spp.,Neisseria

spp.,

Cor original do meio: castanho escuro (chocolate).


Colnias de tamanho pequeno a mdio, com pigmento amarelo: sugestivo de Neisseriaspp,
Branhamellacatarrhalis ou Moraxella spp.
Colnias pequenas e delicadas, com pigmento creme claro: sugestivo de Haemophilus spp.
gar MacConkey (MC)

O cristal violeta inibe o crescimento de microrganismos Gram positivos especialmente


enterococos e estafilococos. A concentrao de sais de bile relativamente baixa em comparao
com outros meios, por isso no to seletivo para Gram negativos como, por exemplo, o gar SS.

Utilidade: isolar bacilos Gram negativos (enterobactrias e no fermentadores) e verificar a


fermentao ou no da lactose.
Interpretao:
Cor original do meio: rosa avermelhado.
Crescimento de bacilos Gram negativos.
Colnias cor de rosa: fermentadoras de lactose.
Colnias incolores: no fermentadoras de lactose.
No h crescimento de cocos Gram positivos.

gar Salmonella-Shigella (SS)

Possui componentes (sais de bile, verde brilhante e citrato de sdio) que inibem
microrganismos Gram positivos. A incorporao de lactose ao meio permite diferenciar se o
microrganismo lactose positiva (bactrias que fermentam a lactose produzem cido que na
presena do indicador vermelho neutro resultando na formao de colnias de cor rosa), e
bactrias que no fermentam a lactose formam colnias transparentes. Tissulfato de sdio e o
citrato frrico permitem a deteco de HS evidenciado por formao de colnias de cor negra no
centro.

Utilidade: selecionar e isolar espcies de Salmonella e Shigella, em amostras de fezes, alimentos


e gua.

Interpretao:
Cor original do meio: vermelho alaranjado.
68

Colnias com centro negro (HS) ou colnias incolores: suspeita de Salmonella.


Colnias incolores: suspeita de Shigella spp.
Colnias cor de rosa ou vermelho: suspeita de Escherichia coli ou Klebsiella spp.
As bactrias no fermentadoras de lactose so incolores.
As bactrias fermentadoras de lactose aparecem na cor rosa.

gar Cystine Lactose ElectrolyteDeficient (CLED)

Usado para isolamento e quantificao de microrganismos presentes em amostras urina. A


deficincia de eletrlitos inibe o vu de cepas de Proteus.
Utilidade: isolar e quantificar microrganismos Gram positivos, Gram negativos e leveduras.

Interpretao:
Cor original do meio: azul claro.
Colnias lactose positiva: cor amarela.
Colnias lactose negativa: cor azul.

gar Thayer-Martin Chocolate (TM)

um meio rico e superior a outros meios de cultivo destinados para o isolamento de


Neisseriagonorrhoeae e Neisseriameningitidis, pois contm em sua frmula antibiticos que
inibem o crescimento de Neisseriassaprfitas e outras bactrias, quando em amostras colhidas de
stios contaminados.
Utilidade: usado para o isolamento seletivo de Neisseriagonorrhoeae e Neisseriameningitidis, a
partir do material de investigao.

Interpretao:
Cor original do meio: marrom-chocolate
Colnias pequenas e opacas: suspeita de Neisseriagonorrhoeae e Neisseriameningitidis.

gar Saboraud (AS)

69

Meio com nutrientes que favorece o crescimento de diversos fungos leveduriformes e


filamentosos.
Utilidade: cultivo e crescimento de espcies de Candidas e fungos filamentosos, particularmente
associados a infeces superficiais e caracterizao macroscpica do fungo filamentoso (colnia
gigante).

Interpretao:
Cor original do meio: amarelo claro opalescente.
Aps o crescimento, deve-se seguir a identificao do microrganismo que cresceu.

gar verde brilhante (BG)

O extrato de levedura e duas peptonas fornecem os nutrientes; a lactose e a sacarose,


juntamente com o vermelho de fenol, fornecem um sistema de diferenciao que exclui os
fermentadores da lactose e/ou sacarose (ex: E. coli), enquanto que as salmonelas no produzem
cido a partir destes acares.
Utilidade: isolamento de outras salmonelas que no sejam as S. Typhi, existentes nas fezes e em
outros materiais.

Interpretao:
Cor original do meio: castanho
Colnias brancas a vermelhas rodeadas por zonas vermelhas: suspeita de Salmonella spp.
ouProteus spp.
Colnias amarelas a esverdeadas rodeadas por zonas amarelo-esverdeadas: suspeita de
Escherichia coli, Klebsiella spp. ouEnterobacter spp.

gar Mueller-Hinton (MH)

Meio padronizado por Kirby e Bauer e pelo CLSI que oferece condies de crescimento
das principais bactrias.

70

Utilidade: realizao do teste de avaliao da resistncia aos antimicrobianos pelos mtodos de


difuso em disco e E-test para enterobactrias, no fermentadores, Staphylococcus,
Enterococcussp.
Interpretao:
Cor original do meio: amarelo palha.
A zona do dimetro particular para cada antibitico e organismo, sendo comparado com
dimetros padronizados pelo CLSI, que determina cada microrganismo sendo sensvel,
intermedirio ou resistente.

COLORAO DE GRAM
A colorao de Gram recebeu este nome em homenagem a seu descobridor, o mdico
dinamarqus Hans Cristian Joaquim Gram. Em 1884, Gram observou que as bactrias adquiriram
cores diferentes, quando tratadas com diferentes corantes. Isso permitiu classific-las em dois
grupos distintos: as que ficavam roxas, que foram chamadas de Gram-positivas, e as que ficavam
vermelhas, chamadas de Gram-negativas.
Princpio: Nas bactrias Gram-positivas a parede celular formada principalmente por cidos
teicicos e nas bactrias Gram-negativas, formada principalmente por lipdeos. Por possurem
grande quantidade de cidos teicicos, aps a colorao, as Gram-positivas formam um complexo
corado azul intenso, que no removido facilmente com lcool-acetona. As Gram-negativas no
retm a colorao aps o tratamento com lcool-acetona e so reveladas posteriormente com
soluo de fucsina ou safranina, apresentando-se na colorao avermelhada.

Procedimento:

1. Cubra o esfregao com cristal violeta e deixe por aproximadamente 1 minuto;


2. Escorra o corante e lave em um filete de gua corrente;
3. Cubra a lmina com lugol e deixe agir por aproximadamente 1 minuto;
4. Escorra o lugol e lave em um filete de gua corrente;
5. Adicione lcool-acetona sobre a lmina; descorando-a, at que no desprenda mais corante;
6. Lave em um filete de gua corrente;
71

7. Cubra a lmina com safranina e deixe agir por aproximadamente 30 segundos;


8. Lave em um filete de gua corrente;
9. Deixe secar ao ar livre;
10. Coloque uma gota de leo de imerso sobre o esfregao;
11. Leia em objetiva de imerso (100 X).

Cocos Gram Positivos

As bactrias Gram-positivas, especialmente os cocos, esto entre os microrganismos mais


freqentemente isolados de amostras biolgicas humanas em laboratrios de microbiologia.

Staphylococcus
So geralmente encontrados na pele e mucosas do homem e de outros animais. Muitas
espcies so isoladas de partes especficas do corpo humano ou de certos animais, por
exemplo: S. auricularis encontrado como parte da microbiota humana do conduto auditivo e S.
hyicus causando dermatite infecciosa em sunos. Os estafilococos so cocos Gram-positivos,
podem se apresentar isolados ou aos pares, em cadeias curtas ou agrupados. O aspecto
macroscpico da colnia em meio slido, presena de pigmento e hemlise em gar sangue de
carneiro so caractersticas auxiliares na identificao destes microrganismos. So imveis,
anaerbios facultativos, no formadores de esporos e produtores de catalase.
Rotineiramente, o teste da catalase utilizado para diferenciar os estafilococos (catalase
positiva) dos estreptococos (catalase negativa). Entretanto, existem relatos na literatura
de Staphylococcus aureuscatalasenegativa relacionados a processos infecciosos, embora raros,
descritos em vrios pases, inclusive no Brasil. A catalase constitui um mecanismo de defesa para
a bactria contra clulas fagocitrias, porm no um fator essencial para a sobrevivncia do S.
aureus.
A identificao da espcie de estafilococos baseada em uma variedade de
caractersticas fenotpicas convencionais. As espcies mais importantes do ponto de vista clnico
podem ser identificadas com algumas provas especficas, como pigmentao da colnia, estafilocoagulase, fator clumping ou fator de agregao, prova da desoxiribonuclease, resistncia
novobiocina, fermentao do manitol, entre outras. A habilidade de coagular o plasma continua
sendo o critrio mais aceito e utilizado para identificar estafilococos patognicos associados com

72

infeces agudas, em geral, S. aureus em humanos e animais e S. intermedius e S. hyicus em


animais.
Os estafilococos esto entre os agentes mais freqentemente relacionados a enfermidades
humanas. Os processos infecciosos mais comuns incluem:

Pneumonias;

Bacteremias;

Infeces de pele e tecidos moles;

Infeces relacionadas ao uso de prteses e cateteres venosos;

Meningites.

Streptococcus
As bactrias do gnero Streptococcus so capazes de causar diversas doenas nos seres
humanos. Dentre as mais freqentes esto as infeces do trato respiratrio, pele e tecidos
moles, endocardites, sepse e meningites. Streptococcuspneumoniae, o pneumococo, um dos
agentes que mais freqentemente causam doenas invasivas graves, como meningite e
bacteremia.
Os estreptococos, da famlia Streptococcaceae so caracterizados como cocos Grampositivos, anaerbios facultativos, no produtores de catalase e de citocromo-oxidase. Os
estreptococos com relevncia clnica so homofermentadores, sendo o cido ltico o produto final
da fermentao da glicose. Podem produzir hemolisinas, e os tipos de reao hemoltica em meio
slido contendo 5% de sangue de carneiro, descritos a seguir, tm sido utilizados na classificao
de estreptococos.
Alfa-hemlise ( ): caracterizada por uma hemlise parcial, associada com a perda parcial de
hemoglobina pelas hemcias, ocorrendo uma zona cinza-esverdeada no meio de cultura ao redor
da colnia. Streptococcuspneumoniae caracteriza-se por produzir este tipo de hemlise.

Beta-hemlise ( ): caracterizada pela lise completa das hemcias que rodeiam a colnia,
ocorrendo uma zona transparente (zona de lise total) ao redor da colnia. Os estreptococos com
esta caracterstica so denominados beta-hemoliticos.
Gama-hemlise ( ): caracterizada pela ausncia de hemlise. Cepas desses microrganismos
no hemolticos, ou d-hemolticos, no causam modificao no meio de gar sangue de carneiro.

73

Os estreptococos requerem meios ricos para o crescimento in vitro e algumas cepas


dependem do CO2 para o seu isolamento a partir de material clnico (isolamento primrio).

S. pyogenes
Esta espcie pertence ao grupo A de Lancefield, so colnias -hemolticas, com
vrios fatores de virulncia. Podem causar faringites, infeces respiratrias,
impetigo, erisipela, endocardites, meningites e artrites. Infeces por cepas
produtoras de toxinas podem causar a febre escarlatina e choque txico.
A faringite por S. pyogenes comum e pode evoluir com seqelas como febre
reumtica e glomerulonefrite aguda.

S. agalactiae
Esta espcie -hemoltica, pertence ao grupo B de Lancefield. Podem causar
infeces graves em neonatologia, como sepse e meningite. A deteco deste
patgeno no trato genital e/ou gastrointestinal de parturientes pode identificar um
risco para infeco dos recm-nascidos e guiar a terapia antimicrobiana intra-parto.
Algumas condies (neoplasias, imunodeficincias e diabetes mellitus) podem
predispor adultos a infeces por este patgeno como bacteremia, endocardite,
infeces de pele e tecidos moles, pneumonia e osteomielites.

Streptococcus do grupo viridans


Este grupo de bactrias faz parte da microbiota normal da cavidade oral, trato
gastrointestinal e trato genital, e freqentemente so considerados contaminantes
quando isolados de hemoculturas. Entretanto sua presena pode estar associada a
endocardite subaguda, especialmente em portadores de prteses valvares,
sendo S. sanguis, S. mitis, S. oralis e S. gordonii os agentes mais encontrados. S.
mutans e S. sobrinus so espcies isoladas de placas dentrias e cries.

BACILOS GRAM-NEGATIVOS

A famlia Enterobacteriaceae contm a maioria dos bacilos Gram- clinicamente


Importantes. Apesar da sua complexidade menos de 20 espcies so responsveis por cerca de
95% das infeces.

74

Encontram-se no solo, na gua, na vegetao e fazem parte da flora intestinal normal de


muitos animais, incluindo os humanos. So responsveis por cerca de 30-35% de todas as
septicemias, por mais de 70% das infeces do trato urinrio e por muitas das infeces
intestinais.

Salmonella

Gnero Salmonella com duas espcies: Salmonella entrica e Shingellabongori.


O seu aparecimento no homem sempre patognico. A transmisso atravs da ingesto
de gua ou alimentos contaminados. Os serotipos S. typhi e S. paratyphi esto altamente
adaptados a humanos e no provocam doena em hospedeiros no humanos. Outros serotipos
s provocam doena em hospedeiros no humanos, j outros serotipos no so especficos
quanto

ao

hospedeiro.

- Possuem 2 sistemas de secreo SPI1 e SPI2. SPI1 insere nas clulas M das placas de Peyer
do intestino delgado as protenas bacterianas Sips ou Ssps, do que resulta um pregueamento da
membrana celular por rearranjo da actina. Esta membrana pregueada envolve a bactria e
captura a Salmonella, que se replica no interior do fagossoma, levando a morte da clula
hospedeira, e espalhando-se para invadir as clulas vizinhas;

Mediam a produo de prostaglandinas e estimulam a andenilciclase levando a secreo


activa;

Possuem um gene de tolerncia ao cido (ATR), o que lhes permite sobreviver ao pH


cido do estmago e do fagossoma;

So catalase e superoxidodismutase positivas, o que lhes permite resistir morte


intracelular.Geralmente so mveis, produzem cido e gs a partir de glicose a manitol,
so urease negativas, so lactose e sacarose negativas, geralmente produzem H2S, ss
seus antigenios capsulados so do tipo VI.

Provas bioqumicas de excluso:

colnias lactose negativas com H2S

Kliger + ureia (KU) ou TSI + ureia


Podem provocar:
75

gastroenterite (geralmente por S. typhimurium e S. enteritidis, que so salmonelas adaptas


aos animais mas que acidentalmente afectam o homem): hemoculturas negativas,
coprocultura (sementeira em meios selectivos MAC, SS, caldo tetrationato pois as
bactrias patognicas esto em minoria no meio da flora intestinal);

septicemia (sobretudo as espcies S. typhi, S. paratyphi e S. cholerasuis, sendo este risco


mais elevados em crianas, idosos e imuno-deprimidos);

colonizao assintomtica;

febre entrica (febre tifide, causada pela S. typhi; febre paratifide, causada pela S.
paratyphi, S. schottmuelleri, S. hirschfeldii; ao contrrio das outras infeces por
Salmonella, as bactrias responsveis pela febre entrica passam atravs das clulas
epiteliais do intestino e so capturadas por macrfagos, multiplicando-se aps serem
transportadas para o fgado, bao e medula ssea).

Diagnstico: hemocultura (durante a primeira semana, na primeira fase da doena,


quando as bactrias andam em circulao antes de entrar nas placas de Peyer e no sistema
mononuclear-monoctico); reao de Widal (na segunda semana; pesquisa de anticorpos antiantignios O, H e Vi); Coprocultura (comprovao da cura, vo sendo eliminadas pelo trato
intestinal; portador da bactria aquele que continua a eliminar a bactria aps um ano de ter
tido a doena).

Shigella
Gnero Shigella com quatro espcies: S. dysenteria, S.flexneri, S. boydii, S. sonnei.
Quando presente sempre patognica, sua transmisso atravs de gua contaminada, comida,
mosca, pessoa a pessoa (via oral fecal). S sonney a causa mais comum de shigelose no mundo
industrial, ao passo que S. flexneri a causa mais comum de shigelosenos pases em
desenvolvimento. Geralmente limitada ao tratogasto-intestinal (raramente invade o sangue).
Inicialmente invadem clulas M das Placas de Peyer do Intestino delgado. Sistema de secreo
tipo III que introduz nas clulas epiteliais e nos macrfagos 4 tipos de protenas: IpaA, IpaB, IpaC
e IpaD. Estas protenas induzem o pregueamento da membrana clulas, capturando a bactria no
interior da clula. A shigella lisa o vacolo fagoctico e replica no interior do citoplasma da clula
hospedeira, usando os filamentos de actina para se movimentar e passar para clulas vizinhas
atravs de junes de hiato. Assim, a Shigella est protegida do sistema imunitrio. A Shigella
induz apoptose das clulas, induzindo a libertao de IL-1, atraindo polimorfonucleados,
distabilizando a integridade da parede intestinal e permitindo bactria atingir clulas epiteliais
76

localizadas

mais

profundamente.

A S. dysenteria produzem a exotoxina Shiga, que actua de modo semelhante s


produzidas pela EHEC: Inicialmente provoca diarria, mediado pela enterotoxina, evoluindo para
dores severas no estmago e tenesmo com abundante pus e sangue nas fezes.

Diagnstico: coprocultura, sementeira em meios seletivos (MAC, SS), kliger + ureia ou


TSI + ureia.
Yersinia
O gnero Yersinia contm 11 espcies, sendo que a Y. pestis, Y. enterocolitica e Y.
pseudotuberculosis so as espcies patognicas para humanos mais conhecidas. A Y. pestis
altamente virulento causando doena sistmica com elevada taxa de mortalidade. A Y.
enterocolitica e Y. pseudotuberculosis so principalmente patognios entricos e que raramente
se isolam do sangue. So intracelulares facultativas, invadem clulas epiteliais, macrfagos e
sistema monoctico-fagocitrio.
As espcies patognicas do gnero Yersinia so resistentes morte por fagocitose atravs
do seu sistema de secreo do tipo III: em contacto com as clulas fagocticas as bactrias
secretam protenas para o interior da clula fagoctica que desfosforilam vrias protenas
necessrias fagocitose (gene YopH), induzem citotoxicidade ao romper filamentos de actina
(gene YopE) e iniciam a apoptose em macrfagos (gene YopJ/P). O sistema de secreo tipo III
tambm suprime a produo de citocinas, diminuindo assim a resposta inflamatria infeco. A
Y. pestis contm dois plasmdeos adicionais que codificam genes de virulncia: gene F1 que
codifica uma cpsula proteica anti-fagoctica e o gene do ativador do plasminognio (Pla), que
degrada os fatores do complemento C3b e C5a, impedindo, deste modo, a opsonizao e a
migrao fagoctica, respectivamente.
As manifestaes clnicas da Y. pestis so a Peste Buvnica (por picada de mosca,
originando febre alta e adenopatias) e a Peste Pneumnica (inicialmente com febre e mal estar
mas posteriormente com sintomatologia pulmonar, podendo o contgio ocorrer de pessoa para
pessoa atravs de aerossis).
Cerca de dois teros das infeces por Y. enterocolitica so enterocolites, originando febre,
diarria e dor abdominal, envolvendo sobretudo o leo terminal e com adenopatia dos ndulos
linfticos mesentricos, podendo mimetizar uma apendicite aguda. A Y. pseudotuberculosis pode

77

originar um quadro clnico semelhante. Os organismos Yersinia podem crescer a 4C, podendo,
por isso, crescer em meios ricos em produtos de sangue armazenados no frigorfico.

Concluso

Conclui-se que a microbiologia essencial para o diagnostico de varias infeces, com o


diagnostico correto possvel auxiliar e acelerar no tratamento do individuo.

78

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

Disponvel em: http://www.vacuette.com.br/download/Guia_de_Coleta_de_Sangue.pdf.


Acesso em: 20/10/2014.
Disponvel em: http://www.aa.med.br/upload/biblioteca/Manual%20de%20Hematologia.pdf.
Acesso em: 20/10/2014.
Disponvel em: http://www.biomedicinapadrao.com/2011/09/contagem-global-de-leucocitos.html.
Acesso em: 20/10/2014.
Disponvel em: http://www.labes.com.br/hemograma_completo.htm.
Acesso em: 20/10/2014.
Disponvel em:
http://www.parasitologiaclinica.ufsc.br/index.php/info/conteudo/doencas/helmintoses/teniase/.
Acesso em: 20/10/2014.
Disponvel em:
http://www.ciencias.seed.pr.gov.br/modules/galeria/detalhe.php?foto=2029&evento=3.
Acesso em: 22/10/2014.
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Disponvel em: http://www.wamadiagnostica.com.br/bulas/imuno-hai/Chagas-1.pdf.
Acesso em: 22/10/2014.
Disponvel em: http://www.wamadiagnostica.com.br/bulas/imuno-hai/Toxoplasmose-1.pdf.
Acesso em: 22/10/2014.
Disponvel em: http://www.wamadiagnostica.com.br/bulas/imuno-hai/tpha-sifilis-1.pdf.
Acesso em: 22/10/2014.
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Acesso em: 26/10/2014.

79

Disponvel em:
http://www.anvisa.gov.br/servicosaude/controle/rede_rm/cursos/boas_praticas/modulo4/intrsta.htm
Acesso em: 26/10/2014.
Disponvel em: http://www.labtest.com.br/reagentes
Acesso em: 05/11/2014.
Disponvel em: http://saudedofuturo.blogspot.com.br/2012/02/entamoeba-coli-e-entamoebahistolytica.html
Acesso em: 05/11/2014.
Disponvel em: http://repositorio.ipv.pt/handle/10400.19/1462
Acesso em: 05/11/2014.

80

DESCRIO DO MATERIAL - BIOMEDICINA - ESTGIO


Agar Triptona, Glicose, Extrato de Carne - Embalagem 250 gr
Agulha Hipodermica Descartvel 20 X 5,5 - c/ 100
Agulha Hipodermica Descartvel 25 X 7 c/ 100
Agulha Hipodermica Descartvel 30 X 7 c/ 100
Agulha p/ Coleta de Sangue Mltipla Vacutainer 25 X 7 - c/ 100
Ala de Platina (5cm X 5cm)
Alcool 70
Algodo em Rolete ##
Algodo Hidrofilo 500 grs ##
Cloreto de Sdio - Embalagem 500 gr
Coletor de Urina Universal
Conta Gotas de Plstico
Corante Leishman (Sol.Eosina Azul de Metileno- Leishman) - c/1L
Descarpack 03 Litros - C/ 20 unidades ##
Descarpack 13 Litros - C/ 20 unidades ##
Detergente p/ Vidraria de Laboratrio
Disco p/ Antibiograma Amoxilina
Disco p/ Antibiograma Ampicilina
Disco p/ Antibiograma Cefalexina - c/ 50
Disco p/ Antibiograma Cloranfenicol
Disco p/ Antibiograma Eritromicina
Disco p/ Antibiograma Estreptomicina
Disco p/ Antibiograma Gentamicina
Disco p/ Antibiograma Imipenen
Disco p/ Antibiograma Norfloxacina
Disco p/ Antibiograma Novobiocina
Disco p/ Antibiograma Oxacilina
Disco p/ Antibiograma Penicilina
Disco p/ Antibiograma Sulfonamida + Trimetroprim
Disco p/ Antibiograma Vancomicina
Esparadrapo Cirurgico Microporo - Larg 5 cm
81

Estanca Sangue ##
Fita Adesiva Hospitalar p/ Autoclave
Fita Reativa p/ Uroanalise - dosagem 10 elementos
Frasco c/ Tiras Teste Glicemia Ap GTECH Free
Fucsina p/ Gram
Garrote Tripa de Mico Latex - GROSSO
Gaze 8 Dobras (Compressa 7,5X7,5cm) 9 Fios c/500 Umed Brisa ##
Gaze 9 Fios 10 CM Larg e 50 CM Compr (Tipo Queijo)
Gorro Descartvel (Amarrar) Masc. - c/ 100 unidades ##
Heparina Sdica 5 ML - c/ 5
Hipoclorito de Sdio ( 10% - 12%) - Embalagem 1 Litro
Hipoclorito de Sdio ( 5% - 6%)
KIT Corante Hematolgico
KIT Corante p/ Gram - Cecon
KIT Corante Zihel - Neelsen
KIT p/ Det.de cido rico - Colorimtrico
KIT p/ Det.de Albumina - Colorimtrico
KIT p/ Det.de Amilase - Enzimtico
KIT p/ Det.de Bilirrubina D (Direta) - Colorimtrico
KIT p/ Det.de Bilirrubina F (Fraes) - Colorimtrico
KIT p/ Det.de Calcio - Colorimtrico
KIT p/ Det.de Capacidade de Ligao de Ferro - Colorimtrico
KIT p/ Det.de CK/ CPK (Fosforo Quinase) - Colorimtrico
KIT p/ Det.de Cloreto - Colorimtrico
KIT p/ Det.de Colesterol HDL - Labtest - Colorimtrico
KIT p/ Det.de Colesterol Total Enz-Colorim
KIT p/ Det.de Creatinina Merck - 117119910022 - Diasys Colorimtrico
KIT p/ Det.de DHL (Desidrogenase Latica) - Colorimtrico
KIT p/ Det.de Dosagem de Glicose Serica
KIT p/ Det.de Fator Reumatoide - Latex
KIT p/ Det.de Ferro Srrico - Colorimtrico
KIT p/ Det.de Fosfatase cida - Colorimtrico
KIT p/ Det.de Fosfatase Alcalina - Colorimtrico
KIT p/ Det.de Fosforo (Colorimetrico)
KIT p/ Det.de Gama GT - Enzimatico Ref.105-2/ 250 - Labtest
KIT p/ Det.de Glicose Ref. 84-2/250 - Labtest - Colorimtrico
KIT p/ Det.de Hema - Cruzi - Biolab
82

KIT p/ Det.de Hema-Toxo Hemaglutinaao Toxoplasmose-Biolab


KIT p/ Det.de Hemoglobina Glicosada - Labtest - Colorimtrico
KIT p/ Det.de Hemoglobina Reagente de Cor Cat 43
KIT p/ Det.de IL-4 e IFN Gama
KIT p/ Det.de Lactato
KIT p/ Det.de Latex Proteina C-Reativa
KIT p/ Det.de Lipase - Colorimtrico
KIT p/ Det.de Lipidios Totais - Colorimtrico
KIT p/ Det.de Magnsio - Colorimtrico
KIT p/ Det.de Padrao Hemoglobina - Labtest - Colorimtrico
KIT p/ Det.de Proteinas Fraes - Colorimtrico
KIT p/ Det.de Proteinas Totais Labtest Cat. 18 - Colorimtrico
KIT p/ Det.de Rugai com Lisina
KIT p/ Det.de Teste p/ Toxoplasmose IGG In Vitro
KIT p/ Det.de Teste p/ Toxoplasmose IGM In Vitro
KIT p/ Det.de TGO - AST - Labtest - Colorimtrico
KIT p/ Det.de TGP - ALT - Labtest - Colorimtrico
KIT p/ Det.de Transaminase Oxalacetica
KIT p/ Det.de Triglicerides Totais/ Enzimatico
KIT p/ Det.de Ureia - Enzimtico
KIT p/ Deteco de IGG Humana
KIT p/ Dosagem de Beta-HCG - Metodo Qualitativo
KIT p/ Teste de Gravidez na Urina - Teste Latex
KIT p/ Teste de Hemoglobina Glicosada - Colorimtrico
KIT p/ Teste de VDRL (Sorologia Sifilis)
KIT Soro Anti-Salmonellla
Lmina p/ Bisturi N 11- c/ 100 unidades
Lmina p/ Microscopia 26X76 MM c/ Borda Fosca Lapidada
Laminula 18X18 MM p/ Microscopia - c/ 100
Laminula 24X24 MM - p/ Microscopia
Laminula 24x32 MM
Laminula 24X50 MM
Laminula de Cristal Espelhada p/ Cmara de Newbauer
Laminula de Cristal p/ Cmara de Newbauer
Lanceta p/ Aparelho Accu-Check - c/ 200
Leno de Papel Absorvente
Lquido de Drabkin - c/ 1 L
83

Lquido de Turk - Embalagem 1 Litro


Lugol - Embalagem 1 Litro
Lugol p/ Tcnica de Gram
Luva Procedimento c/ Talco Tam.G c/100-Super Max/Embramac ##
Luva Procedimento c/ Talco Tam.M c/100-Super Max/Embramac ##
Luva Procedimento c/ Talco Tam.P c/100-Super Max/Embramac ##
Mscara Descartvel c/ Elstico - c/ 50 (Best Fabril) ##
Meio de Cultura Agar Bacteriolgico - c/ 500 gr
Meio de Cultura Agar Base Sangue Columbia Cm331 - c/ 500 gr
Meio de Cultura Agar Caseina Soja c/ 500 gr
Meio de Cultura Agar Cled - c/ 250 gr
Meio de Cultura Agar Mac Conkey c/ 250 gr
Meio de Cultura Agar Manitol - c/ 250 gr
Meio de Cultura Agar Muller Hinton - c/ 500 gr
Meio de Cultura Agar Sangue - c/ 250 gr
Meio de Cultura Agar SS Agar Agar - c/ 500 gr
Meio de Cultura BHI - c/ 500 gr
Meio de Cultura Caldo Tryptic Soy - c/ 500 gr
Meio de Cultura EC (Escherichia) - c/ 500 gr
Meio de Cultura Rugai
Meio de Cultura Tioglicolato c/ 500gr
Microtubo (Eppen Dorfs) 1,5 ML - Pct. c/ 100
Padro de Bilirrubina-Embalagem 1 gr CAT.32-Labtest
Papel Alumnio
Papel Filme Plstico (Magipack) - c/30 CM
Papel Filtro Qualitativo 11MM - c/ 100 fls
Papel Filtro Qualitativo 40X40 CM - c/ 100 Fls
Papel Kraft 100 CM (Rolo Papel Pardo)
Papel Manteiga - 50 x 70
Papel Universal de PH c/ 100 Tiras (Medidor)
Parafilm
Pipeta Pasteur Plstica 3 ML - c/500
Pipeta Sorolgica Estril (Embalada uma a uma) de 10 ML
Pipeta Sorolgica Estril (Embalada uma a uma) de 2 ML
Pipeta Thoma
Placa de Petri de Plstico Esteril Descartvel 90x15MM C/ 20
Plasma Controle Normal p/TP TTPA (Protombina e Tromboplastina)
84

Ponteira p/ Micropipeta Automtica 100-1000 UL


Ponteira p/ Pipeta Automtica Desc (1-5 UL)
Ponteira p/ Pipeta Automtica Desc. (0-200 UL)
Saco Plstico Branco Hosp.100 Lts- Lixo Especial c/ 100
Saco Plstico Branco Hosp.15 Lts-Lixo Especial c/ 100 ##
Saco Plstico Branco Hosp.50 Lts-Lixo Especial c/ 102 ##
Scalpe N 23 ##
Scalpe N 25 ##
Seringa Descartvel 03 ML s/Agulha-c/100 unid-B-D ##
Seringa Descartvel 05 ML s/ Agulha-c/100 unid-B-D ##
Seringa Descartvel 10 ML s/ Agulha-c/100 unid-B-D ##
Seringa Descartvel de Insulina c/ Agulha Removvel-B-D ##
Soluo Tampo p/ PH7 - Embalagem 500 ML
Soro Anti E - Coli Enteroinvasora A
Soro Anti E - Coli Enteroinvasora B
Soro Anti E - Coli Enteropatogenica Classica A
Soro Anti E - Coli Enteropatogenica Classica B
Soro Anti E - Coli Enteropatogenica Classica C
Soro Controle Normal - Trulab GD 6x5ml
Soro Controle Patologico - Trulab GD 6x5ml
Soro Coombs - c/ 10 ML
Soro Fisiologico 0,9% - 10 ML - Ampola cx c/ 200
Soro Fisiologico 0,9%-Cloreto de Sdio 250 ML c/Tampa Rosca
(frasco)
Soro p/ Tipagem Sangunea Anti-A
Soro p/ Tipagem Sangunea Anti-B
Soro p/ Tipagem Sangunea Anti-D
Soro p/ Tipagem Sangunea Anti-O
Soro p/ Tipagem Sangunea Anti-RH
Sorologia p/ Identificao Streptococcus
Swab Estreis
Touca Descartvel Feminina c/ elstico-c/ 100 ##
Tubo Capilar p/ Micro Hematcrito c/ Heparina
Tubo Capilar p/ Micro Hematcrito s/ Heparina - c/ 500
Tubo Vacutainer c/ Heparina 5 ML
Tubo Vacutainer p/ Coagulograma - Tampa Azul 4,0 ML
Tubo Vacutainer p/ Glicose - Tampa Cinza 4,0 ML
85

Tubo Vacutainer p/ Hemograma 4,5 ML - Tampa Roxa


Tubo Vacutainer p/ Soro 10 ML - Tampa Amarela
Tubo Vacutainer p/ Soro 10 ML - Tampa Vermelha
Tubo Vacutainer s/ Anticoagulante 10 ML
Violeta Genciana p/ GRAM

86

GUIA DE BIOSSEGURANA
LABORATRIO ESCOLA DE
ENFERMAGEM E CLNICA

INSTITUTO DE CINCIAS DA SADE

UNIVERSIDADE PAULISTA UNIP


- LABORATRIOS / CLNICAS DA SADE -

GUIA DE BIOSSEGURANA

87

88

Histrico

ELABORAO
Responsabilidade

Nome

Setor

Alessandra

C.

Assinatura

Demarchi

(Enfermeira
Clnica
Enfermagem/UNIP) Campinas

de

Elaborao

I.C.S
Mrcia M. Tivelli Moraes
(Enfermeira
Clnica
Enfermagem/UNIP) Campinas

Data da Elaborao

de

02/03/2009

APROVAO
Responsabilidade

Nome

Setor Assinatura

89

Aprovao

Coordenao Laboratrios

Enc. Geral dos


Clnicas da Sade
Coordenao Geral
Do Curso de
Enfermagem

Labs.

Prof Renata Ghiringhello

e Rita Cludia Mendes Abdalla I.C.S.

Prof Dr Raquel Machado


Cavalca Coutinho.

90

SUMRIO

1. INTRODUO ........................................................................................................................... 92
2. DEFINIES .............................................................................................................................. 92
3. PROCEDIMENTOS (ANEXO I) .................................................................................................. 93
4. ESTOCAGEM E CONSERVAO DO MATERIAL ESTERILIZADO ...................................... 94
5. PROCEDIMENTOS DE ANTISSEPSIA ..................................................................................... 94
6. EQUIPAMENTO DE PROTEO INDIVIDUAL E.P.I . (ANEXO II) ........................................ 94
7. CUIDADOS COM MATERIAL DESCARTVEL ........................................................................ 96
8 CONDUTAS APS ACIDENTE COM MATERIAL BIOLGICO (ANEXO III) ......................... 96
9 NOTIFICAO DO ACIDENTE (ANEXO IV) ........................................................................... 97
10 - ANEXO I: TIPO DE MATERIAL E MTODO PARA PROCESSAMENTO DE
ARTIGOS ..................................................................................................................................... 101
11 - ANEXO II: MATERIAL E PROCEDIMENTO INDICADO PARA USO DE
EQUIPAMENTO DE PROTEO INDIVIDUAL (EPI) ................................................................. 102
12 - ANEXO III FLUXOGRAMA DE ACIDENTE BIOLGICO .................................................. 103
13 ANEXO IV FORMULRIO P/ NOTIFICAO DE ACIDENTE BIOLGICO .................... 105

91

MANUAL DE BIOSSEGURANA
1. INTRODUO
O risco de se contrair infeces nos atendimentos em clnicas de sade est
diretamente ligado ao fato de se negligenciar as condutas de biossegurana que devem
nortear estes estabelecimentos.
A segurana da equipe de sade, bem como a do paciente, deve ser preservada
sempre e da maneira mais conveniente possvel.
No exerccio da profisso, os integrantes da equipe de sade esto sob risco
constante de contrair doenas.

2. DEFINIES

I LIMPEZA E/OU DESCONTAMINAO:


a remoo mecnica e/ou qumica da sujidade para a remoo de resduos
orgnicos, realizada anteriormente desinfeco e esterilizao;
II DESINFECO:
o processo de destruio de microorganismos em forma vegetativa, mediante a
aplicao de agentes qumicos e/ou fsicos;
III ESTERILIZAO:
o processo de todas as formas de vida microbiana, mediante a aplicao de
agentes fsicos e/ou qumicas;
IV ANTI-SEPSIA:
Procedimento que visa o controle de infeco a partir do uso de substncias
microbicidas ou microbiostticas de uso na pele ou mucosa;
V ARTIGOS CRTICOS:
So aqueles que penetram atravs da pele e mucosas, atingindo tecidos
subepiteliais;
92

VI ARTIGOS SEMICRTICOS:
So aqueles que entram em contato com a pele no ntegra ou com mucosas
ntegras;
VII ARTIGOS NO-CRTICOS:
So aqueles que entram em contato com a pele ntegra do paciente, apenas;
3. PROCEDIMENTOS (ANEXO I)

I DE LIMPEZA, DESINFECO E ESTERILIZAO:


Todos os equipamentos, instrumentais, materiais e utenslios utilizados nas clnicas
da sade tero OBRIGATRIAMENTE, que ser submetidos a processo de esterilizao,
desinfeco e/ou limpeza, de acordo com sua finalidade.
A limpeza deve ser realizada em todos os artigos no-crticos e nas superfcies como
pisos, paredes, portas, janelas e mveis,
A limpeza deve ser feita com frico mecnica, utilizando-se gua e sabo, conforme
indicao.
O processo de esterilizao deve ser utilizado para todos os artigos crticos e/ou
semi-crticos em uso nas clnicas da sade.
Os agentes fsicos so o meio mais eficiente, de menor toxidade e de menor custo
de esterilizao.
O processo de esterilizao, atravs do vapor saturado sob presso obtido com o
uso da autoclave, devendo ser observadas as seguintes relaes:
a-) exposio por 30 minutos temperatura de 121C, em autoclaves convencionais
(uma atmosfera de presso);
b-) exposio por 15 minutos a uma temperatura de 132C, em autoclaves
convencionais (uma atmosfera de presso);
c-) exposio por 04 minutos a uma temperatura de 132C, em autoclaves de auto
vcuo;
93

Obs.: o acondicionamento do material a ser esterilizado em autoclave deve ser feito


em pacotes individuais envolvidos por papel grau cirrgicos Kraft ou campo de tecido de
algodo duplo cru.
O processo de esterilizao pelo calor seco deve ser realizado atravs da estufa.
A estufa deve ter um termostato para manuteno efetiva da temperatura, rea
mnima para circulao interna do ar produzido e um termmetro de bulbo para controle
da temperatura preconizada.
Os artigos a serem esterilizados em estufa devero estar acondicionados de forma
adequada, observando-se o tempo de 1 (uma) hora de exposio a uma temperatura de
170C.
O instrumental necessrio para o funcionamento das clnicas da sade deve ser
compatvel com o processo de esterilizao adotado e o nmero de pacientes a serem
atendidos.

4. ESTOCAGEM E CONSERVAO DO MATERIAL ESTERILIZADO

O material esterilizado deve ser estocado em armrio fechado, limpo e seco e de


acesso exclusivo dos membros da equipe da sade.
Devem ser anotadas nos pacotes ou caixas a data da esterilizao e a data limite de
validade.

5. PROCEDIMENTOS DE ANTISSEPSIA

A lavagem das mos obrigatria para toda a equipe de sade;


Para secagem das mos devem ser utilizadas toalhas de papel descartveis.

6. EQUIPAMENTO DE PROTEO INDIVIDUAL E.P.I . (ANEXO II)

94

Para se evitar o risco de infeco ocupacional e de transmisso cruzada, durante o


atendimento, toda a equipe de sade dever observar a utilizao de equipamento de
proteo individual;
Os EPIs so de uso exclusivo ao local de atendimento.
As luvas devem ser obrigatoriamente usadas sempre que se manipule sangue,
saliva, mucosa ou pele de todos os pacientes, devendo ser trocadas aps o atendimento
de cada paciente;
As luvas para atendimento clnico devem ser de ltex e descartadas aps o uso;
A lavagem e descontaminao prvia dos artigos crticos e semi-crticos devem ser
realizadas com luvas de borracha resistente, utilizadas para esta nica finalidade;
O avental deve ser utilizado por todo pessoal de sade no atendimento de qualquer
paciente, devendo ser trocado diariamente ou sempre que ocorrer contaminao por
fluidos corpreos;
O uso do avental deve ser restrito exclusivamente ao local de atendimento;

95

7. CUIDADOS COM MATERIAL DESCARTVEL

Todas as agulhas utilizadas no atendimento devem ser obrigatoriamente,


descartveis;
A destinao de todo material perfuro cortante, tais como agulhas e lminas de
bisturi, deve ser feita em recipientes para perfurocortantes.
Todo material descartvel, luvas, entre outros, deve ser desprezado em sacos de lixo
com rtulo de contaminado, visto que proibida a reutilizao ou processo dos mesmos.

8 CONDUTAS APS ACIDENTE COM MATERIAL BIOLGICO (ANEXO III)

8.1- Cuidados locais

Lavagem do local exposto com gua e sabo nos casos de exposio percutnea
ou cutnea.

Nas exposies de mucosas, deve-se lavar exaustivamente com gua ou soluo


salina fisiolgica.

Pode-se utilizar antissptico, tais como PVPI ou Clorexidine.

No devem ser realizados procedimentos que aumentem a rea exposta, tais como
cortes e injees locais. A utilizao de solues irritantes (ter, glutaraldedo,
hipoclorito de sdio) tambm est contra-indicada;

8.2 Avaliao do acidente

Estabelecer

material

biolgico

envolvido:

sangue,

fluidos

orgnicos

potencialmente infectantes (smen, secreo vaginal, liquor, lquido sinovial,


lquido

pleural,

peritoneal,

pericrdico

amnitico),

fluidos

orgnicos

potencialmente no-infectantes (suor, lgrima, fezes, urina e saliva), exceto se


contaminado com sangue.

96

Tipo de acidente: perfurocortante, contato com mucosa, contato com pele com
soluo de continuidade.

Conhecimento da fonte: fonte comprovadamente infectada ou exposta situao


de risco ou fonte com origem fora do ambiente de trabalho.

Fonte desconhecida.

9 NOTIFICAO DO ACIDENTE (ANEXO IV)

9.1 Alunos/ Estagirios

Colaborador/ Professor/ Encarregado dever acionar o bombeiro da Unidade que


juntamente

com

Chefia

de

Campus

providenciaro

*conduo

do

Aluno/Estagirio p/ a Unidade de Referencia (SUS), que ser o PRONTO


ATENDIMENTO MDICO DE EMERGNCIA (Dr. Edman S. Caserta) - PRONTO
SOCORRO MUNICIPAL DO SO JOO Rua Coelho Neto, 1999 Telefone
36259304;

* A conduo se far por meio de transporte prprio da empresa ou taxi;

Caso o acidentado (aluno/estagirio ou paciente fonte) solicite, comunicar os


familiares;

O acidente dever ser registrado no Livro de Ocorrncias para Perfuro


Cortantes.

O colaborador preencher a notificao e providenciar a cpia da Carteira de


Vacinao do aluno que devero ser apresentados para o atendimento;

A Notificao assinada pela Unidade de Referencia dever ser anexada ao Livro


de Ocorrncias;

Sendo o paciente fonte conhecido, dever ser encaminhado juntamente com o


aluno;

O Encarregado da Sade designar um colaborador para acompanhar o Aluno e o


paciente fonte Unidade de Referencia (SUS), o qual dever permanecer at o
final do atendimento.

Ser solicitado ao aluno e paciente, uma cpia do resultado dos exames para
encerramento do caso.

9.2 Colaboradores (Professor/ Funcionrio)


97

Colaborador/ Professor/ Encarregado dever acionar o bombeiro da Unidade que


juntamente com a Chefia de Campus providenciaro a conduo do colaborador
para a Unidade de Referncia (SUS), que ser o PRONTO ATENDIMENTO MDICO
DE EMERGNCIA (Dr. Edman S. Caserta) - PRONTO SOCORRO MUNICIPAL DO SO
JOO Rua Coelho Neto, 1999 Telefone 3625-9304;

Caso o acidentado solicite, comunicar os familiares;

Comunicar ao Departamento de Segurana e Medicina do Trabalho;

98

O acidente dever ser registrado no Livro de Ocorrncias para Perfuro


Cortantes;

O colaborador preencher a notificao e providenciar a cpia da Carteira de


Vacinao do acidentado que devero ser apresentados para o atendimento;

A Notificao assinada pela Unidade de Referencia dever ser anexada ao Livro


de Ocorrncias;

Sendo o paciente fonte conhecido, dever ser encaminhado juntamente com o


colaborador;

A chefia do acidentado designar um colaborador para acompanh-lo juntamente


com o paciente fonte Unidade de Referencia (SUS), o qual dever permanecer
at o final do atendimento.

Ser solicitado ao colaborador e paciente fonte, uma cpia do resultado dos


exames para encerramento do caso.

99

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

http://bvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/protocolo_expos_mat_biologicos.pdf
acessado em 25/03/2013 - 9h.

ANVISA: Resoluo da diretoria colegiada RDC n 306, de 7 de dezembro de 2004


Dispe sobre o regulamento tcnico para o gerenciamento de resduos de servio de
sade.
M. M. de Souza. 1998. Biossegurana no laboratrio clnica. Ed. Eventos
CDC/NIH- Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories
Manuais de Legislao Atlas; 39a edio. 1998. Volume 16: Segurana e Medicina do
Trabalho.
Teixeira P & Valle S. Biossegurana: uma abordagem multidisciplinar. Rio de Janeiro: Ed.
Fiocruz, 1996.

100

10 - ANEXO I: TIPO DE MATERIAL E MTODO PARA PROCESSAMENTO DE


ARTIGOS

ARTIGO

TIPO
MATERIAL

DE

MTODO

1 OPO

2 OPO

Instrumental

Metal

Esterilizao

Autoclave

Estufa

Caixas

Metal

Esterilizao

Autoclave

Estufa

Bandejas

Metal

Esterilizao

Autoclave

Estufa

Gaze

Tecido

Esterilizao

Autoclave

Autoclave

101

11 - ANEXO II: MATERIAL E PROCEDIMENTO INDICADO PARA USO DE


EQUIPAMENTO DE PROTEO INDIVIDUAL (EPI)

EPI

MATERIAL

PROCEDIMENTO

Luva cirrgica

Ltex

Descartvel

Luva de procedimento

Ltex

Descartvel

Luva de limpeza

Borracha

Desinfeco com lcool

Mscara

Descartvel

Descartvel

102

12 - ANEXO III FLUXOGRAMA DE ACIDENTE BIOLGICO

FLUXOGRAMA DE ACIDENTE BIOLGICO

Aluno com professor


responsvel

Colaborador/ Estagirio

Aluno sem professor


Responsvel

Prof(a). ..................
Acidentou-se

Cuidados Locais (item 8.1)


Comunicar Familiar Responsvel

Comunicar chefia
responsvel + SESMT
Avaliao do Acidente (item 8.2)

Fonte Ausente

Fonte Presente

Encaminhar ambos para atendimento mdico,


em Unidade de Referencia (SUS) (item 9)

Encaminhar colaborador para atendimento mdico,


em Unidade de Referencia (SUS) (item 9)

Como? (Item 9)

Txi

Carro da Universidade

103

104

13 ANEXO IV FORMULRIO P/ NOTIFICAO DE ACIDENTE BIOLGICO

105

106

UNIP / LABORATRIOS MULTIDISCIPLINARES


TIPO:

PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRO (POP)

IDENTIFICAO:
TTULO:

POP LAC 0001

REGULAMENTO DE USO DOS LABORATRIOS DO LABORATRIO DE ANLISES


CLNICAS

DATA DA ELABORAO:

DATA DA PROXIMA REVISO:

30/01/2008

01/2016

APROVAO DO DOCUMENTO

Responsabilidade

Nome

Setor

Elaborado por

I.C.S

I.C.S

Conferido por

I.C.S

Aprovado

APLICAO DO DOCUMENTO

reas

Laboratrio de Anlises Clnicas LAC

107

Assinatura

Data

108

1 Objetivo
Os procedimentos operacionais padronizados (POPs) tem como objetivo estabelecer
regras para a correta utilizao de equipamentos, materiais e reagentes dentro dos Laboratrio de
Anlises Clnica visando garantir a segurana e o bom andamento das aulas prticas.

2 reas de Aplicao
Laboratrios multidisciplinares nos cursos e disciplinas abaixo relacionadas:

Biomedicina Coleta de Material Biolgico, Parasitologia, Bioqumica Clnica, Hematologia


e Hemoterapia, Microbiologia, Imunologia Clnica, Biologia Molecular, Anlises Clnicas e outras
disciplinas conforme grade curricular vigente;

Cincias Biolgicas Microbiologia, Imunologia, Biologia Molecular, Bioqumica Clnica,


Coleta de Material Biolgico e outras disciplinas conforme grade curricular vigente;

Cosmetologia e Esttica Microbiologia e Esttica e outras disciplinas conforme grade


curricular vigente;

Farmcia e Bioqumica Anlises Toxicolgicas, Microbiologia e Micologia Clnica,


Imunologia Clnica, Controle de Qualidade de Produtos Farmacuticos e Cosmticos, Parasitologia,
Hematologia, Citogentica e outras disciplinas conforme grade curricular vigente;

Nutrio Microbiologia de Alimentos e outras disciplinas conforme grade curricular


vigente.
3 Responsabilidades
Todos os funcionrios (encarregados de laboratrios, tcnicos de laboratrios, auxiliares
tcnicos de laboratrios e auxiliares de laboratrios), professores e alunos devem estar cientes
dos procedimentos operacionais padronizados, aplicando-os corretamente.
As normas dos Laboratrios de Anlise Clnicas encontram-se no anexo 1.

3.1 - Encarregado de Laboratrio


Fazer o controle patrimonial dos bens dos laboratrios, bem como fornecer informaes ao
Sistema de Controle Patrimonial UNIP conforme os formulrios prprios do respectivo setor.
Transferncias, emprstimos, obsolescncias (materiais em desuso), consertos, furtos e/ou danos
desses bens;
Assegurar que todos os POPs sejam cumpridos, bem como treinar os funcionrios sobre a
utilizao dos laboratrios e regras de segurana a serem seguidas;
Acompanhar e supervisionar as atividades desenvolvidas nos laboratrios;

109

Coordenar e organizar os calendrios das aulas prticas de cada laboratrio, assegurando


que haja um atendimento eficiente aos professores e alunos;
Supervisionar os horrios de trabalho dos funcionrios dos laboratrios seguindo as normas de
segurana do laboratrio;
Cuidar da estrutura geral dos laboratrios, ou seja, pessoal, instalaes, equipamentos,
materiais e reagentes.
Fazer o pedido de compras de materiais para as aulas prticas, no prazo estipulado pela
assessoria de compras, conforme o formulrio (anexo 2);
Analisar e dar o encaminhamento cabvel s solicitaes de emprstimo externo de
equipamentos e materiais em formulrio especfico (anexo 3) e interno (anexo 4);
Fazer os relatrios referentes a qualquer acidente ou incidente que venha a ocorrer nos
laboratrios, como por exemplo: acidentes necessitando de primeiros socorros, derramamento de
produtos qumicos, incndios, equipamentos/vidrarias/reagentes que desapareceram do decorrer
da aula. Registrar a ocorrncia no livro ATA de ocorrncia do laboratrio.
3.2 - Tcnico de Laboratrio
Verificar a disponibilidade do laboratrio para no haver choque de horrio entre as aulas
prticas;
Utilizar corretamente os Equipamentos de Proteo Individuais (EPIs) necessrios e seguir as normas de segurana;

Utilizar corretamente os Equipamentos de Proteo Coletiva (EPCs) necessrios no decorrer das


aulas;
Permanecer nos laboratrios durante as aulas;
Preparar os reagentes para as aulas prticas;
Montar as aulas prticas, acompanhar os professores e dar assistncia aos alunos no decorrer das
mesmas, orientado-os quanto s tcnicas de manuseio de reagentes, vidrarias e equipamentos,
seguindo as normas de segurana do laboratrio;
Manter os equipamentos sempre testados e em perfeito estado de uso;
Manter a segurana dos alunos e auxiliares dentro dos laboratrios;
No deixar caixas com materiais ou vazias em cima de armrios, no cho ou em bancadas, nas
dependncias dos laboratrios onde ocorrem s aulas prticas;
Descartar de maneira correta os produtos qumicos;
Zelar pelo patrimnio do laboratrio;
110

Manter o inventrio sempre atualizado;


Manter os mapas de produtos controlados sempre atualizados;
Relatar os acidentes ou incidentes ocorridos no laboratrio ao encarregado.

3.3 - Auxiliar Tcnico de Laboratrio


Zelar pelo patrimnio do laboratrio;
Comunicar qualquer irregularidade ao Tcnico do laboratrio em primeira instncia, caso no seja
solucionado procurar o Encarregado dos Laboratrios.
Utilizar os EPIs e os EPCs corretamente;
Permanecer nos laboratrios durante as aulas;
Auxiliar na montagem e desmontagem das aulas prticas, acompanhar os professores, auxiliar os
tcnicos de laboratrio, bem como dar assistncia aos alunos, orientando-os quanto ao uso dos
equipamentos e materiais seguindo as normas de segurana do laboratrio;
Manter instalaes, equipamentos e materiais sempre limpos e organizados;
No deixar caixas com materiais ou vazias em cima de armrios, no cho, em bancadas e em
qualquer rea de circulao ou/e acesso;
Recolher e lacrar imediatamente para descarte em local apropriado todo e qualquer material
infectante que tenha sido esterilizado pelos tcnicos.

3.4 - Auxiliar de Laboratrio


Zelar pelo patrimnio do laboratrio;
Comunicar qualquer irregularidade ao Tcnico do laboratrio;
Utilizar os EPIs e os EPCs corretamente;
Permanecer nos laboratrios durante as aulas;
Auxiliar na montagem e desmontagem das aulas prticas, auxiliar os tcnicos de laboratrio,
Manter instalaes, equipamentos e materiais sempre limpos e organizados;
Limpar as bancadas antes e aps as aulas prticas, conforme os procedimentos descritos;
Executar a lavagem da vidraria com detergente adequado e secar de acordo com as necessidades
de cada vidraria, seguindo os procedimentos descritos;
111

Guardar as vidrarias e outros materiais nos armrios e gavetas seguindo a organizao


determinada pelo tcnico;
No deixar caixas com materiais ou vazias em cima de armrios, no cho, em bancadas e em
qualquer rea de circulao ou/e acesso;

3.5 - Professores
Comparecer no incio do semestre nos laboratrios para discutir agendas de aulas prticas e verificar a disponibilidade dos mesmos;

Entregar o roteiro de aula com 20 dias teis de antecedncia;


Orientar e exigir o cumprimento das normas de segurana do laboratrio;
Manter a ordem dentro dos laboratrios;
Permanecer no laboratrio at sada do ltimo aluno;
Respeitar o horrio de trabalho dos funcionrios e de funcionamento dos laboratrios;
Fazer a lista de matrias que sero utilizadas nas aulas prticas, respeitando a data solicitada pelo
encarregado do laboratrio.

3.6 Alunos
Permanecer e utilizar os laboratrios somente com a presena de um professor ou tcnico;
Seguir as normas de segurana do laboratrio;
proibido trazer crianas para as aulas nos laboratrios;
Colocar os objetos no escaninho do laboratrio, levando para a bancada somente o necessrio
para as anotaes e realizao da aula;
Evitar brincadeiras, gestos bruscos, bancos no corredor e conversas desnecessrias dentro dos
laboratrios;
Buscar informaes, atravs de consulta individual, sobre os produtos qumicos que sero
utilizados durante a aula e sobre os resduos gerados, bem como os meios de primeiros socorros
em caso de acidente;
Sempre manter a bancada de trabalho limpa e organizada. Os frascos de reagentes e matriasprimas fechadas com as esptulas ou pipetas do lado de fora dos frascos;
Aps o uso das vidrarias, essas devem ser devidamente lavadas conforme procedimento adequado e dispostas em cima de um pedao
de papel toalha para secagem;

112

Em caso de acidentes, quebra de vidraria ou de qualquer leso aos equipamentos, chamar o


tcnico responsvel e/ou professor imediatamente, para que eles possam tomar as providncias
cabveis;
Nunca pipetar lquidos muito viscosos, pois este procedimento poder inutilizar a pipeta visto que
poder no ser possvel remov-los das paredes da vidraria;
Limpar as balanas sempre que utiliz-las conforme procedimento adequado de limpeza e
pesagem;
Ao trmino da aula, sempre deixar a bancada, balana e demais equipamentos limpos e os frascos
de reagentes fechados e organizados.
OBS: Reposies de aulas sero permitidas somente em casos especiais com a autorizao da
coordenao do curso e mediante a presena do professor.

113

4 Consideraes gerais
Os Laboratrios Multidisciplinares dos Cursos da Sade da UNIP esto assim constitudos:

Almoxarifado;

Agitador magntico;

Auto clave;

Bancadas de granito equipadas com bico de Bunsen e tomadas 110 v e 220 v e pia
centralizada;

Banho Maria;

Capela de fluxo laminar;

Centrfuga;

Estufa bacteriolgica;

Leitor de Elisa;

Pia;

Bancos;

Capela para exausto de gases;

Chuveiro de emergncia com lava-olhos

Destilador de gua.

O Laboratrio de Anlises Clnicas tem como prioridade as atividades de ensino dos Cursos da Sade da Universidade Paulista
UNIP;

As vidrarias, equipamentos e reagentes utilizados nessas aulas sero fornecidos pela prpria
Universidade e sua reposio solicitada em poca pr-determinada pela assessoria de compras;
Os materiais solicitados para aula prtica que devero ser comprados pela prpria Unidade devem
ser solicitados pelos professores com 20 dias teis de antecedncia;
No permitida a sada de reagentes, equipamentos ou qualquer outro material utilizado durante
as aulas nas dependncias dos laboratrios;
Logo aps a utilizao dos reagentes nas aulas, os mesmos devero ser adequadamente
armazenados;
As vidrarias devero ser conferidas e lavadas conforme procedimento do laboratrio;
S permitida a entrada de alunos, que estejam matriculados naquela disciplina;
A entrada de alunos nos laboratrios para as aulas prticas s ser permitida perante a presena
do professor;
114

Quando no utilizados esses laboratrios devero permanecer trancados e as chaves mantidas em


claviculrio junto ao Encarregado dos Laboratrios;
No permitida a entrada de alunos no almoxarifado;
Reposies de aulas sero permitidas somente em casos especiais com a autorizao da
coordenao do curso e mediante a presena do professor;
Todos os funcionrios, professores e alunos, devero seguir as normas de segurana vigentes nos
laboratrios multidisciplinares, acatando as determinaes do Servio Especializado de Segurana
da Medicina do Trabalho SESMT, da Brigada de Incndio e da Comisso Interna de Preveno de
Acidentes CIPA.
POP Utilizao do laboratrio para as aulas prticas
Os professores no incio do semestre devero programar suas aulas prticas com os
tcnicos dos laboratrios. Caso ocorra conflito de horrios entre cursos/disciplinas, cabe aos
tcnicos programar junto com o professor, o horrio/dia a ser realizada a aula;
Para que o tcnico fique ciente do procedimento da aula, o professor deve passar o roteiro
com 20 dias teis de antecedncia e nele deve constar: materiais, equipamentos, reagentes e sua
concentrao, para que o tcnico possa estimar a quantidade de materiais de acordo com o
nmero de alunos e/ou grupos. Caso ocorra algum imprevisto, o professor deve comunicar o
tcnico para que o mesmo disponibilize o laboratrio para outros cursos;
Com o roteiro em mos, o tcnico deve verificar se h materiais perecveis e providenciar
solicitao de compra (anexos 5 e 6) pelo fundo de caixa;
Antes de iniciar a montagem da aula, o tcnico e/ou auxiliar dever limpar as bancadas,
verificar o gs, testar o chuveiro de emergncia, o lava-olhos e os equipamentos que sero
utilizados na aula;
A listagem de equipamentos do Laboratrio de Anlises Clnicas e as instrues de uso e
limpeza encontram-se no anexo 7.
Montar a aula com materiais e reagentes solicitados no roteiro de aula, de acordo com o
nmero de grupos solicitado pelo professor. Os reagentes que no tem necessidade de serem
manipulados na capela, devem ser fracionados e colocado um frasco em cada bancada;
Os produtos qumicos volteis e perigosos devem ser manipulados na capela de exausto
de gases;
O tcnico deve orientar os alunos sobre: as normas gerais de segurana, ler com ateno o
rtulo dos frascos de reagentes antes de utiliz-los, pois nele h informaes importantes para sua
manipulao segura;
115

O tcnico deve permitir somente a entrada dos alunos e do professor que estiver usando
avental de algodo branco com manga longa, sapatos fechados, calas compridas, cabelos presos
e orientar os mesmos para que deixem sobre a bancada somente o material necessrio para a
aula;
O tcnico e auxiliar devero estar no laboratrio no decorrer da aula para orientar os alunos
em caso de dvidas sobre a utilizao dos materiais e equipamentos e somente o tcnico deve
orientar sobre a manipulao dos reagentes;
Ao trmino da aula, o tcnico dever recolher os reagentes e separar os que foram
contaminados, os que sero descartados e armazenar corretamente o restante em local adequado
(nunca deixar frascos de reagentes armazenado na capela de exausto ou nas dependncias do
laboratrio onde vai ocorrer a aula);
Desmontar a aula prtica: limpar e guardar os equipamentos, separar as vidrarias utilizadas e lavar de acordo com o
procedimento do laboratrio;

Limpar adequadamente as bancadas e deixar o laboratrio organizado;


Desligar o registro de gs, apagar as lmpadas e fechar o laboratrio.

POP - Pesquisa Docente e Discente


Utilizao do Laboratrio
Dever ser feita solicitao formal, ao setor de Ps Graduao e Pesquisa, para utilizao dos
Laboratrios da UNIP para o desenvolvimento de Pesquisa Docente e Discente;
Na solicitao, devero ser especificados o perodo e durao do uso;
A solicitao ser encaminhada para Reunio do Conselho Administrativo para aprovao.
Somente com essa aprovao do Conselho, os laboratrios podero ser utilizados.

116

Solicitao de Materiais
O professor que orienta a pesquisa deve solicitar o material, justificando seu pedido com todos os
dados (descrio do material, tempo de uso, custo aproximado), ao Departamento de Pesquisa da
UNIP que encaminhar a solicitao, para Reunio Administrativa;
Somente aps a aprovao do Conselho os materiais podero ser solicitados para compra ou
disponibilizados.

POP Higienizao de Equipamentos e Materiais

Vidrarias
Separar as vidrarias por tamanho e tipo;
Enxaguar em gua corrente; colocar as vidrarias em imerso com gua e detergente especial
seguindo instrues do rtulo do detergente (10-20g/l), por aproximadamente 1h;
Colocar luvas no momento da lavagem. Para auxiliar na lavagem utilizar esponja e cepilho;
Enxaguar as vidrarias em gua corrente e depois enxaguar novamente com gua destilada;
Secar ao ar livre ou em estufa a 100C. Vidrarias com preciso volumtrica nunca devem ser secas
em estufa e nem levadas ao aquecimento;
Nas vidrarias de preciso volumtrica passar lcool 70%, caso haja necessidade de secagem
rpida, ou deixar secar ao ar livre sobre a bancada;
Antes de retirar as vidrarias da estufa, deslig-la e deix-la fechada at que as vidrarias estejam
frias; Retirar as vidrarias e guard-las adequadamente.

Bancadas
Utilizar luvas nitrlicas na limpeza;
Iniciar a limpeza das bancadas passando um pano umedecido com gua para tirar algum produto
que ali possa ter cado;
Lavar em seguida com gua e sabo utilizando uma esponja. Passar pano umedecido com gua;
Por ultimo passar uma flanela com lcool etlico a 70 %.
Obs: Caso haja necessidade passar uma soluo com hipoclorito de sdio para desinfetar a
bancada.
117

Pisos
A limpeza do piso realizada pelos auxiliares de servios gerais;
Os tcnicos devero orientar os auxiliares de servios gerais em como proceder limpeza nos
almoxarifados para evitar acidentes.

POP - Manuseio das Vidrarias


Vidraria danificada deve sempre ser descartada;
Ao trabalhar com tubos ou conexes de vidro, deve-se utilizar uma proteo adequada para as
mos e olhos;
Familiarizar-se com as instrues apropriadas ao utilizar vidraria para fins especficos;
Descartar vidraria quebrada em recipientes plsticos ou de metal etiquetados e que no sejam
utilizados para coleta de outros tipos de materiais de descarte, etiquetar exclusivo para descarte
de vidrarias;
Ao manusear vidros quentes utilizar luva trmica e/ou pinas apropriadas.

118

POP - Procedimentos de Emergncia


Substncias qumicas apresentam diferentes propriedades, portanto a metodologia de primeiros socorros dever ser
realizada de acordo com as substncias envolvidas e as instrues do fabricante contidas na ficha de emergncia.

Primeiros Socorros
Qualquer acidente deve ser comunicado ao professor;
Qualquer produto qumico que caia sobre a pele, deve ser lavado com gua corrente em
abundncia;
Quando grandes reas do corpo forem atingidas, a utilizao do chuveiro de emergncia mais
eficiente e toda roupa da regio afetada deve ser removida.

Queimaduras leves com:

cidos - lavar com muita gua e depois aplicar sobre a regio afetada uma soluo e bicarbonato
de sdio saturada;
Bases - lavar com gua corrente e aplicar na regio afetada uma soluo de cido brico a 2%.
Em acidentes mais graves que afete grandes regies do corpo, remover a roupa da pessoa e lavar
com bastante gua e encaminh-lo para um hospital;
Quando a regio afetada forem os olhos, utilizar o lava-olhos para remover toda e qualquer
substncia presente e depois lavar com soluo fisiolgica 0,9% de NaCl;
Em caso de inalao de substncias volteis, retirar a pessoa do laboratrio e lev-lo para um local
ventilado.
Acidentes devem ser registrados em caderno de ocorrncias.
Qualquer tipo de ocorrncia, fora da rotina normal dos laboratrios devem ser registradas em um
livro ata identificado como Registro de Ocorrncias Laboratrios Multidisciplinares. So
exemplos de ocorrncias, os acidentes decorrentes durante o expediente de trabalho dentro dos
laboratrios, como derramamento de produtos qumicos, incndios, cortes causados por vidrarias
e/ou outros materiais e queimaduras.
Devem ainda ser relatado na Ficha de Ocorrncia e encaminhado para o Encarregado a fim de
dar cincia aos superiores do ocorrido. (anexo 8).

119

Derramamento
Isolar rea e comunicar a todos que esto no laboratrio;
Proteger-se com os EPIs adequados;
Permitir ventilao e/ou exausto no ambiente;
Providenciar adequadamente a limpeza no local: no caso de cidos, lcalis e produtos orgnicos usar vermiculita, ou uma mistura de areia com areia de gato na proporo de 1:1 e colocar sobre o
produto derramado para absorv-lo. Em seguida recolh-lo com p plstica, acondicionar em saco
preto para depois efetuar o descarte;
Acidentes devem ser registrados em caderno de ocorrncias.

120

Incndio
Pequeno incndio (em bquer, frasco etc), abafar com um vidro de relgio ou uma flanela
umedecida com gua;
Em caso de incndio com envolvimento de materiais volteis e/ou txicos, se as tentativas de
conter um pequeno incndio forem inteis, devem-se tomar as seguintes providncias:

Equipar-se com os EPIs;


Retirar todas as pessoas do laboratrio;
Utilizar o extintor de incndio;
Se necessrio fechar todas as janelas e portas para evitar que o incndio se propague;
Entrar em contato com os bombeiros e/ou Chefia de Campus;
Acidentes devem ser registrados em caderno de ocorrncias e relatados na Ficha de
Ocorrncias.

POP Conservao das instalaes


As reas de trabalho, de circulao e de acesso devem estar sempre limpas e livres de obstrues;
No armazenar caixas com materiais e/ou vazias ou qualquer outro tipo de produto. Para essa
finalidade, utilize o almoxarifado;
Reagentes derramados em qualquer instalao devem ser limpos imediatamente, de maneira
segura.
Materiais usados ou no etiquetados no devem ser acumulados no interior do laboratrio e devem ser descartados imediatamente
aps sua identificao, seguindo os mtodos adequados para descarte de material de laboratrio.

POP Recebimento de Materiais Fornecedores ou CD Taquari


Ao receber o material, o funcionrio (tcnico ou auxiliar) dever:
Conferir e assinar a CEM (Conhecimento de Envio de Mercadoria), observando se o total de
volumes entregues corresponde ao informado, quando no houver Almoxarifado na unidade;
Alocar as caixas no almoxarifado que o material pertence;
Quando o produto a ser transportado for reagente o trabalho dever ser executado por um
tcnico;
Conferir e guardar os materiais recebidos;
Quando receber o produto com nota fiscal original, tirar cpia e encaminhar a original ao setor de
custos ou departamento responsvel;
Conferir a data de validade dos produtos perecveis;
121

POP Troca de materiais


O material poder ser trocado quando chegar vencido ou quando o material no conferir com o que foi solicitado. Nos dois casos
entrar em contato com a Assessoria de Compras para ser providenciada a troca do material.

122

POP - Manuteno de equipamentos


Todos os equipamentos eltricos devem ter certificado de qualidade ao serem adquiridos ou
serem aprovados quando de sua aquisio;
No se devem utilizar extenses para ligar aparelhos a instalaes permanentes.
Utilizar interruptores com circuito de fio terra quando existir o risco de que o operador esteja em
contato com gua e com equipamento eltrico simultaneamente;
Somente pessoal qualificado e treinado est autorizado a consertar ou modificar equipamentos
eltricos ou eletrnicos;
Os equipamentos de laboratrio devem ser inspecionados e mantidos em condies de uso por
pessoas qualificadas para este trabalho. A freqncia de inspeo depende do risco que o
equipamento possui, das instrues do fabricante ou quando necessrio pela utilizao. Os
registros contendo inspees, manutenes e revises dos equipamentos, devem ser guardados e
arquivados pelo lder do laboratrio;
Solicitao para consertos/calibrao de equipamentos deve ser feita em formulrio de solicitao
de servios, fornecido pelo departamento de manuteno da assessoria de compras (anexo 9);
Maneira correta de uso, limpeza e manuteno, seguir o manual de equipamentos;
Todos os equipamentos devem ser guardados adequadamente para prevenir quebras ou perda de
componentes do mesmo.
OBS. No anexo 10 encontra-se o inventrio dos Laboratrios de Anlises Clnicas.
5 Anexos

123

Anexo 1 - Normas de Segurana no Laboratrio de Anlises Clnicas


A prtica da Qumica seja ao nvel profissional ou de aprendizado, exige que regras de segurana
sejam rigorosamente seguidas para evitar acidentes e prejuzos de ordem humana ou material. Os
acidentes podem ser minimizados ou at mesmo evitados se tomadas s devidas precaues.

A seguir esto relacionadas algumas regras de segurana que voc dever colocar em prtica para sua segurana e de seus colegas:

Usar sempre avental de algodo de mangas longas, na altura dos joelhos e fechados;
Usar calado fechado de couro ou similar e cala comprida;
No usar relgios, pulseiras, anis ou quaisquer ornamentos durante o trabalho no laboratrio;
No beber ou comer no laboratrio e nem utilizar material de laboratrio para colocar alimentos;
O material escolar como mochilas, bolsas, pastas e celulares devero ser deixadas na rea de
assepsia nos armrios;
proibido fumar no laboratrio ou em qualquer outro lugar que possa por em risco a segurana
ou sade das pessoas;
No permitido fotografar dentro do laboratrio em qualquer hiptese;
Caminhar com ateno e nunca correr no laboratrio;
Nunca testar amostras ou reagentes pelo sabor, os odores devem ser verificados com muito
cuidado;
No levar a mo boca ou aos olhos quando estiver manuseando produtos qumicos;
Aventais de laboratrio, luvas, culos de proteo ou outras vestimentas no devem ser usados
fora do laboratrio;
Brincadeiras so absolutamente proibidas nos laboratrios;
Usar a capela sempre que trabalhar com solventes volteis, txicos e reaes perigosas, explosivas
ou txicas;
As substncias inflamveis devem ser manipuladas em locais distantes de fontes de aquecimentos;
O uso de pipetadores requerido em qualquer circunstncia ao utilizar pipetas;
124

Lentes de contato no devem ser usadas em laboratrios, pois podem absorver produtos qumicos
e causar leses nos olhos;
Ao final de cada aula, as vidrarias utilizadas durante o trabalho de laboratrio devem ser
enxaguadas com gua antes de serem enviadas para limpeza;

125

Vidrarias trincadas, lascadas ou quebradas devem ser descartadas e o tcnico ou responsvel deve
ser avisado;
Antes de manipular qualquer reagente deve-se ter conhecimento de suas caractersticas com
relao toxicidade, inflamabilidade e explosividade;
Devem-se tomar cuidados especiais quando manipular substncias com potencial carcinognico;
Os reagentes e solues devem ser claramente identificados, com data de preparo, validade e o
nome do tcnico que a preparou;
Todo acidente com reagentes deve ser limpo imediatamente protegendo-se se necessrio;
Todas as substncias so txicas, dependendo de sua concentrao. Nunca confie no aspecto de
um produto, devem-se conhecer suas propriedades para manipul-la;
Receber visitas apenas fora do laboratrio, pois elas no conhecem as normas de segurana e no
esto adequadamente paramentadas.
No deixar caixas com materiais ou vazias em cima de armrios, no cho, nas bancadas ou nas
dependncias dos laboratrios onde ocorrem s aulas prticas;

Essas so algumas regras gerais que devemos seguir durante um trabalho no Laboratrio.
Durante o curso, em cada experimento sero relacionadas outras mais especficas, inclusive
sobre os reagentes a serem manipulados.

126

Anexo 2 - Modelo de Formulrio para Requisio de Materiais

REQUISIO DE MATERIAIS

CD

DESCRIO DO ITEM

UNIDADE:

INSTITUTO: I.C.S

UN

TOTAL

DADOS DO REQUISITANTE
FUNCIONRIO:
COORDENAO:

CURSO:

DISCIPLINA:

JUSTIFICATIVA

DIRETORIA:

LABORATRIO:
127
DATA:

128

Anexo 3 Formulrio para sada de materiais / equipamentos

AUTORIZAO PARA SADA DE


MATERIAIS DOS LABORATRIOS DA
SADE
Natureza Da Operao

Utilizao Externa

Dados Sobre o Material


N

QUANT

DESCRIO

MARCA

Solicitante (Responsvel)
Nome:
RA/Funcional:

MODELO

N DE SRIE

UNIDADE

Funo:
Assinatura:

Destino
Unidade/local:
End:

Telefone:

Sada
Data:

Retorno
Data:

Horas:

Horas:

Motivo do Emprstimo

Encarregado Responsvel
NOME:
Assinatura
OBS: O EQUIPAMENTO SOLICITADO DEVER SER DEVOLVIDO EM PERFEITO ESTADO DE FUNCIONAMENTO, SENDO DE
RESPONSABILIDADE DOS SOLICITANTES QUALQUER DANO QUE OCORRER AO EQUIPAMENTO.

129

Anexo 4 Emprstimo Interno de Materiais e Equipamentos

Emprstimo Interno Lab.Sade


Unidade _______________

( )Professor NFunc.__________ ( )Aluno RA___________


NFunc.__________
Outros ___________________

) Funcionrio

O abaixo assinado se responsabiliza pelos materiais:


Laboratrio:_____________________________________________________________
Material:____________________________________________________________________________

__________________________________________________________________________
__________
__________________________________________________________________________
__________
__________________________________________________________________________
__________
Garantindo sua devoluo no prazo determinado e no estado em que acautelou o
material.

RECEBI: ____/____/____.

DEVOLVI:____/____/____.

____________________________
______________________________
Nome do responsvel pelo Material

Nome responsvel pelo Material

____________________________

____________________________

Assinatura

Assinatura

130

___________________________________________

Responsvel pelo emprstimo do material


___________________________________________
Assinatura

131

Anexo 5 Ficha para Agendamento e Solicitao de Materiais para Aula Prtica

INSTITUTO DE CINCIAS DA SADE ICS


LABORATRIOS / CLNICAS
UNIP

FICHA PARA AGENDAMENTO E SOLICITAO DE MATERIAIS PARA AULA PRTICA

Curso: __________________________________________________________________________
Disciplina: __________________________________________________ Data: ____ / ____ / ____
Professor responsvel: _________________________________________ Ass.: _______________
Funcionrio responsvel: ___________________________________________________________
Ass. Coordenador do Curso: _________________________________________________________

IMPORTANTE
Pedimos a Vossa Senhoria, que esta solicitao seja enviada com ao menos 15
(quinze) dias teis de antecedncia Considerando a disponibilidade do Caixa do
Campus.
O (s) material (is) devero ser providenciados para:
Sala/Laboratrio/Clnica:

Manh

Data da aula: ____ / ____ / ____

Tarde

Noite

1 horrio: _________ h
2 horrio: _________ h

Cdigo

Descrio do item

Qtde.

132

Uni. Med.

Observao:_____________________________________________________________________________
___________________________________________________________
Espao a ser preenchido pelo Encarregado
Entrada: ____ / ____ / ____

Recebido por: _________________

Executado: ____ / ____ / ____

Por:__________________
Entregue em: ____ / ____ / ____

Observao:_____________________________________________________________________________
___________________________________________________________

133

Anexo 6 Solicitao de Compras pelo Fundo de Caixa da Unidade

SOLICITAO DE COMPRAS
PELO FUNDO DE CAIXA

Solicitante: _________________________

Curso: __________________________

Disciplina: _________________________

Lab./ Clnica: ____________________

Funcionrio solicitante: _______________

Data: ____ / ____ / ____

Data da aula: ____ / ____ / ____


Fornecedor: ________________________

Horrio: _____ : _____ h


n Nota Fiscal: _______________

Resumo do Material Solicitado:


_______________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________
_________________

Ass. Resp. ____________ N/N ou n da RM: _______________ Data: ____/ ____ / ____
Aprovao da Diretoria: ____________________

Data: ____ / ____ / ____

SOLICITAO DE COMPRAS
PELO FUNDO DE CAIXA

134

Solicitante: _________________________

Curso: __________________________

Disciplina: _________________________

Lab./ Clnica: ____________________

Funcionrio solicitante: _______________

Data: ____ / ____ / ____

Data da aula: ____ / ____ / ____


Fornecedor: ________________________

Horrio: _____ : _____ h


n Nota Fiscal: _______________

Resumo do Material Solicitado:


_______________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________
_________________

Ass. Resp. ____________ N/N ou n da RM: _______________ Data: ____/ ____ / ____
Aprovao da Diretoria: ____________________

Data: ____ / ____ / ____

135

Anexo 7 Uso e Limpeza dos Equipamentos do Laboratrio de Anlises Clnicas

Agitador Magntico
Verificar a voltagem antes de ligar o aparelho;
Colocar o bquer ou recipiente no centro da plataforma;
Colocar a barra magntica;
Acione o boto de velocidade para ligar o aparelho, observe a movimentao da barra magntica
e regule para a velocidade desejada (considere o tempo de acelerao do motor);
Observao: no recomendamos usar s aquecimento sem agitao, pois no havendo ventilao
o aquecimento poder causar danos ao motor e ao sistema eletrnico.

Limpeza
Limpeza com pano mido e lcool 70%.

Autoclave
Abrir a autoclave;
Retirar o cesto e encher o tambor interno com gua at o nvel determinado;
Recolocar o cesto com o material a ser autoclavado;
Fechar a tampa e as travas de segurana;
Ajustar o peso regulador de presso conforme a necessidade;
Ligar a chave comutadora no nvel mximo;
Abrir o registro para sada do ar interno;
Em seguida fechar o registro;
Quando atingir a temperatura definida leve a chave comutadora at o nvel mdio;
Aps ter passado o tempo determinado para a esterilizao do material, desligar a chave
comutadora e abrir o registro de vapor;
Quando a manmetro zerar, pode ser aberta a tampa.
136

Observao: o acondicionamento do material a ser esterilizado em autoclave deve ser feito em


pacotes individuais, envolvidos por papel Kraft ou sacos especiais para autoclavagem.

Banho-Maria
Verificar se a voltagem do equipamento coincide com a da rede eltrica;
Abastecer o banho com gua destilada ou deionizada, tomando cuidado para no colocar em
excesso, ou seja, at que a gua alcance mais ou menos 3cm da borda superior. Durante o
processo de abastecimento, dever ser considerado o volume das estantes com os respectivos
tubos, para que no ocorra transbordamento de gua quando o banho for arraigado com as
provas;
Ligar o banho rede eltrica, verificando antes se o boto de ajuste de temperatura est na
posio mnima;
Para ajustar temperaturas girar o boto do termostato ligeiramente para a direita ou para a
esquerda, at o ponto de controle desejado;
A lmpada de aquecimento indica que o banho est aquecendo, aguardar que a mesma se
apague, e acompanhar a temperatura no termmetro;
Se a temperatura indicada no termmetro no for a desejada, girar o boto do termostato para a
direita, para aumentar, ou para a esquerda para diminuir;
A estabilizao da temperatura se dar quando a lmpada de aquecimento comear a oscilar no
ponto desejado.

137

Limpeza
Limpeza, manter sempre o banho com gua limpa, garantindo desta forma seu bom
funcionamento;
Para limpar o banho, tirar inicialmente toda a gua, o fundo falso, a lente e o termmetro, e
limp-lo cuidadosamente para no ofender a resistncia, o sensor, nem o protetor do
termmetro;
Manuteno, mandar o equipamento para assistncia tcnica.

Capela de Fluxo Laminar


Abrir a porta frontal e limpar a mesa de inox com lcool 70%;
Fechar a porta frontal e ligar a luz UV e a ventilao por 20 minutos;
Desligar a luz UV;
Ligar a luz branca e a ventilao;
Todo o material que for colocado dentro do fluxo laminar dever ser limpo com lcool 70%;
Aps o uso, limpar, novamente, a mesa de inox com lcool 70%;
Ligar a luz UV por 30 minutos;
Desligar a luz UV e o fluxo laminar.
Observao: Evitar usar o bico de Bunsen dentro do fluxo laminar;
No utilizar luvas de procedimento com talco dentro do fluxo;
No armazenar materiais dentro do fluxo laminar.

Limpeza e Manuteno
A limpeza do fluxo laminar ser realizada com lcool 70%. Mensalmente colocar uma placa de
Petri com um pouco de formol a 10% para auxiliar na descontaminao.
Verificar o prazo das lmpadas e do filtro de ar.

Centrfuga
138

Boas Prticas para a Centrifugao


Antes de centrifugar qualquer material, os tubos devem ser verificados quanto presena de
rachaduras;
Assegurar que a centrfuga esteja perfeitamente equilibrada antes do uso;
Esperar que a centrifugao cesse por completo antes de abrir a tampa para remover o material;
Em caso de derramamento e/ou quebra de um tubo dentro da centrfuga, o interior da centrfuga
deve ser desinfetado por completo;
Recomenda-se a desinfeco da centrfuga a cada dia de uso.

Deionizador de gua
Abrir a torneira de sada, localizada na clula condutimtrica;
Abrir a torneira de gua da rede;
Ajustar o seletor de voltagem tenso da rede eltrica local, e somente ento ligue o
equipamento tomada de energia eltrica;
Aguardar at que a lmpada vermelha se apague, antes de utilizar a gua deionizada;
Rejeitar toda a gua enquanto estiver acesa a lmpada vermelha de advertncia.
Aproximadamente 20 minutos costumam ser suficientes para eliminar os traos da soluo
ativadora das resinas de troca inica, que falsamente indica a saturao da coluna deionizadora;
Aps o uso, fechar a torneira de gua da rede;
Fechar a torneira de sada;
Desligar o deionizador da tomada de energia eltrica.

Boas Prticas para o Uso do Deionizador


Limpe as superfcies usando um pano levemente embebido em lcool ou soluo de hipoclorito de
sdio a 2%;
No usar solventes qumicos de qualquer espcie;

139

Para prolongar a vida til da clula condumtrica, sempre desligue o Deionizador da rede eltrica
aps o uso;
Nunca retirar a coluna deionizadora de dentro da carcaa, sem antes desligar o equipamento da
tomada de energia eltrica.

Estufa Bacteriolgica
Ligar a chave Liga/Desliga;
Acione a tecla Start/Off, at aparecer Off no display (indica que o termostato pode ser ajustado);
Ajustar a temperatura desejada, acionando as teclas Aumentar/Diminuir;
Algum instante voltar o display temperatura interna;
Acionar a tecla Start/Off para iniciar o ciclo.

Limpeza
Manuteno e assepsia devero ser feitas antes do aparelho ser ligado da seguinte maneira:
Usar pano levemente umedecido em gua e sabo neutro para limpeza das partes internas e
externas da estufa;
No usar produtos qumicos no visor, dever ser limpo com gua e sabo neutro utilizando pano
levemente mido;
Manuteno, assistncia tcnica.

Leitor de ELISA
O aparelho deve ser instalado em uma bancada plana, com dimenses adequadas, e longe de
equipamentos que provoquem vibraes, rudos eltricos ou calor excessivo.
Deve-se evitar exposio direta luz solar, que interfere nos resultados, e provoca alteraes na
pintura externa do aparelho, e temperatura ambiente deve ficar entre 15 e 30C.
O aparelho j fornecido com um rolo de papel instalado na impressora.
Manuteno Preventiva, o Quick Eliza, um aparelho robusto que no requer manuteno
preventiva. Alm da conservao normal do aparelho (limpeza externa, uso em condies
140

favorveis, etc) so necessrias apenas atividades de rotina, como troca de papel, ou eventual
troca de fusvel.

Limpeza e Descontaminao
As bancadas ou superfcie de trabalho dever ser limpas com papel absorvente umedecido em
hipoclorito de sdio a 1%. Desinfetar a superfcie borrifando soluo de lcool 70% e deixar na
superfcie at secar.
No descarte de material contaminado usar, sempre, luvas para o manuseio do material
contaminado. Fazer uso de recipientes prprios para descarte, como sacos de lixo branco e caixas
para perfuro-cortantes. Os materiais contaminados tipo meio de cultura e cultura de bactrias e
fungos, antes de serem descartados devem ser autoclavados para que no haja risco de
contaminao.

141

Anexo 8 Ficha de Ocorrncia

Instituto de Cincias da Sade ICS


Laboratrios/Clnicas

LABORATRIO/CLNICA: ________________________________________________
DISCIPLINA: ______________________________________DATA: ____ / ____ / ____

NOME DO PROF(A): ______________________ HORRIO: ____:____


CURSO: __________________________________
_____________________________________________________________________
_________________OCORRNCIA__________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
___________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
___________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
___________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
___________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
___________________________________________________
142

_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
___________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
___________________________________________________
FUNCIONRIO: ___________ DATA: ____/____/____HORRIO:___:___
ASS. ENCARREG:__________ DATA: ____/____/____HORRIO:___:___
ASS. COORD.: _____________ DATA: ____/____/____HORRIO:___:___

Anexo 9 Formulrio para Consertos de Equipamentos

SOLICITAO DE SERVIOS

DADOS DO MATERIAL
MATERIAL

MARCA

MODELO

143

N SERIE

LABORATRIO

UNIDADE

Especificar o defeito apresentado, informar nmero de telefone do fornecedor caso tenha no


equipamento.

Fones :

Solicitante:

Nome da empresa

Funo:

Data:_____/ _____ / 2008.

Obs:

144

Anexo 10 Equipamentos, Materiais e Utenslios


EPIs: Equipamentos de proteo individual
Para funcionrios do setor;

Avental branco de algodo com manga longa;

Sapato fechado de segurana;

Cala comprida;

culos de segurana (quando necessrio);

Mscara para gases orgnicos (quando necessrio);

Luvas trmicas e nitrlicas (quando necessrio).

Para professores e alunos:

Cala comprida;

Sapato fechado;

Avental branco de algodo com manga longa;

culos de segurana (quando necessrio);

Luvas trmicas e nitrlicas (quando necessrio).

EPCs: Equipamentos de proteo coletiva

Capela para exausto de gases;

Caixa de areia para casos de derramamento de produtos qumicos;

Chuveiro de emergncia com lava-olhos;

Detector de fumaa;

Escadas;

Extintores de CO2 e de p qumico;

Luz de emergncia;

Manta corta-fogo;

Ventiladores.

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Equipamentos do Laboratrio
Relacionar o inventrio do Laboratrio Multidisciplinar.

Vidrarias do Laboratrio
Relacionar o inventrio do Laboratrio Multidisciplinar.

6 Referncias Bibliogrficas
Revista CIPA - Segurana nas universidades Cipa, 22(253): 50, 2001 (2p)

http://www.ceunes.ufes.br/downloads/2/
sandrogrecoNormas%20de%20seguran%C3%A7a
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http://www.eb23-caxarias.rcts.pt/cfq/segurana.html (05/01/08)

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http://portal.anhembi.br/publique/media/arquivos/labs/manual_de_bpl.doc. (30/01/08)

http://samu.saude.sc.gov.br/index.php?option=com_content&task=view&id=308&Itemid=197
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