DETERMINACION DE COLESTEROL EN SANGRE

OBJETIVOS:

Analizar la importancia biolgica del colesterol

Realizar la cuantificacin de colesterol en una muestra de sangre.
Analizar la absorcin de colesterol y los factores que afectan.
Analizar las diferentes patologas producidas por valores elevados de colesterol en
sangre y sus repercusiones en el diagnostico

INTRODUCCION:
El colesterol es un esterol (lpido) que se encuentra en los tejidos corporales y en el plasma
sanguneo de los vertebrados. Se presenta en altas concentraciones en el hgado, mdula
espinal, pncreas y cerebro. Pese a tener consecuencias perjudiciales en altas
concentraciones, es esencial para crear la membrana plasmtica que regula la entrada y
salida de sustancias que atraviesan la clula. El nombre de colesterol procede del griego
, kole (bilis) y , stereos (slido), por haberse identificado por primera vez en
los clculos de la vescula biliar por Michel Eugne Chevreul quien le dio el nombre de
colesterina, trmino que solamente se conserv en el alemn (Cholesterin). Abundan en
las grasas de origen animal.
La frmula qumica del colesterol se representa de dos formas: C 27H46O / C27H45OH.
Es un lpido esteroide, molcula de ciclopentanoperhidrofenantreno (o esterano), constituida
por cuatro carboxiclos condensados o fundidos, denominados A, B, C y D, que presentan
varias sustituciones:
1. Dos radicales metilo en las posiciones C-10 y C-13.
2. Una cadena aliftica ramificada de 8 carbonos en la posicin C-17.
3. Un grupo hidroxilo en la posicin C-3.
4. Una insaturacin entre los carbonos C-5 y C-6.
En la molcula de colesterol se puede distinguir una cabeza polar constituida por el grupo
hidroxilo y una cola o porcin apolar formada por el carbociclo de ncleos condensados y los
sustituyentes alifticos. As, el colesterol es una molcula tan hidrfoba que la solubilidad de
colesterol libre en agua es de 10-8 My, al igual que los otros lpidos, es bastante soluble en
disolventes apolares como el cloroformo (CHCl3).
Algunas de las funciones del colesterol son:
1. El colesterol es sumamente importante en cuanto a su funcin estructural por el hecho de
que es un componente basico de las membranas plasmticas. Aunque se encuentra en una
pequea cantidad en las membranas, su funcion es vital.
2. Precursor de la vitamina D, es decir, es indispensable para el metabolismo del calcio.

3. Es sumamente importante para las hormonas sexuales, por la progesterona, estrgenos y

testosterona.
4. Precursor de las hormonas corticoesteroidales, el cortisol y la aldosterona.
5. Principal componente de las sales biliares, imprescindible en la absorcion de algunos
nutrientes lipdicos.
6. Precursor de las balsas de lpidos

Para circular en la sangre el colesterol se combina con protenas llamadas lipoprotenas y

con los triglicridos. Las principales lipoprotenas que transportan colesterol son
las lipoprotenas de baja densidad (LDL) y las lipoprotenas de alta densidad (HDL).
Las LDL transportan el colesterol por todo el organismo y son las causantes de los depsitos
que obstruyen las arterias con sus consecuencias futuras.
Las HDL extraen colesterol de la pared de las arterias (efecto benfico).
El colesterol sanguneo proviene de dos fuentes:
1.

Endgena, o sea produccin propia por parte del organismo, principalmente, en el

hgado (60 - 80%).

2.

Exgena: o sea de los alimentos consumidos.

Las grasas saturadas, generalmente provenientes de productos animales, aumentan el

problema del colesterol.
Las grasas no saturadas provenientes de vegetales como el aceite de maz, tienden a
disminuir el colesterol.
Las carnes blancas (aves-pescado) en su gran mayora estn compuestas de grasas no
saturadas, mientras que la carne de res, leche entera y los huevos, tienen una gran cantidad
de grasas saturadas.
El colesterol elevado por lo tanto puede deberse a fuentes endgenas, exgenas o ambas.
La produccin excesiva de ste
hipercolesterolemias importantes.

es

ms

significativa

en

las

personas

con

La obesidad, el factor hereditario y el sedentarismo contribuyen a aumentar el colesterol.

Los factores ms fisiolgicos sobre los cuales uno puede actuar y en forma econmica son la
dieta y el ejercicio fsico.

METODOLOGIA

1. Longitud de onda 505 nm (500-550)

2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada.
3. Pipetear en una cubeta:
BLANCO
PATRON
MUESTRA
RT (mL)
1.0
1.0
1.0
Patrn (L)
-10
--Muestra (L)
--10
4.- Mezclar e incubar 5 minutos a 37 C o 10 min. A temperatura ambiente
5.- Leer la absorbancia del patrn y la muestra, frente al blanco de reactivo. El color
es estable como mnimo 60 minutos.

PRUEBAS DIAGNOSTICAS DE DIABETES MELLITUS

OBJETIVOS:

Realizar la cuantificacin de glucosa en una muestra de sangre

Analizar la absorcin de la glucosa y factores que la afecta.
Analizar la importancia de realizar la determinacin de glucosa por los
diferentes mtodos que existen.
Analizar los resultados obtenidos y su interpretacin con respecto a los
valores de referencia.

INTRIDUCCIN
Los glcidos, carbohidratos, hidratos de carbono o sacridos (del griego "azcar")
son macromolculas compuestas por carbono,hidrgeno y oxgeno y cuyas principales
funciones en los seres vivos son de reserva energtica y estructurales. La glucosa,
el glucgeno y lacelulosa son las formas biolgicas primarias de almacenamiento y consumo
de energa; la celulosa tambin cumple con una funcin estructural al formar parte de
la pared celular de las clulas vegetales, mientras que la quitina es el principal constituyente
del exoesqueleto de los artrpodos.
El trmino "hidrato de carbono" o "carbohidrato" es poco apropiado, ya que estas molculas
no son tomos de carbono hidratados, es decir, enlazados a molculas de agua, sino que
constan de tomos de carbono unidos a otros grupos funcionales como carbonilo e hidroxilo.
Este nombre proviene de la nomenclatura qumica del siglo XIX, ya que las primeras
sustancias aisladas respondan a la frmula elemental C n(H2O)n (donde "n" es un entero 3).
De aqu que el trmino "carbono-hidratado" se haya mantenido, si bien posteriormente se
demostr que no lo eran. Adems, los textos cientficos anglosajones an insisten en
denominarlos carbohydrates lo que induce a pensar que este es su nombre correcto. Del
mismo modo, en diettica, se usa con ms frecuencia la denominacin de carbohidratos.
Los glcidos pueden sufrir reacciones de esterificacin, aminacin, reduccin, oxidacin, lo
cual otorga a cada una de las estructuras una propiedad especfica, como puede ser
de solubilidad.
Se define como metabolismo de los carbohidratos a los procesos bioqumicos de formacin,
ruptura y conversin de los carbohidratos en los organismos vivos. Los carbohidratos son las
principales molculas destinadas al aporte de energa, gracias a su fcil metabolismo.

El carbohidrato ms comn es la glucosa; un monosacrido metabolizado por casi todos los

organismos conocidos. La oxidacin de un gramo de carbohidratos genera aproximadamente
4 kcal de energa; algo menos de la mitad que la generada desde lpidos.
La gluclisis o glicolisis (del
griego glycos,
azcar
y lysis,
ruptura),
es
la va
metablica encargada de oxidar la glucosacon la finalidad de obtener energa para la clula.
Consiste en 10 reacciones enzimticas consecutivas que convierten a la glucosa en dos
molculas de piruvirato, el cual es capaz de seguir otras vas metablicas y as continuar
entregando energa al organismo.1 d
La gluconeognesis es la produccin de nueva glucosa. Si molcula no es necesitada
inmediatamente se almacena bajo la forma de Glucgeno. Generalmente en personas con
requerimientos de glucosa bajos (poca actividad fsica), el glucgeno se encuentra
almacenado en el hgado pero este puede ser utilizado y metabolizado por 2 enzimas la
enzima desramificante y la glucgeno fosforilasa. El proceso de gluconeognesis se hace de
muchas formas posibles, siendo las tres ms importantes
Desde glic
El proceso empieza cuando el gliceror que viene desde el proceso de lipidolisis) se fosforila
para obtener as el glicerol 3 fosfato. Este proceso es catalizador por la enzima Glicerol
Quinasa, el glicerol 3 fosfato se convierte en dihidroxiacetona fosfato (producto que tambin
participa en la ruta anterior), este proceso es catalizado por la glicerol 3 fosfato xidoreductasa, la dihidroxiacetona fosfato se convierte en usufructo 1,6 bisfofato, sta pasa a
glucosa 6 fosfato por otra enzima (recordemos que este proceso es regulado por lo tanto
tendra que regresar por una enzima ms especfica para este sustrato), la glucosa 6 fosfato
se convierte en glucosa por medio de la Glucosa 6 Fosfatasa.
Desde aminocidos
El mecanismo empieza cuando los cidos grasos mediante el proceso de lipidolsis se
degradan hasta propionato, luego ste mediante una serie de reaccin, ingresa al ciclo de
Krebs, mediante la molcula de Succinil S Coa (coenzima A) y luego pasa a fumarato, luego
malato y es ah en donde se produce un pequeo inconveniente, debido a que la membrana
de la mitocondria no es permeable para malato. Debido a esto es que se tendra como
respuesta a la pregunta de por que estn difcil bajar de peso, al no ser permeable a malato
la clula tiene que ingenirsela para sacar esta molcula es as que la saca bajo la forma de
oxal acetato en donde se produce las reaccin anteriores hasta llegar a glucosa.
Desde lctico
El desplazamiento de las molculas de lactato y piruvato (en condiciones de requerimiento
de energa) esta hacia piruvato esto es realizado por la enzima lactato dehidrogenasa, desde
pirvico es casi imposible detener el proceso y este se carboxila (mediante la piruvato
carboxilasa) para poder entrar a la mitocondria como oxal acetato. El oxal acetato pasa a
Malato mediate la malato deshidrogenasa de tipo A, deacargando su protones sobre el
NAD+, el Malato vuelve a Oxal acetato pero fuera de La mitocondria (debido a lo explicado
anteriormente, de que el Malato no es permeable en mitocondria), mediante la malato
deshidrogenasa tipo b, este pasa a Fosfo enol piruvato mediante la Fosfo enol Piruvato
carboxi quinasa, para empezar nuevamente el proceso de Gluconeogenesis.

El pncreas tiene una parte exocrina y una parte endocrina.

La parte exocrina est constituida por clulas epiteliales dispuestas en estructuras esfricas
u ovoides huecas llamados acinos pancreticos. Formados por las clulas acinosas y en
parte por las centroacinosas.
La parte endocrina se agrupa en islotes de Langerhans, que consisten en cmulos de clulas
secretoras de hormonas que producen insulina, glucagn y somatostatina. Estos tipos de
clulas son los siguientes:
Artculo principal: Islotes de Langerhans.
Clula alfa (Alfa cell)
Sintetizan y liberan glucagn. El glucagn aumenta el nivel de glucosa sangunea (hormona
hiperglucemiante), al estimular la formacin de este carbohidrato a partir del glucgeno
almacenado en los hepatocitos. Tambin ejerce efecto en el metabolismo de protenas y
grasas. La liberacin del glucagn es inhibida por la hiperglucemia. Representan entre el 10
y el 20% del volumen del islote y se distribuyen de forma perifrica.
Clula beta (Beta Cell)
Artculo principal: Clula beta.

Las clulas beta producen y liberan insulina, hormona hipoglucemiante que regula el nivel de
glucosa en la sangre (facilitando el uso de glucosa por parte de las clulas, y retirando el
exceso de glucosa, que se almacena en el hgado en forma de glucgeno).
Clula delta (Delta Cell)
Las clulas delta producen somatostatina, hormona que inhibe la contraccin del msculo
liso del aparato digestivo y de la vescula biliar cuando la digestin ha terminado.
Clulas G (G Cell)
Estas clulas producen y liberan la hormona gastrina. Esta hormona estimula la liberacin
gstrica de HCL, la motilidad y el vaciamiento gstrico.
Clula F (PP CELL)
Estas clulas producen y liberan el polipptido

La diabetes mellitus (DM) es un conjunto de trastornos metablicos,2 que afecta a diferentes

rganos y tejidos, dura toda la vida y se caracteriza por un aumento de los niveles
de glucosa en la sangre: hiperglucemia.3 La causan varios trastornos, siendo el principal la
baja produccin de la hormona insulina, secretada por las clulas de los Islotes de
Langerhans del pncreas endocrino, o por su inadecuado uso por parte del cuerpo, 4 5 que
repercutir en el metabolismo de los hidratos de carbono, lpidos y protenas. La diabetes
mellitus y su comorbilidad constituyen actualmente la principal causa de preocupacin en
salud pblica.

METODOLOGIA
RT (Ml)
Patrn (L)
Muestra (L)

BLANCO
1.0
---

PATRON
1.0
10
--

MUESTRA
1.0
-10

Mezclar e incubar 5 min a 37 C

Leer en el espectrofotmetro a 550 nm
CALCULOS:
(A) Muestra
(A) Patrn

x 100 (con. Del patrn)= x mg/dl de glucosa en sangre.