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Departamento de Biologa
Profesor Carlos Nez Sez

Laboratorio de Reconocimiento de
Biomolculas
Los seres vivos estn constituidos por los
mismos componentes qumicos y fsicos que la
materia inanimada, y obedecen a las mismas
leyes fsicas y qumicas.
Seis elementos; C, H, O, N, P, S, constituyen el
99% de toda la materia viva. Los tomos de
todos estos elementos son pequeos y forman
enlaces covalentes estables y fuertes.
Con excepcin del hidrgeno, todos pueden
formar enlaces covalentes con dos o ms
tomos, dando lugar a las molculas complejas
que caracterizan a los sistemas vivientes.
En esencia la qumica de la vida es la qumica de los compuestos
orgnicos, es decir, de los compuestos que contienen tomos de
carbono.
La clula es el resultado del comportamiento, distribucin y ubicacin
espacial de un conjunto de molculas e iones, todos estos varan en
proporcin de acuerdo al tipo de clula y la funcin que ella cumpla.
Todos estos elementos qumicos contribuirn en entregar todo lo
necesario para el crecimiento, reproduccin, en una palabra para el
desarrollo de la clula.
Objetivos
Aplicar mtodos para reconocer compuestos qumicos inorgnicos y
orgnicos que se encuentran en la materia viva.
Deducir que la materia viva posee una composicin qumica
compleja.
Requisitos
Estudiar y analizar Bases qumicas de la vida. En Biologa de Claude
Ville, Biologa de Solomon, Invitacin a la Biologa de Curtis, Barnes,
Biologa de Helene Curtis.
Materiales
Nitrato de plata al 1 %
cido Clorhdrico concentrado
Licor de Fehling A y B
Hidrxido de sodio al 10 %
Solucin de Lugol
Solucin de cloruro de Na al 1%
Agua oxigenada de 20 Vol.
cido ntrico concentrado
Sulfato de cobre al 0,5%
Sulfato cprico al 1 %
Papel filtro
Portaobjetos
Zanahoria
Cubreobjetos
Clara de huevo cruda
Plumas
Huesos de ave molidos
Pan
cido diluido
cido actico
lcali diluido
Pipeta de 10 ml

Papa cruda
Cpsula de porcelana
Suspensin de almidn al 2%
Solucin de glucosa al 10 %
Solucin de sacarosa al 10 %
Microscopio
Gradilla
Tubos de Ensayo
Aceite
Tapa de tarro de lata
Huevos
ter
Detergente
Mechero
Bistur
Vaso de PP de 100 ml
Vaso de PP. para bao de mara
Pinza de madera
Solucin de albumina
Solucin de detergente
Agua destilada

A.- Compuestos Inorgnicos


1.- Cloruros: En un tubo de ensayo agregue 2ml de cloruro de Na al 1%
y luego agregue unas gotas de nitrato de plata al 1 %. Anote sus
observaciones.
2 . - Carbono: Caliente en una tapa de tarro de caf hueso molido,
pedacito de
pluma trozada y pan. Qu le sucede a las otras
sustancias? Explique.
B. Compuestos Qumicos orgnicos.
B.1 Reconocimiento del poder reductor de los monosacridos
Hidratos de Carbono: Los monosacridos tienen poder reductor
porque su grupo carbonilo (C=0) se puede oxidar a cido (COOH), a
costa de reducir a otros compuestos. Esto se pone de manifiesto con la
reaccin de Fehling en la que una solucin de sulfato de cobre (contiene
CuS04) de color azul, cobre II (reactivo de Fehling) se transforma en
xido cuproso, cobre I de color rojo ladrillo. De este modo, el cambio de
color indica que se ha producido la citada reaccin y que, por lo tanto, el
glcido presente es reductor.
Los disacridos como la sacarosa, al no tener un carbono anomrico
libre, carecen de poder reductor; sin embargo, si se hidroliza la sacarosa
con cido clorhdrico y calor, se separa la glucosa de la fructosa; estos
monosacridos s tienen poder reductor.
1. Enumera los tubos de ensayo del 1 al 3 y aade a cada uno
de ellos:
Tubo N 1:
Fehling B
Tubo N 2:
Fehling B

2 ml de glucosa al 10% + 1 ml de Fehling A + 1 ml de


2 ml de sacarosa al 10% + 1 ml de Fehling A + 1 ml de

1.1. Someter los dos tubos a bao de Mara por algunos minutos hasta
que observe alguna reaccin.
1.4. De acuerdo a lo observado responde lo siguiente:
a) Qu azucares son reductores?
b) Qu ocurre en el tubo 2?
c) Los diabticos eliminan glucosa por la orina. Cmo se puede
diagnosticar la enfermedad?
B.2 Reconocimiento e hidrlisis del almidn
El almidn es un polisacrido de reserva en clulas vegetales
formado por dos componentes: la amilosa y la amilopectina.
La primera se colorea de azul en presencia de yodo debido no a una
reaccin qumica sino a la adsorcin o fijacin de yodo en la
superficie de la molcula de amilosa, lo cual slo ocurre en fro, si se
calienta el almidn as tratado se separan y la coloracin
desaparece. Como reactivo se usa una solucin denominada lugol
que contiene yodo y yoduro potsico. Como los polisacridos no
tienen poder reductor, la reaccin de Fehling da negativa.
El almidn, cuando se hidroliza libera amilosa y amilopectina, si la
hidrlisis prosigue se van liberando oligosacridos de glucosa y
finalmente glucosa.

2. Reconocimiento del almidn.


2.1

Tomamos en un tubo 1, 2 ml de la suspensin de almidn y


aadimos 2 3
gotas de Lugol, observamos y anotamos la
coloracin.

2.2 A continuacin calentamos el tubo en agua sin hervir y observamos


lo que ocurre anotando los resultados.
2.3 Reconocimiento de almidn en muestras vegetales: Para ello
tomamos una papa pelada y del lquido de raspado de su
superficie ponemos un poco en un portaobjetos. Aadimos un poco
de Lugol cubrimos con un cubreobjetos y observamos en el
microscopio la forma de los granos de almidn.
Realiza una observacin antes de aadir el Lugol.
Dibuja lo que observes.
Hidrlisis de almidn.
En el organismo la hidrlisis de este polisacrido se inicia en la
boca debido a la
presencia en la saliva de la enzima amilasa
salival o ptialina.
Para saber si la hidrlisis ha tenido lugar debemos tener un
mtodo que nos diferencie el almidn de su hidrolizado.
Para eso vamos a comprobar si el almidn tiene poder reductor
utilizando el test de Fehling.
3.1. Aadimos a un tubo de ensayo 2 ml de la suspensin de
almidn+1ml de Fehling A + 1ml de Fehling B
3.2. Calentamos al bao Mara y observamos lo que ocurre: la
reaccin es positiva?
Segn eso, el almidn tiene carcter reductor?
3.3. Tomamos un tubo de ensayo al que aadimos 2ml de almidn
+ 2ml de saliva; para que la hidrlisis
se favorezca
calentamos el tubo con las manos o bien al bao Mara (37C) y
dejamos transcurrir unos 10 minutos. A continuacin aadimos 1
ml del reactivo de Fehling A y B, calentamos y observamos si la
reaccin es positiva. Anota los resultados.
Por qu para favorecer la hidrlisis del almidn no
calentamos el tubo de ensayo a la llama?
B.3.-RECONOCIMIENTO
PROPIEDADES

DE

LPIDOS

ESTUDIO

DE

SUS

Los lpidos ms abundantes son los que posen cidos grasos, es


decir, los lpidos
saponificables. De ellos los triglicridos
(grasas y aceites) son los ms caractersticos. En los triglicridos
una molcula de glicerina se encuentra esterificada por tres
molculas de cidos grasos. La reaccin de formacin ser la
siguiente:
GLICERINA (alcohol) + 3 CIDOS GRASOS----------

ESTER (triglicrido) +

AGUA

Los lpidos saponificables como los triglicridos deben este nombre a


que puede ser sustratos de una reaccin de hidrlisis alcalina
llamada saponificacin que libera jabn y glicerina. As, el jabn es,
por tanto, una sal de un cido graso:

4
TRIGLICRIDO + 3 (NaOH) -------(jabn)

------ GLICERINA + 3(RCOONa)

La caracterstica comn a todos los lpidos es que son insolubles


en agua y
solubles en disolventes orgnicos como la gasolina,
benceno, xilol, cloroformo.
Cuando se mezcla agua y aceite y se agita la mezcla se forma una
emulsin transitoria. Esto significa que si se deja la "mezcla"
reposar unos instantes, las gotas de aceite, de menor densidad,
suben y se unen entre s, formndose dos capas, la superior de
aceite y la inferior de agua.

Si a esta mezcla se la aade jabn y se agita, se produce entonces una


emulsin permanente. Esto es debido a que el jabn rodea a las gotas
de aceite quedando su parte hidrofbica (cola del cido graso) en
contacto con el aceite y su zona polar (COO -Na+) en contacto con el
agua. Esto es lo que da a los jabones en general, sus cualidades como
agentes de limpieza y es una propiedad muy utilizada en la fabricacin
de cosmticos que tienen en su composicin agua y aceites,
consiguindose un producto homogneo (se evita la formacin de dos
fases).
1.1.- Mancha sobre el papel:
Coloque en zonas diferentes de papel filtro una gota de aceite y
cido oleico. Examine las manchas al trasluz y comprelas.
1.2.- Emulsin de los lpidos:
1.2.1.- En un tubo de ensayo agregue 1 ml de aceite + 3 ml de
agua destilada. Agite vigorosamente.
1.2.2.- Qu observa? Deje reposar un momento, compare y
registre observaciones.
1.2.3.- En un tubo de ensayo agregue 1 ml de aceite + 3 ml de
detergente. Agite y deje reposar unos minutos.
1.2.4.- Qu observa? Compare con la experiencia anterior.
1.2.5.- Qu tipo de emulsin est observando?
B.4 Reconocimiento y propiedades de las protenas
Las protenas son macromolculas formadas por la unin de
muchos aminocidos por el enlace peptdico (estructura primaria).
Adems pueden darse uniones por enlaces dbiles de distinta
naturaleza que hacen que la protena adquiera una conformacin
tridimensional caracterstica (estructura terciaria).
Las variaciones de pH, temperatura o concentracin salina pueden
destruir esos enlaces dbiles de manera que la protena pierde su
conformacin y se dice que se desnaturaliza.
Solucin de albumina: Se prepara batiendo la clara de huevo con
6 o 10 volmenes de agua. El material es filtrado a travs de una
gasa para remover el precipitado de ovomucoide formado, y luego
filtrado a travs de un papel filtro; el filtrado se usara en los test
siguientes.
1.- Identificacin de Protenas
1.1.- Reaccin Xantoproteca: En un tubo de ensayo coloque 2ml
de
solucin de albmina y agregue 1ml de cido ntrico
concentrado. Qu ocurre? Registre sus observaciones.
1.2.- Caliente la mezcla y verifique el color amarillo formado. Enfre la
solucin y cuidadosamente agregue hidrxido de sodio en
exceso. Note que el color amarillo se torna naranja. Explique.

1.3.- Test de Biuret: Coloque en un tubo de ensayo unos 2 ml de


solucin de albmina de huevo y vierta en igual volumen de
hidrxido de sodio al 10% y mezcle
completamente. Agregue
solucin de sulfato de cobre al 0,5% gota a gota. Qu ocurre?
Dibuje lo observado. Por las paredes del tubo agregue unas gotas
(4) de sulfato cprico al 1%. Registre lo ocurrido.

2.- Identificacin de Enzimas.


1.- Identificacin de la catalasa por su actividad. La catalasa es
una enzima
dnde se encuentra en la clula? Qu reacciones
cataliza?
Procedimiento:
Cortar una rodaja de zanahoria y ponerla sobre el vidrio reloj.
Agregar unas gotas de H2O2 sobre ella.
Qu
observas?
Explcalo.
Repite la misma operacin pero esta vez calienta previamente la
hoja del
cuchillo a la llama del mechero e inmediatamente
corta la rodaja de zanahoria y agrega el perxido de hidrgeno.
Observa y explica lo que ests viendo. Por qu ha ocurrido esto?

A
trabaja
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descubr
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