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Ttulo

Simultaneous quantitative determination of five alkaloids in


Catharanthus roseus by HPLC-ESI-MS/MS (Determinao quantitativa
simultnea de cinco alcalides em Catharanthus roseus por HPLC-ESIMS / MS).
Objetivo do trabalho
Estabelecer um mtodo para determinar simultaneamente os cinco
principais alcalides de Catharanthus roseus para amostras trao,
utilizando cromatografia lquida de alto desempenho de ionizao por
electrospray acoplado espectrometria de massa (HPLC-ESI-MS / MS)
Tipo de amostra
Trs lotes de C. roseus foram recolhidos de diferentes regies da
China. As amostras do norte, mdio e das regies sul da China eram
de Heilongjiang (cultivo parque de Northeast Forestry University),
Zhejiang (cultivo parque de Zhejiang Hisun Pharmaceutical Co., Ltd.)
e Provncia de Hainan (cultivo parque de Hainan Catharanthus Centro
de Pesquisa e Desenvolvimento), respectivamente, e foram
identificados pelo Prof. NIE Shao-Quan do Laboratrio Key Planta de
Ecologia Florestal, Ministrio da Educao, Universidade Florestal do
Norte, Harbin, China. O material foi seco a sombra e foi mantido a 20
C antes de usar.
Analitos estudados
Vinblastina (VBL), vincristina ( VCR), vinleurosina (VLS), vindolina
(VDL) e catarantina (CTR).
Cuidados na coleta (material de coleta, frascos, etc)
No informado no artigo.
Reagentes (grau de pureza)
Os padres de referncia de VBL e VNB foram adquiridos a Sigma (St.
Louis, EUA) (pureza> 98%). VCR, VLS, VDL e CTR foram adquiridos a
partir de Xangai Tauto Biotech Co. Ltd. (Xangai, China) (pureza>
98%); Todos os padres foram dissolvidos em metanol e armazenado
no escuro a 4 C. Metanol de grau HPLC foi adquiridod a J & K
Chemical Ltd. (Pequim, China). O cido frmico e o acetato de amnio
foram adquiridos de Dikma Technology Inc. (Richmond Hill, EUA). A
gua deionizada para anlise por HPLC foi purificada com um sistema
de gua Milli-Q da Millipore Corp. ultrapura (Billerica, MA, EUA).

Outros reagentes eram todos os produtos qumicos de qualidade


analtica.
Mtodo utilizado (tcnica)
O cinco alcalides Catharanthus, vinblastina, vincristina, vinleurosina,
vindolina e catarantina foram separados cromatograficamente por
uma coluna de HPLC C18. A fase mvel foi metanol-15 nmol.L-1 de
acetato de amnio contendo 0,02% de cido frmico (65: 35, V / V).
A quantificao destes alcalides baseou-se no modo de
monitorizao de reaes mltiplas (MRM).
Concentraes encontradas
Os resultados demonstraram que houve uma excelente correlao
entre a relao de rea de pico de cada um alcalide contra a
concentrao para cada alcaloide dentro da linearidade. Os Limites
inferiores de quantificao (LLOQs) de VBL, VCR, e VLS foram de 1,5
ng mL-1, enquanto os LLOQs de VDL e CTR foram 3,1 ng mL-1. Os
LLODs de VBL, VCR, e VLS foram de 0,75 ng mL-1, enquanto os
LLODs de VDL e CTR foram de 1,5 ng mL-1. Estes LLOQs so
suficientes para a deteco do teor dos cinco alcaloides
Catharanthus.
Outras Observaes:
Um mtodo LC-ESI-MS / MS sensvel para a determinao da VBL,
VCR, VLS, VDL e CTR foi desenvolvido, validado e aplicado para a
anlise quantitativa em C. roseus. O mtodo LC-ESI-MS / MS foi
descrito sensvel, com alta preciso e um tempo de execuo curta de
10 min, e cumpriu todos os requisitos para anlise do extrato de
planta. Com nenhum relatrio sobre os mtodos para a determinao
quantitativa dos cinco alcalides Catharanthus HPLC-MS ou HPLC-MS /
MS, este o primeiro relatrio do estudo quantitativo simultnea de
VBL, VCR, VLS, VDL e CTR em extratos de C. roseus. O mtodo
apresentado valioso para fornecer um procedimento para a futura
anlise de vestgios de componentes em C. roseus.

UNIVERSIDADE ESTADUAL DE PONTA GROSSA


SETOR DE CINCIAS BIOLGICAS E DA SADE
DEPARTAMENTO DE CINCIAS FARMACUTICAS

Anlise do artigo: Simultaneous quantitative


determination of five alkaloids in
Catharanthus roseus by HPLC-ESI-MS/MS

PONTA GROSSA
2015
RAPHAEL VIEIRA LOPES

Anlise do artigo: Simultaneous quantitative


determination of five alkaloids in
Catharanthus roseus by HPLC-ESI-MS/MS
Trabalho apresentado pelo
aluno
supracitado,
pertencente ao 2 ano do
curso de Farmcia, na
forma
de
atividade
avaliativa complementar da
disciplina
de
Qumica
Analtica Quantitativa.
Professora Doris de Oliveira
Gregianin.

PONTA GROSSA
2015