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CUESTIONARIO HPLC

1- En qué año fue desarrollada la técnica de HPLC?
1903
2- Cuáles son las principales aplicaciones?
Parte bioquímica y analítica para separar, identificar y cuantificar
compuestos de una mezcla.
3- Cuál es la principal diferencia entre la cromatografía de gases y la
cromatografía líquida de alta eficiencia?
Utiliza alta presión y muestras no volátiles muestras no deben ser
vaporizadas.
4- Nombre los compuestos que pueden ser analizados por medio de la
cromatografía líquida.
Determinar aminoácidos, proteínas, ácidos nucleicos, esteroides,
drogas, plaguicidas, antibióticos, especies organometalicas y ciertas
sustancias de carácter inorgánico.
5- Ventajas de la técnica.
Altamente sensible, más rápida en la respuesta de los compuestos y
es mucho más versátil.
6- Partes del equipo.
 Sistema cromatográfico
 Reservorios
 Bombas
 Sistema de inyección
 Columna
 Sistema de detección
 Registrados de datos
7- Cuál es la función de la bomba?
Generan una alta presión del gas para que el líquido eluya y pasa a
través de las columnas cromatografías.
8- Explique los diferentes tipos de inyección que existen para HPLC.
 Automáticos: Utilizan una jeringa que no tiene punta, emplea
de 1 a 10 uL de muestra y se ubica entre la bomba y la
columna.
 Manual: Mediante válvulas lup de flujo constantes que inyectan
una determinada cantidad en la columna.
9- Cuál es el rango de temperatura en el que puede trabajar la columna
en HPLC.
20 °C

10-Describa las columnas para HPLC. Material, tamaño.

. d) En la columna se separan los compuestos y luego pasan a ser cuantificados en un detector. En la precolumna se quedan todas las partículas o suciedades que puedan dañar a la columna. la fase estacionaria debe ser la misma en la columna y precolumna. e) La respuesta de los detectores es un cromatograma que nos indica el numero de compuestos que tiene la muestra. wolframio y un monocromador. a) La muestra es colocada en un vial ámbar y disuelta en los disolventes orgánicos b) La muestra es colocada en el automuestradeor.  Detector del índice de refracción: Trabaja con modo isocrático  Detector de fluorescencia: Analitos fluoresecntes por naturaleza  Detector de arreglo de fotodiodos: Utiliza lámparas de deuterio. 12-Que preparación se le debe dar a la muestra? Deben ser filtradas que tienen un diámetro de 1 a 5 um 13-Nombre los diferentes tipos de detectores y cuál es la aplicación de cada uno. utiliza una mezcla de solventes para trabajar las muestras 16-Explique el proceso completo de análisis por HPLC.  Detector del espectrómetro de masas: Cuantificar los compuestos en una muestra 14-Que es modo isocrático La fase móvil es constante en el tiempo o utiliza un solo disolvente al inyectar la muestra 15-Que es modo gradiente Fase móvil varia con el tiempo. cada pico significa un compuesto diferente.    Material acero inoxidable o plástico Longitud de 5 a 30 cm Dentro se encuentran fase estacionaria con partículas de sílice o carbón activo Diámetro de 1 a 5 mm 11-Cuál es la función de la precolumna? Y qué tipo de fase estacionaria debe tener. xenón. c) El sistema de inyección toma 10 uL de muestra y los inyecta en la columna.

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