Dissertação Antimicrobiano

UNIVERSIDADE FEDERAL DA PARABA
CENTRO DE CINCIAS EXATAS E DA NATUREZA

PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM QUMICA
NANOPARTCULAS DE PRATA E Ag/ZnO NANOESTRUTURADO

COMO AGENTES ANTIMICROBIANOS OBTIDOS POR
PROCESSO HIDROTERMAL DE MICRO-ONDAS
Suelnio Viegas de Santana
Joo Pessoa-PB
Agosto/2012
SUELNIO VIEGAS DE SANTANA

Dissertao apresentada ao Corpo Docente do

Programa de Ps-Graduao em Qumica da
Universidade Federal da Paraba, em
cumprimento s exigncias para obteno do
Ttulo de mestre em Qumica.
Orientadores:
Prof. Dr. Dawy Keyson de Arajo Almeida
Profa. Dra. Ida Maria Garcia dos Santos
Joo Pessoa-PB
Agosto/2012
S232n
UFPB/BC
Santana, Suelnio Viegas de.

Nanopartculas de prata e Ag/Zno nanoestruturado como
agentes antimicrobianos obtidos por processo hidrotermal de
micro-ondas / Suelnio Viegas de Santana.- Joo Pessoa,
2012.
86f. : il.
Orientadores: Dawy Keyson de Arajo Almeida, Ida Maria
Garcia dos Santos
Dissertao (Mestrado) UFPB/CCEN
1. Qumica. 2. Nanopartculas de prata. 3. Hidrotermal de
micro-ondas. 4. Atividade antimicrobiana. 5. Toxicidade.
6. Citoxidade.
CDU: 54(043)
SUELNIO VIEGAS DE SANTANA

Data da Aprovao: Joo Pessoa, 29 de agosto de 2012
Banca Examinadora
___________________________________
Prof. Dr. Dawy Keyson de Arajo Almeida
Orientador
___________________________________
Profa. Dra. Ida Maria Garcia dos Santos
Orientadora
___________________________________
Prof. Dr. Jailson Machado Ferreira
Membro Externo
___________________________________
Prof. Dr. Ary da Silva Maia Filho
Membro Interno
Quero trazer memria aquilo

que me pode dar esperana.
Lm 3:21
Ao meu pai e minha me, pelo amor e carinho.

Ao meu filho Thales incondicionalmente amado.
Dedico.
AGRADECIMENTOS
Aos meus pais e minha famlia, pelo incentivo e por compartilharem

comigo a realizao dos meus sonhos.
Vanessa minha noiva e companheira, pelo incentivo, apoio, estando
sempre ao meu lado em todos os momentos.
Ao meu filho Thales que mesmo sem ter a compreenso total da
importncia desse trabalho aceitou a minha ausncia retribuindo com amor e
carinho.
Ao prof. Dr. Dawy Keyson de Arajo Almeida, meu orientador e fraterno
amigo, pela inestimvel orientao, incentivo e confiana, determinantes na
execuo deste trabalho.
professora Dr Ida Maria Garcia dos Santos, pelo acolhimento em
seu grupo, pelas discusses, orientaes e ensinamentos cientficos.
Ao Professor Dr. Antnio Gouveia de Souza pelo apoio e colaborao;
professora Dr. Edeltrudes de Oliveira Lima e Camilla Pinheiro pela
orientao, pacincia, apoio e imensa ajuda nos testes antimicrobianos.
Ao Prof. Dr. Maral de Queiroz Paulo, pelas palavras de incentivo,
conselhos, amizade e encorajamento na concluso deste trabalho.
Aos professores Dr. Tibrio Andrade Passos e Dr. Severino Jackson
Guedes de Lima, pelas anlises de MEV realizadas.
Aos colegas Guilherme e Kleber que, alm de amigos, contriburam de
forma sempre presente para o trmino deste trabalho. A vocs a minha eterna
gratido.
Aos colegas, Lucia, Joo Jarlys, Jeferson, Jandilson, Arnayra, Ana
Flavia, Sarah, Augusto, Andr, Fatima, Cristiano, Anderson, Marcia, Marco
Aurelio, Fagner, Danniely, Rosa e a todos que fazem parte do LACOM pelo
companheirismo e por todas as ajudas a mim dispensadas.
Aos Colegas do IFPB campus-picu pela amizade e incentivo;

Aos amigos Aurilio Rossy e Thiago Lima sempre presentes ao meu
lado nas alegrias e nos momentos mais difceis da minha vida.
Aos professores que participaram da qualificao e banca examinadora,
agradeo-lhes as contribuies, sugestes e crticas;
Aos professores do Programa de Ps-Graduao em Qumica, pelos
ensinamentos;
Aos secretrios do LACOM e da coordenao de ps-graduao em
qumica, Marcos Pequeno, pela ajuda e amizade;
A todos os colegas de mestrado da UFPB pelas horas agradveis de
estudo e pelo companheirismo que tiveram durante toda essa luta.
RESUMO
Ttulo: Nanopartculas de prata e Ag/ZnO nanoestruturado como agentes

antimicrobiano obtidos por processo hidrotermal de micro-ondas.
Autor:
Orientadores:
Prof. Dr. Dawy Keyson de Arajo Almeida;
Profa. Dr. Ida Maria Garcia dos Santos.
Este trabalho consiste na obteno, caracterizao e avaliao antimicrobiana
de nanopartculas de prata e Ag/ZnO nanoestruturado. As nanopartculas de
prata foram obtidas atravs de uma nova rota utilizando AgNO3 como sal
precursor e citrato de amnio como agente redutor. Sobre xido de zinco
comercial foram impregnadas nanopartculas de prata por meio do mtodo
hidrotermal de micro-ondas em diferentes tempos de sntese. As amostras
Ag/ZnO nanoestruturado foram caracterizadas atravs das tcnicas de difrao
de raios X (DRX), microscopia eletrnica de varredura (MEV) e espectroscopia
de energia dispersiva (EDS). As nanopartculas de prata coloidais obtidas
durante os processos foram caracterizadas por meio da espectroscopia ptica
na regio do ultravioleta e visvel (UV-Vis). Ensaios de atividade antimicrobiana
foram procedidos para o Ag/ZnO nanoestruturado e para as nanopartculas de
prata coloidal. Foram includas seis espcies bacterianas e seis espcies
fngicas. Anlises da atividade txica e citotxica, foram procedidas para as
nanopartculas de prata coloidal sobre alevinos de Poecilia Reticulata e sobre
Artemia salina. Os resultados demostram que mtodo de sntese escolhido se
mostrou eficaz para a sntese da prata, bem como no processo de
impregnao das nanopartculas de prata sobre o xido de zinco comercial. Os
testes biolgicos revelaram significativa atividade antimicrobiana das
nanopartculas de prata sobre os micro-organismos analisados e a sua baixa
toxidade.
Palavras Chave: nanopartculas de prata, hidrotermal de micro-ondas,
antimicrobiana, toxicidade, citotoxidade.
ABSTRACT
Title: Silver nanoparticles and Ag / ZnO nanostructured as antimicrobial agents

obtained by hydrothermal process of microwaves.
Author:
Advisers: Prof. Dr. Dawy Keyson de Arajo Almeida;
Profa. Dr. Ida Maria Garcia dos Santos.
Suelnio Viegas de Santana; orientadores: Prof. Dr. Dawy Keyson de Arajo
Almeida; Profa. Dr. Ida Maria Garcia dos Santos.
This study consists of the acquisition, characterization and evaluation of
antimicrobial silver nanoparticles and nanostructured Ag/ZnO. The silver
nanoparticles were obtained through a new route using AgNO3 as precursor salt
and ammonium citrate as reducing agent. Concerning the commercial zinc
oxide, silver nanoparticles were impregnated using the microwave hydrothermal
method at different synthesis times. Samples of Ag / ZnO nanostructured were
characterized by using techniques of X-Ray Diffraction (DRX), Scanning
Electron Microscopy (SEM) and Energy Dispersive Spectroscopy (EDS). The
colloidal silver nanoparticles obtained during the processes were characterized
through optical spectroscopy in the ultraviolet and visible (UV-Vis) regions.
Antimicrobial activity assays were carried for the Ag / ZnO nanostructured and
for colloidal silver nanoparticles. They were included six bacteria species as
well as six fungal species. Analysis of toxic and cytotoxic activity was performed
for colloidal silver nanoparticles on fingerlings of Poecilia Reticulata and Artemia
salina. The results show that the chosen synthesis method is effective for silver
synthesis, as well as for the process of impregnation of the silver nanoparticles
on the commercial zinc oxide. The biological tests revealed significant
antimicrobial activity of silver nanoparticles on the micro-organisms analyzed
and their low toxicity.
Keywords: silver nanoparticles, microwave hydrothermal, antimicrobial, toxicity,
cytotoxicity.
LISTA DE FIGURAS
Figura 1. (a) imagens de fibras virgens, (b) Os tecidos revestidos com
nanopartculas de Ag com uma ampliao baixa, (c) Os tecidos
revestidos com Ag nanopartculas com uma ampliao elevada................
22
Figura 2. Esquema ilustrativo demonstrando a sntese, funcionalizao

da superfcie e reduo do dendrmero PAMAM, juntamente com a
formao das nanopartculas de ouro dendrimerizadas..............................
29
Figura 3. Anlise dos agentes estabilizantes relatados em estudos de

sntese de nanopartculas de prata.............................................................
30
Figura 4. Espectro eletrnico de absoro no UV-Vis da soluo de

prata coloidal...............................................................................................
Figura 5.
Espectro UV-Vis de nanopartculas de prata coloidal
preparadas em diferentes quantidades de sementes..................................

Figura 6.
31
Espectros de UV-visvel de nanopartculas de prata
32
em
diferentes da oncentraes de AgNO3. [AgNO3] = 0,5 (1c), 1,5 (2c), 2

(3c), 2,5 (4c) mmol/l.....................................................................................
33
Figura 7. Espectro de absoro do UV-Vis de nanopartculas de prata

estabilizadas com AOT em diferentes potencias de micro-ondas..............
34
Figura 8. Faixa de abrangncia das ondas eletromagnticas....................
37
Figura 9. Reator hidrotermal de micro-ondas.............................................
40
Figura 10. Partes que compem o reator hidrotermal de micro-ondas.....
41
Figura 11. Fluxograma da sntese de nanopartculas de prata..................
42
Figura 12 - Fluxograma do processo de sntese/impregnao de

nanopartculas de prata sobre o xido de zinco..........................................
44
Figura 13. Difratogramas da prata em diferentes tempos de sntese........
52
Figura 14. Difratogramas Ag/ZnO e do ZnO..............................................
54
Figura 15. Dados da prata suportada sobre ZnO em 5 min de sntese: a)

imagem de MEV; b) Mapeamento da Ag; c) Espectro de EDS...............
55
Figura 16. Dados da prata suportada sobre ZnO em 15 min de sntese:

a) Imagem de MEV; b) Mapeamento da Ag; c) Espectro de EDS..........
56
Figura 17. Dados da prata suportada sobre ZnO em 30 min de sntese:

a) imagem de MEV; b) Mapeamento da Ag; c) Espectro de EDS..........
57
Figura 18. Espectro de absoro do UV-VIS das amostras das solues

sobrenadantes diludas na proporo 1:2...................................................
59
Figura 19. Fotografia das solues sobrenadantes sintetizadas no RHM

em diferentes tempos de sntese (mim): a = 5; b = 15; c = 30....................
60
Figura 20. Espectro de absoro do UV-VIS das amostras das solues

sobrenadantes obtidas durante a sntese/impregnao de nanopartculas
sobre o xido de zinco em diferentes tempos de processamento...............
61
Figura 21. Fotografia das solues sobrenadantes obtidas durante a

sntese/impregnao de nanopartculas de prata no RHM em diferentes
tempos de processamento (mim): a = 5; b = 15; c = 30..............................
62
LISTA DE TABELAS
Tabela 1. Descrio de alguns curativos comerciais que utilizam a prata

como agente antimicrobiano........................................................................
24
Tabela 2. Correlao de tamanhos de nanopartculas de prata e o

comprimento de onda na anlise por espectroscopia por UV-vis...............
32
Tabela 3. Precursores utilizados nas snteses nanoestruturadas de prata
40
Tabela 4. FWHM, tamanho de cristalito, parmetros de rede e volume

da clula unitria das amostras sintetizadas pelo mtodo hidrotermal
assistido por micro-ondas............................................................................
53
Tabela 5. Massa de prata metlica nos diferentes tempos de sntese.......
62
Tabela 6. Massa das nanopartculas de prata coloidal nos diferentes

tempos de sntese........................................................................................
63
Tabela 7 Rendimento percentual (em massa) das fases obtidas na

sntese em diferentes tempos de processamento.......................................
64
Tabela 8. Resultados dos ensaios de atividade biolgica das solues

contendo NPC-5 sobre bactrias e leveduras do gnero cndida..............
66

contendo NPC-15 sobre bactrias e leveduras do gnero cndida............
67

contendo NPC-30 sobre bactrias e leveduras do gnero cndida............
68
Tabela 11. Resultado dos ensaios de atividade biolgica da soluo

original de AgNO3 diluda inicialmente na proporo 1:1 sobre bactrias
e leveduras do gnero cndida....................................................................
70

NPC-30 sem a presena de ons Ag+ residuais sobre bactrias e
leveduras do gnero cndida.......................................................................
71
Tabela 13. Resultados dos ensaios de atividade biolgica do Ag/ZnO

sintetizados em 5 minutos...........................................................................
73

sintetizados em 15 minutos.........................................................................
74

sintetizados em 30 minutos.........................................................................
75
Tabela 16. Resultados dos ensaios de atividade biolgica dos slidos

obtidos nas snteses e para o ZnO..............................................................
77
Tabela 17. Resultados dos testes citotxicos das solues de

nanopartculas de prata coloidal em Artemia salina, aps 24 horas......
78
Tabela 18. Resultados dos testes toxicolgicos de uma soluo

contendo ons Ag+ em alevinos de Poecilia reticulata, aps 24 horas........
79
Tabela 19. Resultados dos testes toxicolgicos das solues coloidais

de nanopartculas de prata em alevinos de Poecilia reticulata, aps 24
horas............................................................................................................
79
LISTA DE SIGLAS E SMBOLOS

angstrons.
a, b, c parmetros de cela unitria.
Ag Prata.
AOT bis(2-etil hexil) sulfossuccinato de sdio.
ATCC American Type Culture Collection.
CFC cbica de face centrada.
CIM concentrao inibitria mnima.
CTAB Brometo de cetil trimetil amnio.
DRX difrao de raios-X.
DL50 Dose letal capaz de matar 50% dos indivduos de uma populao em
teste.
EDL Electrical double layer.
EDS Espectroscopia de energia dispersiva
g grama.
GHz GigaHertz.
Hz Hertz.
INLAB investigao laboratorial.
JCPDS Joint Committee on Powder Diffrraction Standards.
LACOM Laboratrio de combustveis e materiais.
LM Laboratrio de micologia.
m metro.
MPC-5 nanopartculas de prata sintetizadas durante 5 minutos
MEV Microscopia eletrnica de varredura.
mg miligrama.
MHz MegaHertz.
min minuto.
mm milmetro.
nm nanmetro.
NPC nanopartculas de prata coloidal
PAMAM Poliamidoamina.
PEG poliestearato de etilnoglicol.

pH potencial hidrogeninico.
ppm partes por milho.
PVA polivinil lcool.
PVP Polivinilpirrolidona
RHM Reator hidrotermal de micro-ondas.
ROS Reactive oxygen species.
SDS Dodecil sulfato de sdio.
SPR Surface plasmon resonance.
UFC unidade formadora de colnia.
UV Ultra violeta.
UV-Vis Ultravioleta e visvel.
L microlitro.
SUMRIO
1 INTRODUO............................................................................................. 18
2 OBJETIVOS................................................................................................. 21
2.1 Objetivo geral............................................................................................ 21
2.2 Objetivos especficos................................................................................ 21
3 FUNDAMENTAO TERICA...................................................................
22
3.1 Atividade antimicrobiana..........................................................................
22
3.2 Sntese e caracterizao de nanopartculas de prata..............................
26
3.2.1 Nanopartculas de prata em sistemas coloidais....................................
27
3.2.2 Caracterizao de nanopartculas de prata coloidal.............................
31
3.3 xido de zinco..........................................................................................
35
3.4 Tecnologia de micro-ondas......................................................................
37
4.METODOLOGIA..........................................................................................
40
4.1 Reagentes................................................................................................
40
4.2 Sntese...................................................................................................... 41
4.2.1 Sntese da prata pelo mtodo hidrotermal de micro-ondas................... 41
4.2.2 Impregnao de nanopartculas de prata sobre o xido de zinco
micromtrico pelo mtodo hidrotermal de micro-ondas.................................
43
4.3 Tcnicas de caracterizao......................................................................
45
4.3.1 Difrao de raios X (DRX).....................................................................
45
4.3.1.1 Tamanho de cristalino (TC) e largura a meia altura...........................
45
4.3.1.2 Parmetros de rede (PR) e volume da clula unitria (VCU)............
46
4.3.2 Espectroscopia ptica nas regies ultravioleta e visvel (UV-vis)......
47
4.3.3 Microscopia eletrnica de varredura (MEV) e espectroscopia de

energia dispersiva (EDS)................................................................................ 47
4.3.4.Gravimetria............................................................................................
48
4.3.5 Avaliao da atividade antimicrobiana..................................................
48
4.3.5.1 Produtos testados............................................................................... 48

4.3.5.2 Antimicrobianos sintticos..................................................................
49
4.3.5.3 Micro-organismos...............................................................................
49
4.3.5.4 Meios de cultura.................................................................................
49
4.3.5.5. Determinao da Concentrao Inibitria Mnima (CIM)..................
50
4.3.6 Anlise da atividade txica e citotxica de nanopartculas de prata

coloidal............................................................................................................ 51
5 RESULTADOS E DISCUSSO................................................................... 52
5.1 Difrao de raios-X...................................................................................
52
5.1.1 Largura a meia altura (FWHM), tamanho de cristalino e parmetros

de rede............................................................................................................ 53
5. 2
Microscopia eletrnica de varredura (MEV) e Espectroscopia de
energia dispersiva (EDS)................................................................................ 55

5. 3 Espectroscopia de absoro na regio do ultravioleta-visvel (UV-vis)
59
5.4 Gravimetria...............................................................................................
62
5.5 Testes biolgicos..............
64
5.5.1 Ensaios de atividade antimicrobiana.............
64
5.5.2 Ensaios de atividade citotxica e txica de nanopartculas de prata

coloidal............................................................................................................ 78
6 CONCLUSES............................................................................................ 80
7 SUGESTO DE TRABALHOS FUTUROS.................................................. 81
8 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS............................................................
82
1 INTRODUO
A nanotecnologia amide vem sendo tratada de maneira transdisciplinar
por qumicos, fsicos, bilogos, engenheiros e farmacuticos, entre outros
profissionais (FERNANDES, 2008) com o intuito de desenvolver novos
materiais alicerados em quatro fundamentos bsicos: (I) sntese/preparao,
(II) caracterizao, (III) estudo de propriedades e relao estrutura-propriedade
e
(IV)
aplicaes
(ZARBIN,
2007).
Recentemente
preparao
de
nanopartculas tem recebido uma grande ateno por parte da comunidade

acadmica devido s propriedades catalticas, pticas, eletrnicas, magnticas
e bactericidas (SIFONTES, 2010).
As propriedades diferenciadas que muitos materiais apresentam quando
em escala nanomtrica, comparadas aos de dimenses micromtricas, tm
como um dos motivos principais a alta relao entre superfcie e volume,
fazendo com que ocorra um aumento do nmero de tomos que esto
localizados na superfcie do material ao se comparar ao nmero de tomos que
esto na regio interna das partculas. Por outro lado, muitas propriedades
fsicas e qumicas de materiais nanoestruturados emergem dos defeitos
presentes em suas superfcies, como o caso do nvel de ordem e desordem a
curto alcance, como por exemplo eltron/buraco e vacncia de oxignios
(OLIVEIRA, 2005).
O mtodo escolhido para obteno de um determinado material em
dimenso nanomtrica tem um papel crucial nas suas propriedades
magnticas, pticas e eltricas. De modo que um material obtido por mtodo
diferente pode apresentar mudanas sensveis nas suas propriedades, na sua
morfologia bem como na sua estrutura cristalina e composio (OLIVEIRA,
2009). Portanto no desafio de obteno de novos materiais, vrias
metodologias e tcnicas de preparao vm sendo desenvolvidas com o intuito
de se controlar a fase, a morfologia e o tamanho de partcula, como
consequncia, melhorar e maximizar suas propriedades. Diferentes mtodos
de sntese para obteno de nanopartculas so descritos na literatura,
incluindo-se os mtodos hidrotermais, co-precipitao, microemulso, o mtodo
sol-gel dentre outros (KEYSON, 2006).
18
Recentemente, o uso da tecnologia de micro-ondas tem sido explorado

como uma promissora tcnica para a sntese de nanoestruturas. A radiao de
micro-ondas gera locais de nucleao muito rapidamente na soluo
aumentando assim significativamente a cintica da reao em relao ao
aquecimento convencional (ASWATHY et al., 2011). Snteses qumicas vm
sendo conduzidas em aparelhos de micro-ondas modificados que possibilitam
o controle da temperatura e presso, de modo que esses reatores de micro-ondas tm se tornado mais eficientes do ponto de vista energtico e
garantindo uma maior reprodutibilidade de processo (SANSEVERINO, 2002).
No mbito tecnolgico, materiais de ordem de grandeza nanomtrica
podem apresentar as mais diversas aplicaes em diferentes reas, como por
exemplo, na optoeletrnica, condutores transparentes, sensores de gs,
fotoctalise e fotoluminescncia (OLIVEIRA, 2009). Na rea mdica, as
nanopartculas metlicas e de seus xidos tm se mostrado promissoras na
sua utilizao como frmacos, principalmente, na ao contra micro-organismos (GARCIA, 2011).
As propriedades antimicrobianas da prata so conhecidas h sculos,
o seu uso para fins medicinais tem se expandido com o tempo, sendo utilizada
em uma variedade de materiais na rea de sade e bem-estar humano, como
por exemplo o seu uso em cateteres com a finalidade de evitar infeces
(SMETANA et al., 2008). Com o aparecimento e crescimento de organismos
microbianos resistentes a mltiplos antibiticos, diferentes formas de
nanomateriais
de
prata
esto
entre
os
mais
promissores
agentes
antimicrobianos que vm sendo desenvolvidos a partir da nanotecnologia

(ASHARANI et al., 2009; MARAMBIO-JONES e HOEK, 2010).
Uma rea que tem crescido rapidamente na nanotecnologia tem sido a
concepo e fabricao de novos materiais, neste sentido tem se tornado um
campo
de
interesse
interao
de
nanopartculas
metlicas
sobre
determinadas superfcies, como no caso de fibras txteis impregnadas com

nanopartculas metlicas (PERELSHTEIN et al., 2008).
A incorporao de
nanopartculas metlicas se d principalmente via dois mtodos: por dopagem

(ou substituio) ou ainda por impregnao do metal (SAHA, WANG e PAL,
2008).
19
Assim sendo, o presente trabalho tem como foco a obteno de

nanopartculas de prata e a sua impregnao sobre xido de zinco
micromtrico, para aplicaes antimicrobianas, atravs de uma nova rota de
sntese utilizando o processo hidrotermal de micro-ondas.
20
2 OBJETIVOS
2.1 Objetivo geral

Sintetizar, caracterizar nanopartculas de prata e nanopartculas de prata
impregnadas sobre xido de zinco comercial e avaliar sua atividade
antimicrobiana.
2.2 Objetivos especficos
Propor uma nova rota de sntese para obteno de nanopartculas de
prata;
Sintetizar nanopartculas de prata atravs do mtodo hidrotermal de
micro-ondas;
Caracterizar as nanopartculas de prata;
Impregnar as nanopartculas de prata sobre xido de zinco comercial de
tamanho micromtrico atravs do mtodo hidrotermal de micro-ondas;
Caracterizar o material obtido na impregnao da prata sobre o xido de
zinco;
Avaliar a atividade antimicrobiana de nanopartculas de prata coloidal.
Avaliar
atividade
antimicrobiana
de
nanopartculas
de
prata
impregnadas em xido de zinco micromtrico.

Avaliar a toxidade e citotoxidade das nanopartculas de prata coloidal e
dos ons Ag+.
21
3 FUNDAMENTAO TERICA
3.1 Atividade antimicrobiana
Ao longo do sculo 20, a reduo dos ndices de mortalidades por
doenas infecciosas foi atribuda utilizao de agentes antimicrobianos.
Entretanto a resistncia aos antibiticos tem atingido, atualmente, um nvel
crtico e, em alguns casos, tornando ineficaz o seu uso clnico. A contnua
evoluo
da
resistncia
antimicrobiana
ameaa
sade
humana,
compromentendo de forma expressiva a capacidade de tratar infeces graves

(HUH e KWON, 2011).
Um caminho para se resolver a resistncia bacteriana s drogas
antimicrobianas tem sido a descoberta de novos antibiticos e a modificao
qumica de antimicrobianos j existentes. Uma nova rota que vem sendo
explorada a da utilizao de nanomateriais antimicrobianos, em que agentes
patognicos no desenvolvam resistncia. Materiais nanoestruturados como
xido de titnio, prata e xido de zinco, entre outros, tm apresentado um
amplo potencial antibacteriano sobre fibras txteis por exemplo. (HUH e
KWON, 2011; DASTJERDI e MONTAZER, 2010). Novos produtos na indstria
de vesturio vm sendo desenvolvidos utilizando a imobilizao de materiais
nanoestruturados em seus tecidos. Atravs de um processo denominado
sonoqumica, que consiste na impregnao de nanopartculas, foi possvel
preparar tecidos tais como: nylon, polister e algodo revestidos com
nanopartculas de prata com propriedades antibacteriana, como visto na Figura
1.
Figura 1 - (a) Imagens de fibras virgens, (b) Os tecidos revestidos com nanopartculas de Ag
com uma ampliao baixa, (c) Os tecidos revestidos com Ag nanopartculas com uma
ampliao elevada (PERELSHTEIN, 2008).
22
Entre as propriedades apresentadas em produtos txteis tratados com

nanomateriais podem ser citadas a: repelncia gua, resistncia ao
amarrotamento, retardantes de chama, sistemas bactericidas, proteo UV etc
(GARCIA, 2011).
Desde a antiguidade, a prata metlica vem sendo aplicada e estudada
como agente bactericida, devido a sua eficincia e baixa toxidade para as
clulas humanas (DASTJERDI e MONTAZER, 2010). A prata metlica, nitrato
de prata e sulfadiazina de prata j foram utilizados no tratamento de
queimaduras e no controle bacteriano, mas o seu uso se tornou impopular com
a descoberta da penicilila na dcada de 1940. Diante do surgimento de
bactrias resistentes a antibiticos, reacendeu-se o interesse na utilizao
clnica da prata (HUH e KWON, 2011).
As propriedades antimicrobianas de nanopartculas de prata so bem
estabelecidas e tm se mostrado eficazes contra bactrias, como a Escherichia
coli, Staphylococcus aureus, Leuconostoc mesenteroides, Bacillus subtilis,
entre outras (MARAMBIO et al., 2010).
Diversos produtos usando prata, seja ela na forma metlica ou inica,
administrada de forma tpica, como agente bacteriano tm sido lanados no
mercado e vm ganhando popularidade diante da propagao de bactrias
resistentes a antibiticos como o caso da Staphylococcus aureus resistente.
Vrios curativos, com ao antimicrobiana, para o tratamento de feridas esto
sendo comercializados pela indstria farmacutica, a Tabela 1 mostra alguns
curativos disponveis no mercado e o contedo de prata presente.
23
Tabela 1- Descrio de alguns curativos comerciais que utilizam a prata como agente
antimicrobiano (GARCIA, 2011).
Nome do produto
Fabricante
Contedo de Ag
2
(mg/100 cm )
Silverlon
Calgitrol
Acticoat
Contreet Foam
Contreet Hydrocolloid
Aquacel Ag
SilvaSorb
Actisorb Silver 220
Argentum Medical
Biomedical
Technologies Inc
Smith and Nephew
Coloplast
Coloplast
ConvaTec
Medline
Johnson & Johnson
546
Descrio resumida do
medicamento
um tecido contendo prata

depositada
pelo
processo
de
oxirreduo cataltica de metalizao
onde cada fibra do tecido revestida
totalmente com prata, resultando
numa liberao de prata inica muito
abrangente.
141
Formado por espuma absorvente,

revestido na superfcie por uma
matriz de alginato e prata inica.
105
formado por malhas de tecidos

onde a prata aplicada a uma malha
de polietileno por deposio a vapor
que resulta na formao de cristais
microscpico de prata metlica.
85
Constitudo de uma espuma de

poliuretano que contm prata inica
que liberada com a absoro do
exsudato da ferida pela espuma.
32
Baseado
na
tecnologia
de
hidrocoloides que libera prata inica
enquanto absorve lquidos oriundos
da ferida.
8,3
5,3
2,7
Constitudo
de
uma
carboximetilcelulose sdica contento
1,2% de prata inica.
composto de uma matriz de
poliacrilato
hidroflico
na
qual
partculas de prata micromtrica so
suspensas.
constitudo basicamente de um
tecido impregnado de carvo ativado
e partculas de prata micromtrica.
24
A utilizao de forma tpica da prata possibilita o combate direto

infeco, aumentando a velocidade do processo de cicatrizao de doenas
cutneas com pobre irrigao sangunea onde h um aumento da proliferao
de bactrias em feridas crnicas, sendo de difcil tratamento com antibiticos
que apresentam dificuldades de acesso s leses (GARCIA, 2011).
Apesar do estudo do mecanismo de efeito antimicrobiano ainda estar
parcialmente indefinido, de conhecimento da comunidade cientifica que as
diferentes formas da prata, metlica em tamanho micromtrico, ons de prata e
prata nanomtrica apresentam mecanismos de ao diferentes (MARAMBIO et
al., 2010).
Estudos recentes do mecanismo de ao dos ons de prata (Ag+) em
micro-organismos parcialmente conhecidos (DIBROV et al., 2002) relatam que
o efeito inibitrio do Ag+ est diretamente relacionado com a atrao
eletrosttica
entre
parede
celular
dos
micro-organismos
carregada
negativamente e a carga positiva dos ons de prata (KIM et al., 2007). No

entanto, ons de prata tm apenas uma utilizao antimicrobiana limitada
devido sua elevada toxidade e baixa estabilidade. Estas limitaes podem ser
minimizadas utilizando-se nanoparticulas de prata estveis, em vez de ons de
Ag+ (MOHANTY et al., 2011 ).
Embora o mecanismo de ao das nanopartculas de prata sobre as
bactrias ainda no esteja completamente elucidado, os trs mecanismos mais
comuns que tentam esclarecer a bioatividade so os seguintes:
1) Captao de ons de prata gerados atravs da dissoluo oxidativa de
nanopartculas de prata. Clulas bacterianas expostas a ons de prata
poderiam
sofrer
alteraes
morfolgicas
como
por
exemplo
deslocamento da membrana celular permitindo assim o vazamento do

contedo intracelular (ASHARANI et al., 2008).
2) Gerao de espcies reativas de oxignio (ROS). As espcies reativas de
oxignio, tais como H2O2 e OH., entre outras so subprodutos do
metabolismo natural dos organismos. As nanopartculas de prata poderiam
agir como catalisadores na produo das ROS em excesso gerando assim
um estresse oxidativo na clula provocando uma ruptura da membrana
celular (SU et al., 2009).
25
3) Prejuzo direto membrana celular. As nanopartculas poderiam interagir

diretamente com membrana bacteriana aderindo e penetrando no interior
da clula induzindo a formao de enormes buracos na membrana celular
e, como consequncia, o vazamento do contedo celular (SMENTANA et
al., 2008)
Diante do carter no conclusivo dessas hipteses abordadas, h de
se considerar que a prata pode apresentar uma ao sinrgica e no um s
modo de atuao na atividade antibacteriana (MOHANTY et al., 2011).
3.2 Sntese e caracterizao de nanopartculas de prata
Muitos mtodos de obteno de nanopartculas de prata tm sido
descritos pela literatura, rotas de preparao e condies experimentais, tais
como reagentes, estabilizantes, pH, temperatura e at mesmo a taxa de adio
dos agentes redutores so parmetros importantes de controle do tamanho das
partculas e de sua morfologia (KHAN et al., 2011). Entre os modos de
preparao de partculas nanomtricas de prata, um dos mais difundidos
consiste na utilizao do citrato de sdio como agente redutor e tendo como
precursor solues de nitrato de prata. Devido s caractersticas no txicas do
citrato, o mtodo Turkevich (TURKEVICH, STEVENSON e HILLIER, 1951) tem
recebido uma ampla aplicao na obteno de prata nanomtrica. Embora
esse mtodo seja abordado de vrias maneiras em relao ao tempo de
reao, tempo de agitao e de aquecimento e resfriamento, a sua
reprodutibilidade consiste basicamente na utilizao de solues aquosas de
sais de prata e citrato de sdio mantidos sob agitao, aquecimento e posterior
resfriamento (GORUP, 2011).
A reao global envolvida no processo ainda no est totalmente
elucidada. A literatura prope, dentre outras, a seguinte equao:
Equao1: Equao qumica global de reduo de Ag+ a Ag0 (YANG, 2010)
C6H5O7 3- + 2 Ag+
OOCCH2COCH2COO- + H+ + CO2 +
2 Ag
26
Estudos recentes demonstram a possibilidade da utilizao da amnia

como moderador na obteno de coloides de nanopartculas de prata. O ponto
crucial para a obteno de ncleos pequenos de nanopartculas de prata
coloidal a formao de um nmero grande de ncleos no incio do processo,
mas apenas uma frao dos ons de prata disponveis seria reduzida. Havendo
disponibilidade de Ag+, portanto, os novos ncleos iriam se formar e os ncleos
j formados continuariam a crescer. Adio de amnia pode levar a formao
de um complexo segundo a equao:
Ag+(aq) + 2 NH3(aq)
[ Ag(NH3)2]+(aq)
amnia
presena
da
no
meio
Equao 2
reacional
pode
impedir
momentaneamente a formao de novos ncleos e o crescimento das

nanopartculas j formadas, acarretando assim na gerao de nanopartculas
de tamanho muito pequeno (GORUP et al., 2011).
3.2.1 Nanopartculas de prata em sistemas coloidais

O objeto de investigao dos coloides est relacionado com o estudo
dos sistemas nos quais pelo menos um dos componentes da mistura apresenta
uma das suas dimenses caractersticas no intervalo de 1 a 1000 nanmetros,
dispersos homogeneamente em um meio contnuo que pode ser um gs, um
lquido ou at mesmo um slido. As partculas dispersas podem apresentar
tamanhos diferentes (sistemas polidispersos) ou o mesmo tamanho (sistemas
monodispersos). Devido elevada rea superficial em virtude do pequeno
tamanho das partculas, as propriedades da interface entre as fases disperso e
dispersante determinam o comportamento dos diferentes sistemas coloidais
(JAFELICCI e VARANDA, 1999).
A sntese de coloides nanoparticulados envolve, simultaneamente, os
processos de nucleao, crescimento e aglomerao das partculas. A etapa
de nucleao comea quando inmeros ncleos de cristais so inicialmente
27
formados, mas estes tendem a se agregar (etapa de crescimento) para formar

cristais termodinamicamente mais estveis. A etapa de aglomerao
favorecida pela maximizao da razo superfcie/volume das nanopartculas
formadas. Alm disso, h entre elas uma fora de atrao mtua que tende a
condens-las em grandes aglomerados a fim de minimizar a rea superficial e
com isso baixar a tenso de superfcie do sistema (ATKINS, 1994; OLIVEIRA,
2005).
Para a formao de nanopartculas dispersas em um sistema coloidal
por uma reao de precipitao, fundamental que na etapa final da reao
ocorra o trmino do crescimento e a estabilizao das nanopartculas
formadas. De um modo geral, existem dois mecanismos bsicos de
estabilizao de dispersos em sistemas coloidais. O primeiro baseia-se na
disperso por repulso eletrosttica das nanopartculas formadas resultante da
interao entre a camada dupla eltrica (electrical double layer - EDL) que
cerca as partculas, pelo fato de haver uma distribuio desigual de cargas
entre o solvente e a superfcie da partcula. A estabilizao eletrosttica se
efetiva quando as foras atrativas de Van der Waals so superadas pelas
foras eletrostticas repulsivas. A camada dupla eltrica uma estrutura que
surge na superfcie da partcula quando colocada em contato com solvente
lquido. Ela formada por duas camadas: uma chamada carga de superfcie,
podendo ser positiva ou negativa, que coincide com a superfcie da partcula; a
outra est na superfcie do lquido e eletricamente oposta primeira camada,
sendo chamada de camada difusa, pois formada de ons livres (GARCIA,
2011).
No segundo mecanismo possvel para a estabilizao, utilizada uma
camada protetora com o emprego de outro material, formando assim uma
camada passivadora, onde a sua ao baseia-se no aproveitamento do efeito
estrico, evitando assim a aproximao entre as nanopartculas formadas
(HENGLEIN, 1989; MATIJEVIC, 1993). As nanopartculas revestidas com
camada passivadora ao se aproximarem uma das outras tm sua mobilidade
dificultada por um efeito de natureza entrpica. O composto usado como
camada passivadora chamado de passivante. A escolha adequada dele
depende basicamente da composio qumica das partculas a serem
estabilizadas no sistema coloidal. Para nanopartculas metlicas, vrios
28
compostos vm sendo utilizados como estabilizadores a exemplo dos

polmeros ou molculas contendo grupos terminais SH, -NH2, -CN entre
outros.
Coloides nanoparticulados estabilizados apresentam inmeras
vantagens, so estveis por mais tempo em soluo, podendo ser ainda

precipitados, secos ou redissolvidos sem perder suas caractersticas de
estabilidade (OLIIVEIRA, 2005; TOLAYMAT et al., 2010).
Um exemplo interessante na estabilizao de partculas metlicas em
escala nanomtrica a utilizao de dendrmeros como passivantes. Huang e
Tomalia (2005) sintetizaram nanopartculas de ouro e o dendrmero
poli(amidoamina) (PAMAM), contendo ncleo disulfeto e possuindo grupos
terminais carboxlicos ou hidroxlicos . O PAMAM foi utilizado como passivante.
Na Figura 2 o esquema da sntese do PAMAM ilustrado juntamente com a
formao das nanopartculas de ouro passivadas pelo dendrmero.
Figura 2 - Esquema ilustrativo demonstrando a sntese, funcionalizao da superfcie e

reduo do dendrmero PAMAM, juntamente com a formao das nanopartculas de ouro
dendrimerizadas (HUNG e TOMALIA, 2005).
29
O on citrato tambm exerce a funo de estabilizante protegendo os

recm-formados ncleos de prata, que apresentam uma preferncia intrnseca
de crescimento de seus cristais. A concentrao de citrato tambm influencia a
morfologia das nanopartculas de prata formadas (YANG et al., 2010 ). Alm do
citrato, outras espcies tambm vm sendo usadas como estabilizadores e/ou
direcionadores podendo ser o PVP (polivinilpirrolidona), PVA (polivinillcool),
PEG (poliestearato de etilenoglicol), entre outros.
A seleo do estabilizante depende da aplicao das nanopartculas
formadas, alm de estarem diretamente relacionadas com a estabilidade,
reatividade, tamanho e forma dessas partculas em escala nanomtrica. Como
ilustrado na Figura 3 em uma reviso da literatura Tolaymat et al.(2010)
mostram que o on citrato tem sido, para aplicaes em geral, o estabilizante
mais empregado para nanopartculas de prata.
Figura 3 - Anlise dos agentes estabilizantes relatados em estudos de sntese de

nanopartculas de prata (TOLAYMAT et al., 2010).
30
3.2.2 Caracterizao de nanopartculas de prata coloidal

Nos ltimos anos, um dos mtodos mais difundido para caracterizar
nanopatculas de prata coloidal tem sido a espectroscopia UV Visvel. O
comportamento de absoro surge devido ressonncia plasmon de
superfcie, surface plasmon resonance (SPR), que se origina decorrente das
oscilaes dos eltrons da banda de conduo das nanopartculas induzidos
pelo campo eletromagntico. Nanopartculas de prata apesentam uma SPR na
regio do visvel, suas propriedades pticas e fototrmicas surgem das
oscilaes ressonantes dos seus eltrons livres. Na Figura 4 apresentado um
espectro de absoro UV Vis de prata coloidal. Observa-se que a absoro
do plasmon de superfcie d origem a uma banda larga, com um pico de
absoro em torno de 408 nm. O ponto mximo de absoro no espectro UVVis de solues coloidais de nanocristais est relacionado ao tamanho mdio
das partculas, por outro lado a largura da banda de absoro est relacionada
com a disperso das partculas (GARCIA, 2011; DE SANTANA, 2006).
Figura 4 - Espectro eletrnico de absoro no UV-Vis da soluo de prata coloidal (DE

SANTANA, 2006).
Estudos recentes demonstram um forte impacto do tamanho das

partculas na disperso da luz de modo que disperses coloidais de
31
nanopartculas de prata de tamanhos diferentes apresentam cores diferentes,

alm de bandas caractersticas de UV-Vis. Samanta et al. (2012) utilizaram a
tcnica de crescimento mediado por semeadura para obteno de
nanopartculas de prata de tamanhos variados relacionando-os com o
comprimento de onda da banda de absoro, conforme ilustrada a Figura 5.
Figura 5 - Espectro UV-Vis de nanopartculas de prata coloidal preparadas em diferentes

quantidades de sementes (SAMANTA et al., 2012).
Estudos correlatos (SOLOMON, 2007) associam o dimetro mdio das

nanopartculas de prata a um padro de absorbncia e comprimento de onda,
cujos resultados esto apresentados na Tabela 2.
Tabela 2. Correlao de tamanhos de nanopartculas de prata e o comprimento de onda na
analise por espectroscopia por UV-vis (SOLOMON, 2007).
Tamanho da partcula (nm)
Comprimento de onda (nm)
5 - 10
380 390
10 14
395 405
35 50
420 435
60 80
438 450
32
Nos processos de obteno de nanopartculas de prata em soluo

coloidal, pela reduo de ons Ag+ durante o progresso da reao, um maior
nmero de ons de prata reduzido resultando no aumento do tamanho das
nanopartculas; com isso as transies multipolares de superfcie plasmon
tornam-se mais proeminentes refletindo no aumento da intensidade da banda
de absoro (GARCIA, 2011).
El-Shishtawy, Asiri e Al-Otaibi (2011) sintetizaram nanopartculas de
prata em soluo coloidal utilizando AgNO3 como precursor em diferentes
concentraes, glicose como agente redutor e brometo de cetil trimetil amnio
(CTAB),
como estabilizante. Durante o estudo analisaram o efeito da
concentrao do AgNO3 na banda de absoro do UV-Vis.

Os resultados encontrados na Figura 6 demostraram uma relao
entre a altura do pico com a concentrao de nanopartculas de prata na
soluo coloidal, onde o aumento da concentrao de prata provocou um
aumento da intensidade da banda de absoro.
Figura 6 - Espectros de UV-visvel de nanopartculas de prata em diferentes da oncentraes

de AgNO3. [AgNO3] = 0,5 (1c), 1,5 (2c), 2 (3c), 2,5 (4c) mmol/l (EL-SHISHTAWY, ASIRI e ALOTAIBI, 2011).
33
Aswthy et al. (2011) obtiveram, atravs da sntese assistida por microondas, uma soluo coloidal de nanopartculas de prata por meio da reduo
de Ag+ proveniente do AgNO3, com a vanilina (C3H8O3) como agente redutor e
dodecilsulfato de sdio (SDS) ou o bis(2-etil hexil) sulfossuccinato de sdio
(AOT) como estabilizantes.
A anlise do espectro de absoro na regio do UV-Vis mostrou a
formao de uma banda de absoro centrada em 385 nm e um ombro em 430
nm. A presena de uma banda larga constituda de dois picos pode ser
atribuda formao de uma fina camada de Ag2O formada na superfcie das
nanopartculas de prata. O pico fino em torno de 385 nm indicou a formao de
prata nonomtrica sem camadas de Ag2O. J a banda de absoro em 430 nm
sugeriu a existncia de Ag/Ag2O, numa estrutura conhecida como core-sheel
(ncleo-concha). A Figura 7 mostra o espectro do UV-Vis de nanopartculas de
prata em diferentes potencias de micro-ondas.
Figura 7 - Espectro de absoro do UV-Vis de nanopartculas de prata estabilizadas com AOT

em diferentes potencias de micro-ondas (ASWATHY et al., 2011).
34
3.3 xido de zinco
O xido de zinco cristaliza-se em estruturas cbicas do tipo wurtzita,

sal de rocha e blenda de zinco. Sob condies ambientes a forma wurtzita a
estrutura mais estvel enquanto a blenda de zinco uma estrutura
metaestvel, podendo ser estabilizada por crescimento em substratos cbicos.
Por outro lado, a forma sal de rocha geralmente estvel apenas sob
condies extremas de presso.
A estrutura do tipo wurtzita apresenta uma clula unitria hexagonal
com dois parmetros de rede a = b c e = = 90 e = 120, sendo a =
3,25 e c = 5,12 , onde a razo de c/a = (8/3)1/2 = 1,633 pertencendo ao
grupo espacial P63mc e faz parte da classe cristalogrfica 6mm. Essa estrutura
formada por duas sub-redes hexagonais compactas, tendo camadas
ocupadas por tomos de zinco alternados com camadas ocupadas por tomos
de oxignio em torno do eixo c. Cada sub-rede formada por quatro tomos
por clula unitria onde cada tomo de zinco est coordenado por quatro
tomos de oxignio e vice-versa.
Logo 50% dos stios tetradricos so
ocupados por tomos de zinco. Sendo assim, pode-se afirmar que estrutura
hexagonal do tipo wurtzita relativamente aberta sendo, portanto, facilitada a
incorporao de dopantes externos na clula do ZnO. Outra caracterstica
importante do xido de zinco, em funo da sua estrutura, a sua superfcie
polar: as cargas positivas de zinco e as negativas do oxignio resultam em um
momento dipolar normal e uma polarizao espontnea ao longo do eixo c.
(ZGR et al., 2005).
Em uma perspectiva econmica, os processos sintticos, para a
produo do xido de zinco, podem ser divididos em dois grupos: os de baixo
custo em escala industrial e os mtodos laboratoriais de alto custo. As
diferenas tecnolgicas entre os mtodos de produo de ZnO envolve
principalmente os precursores de zinco, as temperaturas de processamento e
as operaes unitrias utilizadas. Industrialmente, a maioria do ZnO
produzido
por
mtodos
pirometalrgicos,
hidrometalrgicos
ou
como
subproduto de outros processos. Cada processo produz quantidades de ZnO
35
com relativas diferenas de propriedades e, consequentemente, aplicaes

distintas (MOEZZI, MCDONAGH e CORTIE, 2012).
O xido de zinco tem sido um importante material industrial durante
muito tempo e atualmente vem sendo objeto de interesse considervel, por
apresentar uma combinao de propriedades fsicas (relativa condutividade
eltrica e trmica, absoro ptica no ultravioleta e estabilidade em
temperaturas elevadas), qumicas (estabilidade em pHs neutros) e biolgicas
(ao antibacteriana). O tamanho de partcula bem como a morfologia so
relatados como um grande desafio na investigao das propriedades do ZnO,
tanto em escala micromtrica como tambm em escala nanomtrica.
(FELTRIN, 2010).
ZnO tem se destacado por suas propriedades antibacterianas e
antifngicas e pela capacidade de destruio seletiva de clulas tumorais por
nanopartculas de ZnO e seu potencial no desenvolvimento de agentes anticancergenos (MISHRA et al., 2011). As Propriedades especificas das
nanopartculas de ZnO, tais como a sua toxicidade inerente contra clulas
tumorais, pelo menos, para as clulas de origem linfide, sua habilidade para
induzir a gerao de espcies reativas de oxignio (ROS) do interior da clula
levando morte por meio de um mecanismo de apoptose, e as suas
propriedades fsico-qumicas que cunduzem captao celular e facilidade de
funcionalizao, tm tornado o ZnO um candidato atraente para aplicaes
biomdicas (RASMSEN et al., 2010).
Zhang et al. (2011)
investigaram a atividade antibacteriana de
suspenses contendo ZnO em tamanhos nano e micrometricos, verificando

que ambas apresentam a capacidade de inibir o crescimento de bactrias,
tendo as suspenses de ZnO em tamanho nano uma eficincia claramente
superior em relao s de tamanhos micro. O mecanismo proposto para a
atividade antibacteriana do xido de zinco sugere trs possveis caminhos: 1)
interao qumica entre o ZnO e componentes da membrana celular da
bactria, 2) Interao fsica entre as nanoparticulas de ZnO e a membrana
celular da bactria, 3) Combinao da interao qumica e fsica (ZHANG et al.,
2010).
O xido de zinco faz parte do grupo dos agentes inorgnicos
antimicrobianos mais seguros e extremamente estveis em relao aos
36
agentes antimicrobianos orgnicos. No entanto, o verdadeiro mecanismo para

a
inibio
de
micrbios
ainda
no
claramente
compreendida
(AMORNPITOKSUK et al., 2011).

Nas mais diversas especialidades odontolgicas, cimentos de xido de
zinco e eugenol tm sido amplamente utilizados, no somente na sua forma
original mas tambm em formulaes diversas (LEONARDI et al., 2009). Na
dentstica so utilizados para restaurao e cimentao provisria; na
endodontia, na obturao de canais radiculares; na periodontia como curativo
periodontal cirrgico, entre outras aplicaes (STANKIEWICZ et al., 2000).
3.4 Tecnologia de micro-ondas
As micro-ondas so radiaes eletromagnticas compreendidas em
uma ampla faixa de frequncia que vai de 300 MHz a 30 GHz. J o intervalo do
comprimento de onda varia de 1mm a 1m (SANSEVERINO, 2002), estando,
portanto, entre a radiao infravermelho e as ondas de rdio.
Figura 8 Faixa de abrangncia das ondas eletromagnticas. Disponvel em:

http://www.ced.ufsc.br/men5185/trabalhos/63_lampadas/incand/funciona03.htm acesso em 21
de abril de 20012 s 12:00h.
37
Em virtude da sua extensa faixa espectral, as micro-ondas apresentam

grande multiplicidade de aplicaes podendo ser refletidas, irradiadas ou
utilizadas para aquecimentos; sendo, portando, possvel o seu uso em radares,
aparelhos celulares e em fornos domsticos (KEYSON, 2006).
Certas substncias possuem a capacidade de transformar energia
eletromagntica em energia trmica atravs da interao dos tomos e
molculas. Os princpios relacionados ao aquecimento por micro-ondas
envolvem os conceitos fsico-qumicos tais como: temperatura, capacidade
calorfica, ligao qumica, estrutura molecular, momento dipolo, constante
dieltrica, etc. A utilizao das micro-ondas para o aquecimento de matrias
ocorre pela transferncia de energia diretamente para dentro do material onde
transformada em calor pela influncia dos tomos e molculas com o campo
eltrico, em processos que envolvem conduo eltrica, relaxao dipolar e
interao fton fton (OLIVEIRA, 2009).
Nas ltimas dcadas, o uso da tecnologia de micro-ondas em
laboratrio tem se tornado uma tcnica bem estabelecida e vantajosa, surgindo
como uma fonte de energia alternativa para a realizao de transformaes
qumicas. Uma das principais vantagens a melhoria cintica das snteses
mediadas por micro-ondas em comparao aos mtodos convencionais de
aquecimento. Essa melhora se deve ao fato das micro-ondas provocarem um
rpido aquecimento interno, trazendo assim benefcios econmicos e
tecnolgicos. (ASWATHY et al., 2011).
No campo da sntese de nanomateriais, o mais relevante so as
propriedades desses materiais influenciados basicamente pela forma e
tamanho. O controle da metodologia sinttica se torna um grande desafio, visto
que o crescimento em nanoescala depende em grande parte da termodinmica
e da cintica do processo. As tcnicas convencionais de aquecimento so
baseadas em conduo de radiao, em que o recipiente onde ocorre a reao
atua como um intermedirio, para a transferncia de energia, entre a fonte de
aquecimento e o solvente e, finalmente, as molculas dos reagentes. Isto pode
gerar gradientes trmicos ineficientes e no uniformes em toda a reao. Essa
problemtica tem se tornado um ponto crtico para a qualidade do material
(DARMANIN et al., 2012).
38
Os mtodos de aquecimento por micro-ondas podem resolver esses

problemas de elevao da temperatura no uniforme, baseados numa cintica
rpida com o consumo rpido dos materiais de partida e rendimentos mais
elevados. Com a escolha judiciosa dos solventes, reagentes e estabilizantes e
com um aquecimento seletivo, possvel a produo de nanoestruturas
especficas, o que torna o mtodo de aquecimento por micro-ondas eficiente e
economicamente vivel na produo de nanomateriais (KEYSON, 2006;
NAGOUDA, SPETH e VARMA, 2010).
Khan et al. (2011)
sintetizaram nanopartculas de prata, em curto
espao de tempo (15 s), utilizando a tcnica de aquecimento por micro-ondas

de uma soluo de AgNO3 com glicose como agente redutor suave na
presena de microgel. A sntese foi realizada por aquecimento diludo em
solues alcalinizadas.
39
4 METODOLOGIA
4.1 Reagentes
Na preparao das nanopartculas de prata e na sua impregnao
sobre o xido de zinco pelo mtodo hidrotermal de micro-ondas, foram
utilizados os seguintes reagentes:
Tabela 3 - Precursores utilizados nas snteses nanoestruturadas de prata.
Reagente
Frmula
Grau de pureza
Fornecedor
Nitrato de Prata
AgNO3
99,8%
Vetec
xido de zinco
ZnO
99,0%
Synth
Hidrxido de amnio
NH4OH
99,9 %
Sigma
cido ctrico
C6H8O7.H2O
99,5 %
Cargill
Para as snteses realizadas empregando o mtodo hidrotermal de

micro-ondas, foi utilizado um reator de micro-ondas modelo i9TEC RHM do
fabricante INOVE PRODUTOS E TECNOLOGIA (i9TEC) ilustrado nas Figuras
9 e 10.
Figura 9 - Reator hidrotermal de micro-ondas.
40
Figura 10 Partes que compe a clula do reator hidrotermal de micro-ondas.
4.2 SNTESE
4.2.1 Sntese da prata pelo mtodo hidrotermal de micro-ondas.
As solues para a sntese das nanopartculas de prata foram
preparadas em meio aquoso, onde a concentrao da soluo de AgNO3
apresentava concentrao igual a 0,1 mol.L-1. Para a preparao do citrato de
amnio, foi preparada uma soluo aquosa de cido ctrico 1 mol.L-1 e
neutralizado com hidrxido de amnio at a soluo atingir um pH
aproximadamente igual a 7,0. Aps o preparo das solues, uma alquota de
50 mL de cada reagente foi transferida para um o copo de teflon que compe o
reator hidrotermal de micro-ondas (RHM), sendo hermeticamente fechado e em
seguida levado para o aparelho de micro-ondas. No reator sob o efeito das
micro-ondas e do aumento da temperatura e da presso, ocorreu o
fornecimento de energia suficiente para a formao das nanopartculas de
prata.
As reaes foram realizadas a uma temperatura de 150 C durante 5,
15 e 30 minutos com taxa de aquecimento de 10 C/minuto e submetida a uma
presso aproximadamente igual a 5 Kgf/cm2. Aps esse processo, formaramse uma soluo alaranjada com intensidades diferentes para cada temperatura
e um precipitado cinza escuro. A soluo sobrenadante foi recolhida e o
precipitado foi lavado vrias vezes com gua destilada em temperatura
41
ambiente. Posteriormente, o precipitado cinza foi seco em uma estufa

convencional a 60 C durante 6 horas, obtendo-se um p da mesma cor. Aps
as snteses, a soluo sobrenadante e o p foram submetidos caracterizao
e o slido obtido teve sua massa medida. O mtodo de obteno de
nanopartculas de prata est representado na forma de fluxograma, na Figura
11.
Preparao da soluo de cido ctrico 1 mol/L.
Obteno do citrato de amnio por neutralizao (pH em torno

de 7,0) do cido ctrico utilizando o hidrxido de amnio.
Preparao do sal precursor AgNO
3(aq)
citrato de amnio (50 mL) + AgNO
0,1 mol/L
3(aq)
(50 mL)
Processamento no reator hidrotermal de micro-ondas a 150C

(5, 15 e 30 minutos).
Formao de soluo sobrenadante e de precipitado
Caracterizaes
Figura 11 Fluxograma da sntese de nanopartculas de prata.
42
4.2.2 Impregnao de nanopartculas de prata sobre xido de zinco

micromtrico pelo mtodo hidrotermal de micro-ondas
No copo de teflon que compe o reator hidrotermal de micro-ondas
foram transferidos 50 mL da soluo de AgNO3, 50 mL da soluo de citrato de
amnio com pH aproximadamente igual a 7,0 e 10,7g de xido de zinco
micromtrico. O percentual de prata disponvel no sistema reacional
correspondia a 5% em massa em relao ao xido de zinco.
A mistura reacional foi levada ao RHM, sendo hermeticamente fechado
e submetido a um aquecimento de 150 C durante 5, 15 e 30 minutos sob
presso de aproximadamente igual a 5 Kgf/cm2. Aps esse procedimento,
formaram-se uma soluo amarela com intensidades diferentes para cada
temperatura e um precipitado bege. A soluo sobrenadante foi recolhida e o
precipitado foi lavado vrias vezes com gua destilada a temperatura ambiente
e centrifugado em uma centrfuga convencional. Em seguida, o precipitado foi
seco em uma estufa convencional a 60 C durante 6 horas obtendo-se um p
com a mesma colorao. Posteriormente as snteses, o sobrenadante e o p
foram submetidos caracterizao e avaliao antimicrobiana. O mtodo de
sntese/impregnao de nanopartculas de prata sobre o xido de zinco est
representado na forma de fluxograma, na Figura 12.
43
Preparao da soluo de cido ctrico 1 mol/L.
Obteno do citrato de amnio por neutralizao (pH em torno

de 7,0) do cido ctrico utilizando o hidrxido de amnio.
Preparao do sal precursor AgNO3(aq) 0,1 mol/L
citrato de amnio (50 mL) + AgNO3(aq) (50 mL) +10,7g de ZnO
Processamento no reator hidrotermal de micro-ondas a 150C

(5,15 e 30 minutos).
Formao de soluo sobrenadante e de precipitado
Caracterizaes
Figura 12 - Fluxograma do processo de sntese/impregnao de nanopartculas de prata sobre

o xido de zinco.
44
4.3 Tcnicas de caracterizao

4.3.1 Difrao de raios X (DRX)
Essa tcnica foi utilizada principalmente para a identificao de fases
cristalinas do material. Os difratogramas de raios X foram obtidos utilizando um
difratmetro, marca Siemens, modelo D 5000, na faixa de 2 = 20 80, com
um passo de 0,02 e tempo de passo de 2 segundos, utilizando como fonte de
radiao monocromtica a radiao K de cobre. Os ensaios foram realizados
no Laboratrio de Combustveis e Materiais (LACOM) da Universidade Federal
da Paraba (UFPB). Os resultados obtidos pelos ensaios de difrao de raios X
foram comparados com os padres do arquivo JCPDS (Joint Committee on
Powder Diffrraction Standards) de nmero 89-1397 para o ZnO e 87-0720 para
a Ag.
4.3.1.1 Tamanho de cristalito (TC) e largura a meia altura (FWHM).

Para a prata, os clculos para a determinao do tamanho de cristalito
foram realizados a partir do pico (111), utilizando-se o quartzo como padro
externo e a equao de Scherrer.
Equao 3
Onde:
TC: tamanho de cristalino
: comprimento de onda da radiao incidente
: ngulo de difrao
: largura a meia altura (FWHM) do pico de difrao, onde expresso por:
Equao 4
45
onde:
A a largura a meia altura (FWHM) relacionada amostra e a FWHM
do padro de quartzo.
A equao de Scherrer deduzida considerando as interferncias
construtivas e destrutivas quando a diferena entre os ngulos difratados (2)
muito pequena no cristalito, em relao ao prprio ngulo 2. Atravs da
largura dos picos de difrao, a equao de Scherrer permite a determinao
de caractersticas de uma fase cristalina.
4.3.1.2 Parmetros de rede (PR) e volume da clula unitria (VCU)
Segundo a equao de Braag, para uma dada famlia de planos (h k l),
a reflexo de radiao monocromtica ocorre exclusivamente em um plano ()
e que pode ser encontrado pela distncia entre os planos adjacentes (d) e pelo
comprimento de onda dos raios X ().
Equao 5
Onde:
n a ordem de reflexo (n = 1, 2, 3,...);
o comprimento de onda da radiao eletromagntica;
d a distncia entre os planos (h k l).
O ngulo () formado pela direo do feixe dos raios X com os planos
cristalinos denominado ngulo de Bragg. Com os valores de d das fichas
cristalogrficas JCPDS 87-0720, para a prata e com os dados experimentais de
2 e respectivos ndices (h k l) dos planos, foi dado entrada para o programa
Rede 93, desenvolvido na Unesp - Araraquara, baseado no mtodo dos
mnimos quadrados, para se obter os valores experimentais dos parmetros de
rede a e b e do volume da clula unitria segundo a Equao 6
46
Equao 6
4.3.2 Espectroscopia ptica nas regies ultravioleta e visvel (UV-Vis)

A anlise por espectroscopia ptica nas regies das radiaes
ultravioleta e visvel (UV-Vis) bastante importante para estudos de bandas
eletrnicas, neste trabalho, com objetivo de confirmar o estado reduzido da
prata.
O equipamento utilizado foi um espectrmetro UV-vis - NIR (Cary)
modelo 5G, que possui 400 W para medidas de reflectncia (no intervalo de
190 a 900 nm).
As anlises utilizando a espectroscopia UV-Vis foram realizadas para
as solues sobrenadantes obtidas na sntese da prata dos tempos 5, 15 e 30
minutos e nas solues sobrenadantes obtidas na impregnao da prata sobre
xido de zinco tambm nos tempos de 5, 15 e 30 minutos.
4.3.3 Microscopia eletrnica de varredura (MEV) e espectroscopia de

energia dispersiva (EDS)
Para anlise da morfologia das partculas e das caractersticas
microestruturais dos ps, aps a sntese e impregnao de prata sobre o xido
de zinco comercial, fez-se uso de um microscpio eletrnico de varredura,
marca ZEISS DSM, modelo 940 A. As amostras foram prensadas em vcuo
para obteno de pastilhas e recobertas com uma fina camada de ouro, com o
objetivo de garantir uma melhor condutividade dos eltrons. As anlises foram
realizadas no Laboratrio de Solidificao Rpida (LSR) no Departamento de
Engenharia Mecnica/CT da UFPB.
47
4.3.4 Gravimetria
Os rendimentos das snteses foram determinados por meio de
gravimetria clssica. Para a sntese da prata metlica, mediu-se a massa do
precipitado formado. Sobre a soluo sobrenadante, foi adicionado KCl
suficiente para precipitar todo Ag+ residual
na forma de AgCl que foi lavado
com gua destilada e seco em estufa durante 6 horas sob temperatura de

60 C sendo, em seguida, efetuada a pesagem do precipitado.
4.3.5 Avaliao da atividade Antimicrobiana

Os testes referentes atividade antimicrobiana foram realizados no
laboratrio de Micologia do Departamento de Cincias Farmacuticas (Centro
de Cincias da Sade) da Universidade Federal da Paraba.
4.3.5.1 Produtos testados

Os produtos testados foram: Prata metlica obtida nos trs tempos de
sntese 5, 15 e 30 minutos, o xido de zinco, os slidos obtidos na sntese de
impregnao da prata sobre xido de zinco em trs tempos diferentes de
sntese, 5, 15 e 30 minutos e suas respectivas solues sobrenadantes. Os
mesmos produtos foram dispersos em TWEEN 80 (MERCK/Germany) e
dimetilsufxido, numa proporo, respectivamente, de at 10 % e 1%, para no
interferir sobre os microrganismos (ALLEGRINI et al., 1976).
As amostras da soluo sobrenadante obtidas no processo de impregnao
nos tempos de 5, 15 e 30 minutos foram testadas na sua forma in natura em
diluies seriadas na razo de 1:2, partindo de 100L at 1,6L.
Para a soluo sobrenadante obtida na sntese de 30 minutos, foi
tambm realizada a avaliao antimicrobiana, sem a presena de ons Ag+
residuais, que foram retirados da soluo na forma de AgCl precipitado aps a
adio de KCl.
48
4.3.5.2 Antimicrobianos sintticos
Para o controle de atividade antimicrobiana, foram usados cloranfenicol

(50 g/mL) para bactrias e nistatina (100 I/mL) para as leveduras.
4.3.5.3 Micro-organismos
Nos ensaios microbiolgicos foram includas as espcies bacterianas:
Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Staphylococcus epidermidis (ATCC
12228), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 25853), Pseudomonas aeruginosa
(ATCC 9027), Escherichia coli (ATCC 10536) e Escherichia coli (ATCC 8733).
E as espcies fngicas: Candida albicans (ATCC 90028), Candida albicans
(LM-105), Candida krusei (ATCC 6538), Candida krusei (LM-12C), Candida
tropicalis (LM 14), Candida tropicalis (ATCC 13803).
As cepas foram adquiridas no Instituto Adolfo Lutz de So Paulo,
Laboratrio de Micologia do Departamento de Cincias Farmacuticas da
Universidade de So Paulo e da Universidade Federal da Paraba. As mesmas
bactrias foram mantidas em meios de cultura apropriados, conservadas a
4 C e a 30 C.
A suspenso dos micro-organismos foi preparada conforme a escala
McFarland, ajustada atravs de leitura espectrofotomtrica (Leitz-Photometer
340-800), correspondendo, aproximadamente, a 106 UFC/mL (NCCLS 2000;
HADACECK e GREEGER, 2000; CLEELAND e SQUIRES, 1991).
4.3.5.4 Meios de cultura
Os
ensaios
de
atividade
antimicrobiana
foram
realizados,
respectivamente, em caldo Mueller-Hinton (Merck/USA) e caldo Sabouraud

dextrose ASD (Difco Lab./USA/France) para bactrias e fungos. Os mesmos
foram preparados e usados conforme as instrues do fabricante.
49
4.3.5.5 Determinao da Concentrao Inibitria Mnima (CIM)

Os ensaios de atividade antimicrobiana foram realizados pelo mtodo
de diluio seriada em meio lquido, tcnica de microdiluio (ELOFF, 1987;
CLEELAND; SQUIRES, 1991; BAWER et al., 1996; HADACECK; GREEGER,
2000; NCCLS, 2000).
A determinao da CIM dos compostos em estudo foi realizada atravs
da tcnica de microdiluio, utilizando-se microplacas contendo 96 poos com
fundo chato e tampa (DISPOPETRI/INTERLAB). Inicialmente, adicionou-se,
aos poos, 100 L de caldo nutriente (para bactrias) e caldo Sabouraud
(para leveduras) duplamente concentrados. Em seguida, foram inoculados
100L da disperso dos slidos obtidos no processo de impregnao e foram
feitas as diluies seriadas razo de um para dois, nas concentraes de
1024 a 16 g/mL. Em se tratando da soluo sobrenadante obtida tambm no
processo de impregnao, foram inoculados 100 L, in natura, e realizadas
diluies seriadas de 1:2, partindo de 100 L at 1,6 L. Ento, nas primeiras e
stimas filas de cavidades, os compostos se encontravam nas maiores
concentraes e nas menores concentraes. Posteriormente, 10 L da
suspenso dos microrganismos foram inoculados em todas as cavidades da
placa. Em paralelo, foi feito controle do crescimento das espcies bacterianas e
de leveduras, como tambm com os antimicrobianos padro: cloranfenicol (50
g/mL) para bactrias e nistatina (100 L/mL) para leveduras. O sistema foi
incubado a 35C/24-48 horas (VILJOEN et al., 2003; SAHIN et al., 2004).
Aps o tempo de incubao adequado, foi feita a primeira leitura dos
resultados para determinao da CIM dos compostos frente aos dois grupos de
microrganismos ensaiados: a determinao da CIM dos compostos sobre os
microrganismos foi determinada atravs de observao visual, tomando como
base o fato de que o crescimento nos poos da placa de microdiluio ocorreu
atravs da formao dos chamados botes de crescimento - aglomerado de
clulas (ESPINEL INGROFF et al., 1991; ESPINEL INGROF et al., 1992).
Em seguida, foi utilizado o seguinte procedimento: adicionou-se 20L
de soluo do corante resauzurina a 0,01 % (INLAB), o qual reconhecido
como um indicador colorimtrico de oxirreduo (MANN e MARKAN, 1998;
50
BURT e REINDERS, 2003). Assim, quando ocorreu mudana de colorao do

corante (azul para vermelho), considerou-se como indicador de crescimento
microbiano; e se a cor permanecesse azul, significaria a ausncia de
crescimento microbiano. E foi considerada como CIM a menor concentrao do
composto capaz de inibir o crescimento da cepa ensaiada, verificado pela no
mudana da colorao do corante indicador.
4.3.6 Anlise da atividade txica e citotxica de nanopartculas de prata

coloidal.
Utilizaram-se alevinos de Poecilia reticulata para o teste toxicolgico,
sendo estes aclimatados em laboratrio por um perodo de 48 horas e, em
seguida, usados nos testes. As concentraes usadas foram as seguintes: 200;
100; 50; 25; 12,5; 6,25 e 3,125 ppm. O preparo das solues para os testes foi
feito a partir de uma soluo de nanopartculas de prata coloidal, sintetizadas
em 30 minutos. Por meio de uma diluio em gua destilada obteve-se, ento,
a concentrao de 200 ppm. Para analisar o toxidade dos ons Ag+ foi
preparada uma soluo de 200 ppm de AgNO3.
O ensaio de citotoxicidade com Artemia salina foi baseado na
metodologia de FONTENELE com algumas adaptaes (FONTENELE et
al.,1988). Numa cuba de vidro com capacidade para 1.000mL, foi adicionada
gua salina devidamente tratada e 50g de ovos de A. salina. O sistema foi
submetido luz artificial e temperatura ambiente (29C1C) at o perodo de
ecloso das microlarvas, que se completou aps 48 horas do incio do
experimento. As concentraes utilizadas para o ensaio foram: 200, 100; 50;
25; 12,5; 6,25 e 3,125 ppm. Ambos os testes foram realizados em duplicata,
contendo dez animais em cada soluo, com tempo de exposio de 24 horas,
usando tambm um grupo controle preparado nas mesmas condies, sem a
presena das nanopartculas de prata (teste em branco). Aps 24h de
exposio, foi realizada a verificao da mortalidade dos animais.
51
5 RESULTADOS E DISCUSSO
5.1 Difrao de raios-X
As amostras de prata sintetizadas a 150 C em diferentes intervalos de

tempo, 5, 15 e 30 minutos foram analisadas por difrao de raios-X, sendo os
difratogramas apresentados na Figura 13.
Figura 13 Difratogramas da prata em diferentes tempos de sntese.
Todos os difratogramas indicam a formao de fase cristalina de prata

metlica para todos os tempos indicados com caractersticas de estrutura
cbica de face centrada de acordo com a ficha cristalogrfica JCPDS 87-0720
para a prata. Todos os picos de difrao so bem definidos indicando a
formao da fase cristalina com elevada organizao a longo alcance. Esse
resultado indica que a prata pode ser obtida facilmente em uma nica etapa
num baixo intervalo de tempo pelo mtodo hidrotermal de micro-ondas.
52
5.1.1 Largura a meia altura (FWHM), tamanho de cristalito e parmetros de

rede.
Para se ter uma melhor discusso dos resultados de DRX e observar e
avaliar os efeitos de organizao do material a longo alcance, foi calculado o
tamanho de cristalito, o parmetro de rede e a largura a meia altura (FWHM)
dos picos de maior intensidade (plano (111)) dos difratogramas de raios-X,
mostrados na Tabela 4.
Tabela 4 FWHM, tamanho de cristalito, parmetros de rede e volume da clula unitria das
amostras de prata sintetizadas pelo mtodo hidrotermal assistido por micro-ondas.
Amostras
FWHM DRX (111)
Tamanho
Parmetro
Volume da
de cristalito
de rede ()
clula unitria
(3)
(nm)
Ag 5 min.
16,60
5,06
4.08
67,91
Ag 15 min.
17,67
4,75
4.08
67,91
Ag 30 min.
20,01
4,20
4.08
67,91
Padro
--------
--------
4,07
67,78
Observa-se nos resultados obtidos que o tempo de sntese exerce uma

influncia na organizao dos cristais a longo alcance. O alargamento do pico
de difrao no plano (111) em funo do aumento do tempo de exposio
hidrotermizao em micro-ondas pode ser relacionado desorganizao do
material a longo alcance influenciado pelo decrscimo do tamanho de cristalito
demonstrado nos valores obtidos.
A diminuio do tamanho do cristalito pode ter sido provocada pelo
processo de cristalizao e recristalizao das nanopartculas de prata
formadas, influenciada pelas micro-ondas.
Em relao aos parmetros de rede a ao volume da clula unitria, no
ocorreu mudanas significativas quando comparadas aos valores tericos
demostrando que o material apresenta-se altamente cristalino.
53
Os difratogramas da prata impregnada sobre o xido de zinco Ag/ZnO

sintetizado em diferentes intervalos de tempo e do ZnO so mostrados na
Figura 14.
Figura 14 Difratogramas do Ag/ZnO e do ZnO (# ZnO; * Ag)
Comparando com os dados das fichas cristalogrficas para o Ag (870720) e ZnO (89-1397), com o DRX da prata suportada sobre ZnO comercial
(Ag/ZnO), observou-se a presena dos picos mais proeminentes caractersticos
de prata metlica (Ag0) em torno de 2 = 38,01 e 64,12 graus. Para o tempo
de processamento de 30 minutos, esses picos so mais intensos, devido
presena de uma maior quantidade de prata metlica provocada pela maior
exposio hidrotermizao em micro-ondas. Para as demais snteses, o
menor tempo de processamento provocou, provavelmente, uma diminuio na
quantidade de prata formada acarretando uma diminuio na intensidade dos
seus picos caractersticos. Todos os outros picos so caractersticos da
estrutura hexagonal de ZnO.
Todavia, a efetiva impregnao da prata metlica pode ser observada
tambm para o material obtido aps processamento de 5, 15 e 30 minutos
conforme micrografias de MEV com EDS conforme mostra as Figuras 15 a 17.
54
5. 2 Microscopia eletrnica de varredura (MEV) e Espectroscopia de

energia dispersiva (EDS)
A micrografia da prata impregnada sobre o xido de zinco obtido em
diferentes tempos e o mapeamento e o espectro obtido por EDS esto
representados nas Figuras 15, 16 e 17.
a)
b)
c)
Figura 15 Dados da prata suportada sobre ZnO em 5 min de sntese: a) imagem de MEV;
b) Mapeamento da Ag; c) Espectro de EDS.
55
a)
b)
c)
56
a)
b)
c)
57
As micrografias 15.a, 16.a e 16.a demonstram que o material obtido

possui expressiva homogeneidade em sua superfcie, ainda que no tenha sido
possvel identificar nestas micrografias, as nanopartculas de prata metlica
presentes sobre a superfcie majoritria do ZnO. Isto se d pelo fato das
partculas de prata apresentarem-se sob dimenses estimadas de no mais do
que poucas dezenas de nanmetros, invisveis para esta magnitude de
ampliao.
Uma anlise de mapeamento da prata por tcnica de espectroscopia
de energia dispersiva (EDS) realizada, conforme observado nas Figuras 15.b,
16.b e 17.b respectivamente em relao aos MEVs das figuras 15.a, 16.a e
17.a indicaram a presena, em todas elas, de nanopartculas de prata metlica
impregnadas e uniformemente distribudas sobre toda superfcie do ZnO. Alm
disto, por aumento de densidade dos pontos brancos, que caracterizam a
prata metlica, observou-se que o aumento do tempo de processamento
promove o aumento da quantidade de prata metlica depositada/impregnada
sobre o ZnO comercial.
Os espectros de EDS das Figuras 15.c, 16.c e 17.c confirmam a
presena da prata em torno de 2,6 keV. Todas as impregnaes foram
realizadas pelo mtodo hidrotermal de micro-ondas indicando que a referida
tcnica de sntese/processamento eficiente, mesmo a curtos perodos de
processamento em uma nica etapa, para a impregnao de prata metlica
sobre xido de zinco comercial. Estes resultados sinalizam que este mtodo
pode prestar-se igualmente para a impregnao sobre outros xidos gerando
uma gama de possibilidades para estudo e aplicao industrial.
58
5. 3 Espectroscopia de absoro na regio do ultravioleta-visvel (UV-vis)

As curvas de absoro na regio do ultravioleta-visvel (UV-vis)
possibilitaram a caracterizao de nanopartculas de prata coloidal (NPC). A
Figura 18 mostra as curvas de absorbncia do UV-vis para a soluo
sobrenadante da sntese da prata em diferentes tempos de processamento.
Figura 18 Espectros de absoro do UV-VIS das amostras das solues sobrenadantes

diludas na proporo 1:2.
A partir do espectro de absoro do UV-vis de uma soluo, possvel

retirar informaes importantes como por exemplo a prpria banda de absoro
ptica que caracterstica dos plasmons superficiais das nanopartculas de
prata. Coloides de nanopartculas de prata podem apresentar colorao
amarelada, que corresponde ao espectro de absoro de ftons com
comprimento de onda em torno de 400 nm, podendo variar dependendo da rota
de sntese usada e do tamanho das nanopartculas existentes no meio
(ANDRADE, 2008).
A anlise dos espectros de absoro do UV-vis (Figura 18) mostrou
curvas com perfis semelhantes com picos de comprimento de onda em torno
59
de 340 nm caracterizando nanopartculas de prata em um sistema coloidal com

tamanho de partcula, possivelmente, menor do que 5 nm (SOLOMON, 2007).
O valor mximo de absorbncia um indicativo do nmero de
nanopartculas presentes na soluo coloidal. O aumento na absorbncia no
UV- vis em funo do tempo de sntese demostra um acrscimo gradativo da
concentrao de nanopartculas de prata na soluo coloidal. Observa-se que
o maior pico de absoro ocorre quando o tempo de sntese de 30 minutos,
ou seja, um maior tempo de sntese possibilitou um maior nmero de
nanopartculas de prata formadas. importante ressaltar que essas solues
coloidais foram diludas na proporo de duas partes de gua destilada para
uma parte da soluo coloidal, portanto os picos de absorbncia das solues
originais so cerca de duas vezes maiores do que observado na Figura 16. A
diferena de tonalidade, das solues, de amarelo dourado para um alaranjado
intenso, observada na Figura 19 um indicativo que ocorreu uma pequena
mudana na agregao das partculas visto que no ocorreram mudanas
significativas nos valores dos comprimentos de onda.
Figura 19 Fotografia das solues sobrenadantes sintetizadas no RHM em diferentes tempos

de sntese (mim): a = 5; b = 15; c = 30.
60
No processo de sntese/impregnao de nanopartculas de prata sobre

o xido de zinco foram obtidas, tambm, solues sobrenadantes com as quais
realizaram-se caracterizaes utilizando a espectroscopia UV- vis. As curvas
de absorbncia (Figura 20) das solues tambm seguem praticamente o
mesmo padro de comportamento observado na sntese da prata, ou seja,
picos de comprimento de onda em torno de 340 nm e acrscimo do valor da
absorbncia em funo do tempo, onde o maior valor da banda de absoro
ocorre quando o tempo de processamento de 30 minutos.
Figura 20 - Espectros de absoro do UV-VIS das amostras das solues

sobrenadantes obtidas durante a sntese/impregnao de nanopartculas de prata sobre o
xido de zinco em diferentes tempos de processamento.
J os valores de absorbncia obtidos nesse caso foram menores do

que os observados no processo de sntese de nanopartculas de prata. Esse
comportamento pode ser justificado pela diminuio na concentrao de
partculas de prata em escala nanomtrica na soluo coloidal. Possivelmente,
a presena de partculas de ZnO no meio favorece a ancoragem das partculas
de Ag0 recm nucleadas, que, por descompensaes de carga superficial,
preferem impregnar-se sobre o ZnO do meio para diminuio da sua energia
61
superficial. Assim, as partculas de ZnO funcionam como retiradores de Ag0 da

soluo coloidal.
Na Figura 21 observa-se tambm uma mudana na tonalidade das
solues provocada possivelmente por uma leve mudana na agregao das
partculas, mas sem mudanas significativas no tamanho mdio das partculas,
pois os valores do comprimento de onda no sofreram grandes variaes em
funo do tempo de processamento.
Figura 21 Fotografia das solues sobrenadantes obtidas durante a sntese/impregnao de

nanopartculas de prata no RHM em diferentes tempos de processamento (mim): a = 5; b = 15;
c = 30.
5.4 Gravimetria
No processo de sntese de nanopartculas de prata obteve-se prata em
soluo coloidal (pseudo soluo de cor amarela) e prata metlica precipitada
na forma de p cinza escuro ao trmino da sntese. O p de prata metlica
precipitada foi seco, cujas quantidades obtidas esto na Tabela 5.
Tabela 5. Massas de prata metlica obtidas nos diferentes tempos de sntese.
Tempo de sntese (min)
Massa de prata metlica obtida (g)
0,1263
15
0,3064
30
0,3431
62
Para os resultados obtidos na Tabela 5, observa-se que a quantidade

de produto obtido ou rendimento da sntese depende do tempo de
processamento. Para tempos maiores de sntese e consequentemente maiores
exposies presso, temperatura e micro-ondas, implicaram em maiores
quantidades de prata precipitada.
O rendimento de nanopartculas de prata coloidal foi obtido
considerando a Equao 7 por meio de gravimetria indireta. Conhecendo-se a
quantidade de ons de prata de partida (AgNO3), determinou-se a quantidade
de prata coloidal em soluo e da prata metlica precipitada. A prata metlica
precipitada foi recolhida, seca e pesada. Enquanto que a determinao da
prata coloidal se deu por meio de gravimetria indireta. Para tal, adicionou-se
KCl em excesso que precipitou a totalidade de ons Ag+ na forma de AgCl
insolvel. O AgCl foi ento seco e pesado para que se conhecesse a
quantidade de Ag+
que restava em soluo. O total de prata presente na
soluo de partida menos a prata metlica Ag0 precipitada e menos a prata na

forma de Ag+ confere a quantidade de nanopartculas de prata na forma
coloidal.
Equao 7: Equao Geral da obteno de prata coloidal e precipitada

2 Ag+ + C6H5O7 3-
Ag0 (coloidal) + Ag0(ppt) + C5H4O5 2- + CO2 + H+
Tabela 6: Massa das nanopartculas de prata coloidal nos diferentes tempos de sntese.
Tempo de sntese (min)
Massa das NPC (g)
0,1240
15
0,1576
30
0,1725
Para os resultados obtidos na Tabela 6, observa-se que a quantidade

de prata coloidal obtida depende do tempo de processamento. Para tempos
maiores de sntese e consequentemente maiores exposies ao processo
63
hidrotermal
de
micro-ondas,
ocorreu
maior
formao
gradativa
de
nanopartculas de prata na forma de soluo coloidal.

A partir dos dados obtidos, verifica-se que os resultados gravimtricos
corroboraram com os valores de absorbncia encontrados na Figura 16, ou
seja, ocorre o aumento gradativo da concentrao das NPC em funo do
tempo de sntese quando expostas a presso, temperatura e emisso de
micro-ondas. De posse dos valores encontrados, calculou-se o rendimento (em
massa) da sntese para as duas fases formadas, bem como o rendimento total.
Tabela 7 Rendimento percentual (em massa) das fases obtidas na sntese em diferentes
tempos de processamento.
Tempo de
sntese
(min)
Rendimento percentual
para a prata metlica
precipitada (%).
Rendimento
percentual para as
NPC (%).
Rendimento
total (%).
22,41
22,99
46,40
15
56,81
29,22
86,03
30
63,61
31,98
95,59
5.5 Testes biolgicos

5.5.1 Ensaios de atividade antimicrobiana
Os resultados da atividade antimicrobiana das amostras contendo
nanopartculas de prata coloidal obtidas em diferentes tempos de sntese
(NPC-5, NPC-15 e NPC-30) mostraram uma considervel ao antimicrobiana,
Tabelas 7, 8 e 9. Verifica-se que as solues contendo NPC-5, NPC-15 e
NPC-30 provocaram inibio do crescimento das espcies bactrianas:
Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Staphylococcus Epidermidis (ATCC
12228), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 25853), Pseudomonas aeruginosa
(ATCC 9027), Escherichia coli (ATCC 10536) e Escherichia coli (ATCC 8733)
at a quarta diluio.
64
Para as espcies fngicas, as NPC-5 e NPC-15 provocaram inibio

de crescimento para as espcies Candida krusei (LM- 12C) e Candida krusei
(ATCC 6538) at a terceira diluio enquanto que nas demais NPC-5
provocaram inibio de crescimento at a primeira diluio e as NPC-15
impediram o crescimento at a quarta diluio (Tabelas 8 e 9).
A soluo coloidal NPC-30 provocou a inibio de crescimento de
todos os organismos testados (Tabela 10) at a quarta diluio.
Considerando
que
ao
antimicrobiana
produzida
pelas
nanopartculas de prata, estes resultados esto em concordncia com o que foi

obtido na gravimetria. Ou seja, as solues que foram processadas por mais
tempo tiveram maior quantidade de NPC formada e por isso apresentaram
mais significativa atividade em relao s NPC obtidas em tempos inferiores.
65
Tabela 8 - Resultados dos ensaios de atividade biolgica das solues contendo NPC-5 sobre
bactrias e leveduras do gnero candida.
Microrganismos
Volumes (L)
Controle do
microrganismo
Controle:
Clorafenicol/
Nistatina
100
50
25
12,5
6,25
3,12
1,6
Staphylococcus
aureus
(ATCC 25923)
Staphylococcus.
epidermidis
(ATCC 12228)
Pseudomonas
aeruginosa.
(ATCC 25853)
Pseudomonas
aeruginosa.
(ATCC 9027)
Escherichia coli.
(ATCC 10536)
Escherichia coli.
(ATCC 8733)
Cndida krusei
(LM- 12C)
Candida krusei
(ATCC 6538)
Candida tropicalis
(LM-14)
Candida tropicalis
(ATCC 13803)
Candida albicans
(LM-105)
Candida albicans
(ATCC 90028)
(+): Crescimento do microrganismo

(-): Inibio do crescimento do microrganismo
66
Tabela 9 - Resultados dos ensaios de atividade biolgica das solues contendo NPC-15
sobre bactrias e leveduras do gnero candida.
Microrganismos
Volumes (L)
Controle do
microrganismo
Controle:
Clorafenicol
/ Nistatina
100
50
25
12,5
6,25
3,12
1,6
Staphylococcus
aureus
(ATCC 25923)
Staphylococcus.
epidermidis
(ATCC 12228)
Pseudomonas
aeruginosa.
(ATCC 25853)
Pseudomonas
aeruginosa.
(ATCC 9027)
Escherichia coli.
(ATCC 10536)
Escherichia coli.
(ATCC 8733)
Candida krusei
(LM- 12C)
Candida krusei
(ATCC 6538)
Candida tropicalis
(LM-14)
Candida tropicalis
(ATCC 13803)
Candida albicans
(LM-105)
Candida albicans
(ATCC 90028)

67
Tabela 10 - Resultados dos ensaios de atividade biolgica das solues contendo NPC-30
sobre bactrias e leveduras do gnero candida.
Microrganismos
Volumes (L)
Controle do
microrganismo
Controle:
Clorafenicol/
Nistatina
100
50
25
12,5
6,25
3,12
1,6
Staphylococcus
aureus
(ATCC 25923)
Staphylococcus
epidermidis.
(ATCC 12228)
Pseudomonas
aeruginosa.
(ATCC 25853)
Pseudomonas
aeruginosa.
(ATCC 9027)
Escherichia coli.
(ATCC 10536)
Escherichia coli.
(ATCC 8733)
Candida krusei
(LM- 12C)
Candida krusei
(ATCC 6538)
Candida tropicalis
(LM-14)
Candida tropicalis
(ATCC 13803)
Candida albicans
(LM-105)
Candida albicans
(ATCC 90028)

68
Os
resultados
obtidos
demostram
que
concentrao
das
nanopartculas de prata na soluo coloidal exerceu uma fundamental

influncia sob os micro-organismos, visto que as NPC-30 so as que
apresentam uma maior concentrao de nanopartculas de prata como
observado na anlise gravimtrica.
amplamente conhecida a ao antimicrobiana da prata inica,
possuindo esta alguns inconvenientes. Dentre eles o fato de ser muito instvel
dada sua alta reatividade (forte agente oxidante). Sendo comum o
escurecimento da pele e de superfcies que entram em contato com este
agente qumico.
Como parte dos ons de prata oriundos do AgNO3 permaneceram em
soluo aps a sntese, logo ao antimicrobiana pode ser influenciada pela
presena dos ons Ag+ residuais. Nas Tabelas 11 e 12 so apresentados os
testes para um uma soluo original de AgNO3 diluda na proporo de 1:1
com gua destilada e a soluo de NPC-30 sem a presena de ons Ag+.
Os resultados encontrados na Tabela 11 demonstram a notvel
atividade antimicrobiana dos ons Ag+, entretanto os resultados da Tabela 12,
onde est explicitada a atividade de nanopartculas de prata coloidal livres de
Ag+
residual
demonstram
que
NPC-30
possui
relevante
atividade
antimicrobiana com o conveniente de ser mais estvel (mais durvel) e menos

reativa do que os ons de Ag+.
69
Tabela 11 Resultado dos ensaios de atividade biolgica da soluo original de AgNO3 diluda
inicialmente na proporo 1:1 sobre bactrias e leveduras do gnero candida.
Microrganismos
Volumes (L)
Controle do
microrganismo
Controle:
Clorafenicol/
Nistatina
100
50
25
12,5
6,25
3,12
1,6
Staphylococcus
aureus
(ATCC 25923)
Staphylococcus
epidermidis.
(ATCC 12228)
Pseudomonas
aeruginosa.
(ATCC 25853)
Pseudomonas
aeruginosa.
(ATCC 9027)
Escherichia coli.
(ATCC 10536)
Escherichia coli.
(ATCC 8733)
Candida krusei
(LM- 12C)
Candida krusei
(ATCC 6538)
Candida tropicalis
(LM-14)
Candida tropicalis
(ATCC 13803)
Candida albicans
(LM-105)
Candida albicans
(ATCC 90028)

70
Tabela 12 Resultados dos ensaios de atividade biolgica das solues NPC-30 sem a
+
presena de ons Ag residuais sobre bactrias e leveduras do gnero candida.

Microrganismos
Volumes (L)
Controle do
microrganismo
Controle:
Clorafenicol/
Nistatina
100
50
25
12,5
6,25
3,12
1,6
Staphylococcus
aureus
(ATCC 25923)
Staphylococcus
epidermidis.
(ATCC 12228)
Pseudomonas
aeruginosa.
(ATCC 25853)
Pseudomonas
aeruginosa.
(ATCC 9027)
Escherichia coli.
(ATCC 10536)
Escherichia coli.
(ATCC 8733)
Candida krusei
(LM- 12C)
Candida krusei
(ATCC 6538)
Candida tropicalis
(LM-14)
Candida tropicalis
(ATCC 13803)
Candida albicans
(LM-105)
Candida albicans
(ATCC 90028)

71
Os resultados da atividade antimicrobiana da prata impregnada sobre o

xido de zinco Ag/ZnO (Tabelas 13, 14 e 15) obtido em diferentes tempos de
sntese, sobre bactrias e leveduras do gnero Cndida mostraram pouco ou
nenhum efeito, com exceo da bactria Pseudomonas aeruginosa (ATCC
9027) que foi sensvel aos materiais obtidos em 5 minutos e 15 minutos, com
CIM igual a 256 g/mL. Para o Ag/ZnO obtido em 30 minutos de sntese,
verificou-se nenhum efeito antimicrobiano.
Os resultados das Tabelas 13 a 15 foram explicitadas a rigor,
entretanto pode ser concludo que a mesma metodologia de teste de atividade
antimicrobiana aplicada para as NPCs no se mostrou eficaz para avaliar a
atividade de slidos insolveis, como o caso do Ag/ZnO.
Entretanto, apesar do Ag/ZnO ser insolvel e no promover sua difuso
sobre o meio de cultura, pode-se observar inibio de crescimento da bactria
Pseudomonas aeruginosa (ATCC 9027) utilizando o Ag/ZnO sintetizado em 5 e
15 minutos.
72
Tabela 13 Resultados dos ensaios de atividade biolgica do Ag/ZnO sintetizado em 5 minutos.

Microrganismos
Concentraes (g/mL)
Controle do
microrganismo
Controle:
Clorafenicol
/ Nistatina
1024
512
256
128
64
32
16
Staphylococcus
aureus
(ATCC 25923)
Staphylococcus.
epidermidis
(ATCC 12228)
Pseudomonas
aeruginosa.
(ATCC 25853)
Pseudomonas
aeruginosa.
(ATCC 9027)
Escherichia coli.
(ATCC 10536)
Escherichia coli.
(ATCC 8733)
Candida krusei
(LM- 12C)
Candida krusei
(ATCC 6538)
Candida tropicalis
(LM-14)
Candida tropicalis
(ATCC 13803)
Candida albicans
(LM-105)
Candida albicans
(ATCC 90028)

73
Tabela 14 Resultados dos ensaios de atividade biolgica Ag/ZnO sintetizado em 15 minutos.

Microrganismos
Concentraes (g/mL)
Controle do
microrganismo
Controle:
Clorafenicol
/ Nistatina
1024
512
256
128
64
32
16
Staphylococcus
aureus
(ATCC 25923)
Staphylococcus.
epidermidis
(ATCC 12228)
Pseudomonas
aeruginosa.
(ATCC 25853)
Pseudomonas
aeruginosa.
(ATCC 9027)
Escherichia coli.
(ATCC 10536)
Escherichia coli.
(ATCC 8733)
Candida krusei
(LM- 12C)
Candida krusei
(ATCC 6538)
Candida tropicalis
(LM-14)
Candida tropicalis
(ATCC 13803)
Candida albicans
(LM-105)
Candida albicans
(ATCC 90028)

74
Tabela 15 Resultados dos ensaios de atividade biolgica do Ag/ZnO
sintetizado em 30
minutos.
Microrganismos
Concentraes (g/mL)
Controle do
microrganismo
Controle:
Clorafenicol/
Nistatina
1024
512
256
128
64
32
16
Staphylococcus
aureus
(ATCC 25923)
Staphylococcus.
epidermidis
(ATCC 12228)
Pseudomonas
aeruginosa.
(ATCC 25853)
Pseudomonas
aeruginosa.
(ATCC 9027)
Escherichia coli.
(ATCC 10536)
Escherichia coli.
(ATCC 8733)
Candida krusei
(LM- 12C)
Candida krusei
(ATCC 6538)
Candida tropicalis
(LM-14)
Candida tropicalis
(ATCC 13803)
Candida albicans
(LM-105)
Candida albicans
(ATCC 90028)

75
Para uma melhor compreenso do comportamento dos slidos frente

aos micro-organismos, tambm foram realizados testes antimicrobianos para a
prata metlica obtida em diferentes tempos de sntese, o xido de zinco (como
branco) e os slidos obtidos no processo de impregnao nos diferentes
tempos de sntese, encontrados na Tabela 16.
Os resultados encontrados demostram que as partculas de prata
metlica sintetizada em 30 minutos apresentaram uma notvel capacidade
antimicrobiana, para todos os micro-organismos testados. O seu relevante
desempenho, quando comparado s partculas de prata metlica sintetizada
em 5 e 15 minutos, pode ter sido influenciado pela diminuio do cristalito, no
processo de cristalizao e recristalizao. A partcula formada em um tempo
maior de sntese pode apresentar um nmero expressivo de defeitos que
possivelmente pode gerar a atividade antimicrobiana.
Para o slido obtido no processo de impregnao da prata sobre o
xido de zinco (Ag/ZnO), sintetizado em 5 minutos, a atividade antimicrobiana
praticamente a mesma do ZnO puro. Como para esse tempo de sntese h
uma menor quantidade de prata disponvel em relao aos demais tempos, a
ao antimicrobiana pode ter sido influenciada pelo prprio xido de zinco.
J o produto (Ag/ZnO) obtido no tempo de sntese de 15 minutos,
apresenta uma ao antimicrobiana diferenciada em relao ao ZnO e seletiva
visto que a sua efetiva atividade ocorreu apenas nas espcies bacterianas.
No caso do Ag/ZnO obtido no tempo de sntese de 30 minutos, ocorreu
uma diminuio da atividade antibacteriana, tanto em relao ao ZnO puro
como ao Ag/ZnO sintetizado em 15 minutos.
76
Tabela 16. Resultados dos ensaios de atividade biolgica dos slidos obtidos nas snteses e
para o ZnO.
Concentrao 2000 g/mL
Microrganismos
Controle do
microrganismo
(Produtos)
Controle:
Clorafenicol
/ Nistatina
Staphylococcus
aureus
(ATCC 25923)
Staphylococcus.
epidermidis
(ATCC 12228)
Pseudomonas
aeruginosa.
(ATCC 25853)
Pseudomonas
aeruginosa.
(ATCC 9027)
Escherichia coli.
(ATCC 10536)
Escherichia coli.
(ATCC 8733)
Candida krusei
(LM- 12C)
Candida krusei
(ATCC 6538)
Candida tropicalis
(LM-14)
Candida tropicalis
(ATCC 13803)
Candida albicans
(LM-105)
Candida albicans
(ATCC 90028)
1= Ag sintetizado em 5 min;
2 = Ag sintetizado em 15 min;
3 = Ag sintetizado em 30 min;
4 = ZnO;
5 = Ag/ZnO sintetizado em 5 min;
6 = Ag/ZnO sintetizado em 15. min;
7= Ag/ZnO sintetizado em 30min.;
77
5.5.2 Ensaios de atividade citotxica e txica de nanopartculas de prata

coloidal.
A soluo contendo nanopartculas de prata coloidal no apresentou
citotoxidade em Artemia salina (Tabela 17). Em relao ao teste de
citotoxidade da soluo de AgNO3, no foi possvel verificar a atividade do Ag+,
pois o ensaio ocorreu em soluo salina havendo portanto presena de ons
cloreto o que possibilitou a precipitao de AgCl.
Tabela 17 - Resultados dos testes citotxicos das solues de nanopartculas de prata coloidal
em Artemia salina, aps 24 horas.
Concentrao (ppm)
Extrato por decoco - percentual de

mortalidade de Artemia Salina (%)
200
100
50
25
12,5
6,25
3,125
No teste toxicolgico, encontrado na Tabela 18, da soluo de AgNO3,

observou-se a mortalidade de alevinos at a concentrao 12,5 ppm, o que
demostra um considervel efeito txico, provocado pela presena dos ons Ag+
em soluo.
Para o teste toxicolgico da soluo de NPC, Tabela 19, observou-se a
mortalidade de alevinos at a concentrao de 50 ppm. O que indica uma
menor toxidade das NPC em relao aos ons de prata.
78
Tabela 18 Resultados dos testes toxicolgicos de uma soluo contendo ons Ag em alevinos
de Poecilia reticulata, aps 24 horas.
Concentrao (ppm)

mortalidade de alevinos (%)
200
100
100
100
50
100
25
70
12,5
50
6,25
3,125
Tabela 19 Resultados dos testes toxicolgicos das solues coloidais de nanopartculas de

prata em alevinos de Poecilia reticulata, aps 24 horas.
Concentrao (ppm)

mortalidade de alevinos (%)
200
100
100
100
50
70
25
12,5
6,25
3,125
De acordo com os resultados obtidos, verificou-se que as solues de

NPC no possuem citotoxidade de acordo com os testes realizados com a
Artemia Salina, nas concentraes de 200 3,125 ppm. Frente aos alevinos de
Poecilia reticulata observou-se que a DL50 foi maior do que 25 ppm. Sendo
assim, prope-se uma melhor investigao das propriedades txicas do
composto em estudo.
79
6 CONCLUSES
O estudo do processo de sntese de nanopartculas de prata pelo
mtodo hidrotermal de micro-ondas, utilizando AgNO3 como sal precursor e
citrato de amnio como agente redutor, mostrou-se extremamente eficaz, pois
possibilitou a formao de nanopartculas de prata coloidal com tamanhos
possivelmente menores do que 5 nm, e prata metlica na forma de precipitado,
via uma nica etapa de sntese sob diferentes tempos de processamento da
ordem de minutos, com rendimentos bastantes significativos.
O domnio do processo de obteno de uma soluo coloidal estvel
de nanopartculas de prata coloidal remete para diversas aplicaes
tecnolgicas em potencial.
Os resultados de atividade biolgica obtidos remetem para corroborar
com o fato de que novos produtos base de nanopartculas de prata podem
ser desenvolvidos, de modo especial no campo da sade humana.
O tempo de sntese tanto no processo de obteno da prata como no
processo de impregnao da prata sobre o xido de zinco exerceu influncias
considerveis, principalmente na quantidade de produto obtido e no
comportamento das partculas nos testes biolgicos, visto que a prata metlica
sintetizada em 30 minutos apresentou notvel atividade antimicrobiana, na
concentrao testada. O slido obtido no processo de impregnao da prata
sobre o xido de zinco sintetizado em 15 minutos exerceu ao antimicrobiana
seletiva para bactrias testadas.
As
nanopartculas
de
prata,
na
forma
de
soluo
coloidal,
apresentaram relevante atividade antimicrobiana com uma menor toxicidade

quando comparada prata inica.
80
7 SUGESTO E TRABALHOS FUTUROS

- Estudo da morfologia e tamanho das partculas de prata precipitada e
impregnada sobre o ZnO.
- Estudo da atividade antimicrobiana do Ag/ZnO sobre bactrias
presentes na flora bucal e que so causadoras de crie, j que o xido de zinco
um clssico material usado como curativo odontolgico.
- Estudo das propriedades mecnicas da prata suportada Ag/ZnO
visando a estabelecer se este material pode apresentar-se com propriedades
superiores ao do ZnO puro em aplicaes odontolgicas.
- Estudo da influncia qumica de agentes estabilizantes e/ou templates
como polietilenoglicol sobre o tamanho e sobre a morfologia das partculas.
- Estudo da influncia da variao da concentrao dos componentes de
partida da reao no produto final.
81
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Dissertação Antimicrobiano

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UNIVERSIDADE FEDERAL DA PARABA

CENTRO DE CINCIAS EXATAS E DA NATUREZA

NANOPARTCULAS DE PRATA E Ag/ZnO NANOESTRUTURADO

Suelnio Viegas de Santana

SUELNIO VIEGAS DE SANTANA

NANOPARTCULAS DE PRATA E Ag/ZnO NANOESTRUTURADO

Dissertao apresentada ao Corpo Docente do

Santana, Suelnio Viegas de.

SUELNIO VIEGAS DE SANTANA

NANOPARTCULAS DE PRATA E Ag/ZnO NANOESTRUTURADO

Data da Aprovao: Joo Pessoa, 29 de agosto de 2012

Quero trazer memria aquilo

Ao meu pai e minha me, pelo amor e carinho.

Aos meus pais e minha famlia, pelo incentivo e por compartilharem

Aos Colegas do IFPB campus-picu pela amizade e incentivo;

Ttulo: Nanopartculas de prata e Ag/ZnO nanoestruturado como agentes

Title: Silver nanoparticles and Ag / ZnO nanostructured as antimicrobial agents

Figura 2. Esquema ilustrativo demonstrando a sntese, funcionalizao

Figura 3. Anlise dos agentes estabilizantes relatados em estudos de

Figura 4. Espectro eletrnico de absoro no UV-Vis da soluo de

Espectro UV-Vis de nanopartculas de prata coloidal

preparadas em diferentes quantidades de sementes..................................

Espectros de UV-visvel de nanopartculas de prata

diferentes da oncentraes de AgNO3. [AgNO3] = 0,5 (1c), 1,5 (2c), 2

Figura 7. Espectro de absoro do UV-Vis de nanopartculas de prata

Figura 8. Faixa de abrangncia das ondas eletromagnticas....................

Figura 9. Reator hidrotermal de micro-ondas.............................................

Figura 10. Partes que compem o reator hidrotermal de micro-ondas.....

Figura 11. Fluxograma da sntese de nanopartculas de prata..................

Figura 12 - Fluxograma do processo de sntese/impregnao de

Figura 13. Difratogramas da prata em diferentes tempos de sntese........

Figura 14. Difratogramas Ag/ZnO e do ZnO..............................................

Figura 15. Dados da prata suportada sobre ZnO em 5 min de sntese: a)

Figura 16. Dados da prata suportada sobre ZnO em 15 min de sntese:

Figura 17. Dados da prata suportada sobre ZnO em 30 min de sntese:

Figura 18. Espectro de absoro do UV-VIS das amostras das solues

Figura 19. Fotografia das solues sobrenadantes sintetizadas no RHM

Figura 20. Espectro de absoro do UV-VIS das amostras das solues

Figura 21. Fotografia das solues sobrenadantes obtidas durante a

Tabela 1. Descrio de alguns curativos comerciais que utilizam a prata

Tabela 2. Correlao de tamanhos de nanopartculas de prata e o

Tabela 3. Precursores utilizados nas snteses nanoestruturadas de prata

Tabela 4. FWHM, tamanho de cristalito, parmetros de rede e volume

Tabela 5. Massa de prata metlica nos diferentes tempos de sntese.......

Tabela 6. Massa das nanopartculas de prata coloidal nos diferentes

Tabela 7 Rendimento percentual (em massa) das fases obtidas na

Tabela 8. Resultados dos ensaios de atividade biolgica das solues

Tabela 9. Resultados dos ensaios de atividade biolgica das solues

Tabela 10. Resultados dos ensaios de atividade biolgica das solues

Tabela 11. Resultado dos ensaios de atividade biolgica da soluo

Tabela 12. Resultados dos ensaios de atividade biolgica das solues

Tabela 13. Resultados dos ensaios de atividade biolgica do Ag/ZnO

Tabela 14. Resultados dos ensaios de atividade biolgica do Ag/ZnO

Tabela 15. Resultados dos ensaios de atividade biolgica do Ag/ZnO

Tabela 16. Resultados dos ensaios de atividade biolgica dos slidos

Tabela 17. Resultados dos testes citotxicos das solues de

Tabela 18. Resultados dos testes toxicolgicos de uma soluo

Tabela 19. Resultados dos testes toxicolgicos das solues coloidais

LISTA DE SIGLAS E SMBOLOS

PEG poliestearato de etilnoglicol.

3.1 Atividade antimicrobiana..........................................................................

3.2 Sntese e caracterizao de nanopartculas de prata..............................

3.2.1 Nanopartculas de prata em sistemas coloidais....................................

3.2.2 Caracterizao de nanopartculas de prata coloidal.............................