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Materia: Biologa del desarrollo

PRCTICA No. 1
ESPERMATOBIOSCOPIA

Prctica no. 1
Espermatobioscopia

Tabla de contenido

Fundamento
Hiptesis
Gametognesis
Marco terico
Espermatognesis
Morfologa de los espermatozoides
Nuevos valores para el espermiograma OMS 2010
Alteraciones morfolgicas del espermatozoide
Pruebas bioqumicas a muestra de semen
Anlisis macroscpicos
El factor cervical en esterilidad
Infertilidad masculina
Desarrollo de la prctica
Material
Material biolgico
Procedimiento
Observaciones
Conclusiones:
Bibliografa

Prctica no. 1
Espermatobioscopia
Fundamento
Uno de los dilemas que afrontan los especialistas en biologa de la reproduccin humana, es la
dificultad para evaluar adecuadamente la capacidad frtil de los gametos. Hay que reconocer que
en los ltimos aos se han producido progresos importantes en el rea de androloga diagnstica,
al incorporar pruebas ms precisas que los parmetros tradicionales de estudio del semen.
El resultado de la aplicacin de test, permite un conocimiento adicional de los mecanismos
involucrados en la infertilidad masculina, especialmente en aquellos smenes con caractersticas
convencionales normales pero con capacidad fertilizante reducida. i
Hiptesis
Al observar con el microscopio podemos observar claramente las partes de un espermatozoide, su
motilidad y hacer diversas pruebas con la muestra de semen
Marco terico
Gametognesis
Es la formacin de gametos por medio de la Meiosis a partir de clulas germinales. Mediante este
proceso el material gentico de cada clula se reduce a la mitad. As, el nmero de cromosomas
que existe en las clulas germinales se reduce de diploide (doble) a haploide (nico).
Si el proceso tiene como resultado producir espermatozoides se le denomina espermatognesis
Espermatognesis
La espermatognesis es el proceso mediante el cual se desarrollan los gametos masculinos. Inicia
en la adolescencia y se lleva a cabo en los tbulos seminferos.. Las clulas de Sertoli se
encuentran tambin en los tbulos seminferos y se encargan de dar sostn y nutrir a los gametos
en diferenciacin, de igual manera forman la barrera hematotesticular, necesaria para proveer un
sitio de inmunoprivilegio para los gametos.
Los eventos ms importantes de ste proceso sern nombrados a continuacin: Reduccin
del tamao nuclear.
Condensacin del material gentico por la sustitucin de las histonas por protaminas.
Formacin de la vescula acrosmica a partir del aparato de golgi.
Crece un flagelo a partir de la regin centriolar.
Las mitocondrias se acomodan en la parte proximal del flagelo.
El citoplasma se reduce y se separa formando el cuerpo residual. ii

Morfologa de los espermatozoides

Prctica no. 1
Espermatobioscopia
El espermatozoide normal tiene:

Una Cabeza ovalada de cerca de 5m de


largo y 3m de ancho.
Una cola flagelar larga que mide alrededor de
45 m de longitud.
El acrosoma debe abarcar alrededor de la
mitad de la cabeza y cubrir cerca de los dos
tercios del ncleo en el extremo apical de la
cabeza.
El cuello une la cabeza con la cola y el
segmento intermedio, esta es la parte ms
gruesa de la cola porque est rodeada por una
vaina mitocondrial que produce la energa
requerida para la movilidad de la cola. iii

Nuevos valores para el espermiograma OMS


2010iv

Alteraciones morfolgicas del espermatozoide

Prctica no. 1
Espermatobioscopia
Los defectos de nacimiento pueden deberse a anomalas en el numero o en la estructura de los
cromosomas, pero tambin de la mutacin de un nico gen. Aproximadamente, el 7% de los
principales defectos congnitos se deben a anomalas cromosmicas, mientras que un 8% se debe
a una mutacin gentica.
Alteraciones numricas
A nivel de cabeza

Espermatozoides sin cabeza, a nucleados, en cabeza de alfiler o decapitados, se trata de


espermatozoides acfalos, por lo tanto sin su material gentico, Estos espermatozoides
cuando se observan in vitro pueden presentar movilidad progresiva
Espermatozoides bicfalos: espermatozoides con dos cabezas y un solo flagelo,
normalmente la pieza intermedia aparece engrosada.

A nivel de la cola o flagelo

Espermatozoides sin flagelo, se observan solamente cabezas de espermatozoides


aisladas con ausencia total de cola.
Espermatozoides con flagelos mltiples, anomala de estructura que impide la direccin y
movimiento del espermatozoide.

Alteraciones de forma
A nivel de cabeza

Espermatozoides con cabezas alargadas o tapering, en este caso la cabeza de los


espermatozoides posee la forma de una elipse en la que existe un marcado predominio del
eje longitudinal (5 a 6 m) por el eje transversal (2 a 3 m)
Espermatozoides con cabezas redondas, a diferencia del caso anterior, aqu ambos ejes
tienden a ser similares lo que le da un aspecto esferoide.

A nivel de la pieza de conexin:

Espermatozoides con implantacin axial anmala del flagelo. En estos casos observamos
una estrangulacin a nivel de la pieza intermedia.
Espermatozoides con pieza intermedia marcadamente engrosada, en ocasiones se
observan espermatozoides cuya pieza intermedia puede incluso superar el tamao ceflico

A nivel de la cola o flagelo:

Espermatozoides con enrollamiento total de la cola con o sin restos citoplasmticos


englobndola.
Espermatozoides con enrollamiento parcial de la cola.
Espermatozoides con flagelos truncado, los flagelos tienen en la parte principal
angulaciones de diferentes gradosv

Pruebas bioqumicas a muestra de semen


El estudio del lquido seminal, desde el punto de vista bioqumico, es una determinacin analticoclnica de gran importancia en los estudios de infertilidad en el hombre. Un anlisis seminal

Prctica no. 1
Espermatobioscopia
completo nos informa sobre las propiedades del semen, tanto de la produccin de
espermatozoides como de la funcin de las glndulas sexuales accesorias.
Los estudios que se realizan al semen con el propsito de diagnosticar la presencia de algn
problema de fertilidad son los siguientes:

Espermiograma
Espermocultivo
Recuperacin de espermatozoides motiles
Prueba de la viabilidad
Prueba de la integridad del acrosoma
Determinacin de anticuerpos anti espermticos

Condiciones que debe tener el paciente para la realizacin de un espermiograma son las
siguientes:

Tener de 3 a 5 das de abstinencia sexual :


o Ideal: 3 das
o Minimo.2 das
o Mximo: 6 das
Tener de 3 a 5 das de abstinencia alcohlica
Sin fiebre, gripe, ni ningn proceso viral o bacteriano.
Tomar la muestra por masturbacin en un colector estril.
Entregar la muestra en el laboratorio en un periodo no mayor a 1 hora de haber sido
tomada la muestra.

El semen se considera anormal cuando tiene:

Ausencia de espermatozoides: Azoospermia


Disminucin del nmero de espermatozoides: Oligozoospermia
Disminucin de la movilidad: Astenozoospermia
Alteracin de la morfologa: Teratozoospermia
Alteracin de los tres parmetros: Oligoastenoteratozoospermia

Anlisis macroscpicos

ASPECTO
LICUEFACCION
VOLUMEN

Anlisis microscpicos

Motilidad

Se agrega una pequea cantidad de semen (menos de 10 L) en un portaobjeto y se


procede a cubrirlo con un cubreobjetos, luego se deja estabilizar la muestra por 1 min.
Antes de ser estudiada.

a-motilidad progresiva rpida.27%

b- motilidad progresiva lenta..15%

COLOR
pH
CONSISTENCIA

Prctica no. 1
Espermatobioscopia

c- motilidad no progresiva.48%

d- inmvil20%

Recuento de los espermatozoides

Se prepara una dilucin 1/10, es decir, 1 ml de muestra y 9 ml de la solucin diluyente.


Luego con la muestra diluida se llena el hematimetro y se deja reposar por 5 min. Se hace
el conteo de espermatozoides completos con el objetivo de 100x.

Morfologa

Se utilizan extendidos teidos con diferentes mtodos: Giemsa, tincin de Bryan-leishman


o tincin de shorr.

Viabilidadvi

El factor cervical en esterilidad.

En sentido amplio se entiende por factor cervical en esterilidad cualquier alteracin


anatmica o funcional del crvix que pueda impedir o dificultar el ascenso espermtico
hacia el lugar de la fecundacin.

Dentro de las funciones que desempea el crvix podemos destacar:

Receptibilidad del esperma cercano a la ovulacin e inhibicin de la entrada en fecha no


frtil.
Proteccin del esperma del medio hostil de la vagina.
Soporte de requerimientos energticos para la motilidad espermtica.
Accin de filtro de los espermas anormales.
Almacenaje de espermas para mantener el ascenso al tracto reproductor superior.
Participacin en el proceso de capacitacin espermtica.

Las propiedades fisicoqumicas del Moco cervical son:

PH: en la fase preovulatoria es de 7,3 a 8.


La cristalizacin
La viscosidad
La filancia
Celularidad

Funciones fisiolgica del moco cervical:

Funcin de reserva: la alcalinidad del moco cervical preovulatorio representa un refugio


vital para los espermatozoides.
Mantenimiento y capacitacin de los espermatozoides: la fase lquida proporciona aportes
energticos: hidratos de carbono, hexosaminas y oxgeno.
Limpieza: a mitad del ciclo, la gravedad y el movimiento de los cilios crean un flujo
descendente que drena hacia la vagina las bacterias, los leucocitos y los espermatozoides
muertos.

Prctica no. 1
Espermatobioscopia

Proteccin de los espermatozoides frente a la fagocitosis por los leucocitos: drenados por
el flujo descendente y empujado por el movimiento de los cilios, los leucocitos se alejan de
las paredes y forman una columna en el centro del conducto endocervical.
Barrera qumica contra la infeccin: es a mitad del ciclo cuando la actividad antibacteriana
es ms eficaz, tanto la de la lisozima como de la lactoferrina y la de la peroxidasa. vii

Infertilidad masculina

Puede deberse a:

Una disminucin de la cantidad de espermatozoides.


Espermatozoides que resultan bloqueados y no pueden ser liberados.
Defectos en los espermatozoides.
La infertilidad masculina puede ser causada por:
Defectos congnitos
Tratamientos para el cncer, por ejemplo quimioterapia y radiacin
Exposicin a mucho calor durante perodos prolongados
Consumo compulsivo de alcohol, de marihuana o de cocana
Desequilibrio hormonal
Impotencia
Infeccin
Consumo de ciertos frmacos, como cimetidina, espironolactona y nitrofurantoina
Obesidad
Edad avanzada
Eyaculacin retrgrada
Cicatrizacin a raz de enfermedades de transmisin sexual, lesin o ciruga
Tabaquismo
Toxinas en el medioambiente
Vasectoma o falla de la vasovasostomaviii

Desarrollo de la prctica

Material

Porta objetos de cristal


Cubre objetos de crista

Material biolgico

Muestra de semen

Procedimiento

Azul de metileno
Microscopio fotnico/luz
Contenedor recolector de muestra

Prctica no. 1
Espermatobioscopia
1. En un porta objetos, coloque una gota de muestra de semen y cbralo con un cubre
objetos otro porta objetos coloque una gota de muestra de semen y aplique una gota de
colorante azul de metileno, cubra con un cubre objetos y observe al microscopio. Realice
sus anotaciones
2. En otro porta objetos coloque una gota de muestra de semen y aplique una gota de
colorante azul de metileno, cubra con un cubre objetos y observe al microscopio. Realice
sus anotaciones.
Observaciones

Conclusiones:

Se pudieron apreciar las partes de un espermatozoide adems de poder realizar


las pruebas macroscpicas sin ningn problema.

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Prctica no. 1
Espermatobioscopia

BIBLIOGRAFA

i Manual de prcticas de biologa del desarrollo; coordinacin mdicos cirujano; Agosto 2015, UAEM
ii Bruce M. Carlson. Embriologa Humana y Biologa del Desarrollo. Ed. Mosby. Tercera edicin.
iii Embriologia clnica, Keith L. Moore, McGraw- Hill Interamcaneria, pp 33- 35
iv http://www.scielo.cl/pdf/rmc/v139n4/art20.pdf Luis Sarabia1, Mara Jos Munuce, Presidente del
Programa Latinoamericano para la Estandarizacin del Anlisis Seminal (PLEAS), Universidad de
Chile. Santiago de Chile.
vhttp://embriomon.blogspot.mx/2014/02/morfologiaespermatica_25.html;EQUIPOEMBRIO;2014
vi Informe de Control de Calidad; Universidad de oriente, Ncleo bolvar; Escuela de ciencias de la salud;
Departamento de Bioanalisis, rea: bioqumica clnica

vii Manual de Laboratorio de la OMS para el examen del semen humano y de la interaccin entre el
semen y el moco cervical, Editorial panamericana, 2010; PDF
viii American Society for Reproductive Medicine. Diagnostic evaluation of the infertile female: a committee
opinion.Fertil Steril; Traduccin y localizacin realizada por: DrTango, Inc; actualizacin 2014