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Resumo

Natural killers (NK) so grandes linfcitos granulares do sistema imune inato que
participam do controle precoce das infeces microbianas e cncer. As clulas NK
podem induzir a morte de clulas autlogas submetidas a diversas formas de estresse,
reconhecendo e fornecendo sinais de "perigo" no-microbianos ao sistema imunolgico.
As clulas NK so amplamente distribudas nos rgos linfides e no linfides. Os
precursores de clulas NK so originrios da medula ssea e passam por um complexo
processo de maturao que leva aquisio de suas funes efetoras, s mudanas em
sua expresso de integrinas e receptores quimiotticos, e sua redistribuio a partir da
medula ssea e gnglios linfticos para o sangue, bao, fgado e pulmo. Aqui,
descrevemos a localizao nos tecidos das clulas NK, utilizando NKp46 como
marcador de clulas NK, e revisamos o conhecimento atual sobre os mecanismos que
regem o seu trfico em seres humanos e em camundongos.
Introduo
As clulas NK so linfcitos do sistema imune inato que podem induzir a morte das
clulas alognicas e das clulas autlogas submetidas a diversas formas de estresse, tais
como as infeces microbianas e a transformao maligna. As clulas NK expressam
uma matriz de ativao e receptores inibitrios, cujo envolvimento lhes permite
discriminar entre as clulas-alvo e no-alvo. O repertrio de receptores das clulas NK
complementar de outros sensores inatos, como os receptores scavanger, os receptores
Toll-like (TLRs) ou de domnio de oligomerizao de nucleotdeos (NOD) protena. As
estratgias de reconhecimento das clulas NK, assim, ampliando a deteco de situaes
patognicas em "sinais de perigo" microbianos esto faltando in vivo, como no caso de
tumores pouco imunognicos.
Coerente com seu papel na vigilncia imunolgica, as clulas NK so amplamente
distribudas no corpo. No est claro, no entanto, se esta ampla distribuio devido a
sua recirculao, devido existncia de subgrupos com diferentes capacidades NK
homing, ou devido ao seu desenvolvimento em locais mltiplos. As clulas NK tambm
podem ser recrutadas em vrios tecidos aps a inflamao. No entanto, em contraste
com as clulas B e T, os mecanismos que regem o trfico de clulas NK permanecem
pouco dissecados.
Ampla distribuio tecidual das clulas NK
Tem sido muito apreciado que as clulas NK so amplamente distribudas em
mamferos. Entretanto, poucos estudos tm precisamente os destinatrios dessa
distribuio. Um primeiro estudo em ratos mostrou que a freqncia de grandes
linfcitos granulares (LGLs), incluindo NK e linfcitos T, foi alta no pulmo e no
sangue perifrico, superior do bao, exsudado peritoneal e gnglios linfticos. LGLs
tambm foram encontrados para estar ausentes no timo e na medula. Estudos posteriores
em ratos demonstraram a presena de clulas NK, definida como NK1.1 + CD3 ou DX5
CD3 + por citometria de fluxo, em vrios rgos, mas nunca focada em sua distribuio.
Ns revisitamos essa questo e medimos o percentual e o nmero de clulas NK do rato
em vrios rgos. Nossos resultados confirmam a ampla distribuio das clulas NK
nos rgos linfides e no linfides. A freqncia de clulas NK em linfcitos foi
considerada a mais elevada em orgos no-linfides, tais como o pulmo e o fgado. Um

fenmeno semelhante foi tambm observado para CD8 + efetores de memria de clula
T, sugerindo mecanismos semelhantes de trfico para esses dois tipos de clulas e da
existncia de um nicho para a interleucina-15 (IL-15) - linfcitos dependentes de rgos
no-linfides. A ordem para a freqncia de clulas NK o fgado> pulmo> clulas
mononucleares do sangue perifrico (PBMCs)> bao> medula ssea (BM)> linfonodos
(LN)> timo, onde as clulas NK so quase indetectveis. Para efeito de comparao
clulas NK1.1+ predominam no fgado, enquanto as clulas T no sangue e linfonodos.
As clulas humanas NK tambm parecem ser freqentes em rgos no-linfides.
O maior nmero de clulas NK do rato, 2-3 milhes, pode ser encontrado no bao.
Reservatrios significativos de clulas NK tambm podem ser encontrados em todos os
rgos testados excluindo o timo. Nos seres humanos, verificou-se que clulas NK em
linfonodos ultrapassam clulas NK no sangue de 10:1, enquanto que uma proporo
estimada 1:1 foi observada no rato. A razo para esta discrepncia pode estar ligada
expresso de CCR7 em um subconjunto de recursos humanos, mas no em clulas NK
do rato, como discutido mais tarde.
A presena de clulas NK em tecidos epiteliais tem sido pouco estudada. H grande
nmero de clulas NK no tero durante a gravidez, tanto em humanos quanto em
camundongos. Em humanos, clulas CD3-CD56 + NK foram detectadas na pele de
doadores saudveis e na linfa de drenagem deste tecido. Uma infiltrao de clulas NK
tem sido relatada em pele com dermatite atpica lesional, na epiderme e na derme, aps
a exposio a Malassezia, e na pele inflamatria durante a fase de induo da
hipersensibilidade de contato em um modelo de rato com dermatite de contato alrgica.
Alm disso, vrios grupos tm relatado o acmulo de clulas que expressam um
fentipo de clulas NK em leses cutneas de psorase. No entanto, novos estudos so
necessrios para determinar claramente se as clulas infiltrantes so realmente clulas
NK ou clulas NK-like um pouco T. Em um intestino humano normal, leuccitos
CD3- intra-epiteliais que expressam marcadores de clulas NK, como CD122, CD161,
CD2, CD94, CD56 ou CD16 tm sido descritos. Finalmente, as clulas CD3 + NK1.1
foram recentemente identificadas junto a clulas em suspenso preparada a partir de
tecido vaginal de rato. Alm disso, a IL-15-/ - e / ou RAG2 / - c - / - de ratos so mais
sensveis infeco ao vrus da herpes genital simples 2 (HSV-2), sugerindo um
potencial das clulas NK no controle da disseminao da infeco em tecidos da
mucosa.
Clulas NK nos seios
A visualizao in situ de clulas NK tem sido dificultado pela falta de reagentes
especficos. Tentativas anteriores para identificar as clulas NK in situ basearam-se na
adoo de transferncia do nvel de fluorescncia das clulas ou marcao com antiNK1.1, anti Ly49G2, ou anti-CD49b (28-32). No entanto, nenhum dos anticorpos acima
so especficos para clulas NK. (NK1.1, CD49b) ou expresso em todas as clulas NK
(Ly49G2, CD49b). Recentemente, descobriu-se que a expresso de superfcie da clula
de ativao do receptor das clulas NK NKp46 (CD336) so definidos melhor em
clulas NK atravs das espcies de mamferos, aumentando a possibilidade de procurar
para as clulas NK in situ nos tecidos seccionados usando anticorpos anti-NKp46 (33).

No bao, as clulas NK so encontradas principalmente na polpa vermelha em um


estado estacionrio, portanto, excluindo a rea rica em linfcito T e B-ricos (rea
definida pelo CD19 e CD3 colorao) (Fig. 2A).
Ficando os macrfagos metallophilic (SignR1) (Fig. 2C) com algumas clulas NK
tambm esto presentes na zona marginal mas no vo alm desta zona para a polpa
branca. Anticorpos para NKp46 e CD31 [clula endotelial plaquetria molcula de
adeso-1 (PECAM-1), um endotelial] esto marcados nas mesmas regies, sugerindo
que a maioria das clulas NK esplnicas so de fato localizado no interior dos seios no
sangue (Fig. 2D). Ocasionalmente clulas NKp461 so encontradas na polpa branca,
mas de colorao para CD31 sugere que muitos deles esto realmente de fato dentro dos
seios ou vasos (Fig. 2D). Muitos outros tipos de clulas pode ser encontrada nas
proximidades da zona das clulas NK. Em particular, a maioria das clulas CD11bhigh
(incluindo macrfagos) (Fig. 2E) so encontradas na polpa vermelha e zona marginal,
entretanto que muitas clulas CD11chigh (incluindo clulas dendrticas) (Fig. 2F) so
encontradas no s na polpa branca, mas tambm na zona marginal e na polpa
vermelha. O contato clula a clula entre as clulas NK e os macrfagos (ou da polpa
vermelha ou de a zona marginal) pode ser visto nas imagens estticas. Estes
observaes suportam a existncia de interaes entre NK e macrfagos, bem como as
clulas NK e clulas dendrticas. Tais interaes tm sido amplamente documentadas in
vitro (34-37) e leva a uma regulao mtua desses tipos diferentes de clulas
orquestrao das respostas imunes.
Em um estado de repouso, as clulas NK so encontradas tambm no LN perifrica, na
maior parte excludas das zonas da clulas B e T (33, autores dados no publicados),
consistente com estudos anteriores (29). Em regies perifoliculares as clulas NK so
encontradas no paracrtex e especialmente na zona da medula entre os seios linfticos
(29). Em regio perifolicular, as clulas NK so encontradas novamente nos seios em
torno dos folculos e, especialmente, entre os folculos, no local onde as clulas
dendrticas, presumivelmente, chegam ao migrarem dos tecidos ao LN drenados atravs
de um aferente linftica (29).
Dentro de rgos linfides secundrios, os trs tipos de linfcitos (T, B e clulas NK),
esto localizados em diferentes compartimentos. As clulas NK so preferencialmente
encontradas no interior dos vasos ou seios, sangue ou vasos linfticos. A mesma
concluso tambm poderia ser estendida para o fgado, pois sabido que a maioria
linfcitos hepticos esto presentes nos sinusides (38) e so ausentes do espao do
parnquima.
O desenvolvimento e maturao das clulas NK
A evidncia convincente aponta para o BM como o principal local de NK o
desenvolvimento de clulas de adultos em um estado estvel(6). Alm disso, artigos
recentes sugerem que LN e o timo e poderiam ser fontes alternativas de clulas NK (39,
40). A contribuio aparente destes rgos para o povoar de clulas NK no
conhecida, mas esperada para ser baixo em um estado estvel. Na verdade, esta
poiesis extramedullary 'NK' parece produzir distintos fentipos de clulas NK, que
expressam a cadeia a do receptor IL-7 (40). Essas clulas NK compem o 5% do total

de clulas NK. Alm disso, um exame cuidadoso das clulas NK tmicas revela que
muitas delas expressam a forma fenotpica CD3 intracelularmente e compartilham
caractersticas funcionais com NK1.11 clulas T, sugerindo na verdade que clulas NK
so como clulas T (41). No entanto, em camundongos o desenvolvimento das clulas T
bloqueado por meios genticos, um muito elevado nmero de clulas NK
desenvolvem no timo, mostrando a capacidade de precursores de clulas T
desenvolverem em clulas NK em condies particulares (40). Alm disso, o fgado
normal contm um nmero substancial de clulas imaturas NK, sugerindo que
precursoras das clulas NK originrias da BM poderiam ser oriundas da periferia e
desenvolverem in situ (42). Assim, possvel que o desenvolvimento extra-medular das
clulas NK podem ter localizados em locais linfopnicos ou outras condies que
continuam a ser dissertado.
Ainda desconhecido como e onde as clulas NK completam a sua maturao. Entre os
estgios de maturao das clulas Nk podem ser definidos em ratos baseados na
expresso de CD11b, CD11bhighCD27high (abreviado como DP), e CD11bhigh
CD27dull (abreviado como CD27dull, o mais maduro) (43-45). DP e clulas NK
CD27dull mostram forte funes efetoras que as clulas NK CD11bdull (113). A
distribuio das NK trs subpopulaes de clulas do tecido distribuio variada. Onde
CD11bdull clulas NK predominam na BM e LN, DP e, especialmente, CD27dull
clulas NK prevalecer no sangue, fgado, bao e pulmo (44). Como discutido mais
adiante, a expresso de receptores quimiotxicos diferentes participa nas capacidades
distintas homing das clulas NK subconjuntos. Em humanos, dois subconjuntos de
clulas NK tm sido descritas, CD56dim e clulas NK CD56bright, que partilham
muitas caractersticas com CD11bdull e clulas NK DP/CD27dull, respectivamente
(45). Esta semelhana e outras observaes (12, 46) sugerem que CD56bright poderia
ser precursores das clulas NK CD56dim. Tal como os seus homlogos mouse, as
clulas NK so CD56bright preferencialmente encontradas no LN, enquanto que as
clulas so mais CD56dim abundante no sangue e bao (12).
Ainda desconhecido como e onde as clulas NK completar a sua maturao. Como os
trs subpopulaes de clulas NK so encontrados em todos os rgos,
provvel que os precursores de clulas NK ou clulas imaturas NK (Fase CD11bdull)
so semeados do BM para a periferia, onde se desenvolver no local sob a influncia do
microambiente fatores
Recirculao das clulas Natural Killer
BM: Medula ssea (Bone Marrow)
LN: Linfonodo (Lymph Node)
Poucos dados esto disponveis sobre a recirculao das clulas NK entre os rgos.
Ser que as clulas NK trafegam atravs de rgos perifricos? Elas saiam de rgos
linfides e no linfides, ou elas residem em tecidos? Um estudo anterior (47) mostrou
que na transferncia por via intravenosa em ratos receptores, LGLs marcadas por radio
elemento ficavam preferencialmente nas paredes alveolares do pulmo e da polpa
vermelha do bao. Contudo LGLs foram achadas ausente no ducto torcico e LN ( 47).
Mais tarde, experincias de transferncia adotiva em camundongos mostraram que as

clulas NK do bao podem se alocar no bao, no fgado e BM dos camundongos


receptores (48-50). Para conseguir uma compreenso no trfego de clulas NK, fizemos
uma transferncia intravenosa adotivo de ester succinimidyl carboxifluorescein (CFSE)
- marcando splenocytes em camundongo receptores syngeneic, no irradiados.24 horas
depois da transferncia, a porcentagem de clulas NK dentro dos linfcitos foi medido
no sangue, bao, LM, BM, pulmo e fgado. Os resultados mostraram que a distribuio
das clulas NK transferidos era similar das clulas NK do receptor (fig. 3), assim
como a distribuio de clulas NK1.1 + T. Alm disso, a proporo relativa de
subconjuntos de clulas NK (CD11b dull ate CD27 dull) foi semelhante entre receptor e
doador de clulas NK em todos os rgos (dados no mostrados). Esta experincia
simples mostra que (i) as clulas NK de bao no esto programados para se alocar
dentro do bao, mas sim recircular atravs de todos os rgos que contm clulas NK e
(ii) a recirculao de clulas NK parece ser um subconjunto especfico: LN e BM so
preferencialmente repovoados por clulas NK CD11b dull e o sangue, bao e pulmo
pelas clulas NK CD27dull. A contribuio relativa dos fatores que regulam a alocao
em tecido e a sada, como os receptores quimiotticos ou os mecanismos
homeostticos , na distribuio das clulas NK, deve ser estudada.
No entanto, vrias abordagens tm sido utilizadas para estudar a expresso de receptores
quimiotticos em clulas NK. Em primeiro lugar, vrios estudos mediram a expresso
dos receptores quimiotticos de clulas NK por cytometry de fluxo , quando os
anticorpos foram conhecidos (51-57). Em segundo lugar, vrios linhagens de
camundongos foram criados nos quais uma protena verde fluorescente cDNA estava
inserida(?) em genes que codificam receptores de quimiocina (58,59). Usando esses
camundongos, descobrimos que CXCR6 s expressa por uma frao de clulas NK
CD11b dull, enquanto CX3CR1 adquirida com envelhecimento (maturao?), quase
expressa seletivamente por clulas NK CD27 dull (Fig4). Em terceiro, experimentos de
microarranjos foram realizados para medir a expresso gnica ao nvel pan-genmica
em humanos (60, 61) e subconjuntos de clulas NK de camundongos (tabela 1). Os
resultados obtidos com estas diferentes abordagens revelam vrias tendncias (fig. 5).
Em primeiro lugar, uma forte semelhana no padro de expresso de receptores de
quimiocina em subconjuntos de clulas NK em humanos e ratos enfatiza a homologia
entre clulas NK CD11b dull de ratos e clulas NK CD56 bright, por um lado, e clulas
DP/CD27dull de rato e clulas NK CD56dim humanas de outro lado. Mas contudo,
existam importantes diferencias. Em particular, CCR7 expressa pelas clulas humanas
NK CD56 bright, mas nenhuma transcrio CCR7 est detectada em clulas de rato NK
CD11dull. Esta diferena poderia ser explicada pela representao distintas das clulas
NK em LN em humanos (5% de linfcitos) e em camundongos (0,5% de linfcitos). Em
segundo lugar, as clulas NK esto prontas para estar rapidamente recrutados nos locais
de inflamao, como elas expressam receptores para uma ampla variedade de
quimiocinas inflamatrias (CCR2, CCR5, CXCR3, CX3, CR1). Em terceiro lugar, a
expresso dos receptores quimiotticos muda com a maturao das clulas NK. Em
particular, as clulas NK CD27dull/CD56dim perdem CXCR3 (e tambm CXCR4 em
ratos), mas adquirem a expresso CX3 CR1 (e tambm ChemR23 em humanos), um
conjunto de receptores que so esperados para influenciar sua recirculao e seu
recrutamento sobre a inflamao.

NK trfico de clula em um estado estacionrio Como as clulas NK saem da medula


ssea? Um papel para CXCR4 no homing de clulas NK humanas medula ssea de
reconstitudo (?) ratos no obesos diabticos e / ou grave combinado com
imunodeficiencia foi relatada, sugerindo que a perda de CXCR4 poderia contribuir para
a exportao de clulas NK recm-produzidas. No entanto, CXCR4 parece ser
uniformemente expressa por clulas NK de todos os rgos. Alm disso, um estudo
recente mostrou que o tratamento do rato com um inibidor seletivo CXCR4 no induz a
mobilizao de clulas NK da medula ssea (63). Outro estudo mostrou que as clulas
NK eram praticamente ausentes da periferia do CXCR3 de camundongos nocaute. No
entanto, trs estudos no relataram qualquer defeito na distribuio das clulas NK
nestes ratos, questionando o papel da CXCR3 na emigrao das clulas NK da medula
ssea. Mais recentemente, descobrimos a maturao das clulas NK correlacionada com
a aquisio da SIP, uma das (SIP cinco esfingosina-fosfato), protena G receptores
acoplados. SIP um lysophospholipid secretado vinculado extensivamente albumina e
outras protenas plasmticas. Atividades coordenadas de enzimas biossintticas e
biodegradveis mantm gradientes de SIP in vivo, com alta concentrao de SIP nos
fluidos extracelulares e baixas concentraes de SIP nos tecidos. Em camundongos PISdeficientes, uma diminuio drstica na periferia da contagem de clulas NK
observado no sangue, bao e pulmo. Este homing defeituoso intrnseco das clulas
NK e correlaciona-se com um aumento do nmero de clulas NK na medula ssea e
Linfonodo. PIS opera em clulas NK como quimiottico receptor para SIP in vitro,
promovendo homing das clulas NK no sangue, bao,e pulmo in vivo. O estent de
acmulo de clulas NK na medula e Linfonodo se correlaciona com o nvel de
expresso PIS. Em conjunto, estas observaes sugerem
que SIPs fornecem um sinal de sada para as clulas NK, permitindo a ambas sua
exportao a partir da medula e a sua sada do linfonodo (fig6). Curiosamente, os ratos
tm clulas NK damedula normais, mas muito poucos clulas NK maduras no bao
(70), solicitando uma investigao sobre se estes fatores de transcrio controlam
expresso e / ou funo das SIPs.
Como chegam clulas NK nos rgos linfides?
Como outros linfcitos, clulas NK entram nos Linfonodos atravs das alta vnulas
endoteliais (HEVs) e do bao atravs do seio marginal. CD56bright clulas NK
humanas expressam L selectina que permite a interao com glicosilada ligantes L
selectina nas HEVs(vnulas altas endoteliais dos linfonodos). CD62L expresso em um
nvel similar em subconjuntos de clulas NK de rato isolados do linfonodo e
necessrio para a sua entrada nos mesmos. Se CD62L suficiente para a entrada no se
sabe. Como discutido anteriormente, a maioria das celulas NK de rato localizam- se nos
sinusides e reas em torno de clulas B e T, um local parecido onde no bao as clulas
NK so encontradas, na polpa vermelha em torno da polpa branca. Uma possibilidade
que esta rea atingida por padro, na ausncia de expresso do CCR7. Coerente com
esse modelo, clulas NK do CD56bright do linfonodo humano que expressam CCR7
esto localizadas, no mnimo em parte, no crtex de clulas-T. Recentemente, foi
demonstrado que CCR7 induzida em clulas CD56dim por IL-8 in vitro, sugerindo
que, sob certas conditoes, essas clulas poderiam tambm trafegar no linfonodo.
Transferncia de experincias tm mostrado que as clulas NK perifricas tambm
podem retornar para a medula. Clulas T de memria centrais, preferencialmente
moram neste tecido por um mecanismo que depende tanto do CXCL12 (ligante

CXCR4) quanto das E / P se4lectins / L. Se este tambm o caso das clulas NK, isto
requer uma investigao mais aprofundada.
Como as clulas NK atingir rgos no-linfides?
A distribuio de subpopulaes de clulas NK no sangue, bao, fgado e pulmo
muito semelhante, com a maioria das clulas NK CD27dull. Deficincia de SIPs afeta
as clulas NK desses compartimentos da mesma forma. Este achado sugere, aps a sua
exportao de Sips dependentes para a periferia, que as clulas NK so arrastadas pelo
fluxo de sangue em uma maneira independente de SIPs (fig6). A frao de clulas NK
CD11bDull poderia patrulhar sinusides hepticos atravs da interao de CXCR6 com
CXCL16 endotlio-bound (bound= obrigado- Nao entendi isso)
O trfego de clulas NK durante condies inflamatrias
A cerca da inflamao, em ratos, as clulas NK podem ser recrutadas de vrios rgos,
tais como LN, pulmo, fgado ou sistema nervoso central (CNS) e podem, ento,
extravasar pelo parnquima ou pelas cavidades. A migrao de leuccitos para a luz
vascular de tecidos depende de uma srie de interaes moleculares seqenciais entre
leuccitos e clulas endoteliais, envolvendo receptores de seletinas, integrinas e
quimiocinas.
Seletinas:
No rato, glicoprotenas L-seletina e P-seletina ligantes 1 (PSGL-1) so expressadas por
nveis similares de subconjuntos de clulas NK. L-seletina necessria para o homing
de clulas NK em ratos e recrutada do NL. Em humanos, CD56 bright mas no
amadurecidas CD56dirn CD16+ clulas NK tambm expressam l- sectina. Sialyl estgio
embrionrio especfico do antgeno 1 e uma caracterizao sLex comportando o
receptor pode servir como ligantes de E-seletina. Embora PSGL-1 seja, expressado em
clulas NK de humanos recm-isoladas, somente uma pequena populao de clulas NK
ligam-se a P-selectina-imunoglobulina (Ig).Clula NK humana diferenciada
acompanhada da expresso da superfcie celular de uma glicoprotena mucina-like que
ostenta uma keratan clulas NK restrita a lactosamina sulfato relacionado, o eptopo
PEN5. O carboidrato PEN5 acrescenta-se ao PSGL-1, criando um stio de ligao
exclusivo para L-sectina, o qual independente da PSGL-1 tirosina sulfato. A analogia
para a habilidade dos neutrfilos circulantes para capturar neutrfilos de fluxo livre na
PSGL-1: a espcie de L-sectina- dependente, o eptopo PEN5 pode permitir que clulas
NK interajam com outras L-selectinas + leuccitos (e. g. neutrfilos, moncitos ou
linfcitos T ou B) ligado ao endotlio inflamatrio para amplificar a resposta imune.
Quimiotacinas:
O papel dos receptores quimiotticos nas clulas NK recrutadas, no rato, para stios
inflamatrios tem sido estudadas usando linhagens acontecimentos (knockout strains) e
anticorpos bloqueados (25, 64-67, 82-92). Em humanos, a expresso das
quimiotacinas e dos receptores de stios inflamatrios tem tambm providenciado
algumas informaes.

Quatro receptores parecem desempenhar um papel chave nas clulas NK de ratos


recrutadas logo aps um estmulo inflamatrio: CCR2, CCR5, CXCR3 e CX3CR1.
Estes receptores permitem as clulas NK responder uma grande ordem de
quimiotaquicinas inflamatrias tais como CCL2, CCL3, CCL5, CCL7, CCL8, CCL9,
CCL11, CCL13, CXCL-9 e CX3CL1. Esta ampla resposta poderia justificar o
recrutamento de clulas NK em situaes onde conjuntos limitados de quimiotaxinas
so expressados. Assim, o recrutamento de clulas NK em alguns tecidos podem ser
mediados por diferentes receptores quimiotxicos. Por exemplo, no recrutamento de
clulas NK em humanos para o epitlio parece ser dependente de CCR2, CCR5,
CXCR3 ou ChemR23, dependendo das condies inflamatrias. As clulas NK n s
respondem por diferentes quimiotoxinas, mas tambm parece que as quimiotoxinas
podem agir em conjunto para recrut-los. CCR2 e CCR5 so requeridos para o
recrutamento das clulas NK para o fgado do rato infectado pelo citomegalovirus
(MCMV). Um fenmeno parecido tinha sido observado, anteriormente, por moncitos.
Subpopulaes importantes de clulas NK poderiam tambm ser recrutadas
diferentemente dependendo do estmulo. De fato, CX3CRI mas no CXCR3 requerida
pelas clulas NK recrutadas na CNS um modelo encenfalomielite auto-imune
experimental. Como CXR3 e CX3CRI so expressas de uma forma quase excludentes
em subpopulaes de clulas NK, este achado sugere que os diferentes subgrupos
chamada NK podem ser recrutados de forma independente em diferentes configuraes
inflamatrio. essa diviso do trabalho j foi mostrado para outros tipos de leuccitos,
como moncitos e clulas T CD8 de memria. alm de quimiocinas, as clulas NK
foram mostrados para responder a vrios compostos que so quimiotticos outras
induzidas ou aumentada a inflamao. Estes incluem o cido lisofosfatdico. N-formilmetionil-leucil-fenilalanina (F-MLP), leucotrienos e C5a. o papel destes mediadores
inflamatrios e de seus receptores no recrutamento de clulas NK in vivo continuam a
ser investigados em profundidade.
Integrinas Aps a ativao de quimiocinas, as clulas NK interagir firmemente com o
endotlio atravs de integrinas. O papel da LFA I (funo de leuccitos associada
antigen-1), como para outros leuccitos, foi mostrado para ser central no
extravasamento de clulas
NK (104). Interessante.As clulas NK expressam integrinas sequencialmente diferentes
sobre o desenvolvimento e maturao (43). Para obter uma viso deste fenmeno, ns
examinamos a expresso das integrinas a nvel do mRNA em subconjuntos ordenados
clulas NK, usando microarrays.Todas as clulas NK expressam transcries muitas das
integrinas envolvidas no extravasamento (Tabela 1). Como relatado anteriormente,
descobrimos que CD49b e CD11b CD51 foram adquiridas, enquanto diminuiu a
maturao das clulas NK. Nossos dados mostram tambm que CD11c e CD61,
especialmente (B3 integrina) so reduzidos em maturao. O significado desta
observao obscura, mas diferentes conjuntos de integrinas podem contribuir para o
recrutamento diferencial dos subtipos de clulas NK a inflamao.Alm de integrinas, a
adeso das clulas NK do endotlio pode tambm ser mediada por CX3CR1. De fato,
foi relatado anteriormente que CX3CL1 mediats capturar a rpida adeso integrina
empresa independente, ativao e de leuccitos circulantes em flowthrough CX3CR1
(105). Recrutamento de clulas NK de clulas inflamatrias no fgado NK migram para
o fgado em resposta a uma variedade de estmulos, tais como a injeo de ter anidrido
maleico divinil (MVE-2), Corynebacterium parvum (106), poly (I: C) (89107108 ),
mcmv (109), hepatite B (110), ou concanavalina A (CON-A) (111). Concomitante ao

aumento do fgado clulas NK, clulas NK conta diminuir no bao e no BM, sugerindo
que esses rgos funcionam como reservatrios de clulas NK, em caso de inflamao
(65). receptores de quimiocinas diferentes podem orquestrar essa contratao. CXCR3
parte necessria a mobilizao de splenn clulas NK, enquanto CCR1 necessrio para
o acmulo de clulas NK no fgado (65). Para ganhar uma introspeco no mecanismo
de mobilizao de clulas NK do bao, realizamos experimentos de imunofluorescncia
em cortes congelados de bao obtidos de camundongos injetados com
lipopolissacardeo (LPS) ou con-A. A redistribuio das clulas NK do bao foi
observada em resposta injeo de Con-A (Fig7). clulas NK parecem migrar a partir
da polpa vermelha para a zona marginal. Esta Relocalization de clulas NK no foi
observada quando os ratos foram tratados com LPS, embora esse estmulo provoca uma
redistribuio macia de clulas dendrticas (fig7.4 e dados no mostrados). Aps a
injeo de Con-A, as clulas NK so, portanto, encontrado em estreito contacto com os
macrfagos da zona marginal (fig8). Ser de
interesse para testar se CXCR3 est envolvido neste processo. Este fenmeno
transitrio, como 48h aps a injeo de Con-A, a distribuio das clulas NK no splenn
normal. Recrutamento de clulas NK a LN inflamatrio
A contratao em massa das clulas NK observado na LN drenagem em resposta a
uma injeo de grandes patas leishmania (29), TRL 08/07 ligantes, ou LPS-ativao de
clulas dendrticas (87). Este recrutamento dependente CXCR3 (87). ligantes CXCR3
como CXCL9 so expressos na superfcie de HEVs inflamatrios (112). Em condies
inflamatrias, a maioria das clulas NK so recrutados preferencialmente para a zona de
clulas T do LN, HEVs prximo, em estreita proximidade com as clulas dendrticas
(29). Recrutamento de clulas NK necessrio para ajudar a T-polarizao das clulas T
nave ativado dentro do LN (87). Em outro sistema, verificou-se que CD62L tambm
era necessrio para o recrutamento no LN inflamatrias em resposta a uma injeo
subcutnea de clulas tumorais (72).
Observaes finais
O conhecimento preciso da anatomia do sistema imunolgico , obviamente,
fundamental para nossa compreenso da imunidade. Em contraste com a T, B e clulas
dendrticas, o trfico de clulas NK em condies normais e de doena pouco
caracterizado. No entanto, parece que linfide patrulha NK clulas e rgos nolinfides. Em um estado estacionrio, as clulas NK presentes em uma freqncia
elevada na circulao, pronto para extravasar para os tecidos em condies
inflamatrias. Alm dos papis de SIP5 e receptores de quimiocinas, o conjunto de
molculas que govem trfico de clulas NK in vivo ainda no foram identificados. A
disseco dos mecanismos que regulam a migrao das clulas NK pode provavelmente
fornecer novas perspectivas para a manipulao dessas clulas para fins teraputicos,
como exemplificado pelo uso do agoist S1P, FTY720, como T-imunossupressor de
clula-B e.