Practica 1 Bioquimica 2

PRCTICA N1
Propiedades de aminocidos: Solubilidad y reacciones colorimtricas

Nombres: Henry Cambizaca, Nelly Lazo, Galo Pinos y Sergio Vsquez - Docente: Dra. Diana Astudillo
Universidad de Cuenca, Facultad de Ciencias Qumicas, Escuela de Bioqumica y Farmacia
Bioqumica I, Cuenca Ecuador, Fecha de entrega: 26/03/2015
1. Presentacin de la prctica:
En esta prctica se realizarn dos pruebas con los aminocidos, la primera consiste en
la solubilidad de estos, lo cual lo determinamos basndonos en el carcter polar o
apolar de los diferentes tipos de aminocidos. Para primer este ensayo usaremos tres
solventes, el uno polar como es el agua, el otro no tan polar como es el alcohol etlico y
el tercero apolar como es el cloroformo. De esta forma determinamos la solubilidad de
los aminocidos, y confirmamos el resultado con los datos tericos que tenemos en la
asignatura.
La segunda prueba que realizaremos son las pruebas colorimtricas, las cuales se
basan en la reactividad del grupo R, produciendo compuestos coloreados al reaccionar
con cierto tipo de reactivos. Para realizar esto tomaremos la cantidad indicada de
aminocido y haremos la prueba correspondiente tal como nos dicta la materia
siguiendo los pasos correspondientes.
2. Requisitos, precauciones y evaluacin:
Lecturas recomendadas: Bioqumica de laguna (Pg. 82-90). Por Dr. Jos

Laguna, Editorial el manual moderno; Nutricin para educadores (Pg. 93-95).
Por Jos Mataix Verd, Editorial Daz de Santos; Manual de experimentos de
laboratorio para bioqumica (Pg. 18-21). Por Silvia Quesada Mor, Editorial
EUNED.
Precauciones: Usar todo el equipo de seguridad (mandil, guantes, mascarilla)
para evitar cualquier derrame y envenenamiento por cierto reactivos nocivos. As
logramos reducir al mnimo el riesgo en el laboratorio.
Evaluacin: El estudiante debe dominar conceptos bsicos de la estructura,
propiedades y reactividad de los aminocidos; siendo fundamental conocer el
Henry Cambizaca, Nelly Lazo, Galo Pinos y Sergio Vsquez, estudiantes de 6to de Bioqumica y
Farmacia,
henry.cambizaca1903@ucuenca.ec; nelly.lazov@ucuenca.ec; galo.pinos0210@ucuenca.ec;
sergio.vasquezp94@ucuenca.ec
Dra. Diana Astudillo, docente de 6to de Bioqumica y Farmacia, diana.astudillon@ucuenca.edu.ec
R que presenta cada aminocido para comprender el resultado de las

reacciones.
3. Objetivos:
Analizar la solubilidad de los aminocidos en tres tipos de solventes.
Realizar pruebas colorimtricas, en los aminocidos y los analizar resultados
que nos darn de acuerdo a la estructura del radical R.
4. Equipos, instrumentos y reactivos:
Materiales
Gradilla para tubos
Tubos de ensayo
Pipetas
Propipeta
Hielo
Vasos de precipitacin
Reactivos
Agua destilada
Etanol
Cloroformo
cido Ntrico concentrado
NaOH
NO2Na
Reactivo de Milln: Solucin de
Sulfato Mercrico 150g/l en
cido sulfrico al 15%
Reactivo de Erlich
(p-Dimetilaminobenzaldehdo
100 g/l en HCl concentrado)
Nitroprusiato de Sodio
Amonaco
cido Sulfanlico al 1%
NO2Na al 1%
CO3Na2 al 10%
Sacarosa
H2SO4 concentrado
Aminocidos (triptfano, leucina
y glutamina)
Tabla 1. Materiales para determinar la solubilidad y pruebas colorimtricas de los a.a.
5. Marco Terico:
Farmacia,
Los aminocidos son los monmeros de las que estn formadas las protenas, y por
ello tambin las enzimas.
Qumicamente, se caracterizan por la presencia en su molcula de un grupo carboxilo
en el carbono alfa, y un grupo amino, unido al carbono beta. La nica excepcin a esta
regla es la prolina.
Los aminocidos son compuestos incoloros, cristalinos, a granel se presentan como
polvo blanco. Las formas cristalinas son muy caractersticas y van desde agujas
(tirosina), hasta placas hexagonales gruesas (cistina). El sabor vara desde dulce
azucarado (glicina), pasando por el inspido (tirosina) hasta el amargo (arginina).
(Mora, 2007).
Tienen diferente afinidad por el agua y otro tipo de solventes, y pueden poseer carga
elctrica positiva, carga negativa, o bien, algunos son neutros. Son solubles en medios
acuosos, ligeramente solubles o insolubles en solventes orgnicos.
Por la estructura peptdica y la presencia de determinados grupos (grupos R), las
protenas pueden reaccionar con una variedad de agentes originndose productos
coloreados. Estas reacciones son la base para la determinacin cuantitativa y
cualitativa de las protenas. Por presentarse variaciones en la composicin de los
aminocidos de las diferentes protenas, se manifiestan diferentes colores y grados de
intensidad para una misma reaccin. (Verd, 2013).
6. Proceso y procedimiento:
SOLUBILIDAD
PRUEBAS DE
SOLUBILIDAD
Segundo tubo con a.a.

aadir Etanol con un
volumen igual a V1,
anotar el volumen
utilizado (V2)
Colocar 30 mg de
aminocido en 3 tubos
de ensayo
Tercer tubo con a.a.

aadir Cloroformo con
un volumen igual a V1,
anotar el volumen
utilizado (V3)
Repetir la operacion
con los a.a.que le
entregue el profesor
(triptfano, leucina y
glutamina)
Primer tubo con a.a.

aadir agua
destiladahasta
disolucin con una
pipeta, anotar el
volumen utilizado (V1)
Observar la
solubilidad anotar los
reultados
respectivos.
Farmacia,
PRUEBAS COLORIMTRICAS
REACCIN
XANTOPROTEICA
A 0.5 ml solucin
acuosa de a.a. +
0.5 ml [HNO3]
REACCIN DE
MILLN
A 1 ml solucin
acuosa de a.a. + 5
gotas reactivo de
Mil n
REACCIN DE
ERLICH
REACCIN DE
NITROPRUSIATO
REACCIN DE
PAULY
Aadir a la solucin
NaOH 10M hasta
solucin alcalina
Calentar en un
bao de agua a
ebullicin 10
minutos
A 0,5 ml solucin
acuosa de a.a. + 2
ml reactivo de Erlich
Enfriar a
temperatura
ambiente + 5
gotas de NO2Na
Resultado
positivo.
Color rojo
ladril o,
Resultado
positivo.
Observar los
cambios de color.
A 2 ml solucin acuosa
de a.a. + 0.5 ml
Nitroprusiato de Sodio
A 2ml de cido
sulfanlico 1% +2
ml solucin acuosa
de a.a.
Cambio de
coloracin de
amarillo (sol. cida)
a naranja (sol.
bsica)
Observar los cambios

de color.
Aadir a la solucin 0,5

ml Amonaco
Enfrar en un bao de
hielo + 1ml NO2Na
1%, dejar en bao de
hielo 3 min
Alcalinice con
2ml CO3Na2
10%
A 1ml solucin acuosa

REACCIN DEL
Aadir a la solucin 1ml
de a.a. + 2 gotas
[H22S044] con una pipeta
TRIPTFANO
disolucin
Sacarosa
Henry Cambizaca, Nelly
Lazo, Galo
Pinos y Sergio Vsquez,
estudiantes
de
Observar los
cambios.
Observar una
coloracin guinda-roja
en forma de anillo,
6to de Bioqumica y
reaccin positiva.
Farmacia,

Farmacia,
7.- Resultados
DETERMINACIN DE LOS AMINOCIDOS
Aminocid
o
Reaccin
Xantoproteic
a
Reacci
n de
Milln
Reacci
n de
Erlich
Reaccin de
Nitroprusiat
o
Reacci
n de
Pauly
Reaccin
de
Sakaguchi
Serina
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Glicina
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Alanina
Negativo
Negativo
Negativo
Metionina
Negativo
Negativo
Isoleucina
Negativo
Lisina
Negativo
Reaccin
con
azufre
Negativo
Reaccin
del
triptfano
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Positivo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Positivo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Positivo
Negativo
Negativo
Negativo
Triptfano
Positivo
Positivo
Positivo
Negativo
Positivo
Negativo
Negativo
Positivo
Leucina
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Glutamina
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Valina
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Asparragina
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Positivo
Negativo
Negativo
Negativo
Cistena
Negativo
Negativo
Negativo
Positivo
Negativo
Negativo
Positivo
Negativo
Tirosina
Positivo
Positivo
Negativo
Negativo
Positivo
Negativo
Negativo
Negativo
Histidina
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Positivo
Negativo
Negativo
Negativo
Arginina
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Positivo
Positivo
Negativo
Negativo
Tabla 2.Resultados de las pruebas colorimtricas de los aminocidos.
Henry Cambizaca, Nelly Lazo, Galo Pinos y Sergio Vsquez, estudiantes de 6to de Bioqumica y Farmacia,
henry.cambizaca1903@ucuenca.ec; nelly.lazov@ucuenca.ec; galo.pinos0210@ucuenca.ec; sergio.vasquezp94@ucuenca.ec
Reaccin
Resultado
Coloracin
Grupo responsable
Xantoproteica
Milln
Erlich
Nitroprusiato
Pauly
Sakaguchi
Azufre
Triptfano
Positivo
Positivo
Positivo
Negativo
Positivo
Negativo
Negativo
Positivo
Naranja intenso
Amarillo intenso
Morado
Naranja
Guinda - roja
Grupo indlico
Grupo indlico
Grupo indlico
Grupo indlico
Grupo indlico
SOLUBILIDAD DE LOS AMINOCIDOS

Aminocido
Agua Destilada
Etanol
Cloroformo
Serina
Glicina
Alanina
Metionina
Isoleucina
Lisina
Triptfano
Leucina
Glutamina
Valina
Asparragina
Cistena
Tirosina
Histidina
Arginina
Soluble
Soluble
Soluble
Soluble
Insoluble
Soluble
Insoluble
Soluble
Soluble
Soluble
Soluble
Soluble
Parcialmente soluble
Soluble
Soluble
Insoluble
Insoluble
Insoluble
Insoluble
Insoluble
Insoluble
Insoluble
Insoluble
Insoluble
Insoluble
Insoluble
Insoluble
Insoluble
Insoluble
Insoluble
Insoluble
Insoluble
Insoluble
Insoluble
Insoluble
Insoluble
Tabla 3.Resultados de las pruebas colorimtricas del Triptfano.

Tabla 4 .Resultados de solubilidad de los aminocido.
8. Conclusiones:
Se logr analizar la solubilidad de los aminocidos Triptfano, Leucina y
Glutamina en tres tipos de solventes, en donde existe mayor solubilidad en el
agua destilada en estos tres aminocidos, parcialmente solubles en cloroformo y
menor solubilidad en etanol.
Se logr realizar las diferentes pruebas colorimtricas en los aminocidos
Triptfano, Leucina y Glutamina. Adems de analizar qu grupo es el
responsable del resultado obtenido, donde la Leucina y Glutamina dieron
negativos a estas pruebas, mientras que el Triptfano si present pruebas
positivas de coloracin debido a su grupo funcional indol.
Los aminocidos son los compuestos qumicos fundamentales pues son la base
de la vida, adems de su interesante actividad qumica, ya que algunos
presentas diversas cadenas laterales polares con las cuales se pueden formar
puentes de hidrogeno siendo solubles en agua y otros aminocidos apolares en
solventes orgnicos.
Esta prctica nos permite reconocer las diferentes caractersticas que presentan
los aminocidos mediante pruebas como es la solubilidad en diferentes
reactivos, o de coloracin mediante reacciones de tipo cualitativo.
9.- Recomendaciones:
El uso del mandil en el laboratorio es obligatorio.
Utilice gafas, guantes y anteojos de seguridad, para la manipulacin de
reactivos.
Cercirese de que cada frasco quede correctamente tapado despus de su uso.
Asiente su mochila y cuaderno en el lugar asignado.
Farmacia,
10. Bibliografa:
Laguna, D. J. (2009). Bioquimica de Laguna. Mexico: manual moderno.
Mora, S. Q. (2007). Manual de experimentos de laboratorio para bioqumica. Costa rica:
EUNED.
Verd, J. M. (2013). Nutricin para educadores. Madrid: Daz de Santos.
11. Anexos:
Pruebas colorimtricas del Triptfano
Fig1 .Reaccin Xantoproteica
Fig2. Reaccin de Milln
Fig4. Reaccin de Pauly
Fig3. Reaccin de Erlich
Fig5. Reaccin del triptfano
Farmacia,
Farmacia,

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Propiedades de aminocidos: Solubilidad y reacciones colorimtricas

2. Requisitos, precauciones y evaluacin:

Lecturas recomendadas: Bioqumica de laguna (Pg. 82-90). Por Dr. Jos

R que presenta cada aminocido para comprender el resultado de las

4. Equipos, instrumentos y reactivos:

Tabla 1. Materiales para determinar la solubilidad y pruebas colorimtricas de los a.a.

Segundo tubo con a.a.

Tercer tubo con a.a.

Primer tubo con a.a.

Observar los cambios

Aadir a la solucin 0,5

A 1ml solucin acuosa

henry.cambizaca1903@ucuenca.ec; nelly.lazov@ucuenca.ec; galo.pinos0210@ucuenca.ec;

Tabla 2.Resultados de las pruebas colorimtricas de los aminocidos.

SOLUBILIDAD DE LOS AMINOCIDOS

Tabla 3.Resultados de las pruebas colorimtricas del Triptfano.

Tabla 4 .Resultados de solubilidad de los aminocido.

Fig1 .Reaccin Xantoproteica

Fig2. Reaccin de Milln

Fig4. Reaccin de Pauly

Fig3. Reaccin de Erlich

Fig5. Reaccin del triptfano

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