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TECNOLGICO DE MONTERREY

CAMPUS MORELIA
Laboratorio e Microbiologa.

Practica #1
Preparacin y esterilizacin de materiales del
laboratorio.
Por

Jessica Michelle Mndez Beltrn


Anayantzin Torres Morales
Carlos Pineda Bernal

M.C. Luis Jos Flores lvarez.

Morelia, Michoacn, 24 de agosto de 2015.

Introduccin.

El objetivo de esta prctica que el estudiante conozca los materiales del laboratorio de
microbiologa, distinga los procedimientos para preparar, limpiar y esterilizar el material que
requiera y su rea de trabajo, as como el fundamento de la tcnica de esterilizacin.
En el trabajo del laboratorio de Microbiologa tienen importantsima aplicacin los procedimientos,
tcnicas y productos que suprimen o disminuyen la vitalidad de los microorganismos patgenos.
La preparacin del material del laboratorio se inicia desde el momento en que se colectan
recipientes o utensilios que contienen sustancias de un estudio ya realizado o los materiales que se
requieren para llevarlo a cabo, estos debern esterilizarse y lavarse; posteriormente se secan, se
tapan y se envuelven adecuadamente para ser esterilizados en el horno o autoclave.
En Microbiologa la esterilizacin se define como el proceso mediante el cual se eliminan todos los
microorganismos (incluyendo formas de resistencia) de un objeto, medio o superficie y su
aplicacin garantiza la ausencia de microorganismos en el material y medios de cultivo a ser
empleados. Existen diversos mtodos de esterilizacin, entre ellos: calor (seco o hmedo),
filtracin (para sustancias termolbiles y aire), radiaciones y aplicacin de gas de xido de etileno
(para jeringas y cajas de plstico).
Existen diferentes mtodos para la esterilizacin del material como son:
Mtodos fsicos
Los mtodos fsicos se realizan a travs de la utilizacin de calor hmedo, seco o radiacin,
destruyen todas las formas de vida microbiana, incluyendo las esporas, el mtodo ms utilizado es
el de vapor a presin.
1. Vapor a presin-calor hmedo.
2. Aire caliente-calor seco.
3. Radiacin ionizante.
Mtodos qumicos
1.
2.
3.
4.

Gas xido de etileno.


Gas y solucin de formaldehdo.
Plasma/vapor perxido de hidrgeno.
Ozono.

Objetivo.

Conocer los materiales del laboratorio de microbiologa, distinguir los procedimientos para preparar,
limpiar y esterilizar el material que requiera y su rea de trabajo, as como el fundamento de la
tcnica de esterilizacin.


o
o
o
o

Material.

7 tubos de cultivo de 16 x 150 mm con


tapn de rosca
3 tubos de cultivo de 16 x 150 mm sin
tapn de rosca
3 pipetas de 1 o 2 ml
3 pipetas de 10 ml

o
o
o
o
o
o

1 pipeta Pasteur
3 matraces Erlenmeyer de 250 ml
1 autoclave
1 horno de calor seco
Algodn y gasa
Papel manila o estraza para envolver

Actividad.

o
Realizacin
de
o
asepsia del rea
de trabajo.

Limpieza,
preparacin y
envoltura de la
cristalera para
utilizarla.

Presentacin de
los utensilios para
el manejo directo
de los
microorganismos.

Envolver pipetas.

Elaborar tapones
para tubos y
matraces.

o
Etiquetar
el
o
material.

o
o

Esterilizar el
material en la
Introduzca
el material
a
forma
lo
o en que
esterilizar
en
el
autoclave.
indique el
instructor.

Mantener el equipo en
estas condiciones durante
15 minutos.

o
o
o
o
oRevisar que el nivel de
Dejar que el equipo se
caliente hasta alcanzar los
oagua coincida con la
121 C o 15 lb de presin
o marca en el tubo
revisando continuamente
indicador.
la escala del manmetro.
o
o
o
Desarrollo de la prctica.
Cerrar la puerta, apretar
o
las manijas de dos en dos

Conectar el autoclave y
poner la perilla de control
en calentamiento alto.

en posicin encontrada,
abra la vlvula y esperar a
que salga el are con el
vapor de agua que se
produce.

Apagar el autoclave y
dejar que baje la presin a
0. Abrir la vlvula de
seguridad y con la ayuda
de guantes de asbesto o
una franela hmeda abrir
cuidadosamente la puerta.

o
o
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o
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o
o
o
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o
o
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o
o
o
o
o
Resultados.
o Cuestionario:
1. Qu es la esterilizacin?
o

La esterilizacin es la muerte y/ o eliminacin de todo microorganismo. No existen grados de


esterilidad, un objeto es estril o no lo es.
2. Qu tipo de esterilizacin utiliz para el material de cristalera?

Se utiliz un mtodo fsico por medio de calor, en especfico calor hmedo.


3. Cul es el fundamento de la esterilizacin por calor seco?

Deshidrata las bacterias, virus, etc. y facilita la coagulacin o desnaturalizacin de las


protenas
4. Cul es el fundamento de la esterilizacin por calor hmedo?

Coagulacin de protenas (desnaturalizacin), lo que es causado por la rotura de los puentes


de hidrgeno que son los que mantienen a las protenas en su forma tridimensional,
5. Cul es la temperatura, presin y tiempo para la esterilizacin en autoclave?

A los 121C con una presin de 15 lb durante un tiempo de 15 minutos.


6. Cul es ms eficaz como agente esterilizante, el calor seco o el calor hmedo?, por
qu?

Dependiendo del material que se quiera esterilizar, en nuestro caso al solo esterilizar material
de vidrio o cristalera lo mejor es el calor hmedo debido a que tiene un rpido calentamiento y
penetracin, destruye bacterias y esporas en corto tiempo, no deja residuos txicos y es ms
econmico que el calor seco.
7. Cul es el dimetro del poro en los filtros de steres de celulosa utilizados para esterilizar
por filtracin? Y Cunto mide una bacteria de las ms pequeas que se conocen?

El poro de los filtros bacteriolgicos comunes es de 0,22 micrmetros para esterilizar lquidos y
de 0,45 micrmetros para retener bacterias.
8. Defina desinfeccin y asepsia

Desinfeccin: Tcnica de saneamiento que tiene por objeto destruir los microorganismos
patgenos, productores de enfermedades transmisibles, actuando sobre el ambiente y
superficies de locales, objetos y excretas que son portadores de aqullos, evitando as su
propagacin

Asepsia: Conjunto de procedimientos que tienen por objeto impedir la penetracin de


grmenes en el sitio que no los contenga.
9. Cul es el mtodo ms apropiado para esterilizar el siguiente material?

o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o

MATERIAL
Solucin de vitaminas
Cajas de Petri de plstico de desecho
Aceite mineral
Sangre para transfusin
Ropa contaminada
Cajas de Petri de plstico limpias
Talco
Instrumental de ciruga
Sangre de desecho
Cadveres de animales de experimentacin de
laboratorio

o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o

MTODO
Horno de aire caliente
Horno de aire caliente
Vapor a presin
Horno de aire caliente
Calor seco
Vapor a presin
Por vapor

o
o
o

Fig. 1: Material forrado con papel manila.


Fig. 2: Autoclave utilizada.

o
o
5

o
o
o
o
o

Referencias.

Departamento de Qumica Biolgica. (2014). Esterilizacin > Generalidades. Agosto 23,


2015,
de
Universidad
de
Buenos
Aires
Sitio
web:
http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/Seminarioesterilizacion.htm
Garcs, A.. (2008). PREPARACIN DEL MATERIAL DE VIDRIO DE USO EN EL
LABORATORIO. Agosto 23, 2015, de Universidad Central de Venezuela Sitio web:
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_Prep_de_mate
rial_de_vidrio.pdf
Grupo Cosmos. (2013). Informacin Tcnica y Comercial del Filtro bacterial. Agosto 23,
2015, de Cosmos Sitio web: http://www.cosmos.com.mx/wiki/fv11/filtro-bacterial
Lpez, L. & Torres, C.. (2006). Preparacin del material para el trabajo en Microbiologa
Limpieza y Esterilizacin. Agosto 22, 2015, de Universidad Nacional del Nordeste Sitio
web: http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/tp3.pdf
Rivas, R.. (2013). ASEPSIA Y ANTISEPSIA EN ENDODONCIA. Agosto 23, 2015, de
UNAM
Sitio
web:
http://www.iztacala.unam.mx/rrivas/NOTAS/Notas13Microbiologia/aseconceptos.html