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MICROBIOLOGIA AMBIENTAL

Metabolismo
Microbiano

Profa. Dra. Vanessa Becker


Engenharia Ambiental
vbecker@ct.ufrn.br

Microbiologia Ambiental

Metabolismo Microbiano
METABOLISMO:

grego: metabole = mudana, transformao


Toda a atividade qumica realizada pelos
organismos
So de dois tipos gerais:
- Aquelas que envolvem a liberao de energia:
CATABOLISMO via degradativa
- Aquelas envolvidas na utilizao da energia:
ANABOLISMO via biossntese

Microbiologia Ambiental

Metabolismo Microbiano
Uma clula viva requer energia:
Sntese dos componentes celulares: parede celular,
membrana, etc..;
Sntese
de
enzimas,
cidos
nuclicos,
polissacardeos,
fosfolipdios
entre
outros
componentes qumicos da clula;
Reparos e manuteno da clula;
Crescimento e multiplicao;
Acumulao de nutrientes e excreo de produtos
indesejveis;
Motilidade

Microbiologia Ambiental

Metabolismo Microbiano
Requerimentos de energia:

Componente
s celulares:
parede,
membrana,
etc.

Sntese de
enzimas,
cidos
nuclicos,
polissacardeos,
fosfolipdios,
etc.

Reparos e
manuteno
da clula

Crescimento e
multiplicao

Acumulao
de
nutrientes e
excreo de
produtos
indesejveis

Mobilidade

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Metabolismo Microbiano
Tipos de energia:
Energia qumica
energia contida em ligaes qumicas
das molculas (proveniente da quebra
de nutrientes)

Energia radiante (energia da luz)


deve ser convertida em energia

qumica

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Metabolismo Microbiano
Tipos de energia:
OBS: a energia trmica no pode ser utilizada pelos
seres vivos;
mas uma certa quantidade desta energia
necessria para que as reaes qumicas ocorram
numa velocidade suficientemente rpida para a
manuteno da vida

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Metabolismo Microbiano
Transferncia de energia:

Reaes exergnicas libera energia associadas a


degradao de nutrientes ou substratos qumicos;
Reaes endergnicas necessita energia
associadas sntese de constituintes celulares;
Nos seres vivos
as reaes exergnicas fornecem a energia
necessria para as reaes endergnicas

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Metabolismo Microbiano
Quebra de substratos
ou nutrientes quebra
da estrutura de
molculas

Sntese de compostos
e estruturas celulares

Libera energia
Reaes exergnicas

Via degradativa

Produtos da degradao
servem como unidades
bsicas para a produo de
compostos celulares

utiliza energia
Reaes energnicas

Via biossntese

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Metabolismo Microbiano

Reao
exergnica
libera energia

Parte da
energia
armazenada em
um composto
de
transferncia
de energia

Os compostos
de
transferncia
de energia
doam a energia
para uma
reao
endergnica

+ importante
ATP
adenosina trifosfato

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Metabolismo Microbiano
ATP adenosina trifosfato

O ATP formado pela adio de um grupamento fosfato a


adenosina difosfato (ADP) que tem s dois grupos de fosfato
ENERGIA
ADP + Fosfato

ATP + gua

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Compostos ricos em energia: armazenamento e
transferncia de energia (a longo prazo)
Procariotos:
Glicogenio
Poli--hidroxibutirato
Poli-idroxialcanoatos
S (elementar)
Eucariotos
Poliglicose na forma de amido
Lipdeos na forma de gorduras

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Enzima
Catalisadores das reaes
Aumentam as velocidades de reao de 108 a 1020
vezes
So formadas por cadeias longas de aminocidos
Portanto um tipo de protena com atividade cataltica
Tem stios ativos de ligao do substrato
Podem conter outras molculas acopladas
funo: viabilizar a atividade da clula, quebrando
molculas ou juntando-as para formar novos
compostos

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Metabolismo Microbiano

Enzima
Coenzimas e grupos prosticos facilitam a ao da enzima.

Grupos prostticos - Algumas enzimas contm uma


parte no protica que pode operar como aceptor de
eltrons.
FAD (Flavina Adenina Dinucleotdeo)- participa de
reaes de oxi-reduo

Coenzimas derivadas de vitaminas (NAD+/NADH)


NAD (Nicotinamida Adenina Dinucleotdeo)

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Metabolismo Microbiano

Enzima
Coenzimas e grupos prosticos facilitam a ao da enzima.

NAD FAD: Trata-se de uma substncia capaz de receber


hidrognio, isto , funciona no metabolismo como um

aceptor de hidrognios, os quais so posteriormente


transferidos a outras substncias (dependendo da etapa do
metabolismo envolvida), em reaes que liberam energia.
INTERMEDIADORES PARA GERAR ENERGIA (ATP)

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Metabolismo Microbiano

Enzima
Terminao ase ao seu substrato
Celulase: degradam celulose
Glicose-oxidase: catalisa a oxidao da glicose
Ribonuclease: decompe acido ribonucleico
Lisozima: cliva o peptideoglicano

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Enzima-substrato

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Metabolismo Microbiano
Produo de ATP pelos microorganismos
Lembrando:
Reao Oxidao: perda de eltrons (ou tomo de H)
Reao Reduo: ganho de eltrons (ou tomos de H)
Em cada reao um par de substncia est envolvida, uma na forma
Oxidada, outra na forma reduzida
Sistema de oxidao-reduo
Ex. oxidao
H H+ + eFe++ Fe+++ + e-

Ex. reduo
Fe++++ e- Fe++

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Metabolismo Microbiano
Vias metablicas de produo de energia
Vias Catablicas
Gliclise
Regenerao do NAD+
Fermentao
Respirao:
aerbia
anaerbia

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Metabolismo Microbiano
Produo de ATP pelos microorganismos
A energia gerada pela fosforilao do ADP
(ADP + P = ATP)
Fosforilao em nvel de substrato
Fosforilao oxidativa 3 fase da respirao
celular
Fotofosforilao

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Metabolismo Microbiano
Produo de ATP pelos microorganismos

Fosforilao em nvel de
substrato
A energia liberada na
oxidao
de
compostos
qumicos removida e
adicionada ao ADP
Ligaes de fosfato de alta
energia e essa energia
transferida diretamente ao
ADP para produzir ATP
(Madigan et al., 2004)

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Metabolismo Microbiano
Gliclise
Degradao anaerbica da glicose a cido pirvico
por uma sequncia de reaes catalizadas
enzimaticamente (tambm chamada de via EmbdenMeyerhoff )

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Co-enzima NAD - nicotinamida
adenina dinucleotideo

Gliclise

NAD- utilizada para oxidar a


mol gliceraldedo -3-fosfato

quantidade limitada na clula

carbono
H necessidade
de regenerar o
NAD para que a
gliclise
continue
2 pares
Fosforilao em nivel de substrato

Consumidos 2 ATP
Liberados 4 ATP
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Gliclise

Enterobactrias

Lactobacilos

Leveduras

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Metabolismo Microbiano
Regenerao do NAD

Atravs de 2 mtodos

Fermentao
Respirao:
aerbica
anaerbica

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Metabolismo
Metabolismo Microbiano
Microbiano
2 mol ATP

Co-enzima NAD - nicotinamida


Regenerao
do
NAD
Regenerao do NAD Fermentao adenina dinucleotideo

O NAD regenerado utilizando um aceptor produzido pela prpria


clula
Ex. Streptococcus lactis utiliza diretamente o cido pirvico (produto final da
gliclise) como o aceptor de eltrons

Fermentao

Lactobacilos

Enterobactrias
Leveduras

Microbiologia Ambiental

Metabolismo
Metabolismo Microbiano
Microbiano
2 mol ATP

Co-enzima NAD - nicotinamida


Regenerao
do
NAD
Regenerao do NAD Fermentao adenina dinucleotideo

O NAD regenerado utilizando um aceptor produzido pela prpria


clula
Ex. leveduras realizam fermentao alcolica
Crescem em meio contendo glicose sob cond. anaerbicas aps a prd.
do c. Pirvico (produto Gliclise) removem CO2 e formam acetaldedo
Acetaldeido oxida NADH2 proveniente da gliclise e reduzido a etanol,
regenerando o NAD

Fermentao

Lactobacilos
Enterobactrias
Leveduras

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Metabolismo Microbiano
Regenerao do NAD

Este o processo bsico na indstria de produo de bebidas alcolicas

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Metabolismo Microbiano
Fermentao

Ausncia de O2
Reaes de oxidao e reduo de um composto
orgnico
Baixo potencial de energia (processo pouco eficiente)
Ocorre fosforilao em nvel de substrato

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Metabolismo Microbiano
Fermentao
Espcie microbiana

Principal produto da fermentao

Acetivibrio cellulolyticus

cido actico

Actinomyces bovis

cidos actico, frmico, lctico, etc.

Clostridium
acetobutylicum

Acetona, butanol, etanol, cido frmico, etc.

Enterobacter aerogenes

Etanol, cido frmico, CO2, etc.

Escherichia coli

Etanol, cidos lctico, actico, frmico, succnico, etc.

Lactobacillus brevis

Etanol, glicerol, CO2, cidos lctico, actico, etc.

Streptococcus lactis

cido lctico

Succinimonas
amylolytica

cidos actico e succnico

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Metabolismo Microbiano
Respirao

Processo de regenerao do NAD onde o NADH2 o


doador de e- para o sistema de transporte de eSe o O2 o aceptor final de e-, ento respirao
aerbica
Se outra molcula (NO3-, SO4--) for o aceptor final de
e-, ento respirao anaerbica
Vantagem sobre a fermentao: alm da regenerao
de NAD h produo de fora proton-motiva para
sntese adicional de ATP
Processo mais eficiente na prod. de energia

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Respirao aerbica
O ciclo de Krebs (ciclo do cido ctrico)
Gliclise por organismos aerbios normalmente no pra com a produo do
cido prvico
a oxidao do ac.pirvico pelo NAD em acetil-CoA resulta em NADH2, que vai
servir de doador de e-

Cada molcula de NADH pode doar eltrons para o sistema de transporte para
gerao da fora proton-motiva e gerao de ATP.

gliclise

cido
pirvico

glicose

ADP

O2
H20

ATP

ATP
NAD
Sistema de
transporte
de e-

NADH2

quebra posterior

Respirao aerbica

O ciclo de Krebs
(ciclo do cido ctrico)
Cada molcula de NADH pode doar eltrons
para o sistema de transporte para gerao
da fora protomotiva e gerao de ATP.

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Metabolismo Microbiano

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Metabolismo Microbiano
Produo de ATP pelos microorganismos
Fosforilao oxidativa
Sistema de transporte de letrons
sistema O/R:
doador (O/R)1 (O/R)2 (O/R)3 (O/R)4 aceptor

Energia liberada para a sntese de ATP

Este composto reduzido


pode ser um nutriente que foi absorvido
pela clula ou um componente resultante
da quebra de um nutriente
Ex. cido lctico cido pirvico + 2H+ + 2e-

Microbiologia Ambiental

Metabolismo Microbiano
Produo de ATP pelos microorganismos
Fosforilao oxidativa
Sistema de transporte de letrons
sistema O/R:
doador (O/R)1 (O/R)2 (O/R)3 (O/R)4 aceptor

Energia liberada para a sntese de ATP


Os eltrons provenientes de um doador so
removidos pelo sistema O/R inicial este
oxidado pelo prximo sistema e assim
sucessivamente....

Microbiologia Ambiental

Metabolismo Microbiano
Produo de ATP pelos microorganismos
Fosforilao oxidativa
Sistema de transporte de letrons
sistema O/R:
doador (O/R)1 (O/R)2 (O/R)3 (O/R)4 aceptor

Energia liberada para a sntese de ATP

Finalmente os e- so transferidos ao
aceptor final de e- composto obtido do
ambiente em que a clula est presente
Aerbios: utilizam o oxignio reduz em gua
Anaerbios: nitrato, sulfato ou c. fumrico

Microbiologia Ambiental

Metabolismo Microbiano
Produo de ATP pelos microorganismos
Fosforilao oxidativa
A operao contnua do sistema de
transporte de eltrons resulta em um
acmulo de prtons em um lado da
membrana (externo) e dficit de
prtons no lado interno da membrana.

BACTRIAS sistema est localizado na membrana citoplasmtica


EUCARIOTAS na membrana interna da mitocndria

Microbiologia Ambiental

Metabolismo Microbiano
Produo de ATP pelos microorganismos
Fosforilao oxidativa
Distribuio desigual de prtons FORA PROTON-MOTIVA

Energia potencial
Existem canais especficos na membrana que permitem o
retorno dos prtons
O fluxo de prtons por meio destes canais uma estratgia
utilizada pela cl. para fazer o trabalho de fosforilizao do
ADP para produzir ATP

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Metabolismo Microbiano
Produo de ATP pelos microorganismos
Fosforilao oxidativa

Cada par de
H+ ativa
enzima
ATPase

Cada par de H ativa ATPase


A enzima cataliza a reao do ADP+P

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Metabolismo Microbiano

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Microbiologia Ambiental

Metabolismo Microbiano
Produo de ATP pelos microorganismos

Fotofosforilao
Luz como fonte de energia
Luz produz fora proton-motiva
Fora proton-motiva promove sntese de ATP
Onde faz e quem faz:
Cianobactrias, algas, plantas verdes (fototrficos)
Nos tilacides no citoplasma ou nos cloroplastos, devido
a presena de clorofila

Microbiologia Ambiental

Metabolismo Microbiano
Produo de ATP pelos microorganismos

Fotofosforilao

Alm de fotofosforilao tambm fixam CO2


Reduzem CO2 a carboidrato (CH2O)x

Este processo requer 2 componentes:

ADP (fonte de energia)

NADPH2 (forma reduzida da co-enzima nicotinamida adenina


dinucleotideo fosfato (NADP) para a fixao do CO2)

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Metabolismo Microbiano
BIOSSNTESE

Energia para sntese de compostos celulares:


cidos nuclicos (DNA, RNA), substncias
nitrogenadas
(aa,
enzimas,
protenas),
carboidratos (peptidoglicano), lipdeos, etc.

ATP para processos como diviso celular,


mobilidade, transporte ativo de nutrientes, etc.

Microbiologia Ambiental

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Metabolismo Microbiano
Utilizao de enrgia

Microbiologia Ambiental

Metabolismo Microbiano
Biossntese de compostos nitrogenados
Ativao qumica dos aminocidos via juno com ATP
(gera AMP + pirofosfato)
Inibio por feedback
Protenas sintetizadas atravs do cdigo gentico
Sntese de RNA pr-requisito para a sntese de protenas

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Metabolismo Microbiano
Biossntese de compostos nitrogenados

N inorgnico (NH3+)

N2
Aminocidos

Arranjo de aminocidos

Protenas/enzimas

Purinas e pirimidinas

Nucleotdeos
cidos nuclicos (DNA, RNA)

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Metabolismo Microbiano
Fornecimento de precursores de aminocidos

(Madigan et al., 2004)

Microbiologia Ambiental

Metabolismo Microbiano
Biossntese de Carboidratos
CO2

Triose

Pentoses e hexoses

Nucleotdeos

Polissacardeos
(peptidoglicano,
celulose, amido, etc.)

RNA e DNA

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Metabolismo Microbiano
Outras funes da energia

Transporte
Motilidade
Reparos
Produo de estruturas de resistncia (endosporos)

Microbiologia Ambiental

OPCIONAL: Trabalho
Em dupla esquema (sobre a Gliclise,
Ciclo de Krebs e fosforilao oxidativa)
Escolher 2 etapas