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EXTRACCIN E IDENTIFICACIN DE COLESTEROL DE LA YEMA DEL HUEVO

2014

FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y MATEMTICAS


ESCUELA PROFESIONAL DE QUMICA
LABORATORIO DE QUIMICA ORGANICA IV

ESTEROIDES
EXTRACCIN E IDENTIFICACIN DE
COLESTEROL DE LA YEMA DEL HUEVO
INFORME DE LABORATORIO N 3
PROFESOR: Roberto Martnez
ALUMNOS:
Alviar Suarez Martha
Briceo Flores Eduardo
Fernndez Astete Lizeth
Pea Ayala Juan Carlos
Pea Fernndez Juana Mara
GRUPO: Sbados
HORA: 15 h 30 min 17 h 10 min

2014-09-27
1

EXTRACCIN E IDENTIFICACIN DE COLESTEROL DE LA YEMA DEL HUEVO

2014

NDICE

OBJETIVOS

INTRODUCCION

MARCO TERICO

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

15

RESULTADOS

19

DISCUSIN

22

CONCLUSIONES

23

CUESTIONARIO

24

BIBLIOGRAFA

29

ANEXOS

30

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OBJETIVOS

Extraer esteroide como: el colesterol de la yema del huevo a partir de una serie de
procedimientos y reacciones.

Aislar e identificar el colesterol a partir de la yema del huevo.

Conocer en que se basa la identificacin de colesterol por el reactivo de


Liebermann-Burchard

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INTRODUCCIN
Lpidos son aquellas sustancias orgnicas extrables de tejidos animales o vegetales, por
medio de solventes orgnicos como ter, cloroformo; tetracloruro de carbono, benceno, etc.
Los lpidos extrados de material biolgico representan una gran variedad de molculas,
estructuralmente diferentes, pero que comparten la propiedad de ser solubles en solventes
orgnicos, llamados por eso, solventes de las grasas. Entre los lpidos existen molculas no
polares, como los triacilglicerol, o triglicridos, y molculas polares como los
fosfogliceridos, o fosfolipidos, y los esfingolipidos, y molculas de tipo terpenoide los
esteroides, los terpenos y algunas vitaminas.
En el reino animal, el esteroide ms abundante es el colesterol. El colesterol no se precipita
del ter por la acetona, y como es insaponificable, puede extraerse con ter, despus del
tratamiento con hidrxido de potasio. El colesterol, generalmente, cristaliza como placas
rmbicas blancas. No tiene olor ni sabor. Si se expone a la luz y al aire, se oxida
lentamente, formando una mezcla de productos que bajan su punto de fusin y cambian sus
reacciones de solubilidad.
Es insoluble en agua, cidos, y lcalis. Sus principales propiedades qumicas se relacionan
con su grupo hidroxilo secundario y su doble ligadura.
La demostracin de la presencia del colesterol se hace por medio de la reaccin de
Libermann-Burchard, que es especfica para esteroles con instauracin en los anillos A, B o
C. Esta prueba se realizo en el laboratorio identificando esteroides en el aceite, cebo de
vaca, cebo de cerdo.
En el presente laboratorio tambin se realizo la identificacin de colesterol en el huevo, esta
prueba se realiza en etanol-ter 2:1 (en el laboratorio se realizo con etanol y cloroformo),
esta prueba adems nos ayuda a extraer lectinas que queda en los solventes orgnicos,
mientras el colesterol queda junto a sustancias de menor concentracin.

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MARCO TERICO
1. LPIDOS
Los lpidos son biomolculas orgnicas formadas bsicamente por carbono e hidrgeno y
generalmente tambin oxgeno; pero en porcentajes mucho ms bajos. Adems pueden
contener tambin fsforo, nitrgeno y azufre. (1)
establecer una definicin desde el punto de vista qumico, en el caso de los lpidos esta
tarea entraa una mayor dificultad, ya que constituyen un grupo de sustancias
qumicamente muy heterogneo que no se caracteriza, como otras biomolculas, por la
posesin de un determinado conjunto de grupos funcionales. Por ello, resulta mucho ms
conveniente identificarlos sobre la base de una de sus propiedades fsicas: su mayor o
menor solubilidad en distintos tipos de disolventes. As, se considera que los lpidos son un
grupo de biomolculas que se caracterizan por ser poco o nada solubles en agua y, por el
contrario, muy solubles en disolventes orgnicos no polares. Los lpidos desempean en las
clulas vivas una gran variedad de funciones, entre las que destacan las de carcter
energtico y estructural. (2)
Dada la naturaleza de estas estructuras se pueden dar las siguientes clasificarlas:

Figura 1: clasificacin de los lpidos segn su constitucin. (4)


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Figura 2: clasificacin segn sus propiedades fsicas. (3)

Podemos entonces definir algunos de estos:


1.1. Ceras:
Son esteres de los cidos grasos con alcoholes monohidroxlicos de cadena larga (16 a 30
tomos de carbono), que tambin se denominan alcoholes grasos. El ster formado por el
cido palmtico (16 C) y el triacontanol (alcohol graso de 30 C) es el componente principal
de la cera que fabrican las abejas. Al igual que los triacilglicridos, los cridos son
sustancias netamente hidrofobicas y por lo tanto insolubles en agua. Algunas especies
secretan ceras para proteger el pelo y la piel mantenindolos flexibles, lubricados e
impermeables; los pjaros, especialmente las aves acuticas, secretan ceras gracias a las
cuales sus plumas pueden repeler el agua; en muchas plantas, sobre todo las que viven en
ambientes secos, las hojas y los frutos estn protegidas contra la excesiva evaporacin de
agua por pelculas creas que les dan adems un aspecto brillante caracterstico. Por otra
parte, algunos microorganismos utilizan cridos como material de reserva energtica. Las
ceras naturales tienen diversas aplicaciones en las industrias farmacutica y cosmtica. (2)
Las ceras son lpidos saponificables, formados por la esterificacin de un cido graso y un
monoalcohol de cadena larga. (5)
6

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Figura 3: reaccin de esterificacin para obtencin de ceras. (5)

1.2. Fosfolpidos:
Los fosfoglicridos (FFGs) son componentes esenciales de las membranas biolgicas. Se
trata tambin de steres del glicerol, pero slo poseen dos grupos acilo unidos a los tomos
de oxgeno de los carbonos 1 y 2 del glicerol, mientras que el tercer hidroxilo est
esterificado con el cido fosfrico, el cual a su vez se encuentra unido a un resto X de
distinta naturaleza, resto que da nombre al FFG. (5)

Figura 4.Observacin: Se caracterizan por presentar un cido ortofosfrico en su zona polar.


Son las molculas ms abundantes de la membrana citoplasmtica. (1)

1.3. Glucolpidos:
Estos lpidos contienen, a semejanza de los fosfoesfingolpidos, la molcula base de
ceramida y conforman conjuntamente un grupo denominado esfingolpidos, sin embargo
carecen de grupo fosfato y su grupo polar est formada por una o varias unidades de
monosacridos (de 1 a 6), que pueden ser D-glucosa, D-galactosa o derivados como N7

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acetil-D-galactosamina, unidas por enlace glicosdico al grupo hidroxilo del carbono 1 de la


esfingosina.(6) Se encuentran formando parte de las bicapas lipdicas de las membranas de
todas las clulas, especialmente de las neuronas. Se sitan en la cara externa de la
membrana celular, en donde realizan una funcin de relacin celular, siendo receptores de
molculas externas que darn lugar a respuestas celulares. (1)
Glicridos: Son lpidos simples formados por la esterificacin de una, dos o tres molculas
de cidos grasos con una molcula de glicerina. Tambin reciben el nombre de glicridos o
grasas simples.(1) Estn formados por glicerol (propanotriol) unido mediante enlaces de tipo
ster a una molcula de cido graso, dando los monoacilgliceroles, (monoacilglicridos) a
dos molculas de cidos grasos, los diacilgliceroles (diacilglicridos) o a tres molculas de
cidos grasos, los triacilgliceroles (triacilglicridos). Constituyen el lpido de reserva
energtica preferente, y de los tres grupos los triacilgliceroles forman prcticamente el 99
% de los lpidos almacenados. (6)

Figura 5.
1.4. Terpenos:
Son un grupo de lpidos que no contienen cidos grasos y son por lo tanto no
saponificables. Estn formados por la polimerizacin de un hidrocarburo de 5 tomos de
carbono llamado isopreno (2-metil-1,3-butadieno) (ver Figura 6). Los terpenos existentes
en la naturaleza contienen un nmero variable de unidades de isopreno polimerizadas.
Generalmente la "cabeza" de cada unidad de isopreno est unida con la "cola" de la

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siguiente. Debido a su naturaleza hidrocarbonada son sustancias netamente hidrofbicas y


por lo tanto insolubles en agua. Son especialmente abundantes en el mundo vegetal.
Gracias a que presentan un sistema de dobles enlaces conjugados tienen la propiedad de
absorber luz de diferentes longitudes de onda, por lo que pueden actuar como pigmentos;
as, algunos terpenos como los carotenos y xantofilas son los responsables de la coloracin
caracterstica de muchos frutos, y el fitol, un alcohol terpenoide, forma parte de la clorofila,
el pigmento vegetal por excelencia. Muchos aromas de origen vegetal, como el alcanfor, el
mentol y el geraniol son de naturaleza terpenoide, como tambin lo son algunos productos
vegetales de inters econmico como el caucho. La vitamina A, que deriva biolgicamente
de los carotenos, tambin es un terpeno.(2)

Figura 6.Isopreno

1.5. Prostaglandinas:
Son una clase especial de cidos grasos insaturados. Son hormonas locales sintetizadas en
el mismo lugar donde ejercen su accin a partir de los lpidos de las membranas. Son
vasodilatadores arteriales relacionados con inflamaciones. Provocan agregamiento
plaquetario e intervienen en la contraccin de la musculatura lisa.

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2. ESTEROIDES
Los esteroides son un grupo de lpidos de estructura compleja que tampoco contienen
cidos grasos y por lo tanto tambin son no saponificables. Estn relacionados
estructuralmente

con

el

hidrocarburo

tetracclico

denominado

ciclopentanoperhidrofenantreno (Figura 7). Biolgicamente estn relacionados con los


terpenos, de los cuales derivan. Los diferentes esteroides se diferencian en la naturaleza y
posicin de diversos grupos funcionales, dobles enlaces y cadenas alifticas lineales o
ramificadas aadidas al anillo del ciclopentanoperhidrofenantreno. (2)

Figura 7: ciclopentanoperhidrofenantreno, con


17 tomos de carbono que forman 4 anillos. (6)

Segn su estructura qumica y tambin por sus funciones dentro del organismo se clasifican
en:
a) Hormonas sexuales como la testosterona (hormona sexual masculina), el estradiol
(hormona sexual femenina), y la progesterona (hormona progestgena). (2)
b) Hormonas adrenocorticales como la aldosterona y el cortisol, que regulan diferentes
aspectos del 12 metabolismo. (2)

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c) cidos biliares, principales componentes de la bilis, cuya funcin es emulsionar las


grasas en el intestino delgado para facilitar la accin de las lipasas. (2)
d) Vitamina D, que regula el metabolismo del fsforo y del calcio. (2)
Entre los esteroides se encuentran los esteroles, que poseen un grupo hidroxilo en el
carbono 3; son los ms abundantes e incluyen muchas molculas de inters biolgico entre
las que destaca el colesterol (Figura 8). El colesterol desempea importantes funciones
biolgicas en las clulas animales. En primer lugar, gracias a su moderado carcter
anfiptico, es un componente esencial de las membranas celulares, a las que proporciona
fluidez intercalndose entre los dems lpidos de membrana para impedir que se agreguen y
"solidifiquen". En segundo lugar, el colesterol acta como precursor de un amplio grupo de
sustancias con actividades biolgicas importantes. (3)

Figura 8: estructura del colesterol.

3. COLESTEROL
El colesterol es una sustancia similar a la grasa e indispensable para la vida. Se encuentra
en las membranas celulares de nuestros organismos, desde el sistema a nervioso al hgado y

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al corazn. El cuerpo necesita colesterol para fabricar hormonas, cidos biliares, vitamina
D, y otras sustancias. (7)
Sntesis biolgica del colesterol
El colesterol desde un punto de vista simplificado es un polmero de Acetil CoA, por tanto
su sntesis de colesterol tendr dos fases importantes:
1. Fase anaerobia. Polimerizacin anaerobia de Acetil CoA. Se llevar a cabo hasta llegar a
una estructura de 30 carbonos: el escualeno.
2. Fase aerobia. Ciclacin y transformacin del escualeno en colesterol. Requiere oxgeno.
Fase anaerobia
La sntesis comienza en el citosol con Acetil CoA, que procede tanto de hidratos de
carbono, como de lpidos y protenas. El objetivo de esta fase es, partiendo de Acetil CoA,
dar lugar a Escualeno
1. Se unen dos molculas de Acetil CoA para dar lugar a Acetoacetil CoA, reaccin que
libera una CoASH. La enzima que cataliza esta reaccin es la -cetotiolasa.
2. Se incorpora al Acetoacetil CoA otra molcula de Acetil CoA para dar lugar a
hidroximetilglutaril CoA, lo que libera una CoASH. La enzima encargada de la sntesis es
la HMG CoA-sintasa. Hasta este paso la sntesis de colesterol coincide con la sntesis de
cuerpos cetnicos, y se produce en el citosol (a diferencia de la sntesis de cuerpos
cetnicos que era mitocondrial).
3. A la HMG CoA se le reduce su grupo carboxilo unido a la CoA, liberndose esta, y
quedando reducido este grupo carboxilo a un grupo alcohol. El producto de esta reaccin es
el Mevalonato un importante intermediario de la sntesis de colesterol, y la enzima es la
HMG CoA reductasa. Esto gasta 2 molculas de poder reductor en forma de NADPH+H+.
4. Se activa el mevalonato mediante tres reacciones sucesivas de fosforilacin, lo que gasta
3 ATP. Esta reaccin da lugar a 3-fosfo-5-pirofosfomevalonato y transcurre gracias a
quinasas sucesivas.
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5. El 3-fosfo-5-pirofosfomevalonato se descarboxila perdiendo un fosfato para dar lugar al


isopentenil-pirofosfato, lo cual es catalizado por la pirofosfomevalonato carboxilasa.
6. El isopentenil-pirofosfato se isomeriza gracias a una isomerasa especfica para dar lugar
al 3,3-Dimetilalil pirofosfato.
7. Una molcula de isopentenil-pirofosfato y 3,3-Dimetalil pirofosfato se combinan para
dar una molcula de 10C llamado Geranil pirofosfato
8. Al Geranil pirofosfato se le une una molcula de isopentenil hasta dar lugar a Farnesil
pirofosfato
9. El Farnesil pirofosfato se dimeriza hasta dar lugar al Escualeno.
El escualeno es una molcula abierta, cuyos enlaces simples tienen capacidad giratoria
similar al colesterol, pero esta estructura se debe ciclar para dar lugar a la propia molcula
de colesterol.
Fase aerobia
Tiene lugar en el retculo endoplsmico y requiere oxgeno para cerrar los ciclos del
escualeno. Consiste en la formacin del lanosterol, y posteriormente la transformacin de
este compuesto en colesterol. Estas molculas circulan unidas a una protena transportadora
ya que son enormemente insolubles. Una vez que formamos el colesterol, ste libre y en
exceso es muy perjudicial para la clula, por lo que todo el colesterol que no se utiliza se
esterifica con un cido graso activado y la enzima esterificante se denomina ACAT (Acil
CoA-Colesterol-Acil-Transferasa).(8)

4. COMPOSICIN DE LA MUESTRA (HUEVO):


Composicin nutricional de un huevo entero y con cscara de 59g (peso lquido: clara +
yema 50g). (9)

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Tabla1: datos nutricionales del huevo. (9)

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PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
1. Para la extraccin del colesterol se hizo dos ensayos se tom 3 huevos crudos que luego
se pas a su coccin en agua hervida. Para luego extraer solamente la yema y pesarlo.

Coccin del huevo

Peso de la
yema 45.5 gr

2. Luego pasamos a triturar con cuidado la yema de huevo y lo trasvasamos en baln


agregndole una mezcla de 60 ml de etanol con 20 de cloroformo y lo llevamos a
reflujo.

Se mantuvo
en reflujo por
10 min

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3. Una vez que paso los 10 minutos en reflujo lo sacamos de la cocina para enfriar y
posteriormente filtrarlo.

4. El filtrado de la extraccin lo pasamos a calentar para la evaporacin del solvente


(etanol cloroformo 3:1), hasta la sequedad.

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5. Y el residuo que quedo lo extrajimos con cloroformo y lo pasamos a filtrar.

COLESTEROL

6. Para el sembrado en la placa cromatografa, primero se prepar las placas y luego


paso activarlas en el horno por 2 h a 150 C

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7. Luego que se haya activado las placas se pas hacer la corrida en la placa
cromatografa con cloroformo y metanol 9:1.

8. Para las pruebas analticas se le agrego al colesterol extrado 2 ml de cido y 5 gotas


de H2SO4 (C) y Se observ cambios graduales rojo, azul y verde.

AZUL

ROJO

VERDE

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RESULTADOS
ESPECTRO IR:
En el espectro IR podemos observar las bandas ms importante segn el tipo de enlace que
tiene la estructura de la molcula y las vibraciones de las mismas. En el siguiente cuadro se
colocan las ms importantes:
Tabla2: bandas ms importantes del colesterol

TIPO DE ENLACE
O-H
C-H
C=C

RANGO cm-1
3600 3400
2900 - 2700
1720 - 1600

Se resalta que el doble enlace tiene una baja absorbancia, por ello solo observamos una
pequea pronunciacin en el espectro.

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ESPECTRO UV-VIS:
En el espectro UV-VIS observamos absorbancia en un rango de 240 a 290nm, Debido la
presencia del doble enlace el cual por los saltos electrnicos respectivos nos da un una
absorbancia en este rango.

ESPECTRO DE MASAS:
Podemos empezar a desfragmentar comenzando por regla del 13, luego desfragmentamos
logrando los picos obtenidos en el espectro.

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CROMATOGRAFIA CAPA FINA:


Segn el paper Development and validation of a high-performance thin layer
chromatography method for the determination of cholesterol concentration Q8 Jinu John
a,*, Ankit Reghuwanshi b, Usha K. Aravind c, C.T. Aravindakumar a,d las condiciones
cromatogrficas para la determinacion del colesterol fueron dadas de la siguiente manera.
La fase mvil [es decir, cloroformo: metanol (9,5: 0,5, v / v)] se encontr para dar un fuerte
y pico bien definido a Rf de 0,63 0,03. Mejor resolucin fue obtenido cuando la cmara
se satur durante 20 minutos con la fase mvil a una temperatura ambiente de 25 3 C. Por
lo tanto, este sistema y las condiciones antes mencionadas fueron seleccionados para el
anlisis.

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DISCUSIN

Lieberman-Burchard es un reactivo utilizado en un ensayo colorimtrico para


detectar el colesterol, lo que da un color verde intenso. Este color comienza como
un color rosa violceo y progresa a travs de un verde claro y luego de color verde
muy oscuro. El color es debido al grupo hidroxilo (-OH) de colesterol que reacciona
con los reactivos y el aumento de la conjugacin de la instauracin en el anillo
fusionado adyacente. Puesto que este ensayo utiliza anhdrido actico y cido
sulfrico como reactivos, se debe tener precaucin para no recibir quemaduras
graves.

El colesterol es un lpido muy poco soluble en agua. A temperatura ambiente


(25C), el lmite de solubilidad es de 0,2 mg/100 ml. Sin embargo, la concentracin
plasmtica de colesterol es individuos sanos es normalmente de 150 a 200 mg/100
ml, aproximadamente el doble de la concentracin plasmtica de glucosa. La alta
solubilidad del colesterol en la sangre, se debe a la presencia de las lipoprotenas
plasmticas (principalmente LDL y VLDL) que tienen la capacidad de fijar y por lo
tanto solubilizar grandes cantidades de colesterol.

Slo aproximadamente un 30% del colesterol circulante total se encuentra libre: el


70 % restante se encuentra en forma de steres de colesterol, en los que el colesterol
(especficamente, el grupo OH unido a C-3 est esterificado por un cido graso de
cadena larga, generalmente linoleico. La presencia del cido graso aumenta la
hidrofobicidad del colesterol.

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CONCLUSIONES

El Colesterol es un lpido con un papel de gran importancia, su biosntesis ocurre


en todos los tejidos, pero mucho ms intensa en el hgado y rganos productores de
hormonas esteroides. Es sintetizado por enzimas del retculo endoplasmtico liso y
del citoplasma.

La biosntesis del Colesterol y sus se puede dividir en cuatro etapas que son:
Sntesis de mevalonato, conversin de mevalonato en unidades activas de isopreno,
formacin de escualeno por condensacin de unidades de isopreno activo y
finalmente ciclizacin de escualeno y transformacin en colesterol.

Prueba de Lieberman se basa en la reaccin coloreada (verde) que dan aquellas


sustancias que tienen como ncleo el ciclo pentanoperhidrofenantreno.

El Colesterol desempea un papel de gran importancia a nivel celular en la


estructura de la membrana celular y a nivel biolgico como precursor de hormonas,
Vitamina D y cidos biliares y est asociado en la patognesis de enfermedades
vasculares, por lo cual se lo debe ingerir en bajas cantidades en la dieta.

Se puede extraer esteroides como: el colesterol de la yema del huevo a partir de una
serie de procedimientos y reacciones y tambin gracias a una propiedad fsica del
colesterol que es la solubilidad en etanol cloro formo.

En la yema de huevo se encuentran las lecitinas en gran abundancia, y adems el


colesterol en suficiente cantidad sirve para hacer su aislamiento y deteccin fcil.

La cromatografa en capa fina (TLC) es una tcnica que permite separar una mezcla
de dos o ms compuestos en base a su solubilidad en la fase mvil. En este caso se
separaron mezclas de lpidos, que tienen carcter apolar, por lo que se us como
fase mvil un solvente orgnico; por consiguiente, el compuesto ms apolar tendr
una Rf mayor por ser ms soluble en la fase mvil que otro polar o menos apolar.

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CUESTIONARIO
1. Explique la biosntesis del colesterol?

La biosntesis de colesterol ocurre en prcticamente todos los tejidos, pero es mucho ms


intensa en el hgado y en rganos productores de hormonas esteroides como la corteza de
las glndulas suprarrenales y las gnadas.
El colesterol es sintetizado por enzimas del retculo endoplasmico liso y del citoplasma
soluble.
La principales materias primas necesarias para la sntesis de colesterol son:

a) Acetil CoA, cuyos grupos acetilos proveen todos los carbonos del colesterol
b) ATP, como fuente de energa
c) NADPH.H+ como proveedor de los equivalentes de reduccin necesarios para el
proceso de sntesis.

La sntesis de colesterol es un complejo proceso que puede dividirse en varias etapas para
su estudio:

Sntesis de mevalonato

Conversin de mevalonato en unidades activas de isopreno.

Formacin de escualeno por condensacin de unidades de isopreno activo.

Ciclizacin de escualeno y transformacin en colesterol.

La enzima HidroximetilGlutaril CoA reductasa es la enzima clave en la regulacin de la


sntesis de colesterol.
Un poco menos de la mitad del colesterol en el cuerpo se deriva de la biosntesis de Novo.
Cada da, aproximadamente el 10% de la biosntesis del colesterol se hace en el hgado
(como ya mencionamos algo), y aproximadamente 15%, en el intestino. La sntesis del
colesterol se hace en el citoplasma y el micro somas a partir del grupo acetato de dos
carbonos la acetil-CoA.
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La acetil-CoA que se utiliza para la biosntesis del colesterol se deriva de una reaccin de
oxidacin (los cidos grasos o piruvato) en las mitocondrias y es transportada al citoplasma
por el mismo proceso que esta descrito para la sntesis del cido grasos (vase la figura
abajo). La acetil-CoA se puede tambin derivar de la oxidacin citoplsmica del etanol
catalizada por la acetil-CoA sintetasa.
Todas las reacciones de la reduccin de la biosntesis del colesterol utilizan NADPH como
cofactor. Los intermediarios isoprenoides de la biosntesis del colesterol se pueden ser
dirigidos a otras reacciones de sntesis, tal como para el dolicol (usado en la sntesis de
glicoprotenas N-ligadas, coenzima Q (de la fosforilacin oxidativa) o la cadena lateral del
heme-a. Adems, estos intermedios se utilizan en la modificacin con lpidos de algunas
protenas.

Figura 9. Biosntesis del colesterol

Va de transporte de las unidades del acetil-CoA desde la mitocondria al citoplasma para la


biosntesis de lpidos y del colesterol. Observe que la reaccin catalizada por la enzima
mlica citoplsmica genera NADPH que se utiliza para las reacciones biocinticas
reductoras tales como las de la sntesis del cido grasos y del colesterol.
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El proceso tiene cinco pasos importantes:

Las acetil-CoAs se convierten en 3 hidroxi-3-metilglutaril-CoA (HMG-CoA)

La HMG-CoA se convierte en mevalonato

El mevalonato se convierte en la molcula basada isopreno, el isopentenil


pirofosfato (IPP), con la prdida concomitante de CO2.

El IPP se convierte en escualeno.

El escualeno se convierte en colesterol.

Figura 10. Va de la Biosntesis del colesterol

Va de la biosntesis del colesterol. La sntesis comienza con el transporte del cetil. CoA
desde la mitocondria al citoplasma. El paso limitante ocurre en la reaccin catalizada por la
3 hidroxi-3-metilglutaril-CoA (HMG-CoA) reductasa, (HMGR). Las reacciones de la
fosforilacin son necesarias para solubilizar los intermedios isoprenoides de la va. Los
intermedios de la va son usados para la sntesis de protenas preniladas, del dolicol, de la
coenzima Q y de la cadena lateral del heme a. Colocar el cursor sobre los nombres de los
metabolitos intermedios para ver la estructura. PP = pirofosfato; rxn = reacciones.

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Finalmente, la enzima que requiere NADPH, sintasa del escualeno, cataliza la


condensacin cabeza- -cola de dos molculas de FPP, generando el escualeno (la sintasa de
escualeno tambin est asociada firmemente al retculo endoplsmico).
El escualeno experimenta una ciclizacin de dos etapas para generar el lanosterol. La
primera reaccin es catalizada por monooxigenasa de escualeno. Esta enzima utiliza
NADPH como cofactor para introducir el oxgeno molecular como epxido en la posicin
2,3 del escualeno con una serie de 19 reacciones adicionales, el lanosterol se convierte al
colesterol.

En resumen, estas reacciones pueden agruparse de la siguiente manera:


Tres molculas de acetil-CoA se combinan entre s formando mevalonato, el cual es
fosforilado a 3-fosfomevalonato 5-pirofosfato. El 3-fosfomevalonato 5-pirofosfato es
descarboxilado y desfosforilado a 3-isopentil pirofosfato. Ensamblaje sucesivo de seis
molculas de isopentil pirofosfato para originar escualeno, va geranil pirofosfato y farnesil
pirofosfato.
Ciclacin del escualeno a lanosterol. El lanosterol se convierte en colesterol despus de
numerosas reacciones sucesivas, enzimticamente catalizadas, que implican la eliminacin
de tres grupos metilo (CH3), el desplazamiento de un doble enlace y reduccin del doble
enlace de la cadena lateral.

2. Mencione otras reacciones tiles en la identificacin de esteroides?

a) Reaccin de Salkowsski. Aadiendo cido sulfrico concentrado a una disolucin


del esterol en cloroformo da color rojo en la capa orgnica.

b) Reaccin de Lieberman-Burchard. cido sulfrico mas anhdrido actico sobre


una disolucin del esterol en cloroformo da colores desde o prpura rojizo a azul
verdoso (Mtodo utilizado para determinar colesterol en sangre). Separar colesterol
de su ester disuelto en etanol, aadiendo digitonina en etanol (precipita).

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c) Reaccin de Slatkis (1908). Acido sulfrico concentrado + Cl3Fe + actico glacial


da color rojo (Determinacin en plasma).

d) Reaccin de Rosenheim. Cloroforma con cido tricloroactico da color rojo. Esta


es tpica de dienos conjugados o alcoholes que conducen a ellos por deshidratacin.
3. Enumere correctamente los siguientes esteroides?

Imagen 11. 11-11,17,21-trihydroxypregn-4-ene-3,20-dione

Imagen 12. 11B, 21-dihidroxi-3,20-dioxo-pregnen-18-al

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BIBLIOGRAFA

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ANEXOS

REACCIONES
Identificacin del colesterol mediante el reactivo lieberman-bouchard.

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