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PREVIO TOXI PLOMO-RATA

1.-FUNDAMENTO CIANOMETAHEMOGLOBINA Y BENCIDINA


La intensidad del color formado es proporcional a la concentracin de
hemoglobina presente en la muestra ensayada.

Los resultados se llevan a una curva estndar realizada con soluciones de


cianometahemoglobina comercial, de donde se extrapolan las concentraciones
de hemoglobina de las muestras problema

http://www.cirbiomedicas.uady.mx/sgc/documentos/procedimiento3/M-CIRBAADC-02.pdf

-La prueba se basa en la actividad tipo peroxidasa de las hemoprotenas tales


como la hemoglobina. Las hemoglobinas (Hbs) contienen a un grupo hemo que
les permite llevar a cabo la actividad peroxidasa, lo que sugiere que estas
protenas funcionan in vivo como peroxidasas Esta puede ser detectada por
medio de una reaccin en la que toman parte el perxido de hidrgeno y un
indicador como la bencidina. El mtodo de deteccin de sangre oculta en
materia fecal se basa en la actividad peroxidasa del grupo hemo de la
hemoglobina y sus derivados los cuales oxidan catalticamente sustratos tales
como el guayaco y la bencidina en presencia de H2O2. En este caso el sustrato
oxidable es la tetrametil bencidina que al ser oxidada vira al color azul verdoso.

2.- hematocrito

El hematocrito es un examen de sangre que mide el porcentaje del volumen de toda la


sangre que est compuesta de glbulos rojos. Esta medicin depende del nmero de
glbulos rojos y de su tamao. El resultado se expresa en porcentaje.
El hematocrito casi siempre se ordena como parte de un conteo sanguneo
completo (hemograma).
Para la realizacin de esta prueba, con el macromtodo, la sangre se extrae tpicamente
de una vena, por lo general de la parte interior del codo o del dorso de la mano.
Cuando se inserta la aguja para extraer la sangre, algunas personas sienten un dolor
moderado, mientras que otras slo sienten un pinchazo o sensacin de picadura.
Posteriormente, puede haber algo de sensacin pulstil.
Un volumen de sangre se deposita en un tubo de Wintrobe, por medio de una pipeta,
hasta la marca del 10 y se debe de centrifugar. Al terminar la prueba, deben de quedar
separados el plasma de la sangre y las clulas, depositndose en el fondo y presentando
un color rojo intenso.
Para la realizacin del micromtodo, se utilizan unos tubos de un calibre muy delgado,
llamados capilares, y pueden ser llenados con la misma sangre venosa o de capilar. Este
ltimo es el ms usado, por ser ms rpido y menos riesgoso al usar sangre capilar. Para
su lectura se usa una escala estandarizada

FUNDAMENTO
Este examen mide el volumen (cantidad) de glbulos rojos en la sangre, comparado con otros
componentes. Los resultados del examen se informan como un porcentaje o como un fragmento
decimal de sangre entera. Este examen puede ser usado para evaluar o manejar enfermedades
como enfermedad renal (rion) en estado terminal, o insuficiencia cardaca[1][2][3][4][5].
El valor de hematocrito indica el porcentaje volumtrico de eritrocitos en sangre. El mtodo de
referencia para la determinacin del hematocrito es la centrifugacin.
Mediante la centrifugacin se separan los componentes slidos de la sangre de los lquidos y se
envasan hermticamente. Este mtodo est establecido en la norma DIN 58933-1. A continuacin,
los tubos capilares de vidrio se centrifugan hasta que el producto alcance una aceleracin
centrfuga relativa mnima que acte sobre los eritrocitos (RCF 5.000) y un valor numrico de
tiempo de centrifugado en minutos de por lo menos 100.000.

http://stephanyrenaud.blogspot.mx/2012/03/practica-no3-determinacionde.html

3.- tincin de Wright y nuevo azul de metileno

En 1949, Brecher1 introdujo el mtodo de nuevo azul de metileno para la


identificacin de reticulocitos, basado en la precipitacin del RNA ribosmico
mediante el colorante catinico. Actualmente, este mtodo ha sustituido a
otros y constituye el procedimiento reconocido para la cuantificacin de
reticulocitos en la sangre perifrica2 . Sigma-Aldrich proporciona una solucin
estable para la tincin de reticulocitos en frotis de sangre. La sangre y la
solucin de tincin de reticulocitos se mezclan y se incuban brevemente a
temperatura ambiente. Las extensiones perifricas o centrifugadas se hacen en
portaobjetos microscpicos, se secan al aire y se evalan mediante inmersin
de aceite en un microscopio ptico. Un hemate positivo mostrara dos o ms
grnulos teidos de azul
https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/sigmaaldrich/docs/Sigma/General_Information/1/insert_es_r4132.pdf
La tincin de Wright cuyo colorante est compuesto de azul de metileno (que tie de color
azul las partes cidas de las clulas) y eosina (que tie las partes alcalinas) disueltos en
metanol (que permite la fijacin de las clulas), adicionando a la preparacin buffer de fosfatos
(que rehidrata a las clulas despus de la exposicin con metanol)

La Tincin de Wright fue diseada al principio de la dcada de los noventas por


James Homer Wright. Dicha tincin esta compuesta por azul de mtileno y
eosina. Las estructuras con carcter cido tales como los cidos nucleicos o las
protenas cidas son afines por compuestos bsicos como lo es el azul de
metileno contenido en la tincin. Por el contrario las estructuras de carcter
bsico tales como la hemoglobna y otras protenas bcicas son afines a
compuestos cidos tales como la eosina contenida en la tincin por lo que a la
vista estas estructuras tendrn un color rojo-rosado.
4.- anemia por plomo, alteraciones enzimas y grupo hemo
el plomo es txico para las enzimas dependientes del zinc, los rganos ms sensibles a
la toxicidad son el sistema hematopoytico, el sistema nervioso central y el rin.
Interfiere con la sntesis del hem, ya que se une a los grupos sulfhidrilos de las
metaloenzimas como son la d aminolevulnico deshidratasa, coproporfiringeno
oxidasa y la ferroquelatasa, que se muestra en la Figura 4; siendo el resultado final, el
aumento de las protoprofirinas como la zinc protoporfirina(ZPP) y la anemia.

5.- efectos de plomo en SNC (memoria, aprendizaje act motora)

6.- Fundamento prueba footprint

London

1st edi

7 tejidos de distribucin y depsito de plomo


Luego de su absorcin el plomo se distribuye en compartimentos, ver Figura 2, en
primer lugar circula en sangre unido a los glbulos rojos, el 95% del plomo est unido
al eritrocito, luego se distribuye a los tejidos blandos como hgado, rin, mdula sea
y sistema nervioso central que son los rganos blanco de toxicidad, luego de 1 a 2
meses el plomo difunde a loshuesos donde es inerte y no txico. 90% depsito en
huesos.

8 Esquema biosntesis del grupo hemo y enzimas por plomo

Activa la proteinquinasa C, una enzima que


depende del calcio y que interviene en mltiples
procesos intracelulares.
c) Se une a la calmodulina ms vidamente que el
calcio, sta es una protena reguladora importante.
d) Inhibe la bomba de Na-K-ATPasa, lo que aumenta
el calcio intracelular.

9 Vida media de plomo en sangre y huesos

10.- Manifestaciones de la intoxicacin aguda y crnica por plomo


La toxicidad aguda se presenta luego de una exposicin respiratoria a altas
concentraciones, con encefalopata, insuficiencia renal y sntomas gastrointestinales.
La toxicidad crnica es la ms frecuente y se manifiesta con compromiso
multisistmico: hematopoytico, del sistema nervioso, gastrointestinal, rin y sistema
reproductor.
polineuropata perifrica