MATRIZ EXTRACELULAR

La matriz extracelular regula el

desarrollo y la funcin de casi
todas las clulas en un organismo
metazoo.
Ms an, el desarrollo y el
funcionamiento normales de todos
los tipos celulares en un
organismo, dependen de las
interacciones con molculas del
medio ambiente.

Las funciones de la matriz

extracelular en proveer orden en
el espacio extracelular, poseen
muchas funciones asociadas con el
establecimiento, la separacin y el
mantenimiento de tejidos y
rganos diferenciados.

Por ejemplo:
La matriz extracelular provee un sustrato para la

organizacin de clulas que se adhieren a l.

Los componentes de esta matriz son esenciales

para la diferenciacin celular, como en el caso del

epitelio mamario.

Estos componentes incluyen ligandos que activan

caminos de sealizacin intracelulares, regulando

proliferacin, supervivencia y diferenciacin.

Estos componentes se unen a factores de

crecimiento, etc.

El espacio entre las clulas, provisto por la

matriz extracelular, permite la migracin
de las mismas y de los conos de
crecimiento.
La estructura ordenada, posibilitada por la
matriz extracelular, hace posible
establecer gradientes de molculas que
dirigen el movimiento celular.

DEFINICION DE
MATRIZ EXTRACELULAR

Originalmente:
Se la defini morfolgicamente como el material
extracelular, visible como fibrillas o lminas al
microscopio electrnico.
Actualmente:
Se la define incluyendo a todas las molculas
secretadas que son inmovilizadas fuera de la clula.

Seccin transversal de acinos con morfologa normal.

Seccin transversal de clulas de cncer mamario y matriz extracelular.

Acercamiento de la imagen anterior.

Complejo de adhesin focal en la membrana celular.

La integrina se une a la fibronectina.

Todas las integrinas se unen a la fibronectina y mueven

al colgeno asociado.

Alejamiento del complejo de adhesin focal de la

membrana.

Vuelta a la seccin transversal de la clula tumoral.

Vista cercana al ncleo.

Visin completa del ncleo.

Racimo celular con morfologa cambiada.

Papel de proteasas de matriz

extracelular

Las proteinasas que modifican la MEC y

las molculas de la superficie celular, son
importantes en numerosos procesos
normales y patolgicos.

Por ejemplo, existe mucha evidencia que

indica que estas proteinasas toman parte
en la fertilizacin normal, implantacin,
embriognesis, morfognesis y
diferenciacin, as como en inflamacin,
reparacin de heridas, ateroesclerosis,
etc.

Estas enzimas pueden ser exopeptidasas,

degradando a las protenas por sus
extremos, o endopeptidasas, clivando los
enlaces peptdicos internos.

De acuerdo con su mecanismo de accin, las

endopeptidasas pueden clasificarse en 4
grupos:
-Sernproteinasas
-Cistenproteinasas
-Asprtico proteinasas
-Metaloproteinasas

segn los grupos catalticos esenciales y la

sensibilidad a inhibidores.

Sernproteinasas (EC 3.4.21):

Poseen una trada caracterstica en su
sitio activo: histidina, asprtico y serina.
Cistenproteinasas (EC 3.4.22):
Poseen una cistena y una histidina y
requieren activacin por reactivos
tilicos.

Asprtico proteinasas (EC 3.4.23):

Posee dos asprticos activos y un pH
ptimo acdico.
Metaloproteinasas (EC 3.4.24):
Coordinan un metal de transicin
(generalmente zinc) en su sitio cataltico.

Cada una de las clases de proteinasas,

posee miembros capaces de clivar
molculas especficas de la MEC y de la
superficie celular. Tambin hay que notar
que, adems de las proteinasas que
degradan MEC, tambin hay exo y
endoglicosidasas que contribuyen a la
degradacin de la MEC, removiendo a los
glicosaminoglicanos y azcares de los
proteoglicanos.

Metaloproteinasas de matriz
extracelular.

Constituyen un grupo multignico de endopeptidasas

dependientes de Zinc y Calcio, con una extensa
homologa de secuencia.
Hasta el momento se han descubierto 18 MMPs en
vertebrados y 16 homlogos humanos.
Las MMPs estn reguladas por controles
transcripcionales positivos y negativos, por su
activacin desde un estado latente y a travs de la
influencia de inhibidores tisulares endgenos
(TIMPs).

Table 1. MMP Facts.

MMP

Alternative
Names

MMP-1

EC Number

Chromosome

Substrates

EC3.4.24.7

11q22-q23

Collagens (I, II, III, VII, VIII and X)17, 18; Gelatin; aggrecan19; hyaluronidasetreated versican20; proteoglycan link protein21; large tenascin-C22; 1antitrypsin/1-proteinase inhibitor (1-AT)23-25; 1-antichymotrypsin (1ACHYM)24, 25; 2M; rat 1M; pregnancy zone protein; rat 1I3 (1-inhibitor 3);
ovostatin; entactin (nidogen)26; MBP27; GST-TNF/TNF peptide28; LSelectin29; IL-130; serum amyloid A; IGF-BP532; IGF-BP333; MMP-234;
MMP-920

EC3.4.24.24

16q13

Collagens (I49, IV50, V, VII, X17, XI and XIV51); Gelatin; elastin50, 52;
fibronectin; laminin-1, laminin-553; galectin-354; aggrecan45; decorin55;
hyaluronidase-treated versican20; proteoglycan link protein21; osteonectin48;
MBP27; GST-TNF/TNF peptide28; IL-156; A1-4056, 57v; A10-2058; APP69559; 1AT25; prolysyl oxidase fusion protein60; IGF-BP532; IGF-BP333; FGF R161;
MMP-134; MMP-962; MMP-1363

Collagenase
Fibroblast
Collagenase
Interstitial
Collagenase

MMP-2
72-kDa
Gelatinase
Gelatinase A
Type IV
Collagenase
Neutrophil
Gelatinase

MMP-3

Stromelysin-1
Transin

MMP-7

EC3.4.24.17

11q23

EC3.4.24.23

11q21-q22

Collagen IV82, 50 and X18; Gelatin82; aggrecan19; decorin55; proteoglycan

link protein21; fibronectin and laminin82; insoluble fibronectin fibrils83;
entactin26; large and small tenascin-C84; osteonectin48; 4 intergrin85;
elastin50; casein82; transferrin86; MBP27; 1-AT23; GST-TNF/TNF
peptide28; plasminogen65; MMP-173; MMP-287; MMP-973, 35, 88; MMP9/TIMP-1 complex88

EC3.4.24.34

11q21-q22

Collagens (I, II, III, V36, VII, VIII and X); Gelatin; aggrecan37, 38; 1-AT39;
1-ACHYM16; 2-antiplasmin40; fibronectin41

Matrilysin
PUMP

MMP-8
Neutrophil
Collagenase
Collagenase I

Collagens (III, IV50, V, IX); Gelatin; aggrecan19, 66; versican and

hyaluronidase-treated versican20; perlecan46; decorin55; proteoglycan
link protein21; large tenascin-C23; fibronectin; laminin; entactin26, 67;
osteonectin48; elastin40; casein68; 1-AT23, 25; 1-ACHYM25;
antithrombin-III2525; 2M; ovostatin; Substance P; MBP27; GSTTNF/TNF peptide28; IL-130; serum amyloid A31; IGF-binding protein333; fibrinogen and cross-linked fibrin69; plasminogen70; MMP-1
superactivation71; MMP-2/TIMP-2 complex72; MMP-773; MMP-874;
MMP-975; MMP-1343

MMP-9

92 kDa
Gelatinase>
Gelatinase B

MMP-10

EC3.4.24.35

20q11.2-q13.1

EC3.4.24.22

11q22.3-q23

Collagens (III76, IV77, 50 and V76); Gelatin74; casein68, 76; aggrecan66;

elastin50; proteoglycan link protein21; MMP-168; MMP-877

22q11.2

Human enzyme: 1-AT78; 2M79; casein79; IGF-binding protein-180;

Mouse enzyme: 1-AT78; casein, laminin, fibronectin, gelatin,
collagen IV and carboxymethylated transferrin81

Stromelysin-2

MMP-11
Stromelysin-3

Collagens (IV50, V36, VII, X17 and XIV51); Gelatin; elastin50, 52;
galectin-354; aggrecan19; hyaluronidase-treated versican20;
proteoglycan link protein21; fibronectin31; entactin26; osteonectin48;
1-AT23, 24; MBP27; GST-TNF/TNF peptide28; IL-130; A1-4064;
plasminogen65

MMP-12

Macrophage
Metalloelastase

MMP-13

11q22.2-q22.3

11q22.3

Collagens (I, II and III42, 43, IV, IX, X and XIV44); Gelatin, 1-ACHYM and
plasminogen activator inhibitor 244; aggrecan45; perlecan46; large
tenascin-C and fibronectin44; osteonectin47; MMP-948

14q11-q12

Collagen (I, II and III97, 98); Gelatin, casein, -elastin, fibronectin, laminin,
vitronectin and proteoglycans97-99; large tenascin-C, entactin98; 1-AT,
M97; GST-TNF98; MMP-2100, 101; MMP-1363
2

Collagenase-3

MMP-14
MT-MMP-1

Collagen IV89; Gelatin89; elastin and -elastin60, 90; casein91; 1-AT89, 92;
fibronectin89; vitronectin89; laminin89; entactin93; proteoglycan monomer89,
77, 94; GST-TNF89; MBP89; fibrinogen94; fibrin95; plasminogen96

MMP-15

MT-MMP-2

MMP-16

16q12.2-q21

Fibronectin, large tenascin-C, entactin, laminin, aggrecan, perlecan98;

GST-TNF98; MMP-2102, 103

8q21

Collagen III104; Gelatin, casein105; fibronectin; MMP-2102, 103

MT-MMP-3

ND

MMP-17
MT-MMP-4

MMP-19<

12q14

Gelatin107*, 108

MMP-20

ND

Amelogenin109

Enamelysin

* assigned as MMP-18 in reference 107. MMP-18 has however subsequently been assigned as xenopus MMP

Un ejemplo: activador de
plasmingeno tipo uroquinasa (uPA)
y su receptor (uPAR).

uPA es una proteinasa de serina, con alta

especificidad para el plasmingeno, a quien cliva en
un sitio para dar plasmina.
La unin de uPA a su receptor en la superficie
celular, lo activa y protege contra los inhibidores
de activadores de plasmingeno, as como del
clivaje por plasmina, localizndolo a los sitios
focales.
De este modo, se piensa que indirectamente
cataliza la ruptura de la matriz extracelular, rompe
interacciones clula-matriz y promueve la
migracin e invasin celular.

Adems, los complejos uPA/uPAR interactan con

integrinas, modulando las seales celulares, adhesin
y migracin por medios que son independientes de la
actividad proteoltica.

WX-UK1 (inhibidor de proteasas de

serina)

WX360 inhibe angiognesis en un modelo de aorta de rata. A)

control B) tratado con WX-360 (antagonista del receptor).

INHIBIDORES TISULARES
DE
METALOPROTEINASAS

Los inhibidores tisulares de

metaloproteinasas (TIMPs), constituyen
una familia de, al menos 4 protenas de
22-29 kDa, que inhiben especficamente
y reversiblemente a estas enzimas.

Doce residuos cistena, completamente

conservados, forman 6 puentes
disulfuro intracatenarios, para dar una
estructura general de dos dominios y 6
loops.

Las diferencias entre los miembros de

las familias de dan en:
-Los dominios C-terminales (loops 4-6 y
cola libre)
-Las afinidades por y las actividades
especficas contra MMPs particulares
-La expresin en tejidos especficos
-La regulacin transcripcional
-Los promotores gnicos

Una porcin del dominio N-terminal de los

TIMPs, se une claramente al sitio activo de
las MMP, dado que recombinantes
truncados en C-terminal, conteniendo
solamente los tres primeros loops, todava
inhiben a las MMPs.

Otros hallazgos indican que tanto el

residuo N- como C-terminal de los
TIMPs contribuyen a la unin, mientras
que las propiedades inhibitorias derivan
del dominio N-terminal solamente y, en
particular, de la regin que rodea al
primer nudo disulfuro.

Table 2. Methods for studying the involvement of MMPs in disease

Method

Advantages

Disadvantages

MMP specific

Does not measure protein or activity

Quantitative PCR

Can measure changes in mRNA for multiple

MMPs in small samples
High throughput
Primers easy to design and test
Immunohistochemistry
Can be MMP specific
Can localize MMP expression

Antibodies can cross react with other MMPs

Does not discriminate active and inactive enzyme
Labor intensive
Low sensitivity

ELISA
MMP specific
High throughput of samples
MMPs found in blood and tissue fluids
High sensitivity possible

May crossreact with other MMPs

May detect inactive or inhibitor -complexed MMPs

Can detect active MMP

Can be very sensitive

May not be specific for particular MMP

Subject to sample interference

MMP specific

Costly
Requires establishment of disease model in
knock out strain
Knock out may be compensated for in
development

Direct relevance to therapy

MMP specific inhibitors have not yet been

described

Activity assays

Gene knock out in mice

MMP inhibitors in
models

MUCHAS GRACIAS POR SU

ATENCION