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Manual Veterinrio

de Colheita e Envio
de Amostras

2010
Sade Pblica Veterinria

Centro Pan-Americano de Febre Aftosa

Manual Veterinrio
de Colheita e Envio
de Amostras

2010

Sade Pblica Veterinria

Centro Pan-Americano de Febre Aftosa

permitida a reproduo parcial ou total desta obra,


desde que citada a fonte. A responsabilidade pelos direitos
autorais de textos e imagens do autor.
Tiragem: 5.000 exemplares
1a edio. Ano 2010
Impresso no Brasil / Printed in Brazil
Distribuio e informaes
MINISTRIO DA AGRICULTURA, PECURIA E ABASTECIMENTO
Departamento de Sade Animal
Coordenao Geral de Combate a Doenas
Esplanada dos Ministrios, Bloco D, Anexo A,
3 andar, Sala 301
CEP 70043-900 Braslia, DF
www.agricultura.gov.br
0800 - 7041995
Este Manual foi realizado no mbito do Termo de Cooperao Tcnica (TCT) com o Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento (MAPA) e o Centro Pan-Americano de
Febre Aftosa (PANAFTOSA) da Organizao Pan-Americana
da Sade (OPAS)/ Organizao Mundial da Sade (OMS).

Manual veterinrio de colheita e envio de amostras:


manual tcnico. Cooperao Tcnica MAPA/OPASPANAFTOSA para o Fortalecimento dos Programas de
Sade Animal do Brasil. Rio de Janeiro: PANAFTOSA OPAS/OMS, 2010.
218p.: il. Color.; 15 cm. (Srie de Manuais Tcnicos, 13)
ISSN 0101-6970
1. Colheita de amostras - manuais. 2. Doenas dos
animais - diagnstico. I. Centro Pan-Americano de
Febre Aftosa - OPAS/OMS. II. Ministrio da Agricultura,
Pecuria e Abastecimento. III. Ttulo. IV. Sries.

Crditos
Coordenao
Guilherme Henrique Figueiredo Marques - DSA/SDA/MAPA
Jlio Csar Augusto Pompei OPAS/PANAFTOSA
Mnica Martini - OPAS/PANAFTOSA
Reviso Tcnica
Jlio Csar Augusto Pompei OPAS/PANAFTOSA
Mnica Martini - OPAS/PANAFTOSA
Gilfredo Darsie - OPAS/PANAFTOSA
Guilherme Henrique Figueiredo Marques DSA/SDA/MAPA
Ana Cristina Gonalves Pinto da Rocha CGAL/SDA/MAPA
Elaborao: Grupo Tcnico
Edviges Maristela Pituco IB/SP
Josete Garcia Bersano IB/SP
Claudia Del Fava IB/SP
Claudia Pestana Ribeiro IB/SP
Simone Miyashiro IB/SP
Ricardo Spacagna Jordo IB/SP
Adriana Hellmeister de Campos Nogueira IB/SP
Antonio Guilherme Machado de Castro CAPTAA/SP
Renato Lus Luciano CAPTAA/SP
Ana Maria Iba Kanashiro CAPTAA/SP
Ana Lcia S. P. Cardoso CAPTAA/SP
Eliana Neire Castiglioni Tessari CAPTAA/SP
rica Weinstein Teixeira APTA/SP
Dejair Message UFV/MG
Reviso Bibliogrfica
Astrid Rocha Pimentel
Colaborao
IB/SP: Alessandra Figueiredo de Castro Nassar, Elenice
Sequetin Cunha, Eliana De Stefano, Eliana Roxo,
Eliana Scarcelli Pinheiro, Liria Hiromi Okuda, Margareth
lide Genovez e Wilter Ricardo Russiano Vicente.
MAPA: Jos Carlos de Souza
CDA/SP: Armando Salvador da Silva (In memoriam)
Departamentos de Clnica Veterinria e de Reproduo
Animal da FMVZ/ USP

Apresentao
A Cooperao Tcnica entre o
Centro Pan-Americano de Febre Aftosa e o Ministrio da Agricultura,
Pecuria e Abastecimento tem possibilitado aes efetivas para o fortalecimento dos Programas de Sade
Animal do Brasil, investindo principalmente no aprimoramento das
aes tcnicas e na valorizao dos
prossionais envolvidos na manuteno do patrimnio representado
pela Sanidade Animal.
Este Manual Veterinrio de Colheita e Envio de Amostras foi elaborado para preencher uma lacuna
na bibliograa especializada e sua
proposta servir de guia para consulta rpida e objetiva por veterinrios de campo do servio ocial ou

autnomos. Visa assim, aprimorar a


qualidade da amostra colhida e assegurar sua correta conservao e
envio, facilitando rede laboratorial
a realizao de diagnsticos rpidos
e conclusivos, no mbito dos Programas Nacionais de Sanidade Animal.
nosso desejo que este Manual,
alm de ser utilizado no campo por
prossionais da medicina veterinria, seja tambm um valioso instrumento de capacitao, uso e referncia para os Servios de Sanidade
Animal.

Jamil Gomes de Souza


Departamento de Sade
Animal - Diretor

Ottorino Cosivi
Centro Pan-Americano de
Febre Aftosa Diretor

Prefcio
O Manual Veterinrio de Colheita e Envio de Amostras foi elaborado de forma simples, prtica e com uma viso atualizada dos
aspectos mais importantes da colheita de
amostra para o diagnstico das principais
doenas dos animais. Os autores deram especial nfase queles pontos que, com base
em sua experincia, consideram de maior interesse, particularmente para os Programas
de Sade Animal do Brasil.
Em seus captulos, divididos de acordo
com os aspectos de biossegurana e com a
colheita de amostras para o diagnstico de
doenas de ruminantes, equdeos, sudeos, aves e abelhas Apis mellifera, o manual
pretende fornecer um apoio ao mdico veterinrio de campo quanto correta colheita
de material da espcie afetada e ao sistema
comprometido, para que as amostras colhidas de eleio no levem em considerao
apenas a doena suspeita quando da realizao do exame clnico, o que impossibilitaria
os diagnsticos diferenciais.
6

O Manual no pretende esgotar todos os


assuntos nele abordados, mas abre a possibilidade de uma discusso focada e atualizada e dar ensejo a futuras contribuies, revises e complementaes. Espera-se que os
usurios deste Manual o apliquem em suas
atividades no dia-a-dia, esclarecendo dvidas e promovendo mudanas que resultem
em melhorias na ateno veterinria.

Agradecimentos
Expressamos nossos sinceros agradecimentos ao Ministrio da Agricultura, Pecuria
e Abastecimento (MAPA) pelo apoio na elaborao deste Manual e equipe de autores
pelo excelente trabalho realizado.
7

Sumrio

Captulo 1

Biossegurana

15

1. Equipamentos de proteo individual (EPI)

16

2. Equipamentos para conteno dos animais

18

3. Identicao do animal e da amostra

20

4. Descarte de material
5. Acondicionamento para remessa de amostras
para diagnstico
6. Requisio de exames

Tabela de medidas de agulhas

46

Tubos para colheita de sangue

47

Pele e mucosas

48

Material para colheita de amostras para


diagnstico de doenas de pele e mucosas

50

22

Amostras para diagnstico de doenas


de pele e mucosas

52

24

Lquido e tecido epitelial vesicular

52

28

Lquido esofgico-farngeo (LEF)

54

Exsudato (secrees)

56

Bipsia de pele e mucosa

58

Raspado de pele

60

Sangue

62

Captulo 2

Ruminantes, Equdeos e Sudeos

35

Sangue

36

Sangue

38

Colheita de sangue com sistema a vcuo

40

Colheita de sangue com seringa e agulha

42

Boas prticas de colheita para preveno


da hemlise

44

Boas prticas ps-colheita para preveno


da hemlise

45

Sistema respiratrio

64

Material para colheita de amostras para


diagnstico de doenas do sistema respiratrio

66

Amostras para diagnstico de doenas


do sistema respiratrio

68

Pulmo e linfonodos

68

Secrees

70

Sangue

72

Sistema gastrintestinal
Material para colheita de amostras para
diagnstico de doenas do sistema gastrintestinal
Amostras para diagnstico de doenas do sistema
gastrintestinal

74

Sistema circulatrio e linftico

108

76

Material para colheita de amostras para diagnstico


de doenas do sistema circulatrio e linftico

110

78

Amostras para diagnstico de doenas do sistema


circulatrio e linftico
rgos - sistema nervoso central, fgado, bao,
pulmo, rim, corao, linfonodos e
intestino delgado e grosso

112

Contedo ruminal

78

Fezes

80

Alimentos para nutrio animal

82

Sangue capilar e venoso

116

Sangue

84

Sangue

118

112

Sistema osteoarticular

120

Sistema reprodutor e urinrio

86

Material para colheita de amostras para diagnstico


de doenas do sistema reprodutor e urinrio

Material para colheita de amostras para


diagnstico de doenas do sistema osteoarticular

122

88

Amostras para diagnstico de doenas do sistema


reprodutor e urinrio

Amostras para diagnstico de doenas do sistema


osteoarticular

124

90

Lquido sinovial

124

Feto de at 2 Kg

90

Sangue

126

Feto e natimorto com mais de 2 Kg

92

Placenta

94

Sistema nervoso central (SNC)

128

Smen

96

Muco prepucial tcnica do suabe

98

Material para colheita de amostras para diagnstico


de doenas do sistema nervoso central (SNC)

130

Amostras para diagnstico de doenas do sistema


nervoso central (SNC)

132

Muco prepucial tcnica do lavado prepucial

100

Muco cervicovaginal

102

SNC inteiro

132

Urina

104

Pores do sistema nervoso central (SNC)

134

Sangue

106

Outros rgos - fgado, bao, pulmo, rim,


corao, linfonodos, intestino delgado e grosso

138

Sangue

142

Captulo 3

Captulo 4

Aves

145

Principais doenas que acometem as aves

146

Material para colheita de amostras para


diagnstico de doenas das aves

148

Amostras para diagnstico de doenas


das Aves

150

Sangue (para obteno do soro)

150

rgos

154

Suabe de traquia

158

Suabe de cloaca

160

Suabe de arrasto - a) gaze ou esponja e b) prop

162

Fundo de caixa

164

Papel ou cepilho que forra a caixa


de transportes de aves de 1 dia

166

Fezes frescas

168

Mecnio

170

Ovos bicados

172

Abelhas Apis mellifera

175

Material para colheita de amostras para


diagnstico de doenas de abelhas Apis mellifera

176

Garantindo a segurana

178

Reconhecendo as partes de uma colmeia

179

Identicando os indivduos da colnia, clulas


de operrias, clulas de zango e realeira

180

Abrindo e inspecionando uma colmeia

182

Fases do desenvolvimento das abelhas

186

Diferentes anomalias na fase de cria

188

Principais doenas, intoxicaes e parasitoses que


afetam Crias de Abelhas Apis mellifera

190

Amostras para diagnstico das principais doenas


que afetam Crias de Abelhas Apis mellifera
Amostra 1
Amostra 2
Amostra 3
Amostra 4

194
194
196
198
200

Principais doenas, intoxicaes e parasitoses que


afetam Abelhas Adultas Apis mellifera

202

Amostras para diagnstico das principais doenas


que afetam Abelhas Adultas Apis mellifera
Amostra 1
Amostra 2
Amostra 3
Amostra 4
Amostra 5

Bibliografia

204
204
206
208
210
212
214

Captulo 1

BIOSSEGURANA

Autores
Edviges Maristela Pituco
Ricardo Spacagna Jordo
Adriana Hellmeister de Campos Nogueira
Centro de P & D de Sanidade Animal
Instituto Biolgico (APTA/SAA-SP)
14

15

Biossegurana um conjunto de
procedimentos destinados a prevenir, controlar,
reduzir ou eliminar riscos inerentes s
atividades suscetveis de comprometer a sade
humana, animal e o ambiente

culos

Touca

Luvas com
o de ao

Mscara

1 - Equipamentos de proteo individual (EPI)


Utilizar vestimentas de proteo apropriadas
de acordo com o risco, tais como macaco,
avental ou cala e jaqueta impermeveis.

Luvas
de ltex
Luvas nitrilica
- neoprex

Luvas tricotadas
pigmentadas

Botas

Avental
impermevel

16

Avental

Macaco

17

2 - Equipamentos para conteno dos animais


Verifique com antecedncia se as instalaes e
equipamentos esto disponveis, limpos e em boas
condies de uso. Utilize equipamentos e materiais
de boa qualidade.

Uma boa conteno pode ser obtida pelo


uso de argola nasal

Imobilizador nasal
tipo formiga

Abre boca

Cachimbo

Para prevenir acidentes e fazer uma boa colheita de


amostras para diagnstico, muito importante que
o animal esteja bem imobilizado. Isto deve ser feito
preferencialmente no tronco de conteno.
Muitas vezes necessrio o uso de
peias, principalmente quando h
risco de acidentes (com coices) ou
quando os animais ficam inquietos.

18

19

3 - Identicao do animal e da amostra


Os mtodos de identificao animal mais comuns so:
tatuagem, brinco (visual ou eletrnico) e marcao a fogo.
Brincos

Brincos: aplique o
brinco na parte central
da orelha e entre
as duas nervuras
principais.

Aplicador
de brincos

O alicate aplicador
deve ficar na posio
vertical (em p), evite
a posio horizontal
(deitado).

A identificao da amostra
comea com a identificao
do animal. Essa etapa
crucial para que no final do
processo, seja garantida a
rastreabilidade. No momento
da colheita da amostra de
cada animal, o nmero do
animal dever ser conferido e
anotado no rtulo do frasco e
no formulrio de colheita. Na
impossibilidade de se obter
a identificao do animal,
identificar o lote ou ncleo,
a colmeia, entre outros.

NOTA

Registrar a id
enticao
do animal no
recipiente de
colheita, prefer
encialmente
em rtulo de
esparadrapo
com caneta es
ferogrca.
Para substitui
r essa
forma de iden
ticao,
necessrio
que
a alternativa
a ser
empregada se
ja
previamente
testada.

Animal com brinco


bem posicionado
20

21

4 - Descarte de material

Outros materiais
Seringas,
luvas, gorro,
mscara, avental
ou macaco
descartvel,
gaze, algodo e
outros materiais
potencialmente
infectantes
devem ser
descartados em
saco branco de
lixo, devidamente
identificado
para substncia
infectante.

Material
perfuro-cortante
Agulhas, lminas
de bisturi, tubos
quebrados, tubos
de vidro contendo
uido devem ser
descartados em
caixas coletoras
prprias para
material perfurocortante. Na falta
dessas, utilizar
recipientes de
paredes rgidas
com tampa (latas
de leite em p
ou similares).

NOTA

ndo os
Os recipientes conte
ente infectantes
lm
resduos potencia
s como
do
za
ali
sin
r
devem se
ados para
Infectante e destin
lar ou algo
coleta de lixo hospita
o-se as
nd
equivalente, respeita
acionais
ern
int
e
is
na
cio
normas na
nimizar
mi
e
que tm por nalidad
os
ri
nit
sa
is,
nta
riscos ambie
.
ais
ion
ac
e ocup

22

NOTA

priedade, todos os
Antes de sair da pro
:
na colheita, tais como
materiais utilizados
as
ulh
ag
s),
s (formiga
sondas, imobilizadore
,
ro ser desinfetados
ve
de
,
tas
bo
e
s
ica
metl
s,
co
fsi
micos ou
com desinfetantes qu
po de contato e as
tem
o
e
o-s
nd
observa
situao. Os demais
da
ca
indicaes para
macaces, devero
materiais, como os
cos plsticos para
sa
ser colocados em
o e lavagem.
posterior desinfec

23

5 - Acondicionamento para remessa


de amostras para diagnstico
O sistema de embalagem, inclusive para transporte
terrestre, deve ser envasamento triplo: um recipiente
primrio, uma embalagem secundria e uma
embalagem externa obrigatoriamente rgida
(embalagem terciria).

3 Passo
Acondicionar dentro de outro recipiente resistente
(embalagem secundria). Como alternativa de
embalagem secundria, pode ser utilizada lata de
leite em p ou de achocolatado, por exemplo.

1 Passo
Acondicionar o
recipiente que
contm a amostra
(recipiente primrio),
identificado de forma
clara e legvel, em
saco plstico vedado
hermeticamente.

2 Passo
Envolver este conjunto
em manta absorvente,
prevenindo possveis
vazamentos.

Importante: Deve-se realizar a desinfeco externa em todas


as etapas do processo de acondicionamento da amostra,
desde o recipiente primrio com a amostra, o saco plstico
e a embalagem secundria at a caixa isotrmica

24

NOTA

Se forem colo
cados vrios
recipientes pr
imrios frge
is
em uma mes
ma embalage
m
secundria, el
es devem ser
envolvidos in
dividualmente
ou
separados de
forma que se
evite o contat
o entre eles

25

4 Passo
Acomodar o recipiente na caixa isotrmica (embalagem
intermediria), que dever, por sua vez, ser colocada
na embalagem terciria (externa). Utilizar gelo reciclvel
em quantidade
compatvel com o
tamanho da amostra e
o tempo para chegada
ao laboratrio (como
alternativa, garrafa pet
bem fechada, com gua
congelada). Preencher
o espao vazio com
enchimentos macios
(ocos de isopor, jornal,
papel toalha).

5 Passo
Na parte externa da tampa
da caixa isotrmica, afixar
a requisio de exame,
devidamente preenchida e
colocada num saco plstico
transparente. Fechar bem
a caixa isotrmica e colocla dentro da embalagem
terciria, que dever ser
rotulada de acordo com
as normas nacionais e
internacionais. Em lados
opostos, colocar a orientao
de embalagem:
Este lado para cima.

Use caixas isotrmicas


resistentes e em boas condies
NOTA

O transporte de amostras que tenham


probabilidade insignicante de conter substncias
infecciosas, como soro e sangue para inquritos
soroepidemiolgicos ou que os agentes patognicos
tenham sido neutralizados ou inativados de forma a
no mais representar qualquer risco sade, no
est sujeito a esta regulamentao, devendo apenas
garantir que a embalagem primria seja estanque e
a prova dgua. A embalagem secundria pode ser
um saco plstico hermtico e a marca externa deve
apenas conter a expresso Amostra Animal
Isenta de Agente Infeccioso.

26

NOTA

Para o transporte, as embala


gens de
material biolgico referente
a espcime
diagnstico devem ser iden
ticadas com:
Nome, endereo e telefone
do
remetente e do destinatrio
Telefone para emergncias
A marca UN 3373 colocad
a na
superfcie externa da embala
gem
terciria, de modo que seja
fcil de ver
e ler. A designao ocial de
transporte
Substncia Biolgica, categor
ia B
dever gurar ao lado da ma
rca

27

6 - Requisio de exames

S PARA REMESSA
MAS NECESSRIA

INFORMAES MNI

Nome da Propriedade:
Nome do Proprietrio:
Endereo:
CEP:
Caixa Postal:
Fone:

DE

DIAGNSTICO
AMOSTRAS PAR A

1 - Localizao da propriedade
1.1 Nome completo (sem abreviaes) e endereo do proprietrio do
animal suspeito.
1.2 Nome completo da propriedade ou estabelecimento onde
foi colhida a amostra.
1.3 Localizao que facilite o acesso propriedade citada.

Cidade/Estado:
e-mail:
Celular:
rinrio
Dados do Mdico Vete

Nome:
Celular:
Fone:
do resultado:
Endereo para envio
Cidade/Estado:
s
CEP:
Dados das Amostra
[ ]
central
[ ] Sistema nervoso
[ ]
pele
e
es de mucosa
Infec
]
[
[ ]
Sistemas
stinais
[ ] Infeces gastrinte
afetados:
[ ]
diagnstico e
[ ] Confirmao de
[ ]
a
nci
vigil
do
Finalidade
[ ] Movimentao
o
ida
eval
exame:
o/r
[ ] Requisito certifica

E-mail:

Infeces vasculares
ares
Infeces steo-articul
Infeces do aparelho
rio
respirat
Monitoramento
_____
Outra:______________
___

Tipo de Amostras:
__________
[ ] Soro
A [ ] Outro: ________ ____________
coagulante: [ ] EDT
________________
[ ] Sangue Total - Anti
_
da leso/tecido_____
sitio
________________
car:
o:
ecifi
re
Esp
Sec

]
[
[ ] Bipsia
[ ] Smen
[ ] Fezes
_____________
____
____
[ ] Contedo gstrico
____
ne
________________
[ ] Placenta/cotildo
[ ] rgos:_________
[ ] Fludo cavitrio
[ ] Feto
[ ] Embrio
________________
____
____
____
as
____
[ ] Outr
________
________________
Especificar:_________
entares:
Informaes Complem
:
)
Informaes Clnicas
cos mais significativos
ente os achados clni
(descrever objetivam
s etc)
os relevantes:
Dados epidemiolgic ma doena infecciosa, pessoas envolvida
(rea endmica de algu
o:

Diagnstico presuntiv

Identificao
da amostra

Identificao
do animal

Data da colheita:
eita:
Responsvel pela colh

28

o de colheita
Formulrio detalhad
Sexo
Idade
Espcie

Data do envio:

Pontos importantes no preenchimento


da Requisio de Exames

Tipo de
amostra

Principal
sistema afetado

2 - Identicao do remetente da amostra


2.1 Nome completo (sem abreviaes) e endereo do responsvel
pelo encaminhamento da amostra. Dever constar um nmero
de telefone para casos de emergncia.
2.2 O responsvel pelo preenchimento do formulrio e envio
da amostra dever ser um prossional devidamente habilitado
para trabalhar com materiais de risco biolgico.
3 - Descrio do animal suspeito, rebanho e da amostra
3.1 Informar a data da colheita, nome ou nmero do animal
suspeito, idade, sexo, raa e espcie.
3.2 Preencher a nalidade do exame (ex. conrmao de
diagnstico, movimentao, monitoramento). Em caso de
conrmao de diagnstico, descrever quais os sinais clnicos
apresentados pelo animal, e a data provvel de incio da doena
e em caso de necropsia, descrever os achados mais signicativos.
Para conrmao de diagnstico deve-se preencher uma
requisio de exames para cada animal
3.3 Informar o nmero de animais existentes na propriedade,
quantos animais apresentaram sinais clnicos semelhantes e
quantos vieram a bito (informar vacinao, vermifugao).
3.4 Informar quais amostras foram remetidas e conservante utilizado.
4 - Informaes complementares
Esse espao reservado para qualquer outra informao
que o tcnico considere pertinente (suspeita de zoonoses
informar se h pessoas envolvidas, etc.)
29

ROLGICA
A SNDROME NEU
DE EXAMES PAR
O DE REQUISIO
- dezembro/2009)
(UF)
(verso atualizada
N ________/____

FORMULRIO NIC

2Registro

1Responsvel

amostra:
envio:
3Responsvel pelo

Fax:

Endereo:
Municpio/UF:
E-mail:

Alguns pontos importantes no preenchimento da


Requisio de Exames Para Sndrome Neurolgica

Profissional

n
nal
Registro Profissio
n
Telefone:

pela colheita da

(
(

)
)

2Propriedade:

Municpio/UF:
(
Telefone:
(
Fax:

1Proprietrio:

3Coordenadas:
4Localizao:

)
)

E-mail:

Ovina
_______) Eqdea
ra
de origem: ____
Silvestres (cita
do citar o pas
MNH Animais
bovino importa
Bovdea (para
Felina MH
ina
Can
a
Sun
Caprina
Hospital

o
cria
___)
de
espcie: ________
Estabelecimento
________)
icar: ____________
ruminante):
F
Outro (especif
M
amostra (para
2Local de origem da
______ Sexo:
o de animais
es Raa:______
Feiras/aglomera
Idade:______mes
veterinrio
al:

3Identificao do anim
nda
faze
gico ou na
_____
Registro geneal
________________
a
tria
ular idade (par
Cronologia den
____)
4Mtodo para estip
icar: ____________
_________
Outro (especif
Quando:_______
ruminante):
Sim
No
________________
da vida?
Quais?__________
o em alguma fase
_)
(___
Sim
tos
mor
5O animal ingeriu ra
No
doentes (_____)
cies afetadas?
Leptospirose
_____)
Havia outras esp
Cinomose
__
no rebanho (___
Clostridiose
________________
6Nmero de animais:
Raiva
____ Quando?
foi vacinado
Outras ________

7O animal morto j
lismo
Botu
__
para:
o:____/____/__
Data da Notifica
Vigilncia
D
Terceiro
_/____
1Origem da
Proprietrio
doena: ____/___
da
o
inci
do
l
notificao:
Data provve
____/____/____
2Data da 1 visita:
eriores
dos membros post
s (assinalar):
Paralisia flcida
cos apresentado
riores
em
3Tipos de sinais clni
alag
ped
dos membros ante
Movimento de
Paralisia flcida
ntal
Morte sbita
o comportame
vulses
ra
Con
Alte
Sialorria

Depresso
obia

erof
etria
a/a
Dism
Fotofobi
Agressividade
Ataxia
Tremores
Midriase
ta
Tetania
Paralisia, mas aler
Nistagmo
Opisttono
res
Priapismo
cula
mus
s
smo
Tenesmo
Espa
o
No
Cegueira
mal
Apetite an
Sacrificado: Sim
te/sacrifcio):
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is clnicos (desde
Durao dos sina
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Havia animais que
No
Sim
clnicos?
oas com animais
pess
de
to
dire
Houve contato
suspeitos?
Vsceras/Outras
Medula
falo
E
stra(s) :
aminhada: Enc
_______________
eita da(s) amo
1Tipo de amostra enc
Quais?__________
Dia e hora da colh
s __:___
_
____/____/____
vel da morte:
________________
____
em:
iado
Dia e hora prov
Material env
_
________
___/___/___ s __:_
o do material:
fixa
a
e
eita
colh
Tempo entre a

1Espcie:

hora(s)

Observaes

____
Local/Data:______

/____/____
____________,____
__________
________________
________________
mbo
Assinatura e cari

30

A - Identicao do remetente da amostra:


Nome completo do responsvel pela colheita e/ou pelo envio da
amostra com o n do registro prossional, caso seja veterinrio
ocial, o n da matrcula e nome da instituio.
B - Localizao da propriedade onde foi colhida a amostra:
Nome completo do proprietrio do animal e da propriedade ou
estabelecimento onde foi colhida a amostra. Se possvel, registrar
as coordenadas da propriedade e localizao que facilite o acesso.
C - Descrio do animal suspeito e do rebanho em que se
encontrava:
Marcar a espcie animal e no caso de animal silvestre
especicar o nome vulgar. Marcar MH (morcego hematfago)
e MNH (morcego no hematfago). Ruminante: colocar o local
de origem da amostra no item 2 e preencher o item 5, referente
a ingesto de protenas, concentrados, rao e suprimento
mineral protico. Informar o rebanho existente, n de animais
com sintomas clnicos e mortos, para animais de companhia
ou silvestre desconsiderar essa informao.
D - Aes na propriedade suspeita e os sinais clnicos
apresentados.
Colocar a origem da noticao, data da 1 visita e a data
provvel do inicio da doena.
E - Informaes sobre a colheita, acondicionamento e
conservao da amostra
Pode ser marcado mais de um quadrculo, desde que as
amostras pertenam ao mesmo animal. Especicar as amostras
encaminhadas, sempre quando vsceras/outros for marcado.
F Observaes.
Colocar outras informaes pertinentes, inclusive informando
agresses a pessoas, caso tenham ocorrido.
31

DE AMOSTRAS
S PARA REMESSA
MAS NECESSRIA
INFORMAES MNI
LHAS Apis mellifera
ABE
DE
S
NA
DOE
DE
PAR A DIAGNSTICO

Nome da Propriedade:
de:
Endereo da Proprieda
(apicultor):
Nome do Proprietrio
Endereo:
Cidade/Estado:
CEP:
e-mail:
Caixa Postal:
Celular:
rinrio
Fone:
Dados do Mdico Vete

1 - Localizao da propriedade
1.1 Nome da propriedade ou estabelecimento onde
foi colhida a amostra.
1.2 Endereo da propriedade ou estabelecimento onde foi
colhida a amostra (incluir localizao que facilite o acesso
propriedade citada).
1.3 Nome completo (sem abreviaes) e endereo e telefone
do proprietrio do apirio.

E-mail:

Nome:
Celular:
Fone:
do resultado:
Endereo para envio
Cidade/Estado:
s
CEP:
Dados das Amostra
da colheita:
aspecto no momento
seu
e
idas
colh
Amostras
Aspecto:
[ ] Abelhas do alvado.
de cria. Aspecto:
[ ] Abelhas da rea
. Aspecto:
[ ] Abelhas do cho
[ ] Crias. Aspecto:
lizao na colmeia.
[ ] Favo de mel. Loca
ecificar:
[ ] Outros dados. Esp
eia
Informaes da colm

2 - Identicao do remetente da amostra


2.1 Nome completo (sem abreviaes), endereo e telefone do
responsvel pelo encaminhamento da amostra.

eia:
identificao aqui)
Identificao da colm de forma permanente e escreva essa
(identifique a colmeia
Condio da colmeia:
[ ] Forte. Obs:
[ ] Mdia. Obs:
[ ] Fraca. Obs:
es.
[ ] Outras condi

entares
Informaes complem
arar a origem.
)? Especificar e decl
(energtica ou protica
ano?
do
a
Em que poc
ia? Para que local?

ementar
Adota alimentao supl

atr
Pratica apicultura migr
visitada.
eias na propriedade
Nmero total de colm
das, etc.):
:
icas
Cln
es
ero de colmeias afeta
Informa
comportamento, nm
(sintomas observados,
o de colheita
Formulrio detalhad

stra

Identificao da amo

Data da colheita:
eita:
Responsvel pela colh

32

Pontos importantes no preenchimento


da Requisio de Exames

eia

Identificao da colm

Data do envio:

Tipo de amostra

3 - Dados das Amostras


3.1 Preencher um formulrio por colmeia.
3.2 Informar todos os tipos de amostras colhidas em cada
colmeia, com as observaes pertinentes.
No esquecer de indicar o local no interior da colmeia
onde o pedao de favo de mel foi colhido.
4 - Informaes da colmeia
4.1 Caso o apicultor no adote marcao permanente nas
colmeias, fazer marcao em cada uma das colmeias de
onde foram colhidas as amostras.
5 - Informaes complementares
5.1 Detalhar o manejo de alimentao suplementar adotado
pelo apicultor (incluindo poca de fornecimento s abelhas).
5.2 Caso o apicultor pratique apicultura migratria, indicar os locais
para os quais as colmeias so deslocadas em cada poca do ano.
5.3 Informar se outros apicultores tm colmeias na mesma
propriedade.
5.4 Utilizar o verso do formulrio para outras observaes
que considerar importantes e no contempladas pelos
itens mencionados (ex.: histrico do problema etc.)
33

Captulo 2

RUMINANTES,
EQUDEOS E
SUDEOS

Autores
Edviges Maristela Pituco
Claudia Del Fava
Claudia Pestana Ribeiro
Josete Garcia Bersano
Simone Miyashiro
Centro de P & D de Sanidade Animal
Instituto Biolgico (APTA/SAA-SP)
34

35

Sangue
O sangue representa cerca de 8% do peso corporal de um
animal. As anlises do sangue so importante apoio ao
diagnstico clnico. Pode ser colhido com seringa e agulha
e transferido para recipientes de diferentes capacidades,
com ou sem anticoagulante, ou colhido em tubos a vcuo
que, por serem hermticos, garantem a esterilidade da
amostra, o que desejvel em toda puno venosa. Para
serem representativas, as amostras de sangue devem ter
sua composio e integridade mantidas durante as fases
pr-analticas de colheita, manuseio, transporte e eventual
armazenagem. Antes da colheita de sangue para a
realizao de exames laboratoriais, importante conhecer,
controlar e, se possvel, evitar algumas variveis que podem
interferir na exatido dos resultados. Classicamente, so
referidas como condies pr-analticas variao na dieta
e uso de medicamentos. Outros aspectos, como o uso de
gel separador, anticoagulantes e conservantes e a hemlise
podem tambm ser causa de variao dos resultados.

36

37

1. Material
Sangue

2. Onde colher
a) Veia jugular;
b) Veia coccgea;
c) Veia mamria; e
d) em sunos, veia
cava cranial

3. Como colher
Utilizar sistema a vcuo
ou seringa e agulha

a) Obteno de soro

b) Sangue total

Colher o sangue em tubo sem


anticoagulante; manter o tubo
inclinado em temperatura
ambiente at o sangue
coagular e retrair o cogulo,
exsudando o soro (30 a 60
min). Transferir o soro para
outro tubo (tampa com rosca
ou tipo Eppendorf).
Se for utilizado tubo com
gel separador,
ser necessrio
centrifugar o
sangue no
mnimo
30 minutos
aps a
colheita e
no mximo
2 horas e enviar
o soro no prprio tubo.

O sangue dever ser


colhido e enviado
em tubo com
anticoagulante (EDTA
k2). Homogeneizar
suavemente,
invertendo o tubo
(cerca de 6 vezes)

a) Pesquisa de anticorpos

4. Recipiente e quantidade
a) Tubo de ensaio

sem anticoagulante:
capacidade 10 mL.

b) Tubo de ensaio
com EDTA K2:
capacidade 5 mL

5. Exames
b) Pesquisa direta

do agente

6. Temperatura da amostra para transporte


a e b) Refrigerada (+2C a +8C)

7. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 48 horas

38

39

Colheita de sangue com


Sistema a Vcuo

PASSO A PASSO
1. Rosquear a agulha no adaptador. Retirar a capa
protetora da agulha somente no momento da
puno; (figuras a e b)
2. Realizar antissepsia do local escolhido para
puno; passar algodo embebido em lcool a
70%, na direo do pelo;

c
d

3. Retirar a capa da agulha e fazer o garrote;


4. Puncionar a veia; (figura c)
5. Introduzir o tubo no adaptador, pressionando-o
at o limite; (figuras d e e)
6. Esperar o sangue parar de fluir para dentro
do tubo, s ento retirar o tubo, assegurando a
devida proporo sangue/anticoagulante; (figura f)
7. Soltar o garrote e s depois retirar o tubo e em
seguida a agulha;

e
f

8. Separar a agulha do adaptador e descart-la


em recipiente para perfuro-cortantes.

40

41

Colheita de sangue com


Seringa e Agulha

PASSO A PASSO
1. Encaixar a agulha na seringa, sem retirar a capa
protetora. Certificar-se de que a agulha esteja bem
encaixada; (figura a)
2. Movimentar o mbolo da seringa (para frente e para
trs) para retirar o ar; (figura b)

3. Fazer a antissepsia do local escolhido para puno;


passar algodo embebido em lcool a 70%, na direo
do pelo;
4. Retirar a capa da agulha e fazer o garrote;
5. Introduzir a agulha na veia e puxar o mbolo da seringa
lentamente, para que o sangue possa fluir; (figura c)
6. Colher aproximadamente 10 mL de sangue;
7. Soltar o garrote aps a venopuno;

d
e

8. Separar a agulha da seringa. Descartar a agulha em


recipiente para perfuro-cortantes (figura d).
Lembre-se: Nunca reencapar as agulhas.
9. Transferir o sangue da seringa para um tubo de ensaio
com ou sem anticoagulante. Para evitar hemlise, o
sangue deve fluir lentamente pela parede do tubo; (figura e)
10. Descartar a seringa em saco plstico apropriado ou
no mesmo recipiente em que foi descartada a agulha.
42

43

44

BOAS PRTICAS DE COLHEITA


PARA PREVENO DA HEMLISE

BOAS PRTICAS PS-COLHEITA


PARA PREVENO DA HEMLISE

Antes de iniciar a puno, deixar que o lcool


utilizado na antissepsia seque.
Evitar usar agulhas de menor calibre.
No colher sangue de rea com hematoma
ou equimose.
Em colheitas de sangue a vcuo, puncionar a veia do
animal com o bisel voltado para cima. Perfurar a veia
com a agulha em um ngulo oblquo de insero, de
30 graus ou menos. Esse procedimento visa a prevenir
o choque direto do sangue na parede do tubo, o que
pode hemolisar a amostra, e tambm a evitar o refluxo
do sangue do tubo para a veia do animal. Esperar
o sangue parar de fluir para dentro do tubo, antes
de trocar o tubo por outro, assegurando a devida
proporo sangue/ anticoagulante.
Tubos com anticoagulante com volume insuficiente ou
com excesso de sangue alteram a proporo correta
de sangue/aditivo, podendo levar a hemlise e a
resultados incorretos.
Em colheitas com seringa, verificar se a agulha
est bem adaptada, a fim de evitar a formao de
espuma; no puxar o mbolo da seringa com muita
fora. Descartar a agulha, passar o sangue, fazendo-o
deslizar cuidadosamente pela parede do tubo e
cuidando para que no haja contaminao do bico da
seringa com o anticoagulante ou ativador de cogulo
contido no tubo.
No espetar a agulha na tampa do tubo, para
transferncia do sangue da seringa para o tubo,
porque pode ocorrer uma presso positiva, o que
provoca, alm da hemlise, o deslocamento da
rolha do tubo.

O sangue colhido no deve ficar exposto a


temperaturas muito elevadas ou mesmo exposio
direta luz, para evitar hemlise e/ou degradao.
Homogeneizar a amostra de sangue com
anticoagulante suavemente por inverso de 5 a 10
vezes, no agitar o tubo.
O sangue total nunca deve ser congelado, se
necessrio estocar, manter refrigerado, lembrando
que dever chegar no laboratrio dentro de 48 horas.
O soro poder ser congelado a - 20C, por at um
ms. Nunca congelar soro com cogulo em tubo sem
gel separador.
No deixar o sangue em contato direto com gelo.
No centrifugar a amostra de sangue em tubo para
obteno de soro antes do trmino da retrao do
cogulo, pois a formao do cogulo ainda no est
completa, podendo levar ruptura celular.
Quando utilizar um tubo primrio com gel separador,
a separao (centrifugao) do soro deve ser efetuada
dentro de no mnimo 30 minutos e no mximo 2 horas
aps a colheita.
Tubos com gel separador no podem ser centrifugados
em baixas temperaturas, uma vez que as propriedades
de fluxo do gel relacionam-se com a temperatura. A
formao da barreira de gel pode ser comprometida
caso o tubo seja resfriado antes ou durante a
centrifugao. Para otimizar o fluxo e evitar aquecimento,
ajustar as centrfugas refrigeradas a 25 C.
No usar o freio da centrfuga com o intuito de
interromper subitamente a centrifugao dos tubos,
pois esta brusca interrupo pode provocar hemlise.
45

TABELA DE MEDIDAS DE AGULHAS

Centrifugao
(1500-2000g/10min), no mnimo 30 minutos e no mximo
2 horas aps a colheita

Cogulo
Soro separado por Gel
Pesquisas de anticorpos

Tampa amarela

Repouso 30 a 60 min.
Cogulo
Soro

TUBOS

TUBOS PARA COLHEITA DE SANGUE

CREME
VERDE
PRETO
VIOLETA

Pesquisas de anticorpos

27 5G 1/2

Tampa verde

0,38 X 13

Centrifugao

26G 1/2

Sangue total
Plasma

0,45 X 13

Exames Bioqumicos
e toxicolgicos

24G 3/4

Tampa branca

0,55 X 20

Centrifugao
No mximo em at 2
horas aps a colheita

22G 1
22G 1 1/4

Sangue total
Plasma
Anel de Leuccitos

0,70 X 25
0,70 X 30

Isolamento
Biologia Molecular

21G 1
21G 1 1/4
21G 1 1/2

Centrifugao

0,80 X 25
0,80 X 30
0,80 X 40

Sangue total
Plasma
Anel de Leuccitos

19G 1
19G 1 1/4

Isolamento
Biologia Molecular

1,00 X 25
1,00 X 30

TUBO
TUBO
SILICONIZADO SILICONIZADO
COM GEL
SEPARADOR

PREPARO

18G 1
18G 1 1/2

HEPARINA

PRODUTO FINAL

1,20 X 25
1,20 X 40

EDTA K2
DIPOTSSICO
COM GEL
SEPARADOR

EXAMES

16G 1 1/2

Tampa lils

BRANCO

EDTA K2
DIPOTSSICO

ROSA

1,60 X 40

Indicaes de uso
Puno venosa: Branca bovinos e bubalinos; Rosa bovinos, equdeos, sudeos e
pequenos ruminantes; Creme pequenos ruminantes; Verde pequenos ruminantes
Puno articular: verde, violeta, castanho e cinza; Aves preto e verde

46

TUBOS SEM
ANTICOAGULANTE

TUBOS COM ANTICOAGULANTE

Tampa vermelha

Cor do Canho
A cor do canho define
o dimetro da agulha

CASTANHO

Gauge/
Polegadas

CINZA

Mtrico
(mm)

47

Pele e mucosas
A etiologia das enfermidades que afetam a pele
muito variada, incluindo, entre outras, causas
parasitrias, bacterianas, fngicas, virais, neoplsicas,
nutricionais, txicas, fsicas, congnitas e genticas.
O diagnstico no to fcil, pois a pele est exposta
a fatores externos (contaminao e efeito do sol)
que modificam substancialmente o aspecto e a
evoluo das leses. Das doenas que acometem
as mucosas, a principal a estomatite, que abrange
o complexo de enfermidades vesiculares, tais como
a febre aftosa, a estomatite vesicular e a varola
bovina, que tm em comum a propriedade de
provocar nas espcies afetadas a formao de
vesculas contendo lquido incolor ou ligeiramente
sanguinolento, tpico dessas doenas. O diagnstico
se baseia em informaes clnicas, epidemiolgicas
e laboratoriais. O diagnstico deve ter sempre
um carter diferencial. Os materiais de eleio
para diagnstico so fragmentos de epitlio e de
mucosas e exsudato (lquido vesicular) provenientes
de leses linguais, bucais, podais ou de bere. Alm
disso, para pesquisa direta de agente em possveis
portadores do vrus de febre aftosa, utiliza-se material
esofgico-farngeo. A pesquisa de anticorpos em
soro tem sido utilizada para demonstrar ausncia
de infeco, determinar a prevalncia em estudos
soroepidemiolgicos, avaliar a resposta humoral aps
vacinao e desafio para os programas de erradicao
e vigilncia. Em raras situaes, a sorologia pode ser
utilizada como ferramenta de diagnstico definitivo.

48

Principais doenas de pele


e mucosas e espcies acometidas
ESPCIES ACOMETIDAS
DOENAS
Febre aftosa

Estomatite vesicular

Lngua azul

Varola/vaccnia
(orthopoxvirus)

Pseudovarola

Ectima contagioso

Rinotraqueite
infecciosa bovina/
vulvo vaginite
postular infecciosa

Diarria viral bovina

Doena Vesicular
do suno

Exantema Vesicular
do suno

49

Material para colheita de


amostras para diagnstico de
doenas de pele e mucosas
Tubos (Tipo Falcon) com
meio conservante

Coletor
universal
com meio
conservante

Porta-lminas
Punch
para bipsia
Luvas

Lmina de bisturi
Papel-toalha

Tubo tipo KMA


(tampa com rosca)

Tubos
com tampa
com rosca

50

Lmina de bisturi

Pina
Microtubos tipo
Eppendorf

Tubos a vcuo para


colheita de sangue,
com gel separador, sem
e com anticoagulante

Suabes e meios
conservantes
para transporte

Coletor de raspado
esofgico-farngeo
(copo de Probang)

Cabo de bisturi
Tesoura cirrgica

Agulha para colheita


de sangue a vcuo

Sistema para colheita


de sangue a vcuo

Coletor universal

Lmina para
microscopia

Seringa e agulhas
51

Amostras para diagnstico


de doenas de Pele e Mucosas

3. Quantidade

a) Todo o contedo

b) Cerca de 2 g de

da vescula

epitlio (1 a 2 cm2)

1. Material
Lquido e tecido
epitelial vesicular

a) Nenhum

b) Lquido de Valle com pH 7,4 a 7,8; ou

2. Como colher

a) Lquido Vesicular.

Caso as vesculas estejam


ntegras (no rompidas),
colher o lquido vesicular,
com o auxlio de seringa
e agulha estril

Colhendo lquido ves


icular de um
bovino afetado po
r febre aftosa

Colher, com tesoura ou bisturi


e pina estril, fragmentos de
epitlio vesicular, incluindo
as bordas das leses das
regies oral, nasal, podal e
de glndula mamria

a) Tubo de ensaio

b) Tubo de ensaio estril


contendo meio apropriado em
quantidade suficiente para que
as amostras fiquem submersas

Refrigerada (+2C a +8C)


Extensa leso de boca em um
bovino afetado por febre aftosa

As patas e beres, antes da colheita, devem ser


lavados com gua limpa para remoo de sujeiras
(no utilizar nenhum tipo de sabo ou antissptico)

52

5. Recipiente

6. Temperatura da amostra para transporte

NOTA

pao
Leses no es
o
de um bovin
interdigital

Meio Eagle 2 vezes concentrado, com


antibitico e pH 7,2-7,6

a
estril com tampa
com rosca (5 mL)

b) Tecido Epitelial Vesicular.

4. Meio

Leses no te
to de vaca, pr
ovocadas
pelo vrus da
varola bovin
a

7. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


IMPORTANTE

No caso de suspeita de doe


na
vesicular, o servio oficial dev
er
ser imediatamente informa
do.
As amostras s devem ser colh
idas
por profissionais do servio
oficial
e enviadas sob condies de
segurana para laboratrios
autorizados, para prevenir a
disseminao da doena.

At 48 horas

8. Exames
Pesquisa direta
do agente

53

1. Material

trizes
as dire e
NOTA
m
o
c
o

sa d
ord
De ac gramas de material
e
o
r
dos p a colheita d ver
l,
de
a
o
e
anim
ng
ico-far omente pelo
g
f
o
s
s
e
a
Oficial.
alizad
ser re Veterinrio
o
Servi

Lquido esofgico farngeo (LEF)

2. Onde colher

Mucosa da regio farngea


e anterior do esfago

Introduo do coletor na
boca do

animal

3. Como colher

54

Volume de muco
(ideal: 15 mL, mnimo:
5 mL) diludo em igual
volume de meio

5. Meio
Earle 2 vezes
concentrado, com
antibitico e pH 7,4-7,6

6. Recipiente
Frasco de boca
larga, com tampa de
rosca, esterilizado

7. Temperatura da amostra para transporte


FOTO: LUS DAS

Antes da colheita, os
animais devero permanecer
em jejum, se possvel, por um
perodo de 12 horas;
Uma hora antes da colheita, Realizao dos movimentos
administrar gua para eliminar para a colheita do LEF
eventuais restos alimentares;
Colher as amostras de LEF por meio de
coletores (copo Probang) previamente
esterilizados, utilizando um para cada
animal. Se no houver um nmero
suficiente de coletores, realizar a lavagem
em gua limpa e desinfetar em gua
fervente antes de colher amostra em
outro animal e assim sucessivamente.
Transf
Introduzir o coletor por sobre a lngua do animal conteerir o
do do
pressionando-o levemente na glote at o copo ser copo coletor
engolido pelo animal (certificar que o coletor no para frasco de
esteja na traquia, situao em que o animal ir boca larga
tossir, tentando expelir o objeto);
Realizar o raspado da mucosa esofgica-farngea, fazendo
movimentos suaves com o coletor (at 5 vezes) e retir-lo com
cuidado para no derramar o contedo;
Transferir o material LEF para frasco de boca larga e adicionar
uma quantidade igual de Meio Earle 2X;
Fechar o frasco, agitar e realizar a desinfecao externa.

4. Quantidade

Refrigerada (+2C a +8C); ou Congelada (-20C)

8. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


NOTA

Amostras para ensaios


com fins legais devem ser
lacradas ou seladas de
modo que o acesso a elas
seja possvel somente pelo
rompimento do lacre ou selo
.

At 48 horas

9. Exames
Pesquisa direta do agente
(Febre Aftosa)
55

1. Material
Exsudato (secrees)

rio
Solicitar ao laborat
o.
iad
pr
ro
ap
io
o me

3. Como colher

b) Pesquisa de bactrias

a) Pesquisa de vrus

5. Meio

2. Onde colher
Mucosas oral, nasal ou
outro tecido afetado por
um processo inflamatrio

4. Exames

NOTA

Meios conservantes
para transporte da
amostra (Tioglicolato
de sdio, BHI e Eagle)

a) Eagle 2 vezes
concentrado, com
antibitico e 10% Soro
Fetal Bovino (pH 7,4-7,6)

b) Tioglicolato
de sdio

6. Recipiente

Colher com suabe estril,


friccionando energicamente o local

Tubo de ensaio esterilizado

Acondicionando
suabe em
meio Tioglicolato
de sdio

7. Temperatura da amostra

para transporte

Refrigerada (+2C a +8C)


NOTA

Utilizar um suabe para


cada amostra.
56

8. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 48 horas
57

1. Material

5. Quantidade

a e b) Fragmentos com, no mnimo,


0,5 cm de dimetro por 0,3 cm de espessura

Bipsia de pele e mucosa

2. Onde colher
De preferncia na rea de
transio com e sem leso

a) 3 mL de Eagle

ou soluo salina
fisiolgica - (NaCl
0,9%) estril

3. Como colher

6. Meio
b) Formol tamponado 10%
(Volume de formol, pelo menos,
10 vezes maior que o volume de
tecido a ser fixado)

Com punch, tesoura,


pina e bisturi

a) Tubo de ensaio esterilizado,

capacidade de acordo com o


tamanho do fragmento

Realizar tricotomia e antissepsia;


a. Inserir o punch, gir-lo e retirar
fragmento;
b. Com auxlio de pina e tesoura,
cortar o fragmento para a bipsia;
c. Fragmento extrado;
d. Submergir um fragmento
em meio Eagle (ou em soluo
salina); e
e. outro fragmento em formol 10%.

4. Exames

a) Pesquisa direta do agente


58

7. Recipiente

b) Frasco, capacidade

de acordo com o
tamanho do fragmento

8. Temperatura da amostra para transporte


a) Refrigerada
(+2C a +8C)

b) Ambiente ou Refrigerada
(+2C a +8C). Nunca congelar

9. Tempo crtico para chegada ao laboratrio

d
e

b) Histopatolgico

a) At 48 horas

b) Remeter no mesmo tempo que as


amostras refrigeradas. Os fragmentos
em soluo de formol 10%, mesmo
no completamente fixados, podem
ser enviados ao laboratrio.
59

1. Material

5. Meio

Raspado de pele

Nenhum

6. Recipiente
Coletor universal

2. Onde colher
Na periferia das
reas lesionadas

Nonononon
nonon non

3. Como colher
Fazer o raspado
profundo com
lmina de bisturi

7. Temperatura da
amostra para transporte
Refrigerada
(+2C a +8C)

8. Tempo crtico
4. Quantidade

para chegada
ao laboratrio
At 48 horas

Cerca de 1 g

9. Exames
Pesquisa direta do agente
60

61

1. Material
Sangue

2. Onde colher
a) Veia jugular;
b) Veia coccgea;
c) Veia mamria; e
d) em sunos, veia
cava cranial

3. Como colher
Utilizar sistema a vcuo
ou seringa e agulha

a) Obteno de soro

b) Sangue total

Colher o sangue em tubo sem


anticoagulante; manter o tubo
inclinado em temperatura
ambiente at o sangue
coagular e retrair o cogulo,
exsudando o soro (30 a 60
min). Transferir o soro para
outro tubo (tampa com rosca
ou tipo Eppendorf).
Se for utilizado tubo com
gel separador,
ser necessrio
centrifugar o
sangue no
mnimo
30 minutos
aps a
colheita e
no mximo
2 horas e enviar
o soro no prprio tubo.

O sangue dever ser


colhido e enviado
em tubo com
anticoagulante (EDTA
k2). Homogeneizar
suavemente,
invertendo o tubo
(cerca de 6 vezes)

a) Pesquisa de anticorpos

4. Recipiente e quantidade
a) Tubo de ensaio

sem anticoagulante:
capacidade 10 mL.

b) Tubo de ensaio
com EDTA K2:
capacidade 5 mL

5. Exames

b) Pesquisa direta

do agente

6. Temperatura da amostra para transporte


a e b) Refrigerada (+2C a +8C)

7. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 48 horas

62

63

Sistema respiratrio
As doenas respiratrias so multifatoriais e provocam
mortalidade, especialmente em animais jovens.
Alteraes climticas, manejo zootcnico e instalaes
inadequadas estressam e debilitam o animal,
predispondo-o a infeces. O diagnstico deve
basear-se no conjunto de informaes, tanto clnicas
quanto epidemiolgicas e na confirmao laboratorial.
O material clnico de eleio para o diagnstico
diferencial deve incluir tecido pulmonar e linfonodos
regionais e secrees respiratrias e oculares. O soro
sanguneo pode auxiliar no diagnstico.

64

Principais doenas do sistema


respiratrio e espcies acometidas
ESPCIES ACOMETIDAS
DOENAS
Tuberculose
(Mycobacterium
bovis) e outras
micobacterioses

Linfadenite caseosa

Pleuropneumonia
contagiosa
(Micoplasmose,
Actinobacilose)

Pneumonia
causada por
agentes piognicos

Doena de Aujeszky

Rinite atrfica
(Bordetella
bronchiseptica
e Pasteurella
multocida)

Influenza

Vrus Sincicial
Respiratrio

Mormo

Rinopneumonite
equina

Arterite viral equina

Maedi-Visna

65

Material para colheita de


amostras para diagnstico de
doenas do sistema respiratrio

Tbua para
corte de rgos

Coletor universal estril

Tesoura
para
destrinchar
ossos

Pedra para
afiar facas
Tubos a vcuo para
colheita de sangue,
com gel separador, sem
e com anticoagulante

Meios para transporte de


amostras (BHI, A3XB, Eagle)

Microtubos tipo
Eppendorf

Facas

Tesouras cirrgicas

Tubos
com tampa
com rosca

Suabe estril (Comercial)

Agulha para colheita


de sangue a vcuo

Sistema para colheita


de sangue a vcuo
66

Tubo tipo
KMA
(tampa
com rosca)

Pina dente
de rato
Cabo de bisturi
Lmina de bisturi
Cary Blair
67

Amostras para diagnstico de


doenas do sistema respiratrio

5. Quantidade

a) Fragmentos de 20 g e, pelo b) Fragmentos de 3x1x1 cm


menos, um linfonodo regional
de cada rgo

1. Material
Pulmo e
linfonodos

6. Meio

a) Nenhum

b) Formol tamponado 10% (volume


de formol, pelo menos 10 vezes maior
que o volume de tecido a ser fixado)

2. Onde colher
rgo acometido e
linfonodos regionais

3. Como colher

Leses caseosas em pulmo de


animal acometido por tuberculose

Com tesoura e
pina estril, colher
fragmentos das
reas com leses
(caseosa, purulenta,
marmorizada, outras)

7. Recipiente

a) Coletor

universal estril

b) Frasco, capacidade de acordo


com o tamanho do fragmento

8. Temperatura da amostra para transporte


a) Refrigerada
(+2C a +8C)

b) Ambiente ou
Refrigerada (+2C a +8C)

NOTA

Fragmento de leso o
material de eleio para
diagnstico de tuberculose.

4. Exames

a) Pesquisa direta do agente

68

9. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


a) At

48 horas

b) Histopatolgico

b) Remeter no mesmo tempo que a amostra

refrigerada. Os fragmentos em soluo de


formol 10%, mesmo no completamente
fixados, podem ser enviados ao laboratrio

69

5. Meio

1. Material

a) Submergir o suabe

Secrees

b) Submergir o suabe
em 2 mL de: A3XB para
Mycoplasma spp; e
Tioglicolato de sdio, BHI
ou Cary Blair para outras
bactrias

em 2 mL de Eagle
2 vezes concentrado,
com antibitico

2. Onde colher
Narinas

a
Meio Eagle

3. Como colher

b Meio BHI

Limpar o local com gaze estril


umedecida em soluo fisiolgica,
retirando crosta, se houver. Colher
com suabe estril, friccionando
energicamente o local, utilizando
um suabe para cada narina.
Submergir o suabe no meio para
transporte indicado.

6. Recipiente
Tubo de ensaio
estril com meio
apropriado

7. Temperatura da amostra

para transporte

NOTA

4. Exames
a) Pesquisa de vrus
70

b) Pesquisa de bactrias

Soro sanguneo pode auxiliar


no
diagnstico de algumas doe
nas
respiratrias; por esse motivo,
enviar
o soro junto com o material par
a
pesquisa direta do agente.

Refrigerada
(+2C a +8C)

8. Tempo crtico
para chegada
ao laboratrio
At 48 horas
71

1. Material
Sangue

2. Onde colher
a) Veia jugular;
b) Veia coccgea;
c) Veia mamria; e
d) em sunos, veia
cava cranial

3. Como colher
Utilizar sistema a vcuo
ou seringa e agulha

a) Obteno de soro

b) Sangue total

Colher o sangue em tubo sem


anticoagulante; manter o tubo
inclinado em temperatura
ambiente at o sangue
coagular e retrair o cogulo,
exsudando o soro (30 a 60
min). Transferir o soro para
outro tubo (tampa com rosca
ou tipo Eppendorf).
Se for utilizado tubo com
gel separador,
ser necessrio
centrifugar o
sangue no
mnimo
30 minutos
aps a
colheita e
no mximo
2 horas e enviar
o soro no prprio tubo.

O sangue dever ser


colhido e enviado
em tubo com
anticoagulante (EDTA
k2). Homogeneizar
suavemente,
invertendo o tubo
(cerca de 6 vezes)

a) Pesquisa de anticorpos

4. Recipiente e quantidade
a) Tubo de ensaio

sem anticoagulante:
capacidade 10 mL.

b) Tubo de ensaio
com EDTA K2:
capacidade 5 mL

5. Exames
b) Pesquisa direta

do agente

6. Temperatura da amostra para transporte


a e b) Refrigerada (+2C a +8C)

7. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 48 horas

72

73

Sistema gastrintestinal
Dada a importncia da alimentao nos animais de
produo e a alta incidncia de problemas com ela
relacionados, faz-se necessria uma avaliao do
manejo e das instalaes, assim como uma inspeo
dos alimentos, armazns e reas de pastoreio. As
caractersticas da alimentao e seu manejo podem
ser a origem de muitos problemas, principalmente
digestivos e metablicos. Para pesquisar a causa
do distrbio, alm do exame clnico geral, testes
complementares de amostras de alimento, do suco
ruminal, do sangue e/ou das fezes so de grande
valor no reconhecimento e na diferenciao de
doenas dos rgos digestivos.

74

Principais doenas do sistema


gastrintestinal e espcies acometidas
ESPCIES ACOMETIDAS

DOENAS
TGE Gastrenterite
Transmissvel

Enterites bacterianas
(Colibacilose,
salmonelose,
campilobacteriose)

Disenteria suna
(Brachyspira
hyodysenteriae)

Enterotoxemia
(Clostridium
perfringens)

Isosporose
(Isospora suis)

Verminoses
ou Helmintoses

Rotavirose em
animais jovens

Diarria Viral Bovina

Febre Catarral
Maligna

Intoxicaes

75

Material para colheita de


amostras para diagnstico de
doenas do sistema gastrintestinal

Saco plstico
estril

Tubos a vcuo
para colheita de
sangue, com gel
separador, sem e
com anticoagulante
(EDTA e heparina)

Luvas de
palpao

Coletor
universal
estril

Tubo tipo
KMA (tampa
com rosca)

Tubo com
tampa
com rosca

Adaptadores
para colheita
de sangue a
vcuo

Luvas
de ltex

Sonda
gstrica

Agulha para colheita de sangue a vcuo

Microtubos tipo
Eppendorf

Sistema para colheita


de sangue a vcuo

Seringa e agulhas esterilizadas


76

77

3. Quantidade

Amostras para diagnstico de


doenas do sistema gastrintestinal

Cerca de 10 mL

1. Material

4. Meio

Contedo ruminal

Nenhum

2. Como colher
Por sonda gstrica ou ruminocentese
Introduzir a sonda gstrica via oral e retirar o lquido ruminal,
criando vcuo por um sistema manual ou bomba eltrica.
No caso de ruminocentese, a puno feita no abdmen
esquerdo do animal, no ponto mdio entre a ltima costela e
articulao femorotibiopatelar.
Fazer tricotomia e antissepsia numa rea de 5cm x 5cm.
Fazer aplicao subcutnea de 2 a 3 mL de lidocana 2%.
Introduzir a cnula ventrocranial e aspirar o contedo
com seringa de 20 mL. Se ocorrer obstruo da agulha,
injetar ar com outra seringa. Obter de 3 a 10 mL de lquido
ruminal. Antes de retirar a agulha, introduzir 5 mL de soluo
fisiolgica estril, para evitar aderncia. Finalmente, retirar
seringa e agulha, de forma suave e conjunta.

5. Recipiente
Frasco estril

6. Temperatura

da amostra
para transporte

Refrigerada (+2C a +8C)


ou Congelada (-20C)
NOTA

Resfriar ou congelar o
mais
rpido possvel aps a
colheita
fazendo chegar ao lab
oratrio,
nessas condies.

7. Tempo crtico

para chegada
ao laboratrio
At 48 horas

8. Exames
Toxicolgicos
78

79

1. Material
Fezes

3. Quantidade
20 g de fezes por animal. No caso de
rebanhos, colher 10 a 15 amostras de cada
faixa etria. Utilizar um frasco por animal.

2. Como colher
Diretamente do
reto (utilizando
luva) ou da poro
central do bolo fecal
(utilizando esptula),
imediatamente
aps defecao

4. Meio
Nenhum

5. Recipiente
Coletor universal estril

NOTA

Em caso de material de necrps


ia,
enviar um fragmento de ala
intestinal
com o contedo fecal, amarran
do as
extremidades com barbante.
Alm disso, enviar fragmentos
de
fgado e rim, uma parte refrigera
da
para exames toxicolgicos e
outra
parte em formol a 10% para exa
mes
histopatolgicos.
A identificao de substncia
txica
nestes rgos pode auxiliar no
diagnstico da causa morte.
80

6. Temperatura da amostra para transporte


Refrigerada (+2C a +8C)

7. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 48 horas

8. Exames
Pesquisa direta do agente
81

1. Material
Alimentos para nutrio animal

2. O que colher
Rao comercial, gros, forragens frescas e conservadas
(silagem e feno), restos de cultura, palhadas e suplementos

3. Como colher
Retirar amostras parciais de cada alimento a ser
analisado, colhidas em diferentes pontos do local de
interesse: campo, armazm, sacarias, cocho, silos etc.
Dessa amostra mdia, aps homogeneizao, retirar
uma nica amostra, que deve ser representativa da
mdia do material a ser analisado.
NOTA

um nico
Nunca retirar a amostra de
entativa
res
rep

ser
no
s
poi
ponto,
quanto
es
clus
e no permitir con
o.
dut
pro
do
qualidade

4. Quantidade
a) 1 kg para

b) 2 kg para alimentos volumosos,


raes, gros e
como silagem, feno e para alimentos
concentrados,
que tem tendncia separao como
entre outros
raes e concentrados contendo uria,
alimentos.
farelo de algodo, entre outros produtos.

NOTA

Efetuar as colheitas em
ente
vrios pontos, principalm
para produtos que
no apresentam uma
a ou que
homogeneidade perfeit
arao.
sep

cia
tenham tendn

5. Recipiente
Sacos plsticos
resistentes para
produtos slidos
Frascos de polietileno
para produtos lquidos
(melao, gordura)

6. Temperatura da amostra para transporte


a) Ambiente (material seco)

b) Refrigerada
(+2C a +8C) para
material verde ou mido

7. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 48 horas

8. Exames
Anlise qumica e pesquisa de agente
(toxinas e bactrias, entre outros agentes)
82

83

1. Material

a) Obteno de soro
Colher o sangue em tubo sem
anticoagulante; manter o tubo
inclinado em temperatura
ambiente at o sangue
coagular e retrair o cogulo,
exsudando o soro (30 a 60
min). Transferir o soro para
outro tubo (tampa com rosca
ou tipo Eppendorf).
Se for utilizado tubo com
gel separador,
ser necessrio
centrifugar o
sangue no
mnimo
30 minutos
aps a
colheita e
no mximo
2 horas e enviar
o soro no prprio tubo.

Sangue

2. Onde colher
a) Veia jugular;
b) Veia coccgea;
c) Veia mamria; e
d) em sunos, veia
cava cranial

3. Como colher
Utilizar sistema a vcuo
ou seringa e agulha

a) Pesquisa

4. Recipiente e quantidade
a) Tubo de
ensaio sem
anticoagulante:
capacidade 10 mL

b e c) Sangue total

b) Tubo de
ensaio com
EDTA K2:
capacidade
5 mL

de anticorpos

c) Tubo de
ensaio com
heparina:
capacidade
de 5 a 10 mL

b) Pesquisa direta
do agente

O sangue dever
ser colhido e
enviado em tubo
com anticoagulante
(EDTA ou heparina).
Homogeneizar
suavemente,
invertendo o tubo
(cerca de 6 vezes)

EDTA

Heparina

5. Exames
c) Toxicolgicos
e bioqumicos

6. Temperatura da amostra para transporte


a, b e c) Refrigerada (+2C a +8C)

7. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 48 horas

84

85

Sistema reprodutor e urinrio


Os problemas reprodutivos esto associados
a repetio de cio, infertilidade, descarte prematuro
de reprodutores, abortamento, mumificao fetal,
nascimento de bezerros com malformao
e fracos, entre outros fatores. A etiologia das
doenas da reproduo multifatorial, podendo
a causa ser infecciosa ou no infecciosa, e requer
diagnstico diferencial para identificao do agente.
Para tanto, devem ser examinadas prioritariamente
amostras de tecidos fetais refrigerados e fixadas
em formol, secrees cervicovaginal e prepucial.
A pesquisa de anticorpos no soro sanguneo pode
auxiliar no diagnstico.

86

Principais doenas do sistema reprodutor


e urinrio e espcies acometidas
ESPCIES ACOMETIDAS
DOENAS
Brucelose

Leptospirose

Campilobacteriose
Genital

Micoplasmose

Neosporose

(raro)

Tricomonase
Genital Bovina

Rinotraquete
infecciosa bovina/
Vulvo vaginite
postular infecciosa

Diarria viral bovina

Toxoplasmose

Parvovirose

Doena de Aujeszky

Peste suna clssica

Sndrome Reprodutiva e Respiratria


dos Sunos (SRRS)

Circovirose

Clamidiose

Arterite viral equina

Aborto equino
por herpesvirus

X
87

Material para colheita de amostras


para diagnstico de doenas do
sistema reprodutor e urinrio

Coletor
universal estril
Saco plstico
Tbua para
corte de rgos

Suabe estril

Suabe estril

Suabe acoplado
em pipeta de
inseminao artificial

Pipeta de
inseminao artificial

Tesoura
para
destrinchar
ossos

Pedra para
afiar facas
Facas
Tubo com
tampa
com rosca

Agulha para colheita


de sangue a vcuo

Microtubos tipo
Eppendorf

Sistema para colheita


de sangue a vcuo

Papel
toalha
Meios para transporte
de secrees (BHI,
A3XB, Eagle e Lactopep)
88

Tubos a vcuo para colheita de


sangue, com gel separador,
sem e com anticoagulante

Tubo tipo
KMA (tampa
com rosca)
Gaze

Palhetas
de smen
89

3. Recipiente

Amostras para diagnstico de


doenas do sistema reprodutor
e urinrio

Saco plstico
(no mnimo,
3 sacos para
cada feto)

1. Material
Fetos de at 2Kg

2. O que colher

4. Temperatura
da amostra para
transporte

Feto bovino

Feto inteiro

Refrigerada (+2C a +8C)

5. Tempo crtico

Feto ovino
Feto caprino

para chegada
ao laboratrio
At 48 horas

NOTA

No congelar.

O laboratrio ir necropsiar e colher


as amostras para os diversos exames.
Colher soro sanguneo da fmea
que abortou.
Fetos sunos

90

6. Exames
Pesquisa direta
e indireta do
agente e exame
histopatolgico
91

5. Quantidade

1. Material

a1) Fragmentos de cada rgo b) Fragmento de cada

Feto e natimorto
com mais de 2 Kg

com cerca de 20 g

a2) 3 mL de cada fluido

6. Meio

2. O que colher

7. Recipiente
Colhendo contedo gstrico

3. Como colher
Necropsiar e colher os fragmentos de rgos com pina
e tesoura esterilizadas. Escolher parte do rgo com
leso, se no houver leso, colher aleatoriamente. Colher
os fluidos corporais com seringa e agulha esterilizadas

a1) Pesquisa direta do agente


a2) Anticorpos
Fluido
tracoabdominal

92

b) rgos fixados com formol


tamponado 10% (volume de formol,
pelo menos 10 vezes maior que o
volume de tecido a ser fixado).

a) Nenhum

Fgado, pulmo, bao,


sistema nervoso central,
corao, rim, timo e
fluidos corporais
(lquido toracoabdominal
ou pericrdico e
contedo gstrico)

4. Exames

rgo com cerca de


3x3x1 cm

b) Histopatolgico

a1) rgos: saco plstico


ou coletor universal.
a2) Fluido: tubo de ensaio
esterilizado ou coletor universal

b) Frasco; capacidade

de acordo com o
tamanho do fragmento

8. Temperatura da amostra para transporte

a) Refrigerada
(+2C a +8C)

b) Ambiente ou
Refrigerada (+2C a +8C).
Nunca congelar

9. Tempo crtico para chegada ao laboratrio

a) At
48 horas

b) Remeter no mesmo tempo que a amostra

refrigerada. Os fragmentos em soluo de


formol 10%, mesmo no completamente
fixados, podem ser enviados ao laboratrio
93

1. Material

4. Quantidade
a) 20 g

Placenta

b) Fragmento de 3x3x1 cm

2. Como colher
Escolher sempre reas de transio do tecido com e sem
leso. Nos ruminantes, colher algumas carnculas

5. Meio
a) Nenhum

b) Formol tamponado 10% (Volume


de formol, pelo menos 10 vezes maior
que o volume de tecido a ser fixado)

a) Saco plstico
ou coletor universal

b) Frasco; capacidade

de acordo com o
tamanho da pea

7. Temperatura da amostra para transporte

3. Exames

a) Pesquisa direta do agente b) Exame histopatolgico

a) Refrigerada
(+2C a +8C)

b) Ambiente ou
Refrigerada (+2C a +8C).
Nunca congelar

8. Tempo crtico para chegada ao laboratrio

a) At
48 horas

94

6. Recipiente

b) Remeter no mesmo tempo que a amostra

refrigerada. Os fragmentos em soluo de


formol 10%, mesmo no completamente
fixados, podem ser enviados ao laboratrio
95

1. Material

3. Quantidade
Smen in natura: 0,5 mL
Smen industrializado:
10 palhetas de 0,5 mL

Smen

2. Como colher

4. Recipiente

Excitar o touro
com fmea ou
manequim, ou usar
eletroejaculador.
Colher o smen,
utilizando vagina
artificial

5. Temperatura da amostra
OA

para transporte

Refrigerada (+2C a +8C)

FOTO: CRVLAG

FOTO: CRVLAGOA

Palheta ou
tubo de ensaio
esterilizado

NOTA

O volume de sm
en a ser
enviado ao labor
atrio depende
das anlises que
sero realizadas;
na dvida, consult
ar o laboratrio.
Identificar individu
almente
as amostras.

6. Tempo crtico
para chegada
ao laboratrio

At 48 horas

7. Exames
Pesquisa direta do agente
96

97

NOTA

1. Material
Muco prepucial

2. Onde colher
Cavidade prepucial

nter o touro
Antes da colheita, ma
nimo 07 dias.
m
no
l
em repouso sexua
do muco com
Evitar contaminao
urina.
her primeiro
Quando for o caso, col
is proceder
po
o suabe prepucial e de
ao lavado.
Solicitar ao laboratrio
s.
os meios apropriado

3. Como colher

a) Pesquisa
de vrus

98

a) Submergir

c) Submergir o
b) Submergir o
o suabe
suabe em 2 mL suabe em 10 mL
em 2 mL de
de Lactopep
de: Tioglicolato
Eagle 2 vezes
de sdio ou BHI (0,5 g de Lactopep
concentrado,
para 10 mL
(Campylobacter spp),
com antibitico
A3xB Mycoplasma de soluo salina
0,85%)
spp) e Cary Blair
(outras bactrias)
c

Tcnica do suabe:
Fazer a tricotomia do stio
prepucial e lavar externamente
o prepcio, utilizando apenas
gua, e enxugar com
papel toalha. Colher muco,
introduzindo no fundo de saco
da cavidade prepucial um suabe
estril acoplado a uma pipeta de
inseminao artificial. Friccionar
o suabe nas mucosas prepucial
e peniana. Retirar o suabe
e submergi-lo no meio para
transporte apropriado. Utilizar
um suabe para cada amostra.

4. Exames

5. Meio

b) Pesquisa de

bactrias

6. Recipiente
Tubo de ensaio

7. Temperatura da amostra para transporte


a e b) Refrigerada (+2C a +8C)

c) Pesquisa de
Tritrichomonas foetus

c) Ambiente

8. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


a e b) At 48 horas

c) At 6 dias
99

1. Material
Muco prepucial

2. Onde colher
Cavidade prepucial

3. Como colher
Tcnica do lavado prepucial:
Fazer a tricotomia do stio
prepucial e lavar externamente
o prepcio utilizando apenas
gua. Enxugar com papel toalha.
Proceder lavagem da cavidade
prepucial, utilizando uma pipeta de
inseminao artificial acoplada a um
tubo flexvel ligado a uma seringa
com 40 mL de soluo salina estril
0,85%. Introduzir a pipeta at o
fundo de saco da cavidade prepucial
e injetar o volume total da soluo
salina. Retirar a pipeta e obliterar
o stio prepucial com uma das
mos e, com a outra, massagear
vigorosamente o prepcio por um
minuto. Liberar o stio prepucial
e recolher o lquido no frasco
contendo meio Lactopep (em p).
Homogeneizar e completar o volume
com soluo salina, at obter 40 mL.
100

ro
r o tou
mante
,
s.
a
ia
it
d
e
0
da colh al de 07 a 1
s
te
n
A
exu
o
ouso s
o muc
em rep
ao d
in
m
ta
on
Evitar c
a.
in
r
u
s, no
com
olheita
ias 3 c e 7 dias,
r

s
s
e
c
d
So ne m intervalo sexual.
uso
o, co
o
im
p
e
n
r
m
o
ndo-se
mante

NOTA

4. Quantidade
40 mL de soluo
salina 0,85%

5. Meio

Lactopep (proporo:
2 g/40 mL de soluo salina)

6. Recipiente
Tubo cnico

7. Temperatura
da amostra para
transporte
Ambiente

8. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 06 dias

9. Exame
Pesquisa de Tritrichomonas foetus
101

NOTA

1. Material

O perodo ideal pa
ra colheita
de muco vaginal
nos dias
subsequentes ao
estro (evitar colhe
ita
logo aps a cpu
la).

Muco cervicovaginal

2. Onde colher

O uso de espcu
lo fundamenta
l
para obteno de
amostra de muc
o
cervicovaginal de
boa qualidade.

Cavidade vaginal

3. Como colher
Lavar a regio vulvar apenas com gua e secar com papel
toalha. Adaptar o suabe a uma pipeta de inseminao
artificial e com auxlio de um espculo, introduzir o suabe
na vulva at a crvix. Friccionar a mucosa, retirar o suabe e
submergir em tubo de ensaio contendo meio de transporte.
Utilizar um suabe para cada amostra.

4. Exames

a) Pesquisa
de vrus

b) Pesquisa de

bactrias

b) Submergir o
c) Submergir o
o suabe
suabe em 10 mL
suabe em 2 mL de:
de Lactopep
Tioglicolato de
em 2 mL de
Eagle 2 vezes
sdio ou BHI (0,5 g de Lactopep
para 10 mL
concentrado, (Campylobacter spp),
com antibitico A3xB (Mycoplasma de soluo salina
0,85%)
spp) e Cary Blair
(outras bactrias)

102

Tubo de ensaio
esterilizado contendo
meio apropriado

c) Pesquisa de
Tritrichomonas foetus

5. Meio
a) Submergir

6. Recipiente

7. Temperatura da amostra para transporte


a e b) Refrigerada

(+2C a +8C)

c) Ambiente

8. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


a e b) At 48 horas

c) At 6 dias
103

1. Material
Urina

2. Onde colher
A amostra de urina pode ser obtida da mico
espontnea, de mico induzida, por puno vesical
ou mediante cateterismo uretral em fmeas.

3. Como colher
Antes da colheita, higienizar a regio da vulva ou
prepcio com gua e sabo, enxaguar e secar com
papel toalha.
Colher o jato intermedirio da urina com coletor
universal estril.
H vrios procedimentos para induzir a mico:
- A obstruo dos olhos e boca em pequenos
ruminantes, durante uns segundos, tanto em fmeas
como em machos, estimula a eliminao de urina.
- Induo da mico em touros por massagem suave
e rtmica no stio prepucial e, em vacas, massagem
na vulva. Alertamos que esses mtodos s funcionam
quando a bexiga est cheia.
- Uso de furosemida (diurtico) por via intravenosa
favorece a mico dentro de 10 a 15 minutos, porem no
deve ser utilizado em animais suspeitos de urolitase

4. Exames

a) Pesquisa para b) Pesquisa para


c) Tcnicas de
Leptospira spp.
Brucella spp. biologia molecular
104

5. Meio e quantidade
a) Meio de Fletcher.

Colocar 1 mL de urina
em 9 mL de soluo
salina tamponada,
pH 7,2 e inocular 2 mL
dessa diluio em
tubo contendo meio
de Fletcher.

a e b) Tubo de ensaio

contendo meio apropriado

b) BHI.
Colocar 1 mL
da urina em
3 mL em tubo
contendo meio
de transporte
(BHI).

c) Nenhum.

Enviar o
restante de
urina, cerca
de 20 mL.

6. Recipiente

c) Coletor universal estril

NOTA

Os meios
especficos so
fornecidos pelo
laboratrio.

7. Temperatura da amostra para transporte


Refrigerada (+2C a +8C)

8. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 48 horas
105

1. Material
Sangue

2. Onde colher
a) Veia jugular;
b) Veia coccgea;
c) Veia mamria; e
d) em sunos, veia
cava cranial

3. Como colher
Utilizar sistema a vcuo
ou seringa e agulha

a) Obteno de soro

b) Sangue total

Colher o sangue em tubo sem


anticoagulante; manter o tubo
inclinado em temperatura
ambiente at o sangue
coagular e retrair o cogulo,
exsudando o soro (30 a 60
min). Transferir o soro para
outro tubo (tampa com rosca
ou tipo Eppendorf).
Se for utilizado tubo com
gel separador,
ser necessrio
centrifugar o
sangue no
mnimo
30 minutos
aps a
colheita e
no mximo
2 horas e enviar
o soro no prprio tubo.

O sangue dever ser


colhido e enviado
em tubo com
anticoagulante (EDTA
k2). Homogeneizar
suavemente,
invertendo o tubo
(cerca de 6 vezes)

a) Pesquisa de anticorpos

4. Recipiente e quantidade
a) Tubo de ensaio

sem anticoagulante:
capacidade 10 mL.

b) Tubo de ensaio
com EDTA K2:
capacidade 5 mL

5. Exames
b) Pesquisa direta

do agente

6. Temperatura da amostra para transporte


a e b) Refrigerada (+2C a +8C)

7. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 48 horas

106

107

Sistemas circulatrio e linftico


Doenas do sistema circulatrio e linftico produzem
sinais clnicos diversos, tais como edema subcutneo,
colorao anormal de mucosas (palidez, cianose,
congesto e ictercia), hemorragias (petquias e
sufuses) na pele e nos rgos internos, edema de
rgos, principalmente do pulmo e do crebro. Esses
sinais so decorrentes da ao de alguns patgenos
que lesionam o endotlio e podem causar dificuldade
respiratria, cansao, anorexia, apatia e prostrao no
animal. O diagnstico diferencial utiliza fragmentos de
rgos refrigerados e fixados em formol, sangue com
anticoagulante e soro sanguneo.

108

Principais doenas dos sistemas


circulatrio e linftico e espcies acometidas
ESPCIES ACOMETIDAS
DOENAS
Peste Suna Clssica

Peste Suna Africana

Circovirose

Diarria viral bovina

Carbnculo
Hemtico (Antrax)

Hemoglobinria
bacilar

Leptospirose

Erisipela

Doena do Edema

Babesiose
(protozorios
sanguneos)

Anaplasmose

Prpura
hemorrgica

Anemia
infecciosa equina

109

Material para colheita de amostras


para diagnstico de doenas dos
sistemas circulatrio e linftico

Potes de plstico, de boca


larga e tampa de rosca, com
capacidade para
diferentes volumes

Tubos a vcuo para colheita de


sangue, com gel separador, sem
e com anticoagulante

Agulhas para
colheita de
sangue a vcuo

Seringa e
agulha estreis

Tubo
com
tampa
com
rosca

Porta-lminas
redondo

Sistema para colheita


de sangue a vcuo

Saco plstico

Serrote de arco

Tubo tipo
KMA (tampa
com rosca)
Tbua
para corte
de rgos

Frasco de formol
35-40% (para
utilizao, diluir
uma parte de
formol em 9
partes de gua)

Microtubos tipo
Eppendorf
Cizalha
Porta-lminas
Tesoura
para
destrinchar
ossos

Pedra para
afiar facas
Facas
110

Talhadeira

Gancho
Marreta
Faca

Machado
111

3. Exames

Amostras para diagnstico de


doenas dos sistemas circulatrio
e linftico

a Pesquisa direta do agente

Rim

Pulmo

Corao

1. Material
rgos - sistema nervoso central, fgado, bao,
pulmo, rim, corao, linfonodos e intestino delgado
e grosso

Fgado

Bao

2. Como colher
Linfonodo

Necropsiar o animal e colher os fragmentos com tesoura


ou bisturi e pina esterilizados, evitando danos ao tecido
durante a retirada. Escolher parte do rgo com leso;
se no houver leso, colher aleatoriamente. Selecionar
a poro do intestino delgado com contedo, ligar e
seccionar. Colher linfonodos regionais.

Fragmentos de
rgos que sero
remetidos ao
laboratrio, sob
refrigerao

Ala
intestinal
ligada

um dos
hemisfrios
cerebrais
cerebelo
Medula
cervical

112

Fatia do
tlamo

113

b Exame histopatolgico
Pulmo

Rim

Bao
Intestino
delgado

5. Meio

a) Nenhum

b) Formol tamponado 10% (volume de


formol, pelo menos 10 vezes maior que o
volume de tecido a ser fixado)

Fgado

Corao

Linfonodos

leo terminal

Fragmentos de rgos
que sero remetidos
ao laboratrio, fixados
em formol

6. Recipiente

b) Frasco; capacidade de acordo

a) Saco plstico
ou coletor universal

com o tamanho do fragmento

ATENO
Outro hemisfrio cerebral

go
Embalar cada r
para
te
en
individualm
tes
en
ag
de
a
uis
pesq
a Fragmentos de SNC e

Tronco
enceflico

outros rgos, embalados


em sacos plsticos
esterilizados (refrigerados)
Metade do cerebelo

(+2C a +8C)

a1) Fragmentos de 20 g

de cada rgo
a2) 10 a 30 cm de
intestino delgado
(ala ligada)
114

b1) Fragmentos de 3x1x1cm


de cada rgo

b2) 10 cm de rgo tubular

(leo com placas de Peyer)

fixados
em formol

7. Temperatura da amostra para transporte

a) Refrigerada

4. Quantidade

b Tecidos

b) Ambiente ou Refrigerada

(+2C a +8C)

8. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


a) At
48 horas

b) Remeter no mesmo tempo que a amostra


refrigerada. Os fragmentos em soluo de
formol 10%, mesmo no completamente
fixados, podem ser enviados ao laboratrio

115

1. Material

Preparao de um esfregao de
sangue a campo, imediatamente
aps a colheita da amostra.

Sangue capilar e venoso

2. Onde colher

1. Manter a lmina horizontalmente entre o polegar


e o indicador.
2. Colocar uma pequena gota de sangue sem
anticoagulante na extremidade da lmina. (figura a)
3. Colocar uma segunda lmina (extensora) contra
a superfcie da lmina, em frente gota de sangue,
formando um ngulo de 45.
4. Movimentar a lmina para trs, de modo que entre em
contato com a gota de sangue, pressionando-a at que a
gota se espalhe por toda a borda da lmina. (figura b)
5. Impelir a lmina, mantendo sempre o mesmo ngulo,
num s movimento firme e uniforme, sem separar uma
lmina da outra. Forma-se ento uma delgada camada
de sangue. (figura c)
6. Secar rapidamente ao ar e identificar com lpis.
7. Fixar por dois minutos em lcool metlico, retirar e secar.
8. Enviar ao laboratrio em porta-lminas.
NOTA

A sensibilidade da tcnica pode ser aumentada com


a confeco de esfregaos sanguneos a partir da
puno de capilares na ponta da orelha.

116

Trs lminas por animal

5. Meio

Preferencialmente sangue
perifrico a partir da
puno de capilares na
ponta da orelha

3. Como fazer o esfregao de sangue

4. Quantidade

Nenhum

6. Recipiente
Transportar em caixas ou
frascos com paredes rgidas e
com ranhuras prprias para a
fixao das lminas

7. Temperatura
da amostra para
transporte
Ambiente

8. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 48 horas

9. Exames
Pesquisa de hemoparasitas
117

1. Material
Sangue

2. Onde colher
a) Veia jugular;
b) Veia coccgea;
c) Veia mamria; e
d) em sunos, veia
cava cranial

3. Como colher
Utilizar sistema a vcuo
ou seringa e agulha

a) Obteno de soro

b) Sangue total

Colher o sangue em tubo sem


anticoagulante; manter o tubo
inclinado em temperatura
ambiente at o sangue
coagular e retrair o cogulo,
exsudando o soro (30 a 60
min). Transferir o soro para
outro tubo (tampa com rosca
ou tipo Eppendorf).
Se for utilizado tubo com
gel separador,
ser necessrio
centrifugar o
sangue no
mnimo
30 minutos
aps a
colheita e
no mximo
2 horas e enviar
o soro no prprio tubo.

O sangue dever ser


colhido e enviado
em tubo com
anticoagulante (EDTA
k2). Homogeneizar
suavemente,
invertendo o tubo
(cerca de 6 vezes)

a) Pesquisa de anticorpos

4. Recipiente e quantidade
a) Tubo de ensaio

sem anticoagulante:
capacidade 10 mL.

b) Tubo de ensaio
com EDTA K2:
capacidade 5 mL

5. Exames
b) Pesquisa direta

do agente

6. Temperatura da amostra para transporte


a e b) Refrigerada (+2C a +8C)

7. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 48 horas

118

119

Sistema osteoarticular
A avaliao de problemas osteoarticulares deve
considerar a possibilidade de alteraes do
encfalo e do aparelho locomotor, tendo em
vista que os sinais clnicos podem ter sua origem
em anomalias de um ou de outro sistema. No
diagnstico diferencial, deve-se considerar artrose
e artrite sptica, malformaes das extremidades,
traumatismos no parto ou causados por acidentes.
O material clnico de eleio para pesquisa de
agentes infecciosos o lquido sinovial. O soro
sanguneo pode auxiliar no diagnstico.

120

Principais doenas do sistema


osteoarticular e espcies acometidas
ESPCIES ACOMETIDAS
DOENAS
CAE (artriteencefalite caprina)

Maedi-Visna

Brucelose

Chlamidofilose
(Chlamydophila
psittaci e pecorum)

Tuberculose

Micoplasmose

Erisipela suna

Artrites causadas
por bactrias
piognicas e
enterobactrias

121

Material para colheita de amostras


para diagnstico de doenas do
sistema osteoarticular

Algodo

Produto para
antissepsia

Seringa e agulhas

Material para
tricotomia

Agulha para colheita


de sangue a vcuo

Sistema para colheita


de sangue a vcuo

Tubo tipo
KMA (tampa
com rosca)

Tubos a vcuo para


colheita de sangue, com
gel separador, sem e com
anticoagulante

Microtubos tipo
Eppendorf

Suabe estril

Suabe estril

122

123

Amostra para diagnstico


de doenas do sistema
osteoarticular

NOTA

O soro sanguneo pode


auxiliar no diagnstico
de algumas doenas
osteoarticulares.

1. Material
Lquido sinovial
2. Onde colher
Articulaes acometidas
- escapulo-umeral,
coxofemoral e articulaes
do carpo e do tarso

3. Como colher
1 Sedar o animal;
2 Fazer a tricotomia e a
desinfeco da regio
da puno; 3 Conter o
animal, a fim de evitar
Puno da articulao do carpo
movimentos bruscos;
em ovino acometido de artrite
4 Puncionar a
articulao acometida,
utilizando seringas com agulhas de 0,8 mm
de dimetro e 40 mm de comprimento para
articulaes escapulo-umeral e coxofemoral e
com agulhas mais curtas para articulaes do
carpo e do tarso;
5 Posteriormente, dividir a amostra entre um
tubo com anticoagulante, para estudo citolgico
e outro tubo sem anticoagulante, para pesquisa
direta de agente;
6 Retirar a agulha e aplicar um curativo no local.
124

4. Quantidade
Mnimo 1,5 mL

5. Recipiente
Tubo estril

O lquido sinovial
normal incolor
e muito viscoso

6. Temperatura
da amostra para
transporte
Refrigerada
(+2C a +8C)

Lquido sinovial
de aspecto
sanguinolento em
um caso de artrite

NOTA

7. Tempo crtico

Se a leso estiver
supurada,
colher o exsudato
com suabe,
utilizando meios
especficos
para cada situa
o.

para chegada
ao laboratrio
At 48 horas

8. Exames

Pesquisa direta do agente e citolgico


125

1. Material
Sangue

2. Onde colher
a) Veia jugular;
b) Veia coccgea;
c) Veia mamria; e
d) em sunos, veia
cava cranial

3. Como colher
Utilizar sistema a vcuo
ou seringa e agulha

a) Obteno de soro

b) Sangue total

Colher o sangue em tubo sem


anticoagulante; manter o tubo
inclinado em temperatura
ambiente at o sangue
coagular e retrair o cogulo,
exsudando o soro (30 a 60
min). Transferir o soro para
outro tubo (tampa com rosca
ou tipo Eppendorf).
Se for utilizado tubo com
gel separador,
ser necessrio
centrifugar o
sangue no
mnimo
30 minutos
aps a
colheita e
no mximo
2 horas e enviar
o soro no prprio tubo.

O sangue dever ser


colhido e enviado
em tubo com
anticoagulante (EDTA
k2). Homogeneizar
suavemente,
invertendo o tubo
(cerca de 6 vezes)

a) Pesquisa de anticorpos

4. Recipiente e quantidade
a) Tubo de ensaio

sem anticoagulante:
capacidade 10 mL.

b) Tubo de ensaio
com EDTA K2:
capacidade 5 mL

5. Exames
b) Pesquisa direta

do agente

6. Temperatura da amostra para transporte


a e b) Refrigerada (+2C a +8C)

7. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 48 horas

126

127

Sistema nervoso central (SNC)


A importncia das doenas do sistema nervoso central
(SNC) cresceu aps o aparecimento da encefalopatia
espongiforme bovina (EEB), por se tratar de uma
zoonose. Desde ento, o conhecimento sobre essas
doenas aumentou exponencialmente. A patologia
do sistema nervoso complexa, devido grande
variabilidade anatmica de suas estruturas: encfalo
(crebro, tronco enceflico e cerebelo) e medula
espinhal, que atuam de forma integrada para controlar
as funes do organismo. Agentes bacterianos, virais,
parasitrios e prinicos, tumores, substncias txicas
ou traumatismos podem afetar direta ou indiretamente
o SNC e produzirem sinais clnicos que permitem
identificar disfuno neurolgica e, em alguns casos, a
localizao da leso.
O envolvimento do SNC evidenciado por alteraes
nas funes sensitivas, motoras, reflexas, sensoriais e
comportamentais. Para confirmar a causa de doena
neurolgica necessria a realizao de diagnstico
diferencial. As estruturas do encfalo e de outros rgos
para pesquisa direta de agentes devem ser colhidas
e mantidas sob refrigerao at sua chegada ao
laboratrio; para exame histopatolgico, devem ser
fixadas em formol 10%. A pesquisa de anticorpos no
soro sanguneo pode auxiliar no diagnstico.

128

Principais doenas do sistema nervoso central


e espcies acometidas
ESPCIES ACOMETIDAS
DOENAS
Raiva

Encefalopatia
Espongiforme
Bovina (EEB)

Scrapie

Encefalite
Herptica Bovina

Febre Catarral
Maligna

Doena de Aujeszky
(Pseudoraiva)

Listeriose

Botulismo

Intoxicaes
(arsnico, chumbo,
organofosforados,
carbamatos e
plantas txicas)

Encefalite
Herptica equina

Encefalomielite
equina do
leste, oeste e
venezuelana

Polioencefalomalcia

Leucoencefalomalcia equina

X
129

Material para colheita de amostras


para diagnstico de doenas do
sistema nervoso central (SNC)

Agulhas
para
colheita de
sangue a
vcuo
Seringa e
agulha estreis

Potes de plstico,
de boca larga e
tampa de rosca,
com capacidade
para diferentes
volumes
Frasco de
formol 3540% (para
utilizao,
diluir uma
parte de
formol em
9 partes
de gua)

Tubos a vcuo
para colheita
de sangue,
com gel
separador,
sem e com
anticoagulante
Saco plstico

Sistema para colheita


de sangue a vcuo
Microtubos
tipo
Eppendorf
Tbua para
corte de rgos

Serrote
de arco
Coletor
universal estril

Tubo tipo
KMA (tampa
com rosca)

Cizalha

Talhadeira
Gancho
Pedra para
afiar facas
Facas
130

Tesoura
para
destrinchar
ossos

Marreta
Machado
Faca
131

Amostras para diagnstico de


doenas do sistema nervoso
central (SNC)
1. Material
SNC inteiro

2. Como colher
1 passo: com faca e auxlio de um
gancho, retirar a pele e msculos da
calota craniana
2 passo: cortar o osso com machado,
serra ou talhadeira e marreta
3 passo: seccionar com tesoura
a duramater e retirar o encfalo
cortando os nervos cranianos
4 passo: enviar o encfalo inteiro
com a medula espinhal cervical e o
conjunto hipfise, trigmeos e rede
admirvel carotdea (capilares ao
redor da hipfise)

NOTA

Nunca congelar, pois o laborat


rio
ir dividir as pores para os
diferentes exames e, inclusive
, fixar
uma parte em formol.

3. Meio
Nenhum

4. Recipiente
Saco plstico ou
frasco; capacidade
de acordo com o
tamanho do rgo

5. Temperatura
da amostra para
transporte
Refrigerada (+2C a +8C)

6. Tempo crtico

para chegada
ao laboratrio
At 48 horas

7. Exames
Pesquisa direta do agente e exame histopatolgico
132

133

4. Passo a passo para separar o SNC

1. Material

Separando o cerebelo

Pores do sistema nervoso central (SNC)

2. Como colher
Dissecar a pele e os msculos da cabea. Cortar a calota
craniana, utilizando serrote, machado ou talhadeira e
marreta. Com tesoura e pina, seccionar a duramater e os
nervos cranianos. Retirar o encfalo e a medula espinhal
cervical. Separar as pores para anlise laboratorial.

3. Pores anatmicas do SNC


Encfalo e medula
espinhal cervical
a - hemisfrios
cerebrais;
b - cerebelo;
c - tronco
enceflico;
d - medula
espinhal
cervical

Seccionar os
pednculos
cerebelares,
um por vez,
introduzindo
uma lmina
cortante, rostral
e horizontalmente
entre o tronco
enceflico e o
cerebelo

Separando o tronco enceflico


Seccionar o tronco enceflico do
resto do encfalo, na altura do
tlamo, de ambos os lados

Encfalo

a
b

Medula espinhal cervical


134

d
135

5. Exames
a Pores do SNC para pesquisa direta do agente

b Pores do SNC para exame histopatolgico


1

4
3
Separar em:
1 - hemisfrio cerebral;
2 - metade do cerebelo;
3 - medula espinhal cervical;
4 - tlamo

6. Meio

a) Nenhum

b) Formol tamponado 10% (volume de

formol, pelo menos 10 vezes maior que


o volume de tecido a ser fixado).

ou coletor universal

136

4
Separar em:
1 - hemisfrio cerebral; 2 - metade do cerebelo;
3 - conjunto de hipfise, rede admirvel
carotdea e gnglio do nervo trigmeo ;
4 - tronco enceflico; 5 - medula espinhal cervical

8. Temperatura da amostra para transporte

7. Recipiente

a) Saco plstico

a) Refrigerada
(+2C a +8C)

b) Ambiente ou
Refrigerada (+2C a +8C)

9. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


b) Frasco de boca larga com

tampa de rosca; capacidade de


acordo com o tamanho da pea

a) At
48 horas

b) Remeter no mesmo tempo que a amostra

refrigerada. Os fragmentos em soluo de


formol 10%, mesmo no completamente
fixados, podem ser enviados ao laboratrio

137

Pulmo

1. Material
Outros rgos fgado, bao,
pulmo, rim, corao,
linfonodos, intestino
delgado e grosso

NOTA

Em casos de morte sbita


e crepitao muscular,
colher tambm fragmentos
de msculo alterado.

2. Como colher
Colher os fragmentos com tesoura ou bisturi e pina
esterilizados, evitando danos ao tecido durante a
retirada. Escolher parte do rgo com leso; se no
houver leso, colher aleatoriamente. Para o intestino
delgado, selecionar a poro com contedo, ligar e
seccionar. Colher linfonodos regionais.

Rim

NOTA

Enviar ao laboratrio pelo


menos um fragmento de
cada rgo refrigerado e
um em formol.

Fgado
Bao
Corao

138

139

Ala intestinal ligada

Poro do
intestino
delgado

5. Meio

a) Nenhum

b) Formol tamponado 10% (volume de


formol, pelo menos 10 vezes maior que o
volume de tecido a ser fixado).

a) Saco plstico
ou coletor universal
leo terminal
(placas de Peyer)
Linfonodos

3. Exames

a) Pesquisa direta do agente b) Exame histopatolgico

4. Quantidade

a1) Fragmentos de 20 g
de cada rgo
a2) 10 cm a 30 cm
de intestino delgado
(ala ligada).
140

b) Frasco; capacidade de acordo


com o tamanho do fragmento.

NOTA

Embalar cada rgo


individualmente para
pesquisa de agentes

Fragmentos de SNC
e outros rgos

Tecidos fixados em formol

7. Temperatura da amostra para transporte

a) Refrigerada
(+2C a +8C)

b1) Fragmentos de
3x1x1cm de cada rgo
b2) 10 cm de rgo
tubular (duodeno, jejuno e
poro terminal do leo)

6. Recipiente

b) Ambiente ou Refrigerada

(+2C a +8C)

8. Tempo crtico para chegada ao laboratrio

a) At
48 horas

b) Remeter no mesmo tempo que a amostra

refrigerada. Os fragmentos em soluo de


formol 10%, mesmo no completamente
fixados, podem ser enviados ao laboratrio

141

1. Material
Sangue

2. Onde colher
a) Veia jugular;
b) Veia coccgea;
c) Veia mamria; e
d) em sunos, veia
cava cranial

3. Como colher
Utilizar sistema a vcuo
ou seringa e agulha

a) Obteno de soro

b) Sangue total

Colher o sangue em tubo sem


anticoagulante; manter o tubo
inclinado em temperatura
ambiente at o sangue
coagular e retrair o cogulo,
exsudando o soro (30 a 60
min). Transferir o soro para
outro tubo (tampa com rosca
ou tipo Eppendorf).
Se for utilizado tubo com
gel separador,
ser necessrio
centrifugar o
sangue no
mnimo
30 minutos
aps a
colheita e
no mximo
2 horas e enviar
o soro no prprio tubo.

O sangue dever ser


colhido e enviado
em tubo com
anticoagulante (EDTA
k2). Homogeneizar
suavemente,
invertendo o tubo
(cerca de 6 vezes)

a) Pesquisa de anticorpos

4. Recipiente e quantidade
a) Tubo de ensaio

sem anticoagulante:
capacidade 10 mL.

b) Tubo de ensaio
com EDTA K2:
capacidade 5 mL

5. Exames
b) Pesquisa direta

do agente

6. Temperatura da amostra para transporte


a e b) Refrigerada (+2C a +8C)

7. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 48 horas

142

143

Captulo 3

AVES

Autores
Antonio Guilherme Machado de Castro
Renato Lus Luciano
Ana Maria Iba Kanashiro
Ana Lcia S. P. Cardoso
Eliana Neire Castiglioni Tessari
Centro Avanado de Pesquisa Tecnolgica
do Agronegcio Avcola (CAPTAA)
Instituto Biolgico, Descalvado, SP (APTA/SAA-SP)
144

145

Principais doenas
que acometem as aves
A avicultura industrial caracteriza-se por possuir um
sistema de criao intensivo, com as aves alojadas em
galpes, para se obter o mximo de produtividade.
Essa particularidade torna necessria a adoo de
medidas de biosseguridade, visando a obter elevados
ndices de produo, alm da preveno das doenas.
Por essa razo imprescindvel o diagnstico e o
monitoramento freqente do status sanitrio dos
plantis avcolas.

As principais doenas que acometem as aves so:


Salmonelose
Micoplasmose
Influenza Aviria
Doena de Newcastle
Bronquite Infecciosa
Laringotraquete
Doena de Gumboro
Anemia Infecciosa
Colibacilose
Coccidiose
Clostridiose
A maioria delas no ocorre isoladamente, havendo
uma interao entre diversos patgenos, com a
possibilidade de ocorrerem associaes simultneas
entre vrias doenas, dentro de um mesmo lote,
acarretando elevadas perdas econmicas.

IMPORTANTE

Em casos de suspeita de
Doena de Newcastle e
Influenza Aviria de alta
patogenicidade, o Servio
Veterinrio Oficial no estado
dever ser imediatamente
notificado, sendo somente
competncia do mesmo a
colheita das amostras

146

147

Material para colheita de amostras


para diagnstico de doenas das aves

Frasco para remessa histopatolgico


Tesoura

Tesoura
trinchante
Pina

Frasco com
gua peptonada

Plstico
Bolsa de amostras
com gua peptonada

Frasco coletor

Luvas

Suabe
Gaze

Gaze para
suabe de arrasto

Caneta

Palitos
esterilizados

Seringa
e agulha
Frascos para
colheita de sangue
Bolsa plstica
para colheita
Prop
148

Pipeta pasteur

Microtubos tipo
Eppendorf
149

Amostras para diagnstico


de doenas das aves
1. Material
Sangue
(para obteno de soro)

2. Onde colher
Aves adultas:
puno cardaca ou veia
ulnar (asa)
Aves de 1 dia:
puno cardaca ou veia
jugular (decapitao)

3. Como colher sangue para obteno do soro


AVES ADULTAS
Veia ulnar (asa): Colocar a ave em decbito lateral,
para que a colheita seja feita na veia ulnar (veia da
asa). Colher o sangue usando seringa descartvel
de 5 mL atravs da puno venosa; transferir para
frascos de vidro ou tubo de ensaio de 10 mL, limpos e
secos, sem anticoagulante.
AVES DE 1 DIA
Decapitao: Aps a insensibilizao do animal, com
o auxlio de tesoura, proceder tcnica de seco
da primeira vrtebra cervical (decapitao). Colher o
sangue em frasco de vidro ou tubo de ensaio (10 mL),
limpo e seco, sem anticoagulante.
AVES ADULTAS E AVES DE 1 DIA
Puno cardaca: Realizar a conteno da ave com a
imobilizao das pernas e asas com uma das mos e
puncionar no meio da regio da quilha (base do
esterno), onde h um vazio, tendo o cuidado para no
atingir o pulmo. Inserir a seringa com agulha no peito
da ave de maneira perpendicular ao ponto de entrada
e paralelo coluna vertebral, at atingir o corao.
Puxar lentamente o mbolo at obter a quantidade
desejada. Transferir para frascos de vidro ou tubo de
ensaio de 10 mL, limpos e secos, sem anticoagulante.
Aps colheita do sangue da ave atravs de puno
cardaca, venosa ou outros mtodos de prtica; manter
o frasco ou tubo inclinado a temperatura ambiente
para que o sangue coagule e libere o soro;
transferir a amostra de soro para microtubo tipo
Eppendorf ou outro frasco de vidro.

150

151

4. Quantidade
Sangue para
obteno do soro:
4,0 mL por ave
Soro: 1 mL por ave

5. Recipiente
Tubo de ensaio ou
frasco de vidro (para
sangue); e
microtubo tipo
Eppendorf (para
sangue ou soro)

NMERO DE AMOSTRAS

ELISA: mdia 25 soros/lote


Soroagltinao Rpida (SAR):
sma
100 soros/lote para Mycopla
synoviae (MS) e Salmonella
s/
pullorum (SP) e 150 ou 300 soro
ticum
isep
gall
sma
opla
Myc
a
par
lote
vigente
(MG). Consultar a legislao
cial
ofi
a
itori
mon
de
o
em cas

NOTA

Para se obter um soro sem


hemlise, ao transferir o sangue
da
seringa para o tubo, deve-se
faz-lo
cuidadosamente, deixando que
o
sangue escorra pela parede
lateral
do tubo . Nunca esgotar o san
gue
de forma brusca e nem no fund
o
do tubo. Evitar mexer os frascos
ou
tubos enquanto o sangue est
em
descanso para separar o soro
.

6. Exames
Sorolgico para pesquisa de anticorpos

a) Soroaglutinao
rpida (SAR)

b) Teste de inibio da

hemaglutinao (HI),
ELISA, Soroneutralizao,
Soroaglutinao lenta e
Imunodifuso em Gel de gar

7. Temperatura da amostra para transporte

a) Refrigerada

(+ 2C a + 8C).
Nunca congelar

b1) Refrigerada
(+ 2C a + 8C);

ou

b2) Congelada

(- 20C)

8. Tempo crtico para chegada ao laboratrio

a) At 24 horas
152

b1) At 24 horas; ou b2) At 48 horas


153

1. Material
rgos

2. O que colher
fgado

Traquia, pulmo, orofaringe, corao, fgado, bao,


rim, bursa, crebro, cerebelo, nervo citico, proventrculo,
moela, pncreas, tonsilas cecais, duodeno e ceco.

3. Como colher
Utilizar luvas. Com o auxlio de uma tesoura de
destrinchar aves, realizar a abertura da cavidade
abdominal e torcica, em ave recm sacrificada;
Colher cuidadosamente rgos ou fragmentos de
eleio, utilizando-se de tesouras e pinas esterilizadas;
Cortar fragmentos com espessura mxima de 2,0 cm,
dos tecidos com alteraes;
Evitar encostar as mos nos rgos, mesmo com luvas,
para evitar a contaminao.
Agrupar os rgos em 4 conjuntos e coloc-los em
recipientes separados, sendo:
1. Traquia, pulmo e orofaringe;
2. Corao, fgado, bao e rins;
3. Crebro, cerebelo e nervo citico; e
4. Proventrculo, moela, bursa,
duodeno, pncreas, tonsilas
NOTA
ve ser
cecais e ceco.
1. Traquia de
a.
gr
te
n
a
mantid
ultas
ad
Para o histopatolgico, colher
es
av
Em
2.
sexual), a
fragmentos de todos os rgos
(maturidade
a atrofia
acima descritos em um nico
bursa sofre um mais
o
nd
se
frasco com formol a 10%.
a,
fisiolgic
aves jovens.
Incluir o nervo citico.
em
te
en
id
ev
154

bao

corao

moela

pulmo

proventrculo

testculo

duodeno
rim
tonsilas
cecais

ceco
pncreas

bursa

nervo citico

155

4. Quantidade

Somente para mdicos


veterinrios do Servio Oficial
Para o diagnstico da doena
de Newcastle e Influenza Aviria,
os rgos devem ser colhidos
separadamente, sendo cada
rgo de cada ave acondicionado
em um nico recipiente.

rgos de no mnimo 5 aves/lote, sendo 3 aves


com sintomas e 2 aves aparentemente sadias

5. Exames

a) Bacteriolgico
b) Isolamento viral e biologia molecular
c) Histopatolgico

6. Meio
a) Nenhum

NOTA

O volume ideal de formol para


cada recipiente cerca de
10 vezes o volume do material.

7. Recipiente

a e b) Frasco coletor ou tubos tipo Falcon, agrupados


segundo descrito no item 3.

b) MEM (Meio Essencial Mnimo) com 10% de soro


bovino (ou 10% de soro fetal bovino) com soluo de
antibiticos (0,5X); BHI com soluo de antibiticos
(0,5X); Caldo Triptose Fosfato Tamponado (TPB) com
soluo de antibiticos (0,5X)

a e b) Refrigerada (+ 2C a + 8C);

c) Soluo de formol 10% (100 mL de formaldedo

c) Ambiente. Nunca congelar

a 37% e 900 mL de gua v/v)

8. Temperatura da amostra para transporte

9. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


a) At 24 horas;
b) At 48 horas;

c) Remeter no mesmo tempo que as demais

amostras. As amostras em soluo de formol 10%,


mesmo no completamente fixadas, podem ser
enviadas ao laboratrio

156

157

NOTA

1. Material
Suabe de traquia

2. Como colher

Ao passar o suabe na traquia, devese tomar o cuidado de verificar se ele


est sendo introduzido no local correto.
Muitas vezes, pode-se confundir a
traquia com o esfago. A traquia
localiza-se na poro VENTRAL. Uma
dica tracionar um pouco a lngua
da ave, de modo que a traquia seja
projetada em direo cavidade bucal,
podendo ento ser visualizada.

Abrir o bico da ave,


abaixar a lngua,
introduzir o suabe
esterilizado na traquia
e esfregar em toda a circunferncia,
evitando tocar o suabe nas mucosas
da boca, para evitar contaminao;
Passar um suabe por ave e, em
seguida, cortar a extremidade do
suabe que estava em contato com
a mo e mergulhar o restante
no frasco que contm o meio
de transporte.
Ateno: no momento da colheita,
sempre usar luvas descartveis e
abrir a embalagem com o suabe
pelo lado que est o cabo, evitando
tocar no algodo.

3. Exames

a) Isolamento viral

b) Isolamento bacteriolgico
ou tcnica de biologia
molecular para Micoplasma

4. Quantidade

b) Suabes de 20
aves/lote, agrupados
em um recipiente

a) Suabes de 30 aves/

lote, agrupando 10 suabes


em cada recipiente

a) Soluo salina adicionada

de antimicrobianos especficos

5. Meio

b) Caldo Frey

esfago

6. Recipiente

traquia

a e b) Bolsa de amostra ou frasco com tampa rosca

7. Temperatura da amostra para transporte


a) Refrigerada

(+ 2C a + 8C)

b1) Refrigerada (+ 2C a + 8C); ou


b2) Congelada (- 20C)

8. Tempo crtico para chegada ao laboratrio

a) At 24 horas

158

b1) At 24 horas; ou

b2) se demorar mais de 24 horas


159

1. Material
Suabe de cloaca

2. Como colher
Colher amostra com suabe estril, realizando
movimentos circulares no orifcio da cloaca. Passar o
suabe na ave; em seguida, cortar a extremidade do
suabe que estava em contato com a mo e mergulhar o
restante no frasco que contm o meio para transporte.
Ateno: no momento da colheita, sempre usar luvas
descartveis e abrir a embalagem do suabe pelo lado
onde fica o cabo, evitando tocar no algodo.

3. Exames

a) Bacteriolgico

b) Isolamento viral, tcnica

para salmonela

de biologia molecular

a) 50 suabes, sendo um
suabe para cada 2 aves,
total de 100 aves por
ncleo. Todos os suabes
agrupados em um
mesmo recipiente

4. Quantidade

b) 30 suabes, sendo um
suabe por ave, total de 30
aves por ncleo. Agrupar
cada 10 suabes em um
mesmo recipiente
(3 recipientes/ncleo)

NOTA

vigente
legislao
Consultar a onitoria oficial
em
em caso d

a) gua peptonada

tamponada esterilizada

5. Meio

b) Soluo salina adicionada


de antimicrobianos especficos

6. Recipiente
Bolsa de amostra ou frasco esterilizado

7. Temperatura da amostra para transporte


a) Refrigerada
(+ 2C a + 8C)

b1) Refrigerada (+ 2C a + 8C); ou


b2) Congelada (- 20C)

8. Tempo crtico para chegada ao laboratrio

a) At 24 horas

b1) At 24 horas; ou

b2) se demorar mais de 24 horas


160

161

1. Material

4. Quantidade

Suabe de arrasto
a) gaze ou esponja
esterilizada
b) prop esterilizado

2. Onde colher
Galpo

2 suabes por galpo do ncleo


NOTA

Gaze ou esponja
esterelizada

descartveis, abrir a
embalagem do suabe
de arrasto dentro do
galpo a ser amostrado.
Segurar o suabe pelo
cordo e caminhar pelo
galpo, arrastando-o sobre
a cama, principalmente
entre comedouros e
bebedouros. Colocar o
suabe dentro do recipiente
com o meio para transporte,
cortando fora o cordo.

b) Calar o prop esterilizado

sobre a bota e caminhar pelo


galpo, principalmente entre
comedouros e bebedouros.
Retirar o prop utlizando luvas
descartveis e colocar dentro
do recipiente com o meio
para conservao.

162

5. Meio

gua peptonada
tamponada esterilizada

3. Como colher
a) Usando luvas

Caso o laboratrio fornea


um palito estril, utiliz-lo
tro
para colocar o suabe den
do recipiente.

Prop esterelizado

6. Recipiente
Bolsa de amostra
ou frasco esterilizado

7. Temperatura da amostra para transporte


Refrigerada (+2C a +8C)

8. Tempo crtico

para chegada
ao laboratrio
At 24 horas

9. Exame
Bacteriolgico para Salmonela
163

4. Quantidade

1. Material

de 4 caixas analisadas/lote,
agrupando todos os suabes
do lote num mesmo recipiente

2. Onde colher
Caixa de transporte de aves de 1 dia

NOTA

gente
legislao vi
Consultar a
cial
ofi
ria
ito
mon
em caso de

3. Como colher
a) Suabe: usando luvas

descartveis, esfregar gaze


esterilizada por toda a
superfcie interna da caixa,
preferencialmente sobre
fezes, e coloc-la depois
em recipiente adequado.

b) Fundos de no
mnimo 4 caixas,
agrupados por lote em
um mesmo recipiente

a) 1 suabe/2 caixas. Mnimo

Fundo de caixa

b) Fundo da caixa:
usando luvas descartveis,
dobrar o fundo das caixas,
de modo que o lado sujo
com fezes fique para
dentro, e coloc-lo depois
em recipiente adequado

a) gua peptonada

5. Meio

b) Nenhum

tamponada esterilizada

6. Recipiente
b) Sacos

a) Bolsa de

plsticos
resistentes

amostra
ou frasco
esterilizado

7. Temperatura da amostra para transporte


a) Refrigerada
(+ 2C a + 8C)

b ) Ambiente

8. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


a e b) At 24 horas

9. Exames

Bacteriolgico e Micolgico
164

165

1. Material

5. Meio

Papel ou cepilho
que forra a caixa de
transporte de aves de 1 dia

Nenhum

6. Recipiente

2. Onde colher

Sacos plsticos resistentes

Caixa de transporte de aves de 1 dia

3. Como colher
Usando luvas descartveis, transferir
o material que forra a caixa para
sacos plsticos resistentes

4. Quantidade

Forro de caixa de transporte


de no mnimo 4 caixas,
agrupados por lote em um
mesmo recipiente

NOTA

Consultar a legislao vigente


em caso de monitoria oficial

7. Temperatura da
amostra para transporte
Ambiente

8. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 24 horas

9. Exames
Bacteriolgico e Micolgico
166

167

1. Material
Fezes frescas

a) Bacteriolgico

4. Exames

b) Isolamento viral, tcnica

de biologia molecular

2. Onde colher
No Galpo

a) 1 pool de 100 amostras/ncleo,


colocadas num mesmo recipiente

3. Como colher
Usando luvas descartveis
e com auxlio de esptula
esterilizada, recolher as
amostras de fezes frescas
de vrios pontos do galpo,
coloc-las em uma mesma
embalagem por lote

5. Quantidade

b) 50 a 100g/lote

NOTA

Consultar a legislao vigente


em caso de monitoria oficial

a) Nenhum

6. Meio

b) Soluo salina adicionada de


antimicrobianos especficos

7. Recipiente
a) Sacos plsticos
resistentes

b) Bolsa de amostra ou
frasco esterilizado

8. Temperatura da amostra para transporte


a e b) Refrigerada (+2C a +8C)

9. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


a e b) At 24 horas
168

169

1. Material
Mecnio

4. Quantidade
50 mL/ncleo de reprodutoras no vacinadas contra
Salmonella enteritidis
Mecnio de 200 pintos/ ncleo de reprodutoras
vacinadas contra Salmonella enteritidis,
apenas no primeiro nascimento

2. Onde colher
No incubatrio

3. Como colher
Usando luvas
descartveis,
colher o
mecnio
diretamente
em recipiente
apropriado
depois de a ave
excret-lo sob
leve presso

NOTA

Consultar a legislao vigente


em caso de monitoria oficial

5. Meio
Nenhum

6. Recipiente
Bolsa de amostra ou
frasco esterilizado

7. Temperatura da
amostra para transporte
Refrigerada (+2C a +8C)

8. Tempo crtico

para chegada
ao laboratrio
At 24 horas

9. Exame
Bacteriolgico para Salmonela
170

171

4. Quantidade

1. Material
Ovos bicados

2. Onde colher

20 ovos/ncleo de reprodutoras no vacinadas contra


Salmonella enteritidis
150 ovos do primeiro nascimento/ncleo de
reprodutoras vacinadas contra Salmonella enteritidis

No incubatrio

5. Meio

3. Como colher

Nenhum

Usando luvas
descartveis, retirar
do nascedouro ovos
bicados no nascidos

6. Recipiente
Embalagens plsticas
resistentes

7. Temperatura da amostra para transporte


ou

a1) Refrigerada
(+2C a +8C);

a2) Congelada (-20C)

8. Tempo crtico para chegada ao laboratrio

a1) At 24 horas;

ou

a2) Acima de 24 horas, at a

entrega no laboratrio

9. Exames
Bacteriolgico
172

173

Captulo 4

ABELHAS
Apis mellifera

Autores
rica Weinstein Teixeira
Agncia Paulista de Tecnologia dos Agronegcios
(APTA, SAA-SP)
Dejair Message
Universidade Federal de Viosa (UFV)
174

175

Material para colheita


de amostras para diagnstico
de doenas que afetam

Abelhas Apis mellifera

Saco plstico

Caixa isotrmica
com gelo reciclvel

IMPORTANTE

Kit EPI Equipamento


de proteo individual

cas e
ar formo, fa
Sempre utiliz
fetados,
sin
de
te
en
am
pinas devid
rios
i
ap
tre
e en
entre colmeias
bo, realizar
sa
e
ua
g
(lavar com
pois
ecnica e de
esfregao m
)
%
70
ol
co
l
submergir em

Pina

Lpis e caneta
esferogrfica

Luvas de ltex
Jornal

Fumigador

Pincel/ trincha

Tubos tipo Eppendorf

Etiquetas

Envelope

Espuma
Papel

Formo

Faca
Caneta do tipo marcador permanente
176

Pote plstico
universal

Pote plstico
universal perfurado

Pote plstico
de 500 mL
177

Garantindo a segurana
Antes de dirigir-se ao apirio, o profissional
dever vestir-se adequadamente com o
equipamento de proteo individual (EPI),
acender o fumigador e pegar o formo

Reconhecendo as partes
de uma colmeia
Tampa

Chapu

DUPLA
HAR EM

TRABAL

ever
e colheita d
O trabalho d
em
re
p
m
se
do
ser executa
rolando
divduo cont
dupla, um in
dor e
com fumiga
as abelhas
tras
os
m
do as a
outro colhen

Mscara/Vu

Melgueira

Macaco
Tela excluidora

Ninho

Alimentador

Fundo

Luvas de
borracha
Protetor contra
formiga

Formo
Fumigador
O fumigador
imprescindvel, pois a
fumaa, na quantidade
certa, permite controlar a
defensividade das abelhas.

178

Cavalete
Alvado (entrada da colmeia)

Botas
Luvas de
algodo (usar

opcionalmente,
por baixo
das luvas de
borracha)

Colmeia Langstroth ou padro,


despovoada, em cavalete de madeira
179

Identificando os indivduos da
colnia, clulas de operrias,
clulas de zango e realeira
Clula de
operria
operculada

Clula de zango
desoperculada

Clula de zango
operculada

Operria

Realeira
aberta
Clula de
operria
desoperculada

Zango

Rainha

Operrias fazendo
corte rainha
Realeira fechada

180

181

Abrindo e inspecionando
uma colmeia
1 Passo
Abrindo a colmeia e controlando o
comportamento defensivo das abelhas

Certificar-se de que
a rainha no est
na tampa

Fazer fumaa no alvado;


Levantar a tampa;
Fazer fumaa paralela
superfcie dos quadros;
Fechar a colmeia por
1 minuto;
Manter o fumigador
cerca de 15 cm
da colmeia

Abrir a tampa
novamente e fazer
fumaa paralela
superfcie
dos quadros;

182

Apoiar a tampa no cho com a parte interna


para cima, colocando sobre ela a(s) melgueira(s)
ou qualquer outro aparato utilizado pelo apicultor
(Ex.: Alimentador de topo, coletor de plen, coletor
de prpolis, tela excluidora etc.).
183

2 Passo - Inspecionando a rea de cria;

Realizar a inspeo dos


quadros da rea de cria.
Certificar-se de que a
rainha no est presente
nesse quadro e, caso esteja,
transferi-la cuidadosamente
para outro quadro ou
permitir que ela o faa
espontaneamente.

NOTA

Localizao
mais provvel
ia.
da rea de cr

Ninho

Com o auxilio
do formo,
descolar os
quadros do
ninho (devido
propolizao);
retirar um
quadro da rea
de cria.

184

Para facilitar a visualizao


das crias, se necessrio, chacoalhar o quadro
suavemente para dentro da colmeia ou utilizar um
pequeno ramo de planta para afastar as abelhas
adultas que esto cobrindo a rea de cria.
185

Fase de pupa

Durante seu ciclo de vida, as abelhas passam por quatro


diferentes fases: ovo, larva, pupa e inseto adulto

DIFERENTES FASES DO DESENVOLVIMENTO


DAS ABELHAS CRIAS NORMAIS

M. Elias-Neto, FFCLRP/ USP

Pupa

Fases do desenvolvimento
das abelhas

Diferentes estgios da fase de pupa (pupa de olho branco,


pupa de olho rosa, pupa de olho rosa-escuro e pupa de olho
marrom com pigmentao torcica de leve a forte).

H.M.Takada, PRDTA-VP/APTA, SAA, SP

Ovo
No primeiro dia,
encontra-se na posio
vertical, no segundo dia
inclinada e, no terceiro
dia, passa a ficar na
posio horizontal

Larva
Pr-pupa

Diferentes sub-estgios do desenvolvimento


larval, incluindo pr-pupa

Diferentes estgios
da fase larval. Crias
desoperculadas
e operculadas
186

M. Elias-Neto, FFCLRP/ USP

Fase larval

Pr-pupa e pupa em diferentes estgios,


desoperculadas, para permitir a visualizao.
Crias sadias normalmente so vigorosas e apresentamse na fase larval no fundo dos alvolos, em forma de
C (desoperculadas). Aps 5 a 6 dias, essas larvas
so operculadas com cera, mudando constantemente
a sua posio at ficarem retas nos alvolos, com o
dorso do corpo na parede lateral do alvolo (pr-pupa).
Nessa fase, ela cessa seus movimentos e passa por
modificaes, transformando-se em pupa. Desde ovo,
passando por todos os estgios de larva, at o estgio
inicial de pupa, a cria apresenta-se com colorao
branco-prola em todo o corpo. Ao longo da fase de
pupa, ocorrem mudanas gradativas na pigmentao
dos olhos e dos segmentos do corpo.
187

Para reconhecer os sintomas das doenas importante


estar familiarizado com as caractersticas das diferentes
fases do desenvolvimento das crias e com a aparncia de
um favo com crias saudveis.

Quadro com rea


de cria normal

Exemplos de possveis alteraes


na aparncia das crias
Bart Smith, BRL/ARS/USDA

Diferentes anomalias
na fase de cria

Cria mumificada

Cria com alterao de


cor e/ou ressecada

Cria contorcida na
parede do alvolo
com alterao de
cor e murcha

Cria no fundo da clula com


alterao de cor e murcha
Quadro com rea
de cria falhada

Cria com alteraes de


consistncia (aquosa)
188

189

Cria Giz

Principais doenas, intoxicaes


e parasitoses que afetam
CRIAS DE ABELHAS - Apis mellifera

Agente causador
Fungo Ascosphaera apis
Fase de desenvolvimento da cria afetada
Crias j operculadas, pr-pupa e pupa
(ficam mumificadas)

Cria Ptrida Americana


ou Loque Americana

Cria Ptrida Europia ou Loque Europia


Agente causador
Bactria Melissococcus plutonius
Fase de desenvolvimento da cria afetada
Geralmente larva desoperculada em fase de
alimentao; algumas vezes cria operculada

190

BART SMITH, BRL/ARS/USDA

VIRGINIA WILLIAMS, BRL/ARS/USDA

BART SMITH, BRL/ARS/USDA

Fase de desenvolvimento da cria afetada


Pr-pupa e pupa

BART SMITH, BRL/ARS/USDA

Agente causador
Bactria Paenibacillus larvae

Cria Ensacada
Agente causador
Vrus SBV (Sac Brood Virus)
Fase de desenvolvimento
da cria afetada
Pr-pupa (no consegue
passar para pupa)

191

Cria Ensacada Brasileira


Agente causador
Plen da planta barbatimo (Stryphnodendron spp)

Agente causador
Causa indeterminada

Fase de desenvolvimento da cria afetada


Pr-pupa (no consegue passar para pupa)

Fase de desenvolvimento da cria afetada


Pupa

Cria com asa deformada

192

Crias Anmalas

Varroatose

Agente causador
Vrus DWV (Deformed Wing Virus), ou, eventualmente,
Varroa (por ao fsica)

Agente causador
caro ectoparasita Varroa destructor
(na fase de reproduo)

Fase de desenvolvimento da cria afetada


Pupa, prximo emergncia ou nascimento
(quando o sintoma evidente)

Fase de desenvolvimento
da cria afetada
Cria j operculada

193

Amostras para diagnstico das principais doenas


que afetam CRIAS DE ABELHAS - Apis mellifera
Antes de iniciar a colheita de amostra, faa uma
observao minuciosa dos favos na rea de cria.
Nos quadros que apresentarem falhas (conforme
apresentado na pgina 188), procure detectar a
presena de crias com alteraes na cor (mudana de
branco-prola para marrom claro a escuro); murchas;
contorcidas nas paredes dos alvolos ou mumificadas.

Colheita de crias para anlise


Para diagnstico da doena, colher 4 amostras diferentes

Amostra 1
1. Onde colher
No ninho

2. O que colher

Com a faca, entre os arames


do quadro, cortar pedaos
de favo em uma regio com
crias suspeitas
194

Pedaos de favo contendo


o mximo possvel de crias
anormais 3 a 5 pedaos de
favo de aproximadamente
3x3 cm a 3x10 cm,
preferencialmente entre os
arames do quadro. Pode
tambm ser o favo inteiro

5. Recipiente
Envolver as amostras de favo em papel jornal
ou outro tipo de papel no encerado.
Ateno: Nunca envolver em plstico ou papel
alumnio, nem colocar em frasco fechado

NOTA

de
Realizar as colheitas
a
luv
o
nd
iza
util
amostras
sobre as
descartvel de ltex
-la, entre
de borracha e descart
saco
em
uma e outra colmeia,
uida.
seg
em
o-o
nd
de lixo, fecha

Favos falhados e com crias anormais, sem mel

3. Como colher

4. Quantidade

6. Temperatura da amostra para transporte


Ambiente

7. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 48 horas

8. Exames
Isolamento/identificao
Anlise microscpica e/ou molecular, se o material
estiver preservado
195

Amostra 2
1. Onde colher
No ninho

2. O que colher

5. Recipiente
Envolver os pedaos
de favo em papel
jornal ou outro tipo de
papel no encerado.
Ateno: nunca envolver
em plstico ou papel
alumnio, nem colocar em
frasco fechado

Favos contendo
crias operculadas
(preferencialmente, sem
mel e com pupas mais
velhas, de olho escuro)

3. Como colher
Com uma faca,
cortar um pedao de
favo com crias

6. Temperatura da amostra para transporte


Ambiente

4. Quantidade
Pedao de favo de
aproximadamente
3x10 cm (contendo
pelo menos 100 crias
operculadas)

7. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 48 horas

8. Exames
Avaliao da taxa de infestao de crias por
Varroa destructor (varroatose)

196

197

Amostra 3
1. Onde colher

b) Papel ofcio comum

- esmagar a amostra
ao dobrar o papel
(colocar o papel dentro
de um envelope)

No ninho

2. O que colher
Crias anormais

3. Como colher
Com uma pina,
colher, individualmente,
crias anormais

4. Quantidade
Efetuar colheita individual de aproximadamente
20 crias ou todas, se forem menos de 20

5. Recipiente
Dividir as amostras em 2
partes iguais e colocar em:

a) Tubos tipo Eppendorf

de 1,5 ou 2,0 mL - colocar


uma cria suspeita por tubo

198

6. Temperatura da amostra para transporte


a) Congelada (-20C). Congelar

imediatamente as amostras,
mantendo o material em freezer
at o envio para o laboratrio

b) Ambiente

7. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 48 horas

8. Exames
Anlise microscpica, microbiolgica e/ou molecular
199

Amostra 4

Detalhe do favo
contendo mel
operculado e plen
armazenado no
alvolo (tambm
chamado
de po de abelha)

1. Onde colher
No ninho

2. O que colher
Pedao de favo contendo
mel operculado
(na parte superior de favos
de cria - caso no encontre,
colher mel desoperculado)

3. Como colher
Com uma faca, cortar
a parte superior do
favo contendo mel
(entre o arame e a
madeira do quadro)

Plen armazenado

Mel operculado

5. Recipiente
Colocar as amostras em frascos plsticos de
500 g a 1 kg. Fechar bem, colocando em seguida
cada frasco em saco plstico

6. Temperatura da amostra para transporte


Ambiente

7. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 48 horas

4. Quantidade
Quatro pedaos de
aproximadamente
3X7 cm (a amostra
pode conter plen)
200

8. Exames
Anlise para esporos de P. larvae
e presena de plen de barbatimo
201

Sintomas clnicos
Diarria, quando causada por N. apis;
Sintoma inespecfico, quando causada por N. ceranae

Acariose
Agente causador
caros endoparasitas, Acarapis woodi,
dentre outras espcies
Sintomas clnicos
Inespecfico

Varroatose
Agente causador
caro ectoparasita, Varroa destructor
Constatao visual
da presena do caro
sobre as abelhas

202

Agente causador
Cerca de 18 diferentes vrus podem infectar abelhas,
dentre os quais podem ser citados Black Queen Cell
Virus (BQCV) - Filamentous Virus (FV) - Deformed Wing
Virus (DWV) - Chronic Bee Paralysis Virus (CBPV) - Acute
Bee Paralysis Virus (ABPV) - Israeli Acute Paralysis Virus
(IAPV) e Cloud Wing Virus (CWV)
Sintomas clnicos
Inespecficos, muito embora, alguns sintomas tenham sido associados a viroses, tais como: abelhas
com asas deformadas
dentro e na frente da
colmeia, abelhas sem
pelos e com aspecto
brilhoso, abelhas com
asas opacas e abelhas
com tremores

Intoxicaes por agrotxicos


Agente causador
Constituintes qumicos de
inseticidas e de outros
defensivos agrcolas
Sintomas clnicos
Grande quantidade de
abelhas mortas fora
e/ou dentro da colmeia

Osmar Malaspina, CEIS/UNESP

Nosemose
Agente causador
Microspordeos, Nosema apis e/ou Nosema ceranae

Viroses

Yanping Chen, BRL/ARS/USDA

Principais doenas, intoxicaes


e parasitoses que afetam
ABELHAS ADULTAS - Apis mellifera

203

2. O que colher

Amostras para diagnstico das principais doenas


que afetam ABELHAS ADULTAS - Apis mellifera
Em abelhas adultas, geralmente, no ocorrem
sintomas caractersticos de cada doena. O que se
observa comumente a presena de algumas abelhas
adultas moribundas na entrada da colmeia (alvado)
ou no cho, rastejando at morrerem. Quando ocorre
mortalidade por algum tipo de inseticida, observa-se
maior quantidade de abelhas mortas no cho na frente
da colmeia e, algumas vezes, no fundo da colmeia.
Eventualmente, certas viroses e parasitas podem
produzir sintomas especficos (asas deformadas,
ausncia de pelos, entre outros)

Colheita de abelhas
adultas para anlise
Para diagnstico das doenas e intoxicaes de
abelhas adultas, colher 5 amostras diferentes

Abelhas adultas ainda vivas


e moribundas (rastejando e
sem conseguir voar)

3. Como colher
NOTA

tes
Se possvel, um dia an
par
lim
ar/
pin
ca
,
ita
he
da col
de
nte
fre
2 a 3 metros na
ilitar a
cada colmeia, para fac
que
as
elh
ab
visualizao das
s
da
un
rib
esto mo

Com o auxilio de
uma pina, colher as
abelhas moribundas

4. Quantidade
Cerca de 30 abelhas
ou mais por colmeia

5. Recipiente

Frascos de plstico tipo universal


perfurado na tampa e nas laterais

6. Temperatura da amostra

para transporte
Ambiente

Amostra 1

7. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 48 horas

1. Onde colher
Na frente da colmeia (no solo) e na
entrada da colmeia (alvado)
204

8. Exames
Deteco de esporos de Nosema spp.,
caros endoparasitas e protozorios
205

4. Quantidade

Amostra 2

Cerca de 30
abelhas ou mais,
por colmeia

1. Onde colher
Na entrada da colmeia (alvado)

2. O que colher
Abelhas adultas campeiras que esto chegando

3. Como colher

5. Meio
lcool 70%. No
frasco, deixar
5mm de lcool
acima das
amostras de
abelhas

6. Recipiente

Fechar a entrada da
colmeia (alvado) com
uma tira de espuma
comum e colher as
abelhas que esto
chegando dentro de
um frasco plstico
tipo universal,
contendo lcool 70%

Frasco plstico tipo universal (contendo lcool 70%)


Ateno: fechar bem o frasco, colocando cada frasco
em um saco plstico. Em seguida, colocar em caixa de
papelo com divisrias entre os frascos

7. Temperatura da amostra para transporte


NOTA

Para a colheita de abelhas


no alvado, pode-se sug-las,
utilizando-se um sugador de
abelhas ou, alternativamente,
varr-las com um pincel/
trincha comum (de pintura) de
4 a 5 cm de largura

Ambiente

8. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 72 horas

9. Exames
Deteco de esporos de Nosema spp., caros
endoparasitas e protozorios

206

207

Amostra 3
1. Onde colher
Dentro da colmeia

2. O que colher

4. Quantidade
Cerca de 10 abelhas
por colmeia

5. Recipiente
Frascos plstico
tipo universal

Abelhas adultas que esto cobrindo a rea de cria

3. Como colher
Suspender um favo de cria. Com o auxlio de um
frasco de plstico tipo universal, posicionado
obliquamente e arrastado de baixo para cima,
colher as abelhas dentro do frasco

6. Temperatura

da amostra
para transporte

Congelada (-20C).
Congelar imediatamente
as amostras, mantendo
o material em freezer
at o envio para o
laboratrio

7. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 24 horas

8. Exames
Anlise molecular
208

209

Amostra 4

4. Quantidade
Cerca de 200 a 300 abelhas por colmeia

1. Onde colher
Dentro
da colmeia

2. O que colher
Abelhas
adultas que
esto cobrindo
a rea de cria

3. Como colher
Suspender um
favo de cria. Com
o auxlio de um
frasco de plstico
de 500 mL contendo
250 mL de lcool
70%, posicionado
obliquamente e
arrastado de baixo
para cima, colher
as abelhas dentro
do frasco
210

5. Meio
lcool 70%. No frasco, deixar 5mm de
lcool acima das amostras de abelhas.

6. Recipiente
Frasco plstico de 500 mL
(contendo lcool 70%)
Ateno: fechar bem o frasco,
colocando cada frasco em
um saco plstico. Em seguida,
colocar em caixa de papelo com
divisrias entre os frascos

7. Temperatura da
amostra para transporte
Ambiente

8. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 72 horas

9. Exames
Determinao da taxa de infestao
de caros ectoparasitas
211

4. Quantidade

Amostra 5

Cerca de 300 a
500 abelhas nas
proximidades de
cada colmeia

1. Onde colher

OSMAR MALASPINA, CEIS/U

NESP.

Na frente e/ou
no fundo de
cada colmeia

2. O que colher
Abelhas adultas
moribundas e/ou
mortas

3. Como colher
Com o auxlio de
uma pina ou
com a prpria
mo utilizando
luvas descartveis,
colher as abelhas
moribundas e/ou
recentemente mortas
212

Frasco plstico com capacidade de 1 kg

6. Temperatura da amostra para transporte


OSMAR MALASPINA, CEIS/UNESP.

Importante: Colher
abelhas mortas
somente se a
mortalidade tiver
ocorrido um dia
antes da colheita

5. Recipiente

Congelada (-20C). Congelar


imediatamente as amostras,
mantendo o material em freezer at
o envio para o laboratrio

7. Tempo crtico para chegada ao laboratrio


At 24 horas

8. Exames
Deteco de inseticida e outros defensivos agrcolas
213

Bibliografia
Antn, J. J. R.; Mayayo, L. M. F. La exploracin clnica del ganado ovino y
su entorno. Zaragoza: Servet, 2007. 422 p.
ASSOCIAO BRASILEIRA DE NORMAS TCNICAS. NBR 7.500: smbolos de
risco e manuseio para o transporte e armazenamento de material. Rio de
Janeiro, maro de 2000.
BERCHIERI JNIOR, A.; MACARI, M. Doenas das aves. Campinas: FACTA,
2000. 800 p.
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de setembro de 1991. Dispe sobre a incinerao de resduos slidos
provenientes de estabelecimentos de sade, portos e aeroportos. Dirio
Oficial Unio, Braslia, DF, 30 out. 1991. Disponvel em: <http://e-legis.anvisa.
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BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Instruo


Normativa N 17 de 07 de abril de 2006. Aprovar, no mbito do Programa
Nacional de Sanidade Avcola, o Plano Nacional de Preveno da Influenza
Aviria e de Controle e Preveno da Doena de Newcastle. Dirio Oficial
da Unio, Braslia, DF, 10 abril 2006,Seo1,p.6.

BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Portaria


N 126, de 03 de novembro de 1995. Normas de credenciamento e
monitoramento de laboratrios de diagnstico das salmoneloses
avirias (S. enteritidis, S. gallinarum, S. pullorum e S. typhimurium).
Dirio Oficial da Unio, Braslia, DF, 06 nov. 1995, Seo 1, p. 17694.
Disponvel em: < http://extranet.agricultura.gov.br/sislegis-consulta/
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BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Instruo


Normativa N 32, de 14 de maio de 2002. Aprova as normas tcnicas de
vigilncia para doena de Newcastle e Influenza Aviria, e de controle e
erradicao para a doena de Newcastle. Dirio Oficial da Unio, Braslia,
DF, 14 maio 2002.Seo1,p.28.

BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento.


Portaria N 182 de 08 de novembro de 1994. Aprova as Normas de
Credenciamento e Monitoramento de Laboratrios de Diagnstico da
Doena de Newcastle. Dirio Oficial da Unio, Braslia, DF, 11 nov.
1994,Seo1,p.17003.

BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Instruo


Normativa N 44 de 23 de agosto de 2001. Aprova as normas tcnicas para
o controle e a certificao de ncleos e estabelecimentos avcolas para a
Micoplasmose Aviria (Mycoplasma gallisepticum, synoviae e melleagridis).
Dirio Oficial da Unio, Braslia, DF, 24 ago. 2001,Seo1,p.68.

BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Procedimentos


para colheita, transporte, recepo e conservao de amostras de
soros para diagnstico sorolgico de febre aftosa. Braslia: MAPA/DSA/
DDA, 2004.13 p.

BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Instruo Normativa


N 78, de 03 de novembro de 2003. Aprova as normas tcnicas para controle e
certificao de ncleos e estabelecimentos avcolas como livres de Salmonella
gallinarum e de Salmonella pullorum e livres ou controlados para Salmonella
enteritidis e para Salmonella typhimurium. Dirio Oficial da Unio, Braslia, DF,
05 nov. 2003, Seo1, p.3. Disponvel em: < http://extranet.agricultura.gov.br/
sislegis-consulta/servlet/VisualizarAnexo?id=11080>. Acesso em: 14 dez. 2009.

214

BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Plano de


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de doena vesicular. Braslia: MAPA/SDA/DSA, 2009. 96 p.

BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Procedimentos


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Braslia: MAPA/DSA/DDA, 2003. 50 p.
BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Secretaria
de Defesa Agropecuria. Programa Nacional de Sanidade Avcola.
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215

BRASIL. Ministrio da Sade. Secretaria de Cincia, Tecnologia e Insumos


Estratgicos. Diretrizes gerais para o trabalho em conteno com
material biolgico. Braslia, DF: Ministrio da Sade, 2004. 60 p. (Srie A.
Normas e Manuais Tcnicos).
BRASIL. Ministrio dos Transportes. Portaria n 204, de 20 de maio de 1997.
Aprova as instrues complementares aos regulamentos dos transportes
rodovirios e ferrovirios de produtos perigosos. Dirio Oficial Unio, Braslia,
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CLINICAL AND LABORATORY STANDARDS INSTITUTE. Control of preanalytical
variation in trace element determinations; approved guideline.
Pennsylvania: NCCLS, 1997. (NCCLS document C38-A).
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Pennsylvania: NCCLS, 2003. (NCCLS document H01-A5).
Koerich, P. K. V.; ZUFFO, J. P.; BACK, A.; PEREIRA, R. A. Guia de coleta e
envio de materiais para diagnstico laboratorial. 2. ed. Xanxer, SC:
News Print Grfica e Editora Ltda, 2007. 165p.
McGavin, M. D.;Zachary, J. F. Pathologic basis of veterinary disease.
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Sociedade Brasileira de Patologia Clnica/ Medicina Legal; BD Diagnostics
Preanalytical Systems. Recomendaes da Sociedade Brasileira de Patologia
Clnica / ML para coleta de sangue venoso. So Paulo: SBPC/ML, 2005. 76 p.
UNITED NATIONS. UN recommendations on the transport of dangerous goods
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www.oie.int/eng/normes/mmanual/A_00055.htm> Acesso em: 30 out. 2009.

216

217

Ministrio da Agricultura, Pecuria e


Abastecimento - MAPA
Departamento de Sade Animal
Esplanada dos Ministrios Bloco D, Anexo A,
Sala 301
70043-900 - Braslia, DF - Brasil
Tel.: 00 55 61 3218-2701 Fax: 00 55 61 3226-3446
http://www.agricultura.gov.br
0800 - 7041995
Organizao Pan-Americana
da Sade OPAS/OMS
Sade Pblica Veterinria
Centro Pan-Americano de Febre Aftosa PANAFTOSA
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Tel.: 00 55 21 3661-9003 Fax: 55 21 3661-9001
http://www.panaftosa.org.br

Sade Pblica Veterinria

Centro Pan-Americano de Febre Aftosa