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Abstracto.

El propósito de este estudio fue caracterizar formularios 1 y 2 de clorhidrato de
buspirona, un medicamento ansiolítico. Las técnicas utilizadas para la
caracterización incluyen microscopía (óptica, etapa caliente, y microscopía
electrónica de barrido), el análisis térmico (calorimetría diferencial de barrido y
análisis termogravimétrico), de estado sólido transformada de Fourier infrarroja
(FTIR), polvo de difractometría de rayos X (XRD), y espectroscopia Raman.
Morfológicamente, formularios 1 y 2 consisten de placas y cristales columnares,
respectivamente, con buena capacidad de filtración. El análisis térmico mostró que
las dos formas son enantiotrópica sobre el rango de temperatura estudiado. El
método FTIR fue utilizado con éxito para la cuantificación de la Forma 1 en una
mezcla de las Formas 1 y 2. La relación de un pico característico a un pico de
referencia y el método quimiométrico se utilizaron para obtener la curva de
calibración. Los cambios de pico Raman mostraron la diferencia entre las dos
formas especialmente para el grupo n-butilo. El gran número de picos de XRPD
distinguibles en la región de 5° a 30° 2ᶿ de los dos polimorfos demostraron que
XRPD es una herramienta útil para el análisis cuantitativo y cualitativo de los
polimorfos.
PALABRAS CLAVE: clorhidrato de buspirona; caracterización; polimorfismo.
INTRODUCCIÓN
El polimorfismo ha sido reconocido como un elemento importante del desarrollo de
fármacos. Muchos sólidos farmacéuticas pueden existir en diferentes formas
polimórficas. Los polimorfos difieren en su estructura de estado sólido interno y
poseen diferentes propiedades físicas, tales como la estabilidad, velocidad de
disolución, y la biodisponibilidad, que pueden afectar la procesabilidad de drogas y
la calidad / rendimiento. Las diferencias en las propiedades físicas, químicas y
propiedades mecánicas del ingrediente farmacéutico activo (API) deberán estar
claramente establecidas en la presentación de solicitudes de nuevos medicamentos
(NDA) y abreviados solicitudes de nuevos medicamentos (ANDA) (1). Los fabricantes
farmacéuticos suelen elegir una forma especial que tiene las características
deseables. clorhidrato de buspirona es un fármaco ansiolítico. El mecanismo por el
cual la buspirona funciona no se entiende completamente; parece actuar mediante
la modificación de la liberación de una mezcla de neurotransmisores en el cerebro.
Los neurotransmisores son sustancias químicas que se almacenan en las células
nerviosas y están involucrados en la transmisión de mensajes entre las células
nerviosas. clorhidrato de buspirona es un compuesto blanco, cristalino y soluble en
agua con una masa molecular de 422. Químicamente, clorhidrato de buspirona
(BUS-HCl) es N- [4- [4- (2-pirimidinil) -1-piperazinil] butil] -1, monohidrocloruro de 1cyclopentanediacetamide. La fórmula molecular C21H31N5 O2IHCl está
representado por la fórmula estructural se muestra en el Esquema 1. Se ha
descubierto que BUS-HCl sólido puede existir en dos formas polimórficas diferentes
(2). Una serie de métodos se emplean actualmente para la caracterización de los
polimorfos farmacéuticos sólidos (9). Difracción de polvo de rayos X (XRPD)
identifica los polimorfos como resultado de las diferencias en las dimensiones de la

y XRPD se ha llevado a cabo. Basándose en sus investigaciones.4 a 3.celda unidad. los cálculos teóricos sugieren que la banda NH + en BUS-HCl refleja la formación de una moderadamente fuerte enlace de hidrógeno entre el átomo de nitrógeno protonado piperazina (unida al espaciador de butilo) y el anión de cloro. se utilizó para el análisis visual. Otros productos químicos se adquirieron de Caledon (Georgetown. Canadá). En este estudio.0 Norte Eclipse. EE. Una suspensión de la Forma 2 en IPA se calentó a 40Y42-C durante 20 h. La solución concentrada se enfrió a 0Y5-C a una velocidad de enfriamiento de 1-C / min y se mantuvo a esa temperatura durante 3 h. (3) han informado de la espectroscopia de RMN de BUS-HCl sólido. se lavó. ON. 99. sin mencionar la forma polimórfica. La recristalización de la buspirona Base base de buspirona se purificó utilizando isopropanol (IPA. El producto se filtró. Canadá) y EMD (Gibbstown. Preparación de la forma BUS-HCl 1 Forma BUS-HCl 1 fue producido por la conversión de la Forma 2 (2). Chilmonczyk et al. El punto de fusión de la Forma 1 se informó como 188-C y la de la Forma 2 está en el rango 202Y204-C (2). La suspensión se enfría a una velocidad de enfriamiento de 1-C / min a temperatura ambiente y los sólidos recogidos en un filtro. Durante el ajuste del pH. PharmaChem (Brantford. y se secó bajo vacío para obtener base de buspirona puro. la solución se concentró por evaporación.6 mediante la adición lenta de ácido clorhídrico (38%). equipado con una cámara digital y software de imagen v6. La solución caliente se filtró y se lavó con IPA caliente. Óptica y microscopía electrónica de barrido Un microscopio óptico (Zeiss. la temperatura se mantuvo a 45Y50-C. la caracterización de BUS-HCl por análisis térmico.UU. se lavó con IPA y se secó a 30Y35-C bajo vacío. El producto (Formulario BUS-HCl 2) se filtró. A continuación. Se utilizó un microscopio electrónico de barrido (SEM) . La identidad polimórfica del producto final se confirmó por análisis DSC y FTIR. espectroscopía Raman y FTIR. La solución se enfrió a 20Y25-C a una velocidad de enfriamiento de 1-C / min en atmósfera de nitrógeno y se mantuvo a esa temperatura durante 2Y3 h. ON.). La identidad polimórfica del producto final se confirmó por análisis DSC y FTIR. se lavó con IPA y se secó bajo vacío. NJ. Después de la disolución completa de la base de la buspirona en IPA en 45Y50-C. Preparación de la forma BUS-HCl 2 Forma BUS-HCl 2 fue producido por la reacción entre la base y la buspirona HCl.5%) como disolvente. Canadá) con una ampliación de 50 a 500. Transformada de Fourier de infrarrojos (FTIR) y espectroscopia Raman son métodos que se basan en la detección de las propiedades que están asociadas con el nivel molecular. MATERIALES Y MÉTODOS base de buspirona fue suministrada por Apotex Inc. ON. con IPA frío. el pH de la solución se ajustó a 3. North York. buspirona base de agua con amortiguación se disolvió en IPA y se calienta a 68Y72C.

El número de análisis fue de 32 sobre la región espectral 450Y4000 cmj1 con una resolución de 2 cmj1. se utilizó la relación de la altura del pico de característica para un pico inerte.UU. El espectro para cada muestra se registró sobre la región espectral 450Y4000 cmj1 con 2 cmj1 resolución. Las muestras eran de oro-farfulló. Las muestras (4Y15 mg) se prepararon en un crisol de aluminio cubierto de haber perforado las tapas para permitir el escape de volátiles. Espectroscopia Infrarroja por Transformada de Fourier Analisis cualitativo FTIR Los espectros se registraron en un espectrómetro de transformación de Fourier de infrarrojos de estado sólido (Bruker Vector 22. 50. Análisis térmico Hot-Etapa Microscopía (HSM) transiciones térmicas en las muestras fueron estudiadas a través de un Lincam LTS 350 de platina caliente (Surrey.1 OPUS. Los espectros de la forma pura 1 y 2 y mezclas conocidas de la Forma 1 en la Forma 2 se analizaron por triplicado y el promedio fue elegido para el análisis. Tokio. Suiza) que funciona con la versión 6. Reino Unido) y un microscopio Zeiss. Polvo de Rayos X Difracción . El análisis termogravimétrico (TGA) Las pérdidas de masa de las muestras como una función de la temperatura se determinaron utilizando Mettler Toledo TGA 851e sistema de operación Ating con la versión 6. Para mejorar los resultados. y 100-C se emplearon / min. componente de regresión Principal (PCR) y Mínimos Cuadrados parciales (PLS) se aplicaron métodos para la calibración de mezclas de dos polimorfos (4). se evitó la molienda. El fondo se recogió en el mismo intervalo de aire. EE. Análisis cuantitativo El pico a 1153 cmj1 se consideró para el análisis cuantitativo de las formas polimórficas. El pico a 1193 cmj1 se consideró como el pico inerte. 20.) equipado con v3.para el análisis morfológico (Hitachi S-4500. MA. Japón). 10. Las muestras se calentaron mediante un calentador programable Lincam TNS 594. La preparación de la muestra fue el mismo que con el DSC. Los sensores y las muestras se encontraban bajo purga de nitrógeno durante los experimentos. Una velocidad de calentamiento de 10-C / min fue empleado. Las muestras se analizaron por FTIR en el modo de transmisión a través de una ventana de diamante. Billerica. Debido a la posible transformación polimórfica.1 del software Stare.1 del software Stare. 5. Calorimetría diferencial de barrido (DSC) El análisis térmico se realizó utilizando un calorímetro diferencial de barrido Mettler Toledo 822e (Greifensee. velocidades de calentamiento de 1.

En una velocidad de calentamiento de 10-C / min. A medida que la velocidad de calentamiento se aumentó a 50-C / min. Japón). porque Tmelt 1 <Tmelt 2 y 1 DHmelt> DHmelt 2. el pico de recristalización y de fusión de la Forma 2 pico fueron más bajos en comparación con la velocidad de calentamiento de 1-C / min. La Tabla I presenta los valores medidos de temperatura de fusión y el calor de fusión calculado para las dos formas polimórficas de BUS-HCl.los espectros de XRPD se recogieron en un difractómetro de polvo Rigaku Geigerflex-CN2029 (Tokio. lo que indica que las formas eran anhidro y nonsolvated. No se observaron pérdidas de masa durante el análisis de TGA de cualquiera de las formas.2q. utilizando CuKa (l para Ka = 1. De acuerdo con las normas polimórficas hamburguesa y Ramberger (5.con el tiempo contable de 2 s para cada paso.54184 A ˚) de radiación obtenido en 40 kV y 35 mA. Además. Análisis térmico DSC de la Forma 1 a una velocidad de calentamiento de 1-C / min mostró una transformación de fase a una fase más estable. Forma 2 produjo un único punto de fusión a 203-C. Para el cálculo de los calores de fusión de la Forma 1. Forma 2 se compone de cristales columnares regulares con tamaño medio de 16 3 92 mm y un menor grado de aglomeración que la Forma 1. la transición solidYsolid ocurre cuando las dos formas son conformacionalmente relacionada o la disposición molecular en el cristal está cerca. Las exploraciones se realizaron a partir de 5. Reino Unido) utilizando una potencia objetivo 50. las dos formas están relacionadas enantiotropically. y el cambio de la velocidad de calentamiento no tiene ningún efecto sobre el termograma. aproximadamente 2 mW y 633-nm láser. Las micrografías SEM muestran que la forma 1 tiene cristales en forma de placas irregulares con un tamaño promedio de 17 4 45 mm. Forma 1 exhibió una endoterma a 189-C (el punto de la Forma 1 de fusión). De estado sólido FTIR . Un microscopio óptico equipado con una platina caliente (HSM) también confirmó la temperatura de punto de fusión y la transformación de las dos formas.05.0 a 95. aumentando a un tamaño de paso de 0. había una amplia pico con inicio en 189-C. El calor de recristalización de la Forma 2 era muy pequeña. el espectro DSC de la Forma 1 con velocidad de calentamiento de 10-C / min se consideró. y otro endoterma a 203-C para la fusión de la Forma recristalizado 2. Láser espectroscopia Raman El experimento Raman se realizó en un espectrómetro Modelo Renishaw Raman 2000 (Gloucestershire. una reacción exotérmica a 192-C para la cristalización a la Forma 2.0. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Morfología La Figura 1 muestra la forma de los cristales de las formas polimórficas BUS-HCl a dos ampliaciones (250 y 2500).6). en general se acepta que para las formas enantiotrópica.

Figura 3 magnifica la banda de absorción a 1153 cmj1. Picos a 1153 y 1193 cmj1 son los picos característicos de la Forma 2 y los picos de referencia usados en el método anterior. Como se mencionó antes.9806). Para evitar el efecto de la distribución del tamaño de partículas. con una absorbancia mayor para la Forma 2. Forma 2 exhibe una única banda de absorción en 1153 cmj1. que se muestra en la Fig. lo mejor es utilizar la relación entre el pico característico y un pico de referencia (pico inerte) que es común a los dos polimorfos. Otro enfoque para el análisis cuantitativo de una mezcla polimórfica usando todo el espectro FTIR es el método quimiométrico. se utilizó la banda de absorción característica de la Forma 2 en 1153 cmj1 para la cuantificación. Combinación 1 utiliza los cuatro picos mencionados anteriormente. Análisis cuantitativo En el caso de suficientemente grandes diferencias espectroscópicas entre polimorfos. Los métodos de PCR y PLS se llevaron a cabo en estos datos. La Figura 4 muestra los resultados de la calibración para la mezcla de dos polimorfos. Los dos métodos se compararon con una combinación diferente de los picos. Ambas formas también indican una fuerte banda de absorción debida a C = C vibraciones de tensión en la región cmj1 1600Y1500 y una banda de absorción ancha en la región cmj1 3000Y3100 debido a CYH en los anillos aromáticos. La banda asociado con CYN estiramiento aparece en la región 1130Y1270 cmj1 en el Formulario 2. Combinación 2 utiliza los primeros y últimos dos picos. respectivamente. Para la matriz de concentración. con un pequeño hombro. muestra una buena linealidad en todo el rango de concentración con un alto coeficiente de correlación (R2 = 0. 4. Combinación 3 utiliza los picos característicos y de referencia. se utilizaron diferentes combinaciones de picos (combinaciones de 1 a 3) en 1118. Los factores que se fueron los valores propios y los vectores propios que abarcan los datos de la matriz de la concentración. La banda debido a CYH tijera y vibración de flexión está presente en 1.380 cmj1. picos en 1153 y 1193 fueron elegidos como cmj1 pico característico y referencia. Esta banda es muy útil para la determinación cualitativa y cuantitativa de polimorfos BUS-HCl. el número de factores en cada caso. la cuantificación de la mezcla de polimorfo se puede realizar con precisión. La Tabla II muestra los resultados de varios cálculos con un número diferente de factores y matrices de concentración para un punto en la mezcla de dos polimorfos. Para BUS-HCl. El gráfico de calibración. 1153.espectroscopia de estado sólido FTIR se puede utilizar tanto para el análisis cuantitativo y cualitativo de las drogas (8). y 1193 cmj1. 1134. Quimiometría utiliza el análisis multivariado de datos y herramientas matemáticas para extraer información de todo el espectro. Un paso clave en el desarrollo de la PCR y PLS calibraciones es la elección de los factores abstractos (rango) entre aquellos . Analisis cualitativo El factor clave para el análisis cualitativo de los polimorfos es encontrar la longitud de onda característica de cada formulario. así como la ecuación lineal. La Figura 2 muestra los espectros FTIR de polimorfos BUS-HCl. Ambas formas indican una fuerte banda de absorción debida a C = O vibraciones de tensión en la región 1650Y1700 cmj1.

Figura 5 muestra el vs.4-. El efecto Raman se basa en la dispersión inelástica de la luz láser por moléculas o cristales de (7). el método Raman dio espectros vibracionales de las muestras en el intervalo 200Y4000 cmj1. al tiempo que aumenta el error. 28. 14. predicho valores de dos picos estarán más cerca al valor real en lugar de a partir de cuatro picos.2. El valor de R2 para los dos métodos confirma buena predicción de los valores de concentración.2 -. 20.6. 18. Para reducir el efecto de la distribución de tamaño de los cristales en los resultados de XRPD.y 30.8-. el número de picos es muy importante.6-.0-.9-.6. No transformación polimórfica se observó debido a la molienda de las muestras. Si se seleccionan cinco factores. Láser espectroscopia Raman espectroscopía Raman proporciona información acerca de las vibraciones moleculares que se pueden utilizar para la identificación de la muestra y el análisis cuantitativo. 25. en el método PCR con la combinación 1 de los picos. La razón de esto es que los datos de los diferentes picos son cross-correlación y no pueden añadir más información para la matriz de concentración.6. Estos ángulos y sus intensidades relativas se pueden utilizar para la identidad polimórfica de las formas sólidas y para la determinación cuantitativa de las composiciones de fase. los resultados con cinco y ocho factores son similares.3-. tiene picos específicos en los siguientes ángulos 2Q: 6. Durante dos polimorfos de BUS-HCl.9-. La Figura 6 muestra los espectros de XRPD para dos polimorfos de BUSHCl. 16. Además. y GC es una constante. 10. 18. 17.0-.8-. Spinning o balanceo de la muestra durante la adquisición de datos o combinación de estos métodos también se puede hacer.y 26.9-. El número de factores es cinco y la matriz de concentración incluye dos picos (combinación 3). Los ángulos 2q únicos para la Forma 2 son 7. 33.5-.y 44. 21. 22. 15. 23. 24. Los métodos de PCR y PLS tienen resultados similares para diferentes combinaciones de picos y factores. Forma 1. 29.0-. 19. Polvo de Rayos X Difracción Cada forma cristalina produce un patrón de difracción que se puede utilizar como una huella dactilar para esa forma y por lo tanto se puede utilizar para polimorfos de pantalla durante el descubrimiento de fármacos. 8. 12. Ai son el máximo de cada pico. sin embargo. 17.3.0-. gi son constantes correspondientes a cada pico. Existen patrones de difracción de XRPD similares para los dos polimorfos en las posiciones angulares 2q 13.2-.7-.2. 13. El aumento del número de factores (punto óptimo) aumenta la cantidad de cálculos. La Tabla III muestra diferentes constantes para las combinaciones de picos.4-.6-.25.3-.5-.8-.intervalos.0-. Estos . las muestras se molieron.factores que son útiles para el análisis y aquellos factores que son único ruido modelo.7-.3-.con T 0. Por ejemplo. El método de PCR tiene una ecuación lineal para la curva de calibración dado por: C = 1 i ¼X donde C es la concentración. desarrollo de la formulación y fabricación. 20. real predijo valores para dos métodos. Se obtuvieron buenas correlaciones entre la composición de la muestra y las intensidades de dispersión para los dos polimorfos.

Estos calificar esta técnica para el análisis cuantitativo preciso de componentes sólidos o polimorfos en formulaciones de fármacos. y ensayos de cuantificación. Los métodos de espectroscopia de XRPD y Raman muestran la diferencia entre los dos polimorfos. Mediante el uso de la relación entre dos picos de los métodos de FTIR y quimiometría. y las intensidades relativas de los espectros fueron apenas se ve afectada por los parámetros de muestreo. para proporcionar muestras de base libre de buspirona. La tabla IV presenta información pico Raman para las dos formas. La Figura 7 muestra los espectros Raman para dos polimorfos de BUS-HCl. CONCLUSIONES Las formas polimórficas de BUS-HCl fueron estudiados en detalle en este trabajo. Canadá. Brantford. Los dos polimorfos tienen diferencias conformacionales. El análisis por DSC demostró que los dos polimorfos se relacionan enantiotropically y el calor de fusión regla confirmaron esta conclusión. Las muestras de ambas formas eran puros y TGA no mostraron pérdidas de masa. Ontario.. la composición de cada polimorfo en una mezcla sólida se puede determinar.espectros se pueden utilizar para el análisis estructural. El método Raman no requiere mucha preparación de la muestra. De la comparación entre los dos espectros. RECONOCIMIENTO Los autores agradecen a Apotex PharmaChem Inc. picos característicos únicos en los espectros FTIR de las dos formas se utilizaron con éxito para la cuantificación y calificación de las mezclas de polvo. Formas 1 y 2 de BUS-HCl se pueden distinguir por análisis térmico y métodos cristalográficos y espectroscópicas debido a diferencias en sus puntos de fusión y únicos picos de vibración y de XRPD. los cambios únicos para cada polimorfo y picos comunes para ellos pueden ser identificados. la identificación de formas de cristal. .