You are on page 1of 3

9.

Explicar las variables que influyen en el flujo electroosmótico o las que
regulan la dispersión de los analitos.

Variables que afectan al EOF
Variable
pH de la
regulador
a
Fuerza de
la
regulador
a

Efecto en EOF
EOF aumenta
con el pH

Comentario
Método adecuado para controlar EOF pero afecta a
la carga de los analitos

EOF disminuye
con el aumento
de la fuerza de
la reguladora

Campo
eléctrico

El aumento del
campo
eléctrico
incrementa
EOF
Aumentar la
temperatura
disminuye la
viscosidad e
incrementa
EOF
Cambia el
potencial en las
paredes del
capilar, la
constante
dieléctrica de
la reguladora y
la viscosidad.
Normalmente
reduce el EOF.
Se adsorben
sobre las
paredes de la
superficie del
capilar.

Temperatu
ra

Modificad
or
orgánico

Tensioacti
vos

El aumento de la fuerza iónica aumenta la
corriente eléctrica a través del capilar
produciendo calor.
 A fuerza iónica baja se produce un aumento de
la adsorción de la muestra en las paredes del
capilar.
 Concentraciones de reguladora baja reducen el
“stacking” de la muestra tras la inyección.
Bajar el campo eléctrico puede reducir la eficiencia
de la separación y aumentar la fuerza del campo
puede causar calentamiento.

Fácil de controlar

Efectos complejos, puede usarse pero debe
evaluarse su efecto experimentalmente.

Recubrimi
ento
covalente

Pueden
aumentar o
disminuir EOF


Los catiónicos tienen mucha afinidad por los
grupos silanol y bloquean el acceso a los
cationes pequeños en disolución reduciendo el
EOF. A concentraciones elevadas forman una
doble capa, dando a la pared del capilar una
carga positiva y produciendo un EOF inverso
hacia el ánodo.
Los aniónicos reducen el acceso de los iones
pequeños al potencial positivo en las paredes
incrementando EOF.
Los neutros reducen la carga negativa de la
pared reduciendo EOF.
Los iónicos tienen un marcado efecto en EOF.

o El “stacking” se corrige disolviendo la muestra en agua o una reguladora de baja conductividad: al aplicar el campo eléctrico los iones migran rápidamente a la frontera con la reguladora. Este efecto es menor si se aumenta la concentración de la reguladora. o Depende de la longitud del capilar y del coeficiente de difusión del analito en la reguladora. o Si sólo se requiere el análisis de cationes se puede bajar el pH reduciendo la carga o negativa de los grupos silanol.     Longitud del volumen inyectado o Pequeños volúmenes ocupan mucha longitud de capilar (0. o La generación de calor puede minimizarse usando capilares estrechos y/o manteniendo termostatizado el capilar.02 μL = 1 cm) y se suelen introducir volúmenes relativamente elevados para compensar los altos LD.de la pared dependiendo del recubrimiento Variables que regulan la dispersión de analitos     Difusión longitudinal o Principal causa del aumento de la anchura de pico pero menor que en GC. se obtienen picos con frente debido a que las moléculas de analito del frente entran en la zona de la reguladora donde experimentan un campo eléctrico mayor (hay una resistencia mayor en esta zona que en la del analito) y se separan de la zona de la muestra.     Interacciones del analito y la pared o El analito puede interaccionar con la pared a través de los grupos silanol negativos o por interacciones hidrofóbicas. o Los péptidos y las moléculas grandes tienen coeficientes de difusión pequeños (picos estrechos). reduciendo EOF con lo que los cationes se moverán hacia el cátodo sin la ayuda del EOF. o Fuerzas iónicas fuertes bloquean las cargas negativas y reducen el EOF pero producen un aumento del calor.     Calentamiento Joule o La fuerza del campo eléctrico está limitada por la conversión de energía eléctrica en calor.     Electrodispersión o La movilidad de los iones de la reguladora tiene que ser similar a los del analito. se obtienen picos con cola debido a que las moléculas de analito de la parte posterior se retrasan y entran en la zona de la reguladora donde eperiementan un campo eléctrico menor (hay una resistencia menor en esta zona que . o Si es menor. o Si es mayor. o El aumento de la temperatura local produce cambios locales de viscosidad.

.en la del analito) y se separan de la zona de la muestra. Este efecto es menor si se disminuye la concentración de la reguladora.